专利名称：20(s)－原人参二醇衍生物在制备抗抑郁药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药领域，具体的说，涉及20(S)-原人参二醇衍生物在制备抗抑郁药物中的应用。
背景技术：
抑郁症是以情绪抑郁为主要表现的疾病，在精神疾病中，属情感性精神障碍范畴。抑郁症的发作表现可以概括的称为“三低”，即情绪低落、思维迟缓和意志消沉。其核心症状是情绪低落，病人体验到情绪低、悲伤，在此基础上病人会感到绝望、无助与无用，并出现兴趣缺乏和乐趣丧失；其心理症状表现为焦虑、自责自罪、妄想或幻觉、注意力和记忆力下降、自杀倾向等；其躯体症状表现为睡眠紊乱、食欲下降、体重减轻、性欲减退、神疲乏力等。抑郁症是危害人类健康的常见病、多发病，在我国，情感性精神病的发病率为0.76％，女性高于男性，可能与女性生活负担较重，面临应激时间较多有关。抑郁症的发病率很高，但现在对它的发病原因仍不十分清楚，可能预社会心里因素、遗传、人体的生化变化及神经内分泌有关。在20世纪50年代，第一个开发的抗抑郁药是单胺氧化酶抑制剂，因严重毒副反应被三环类抗抑郁药取代，后者成为50年代到80年代世界范围内的抑郁症治疗一线用药，选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)近年的发展引人注目，因具有较好的药代学和药效学特点，而且疗效号毒副反应小，服用简便，发展很快。这些药物大多因其本身的特点，在中枢神经系统和植物神经系统中有一定的副作用，并伴有胃肠道反应。
原人参二醇是二醇组人参皂甙的甙元，分为20(S)-原人参二醇和20(R)-原人参二醇，它们互为对映异构体，其结构如下
20(S)-原人参二醇 20(R)-原人参二醇20(S)-原人参二醇为甙元的皂甙类成分具有显著的抗抑郁活性。现有技术中没有对单一成分的20(S)-原人参二醇衍生物是否具有抗抑郁活性的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种20(S)-原人参二醇衍生物在制备抗抑郁药物中的应用。
本发明所述20(S)-原人参二醇衍生物，其结构通式如下所示 其中R1为氢、结构式为 的鼠李糖基、结构式为 的吡喃型的阿拉伯糖基、结构式为 的吡喃型的木糖基、结构式为 的吡喃型的半乳糖基、结构式为 的纤维二糖基或结构式为 的葡萄糖基；
R为氢、结构式为 的鼠李糖基、结构式为 的吡喃型的阿拉伯糖基、结构式为 的吡喃型的木糖基、结构式为 的吡喃型的半乳糖基、结构式为 的纤维二糖基或结构式为 的二糖基以及结构式为 的葡萄糖基；Y为羟基或氢，且当Y为羟基时，R和R1均为氢。
上述结构式中的R2优选为氢、C2-C6的烷基取代酰基或苯甲酰基。
20(S)-原人参二醇衍生物的制备方法，包括如下步骤a)选择性保护20(S)-原人参二醇，得到结构式为下式的单取代的20(S)-原人参二醇， 式中R3优选为芳香烃类酰基、烷烃取代的芳香烃类酰基、C3-C6的烷基取代酰基，在反应中20(S)-原人参二醇和含保护基团反应物的摩尔比优选为1∶3.0-5.0，反应温度优选为-10-25℃，反应时间优选为1.5-12小时，反应有机溶剂优选为C2-C4的氯代烷烃、三乙胺、吡啶或N，N-二甲基甲酰胺中一种或一种以上的混合物，用量优选为1mol原人参二醇用6.5-10升有机溶剂。
b)单取代的20(S)-原人参二醇、糖基给体、路易斯酸催化剂和分子筛在惰性气体保护下，在有机溶剂中进行糖苷化反应，其中单取代的20(S)-原人参二醇、糖基给体和路易斯酸催化剂的摩尔比优选为1∶0.8-5.0∶0.01-1.0，单取代的20(S)-原人参二醇和分子筛的重量比优选为1∶0-7.0，反应温度优选为-20-40℃，反应时间优选为0.5-4.5小时，反应溶剂用量优选为1mol单取代的原人参二醇用4-12升有机溶剂，反应结束时加入淬灭剂淬灭反应，产物用柱层析或重结晶纯化。
c)将步骤b)中纯化后的产物和一价碱金属化物在极性溶剂中进行脱保护基反应生成20(S)-原人参二醇的3位糖基化衍生物。其中，步骤b)纯化后的产物和一价碱金属化物的摩尔比优选为1∶4-10，反应温度优选为40-100℃，反应时间优选为10-18小时，极性溶剂的用量优选为1mol步骤b)纯化后的产物用10-30升极性溶剂，本步生成的产物经重结晶纯化。
本发明还提供了一种20(S)-原人参二醇的糖基化衍生物的制备方法，包括如下步骤d)20(S)-原人参二醇、糖基给体、路易斯酸催化剂和分子筛在惰性气体保护下，在有机溶剂中进行选择性糖苷化反应，选择性得到20(S)-原人参二醇的12位单糖基化而3位羟基裸露的产物。其中20(S)-原人参二醇、糖基给体和路易斯酸催化剂的摩尔比优选为1∶0.6-1.5∶0.01-1.0，20(S)-原人参二醇和分子筛的重量比优选为1∶0.1-7.0，反应温度优选为-50-0℃，反应时间优选为0.5-4.5小时，反应溶剂用量优选为1mol 20(S)-原人参二醇用4-12升有机溶剂，反应结束时加入淬灭剂淬灭反应，产物用柱层析或重结晶纯化。
e)将上述步骤d)中纯化后的产物和一价碱金属化物在极性溶剂中进行脱酰基保护基反应生成20(S)-原人参二醇的12位糖基化衍生物。其中，纯化后的产物和一价碱金属化物的摩尔比优选为1∶4-10，反应温度优选为40-100℃，反应时间优选为10-18小时，极性溶剂的用量优选为1mol纯化后的反应物用10-30升极性溶剂，生成的产物经重结晶纯化。
步骤e)中脱酰基保护基反应是除去糖基给体中的C2-C6的烷基取代酰基或苯甲酰基。
本发明还提供了一种20(S)-原人参二醇的糖基化衍生物的制备方法，包括如下步骤f)20(S)-原人参二醇、糖基给体、路易斯酸催化剂和分子筛在惰性气体保护下，在有机溶剂中进行选择性糖苷化反应，选择性得到20(S)-原人参二醇的12位单糖基化而3位羟基裸露的产物，其中20(S)-原人参二醇、糖基给体和路易斯酸催化剂的摩尔比优选为1∶0.6-1.5∶0.01-1.0，20(S)-原人参二醇和分子筛的重量比优选为1∶0.1-7.0，反应温度优选为-50-0℃，反应时间优选为0.5-4.5小时，反应溶剂用量优选为1mol 20(S)-原人参二醇用4-12升有机溶剂，反应结束时加入淬灭剂淬灭反应，产物用柱层析或重结晶纯化。
g)将上述步骤f)中纯化后的产物与糖基给体、路易斯酸催化剂和分子筛在惰性气体保护下，在有机溶剂中进行糖苷化反应，纯化后的产物、糖基给体和路易斯酸催化剂的摩尔比是1∶1.0-2.0∶0.01-1.0，纯化后的产物和分子筛的重量比为1∶0.1-7.0，反应温度是-20-50℃，反应时间是0.5-4.5小时，反应溶剂用量是1mol纯化后的产物用4-12升有机溶剂，反应结束时加入淬灭剂淬灭反应，产物用柱层析或重结晶纯化；h)将上述步骤g)中纯化后产物和一价碱金属化物在极性溶剂中进行脱酰基保护基反应生成20(S)-原人参二醇的3和12位糖基化衍生物，其中，纯化后的反应物和一价碱金属化物的摩尔比是1∶4-10，反应温度是40-100℃，反应时间是10-18小时，极性溶剂的用量是1mol纯化后的反应物用10-30升极性溶剂，生成的产物经重结晶纯化。
步骤h)中脱酰基保护基反应是除去糖基给体中的C2-C6的烷基取代酰基或苯甲酰基。
所述糖基给体是结构式优选为 的鼠李糖基给体、结构式为 的吡喃型的阿拉伯糖基给体、结构式为 的吡喃型的木糖基给体、结构式为 的吡喃型的半乳糖基给体、结构式为 的纤维二糖基给体或结构式为 的二糖基以及结构式为 的葡萄糖基；Y为羟基或氢，且当Y为羟基时，R和R1均为氢；R2优选为氢、C2-C6的烷基取代酰基或苯甲酰基；X优选为OC(NH)CCl3或SEt或Br。
所述路易斯酸催化剂优选为C3-C9的卤代酰胺、C1-C6的氟代烃基磺酸、C2-C8的硅基氟代烃基磺酸酯、C1-C6的氟代烃基磺酸银、三氟化硼-乙醚络合物或三氟化硼-乙醚混合物。
所述的惰性保护气体优选为氮气、氩气或氦气。
所述的有机溶剂优选为C2-C4的氯代烷烃或甲苯。
所述淬灭剂优选为三甲胺、三乙胺或硫代硫酸钠。
所述的分子筛优选为3-5型硅铝酸盐分子筛。
柱层析所用的填充剂优选为硅胶、氧化铝或大孔树脂。
所述柱层析纯化中洗脱用的溶剂优选为石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、三氯甲烷、甲醇或环己烷中一种或多种的混合物。
所述一价碱金属化物优选为氢氧化钠、甲醇钠、氢氧化钾或氢氧化锂。
所述脱保护基反应中的极性溶剂优选为四氢呋喃、甲醇、二氯甲烷、乙醇、水中的一种或多种的混合物。
所述重结晶纯化中的溶剂优选为三氯甲烷、C1-C4的烷基醇、乙酸乙酯、丙酮、水中一种或多种的混合物。
抑郁症是情感障碍(又称心境障碍)中的一种，核心症状为情绪低落、思维迟钝和言语动作减少。抑郁症发病一般较缓慢，数周至数月不等。少数因心理社会因素诱发者则发病较急。开始常表现为失眠、食欲不振、精神萎靡、工作效率下降等症状，以后情绪低落、悲观失望甚至消极自杀等症状逐渐突出。
在西方发达国家，抑郁症是一种普遍的精神疾病，其中终身抑郁症的发病率在6％-8％之间，随着人口的逐步老龄化，抑郁症在60岁以上人群中的发病率高达20％-50％，统计资料显示，美国抑郁症的发病率仅次于心脏病，年均治疗费在440亿美元左右，抑郁症正成为一个严重的全球问题。
在我国，随着生活节奏的加快，各种压力增强，精神疾病的患病率呈逐年上升的趋势，抑郁症的诊断和治疗也日益为广大的社区和初级医疗机构的医生所重视，并普遍为广大患者接受。目前，抑郁症患者已经占到精神系统科室门诊病房总人数的20％-30％，另据专家估计，中国抑郁症患者接受治疗的比例将从现在的25％上升到2010年的40％。中国的抗抑郁药市场规模还比较小，但增长速度很快，市场潜力巨大。
药理实验结果表明，20(S)-原人参二醇衍生物具有良好的抗抑郁效果。
具体实施例方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1单取代的20(S)-原人参二醇 即12-特戊酰基-20(S)-原人参二醇的合成。
合成反应式为 20(S)-原人参二醇(按中国发明专利CN1569882公开方法制备)40g(0.087mol)溶于二氯甲烷(700ml)和三乙胺(85ml)的混合溶剂中，加入特戊酰氯36.5ml(0.298mol)，冷至-8℃，反应1.5h，薄层层析检测至反应完全。加入甲醇终止反应，饱和NaCl水液洗涤，此水液用二氯甲烷提取，合并有机相，再用饱和NaCl水液洗至中性，干燥。硅胶柱过滤后浓缩，得单取代的20(S)-原人参二醇42.5g，收率89.8％，纯度为99.6％。
12-特戊酰基-0(S)-原人参二醇的物化数据与中国专利ZL2004100532692中所述一致。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.28(d，1H)，3.6(m，1H)，3.2(s，1H)，2.2-1.8(m，6H)，1.72-1.38(m，14H)，1.28-1.14(m，22H)，1.1(s，3H)，0.98-0.72(m，9H)。
实施例2 20(S)-原人参二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷
化合物(12-特戊酰基-20(S)-原人参二醇，A2)44g(0.081mol，纯度99.6％)和化合物(D1)约82g(0.132mol)溶于850ml无水二氯甲烷中，加入4分子筛80g，在氩气保护下搅拌0.5小时，滴加三氟甲磺酸三甲基硅基酯1.43ml(0.0079mol)，室温搅拌反应0.5小时。反应结束后加入三甲胺1.2ml(0.0086mol)淬灭反应。过滤，滤液浓缩后，经硅胶柱层析[洗脱剂石油醚与乙酸乙酯的体积比6∶1]纯化，得结构式为 的白色固体，即化合物(3A’)67.5g，收率83％，HPLC测定纯度为93％。
化合物(3A’)的物化数据如下1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.09-7.25(m，15H，3C6H5)，5.84(dd，1H)，5.71-5.65(m，2H)，5.19-5.16(m，1H)，5.09(s，1H)，4.85-4.78(td，1H)，4.31-4.08(m，1H)，3.24-3.17(m，1H)，1.70(s，3H)，1.62(s，3H)，1.30(d，3H)，1.22(s，9H，CH3)3CCO2-)，1.11(s，3H)，1.04(s，3H)，1.03(s，3H)，0.96(s，3H)，0.94(s，3H)，0.91(s，3H)。
脱保护基反应化合物(3A’)5.66g(0.0056mol，HPLC93％)溶解于13.5ml二氯甲烷和27ml乙醇的混合溶剂中，搅拌下滴加6.24g(50％，0.06mol)甲醇钠10ml甲醇溶液，80℃反应10小时，薄层层析检测，反应完毕。反应液浓缩得白色固体，用乙醇和乙酸乙酯混合溶液重结晶，得到化合物(3A)3.09g，收率91％，HPLC测定纯度为99.2％。
化合物(3A)的物化数据如下ESI-MS(m/z)606.6[M]+。
1H NMR(300MHz，C5D5N)5.33(m，1H)，4.54(m，1H)，4.28-4.23(m，1H)，4.31-4.27(m，2H)，3.95-3.88(td，1H)，3.17(dd，1H)，1.65(s，3H)，1.62(s，3H)，1.42(s，3H)，0.98(s，3H)，0.95(s，3H)，0.92(s，3H)，0.82(s，3H)，0.80(s，3H)。
实施例3 20(S)-原人参二醇-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷 化合物(12-特戊酰基-20(S)-原人参二醇，A2)42.5g(0.078mol，HPLC99.48％)和化合物(D2)约61.3g(0.101mol)溶于850ml无水二氯甲烷中，加入4分子筛80g，在氩气保护下搅拌0.5小时，滴加三氟甲磺酸三甲基硅基酯1.43ml(0.0079mol)，室温搅拌反应0.5小时。反应结束后加入三甲胺1.2ml(0.0086mol)淬灭反应。过滤，滤液浓缩后，经硅胶柱层析[洗脱剂石油醚与乙酸乙酯的体积比6∶1]纯化，得结构式为 的白色固体，即化合物(3B’)59.1g，收率77％，HPLC测定纯度为94％。
化合物(3B’)的物化数据如下1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.08-7.25(m，15H，3C6H5)，5.78(dd，1H)，5.68-5.64(m，1H)，5.60(dd，1H)，5.18(m，1H)，4.85-4.75(m，2H)，4.28(dd，1H)，3.88(d，1H)，3.16(dd，1H)，1.69(s，3H)，1.62(s，3H)，1.20(s，9H，CH3)3CCO2-)，1.12(s，3H)，0.96(s，3H)，0.91(s，3H)，0.81(s，3H)，0.76(s，3H)，0.65(s，3H)。
脱保护基反应化合物(3B’)3.95g(0.004mol，HPLC94％)溶解于13.5ml二氯甲烷和27ml乙醇的混合溶剂中，搅拌下滴加4.32g(50％，0.04mol)甲醇钠10ml甲醇溶液，80℃反应10小时，薄层层析检测，反应完毕。反应液浓缩得白色固体，用乙醇和乙酸乙酯混合溶液重结晶，得到化合物(3B)2.12g，收率89.7％，HPLC测定纯度为99.1％。
化合物(3B)的物化数据如下ESI-MS(m/z)644.6[M+Na]+1H NMR(300MHz，C5D5N)5.31(t，1H)，4.77(d，1H)，4.47(t，1H)，4.33-4.29(m，1H)，4.19(dd，1H)，3.94-3.79(m，2H)，3.32(dd，1H)，1.65(s，3H)，1.62(s，3H)，1.47(s，1H)，1.28(s，3H)，0.96(s，3H)，0.95(s，3H)，0.94(s，3H)，0.83(s，3H)。
实施例4 20(S)-原人参二醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷 化合物(12-特戊酰基-20(S)-原人参二醇，A2)42.5g(0.078mol，HPLC99.48％)和化合物(D3)约61.3g(0.101mol)溶于850ml无水二氯甲烷中，加入4分子筛80g，在氩气保护下搅拌0.5小时，滴加三氟甲磺酸三甲基硅基酯1.43ml(0.0079mol)，室温搅拌反应0.5小时。反应结束后加入三甲胺1.2ml(0.0086mol)淬灭反应。过滤，滤液浓缩后，经硅胶柱层析[洗脱剂石油醚与乙酸乙酯的体积比6∶1]纯化，得结构式为 的白色固体，即化合物(3C’)57.5g，收率74.5％，HPLC测定纯度为92％。
化合物(3C’)的物化数据如下ESI-MS(m/z)990.6[M+H]+脱保护基反应化合物(3C’)3.98g(0.004mol，HPLC94％)溶解于13.5ml二氯甲烷和27ml乙醇的混合溶剂中，搅拌下滴加4.30g(50％，0.04mol)甲醇钠10ml甲醇溶液，80℃反应10小时，薄层层析检测，反应完毕。反应液浓缩得白色固体，用乙醇和乙酸乙酯混合溶液重结晶，得到化合物(3C)2.22g，收率93.1％，HPLC测定纯度为99.6％.
化合物(3C)的物化数据如下ESI-MS(m/z)644.6[M+Na]+1H NMR(300MHz，C5D5N)5.33(t，1H)，4.90(d，1H)，4.37(dd，1H)，4.22-4.11(m，2H)，4.00(t，1H)，3.95(dd，1H)，3.97-3.86(m，1H)，3.75(t，1H)，3.35(dd，1H)，1.66(s，3H)，1.64(s，3H)，1.44(s，3H)，1.32(s，3H)，1.01(s，3H)，0.99(s，3H)，0.98(s，3H)，0.85(s，3H)。
实施例5 20(S)-原人参二醇-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷
化合物(12-特戊酰基-20(S)-原人参二醇，A2)42.5g(0.078mol，HPLC99.48％)和化合物(D4)约74.8g(0.112mol)溶于850ml无水二氯甲烷中，加入4分子筛80g，在氩气保护下搅拌0.5小时，滴加三氟甲磺酸三甲基硅基酯1.43ml(0.0078mol)，室温搅拌反应0.5小时。反应结束后加入三甲胺1.2ml(0.0086mol)淬灭反应。过滤，滤液浓缩后，经硅胶柱层析[洗脱剂石油醚与乙酸乙酯的体积比6∶1]纯化，得结构式为 的白色固体，即化合物(3D’)78.5g，收率89.6％，HPLC测定纯度为91.94％。
化合物(3D’)的物化数据如下1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.1-7.2(m，20H，4C6H5)，5.92(t，1H)，5.86(dd，1H)，5.60(dd，1H)，5.16(t，1H)，4.82(d，2H)，4.60-4.51(m，2H)，4.32(m，1H).3.0-3.12(dd，1H)，3.10(dd，1H)，1.70(s，3H)，1.62(s，3H)，1.22(s，9H，CH3)3CCO2-)，1.12(s，3H)，0.91(s，3H)，0.85(s，3H)，0.80(s，3H)，0.68(s，3H)，0.66(s，3H)。
脱保护基反应化合物(3D’)4.66g(0.004mol，HPLC92.8％)溶解于13.5ml二氯甲烷和27ml乙醇的混合溶剂中，搅拌下滴加4.32g(50％，0.04mol)甲醇钠10ml甲醇溶液，80℃反应10小时，薄层层析检测，反应完毕。
反应液浓缩得白色固体，用乙醇和乙酸乙酯混合溶液重结晶，得到化合物(3D)2.13g，收率82.4％，HPLC测定纯度为99.16％。
化合物(3D)的物化数据如下ESI-MS(m/z)645.3(M++Na)。
13C NMR(300MHz，C5D5N)130.73，126.30，107.54，107.53，88.75，76.84，75.45，75.43，73.14，72.93，70.95，70.28，62.45，62.44，56.37，54.77，51.68，50.38，48.56，40.0，39.64，39.12，36.95，35.85，35.14，32.03，31.32，28.13，27.07，26.84，26.80，25.81，22.98，18.43，17.68，17.02，16.74，16.37，15.82。
实施例6 20(S)-原人参二醇-12-O-α-L-吡喃鼠李糖苷 化合物20(S)-原人参二醇(A1)42.5g(0.078mol，HPLC98.48％)和化合物(D1)约46.8g(0.101mol)溶于850ml无水二氯甲烷中，加入4分子筛80g，在氩气保护下搅拌0.5小时，降温至-15℃，滴加三氟甲磺酸三甲基硅基酯1.43ml(0.0078mol)，室温搅拌反应0.5小时。反应结束后加入三甲胺1.2ml(0.0086mol)淬灭反应。过滤，滤液浓缩后，经硅胶柱层析[洗脱剂石油醚与乙酸乙酯的体积比6∶1]纯化，得结构式为 的白色固体，即化合物(12A’)52.4g，收率67％，HPLC测定纯度为90.9％。
化合物(12A’)的物化数据如下1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.09-7.25(m，15H，3C6H5)，5.84(dd，1H)，5.71-5.65(m，2H)，5.29-5.23(m，1H)，5.21(d，1H)，4.43-4.38(m，1H)，4.26(brs，1H)，3.88-3.80(td，1H)，3.22(dd，1H)，1.71(s，3H)，1.67(s，3H)，1.37(d，3H)，1.06(s，3H)，0.98(s，3H)，0.94(s，3H)，0.91(s，3H)，0.79(s，3H)。
脱保护基反应化合物(12A’)5.66g(0.0056mol，HPLC90.9％)溶解于13.5ml二氯甲烷和27ml乙醇的混合溶剂中，搅拌下滴加6.24g(50％，0.06mol)甲醇钠10ml甲醇溶液，80℃反应10小时，薄层层析检测，反应完毕。反应液浓缩得白色固体，用乙醇和乙酸乙酯混合溶液重结晶，得到化合物(12A)3.12g，收率91％，HPLC测定纯度为98.4％。
化合物(12A)的物化数据如下ESI-MS(m/z)629.4[M+Na+]1H NMR(300MHz，CD3OD)5.15-5.11(m，1H)，5.02(s，1H)，3.76-3.57(m，3H)，3.37-3.30(m，1H)，3.28-3.12(m，1H)，1.68(s，3H)，1.62(s，3H)，1.27(d，3H)，1.16(s，3H)，1.02(s，3H)，0.96(s，3H)，0.94(s，3H)，0.92(s，3H)，0.77(s，3H)。
实施例7、20(S)-原人参二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-12-O-α-L-吡喃鼠李糖苷 化合物(12A’)77.9g(0.0777mol，HPLC98.48％)和化合物(D6)约74.8g(0.112mol)溶于850ml无水二氯甲烷中，加入4分子筛80g，在氩气保护下搅拌0.5小时，降温至-15℃，滴加三氟甲磺酸三甲基硅基酯1.43ml(0.0078mol)，室温搅拌反应0.5小时。反应结束后加入三甲胺1.2ml(0.0086mol)淬灭反应。过滤，滤液浓缩后，经硅胶柱层析[洗脱剂石油醚与乙酸乙酯的体积比6∶1]纯化，得结构式为
的白色固体，即化合物(3，12A’)78.5g，收率82.7％，HPLC测定纯度为91.94％。
化合物(3，12A’)的物化数据如下1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.13-7.21(m，35H，7C6H5)，5.94-5.84(m，2H)，5.78-5.67(m，2H)，5.58-5.52(m，2H)，5.29-5.22(m，2H)，4.85(d，1H)，4.55(d，2H)，4.44-4.39(m，1H)，4.30-4.07(m，1H)，3.83-3.80(m，1H)，3.09(dd，1H)，1.70(s，3H)，1.62(s，3H)，1.12(s，3H)，0.96(s，3H)，0.91(s，3H)，0.78(s，3H)，0.66(s，3H)，0.63(s，3H)脱保护基反应化合物(3，12A’)6.47g(0.004mol，HPLC92.8％)溶解于13.5ml二氯甲烷和27ml乙醇的混合溶剂中，搅拌下滴加4.32g(50％，0.04mol)甲醇钠10ml甲醇溶液，80℃反应10小时，薄层层析检测，反应完毕。反应液浓缩得白色固体，用乙醇和乙酸乙酯混合溶液重结晶，得到化合物(3，12A)2.68g，收率85.4％，HPLC测定纯度为99.16％。
化合物(3，12A)的物化数据如下ESI-MS(m/z)1559.3(2M+Na+)。
1H NMR(300MHz，C5D5N)5.70(s，1H)，5.39(s，1H)，5.33(t，1H)，5.00(d，1H)，4.97(dd，1H)，4.77(dd，1H)，4.57(d，1H)，4.50-4.39(m，1H)，4.50-4.39(m，1H)，4.09-4.04(m，2H)，4.00(m，2H)。
实验例1对4种20(S)-原人参二醇衍生物及人参皂苷Rg3(参一胶囊)采用“获得性绝望”实验中的“小鼠尾悬挂试验”进行了抗抑郁作用的研究。其结果显示氟西汀可明显缩短小鼠悬尾不动时间，3A20mg/kg、20(S)-原人参三醇50mg/kg、12A 20mg/kg、50mg/kg及Rg340mg/kg可明显缩短小鼠悬尾不动时间，表明具有抗抑郁效果。
1.1动物品系清洁级昆明小鼠性别雄性体重18-22g来源上海斯莱克实验动物有限责任公司提供许可证号SCXK(沪)2003-00031.2药品1.2.1试验样品3A(代号)，按照实施实例2制备，其分子式为 12A(代号)，按照实施实例6制备，其分子式为 20(S)-原人参三醇，按照我单位所申请的中国专利ZL200410018038.8制备，其分子式为 人参皂苷Rh2，按照我单位所申请的中国专利ZL200410053269.2制备，其分子式为 以上各样品，性状均为白色粉剂来源由上海中药创新研究中心合成产品批号0601。
参一胶囊(人参皂苷Rg3)，其分子式为 性状胶囊，内含白色粉末规格10mg/粒产品批号20060203来源吉林亚泰制药股份有限公司1.2.2阳性对照药名称盐酸氟西汀(奥麦伦)性状胶囊，内含白色颗粒规格20mg/粒批号050503/050702来源上海中西制药有限公司1.3实验方法小鼠尾悬挂试验所有小鼠于给药前一天进行预筛。将小鼠尾尖2cm处用透明胶贴在一水平棍上，使其呈倒挂状态，其头部离台面约5cm，四周以板隔离小鼠视线。小鼠为了克服不正常体位而挣扎活动，但活动一段时间后出现间断性不动，显示失望状态。每只动物观察6min，选择6分钟内累计不动时间大于70秒的动物备第二天实验用。不动时间(immobility time)是指小鼠除呼吸外所有肢体均不动。
按不动时间长短将小鼠分为正常对照、氟西汀及给药组，各试验组按相应药物口服给药，0.2ml/10g体重，每日一次，连续给药10天。末次给药1小时后进行小鼠尾悬挂试验，持续时间为6分钟，记录6分钟内停止不动的时间。
1.4结果与正常对照组相比，氟西汀20mg/kg明显缩短小鼠悬尾不动时间(均P＜0.01)；20mg/kg的3A可明显缩短小鼠悬尾不动时间；50mg/kg的20(S)-原人参三醇可明显缩短小鼠悬尾不动时间；20mg/kg、50mg/kg的12A明显缩短小鼠悬尾不动时间；40mg/kg的人参皂苷Rg3明显缩短小鼠悬尾不动时间；10mg/kg、20mg/kg的人参皂苷Rh2明显缩短小鼠悬尾不动时间。具体试验数据见表1、表2、表3、表4。
表1 3A、20(S)-原人参三醇对小鼠悬尾不动时间的影响(x±s)
注与正常对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01表2 12A对小鼠悬尾不动时间的影响(x±s)
注与正常对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01表3人参皂苷Rg3对小鼠悬尾不动时间的影响(x±s)
注与正常对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01表4人参皂苷Rh2对小鼠悬尾不动时间的影响(x±s)
注与正常对照组比较*P＜0.05，**P＜0.0权利要求
1.20(S)-原人参二醇衍生物在制备抗抑郁药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述20(S)-原人参二醇衍生物结构通式如下所示 其中R1为氢、结构式为 的鼠李糖基、结构式为 的吡喃型的阿拉伯糖基、结构式为 的吡喃型的木糖基、结构式为 的吡喃型的半乳糖基、结构式为 的纤维二糖基或结构式为 的葡萄糖基；R为氢、结构式为 的鼠李糖基、结构式为 的吡喃型的阿拉伯糖基、结构式为 的吡喃型的木糖基、结构式为 的吡喃型的半乳糖基、结构式为 的纤维二糖基或结构式为 的二糖基以及结构式为 的葡萄糖基；Y为羟基或氢，且当Y为羟基时，R和R1均为氢；R2为氢、C2-C6的烷基取代酰基或苯甲酰基。
全文摘要
本发明涉及20(S)－原人参二醇衍生物在制备抗抑郁药物中的应用。药理试验研究显示，20(S)－原人参二醇的衍生物在抑郁症经典模型－“获得性绝望”实验中的“小鼠尾悬挂试验”中可明显缩短小鼠悬尾不动时间，表明20(S)－原人参二醇衍生物具有抗抑郁的活性。
文档编号A61P25/00GK1931177SQ20061011635
公开日2007年3月21日 申请日期2006年9月21日 优先权日2006年9月21日
发明者惠永正, 杨志奇, 赵安, 葛强 申请人:上海中药创新研究中心