转谷氨酰胺酶介导的生长激素的结合的制作方法

专利名称：：转谷氨酰胺酶介导的生长激素的结合的制作方法
技术领域：
：本发明涉及翻译后结合生长激素的新方法，其中转谷氨酰胺酶用于在肽的特定位置上结合入连接点，籍此PEG可以选择性地连接到肽上。所述结合的生长激素具有改变的特性和由此可以用于治疗应用中。
背景技术：
：众所公知通过将适当改变肽性能的基团结合在肽上可以改变肽的性能和特性。所述结合通常需要一些肽上的官能团与结合基团上的其它官能团反应。一般地，氨基比如N-末端氨基或者赖氨酸的s-氨基已经用于与适宜的酰化试剂联合使用。通常期望或者甚至要求能够控制结合反应，即控制结合化合物被连接的位置和控制许多结合基团进行如何连接。通常将其称之为特异性。长期以来，肽的结合一般已经为人们所熟知，和20多年以前的US4,179,337公开了肽，和特别是结合到聚乙二醇或者聚丙二醇上的生长激素。可以有效在肽和意欲结合到肽上的部分之间形成键的不同类型的化学作用已经被公开。EP605963公开了含水聚合物的接枝，其与蛋白质上的醛基形成肟连接。天然氨基酸都不包含醛，因此，必须对羟基进行氧化，作为结合过程的第一步骤。WO96/41813公开了可用于结合反应中的用氨基-氧基肟形成基团官能化的聚合物。WO98/05363公开了含有肽和水溶性聚合物的化合物，其中二者在N-末端氨基酸残基通过肟鍵共价连接。此外，使得肽的更特异结合能够实现的酶的应用是已知的。EP243929公开了蛋白水解酶的应用，比如羧肽酶，用于结合在肽的C-末端具有官能团的化合物，其中所述官能团可以随后用于连接细胞毒素基团，其它肽或者用于促进肽的分析的报道基团，比如，例如荧光基团。然而，该工艺限制了C-末端氨基酸残基的连接点，有时如果C末端残基对于肽的活性至关重要时，会构成严重的限制。先前已经使用转谷氨酰胺酶改变肽的性能u在食品工业并且特别是在乳品加工业中，多种工艺可以用于，例如使用转谷氨酸酶横接(cross-bind)肽。其它文献公开了使用转谷氨酰胺酶以改变生理学活性肽的性能。EP950665、EP785276和Sato，Adv.DrugDeliveryRev.54，487-504(2002)公开了含有至少一个Gln的肽和胺-官能化的PEG或者类似配体之间在转谷氨酰胺酶存在下的直接反应，和Wada,Biotech.Lett.23,1367-1372(2001)公开了P-乳球蛋白与脂肪酸通过转谷氨酰胺酶进行的直接结合。公开为WO2005/070468的国际专利申请公开了使用转谷氨酰胺酶以结合入结合基团可以被连接的把手。
发明内容本发明的目的是提供一种方法，籍此生长激素可以与PEG在特定位置以高度特异性结合。通过该方法获得的结合物具有改良的.或者另外的特性，例如药理学特性，这使得它们特别是在治疗中是适宜的。发明概述在一种实施方案中，本发明涉及将PEG部分共价连接到生长激素上的方法，所述方法包含在一个或者多个步骤中使含有式[Ia]表示的生长激素的谷氨酰胺残基-C(=0)-NH2获得的生长激素基团(radical、):、:式[n]的^氮亲核试剂在转谷氨酰胺酶存在下反应H2N-D-R-X其中D表示-O-或者单键;R表示d-6亚烷基、-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-、-(CH2)4-CH(NHCOCH3)-CO-NH-CH2-或者C5.15杂亚烷基；X表示-0-NH2、醛、酮，或者通过进一步反应可以转化为-0-NH2、醛或者酮的潜在基团；从而形成式[IIIa的氨基转移化的生长激素<formula>formulaseeoriginaldocumentpage49</formula>任选地，如果X为潜在基团，将所迷潜在基团转化为-0-NH2、醛或者酮，所述氨基转移化的生长激素进一步与式[IV]的第二化合物反应<formula>formulaseeoriginaldocumentpage49</formula>[IV]其中Y，如果X表示醛、酮，或者通过进一步反应可以转化为醛或者酮的潜在基团，表示-0-NH2;或者，如果X表示-0-NH2，或者通过进一步反应可以转化为-0-NH2的潜在基团，表示醛或者酮；和Z表示选自以下的部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage49</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage50</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage52</formula>其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG，和PEG表示分子量为1kDa~10kDa的PEG;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage52</formula>条件是如果Z为HH22-5，那么PEG为10kDaPEG,从而形成式[Va]的PEG化的生长激素，n—D—r—A—ZH网其中A表示肟键。在一种实施方案中，本发明提供式[V]或者[Va]的化合物及其任何药学上可接受的盐、前药或者溶剂化物。在一种实施方案中，本发明提供hGH，其在对应于SEQIDNo.1的位置40和/或141的位置上已经进行了PEG化。在另一实施方案中，本发明提供含有式[V]或者[Va]化合物的组合物，并且特别是含有式[Va]化合物的药物组合物。在一种实施方案中，本发明提供式[Va]化合物在治疗中的应用。在一种实施方案中，本发明提供治疗受益于血浆生长激素水平的浓度升高的疾病的方法，该方法包含给药治疗有效量的式[Va]化合物。在一种实施方案中，本发明提供式[Va]化合物在制造用于治疗受益于生长激素血浆水平升高的疾病的药物中的用途。在一种实施方案中，本发明提供改善或者改变生长激素的药理学性能的方法，该方法包含根据本发明的方法PEG化所述生长激素。序列表的简要说明SEQIDNo.1是人生长激素的氨基酸序列，亦称22K-hGH。发明详述本发明基于，与两个末端之间的某些氨基酸上的PEG化(即，链内PEG化)相比，在N-末端，并且特别是在hGH的C-末端的PEG化在活性上引起更大降低的观察。特别是，在对应于具有SEQIDNo.l序列的hGH中位置40和/或141的位置的PEG化产生PEG化的hGH，其中大部分活性得到了保持。位置40和141都是谷氨酰胺，并且，事实上，具有SEQIDNo.1序列的hGH，包含其它的11个谷氨酰胺残基，即在位置22、29、46、49、68、69、84、91、122、137和181上。然而，惊人地发现，使用转谷氨酰胺酶(TGase),并且特别是链轮丝菌属(Streptoverticillium)mobaraenae或者链霉菌属(Streptomyces)lydicus的TGase允许在位置40和/或141上进行选择性PEG化，并且尽管事实上谷氨酰胺是转谷氨酰胺酶的底物，但是仍然剩余II个谷氨酰胺残基未受影响。本发明的方法还可以用于任何含有一个或者多个谷氨酰胺残基的多肽的链内PEG化作用中，例如治疗上感兴趣的多肽。这特别可以用于包含一个以上的谷氨酰胺残基和其中期望位置特异性的PEG化的多肽的PEG化作用中，不过该方法可以用于转谷氨酰胺化任何包含多肽的谷氨酰胺残基。由此，本发明提供将PEG共价连接到包含至少一个谷氨酰胺残基的多肽上的方法，所迷方法包含在一个或者多个步骤中使含有式[I]表示的多肽的所迷谷氨酰胺残基<formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>其中PP表示通过从存在于多肽中的谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(=0)-NH2获得的多肽基团，与式[II]的含氮亲核试剂<formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>其中D表示-O-或者单键；R表示C!-6亚烷基、-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-、-(CH2)4-CH(NHCOCH3)-CO-NH-CHr或者C5.15杂亚烷基；X表示-0-NH2、醛、酮，或者通过进一步反应可以转化为-0-NH2、醛或者酮的潜在基团；在转谷氨酰胺酶存在下反应，从而形成式[III]的氨基转移化的多肽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>任选地，如果X为潜在基团，将所述潜在基团转化为-0-NH2、醛或者酮，所述氨基转移化的多肽进一步与式[IV]的第二化合物反应Y-Z其中Y，如果X表示醛、酮，或者通过进一步反应可以转化为醛或者酮的潜在基团，表示-0-NH2;或者，如果X表示-0-NH2，或者通过进一步反应可以转化为-0-NH2的潜在基团，表示醛或者酮；和Z表示选自以下的部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage55</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage56</formula>mPEG-00mPEG-CTv1。o-Peg-O^^NH2-100mPEG-0OmPEGOmPEGmPEG-OmPEG-0mPEG-0mPEG-0、mPEG-0^^^)^0—Peg-其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG,和PEG表示分子量为1kDa~10kDa的PEG;0mPEG条件是如果Z为N十CH、H22-5,那么PEG为10kDaPEG,从而形成式[V]的PEG化的多肽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage58</formula>其中A表示將键；或者其任何药学上可接受的盐、前药或溶剂化物。除非另有说明或者与上下文矛盾，在此使用的术语多肽包括任何适宜的多肽并且可以与术语肽和蛋白质同义使用。在此使用的术语多肽通常应当理解为是指任何适宜大小和组成(关于蛋白质分子中氨基酸的数目和相关链的数目)的任何适宜多肽。此外，除非另有说明或者与上下文矛盾，在此所述的本发明方法和组合物的上下文中的多肽可以包含非天然存在的和/或非-L氨基酸残基。所述多肽还可以进行衍生化。除非另有说明或者与上下文矛盾，衍生化的多肽通常应当理解为是指其中多肽的一个或者多个氨基酸残基已经被化学改性(例如通过烷基化、酰化、酯形成或者酰胺形成)或者与一个或者多个非氨基酸有机和/或无机原子或者分子取代基相关的、并且还可以或可供选择地包含非必需、非天然存在的和/或非-L氨基酸残基的多肽。所述氨基酸残基的非限制性实例包括，例如2-氨基己二酸、3-氨基己二酸、P-丙氨酸、P-氨基丙酸、2-氨基丁酸、4-氨基丁酸、6-氨基己酸、2-氨基庚酸、2-氨基异丁酸、3-氨基异丁酸、2-氨基庚二酸、2,4-二氨基丁酸、锁链赖氨酸、2,2'-二氨基庚二酸、2,3-二氨基丙酸、N-乙基氨基乙酸、N-乙基天冬酰胺、羟基赖氨酸、别轻基赖氨酸(allohydroxylysine)、3-羟基脯氨酸、4-羟基脯氨酸、异锁链氨酸、别异亮氨酸、N-甲基甘氨酸、N-甲基异亮氨酸、6-N-甲基赖氨酸、N-甲基缬氨酸、降缬氨酸(norvaline)、降亮氨酸(norleucine)、鸟氨酸和他汀(statme)卣化的氨基酸。治疗有用的和使用多肽的治疗将受益于例如升高的保留时间的多肽特別适用于本发明的方法中。在一种实施方案中，多肽为包含生长激素的谷氨酰胺残基，和PP获得的生长激素基团。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage58</formula>由此，本发明提供将PEG共价连接到生长激素上的方法，所述方法包含在一个或者多个步骤中使含有式[Ia]表示的生长激素的谷氨酰胺残基<formula>formulaseeoriginaldocumentpage59</formula>获得的生长激素基团，与式[n]的:氮亲核"i剂''、其中D表示-O-或者单键；R表示C卜6亚烷基、-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-、-(CH2)4-CH(NHCOCH;0-CO-NH-CH2-或者C5—15杂亚烷基；X表示-0-NH2、醛、酮，或者通过进一步反应可以转化为-0-NH2、醛或者酮的潜在基团；在转谷氨酰胺酶存在下反应，从而形成式[IIIa]的氨基转移化的生长激素N—D—R—XH任选地，如果X为潜在基团，将所述潜在基团转化为-0-NH2、醛或者酮，所述氨基转移化的生长激素进一步与式[IV]的第二化合物反应<formula>formulaseeoriginaldocumentpage60</formula>其中Y表示-0-NH2、醛、酮；和Z表示选自以下的部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage60</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage61</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>，和<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG,和PEG表示分子量为1kDa-10kDa的PEG;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>条件是如果Z为<formula>formulaseeoriginaldocumentpage62</formula>,那么PEG为10kDaPEG，从而形成式[Va]的PEGy化的生长激素<formula>formulaseeoriginaldocumentpage63</formula>[Va]其中A表示肟键；或者其任何药学上可接受的盐、前药或溶剂化物。在本发明上下文中，"生长激素"(GH)意欲表示显示出如本文测定I中中所测定的生长激素活性的蛋白质。在所述测定中显示出超过hGH的活性的20%的活性的蛋白质，比如超过40%,比如超过60%,比如超过80%,被定义为生长激素。在本发明上下文中，术语"氨基转移化"和相关的术语意欲表示其中谷氨酰胺侧链中的氮与其它化合物中的氮交换的反应，特别是与其它含氮亲核试剂中的氮交换。术语"基团(radical)"或者"双基(biradical)"意欲表示分别具有一个或者两个未成对电子的分子片段。所述片断可以通过均裂的键裂解(即键裂解)除去一个(例如，氢)或者两个原子或者原子团(例如，羟基)得到形式上(formally)形成，其中两个所得片断各自含有形成最初的键的两个电子中的一个。在此使用的"hGH(141)"是指通过从hGH的谷氨酰胺(141)上形式(formal)除去CONH2-基团形成的基团，"hGH(40)"是指通过从hGH的谷氨酰胺(40)上形式除去CONHr基团形成的基团，和"hGH(40，141)"是指通过从hGH的谷氨酰胺(40)和谷氨酰胺(Ml)上形式除去CONH2-基团形成的基团。hGH(40/141)是指通过乂人hGH的谷氨酰胺(40)和/或谷氨酰胺(Ml)上形式除去CONHr基团形成的基团，包括hGH(40)、hGH(Ml)和hGH(40，141)中两种或者更多种的混合物。术语"亚烷基"意欲表示饱和、直链、支链和/或环状烃的双基。除非明确说明具有其它碳原子数目，该术语意欲表示具有2~6(包括两者)个石友原子的火3:,比^口2—5(包才舌两者)，比4口2-4(包4舌两者)，例^口2—3(包括两者)u具体的实例包括亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基和亚己基。术语杂亚烷基(heteroalkylene)意欲表示其中一个或者多个亚曱基基团已经被-o-所取代的如上所迷的亚烷基。具体的实例包括聚乙二醇的双基。术语"PEG"或者"Peg"是指以下结构的多分散或者单分散二基其中n为大于1的整数，并且其分子量为约100~大约1,000，000Da。术语"mPEG"或者"mPeg"是指以下结构的多分散或者单分散基团H3C,0'0'm其中m为大于1的整数。由此，其中m为90的mPEG的分子量为3991Da，即大约4kDa。同样地，平均分子量为20kDa的mPEG的平均m为454。归于生产mPEG的方法，这些分子通常具有分子量分布。该分布通过多分散指数进行描述。在此使用的术语"多分散指数"如聚合物化学中所熟知，是指重均分子量和数均分子量之间的比例(参见例如"PolymerSynthesisandCharacterization",J.A.Nairn,UniversityofUtah,2003)。多分散指数是大于或者等于l的数，并且其可以根据凝胶渗透色谱数据进行估计。当多分散指数为l时，产品为单分散性，由此由具有单一分子量的化合物组成。当多分散指数大于l时，它是该聚合物的多分散性的量度，即具有不同分子量的聚合物分布的有多宽。在分子式、化合物名称或者分子结构中，例如"mPEG20000"或者"mPEG(20k)"的使用表示其中mPEG为多分散性和分子量大约为20kDa的mPEG残基。多分散指数一般随着PEG或者mPEG的分子量而升高。当提及20kDaPEG时，并且特别是20kDamPEG时，意图表示多分散性指数低于1.06的化合物(或者事实上为化合物的混合物)，比如低于1.05,比度低于1.04,比度低于1.03，比如为1.02~〗.03。当提及30kDaPEG时，并且特别是30kDamPEG时，意图表示多分散性指数低于1.06的化合物(或者事实上为化合物的混合物)，比如低于1.05，比如低于1.04,比如低于1.03，比如为1.02~1.03。当提及40kDaPEG时，并且特别是40kDamPEG时，意图表示多分散性指数低于1.06的化合物(或者事实上为化合物的混合物)，比如低于1.05,比度低于1.04，比度低于1.03,比如为1.02~1.03。术语"PEG化的GH"或者"PEG化的hGH"意图表示已经共价连接在PEG上的GH或者hGH，即，它表示含有GH或者hGH和PEG的结合物，其中所述GH或者hGH和所述PEG彼此共价键连。所述连接可以经连接物进行。术语"结合物"作为名词意图表示改性的肽，即通过键接到它上面的部分来改变所述肽的性能的肽。作为动词，该术语意图表示将部分键接到肽上从而改变所述肽的性能的工艺。术语"肟键"意图表示结构-O-N-的化学亚结构。在此使用的结构式中，在式中由A表示的肝键可以以任何方向定位，即为-O-N-或者=N-〇-。在一种实施方案中，在结构式中，肟键的方向给定为-O-N、在另一实施方案中，在结构式中，肟键的方向给定为-N-O-。在本发明上下文中，术语"药学上可接受的盐"意图表示对患者无害的盐。所述盐包括药学上可接受的酸加成盐、药学上可接受的金属盐、铵盐和烷基化的铵盐。酸加成盐包括无机酸以及有机酸的盐。适宜的无机酸的代表性实例包括氢氯酸、氢溴酸、氢碘酸、磷酸、疏酸和硝酸等等。适宜的有机酸的代表性实例包括甲酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯甲酸、肉桂酸、柠檬酸、富马酸、甘醇酸、乳酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、草酸、苦味酸、丙酮酸、水杨酸、琥珀酸、曱磺酸、乙磺酸、酒石酸、抗坏血酸、朴酸(pamoicacid)、二亚曱基水杨酸、乙二磺酸、葡糖酸、柠康酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕榈酸、EDTA、甘醇酸、对氨基苯曱酸、谷氨酸、笨磺酸、对甲笨磺酸等等。药学上可接受的无^^或者有机酸加成盐的进一步实例包括列于J.Pharm.Sci.1977，66，2中的药学上可接受的盐，其在此引入本文作为参考。金属盐的实例包括锂、钠、钾、镁盐等等。铵盐和烷基化铵盐的实例包括铵盐、曱基铵盐、二甲基铵盐、三甲基铵盐、乙基铵盐、羟乙基铵盐、二乙基铵盐、丁基铵盐、四甲基铵盐等等。在此使用的术语"前药"意图表示不具有或者不必具有治疗活性，但是在给药时，通过在体内进行反应被转化为治疗活性化合物的化合物。一般地，所迷反应为水解反应，例如通过酯酶或者氧化进行水解。前药的实例包括可生物水解的酰胺和可生物水解的酯，并且还包括a)在所述前药中，可生物水解的官能度包括在根据本发明的化合物中的化合物，和b)在给定的官能团下，可以被生物氧化或者还原得到根据本发明的药物物质的化合物。这些官能团的实例包括1，4-二氢吡啶、N-烷基羰基_1,4-二氢吡啶、1,4-环已二烯、叔丁基等等。在此使用的术语"可生物水解的酰胺"是一种药物物质(在此为根据本发明的化合物)的酰胺，其或者a)不妨碍母体物质的生物活性，但是赋予该物质在体内有利的性能，例如作用的持续时间，作用的发作等等，或者b)为生物学非活性的，但是易于被受试者在体内被转化为生物学活性成分(principled优点为，例如升高的溶解性或者可生物水解的酰胺从消化道中口服吸收并且在血浆中转化为根据本发明的化合物。所述物质的多种实例在现有技术中都是已知的，并且包括例如低级烷基酰胺、oc-氨基酸酰胺、烷氧基酰基酰胺和烷基氨基烷基羰基酰胺。在此使用的术语"可生物水解的酯"是一种药物物质(在此为根据本发明的化合物)的酯，其或者a)不妨碍母体物质的生物活性，但是赋予该物质在体内具有有利的性能，例如作用的持续时间，作用的发作等等，或者b)为生物学非活性的，但是易于被受试者在体内转化为生物学活性成分。优点为，例如升高的溶解性或者可生物水解的酯从消化道中口服吸收并且在血浆中转化为根据本发明的化合物。所述物质的多种实例在本领域中都是已知的，并且包括例如C广C4烷基酯、d-Ct酰氧基烷基酯、CrC4烷氧基酰氧基烷基酯、烷氧基酰氧基酯、烷基酰氨基烷基酯和胆碱酯。转谷氨酰胺酶(E.C.2.3.2.13)亦称蛋白质-谷氨酰胺-Y-谷氨酰基(glutamyl)转移酶，并且催化一般反应<formula>formulaseeoriginaldocumentpage66</formula>Q-C(0)-NH2(胺受体)可以表示含有肽的谷氨酰胺残基和Q，-NH2(胺给体)表示含有胺的亲核试剂。另外地，Q-C(0)-NH2和Q，-NH2可以分别表示胺受体和含有赖氨酸的肽。然而，在本发明中，Q-C(0)-NH2表示含有生长激素的谷氨酰胺残基和Q，-NH2表示如上所指出的含有胺的亲核试剂。体内的常规胺给体为肽-结合赖氨酸，和然后上述反应提供肽的交联键连。凝结因子(coagulationfactor)FactorXIII是在损伤时实现血液凝固的转谷氨酰胺酶。不同的转谷氨酰胺酶彼此不同，例如，不同之处在于使蛋白质成为底物所需的围绕谷氨酰胺残基(或者Gin)的是何种氨基酸残基，即取决于何种氨基酸残基邻接Gln残基，不同的转谷氨酰胺酶将具有不同的含Gin肽作为底物。如果意欲进行改性的生长激素含有多于一个Gln残基，那么该方面可以得到发挥。如果希望将生长激素选择性地仅仅偶联在一些存在的Gln残基上，则该选择性可以通过选择仅仅将相关Gin残基(们)接受为底物的转谷氨酰胺酶得到获得。另外地，可以对Gin附近的一个或者多个氨基酸残基进行改变，例如通过基因工程进行改变，从而改变给定转谷氨酰胺酶对所迷Gln残基的活性。当然，具有较少或者仅仅具有一个待偶联的谷氨酰胺残基的生长激素。人们认识到，化合物是否为给定酶的底物原则上取决于反应条件，例如，时间框架、温度等等。给定足够的时间，许多通常不被认为是底物的化合物事实上成为底物。当如上所述，对于给定的转谷氨酰胺酶，一些Gln残基可以为底物而其它不是底物时，这意图将"其它不是"表示为期望的选择性仍然可以得到实现的程度。如果期望保留不偶联的一个或多个Gln残基，当与转谷氨酰胺酶接触延长的时间期间时，事实上是转谷氨酰胺酶的底物，那么选择性可以通过在适宜的时间之后除去或者灭活转谷氨酰胺酶得到实现。可用的转谷氨酰胺酶的实例包括微生物转谷氨酰胺酶，比如，例如链霉菌属mobaraense、链霉菌属肉桂链轮丝菌和链霉菌属griseocameum中的那些(所有都公开在US5，156,956中，其在此引入作为参考)，和薰衣草链霉菌(公开在US5,252,469中，其在此引入作为参考)和链霉菌属ladakanum中的那些(JP2003199569,其在此引入作为参考)。应当指出，从前的链轮丝菌属的成员现在包括在链霉菌属中(Kaempfer,丄Gen.Microbiol.137,1831-1892(1991))u其它有用的微生物转谷氨酰胺酶分离自枯草杆菌(公开于US5,731,183中，其在此引入作为参考)和各种粘菌。有用的微生物转谷氨酰胺酶的其它实例是公开于WO96/0693(例如来自Baciluslydicus的转谷氨酰胺酶)和WO96/22366中的那些，二者在此引入作为参考。有用的非微生物转谷氨酰胺酶包括豚鼠肝转谷氨酰胺酶和得自于各种海生源的转谷氨酰胺酶，比如平鱼鲽科真鲷(公开在EP-0555649中，其在此引入作为参考)和日本蚝巨蛎属gigas(公开在US5,736,356中，其在此引入作为参考)。在一种实施方案中，包含意欲进行PEG化的生长激素的谷氨酰胺残基为人生长激素(hGH),亦称人促生长素。hGH存在的不同变体，例如，公开于公开数据库SwissProt中。它包含26个氨基酸信号肽和191个氨基酸成熟肽。在一种实施方案中，hGH具有如本文中SEQIDNo.l(亦称22K-hGH)所示的氨基酸序列。在一种实施方案中，hGH为20kDahGH(或者20K-hGH)，如J.Clin.Endocnn.Metabol.89,1562-1571(2004)和Endocrine丄，47,S49-S52(2000)中所述20kDahGH是分子量为20kDa的hGH(20K-hGH)，其由脑下垂体前叶腺分泌为剪接变体(转朊基因3的可变剪接)并且据报道其量为流通血浆hGH的大约5-10%(Baumann，Endocr.Rev.12,424-449(1991))。同22K-hGH相比，20K-hGH缺少15个氨基酸(残基32-46)。22K-hGH当前被批准和使用于hGH替换和药理学治疗中，然而，20K-hGH在这些疗法中从未祐:使用过。在切除垂体的大鼠和萎缩大鼠中，20K-hGH是促生长作用的完全激动剂，由此具有与22K-hGH相同的效力(Wada等人，Mol.Cellu.Endocr.113,99-107(1997),Ishikawa等人，GrowthHorm.IGFRes.10,199-206(2000))。此外，20K-hGH在人类成骨细胞中的osteoanabolic作用也等同于22K-hGH的。使用重组20K-hGH、22K-hGH和对照组，在三前肢24小时输注研究(在大鼠中)中，同对照组相比，在血糖(euglycaemic)夹板中，20K-hGH对葡萄糖液输注速率(GIR)没有显著的影响。相反，同20K-hGH和对照组相比，22K-hGH显著地降低GIR(Takahashi等人，GrowthHorm.IGFRes.11，110-U6(2001))。由此，同22K-hGH相比，峰值较低(稳定)的20K-hGH血浆分布似乎致糖尿病性更低和具有降低的胰岛素拮抗作用。此外，在正常的大鼠中，同22K-hGH相比，20K-hGH显示出导致尿储留(浮肿形成)的降低效能(Satozawa等人，GrowthHorm.IGFRes.10，187-192(2000))。长效的生长激素产品将具有接近于利用输注获得的血浆分布。由此，使用20K-hGH的衍生物可以提供与22K-hGH衍生物类似的期望药理学，不过具有改良的副作用分布。此外，由于同22K-hGH相比，在人类中其具有固有的30%较长的血浆半衰期，因此20K-hGH可能具有提供长效生长激素产品的增强可能性。降低的清除率被认为是由于降低的受体介导清除的原因(Leung等人，Am.J.PhysiolEndocr.Metab.283，836-843(2002))。此夕卜，在低浓度(O.lnM)时，20K-hGH已经被证实比22K-hGH诱发IGF-1表达有效大约三倍(Yoshizato等人，Endocr.J.47，37-40(2000)),这再次表明了长效生长激素产品的更好分布。在一种实施方案中，意欲进行PEG化的生长激素为hGH的变体，中的一个或多'个氨基酸残基获得的化i物；和/;::4将一个或多个天然或者非天然氨基酸加入到hGH序列中获得的化合物；和/或通过从hGH序列中除去一个或多个氨基酸残基获得的化合物，其中任何这些步骤都可以任选随后进行一个或者多个氨基酸残基的进一步衍生化作用，例如通过PEG化导致二或者多peg化(peguylated)的生长激素变体。特别是，所述替换为保守的，在一种氨基酸残基被相同组的另一氨基酸残基替换，即被另一具有类似性能的氨基酸残基替换的意义上。基于它们的性能，氨基酸可以合意地分为以下组碱性氨基酸(比如精氨酸和赖氨酸)、酸性氨基酸(比如谷氨酸和天冬氨酸)、极性氨基酸(比如谷氨酰胺、组氨酸、半胱氨酸和天门冬酰胺)、疏水氨基酸(比如亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、蛋氨酸和缬氨酸)、芳香氨基酸(比如苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸)和小的氨基酸(比如甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸和苏氨酸)。在一种实施方案中，hGH是其中对应于SEQIDNo.1中位置40的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换的hGH。在一种实施方案中，hGH是其中对应于SEQIDNo.中位置4的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换的hGH。在一种实施方案中，hGH为其中对应于SEQIDNo.1中位置40的位置上的谷氨酰胺残基和对应于SEQIDNo.1中位置141的位置上的谷氨酰胺残基各自已经被除去或者被另一氨基酸替换的hGH,和其中谷氨酰胺残基存在于生长激素的其它位置上。在另一实施方案中，所述其它氨基酸为天门冬酰胺。在一种实施方案中，包含意欲PEG化的生长激素的谷氨酰胺残基与hGH具有至少80%的同一性，比如至少85%,比如至少90%,比如至少95%，比如至少98%。在一种实施方案中，所述与hGH的同一性与本文测定I中测定的hGH的生长激素活性的至少20%联系在一起，比如至少40%,比如至少60%,比如至少80%。术语"同一性"如本领域中所熟知，是指两种或者多种蛋白质序列之间的关系，通过比较序列进行确定。在本领域中，"同一性"还指蛋白质之间序列相关性的程度，通过比较两种或者多种氨基酸残基的行之间的匹配数目进行确定。"同一性"测量两种或者多种序列中较小的序列与通过具体输血模型或者计算机程序(即，"算法")编址的间隙对准(如果存在)之间的等同匹配的百分比。相关蛋白质的同一性可以通过已知的方法轻易进行计算。所述方法包括但不限于描迷在ComputationalMolecularBiology,Lesk，A.M.,ed.，OxfordUniversityPress,NewYork,1988;Biocomputing:InformaticsandGenomeProjects,Smith,D.W.,ed.，AcademicPress,NewYork,1993;ComputerAnalysisofSequenceData,Part1，Griffin,A.M.禾口Griffin,H.G.，eds.,HumanaPress,NewJersey,1994;SequenceAnalysisinMolecularBiology,vonHeinje,G.,AcademicPress,1987;SequenceAnalysisPrimer,Gribskov,M.和Devereux,丄，eds.,M.StocktonPress,NewYork,1991;和Canllo等人，SIAMJ.AppliedMath.，48:1073(1988)中的方法。优选确定同一性的方法设计用于给出测试序列之间的最大匹配。确定同一性的方法描述在公众可获得的计算机程序中。优选确定两个序列之间同一性的计算机程序方法包括GCG程序包，包括GAP(Devereux等人，Nucl.Add.Res.,12.387(1984);GeneticsComputerGroup,UniversityofWisconsin,Madison,Wis.)、BLASTP、BLASTN和FASTA(Altschul等人，J.Mol.Biol.，215:403-410(1990))。BLASTX程序公众可以获4寻于theNationalCenterforBiotechnologyInformation(NCBI)和其它来源(BLASTMa画l，AItschul等人NCB/NLM/NIHBethesda，Md.20894;Altschul等人，同上)。还可以使用众所周知的SmithWaterman算法确定同一性。例如，4吏用计算才几算法GAP(GeneticsComputerGroup,UniversityofWisconsin,Madison,Wis),对意欲确定序列同一性百分比的两种蛋白质进行调准，以使它们相应的氨基酸最优化匹配("匹配的跨度"，通过算法确定)。间隙开放损失(计算为3倍平均对角线；"平均对角线"是使用的对比基质的对角线的平均值；"对角线"是由具体对比基质分配给各个完美氨基酸匹配的分数或者数目)和间隙延伸损失(通常为间隙开放损失的分数(1/10)倍)，以及比如PAM250或者BLOSUM62的对比基质与算法结合使用。标准对比基质(PAM250的对比基质参见Dayhoff等人，AtlasofProteinSequenceandStructure,vol.5supp.3(1978);BLOSUM62对比基质参见Henikoff等人，Proc.Natl.Acad.SciUSA，89:10915-10919(1992))也通过算法进行应用。优选用于蛋白质序列比较的参数包括以下算法Needleman等人，J.Mol.Biol,48:443-453(1970);对比基质BLOSUM62,Hemkoff等人，Proc.Natl.Acad.Sci,USA，89:10915-10919(1992);间隙损失12,间隙长度损失4,类似性的才及限0。使用具有上述参数的GAP程序。上述参数是使用GAP算法的蛋白质对比的缺省参数(连同末端间隙没有损失)。应当理解，上述讨论的意欲进行PEG化的生长激素必须包含至少一个谷氨酰胺残基。在此使用的术语"谷氨酰胺残基"还包括适用于氨基转移化作用的谷氨酰胺残基类似物。适宜的谷氨酰胺残基类似物包括但不限于部分氟化的、烷基化的或者氘化的谷氨酰胺残基类似物，或者谷氨酰胺残基的同系物，即通过将一个、两个或者更多个亚甲基基团(-CHr)正式插入谷氨酰胺的C-C、C-H或者C-N-键之中形成的化合物。生长激素可以通过标准蛋白质合成法获得，或者生长激素可以通过用编码感兴趣的生长激素的DNA转染适宜的宿主细胞获得。这在本领域熟练技术人员的能力范围之内。如果期望，可以通过使用根椐本发明的方法获得的PEG化的生长激素还可以通过PEG化之外的其它方式进行衍生化。所述另外的衍生作用可以在使用本发明方法的步骤之前、期间或者之后进行。确定所述另外的衍生化作用的时机在本领域熟练技术人员的能力范围之内。除了意欲进行PEG化的位置或位置们之外，使用的生长激素还可以在一个或者多个其它位置利用根据本发明的方法已经进行了PEG化。在一种实施方案中，D表示-O-。在另一实施方案中，D表示单键。连接物R提供亲核试剂的胺和意欲合并入生长激素中的官能团或者潜在官能团的适当间隔。在一种实施方案中，R表示-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-或者-(CH2)4-CH(NHCOCH3)-CO-NH-CH2-。在一种实施方案中，R表示C^6亚烷基。在一种实施方案中，R表示C-3亚烷基。在一种实施方案中，R表示亚甲基、亚乙基或者亚丙基。在一种实施方案中，R表示亚甲基或者亚丙基。在一种实施方案中，Z表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage72</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage73</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage74</formula>其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG,和PEG表示分子量为1kDa~10kDa的PEG。应当理解，包含在X中的官能团可以在下列意义上是潜在的，即它必须在与Y-Z反应之前进行活化u例如，X可以包括在与适宜的试剂反应时而被转化为醛或者酮的部分。所述部分的实例包括<formula>formulaseeoriginaldocumentpage75</formula>其中W表示H、d-6烷基、芳基或者杂芳基。具体的实例包括甲基、乙基和丙基。所述部分可以通过用适宜的试剂(比如，例如高碘酸盐)氧化，或者通过用含水酸水解，任选在催化剂(比如，铜、银或者汞盐)存在下转化为醛或者酮。在本发明上下文中，术语"芳基"意图表示碳环(homocyclic)芳环基团或者其中至少一个环为芳香环的稠合碳环系统基团。典型的芳基包括苯基、联笨基、萘基和萘满基(tetralinyl)等等。在此单独或者组合使用的术语"杂芳基"是指具有例如5-7个环原子的芳环基团或者具有例如7~18个环原子的稠合芳环系统基团，其中至少一个环为芳香环并且含有一个或者多个选自氮、氧或者硫杂原子的杂原子作为环原子，其中N-氧化物和一氧化硫和二氧化硫是可允许的杂芳基取代。实例包括呋喃基、噻吩基、苯硫基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、"恶唑基、异P恶唑基、喁二唑基、噻二唑基、异噻唑基、吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、苯并呋喃基、笨并噻吩基、吲哚基和吲唑基等等。还应当理解的是，X和Y在下列意义上必须是互补的，即它们应当能够彼此反应从而形成肟键。这意味着如果X为(或者可以被活化为)醛或者酮，那么Y必须是氨基氧基。如果X是氨基氧基，那么Y必须是醛或者酮。如果Y是醛或者酮，那么X必须是氨基氧基。如果Y是氨基氧基，那么X必须是(或者必须被活化为)酪或者酮。式[II]化合物的具体实例包括1,3-二氨基氧基丙烷和1,3-二氨基-2-丙醇如果使用后面的化合物，那么潜在的醛基必须被氧化，例如通过高碘酸盐氧化，转化为醛。在一种实施方案中，Y表示-0-NH2和X表示醛或者可以进一步反应从而形成醛的潜在基团u在一种实施方案中，Y表示-0-NH2和X表示酮或者可以进一步反应从而形成酮的潜在基团,，在一种实施方案中，式[II]化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage76</formula>表示1,3-二氨基-2-丙醇，和Y表示-0-NH2在另一实施方案中，式[IV]化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage76</formula>表示选自以下的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage76</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage77</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage78</formula>其中，除非另有说明，mPEG是指分子量为10kDa、20kDa或者30kDa的mPEG,和PEG是指分子量为2kDa~5kDa的PEG。在一种实施方案中，Y表示醛和X表示-0-NH2或者在进一步反应时可以转化为-0-NH2的潜在基团。在另一实施方案中，式[II]化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage78</formula>表示1,3-二氨基氧基丙烷，和Y表示醛,在另一实施方案中，式[IV]化合物Y-Z表示选自以下的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage78</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage79</formula>其中，除非另有说明，mPEG是指分子量为10kDa、20kDa或者30kDa的mPEG，和PEG是指分子量为2kDa~5kDa的PEG。在一种实施方案中，Y表示酮和X表示-0-NH2或者在进一步反应时可以转化为-0-NH2的潜在基团。在另一实施方案中，式[II]化合物H2N-D-R-X表示1,3-二氨基氧基丙烷，和Y表示酮在另一实施方案中，式[IV]化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage79</formula>表示选自以下的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage80</formula>其中，除非另有说明，mPEG是指分子量为10kDa、20kDa或者30kDa的mPEG，和PEG是指分子量为2kDa-5kDa的PEG。式卩Vj化合物可以市场购买到，例如，得自于Shearwater或者NOF公司，或者它们可以由市售化合物通过简单化学修饰轻易获得。同相应的未偶联生长激素(还称为母体生长激素)相比，式V化合物可以具有改良的或者其它药理学性能。由此，在一种实施方案中，本发明涉及改变生长激素的药理学性能的方法，所述方法包含根据本发明<formula>formulaseeoriginaldocumentpage80</formula>的方法将PEG连接在所述生长激素上。所述药理学性能的实例包括官能体内半衰期、免疫原性、肾过滤、蛋白酶保护和白蛋白结合。术语"官能体内半衰期，，以其常规意义使用，即，生长激素或者偶生长激素或者生长;°素结合物的活性为其初始值的;:％的时间。作-确定官能体内半衰期的替代物，可以对"体内血浆半衰期，，进行测定，即在清除之前，50%的生长激素或者生长激素结合物在血浆或者血流中循环时的时间。血浆半衰期的测定通常比官能半衰期的测定更简单，并且血浆半衰期的数值通常是官能体内半衰期数值的良好指示。血浆半衰期的替代术语包括血清半衰期、循环半衰期、流通半衰期、血清清除率(clearance),血浆清除率和清除半衰期。与官能体内半衰期或者血浆半衰期结合使用的术语"升高的"用于表示生长激素结合物的相关半衰期相对于在可比拟条件下测定的母体生长激素，在统计学上显著被升高。例如，相关的半衰期可以增加至少约25%,比如至少约50%，例如，至少约100%、150%、200%、250%或者500%。在一种实施方案中，相对于母体GH的半衰期，本发明化合物显示出半衰期升高至少约5h,优选至少约24h,更优选至少约72h，和最优选至少约7天。体内血浆半衰期的测定可以如文献中所迷以多种方法进4亍。体内血浆半衰期的升高可以定量为清除率的降低(CL)或者平均停留时间(MRT)的升高。在适宜的测定中，相对于母体生长激素的CL,CL被降低至小于70%,比如小于50%,比如小于20%,比如小于10%的本发明偶联生长激素被认为具有升高的体内血浆半衰期。在适宜的测定中，相对于母体生长激素的MRT,MRT被升高至大于130%,比如大于150%,比如大于200%,比如大于500%的本发明偶联生长激素被认为具有升高的体内血浆半衰期。清除率和平均停留时间可以在标准药物动力学研究中使用适宜的试验动物进行评价。对于给定的蛋白质选择适宜的试验动物在本领域熟练技术人员的能力范围之内。当然，在人类中进行的试验表示最终试-睑。适宜的试验动物包括正常的、Sprague-Dawley雄性大鼠、小鼠和食蟹猴。小鼠和大鼠典型地以单一皮下弹丸注射，然而猴子可以单一皮下弹九注射或者单一iv剂量注射。注射的量取决于试验动物。随后，酌情在1~5天期间采集血样以评价CL和MRT。血样通过EUSA技术进行合意地分析。术语化合物的"免疫原性"是指当化合物给药至人类时，在体液、细胞或者二者中引起有害的免疫反应的能力。在任何人类子群中，都可能存在对具体给药的蛋白质表现出敏感性的个体。免疫原性可以通过利用本领域已知的常规方法，定量在敏感个体中存在的生长激素抗体和/或生长激素反应T细胞进行测定。在一种实施方案中，相对于母体GH的个体免疫原性，本发明偶联的GH在敏感个体中显示出降低至少约10%的免疫原性，优选至少约25%,更优选至少约40°/。和最优选至少约50%。在另一方面中，免疫原性可以指在类似对象群体中的典型响应，比如，在临床试验的患者群体中的典型响应。在此使用的术语"蛋白酶保护"或者"蛋白酶保护的"意图表示，同母体生长激素相比，本发明的偶联生长激素对血浆肽酶或者蛋白酶具有更强的抵抗。熟知存在于血浆中的蛋白酶和肽酶涉及循环蛋白质的降解，比如，例如循环的肽类激素，比如生长激素。蛋白质对例如二肽基氨肽酶IV(DPPIV)降解的抵抗通过下列降解测定进行确定在lOO^LO.lM三乙胺-HC1緩冲液，pH7.4中，在37°C下，将蛋白质(5nmo1)等份试样与lpL纯化的对应于5mU的酶活性的二肽基氨肽酶IV培养10-180分钟。通过加入5jxL10。/o三氟乙酸终止酶反应，和将蛋白质降解产物分离并且使用HPLC分析对其进行定量。进行该分析的一种方法是根据Siegel等人，Regul.Pept.79,93-102(1999)和Mentlein等人Eur.J.Biochem.214，829-35(1993),将混合物施加到VydacC8widepore(30nm孔，5pm颗粒)250x4.6mm柱上，和以1ml/min的流速用在0.1%三氟乙酸中的乙腈的线性分级梯度(0%乙腈3min,0-24%乙腈17min,24-48%乙腈lmin)进行洗脱。蛋白质和它们的降解产物可以通过它们在220nm(肽键)或者280nm(芳香氨基酸)下的吸光度进行监控，并且通过积分它们相对于标准样品的峰面积进行定量。蛋白质通过二肽基氨肽酶IV的水解速率估计为导致小于10%肽被水解的培养时间。对其它血浆蛋白酶或者肽酶的4氐抗可以以类似的方式进行测定,，在一种实施方案中，生长激素结合物的水解速率小于母体生长激素的70%，比如小于40%,比如小于10%。在哺乳动物物种的循环血液中最丰富的蛋白质组分为血清白蛋白，其通常以大约3~4.5克/100mL全血的浓度存在。血清白蛋白是在循环系统中具有几种重要功能的大约70,000道尔顿的血液蛋白。它起着血液中发现的各种有机分子的转运蛋白的作用，起着比如脂肪酸和胆红素的各种代谢物通过血液的主要转运蛋白的作用，和由于其大量存在，起着循环血液的渗透调节剂的作用。血清白蛋白具有大于一周的半衰期，并且趋向于升高已经偶联到结合血清白蛋白的蛋白质组的蛋白质的血浆半衰期。白蛋白的结合性能可以如J.Med.Chem,43,1986-1992(2000)中所述进行确定，该文献在此引入作为参考。在一种实施方案中，本发明涉及根据式[V]的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage83</formula>其中PP表示通过从存在于多肽中的谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(=〇)-NH2获得的多肽基团；D表示-O-或者一个键；R表示d-6亚烷基、-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-、-(CH2)4-CH(NHCOCH3)-CO-NH-CHr或者C5_15杂亚烷基；A表示肟键；Z表示选自以下的部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage83</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage84</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage85</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage86</formula>其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG,和PEG表示分子量为1kDa~10kDa的PEG;及其任何药学上可接受的盐、前药或溶剂化物。在一种实施方案中，多肽为包含生长激素的谷氨酰胺残基，和PP表示通过从存在于生长激素的谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(K))-NH2获得的生长激素基团。在一种实施方案中，本发明涉及共价连接在一个或者多个包含PEG(并且特别是mPEG)的部分上的生长激素，比如hGH，其中所述含PEG部分连接在存在于生长激素中的谷氨酰胺残基的侧链上。在一种实施方案中，本发明涉及其中共价连接在包含PEG(并且特别是mPEG)的部分上的hGH，其中所述含PEG部分在对应于SEQIDNo.1的位置40、位置141或者位置40和141的位置上连接在谷氨酰胺残基的側链上，条件是它不是Nd"-[2-(4-(4-(mPEG(20k)基丁酰基)-氨基-丁氧基亚氨基)-乙基]hGH,NE'"-[2-(l-(十六烷酰基)哌啶-4-基)乙氧基亚氨基)-乙基]hGH,NKl4l(2-(4-(4-(1，3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)丁氧基亚氨基)乙基)hGH,^'141(2-(4-(2,6-二(0^60(2010基氧基羰基氨基)己酰基氨基)丁氧基亚氨基)乙基)hGH，Nf'"、2-(4-(4-(mPEG(30k)基氧基)丁酰氨基)丁氧基亚氨基)乙基)hGH，N"引(2-(4-(4-(mPEG(20k)基氧基)丁酰氨基)丁氣基亚氨基)乙基)hGH,或者]sT"'(2-(4-(3-(mPEG(30k)基氧基)丙酰基氨基)丁氧基亚氨基)乙基)hGH。在一种实施方案中，本发明涉及式[Va]化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage87</formula>其中GH表示通过从存在于生长激素中的谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(=0)-NH2获得的生长激素基团；D表示-O-或者一个键；R表示d.6亚烷基、-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-、-(CH2)4-CH(NHCOCH3)-CO-NH画CHr或者C5.15杂亚烷基；A表示坊键；Z表示选自以下的部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage87</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage88</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage89</formula>其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG和PEG表示分子量为IkDa~10kDa的PEG;及其任何药学上可接受的盐、前药或溶剂化物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage89</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage90</formula>条件是如果Z为25,那么mPEG为10kDamPEG。在一种实施方案中，D表示-O-。在一种实施方案中，D表示单键。在一种实施方案中，R表示-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-或者-(CH2)4-CH(NHCOCH3)-CO-NH-CH2-。在一种实施方案中，R表示C"6亚烷基。在另一实施方案中，R表示C,—3亚烷基。在另一实施方案中，R表示亚甲基、亚乙基或者亚丙基。在另一实施方案中，R表示亚甲基或者亚丙基。在一种实施方案中，Z表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage90</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage91</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage92</formula>wo,或者mPEG-0^^"T1^0—Peg-0^/其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG,和PEG表示分子量为1kDa-10kDa的PEG。在一种实施方案中，GH表示通过从存在于含有SEQIDNo.l的氨基酸序列的hGH中的谷氨酰胺残基側链上除去-C(K))-NH2获得的基团。在一种实施方案中，GH表示通过从存在于20kDahGH中的谷氨酰胺残基侧链上除去-C(-0)-NH2荻得的基团。在一种实施方案中，GH表示通过从hGH的谷氨酰胺40的侧链上除去-C(0)-NH2获得的基团。特别是，所述hGH可以通过除去谷氨酰胺141或者用其它氨基酸(并且特别是天门冬酰胺)替换谷氨酰胺141进行进一步改性。在一种实施方案中，GH表示通过从hGH的谷氨酰胺14的侧链上除去-C(-0)-NH2获得的基团。特别是，所述hGH可以通过除去谷氨酰胺40或者用其它氨基酸(并且特别是天门冬酰胺)替换谷氨酰胺40进行进一步改性。在一种实施方案中，GH表示通过从不同于对应SEQIDNo.1中位置40的位置的位置上和不同于对应SEQIDNo.1中位置141的位置的位置上存在的谷氨酰胺残基側链上除去-C(K))-NH2获得的基团，其中对应于SEQIDNo.1中位置40的位置上的谷氨酰胺残基和对应于SEQIDNo.1中位置141的位置上的谷氨酰胺残基各自已经被除去或者被另一种氨基酸(并且特别是天门冬酰胺)替换。式[Va]化合物的具体实例包括N副"40-2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基}氨基丁基)-肟基)乙基hGH;N副固-2-(O-(4-(4-(mPEG(10k)基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS"，-2-(O-(4-P-(mPEG(10k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N副,-2-(O-(4-(4-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;N副,-2-(O-(4-(5-(mPEG(10k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N"41/气3_({4_(2_(2_(2_(2_(4_(j，3_二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基}氨基氧基)丙-1-基氧基hGH;NW"('-3-((4-(l,3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基)-氨基氧基)丙氧基hGH;NS""气3-(H-(mPEG(10k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS",-3-((4-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基〉氨基氧基)丙氧基hGH;NS",-3-((3-(mPEG(10k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NSM歸-2-(O-(2-(3-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;N副固-3-((4-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基〉氨基氧基)丙氧基hGH;NW湖-2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)氨基丁基)-肟基)乙基hGH,NS4"气2-(O-(4-(3-(mPEG(20k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NM4,-2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;N^"()-2-(O-(4-(5-(mPEG(20k)基氧基-5-氧代戊酰基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;#141/4()陽3-({4-(2-(2-(2-(2-(4-(1，3-二(1^￡0(2010基氨基羰氧基)丙画2-基氣基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基}氨基氧基)丙-l-基氧基hGH;NS",-3-(H-(l，3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基卜氨基氧基)丙氧基hGH;N^固-3-((4-(mPEG(20k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS""气3-((4-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙小基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS"固-3-((3-(mPEG(20k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;!^141/4(>_2_(0_(2_(3_(2,3_二(1^￡(3(201^基氧基)丙氧基)丙基氨基)一2_氧代乙基)肟基)乙基hGH;NS"'"('-3-(H-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙小基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NW""-2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基}氨基丁基)-肟基)乙基hGH;NS"歸-2-(O-(4-(3-(mPEG(30k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NW4歸-2-(O-(4-H-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N"4自-2-(O-(4-(5-(mPEG(30k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH，]^4歸-3-({4-(2-(2-(2-(2-(4-(1,3-二(11^￡0(3010基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙-l-基氧基hGH;NS'4卵-3-((4-(l,3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基)-氨基氧基)丙氧基hGH;NW，3-((4-(mPEG(30k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NW4,-3-((4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS",-3-(P-(mPEG(30k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;]^14|/4°-2-(0-(2-(3-(2，3-二(1^￡0(3010基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;NS",-3-((4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基〉氨基氧基)丙氧基hGH;NW4卵-3-(H-((2,3-二(mPEG(20k)基)丙-l-基氧基)PEG基氧基)亚丁基}氨基氧基)丙氧基hGH;N"4"气2-((4-(4-((2，3-二(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁酰氨基)丁基)肘基)乙基hGH;N""-2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)-氨基丁基)肟基)乙基hGH;NW-2-(O-(4-(4-(mPEG(10k)基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N^'-2-(O-(4-(3-(mPEG(10k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NM"-2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-卜基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;W4)-2-(O-(4-(5-(mPEG(10k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N引4'-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l，3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙-l-基氧基hGH;]^14|-3-({4-(1,3-二(1^￡0(1010基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基}-氨基氧基)丙氧基hGH;NS"-3-((4-(mPEG(10k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS"'-3-((4-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS14'-3-({3-(mPEG(1Ok)基氧基)亚丙基}氨基氧基)丙氧基hGH;NSW-2-(O-(2-(3-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;N""-3-((4-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N""-2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基}-氨基丁基)肟基)乙基hGH,NS"'-2-(O-(4-(3-(mPEG(20k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NW-2-(O-(4-(4-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS"L2-(O-(4-(5-(mPEG(20k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS"L3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l，3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙-l-基氧基hGH;#|41-3-({4-(1,3-二(11^￡0(2010基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基}-氨基氧基)丙氧基hGH;N""-3-((4-(mPEG(20k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NM"-3-((4-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N""-3-(卩-(mPEG(20k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N"4'-2-(O-(2-(3-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;NS'引-3-(H-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙小基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N副L2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(30k)基氨基羰氣基)丙-2-基氧基)丁酰基)-氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS'4'-2-(O-(4-(3-(mPEG(30k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS'"-2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS'4'-2-(O-(4-(5-(mPEG(30k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS"'-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基}氨基氧基)丙-1-基氧基hGH;#141-3-({4-(1,3-二(11^60(3010基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基}-氨基氧基)丙氧基hGH;NW"-3-((4-(mPEG(30k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS)引-3-((4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙小基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS'"-3-((3-(mPEG(30k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS川-2-(O-(2-(3-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;NW"-3-(H-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NM"-3-((4-K2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基)PEG基氧基}亚丁基}氨基氧基)丙氧基hGH;N^-2-((4-(4-((2,3-二(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁酰氨基)丁基)肝基)乙基hGH;N64u-2-(0-(4-{4-(1，3-二(mPEG(1Ok)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)-氨基丁基)肟基)乙基hGH;N54('-2-(0-(4-{4-(mPEG(1Ok)基氣基)丁酰基}氨基丁基)肟基)乙基hGH,NS4G-2-(0-(4-{3-(mPEG(IOk)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N,-2-(O-(4-H-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS4()-2-(O-(4"5-(mPEG(10k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH，NS4G-3-({4-(2-(2-(2-(2-(4-(1，3-二(mPEG(1Ok)基氨基羰氧基)丙-2-基氧-l基hG^;土"土^土"^土、土"土"土土#40-3-({4-(1,3-二(0^60(1010基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基}-氨基氧基)丙氧基hGH,NS")-3-((4-(mPEG(10k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS")-3-((4-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS气3-((3-(mPEG(10k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS，2-(O-(2-(3-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;N柳J-((4-(2,S-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS化-2-(O-(4-H-(U-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基}-氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS4°-2-(0-(4-{3-(mPEG(20k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N,-2-(O-(4-H-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N54('-2-(O-(4-(5-(mPEG(20k)基氣基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH,NS")-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙-l-基氧基hGH;N糾)-3-((4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基卜氨基氧基)丙氧基hGH;N,-3-((4-(mPEG(20k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS气3-((4-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N5，3-((3-(mPEG(20k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS气2-(O-(2-(3-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;NS，3-((4-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氡基)丙氧基hGH;NS气2-(O-(4-H-(l，3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)-氨基丁基)肟基)乙基hGH;N,-2-(O-(4-(3-(mPEG(30k)基氧基)丙酰基}氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS，2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NM0-2-(O-(4-(5-(mPEG(30k)基氧基-5-氧代戊酰基}氨基丁基)肟基)乙基hGH;N,-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙小基氧基hGH;]^40-3-({4-(1，3-二(1^￡0(3010基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基}-氨基氧基)丙氧基hGH;N,-3-((4-(mPEG(30k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N,-3-((4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N,-3-(p-(mPEG(30k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS4()-2-(O-(2-(3-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH，NS4()-3-((4-(2，3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N,-3-((4-U2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基)PEG基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N,-2-((4-(4-((2，3-二(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁酰氨基)丁基)肟基)乙基hGH;Ne"L[2-O-(4-(4-(l，3-二(mPEG(20K)氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH;Ne^-[2-(O-(4-(4-(mPEG(30K)氧基)丁酰氨基)-丁基)氧基亚氨基)-乙基〗hGH;N""-(3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l，3-二(mPEG(20K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基)hGH;1sT'"'-[2-(2-(2，3-(mPEG(20K)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基肟基)乙基]hGH;Nf:"-[2-(O-(2-(2-(mPEG(40K)基氧基)乙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基]hGH;NKl41-[2-(3-(4-((1,3-二(mPEG(30K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基亚氨基)乙基]hGH;N"4卵-[2-O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20K)氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH;]^141/气[2-(〇-(4-(4-(11^￡0(301<:)氧基)丁酰氨基)-丁基)氧基亚氨基)-乙基]hGH;Nd4"4()-(3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(20K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基)hGH;N"园-[2-(2-(2,3-(mPEG(20K)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基肟基)乙基]hGH;N"4脂-[2-(O-(2-(2-(mPEG(40K)基氧基)乙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基]hGH;N"4諸-[2-(3-(4-((l,3-二(mPEG(30K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基亚氨基)乙基]hGH;Nk40-[2-O-(4-(4-(,3-二(mPEG(20K)氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH;N"G-[2-(O-(4-(4-(mPEG(30K)氧基)丁酰氨基)-丁基)氧基亚氨基)-乙基]hGH,N""-(3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l，3-二(mPEG(20K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基)hGH;N^-[2-(2-(2，3-(mPEG(20K)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基肟基)乙基〗hGH;N"、[2-(O-(2-(2-(mPEG(40K)基氧基)乙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基〗hGH;Ne4、[2-(3-(4-((1>二(0^￡0(3(^)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)亚丁基)-氨基氧基)丙氧基亚氨基)乙基]hGH;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage101</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage102</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage103</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage104</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage105</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage106</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage107</formula>-些以上图示代表也可以或者另外表示为N^-(2-(O-(2-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基)朽基)乙基)hGH,NS'"-(2-(O-(3-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙氧基羰基氨基)丙基)肟基)乙基)hGH,NS气(2-(O-(2-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基)肟基)乙基)hGH，NS气(2-(O-(3-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙氧基羰基氨基)丙基)肟基)乙基)hGH,NS"、2-O-(2-氧代-2-(3-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)乙基)將基乙基)hGH，NS，(2-O-(2-氧代-2-(3-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)乙基)肟基乙基)hGH,NS'"-(2-O-(4-(5-(3-(①-(3-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙氧基)丙氧基)聚氧乙烯基氧基)丙基氨基)-l,5-二氧代戊基氨基)丁基)肟基乙基)hGH,NW"-(2-(O-(2-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基)肟基)乙基)hGHN""-(2-(O-(3-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙氧基羰基氨基)丙基)肟基)乙基)hGHN,-(2-(O-(2-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基)肟基)乙基)hGHN,-(2-(O-(3-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙氧基羰基氨基)丙基)肟基)乙基)hGHN5出-(2-O-(2-氧代-2-(3-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)乙基)肟基乙基)hGHNS气(2-O-(2-氧代-2-(3-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)乙基)肟基乙基)hGH，NW-(2-0-(4-(5-(3-(co-(3-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙氧基)丙氧基)聚氧乙烯基氧基)丙基氨基)-l,5-二氧代戊基氨基)丁基)肟基乙基)hGH,N^-(2-(O-(2-(2，3-二(mPEG(30k)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基)肟基)乙基)hGH，NS'4)-(2-(O-(3-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙氧基羰基氨基)丙基)肟基)乙基)hGH，N,-(2-(O-(2-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基)肟基)乙基)hGH,NS4G-(2-(O-(3-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙氧基羰基氨基)丙基)肟基)乙基)hGH,N副、2-O-(2-氧代-2-(3-(2，3-二(mPEG(30k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)乙基)肟基乙基)hGH，N柳-(2-O-(2-氧代-2-(3-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)乙基)肟基乙基)hGH，和NS"L(2-0-(4-(5-(3-(co-(3-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙氧基)丙氧基)聚氧乙烯基氧基)丙基氨基)-l,5-二氧代戊基氨基)丁基)肟基乙基)hGH。在一种实施方案中，本发明涉及根据式[VI]的化合物0.Z—A—R—D—N'H其中PP表示通过从存在于所述多肽中的两个谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(=〇)-NH2获得的多肽基团；D表示-O-或者一个键；R表示C卜6亚烷基、-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-、-(CH2)4-CHNHCOCH3)-CO-NH-CH2-或者C5-15杂亚烷基；A表示肟键；Z表示选自以下的部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage109</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage110</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage111</formula>mPEG-0mPEG-0mPEG-0mPEG-0mPEG-0mPEG-01-10,和woO—Peg—01-10'其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG,和PEG表示分子量为1kDa~10kDa的PEG;及其药学上可接受的盐、前药或溶剂化物。在一种实施方案中，多肽为包含生长激素的谷氨酰胺残基，和PP表示通过从存在于生长激素的两个谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(=0)-NH2获得的生长激素基团。在一种实施方案中，本发明提供根据式[VIa]的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage112</formula>[Via]其中GH表示迥:a从什牡丁尸/r还王，瑰上除去-C(K))-NH2获得的生长激素基团；D表示-O-或者一个键；R表示C卜r)亚烷基、-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-(CH^-CI^NHCOCHO-CO-NH-CH^*(:5—15杂亚烷基；A表示肘键；Z表示选自以下的部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage113</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage114</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage115</formula>和<formula>formulaseeoriginaldocumentpage115</formula>其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG，和PEG表示分子量为1kDa~10kDa的PEG;及其药学上可接受的盐、前药或溶剂化物。在一种实施方案中，D表示-O-。在一种实施方案中，D表示单鍵。在一种实施方案中，R表示-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-或者-(CH2)4-CH(NHCOCH3)-CO-NH-CH2-。在一种实施方案中，R表示C卜6亚烷基。在另一实施方案中，R表示Cw亚烷基。在另一实施方案中，R表示亚曱基、亚乙基或者亚丙基u在另一实施方案中，R表示亚曱基或者亚丙基。在一种实施方案中，Z表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage116</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage117</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage118</formula>其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG，和PEG表示分子量为1kDa~10kDa的PEG。在一种实施方案中，式[VIa]中的GH表示通过从存在于包含SEQIDNo.l的氨基酸序列的hGH中的两个谷氨酰胺残基的側链上除去-C(=C))-NH2获得的基团。在一种实施方案中，式[VIa]中的GH表示通过从存在于20kDahGH中的两个谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(K))-NH2获得的基团。在一种实施方案中，式[VIa]中的GH表示通过从对应于SEQIDNo.1中位置40的位置上的谷氨酰胺残基侧链上和从对应于SEQIDNo.1中位置141的位置的从谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(K))-NH2获得的基团；或者表示通过从对应于SEQIDNo.中位置40的位置上的谷氨酰胺残基側链上除去-C(KD)-NH2获得的基团，其中对应于SEQIDNo.1中位置141的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换，和通过从不同于对应于SEQIDNo.中位置40和141的位置的位置上存在的另一种谷氨酰胺残基侧链上除去-C(K))-NH2获得的基团；或者表示通过从对应于SEQIDNo.1的位置4的位置上的谷氨酰胺残基侧链上除去-C(K))-NH2获得的基团，其中对应于SEQIDNo.1的位置40的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换，和通过从不同于对应于SEQIDNo.1中位置40和141的位置的位置上存在的其它谷氨酰胺残基侧链上除去-C(0)-NH2获得的基团；或者表示通过从不同于对应于SEQIDNo.1的位置40和141的位置的位置上的hGH中存在的两个谷氨酰胺侧链上除去-C(0)-NH2获得的基团，其中在对应于SEQIDNo.1的位置40和141的位置上存在的任何谷氨酰胺残基已经被除去或者被其它氨基酸替换。在另外的或者替代实施方案中，本发明提供了本文中所述的方法和化合物，其中在各种情况下"mPEG"被替换为烷氧基-PEG或者下式的"aPEG"化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage119</formula>其中m为大于l的整数。各个R可以为任何适宜的Cwo烷基，支链或者(对于Cwo而言)非支链的，包括但不限于，甲基、乙基、丙基和丁基。'/S疗将受益日h^化,《、溯^w7于循环生长激素的量升高的疾病或者状态。特别是，本发明提供了用于治疗以下疾病的方法生长激素缺乏(GHD);特纳综合征；Prader-Willi综合征(PWS);Noonan综合征；唐氏综合征；慢性肾疾病，青少年类风湿性关节炎；嚢性纤维化，接受HAART治疗的儿童中的HIV-感染(HIV/HALS儿童)；对于胎龄而言矮小的矮小儿童(SGA);具有出生体重极低(VLBW)但是SGA的儿童中的矮小身材；骨骼发育异常；hypochondroplasia;软骨发育不全；自发性矮小身材(ISS);成人中的GHD;长骨中或长骨的骨折，比如胫骨、腓骨、股骨、肱骨、桡骨、尺骨、锁骨、matacarpea、matatarsea和指头；海绵状多孔骨駱中的骨折或海绵状多孔骨骼的骨折，比如尾推、手掌和食品基底；肌腱或者韧带手术之后的患者，例如手、膝盖或者肩；具有或者经受distractionoteogenesis的患者；髋或者嚢盘替换、半月板修理、脊柱制动术或者假肢固定后的患者，比如在膝、髋、肩、肘、手腕或者颌中进行；已经在其中固定入骨接合材料的患者，比如钉子、螺钉和板；未连接或者连接不正的骨折患者；osteatomia之后的患者，例如来自胫骨或者第一脚趾；移植物植入之后的患者；由创伤或者关节炎引起的膝中关节软骨变性；患有特纳综合症的患者的骨质疏松症；男性骨质疏松症；慢性透析的成年患者(APCD);在APCD中营养不良相关的心血管疾病；APCD中恶病质的逆转；APCD中的癌症；APCD中的慢性抽象肺疾病；APCD中的HIV;患有APCD的老年人；APCD中的慢性肝病，APCD中的疲劳综合征；节段性回肠炎；削弱的肝功能；HIV感染的男性；短肠综合征；中心肥胖病；HIV-相关的脂肪营养不良综合征(HALS);男性不育症；主体选择性手术之后的患者；酒精/药物解毒或者神经学创伤；衰老；脆弱的老年人；骨关节炎；创伤性损伤的软骨；勃起机能障碍；纤维肉瘤；记忆疾病；抑郁症；创伤性脑损伤；外伤性脊髓损伤；蛛网膜下出血；极低出生体重；新陈代谢综合征；糖肾上腺皮质激素肌病；或者由于glucucorticoid治疗导致的儿童中的矮小身材，所述方法包含给药需要其的患者治疗有效量的根据本发明的化合物。特别是，所述化合物为式[Va]或者式[VIa]的化合物。在此使用的术语"治疗"(treatment)和"治疗"(treating)是指为了对抗某种病症的目的，比如疾病或者紊乱，而对患者的处理和照顾。该术语意图包括对患者正在遭受的给定病症的全方位治疗，比如给药活性化合物以减轻症状或者并发症，用于延迟疾病、紊乱或者病症的进程，以减轻或者緩解症状和并发症，和/或用于治愈或者消除疾病、紊乱或者病症以及用于预防病症，其中预防应当理解为为了对抗疾病、病症或者紊乱的目的对患者的处理和照顾，并且包括给药活性化合物以预防症状或者并发症的发作。优选意欲进行治疗的患者为哺乳动物，特别是人，但是还可以包括动物，比如狗、猫、牛、绵羊和猪。尽管如此，应当认识到，治疗方案和预防(预防性的)方案表示本发明的单独方面。在此使用的化合物的"治疗有效量"是指足以治愈、减轻或者部分阻止给定疾病和它的并发症的临床表现的量。适于实现该目的的量定义为"治疗有效量"。用于各种目的的有效量将取决于，例如疾病或者损伤的严重程度以及对象的体重、性别、年龄和一般状况。应当理解，确定适当的剂量可以利用常规实验，通过构造基质值和在基质中测试不同点实现，所有这些都在熟练的医师或者兽医的普通能力范围之内。由此，本发明提供用于在治疗中使用的根据本发明的化合物。在一方面，本发明提供用于促进肌肉组织、神经组织或者创伤愈合的方法；促进或者改善受伤组织的血液流动的方法；或者降低受伤组织中感染速度的方法，该方法包含给药需要其的患者有效量的治疗有效量的本发明化合物。特别是，所述化合物为式[Va]或者式[VIa]的化合物。在一种实施方案中，本发明涉及根据本发明的化合物在制备受益于生长激素血浆水平升高的疾病的药物中的用途，比如上述疾病。特别是，所述化合物为式[Va]或者式[Via]的化合物。典型的胃肠外剂量为每次给药l(T9mg/kg约100mg/kg体重的范围。典型的给药剂量为每次给药约0.0000001~约10mg/kg体重。精确剂量将取决于例如适应症、药物、给药的频率和模式、进行治疗的对象的性别、年龄和一般条件、待进行治疗的疾病或者病症的本质和严重程度、治疗的预期效果和对于所述
技术领域：
熟练技术人员而言明显的其它因素。典型的剂量给药频率为每天两次、每天一次、两天一次(bi-daily)、每周两次、每周一次或者甚至更长的剂量间隔。由于同相应的未偶联生长激素相比本发明化合物具有延长的半衰期，因此长剂量间隔(比如每周两次、每周一次或者甚至更长的剂量间隔)的剂量方案是本发明的具体实施方案。在治疗中使用多于一种药物或者伴随给药或者顺序给药，多种疾病可以得到治疗。由此，在治疗一种上述疾病的治疗方法中使用根据本发明的化合物，结合一种或者多种通常在所述疾病的治疗中使用的其他治疗活性化合物在本发明的范围内。照此类推，在制备所述疾病的药物中使用本发明化合物结合其它通常在一种上迷疾病的治疗中使用的治疗活性化合物同样也在本发明的范围内。药物组合物本发明的另一目的是提供药物组合物，其包含以10—15mg/ml~200mg/ml的浓度存在的本发明化合物，比如例如为1(T1C)mg/ml~5mg/ml，并且其中所迷组合物的pH值为2.0~10.0。所述组合物可以进一步包含緩冲体系、防腐剂(们)、强壮剂(们)、螯合剂(们)、稳定剂和表面活性剂。在本发明的一种实施方案中，药物组合物为含水组合物，即组合物包含水。所述组合物一般为液剂或者混悬剂。在本发明的另一实施方案中，药物组合物为含水液剂。术语"含水组合物"的定义为含有至少50%w/w水的组合物。同样地，术语"含水液剂"定义为含有至少50。/。w/w水的液剂，和术语"含水混悬剂"定义为含有至少50%w/w水的混悬剂。在另一实施方案中，药物组合物为冻干组合物，在使用之前医师或者患者向其中加入溶剂和/或稀释剂。在另一实施方案中，药物组合物为不需任何在先溶解即可使用的无水组合物(例如冻干或者喷雾干燥组合物)。在另一方面，本发明涉及含有本发明化合物的水溶液和缓沖液的药物组合物，其中所迷化合物以0.1-100mg/ml或者更高的浓度存在，和其中所述组合物的pH值为约2.0~约10.0。在本发明的另一实施方案中，组合物的pH值选自下列2.0,2.1,2.2,2.3,2.4,2.5,2.6,2.7,2,8，2.9,3.0,3.1,3.2,3.3,3.4,3.5,3.6,3.7,3.8,3,9,4,0,4.1,4.2,4.3,4.4,4.5,4.6,4.7,4.8,4.9,5.0,5.1,5.2,5.3,5.4,5.5,5.6,5.7,5.8,5.9,6.0,6.1,6.2，6.3,6.4,6.5,6.6,6.7,6.8,6.9,7.0,7.1,7.2,7.3,7.4,7.5,7.6,7.7,7.8,7.9,8.0,8.1,8.2,8.3,8.4,8.5,8.6,8.7,8.8,8.9,9,0'9.1,9,2,9,3,9.4,9,5,9.6,9.7,9.8,9.9，和10.0。在本发明的另一实施方案中，緩沖液选自乙酸钠、碳酸钠、柠檬酸盐、甘氨酰替甘氨酸(glycylglycine),组氨酸、甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠和三(羟曱基)-氨基曱烷、二甘氨酸、三甘氨酸、苹果酸、琥珀酸盐、马来酸、富马酸、酒石酸、天冬氨酸或者其混合物.这些具体緩冲液的每一种构成本发明的另一实施方案。在本发明的另一实施方案中，组合物进一步包含药学上可接受的防腐剂。在本发明的另一实施方案中，防腐刑选自笨酚、邻甲酚、间曱酚、对甲酚、对羟基笨曱酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、2-苯氧基乙醇、对羟基笨甲酸丁酯、2-笨基乙醇、千醇、氯代丁醇和硫代笨甲酚、溴硝丙二醇、笨甲酸、咪唑烷脲、双氯笨双胍已烷、脱氬醋酸钠、氯曱酚、对羟苯甲酸乙酯、氯化节乙氧铵、chlorphenesine(3p-氯苯氧基丙烷-1,2-二醇)或者其混合物。在本发明的另一实施方案中，防腐剂以0.1mg/ml~20mg/ml的浓度存在。在本发明的另一实施方案中，防腐剂以0.1mg/ml~5mg/ml的浓度存在。在本发明的另一实施方案中，防腐剂以5mg/ml-10mg/ml的浓度存在。在本发明的另一实施方案中，防腐剂以10mg/ml~20mg/ml的浓度存在。这些具体防腐剂的每一种构成本发明的另一实施方案。防腐剂在药物组合物中的使用是本领域熟练技术人员所熟知的。为了方j更起见，在此引用Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,20thedition,2000。在本发明的另一实施方案中，组合物进一步包含等渗试剂。在本发明的另一实施方案中，等渗试剂选自盐(例如氯化钠)、糖或者糖醇、氨基酸(例如L-甘氨酸、L-组氨酸、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、苏氨酸)、醛醇(例如甘油、1,2-丙二醇(亚丙基二醇)、1,3-丙二醇、1,3-丁二醇)、聚乙二醇(例如PEG400)或者其混合物。可以使用任何糖，比如单糖、二糖或者多糖，或者水溶性的葡聚糖，包括例如果糖、葡糖、甘露糖、山梨糖、木糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、右旋糖酐、出芽短梗孢糖、糊精、环糊精、可溶性淀粉、羟乙基淀粉和羧甲基纤维素-Na。在一种实施方案中，糖添加剂为蔗糖。糖醇的定义为具有至少一个-OH基团的CrC8烃类，并且包括例如甘露醇、山梨醇、肌醇、半乳糖醇、卫矛醇、木糖醇和阿糖醇。在一种实施方案中，糖醇添加剂为甘露醇。上述的糖或者糖醇可以单独或者组合使用。对于使用的量没有固定限制，只要糖或者糖醇可溶于液体制剂中并且不会不利地影响利用本发明方法获得的稳定效果即可。在一种实施方案中，糖或者糖醇的浓度为约lmg/ml-约150mg/ml。在本发明的另一实施方案中，等渗试剂以1mg/ml~50mg/ml的浓度存在。在本发明的另一实施方案中，等渗试剂以1mg/m卜7mg/ml的浓度存在。在本发明的另一实施方案中，等渗试剂以8mg/ml~24mg/ml的浓度存在。在本发明的另一实施方案中，.等渗试削以25mg/ml~50mg/ml的浓度存在。这些具体等渗试剂的每一种构成本发明的另一实施方案。等渗试剂在药物组合物中的使用是本领域熟练技术人员所熟知的。为了方便起见，在此引用Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,20thedition,2000。在本发明的另一实施方案中，组合物进一步包含螯合剂。在本发明的另一实施方案中，螯合剂选自乙二胺四乙酸(EDTA)、柠檬酸和天冬氨酸的盐及其混合物。在本发明的另一实施方案中，螯合剂以0.1mg/ml~5mg/ml的浓度存在。在本发明的另一实施方案中，螯合剂以0.1mg/ml~2mg/ml的浓度存在。在本发明的另一实施方案中，螯合剂以2mg/ml~5mg/ml的浓度存在。这些具体螯合剂的每一种构成本发明的另一实施方案。螯合剂在药物组合物中的使用是本领域熟练技术人员所熟知的。为了方便起见，在此引用Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,20thedition,2000。在本发明的另一实施方案中，组合物进一步包含稳定剂。稳定剂在药物组合物中的使用是本领域熟练技术人员所熟知的。为了方便起见，在jt匕引用Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,20thedition,2000。更特别地，本发明的组合物为稳定的液体药物组合物，它的治疗活性组分包括在液体药物组合物存储期间可能表现出团聚体形成作用的蛋白质u术语"团聚体(aggregate)形成作用"是指导致低聚物形成的蛋白质分子之间的物理相互作用，其可能仍然是可溶的，或者从溶液中沉淀出大的可见的团聚体。"存储期间"是指制备得到的液体药物组合物或组合物没有立即给药至对象。相反地，在制备之后，为了存储将其包装成或者液体形式、冻干状态或者后来重构成液体形式或者其它适用于给药至对象的其它形式的无水形式。"无水形式"是指通过冷冻干燥(即，冻干；参见，例如，Will訓s和PollK1984XTParenteralSci.Technol.38:48-59)、喷雾干燥(参见Masters(1991)inSpray-DryingHandbook(5thed;LongmanScientificandTechnical,Essez,U.K.),pp.491-676;Broadhead等人(1992)DrugDevel.Ind.Pharm.18:1169-1206;和Mumenthaler等人(1994)Pharm.Res.11:12-20)或者风干(Carpenter和C隨e(1988)Cryobiology25:459-470;和Roser(1991)Biopharm.4:47-53)对液体药物组合物或组合物进行干燥。在液体药物组合物的存储期间蛋白质的团聚体形成作用会不利地影响该蛋白质的生物活性，导致药物组合物的治疗效能损失。此外，当使用输注系统给药含蛋白质的药物组合物时，团聚体形成作用可能导致其它问题，例如管、膜或者泵的堵塞。本发明的药物组合物可以进一步包含足以降低组合物存储期间蛋白质的团聚体形成作用的氨基酸基体的量。"氨基酸基体(base)"是指氨基酸或者氨基酸的组合，其中任何给定的氨基酸或者以其游离碱形式或者以它的盐形式存在。当使用氨基酸的组合时，所有氨基酸可以以它们的游离碱形式存在，所有的都可以以它们的盐形式存在，或者一些可以以它们的游离碱形式存在，而其它的以它们的盐形式存在。在一种实的，比如精氨酸、赖氨酸、天冬氨酸和谷氨酸。具体氨基酸(蛋氨酸、组氨酸、精氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、苏氨酸和其混合物)的任何立体异构体(即，L或者D异构体或者其混合物)或者这些立体异构体的组合或者甘氨酸或者有机碱比如但不限于咪唑都可以存在于本发明的药物组合物中，只要具体的氨基酸或者有机碱以它的游离碱形式或者它的盐形式存在即可。在一种实施方案中，使用氨基酸的L-立体异构体。在一种实施方案中，使用L-立体异构体。本发明的组合物还可以用这些氨基酸的类似物配制。"氨基酸类似物"是指在本发明液体药物组合物存储期间，51起降低蛋白质的团聚体形成作用的预期效果的天然存在的氨基酸的衍生物。适宜的精氨酸类似物包括，例如氨基胍、鸟氨酸和N-单乙基L-精氨酸，适宜的蛋氨酸类似物包括乙基蛋氨酸和丁基蛋氨酸，和适宜的半胱氨酸类似物包括S-甲基-L-半胱氨酸。如同其它氨基酸一样，氨基酸类似物以它们的游离碱形式或者它们的盐形式结合到组合物中。在本发明的另一实施方案中，氨基酸或者氨基酸类似物以足以预防或者延迟蛋白质的团聚作用的浓度使用。在本发明的另一实施方案中，当起治疗剂作用的蛋白质是包含至少一种对所述氧化敏感的蛋氨酸残基的蛋白质时，可以加入蛋氨酸(或者其它含硫(sulphuric)氨基酸或者氨基酸类似物)以抑制蛋氨酸残基氧化为蛋氨酸亚砜。"抑制"是指随时间产生最低的蛋氨酸氧化物种的累积。抑制蛋氨酸氧化导致蛋白质以其更适当的分子形式得到更大保持。可以使用蛋氨酸的任何立体异构体(L或者D异构体)或者其任何组合。加入的量应当是这样的量，其足以抑制氧化蛋氨酸残基，从而使得蛋氨酸亚砜的量是管理机构可以接受的量。一般地，这意味着组合物含有不多于约10%~约30Q/。蛋氨酸亚砜。通常，这可以通过加入蛋氨酸，从而使得加入到蛋氨酸残基中的蛋氨酸比例为约1:1~约1000:1,比如10:1-约100:1得到实现。在本发明的另一实施方案中，组合物进一步包含稳定剂，其选自高分子量聚合物或低分子化合物。在本发明的另一实施方案中，稳定剂选自聚乙二醇(例如PEG3350)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮、羧基/羟基纤维素或者其衍生物(例如HPC、HPC-SL、HPC-L和HPMC)、环糊精、含硫物质(比如单硫代甘油、巯基乙酸和2-甲基疏代乙醇)和不同的盐(例如氯化钠)。这些具体稳定剂的每一种构成本发明的另一实施方案。药物组合物还可以含有另外的稳定剂，其进一步增强其中治疗活性蛋白质的稳定性。本发明特别感兴趣的稳定剂包括但不限于保护蛋白质防止蛋氨酸氧化的蛋氨酸和EDTA,和防止蛋白质发生与冻融或者机械剪切相关的聚集的非离子表面活性剂。在本发明的另一实施方案中，组合物进一步包含表面活性剂。在本发明的另一实施方案中，表面活性剂选自洗涤剂、乙氧基化蓖麻油、聚乙二醇化的甘油酯、乙酰化的单酸甘油酯、脱水山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段聚合物(例如泊洛沙姆，比如Pluronic'BF68、泊洛沙姆188和407、TritonX-IOO)、聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧乙烯和聚乙烯衍生物(比如烷基化和烷氧基化的衍生物)(Tweens，例如Tween-20、Tween-40、Tween-80和Brij-35)、单酸甘油酯或者其乙氧基化衍生物、甘油二酯或者其聚氧乙烯衍生物、醇、甘油、外源凝集素和磷脂(例如磷脂酰丝氨酸、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、双磷脂酰甘油和鞘磷脂)、磷脂衍生物(例如二棕榈酰磷脂酸(phosphatideacid))和溶血磷脂(例如棕榈酰溶血性磷脂酰-L-丝氨酸，和乙醇胺、胆碱、丝氨酸或者苏氨酸的l-酰基-sn-甘油并(glycero)-3-磷酸酯)和溶血性磷脂酰的烷基、烷氧基(烷基酯)、烷氧基(烷基醚)-衍生物和磷脂酰胆碱(例如溶血磷脂酰胆碱的月桂酰和肉桂酰衍生物、二棕榈酰磷脂酰胆碱和极性头基团的变型，即胆碱类、乙醇胺类、磷脂酸、丝氨酸类、苏氨酸类、甘油、肌醇和带正电荷的DODAC、DOTMA、DCP、BISHOP、溶血性磷脂酰丝氨酸和溶血性磷脂酰苏氨酸)和甘油并磷脂(例如脑磷脂)、甘油并糖脂(例如galactopyransoide)、鞘糖脂(例如神经酰胺、神经节苷脂)、十二烷基磷酸胆碱、母鸡蛋溶血卵磷脂、梭链孢酸衍生物(例如钠tauro-dihydrofusidate等等)、C6-Cl2长链脂肪酸和其盐(例如油酸和辛酸)、酰肉碱和衍生物、赖氨酸、精氨酸或者组氨酸的]sr-酰化衍生物、或者赖氨酸或者精氨酸的侧链酰化衍生物、含有赖氨酸、精氨酸或者组氨酸以及中性或者酸性氨基酸任何组合的二肽的N"-酰化衍生物、含有中性氨基酸和两个带电荷氨基酸的任何组合的三肽的lsT-酰化衍生物、DSS(多库酯钠，CAS登记号[577-ll-7])、多库酯4丐(CAS登记号[128-49-4])、多库酯钾(CAS登记号[7491-09-0])、SDS(十二烷基硫酸钠或者月桂基疏酸钠)、辛酸钠、胆酸或者其衍生物、胆汁酸和其盐和甘氨酸或者牛磺酸结合物、熊去氧胆酸、胆酸钠、脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠、甘胆酸钠、N-十六烷基-N，N-二曱基-3-胺基(ammonio)-l-丙烷磺酸盐、阴离子型(烷基-芳基-磺酸盐)一价表面活性剂、两性离子表面活性剂(例如N-烷基-N，N-二甲基胺基-1-丙烷磺酸盐、3-胆酰胺基(cholamido)-l-丙基二曱基胺基-l-丙烷磺酸盐)、阳离子表面活性剂(季铵碱)(例如溴化十六烷基-三甲基铵、氯化十六烷基吡啶镞)、非离子表面活性剂(例如十二烷基P-D-p比喃葡糖普)、poloxamines(例如Tetronic，s)，它是由氧化丙烯和氧化乙烯顺序加成到乙二胺上衍生得到的四官能嵌段共聚物，或者表面活性剂可以选自咪唑啉衍生物，或者其混合物。这些具体表面活性剂的每一种构成本发明的另一实施方案。表面活性剂在药物组合物中的使用是本领域熟练技术人员所熟知的。为了方Y更起见，在jt匕引用Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,20thedition,2000。可能的是，其它成分也可以存在于本发明的药物组合物中。所述另外的成分可以包括润湿剂、乳化剂、抗氧化剂、膨胀剂、强壮调节剂、螯合剂、金属离子、油性赋形剂、蛋白质(例如，人血清白蛋白、明胶或者蛋白质)和两性离子(例如，氨基酸，比如甜菜碱、牛磺酸、精氨酸、甘氨酸、赖氨酸和组氨酸)。所述另外的成分当然不应当不利地影响本发明药物组合物的总体稳定性。含有本发明化合物的药物组合物可以在几个位点给药至需要所述治疗的患者，例如，在局部位点(例如，皮肤和粘膜位点)，在旁路吸收的位点(例如，在动脉、静脉、心脏中给药)，和在涉及吸收的位点(例如，在皮肤、皮下、肌肉内或者腹部给药)。根据本发明的药物组合物可以通过几种给药途径给药至需要所述治疗的患者，例如，经舌、舌下、颊、口内、口服、胃和肠内、鼻、肺(例如，通过细支气管和肺泡或者其组合)、表皮、皮肤、透皮、阴道、直肠、眼睛(例如，通过结膜)、uretal和胃肠外。本发明组合物可以以多种剂型给药，例如，为液剂、混悬剂、乳剂、微乳剂、多重乳状液、泡沫、油膏剂、糊剂、硬青剂、膏剂、片剂、包衣片剂、漱口剂、胶嚢(例如，硬明胶胶嚢和软明胶胶囊)、栓剂、直肠胶嚢、滴剂、凝胶剂、喷雾剂、粉剂、气雾剂、吸入剂、滴眼剂、眼用软膏、眼睛清洗剂、阴道栓剂、阴道环、阴道青剂、注射液、在原位转化溶液(例如在原位凝胶化、原位凝结、原位沉淀、原位结晶)、输注溶液和冲直入片。本发明的组合物可以进一步配制或者连接在(例如，通过共价、疏水和静电相互作用)药物载体、药物递送系统和增强的药物递送系统中，以进一步增强GH结合物的稳定性、提高生物利用度、提高溶解性、降低副作用、实现本领域熟练技术人员熟知的长期治疗和提高患者的顺应性或者其任何组合。载体、药物递送系统和增强的药物递送系统的实例包括但不限于聚合物(例如纤维素及其衍生物)、多糖(例如右旋糖酐及其衍生物)、淀粉及其衍生物、聚(乙烯醇)、丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯聚合物、聚乳酸和聚乙醇酸及其嵌段共聚物、聚乙二醇、载体蛋白质(例如白蛋白)、凝胶(例如，热凝胶化系统，例如本领域熟练技术人员熟知的嵌段共聚系统)、胶束、微脂粒、微球、纳米颗粒、液态结晶及其分散体、脂-水系统中本领域熟练技术人员熟知相特性的L2相及其分散体、聚合胶束、多重乳状液、自乳化、自微乳化、环糊精及其衍生物和树枝形聚合物。本发明的组合物可以用于利用例如计量剂量吸入器、干粉吸入器和雾化器肺部给药式[Va]或者式VIa]化合物的固体、半固体、粉末和溶液组合物中，所有这些设备都是本领域熟练技术人员所熟知的。本发明的组合物具体可以用于控制、緩释、延长、延迟和緩释药物递送系统的组合物中。更具体但不限于，所述组合物可以用于本领域熟练技术人员熟知的胃肠外控释和持续释放系统(两种系统都导致给药数的多倍减少)的组合物中。更优选为皮下给药的控释和持续释放系统。以下并不限制本发明的范围，有用的控释系统和组合物的实例为水凝胶、油性凝胶、液态结晶、聚合胶束、微球、纳米颗粒用于生产可用于本发明组合物的控释系统的方法包括但不限于结晶、浓缩、共结晶、沉淀、共沉淀、乳化、分散、高压均质化、胶束化、喷雾干燥、微胶嚢包裹、团聚、相分离、溶剂蒸发以生产微球、挤压和超临界流体方法。一般参见HandbookofPharmaceuticalControlledRelease(Wise,DL.,ed.MarcelDekker,NewYork,2000)和DrugandthePharmaceuticalSciencesvol.99:ProteinCompositionandDelivery(MacNally，E丄，ed.MarcelDekker，NewYork,2000)。胃肠外给药可以利用注射器通过皮下、肌内、腹膜内或者静脉内注射进行，任选为笔状注射器。另外地，胃肠外给药可以通过输液泵进行。进一步任选以鼻或者肺喷雾剂形式给药本发明化合物的可以为液剂或者混悬剂的组合物。更进一步任选，含有本发明化合物的药物组合物还可以适合于透皮给药，例如，通过非针注射或者贴片形式给药，任选离子渗透贴片或者转化粘液质，例如颊给药。术语"稳定的组合物"是指具有升高的物理稳定性、升高的化学稳定性或者升高的物理和化学稳定性的组合物。在此使用的术语蛋白质组合物的"物理稳定性"是指由于将蛋白质暴露于热-机械应力和/或使其与去稳定界面和表面(比如疏水性表面和界面)相互作用的结果，导致蛋白质形成生物学非活性和/或蛋白质的不溶性团聚体的趋势。含水蛋白质组合物的物理稳定性在将填充在适宜容器(例如筒或者管形瓶)中的组合物在不同温度下暴露于机械/物理学应力(例如振荡)各种时期之后，通过目测检查和/或浊度测定进行评价。组合物的目测检查在敏锐聚焦灯中以黑色背景进行。组合物的浊度特征通过目测评分排列浊度的程度进行，例如标度0-3(没有显示出浊度的组合物对应于目测评分0,和在日光下显示出目测浊度的组合物对应于目测评分3)。当它在日光下显示出目测浊度时，将组合物关于蛋白质团聚分类为物理不稳定。可供选择地，组合物的浊度可以通过本领域熟练技术人员熟知的简易浊度测定进行评价。含水蛋白质组合物的物理稳定性还可以通过利用蛋白质构象状态的光语试剂或者探针进行评估。优选探针为优先结合蛋白质非本质构象的小分子。蛋白质结构的小分子光谱探针的一种实例为ThioflavinT。ThioflavinT是已经广泛用于检测淀粉样纤丝的荧光染料。在纤丝存在下，还可能存在其它蛋白质构型，当连接形成纤丝蛋白质形式时，ThioflavinT在大约450nm处产生新的最大激发，和在大约482nm处产生增强的发射。未结合的ThioflavinT在这些波长下基本上无荧光。其它小分子也可以用作蛋白质结构从本质状态变为非本质状态的变化的探针。例如，"疏水贴片，，探针优先结合暴露的疏水性蛋白质贴片。疏水贴片在其本质状态下通常掩盖在蛋白质的三级结构中，但是当蛋白质开始展开或者变性时变得被暴露。这些小分子光谱探针的实例为芳香、疏水性染料，比如蒽、吖啶、菲咯啉等等。其它光谱探针为金属-氨基酸配合物，比如疏水氨基酸的钴金属配合物，比如苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸和缬氨酸等等。在此使用的术语蛋白质组合物的"化学稳定性"是指蛋白质结构的化学共价变化导致形成，同本质蛋白质结构相比，可能具有更低生物学效能和/或可能具有升高的免疫原性性能的化学降解产品。取决于天然蛋白质的类型和性质以及蛋白质暴露的环境，多种化学降解产品可以得到形成。化学降解的消除最可能无法完全避免，和蛋白质组合物的存储和使用期间，通常看到升高量的化学降解产品，如本领域熟练技术人员所熟知。大多数蛋白质易于脱酰胺，这是一种谷氨酰胺酰基或者天冬酰胺酰残基中的侧链酰胺基被水解从而形成游离羧酸的过程。其它降解途径涉及高分子量转化产物的形成，其中两个或者更多个蛋白质分子通过转酰胺基作用和/或二硫化物相互作用彼此共价结合起来，导致共价结合的二聚体、低聚物和聚合降解产品形成(StabilityofProteinPharmaceuticals,Ahern.T.J.&ManningM.C.，PlenumPress,NewYork1992)。氧化(例如蛋氨酸残基的氧化)可以被提及为化学降解的另一种变体。蛋白质组合物的化学稳定性可以通过在暴露于不同环境条件之后，在各个时间点测量化学降解产品的量进行评价(降解产品的形成通常可以受例如升高的温度促进)。各个个体降解产品的量通常可以通过取决于分子尺寸和/或电荷通过使用多种色谱法工艺(例如SEC-HPLC和/或RP-HPLC)分离降解产品得到确定。由此，由上所指出，"稳定的组合物"是指具有升高的物理稳定性、升高的化学稳定性或者升高的物理和化学稳定性的组合物。通常，在使用和存储期间(遵循建议的使用和存储条件)组合物必须是稳定的，直至达到失效期为止。在本发明的一种实施方案中，含有本发明化合物的药物组合物对于使用大于6周，和对于存储大于3年是稳定的。在本发明的另一实施方案中，含有本发明化合物的药物组合物对于使用大于4周，和对于存储大于3年是稳定的。在本发明的另一实施方案中，含有本发明化合物的药物组合物对于使用大于4周，和对于存储大于两年是稳定的。在本发明的另一实施方案中，含有本发明化合物的药物组合物对于使用大于2周，和对于存储大于两年是稳定的。以下是实施方案的编号列表，不应当将其视为对本发明的限制实施方案l.一种将PEG共价连接到包含至少一个谷氨酰胺残基的多肽上的方法，所迷方法包含在一个或者多个步骤中使含有式[I]表示的多肽的所述谷氨酰胺残基其中PP表示通过从存在于多肽中的谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(=0)-NH2获得的多肽基团，与式[II]的含氮亲核试剂其中D表示-O-或者单键；R表示C].6亚烷基、-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CHr、-(CH2)4-CH(NHCOCH3)-CO-NH-CH2-或者C5.i5杂亚烷基；X表示-0-NH2、醛、酮，或者通过进一步反应可以转化为-0-NH2、醛或者酮的潜在基团；在转谷氨酰胺酶存在下反应，从而形成式[III]的氨基转移化的多肽H2N-D-R-X[II]<formula>formulaseeoriginaldocumentpage132</formula>[III]任选地，如果X为潜在基团，将所述潜在基团转化为-0-NH2、醛或者酮，所述氨基转移化的多肽进一步与式[IV]的第二化合物反应<formula>formulaseeoriginaldocumentpage132</formula>[IV]其中Y,如果X表示醛、酮，或者通过进一步反应可以转化为醛或者酮的潜在基团，表示-0-NH2;或者，如果X表示-0-NH2，或者通过进一步反应可以转化为-0-NH2的潜在基团，表示^或者酮；和Z表示选自以下的部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage132</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage133</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage134</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage135</formula>其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG，和PEG表示分子量为1kDa~10kDa的PEG;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage135</formula>，那么PEG为10kDaPEG,从而形成式[V]的PEG化的多肽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage135</formula>其中A表示肟键；或者其任何药学上可接受的盐、前药或溶剂化物。实施方案2.根据实施方案1的方法，其中D表示-O-。实施方案3.根据实施方案1的方法，其中D表示单键。实施方案4.根据实施方案-3任一的方法，其中R表示-(012)4-0^(则2)《0-丽-(^2-或者-(€^2)4^^,(:00^)-(:0-卯-(^2-。实施方案5.根据实施方案1~3任一项的方法，其中R表示C,-6亚烷基。实施方案6.根据实施方案5的方法，其中R表示d.3亚垸基。实施方案7.根据实施方案6的方法，其中R表示亚曱基或者亚丙基。实施方案8.根据实施方案17任一项的方法，其中Z表示a<formula>formulaseeoriginaldocumentpage135</formula>条件是如果Z为H<formula>formulaseeoriginaldocumentpage136</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage137</formula>mPEG-0mPEG-0OmPEGmPEG-0mPEG0mPEG-0mPEG-,或者"。0—Peg-O^^其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG:和PEG表示分子量为1kDa~lOkDa的PEG;OmPEG条件是如果Z为22-5,那么PEG为10kDaPEG,实施方案9.根据实施方案1~8任一项的方法，其中Y表示-0-NH2和X表示醛或者可以进一步反应形成醛的潜在基团。实施方案IO.根据实施方案1~8任一项的方法，其中Y表示-0-NH2和X表示酮或者可以进一步反应形成酮的潜在基团。实施方案ll.根据实施方案9或者实施方案10的方法，其中式[IV]化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage138</formula>表示选自以下的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage139</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage140</formula>其中，除非另有说明，mPEG是指分子量为10kDa、20kDa或者30kDa的mPEG，和PEG是指分子量为2kDa~5kDa的PEG。实施方案12.根据实施方案18任一项的方法，其中Y表示醛和X表示-0-NH2或者通过进一步反应可以转化为-0-NH2的潜在基团。实施方案13.根据实施方案12的方法，其中式[IV]化合物Y-Z表示选自以下的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage141</formula>,和<formula>formulaseeoriginaldocumentpage141</formula>其中，除非另有说明，mPEG是指分子量为10kDa、20kDa或者30kDa的mPEG，和PEG是指分子量为2kDa~5kDa的PEG。实施方案14.根据实施方案18任一项的方法，其中Y表示酮和X表示-0-NH2或者通过进一步反应可以转化为-0-NH2的潜在基团。实施方案15.根据实施方案]4的方法，其中式[IV]化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage142</formula>表示选自以下的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage142</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage143</formula>其中，除非另有说明，mPEG是指分子量为10kDa、20kDa或者30kDa的mPEG，和PEG是指分子量为2kDa~5kDa的PEG。实施方案16.根据实施方案1~8任一项的方法，其中式[II]化合物H2N-D-R-X[II]表示1,3-二氨基-2-丙醇，和Y表示-0-NH2。实施方案17.根椐实施方案1-8任一项的方法，其中式[n]化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage143</formula>表示1,3-二氨基氧基丙烷，和Y表示醛。实施方案8.—种改变生长激素的药理学性能的方法，所述方法包括根椐实施方案1-17任一项的方法将PEG共价连接在所迷生长激素上。实施方案19.根据实施方案1~18任一项的方法，其中所述多肽为包含生长激素的谷氨酰胺残基，和PP表示通过从存在于生长激素中的谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(-0)-NH2获得的生长激素基团。实施方案20.根据实施方案19的方法，其中所迷包含生长激素的谷氨酰胺残基表示人生长激素。实施方案21.根据实施方案20的方法，其中所述包含生长激素的谷氨酰胺残基表示a)包含SEQIDNo.l的氨基酸序列的hGH,b)20kDahGH，c)其中对应于SEQIDNo.1中位置40的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换的hGH,d)其中对应于SEQIDNo.1中位置141的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换的hGH，或e)其中对应于SEQIDNo.1中位置40的位置上的谷氨酰胺残基和对应于SEQIDNo.1中位置141的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换的hGH，和其中谷氨酰胺残基存在于生长激素中的另一位置上u实施方案22.根据实施方案21的方法，其中所述生长激素表示hGH。实施方案23.根据式[V]的化合物其中PP表示ii-C(=〇)-NH2获得的多肽基团；D表示-O-或者一个键；R表示亚烷基、-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-、(NHCOCH3)-CO-NH-CH2-或者C5.,5杂亚烷基；A表示將键；Z表示选自以下的部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage144</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage145</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage146</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage147</formula>,和其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG,和PEG表示分子量为1kDa~10kDa的PEG;及其药学上可接受的盐、前药或溶剂化物；条件是如果Z为那么mPEG为10kDamPEG。实施方案24.根据实施方案23的化合物，其中D表示-O-。实施方案25.根据实施方案23的化合物，其中D表示单键。实施方案26.根据实施方案23-25任一项的化合物，其中R表示-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-或者-(CH2)4-CH(NHCOCH3)-CO-NH-CH2-。实施方案27.根据实施方案23~25任一项的化合物，其中R表示C卜6亚烷基。实施方案28.根据实施方案27的化合物，其中R表示Cw亚烷基。实施方案29.根据实施方案28的化合物，其中R表示亚曱基或者亚丙基。实施方案30.根据实施方案2329任一项的化合物，其中Z表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage148</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage149</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage150</formula>其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG,和PEG表示分子量为1kDa~10kDa的PEG;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage150</formula>条件是如果Z为HH22-5,那么PEG为10kDaPEG。实施方案31.根据实施方案23-30任一项的化合物，其中所述多肽为包含生长激素的谷氨酰胺残基，和PP表示通过从存在于生长激素中的谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(K))-NH2获得的生长激素基团。实施方案32.根据实施方案31的化合物，其中GH表示通过从存在于包含SEQIDNo.l的氨基酸序列的hGH中的谷氨酰胺残基侧链上除去-C(-0)-NH2获得的基团。实施方案33.根据实施方案31的化合物，其中GH表示通过从存在于20kDahGH中的谷氨酰胺残基侧链上除去-C一0)-NH2获得的基团,，实施方案34.根据实施方案31的化合物，其中GH表示通过从以下物质的侧链上除去-C(=〇)-NH2获得的基团a)在对应于SEQIDNo.1的位置40的位置上的谷氨酰胺残基；或者b)在对应于SEQIDNo.1的位置141的位置上的谷氨酰胺残基；或者GH表示通过从对应于SEQIDNo.1的位置40的位置上的谷氨酰胺侧链上除去-C(-0)-NH2获得的基团，其中在对应于SEQIDNo.1的位置141的位置上存在的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换；或者GH表示通过从对应于SEQIDNo.的位置141的位置上的谷氨酰胺残基侧链上除去-C(K))-NH2获得的基团，其中在对应于SEQIDNo.1的位置40的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换；或者GH表示通过从不同于对应于SEQIDNo.1的位置40的位置和不同于对应于SEQIDNo.1的位置141的位置的位置上存在的谷氨酰胺侧链上除去-C(-0)-NH2获得的基团，其中在对应于SEQIDNo.的位置40的位置上的谷氨酰胺残基和对应于SEQIDNo.1的位置141的位置上的谷氨酰胺残基各自已经被除去或者被另一氨基酸替换。实施方案35.根据实施方案23的化合物，其选自N"4,-2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)氨基丁基)-肟基)乙基hGH;NS",-2-(O-(4-(4-(mPEG(10k)基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NW""()-2-(O-(4-(3-(mPEG(10k)基氧基)丙酰基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS""气2-(O-(4-(4-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙小基氧基)丁酰基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH，NW柳-2-(O-(4-(5-(mPEG(10k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NW"()-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2管基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基}氨基氧基)丙-1-基氧基hGH;N814/40-3-((4-(l，3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基}-氨基氧基)丙氧基hGH;N8141/40-3-((4-(mPEG(10k)基氧基)亚丁基)氡基氧基)丙氧基hGH;N8141/40-3-((4-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氣基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N8141/40-3-((3-(mPEG(10k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH,NSi4i/气2一(o《2-(3一(2,3-二(mpEGook)基氧基)丙氧基)丙基氨基)國2一氧代乙基)肟基)乙基hGH;N8141/40-3-((4-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N8141/40-2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)氨基丁基)-肟基)乙基hGH;N8141/40-2-(O-(4-(3-(mPEG(20k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH,N8141/40-2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;N8141/40-2-(O-(4-(5-(mPEG(20k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N8141/40-3-({4-(2-(2-(2-(2-(4-(1,3-二(11^￡0(2010基氨基羰氧基)丙-2-基氣基)丁酰氨基)乙氡基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙-1-基氧基hGH;N8141/40-3-((4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基)-氨基氧基)丙氧基hGH;N8141/40-3-((4-(mPEG(20k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N8141/403-((4-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N8141/40-3-((3-(mPEG(20k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N8141/40-('-2-(0-(2-(3-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH,N8141/40-3-(H-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N8141/40-2-(O-(4"4-(l,3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)氨基丁基)-肟基)乙基hGH;N5"固-2-(O-(4-(3-(mPEG(30k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N副,-2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;N副固-2-(O-(4-。-(mPEG(30k)基氧基-5-氧代戊酰基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;Nsm/气3^4-(2-(2-(2-(2乂4-o，3.二(mpEG(30k)基氨基羰氧基)丙-^基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙-1-基氧基hGH;NW"，3-((4-(l，3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基J-氨基氧基)丙氧基hGH;NSW湖-3-((4-(mPEG(30k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS"气3-((4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N^固-3-((3-(mPEG(30k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS川气2-(o-(2一(3-(2,3.二(mpEG(30k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)^氧代乙基)肟基)乙基hGH;NS",-3-((4-(2，3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS",-3-((4-((2,3-二(mPEG(20k)基)丙-l-基氧基)PEG基氧基)亚丁基}氨基氧基)丙氧基hGH;N5'4'柳-2-((4-(4-((2,3-二(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁酰氨基)丁基)肟基)乙基hGH;NM"-2-(O-(4"4-(l，3-二(mPEG(10k)基氨基锬氧基)丙-2-基氧基)丁酰基卜氨基丁基)肟基)乙基hGH;NW"-2-(O-(4-(4-(mPEG(10k)基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS"'-2-(O-(4-(3-(mPEG(10k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N""-2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS出-2-(O-(4-(5-(mPEG(10k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NW"-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙-l-基氧基hGH;>^141-3-({4-(1,3-二(1^￡0(1010基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基}-氨基氧基)丙氧基hGH;NM"-3-((4-(mPEG(10k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N""-3-((4-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基〉氨基氧基)丙氧基hGH，N"4'-3-((3-(mPEG(10k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH,N""-2-(O-(2-(3-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;N6'"-3-((4-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基〉氨基氧基)丙氧基hGH;NW-2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)-minobutyl)肟基)乙基hGH;N^L2-(O-(4-(3-(mPEG(20k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH,NS'"-2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N副'-2-(O-(4-(5-(mPEG(20k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH,N"4'-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基}氨基氧基)丙-卜基氧基hGH;N"4'-3-((4-(l，3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基〉-氨基氧基)丙氧基hGH;N^-3-((4-(mPEG(20k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N^-3-((4-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙小基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N""-3-((3-(mPEG(20k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS出-2-(O-(2-(3-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;NS出-3-((4-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS"'-2-(O-(4-(4-(l，3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)-氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS""-2-(O-(4-(3-(mPEG(30k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NW-2-(O-(4-(4-(2，3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NM"-2-(O-(4-。-(mPEG(30k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N"4'-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙-l-基氧基hGH;NS'"-3-((4-(l,3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基卜氨基氧基)丙氧基hGH;N副^3-((4-(mPEG(30k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NW-3-((4-(2，3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS^-3-((3-(mPEG(30k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS'"-2-(O-(2-(3-(2，3-二(mPEG(30k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;N""-3-((4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N""-3-((4-K2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基)PEG基氧基}亚丁基}氨基氧基)丙氧基hGH;N""-2-((4-(4-((2，3-二(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁酰氨基)丁基)肟基)乙基hGH,N柳-2-(O-(4-(4-(l，3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)-氨基丁基)肟基)乙基hGH;N練'-2-(O-(4-(4-(mPEG(10k)基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS4C)-2-(0-(4-{3-(mPEG(10k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肝基)乙基hGH;N5气2-(O-(4-(4-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS40-2-(O-(4-。-(mPEG(10k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N,-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l，3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基}氨基氧基)丙小基氧基hGH;1^54()-3-({4-(1,3-二(11^50(1010基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基}-氨基氧基)丙氧基hGH;NS4G-3-({4-(mPEG(1Ok)基氧基)亚丁基}氨基氧基)丙氧基hGH;NS4('-3-((4-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙小基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS4()-3-({3-(mPEG(1Ok)基氧基)亚丙基}氨基氧基)丙氧基hGH;NS气2-(O-(2-(3-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH，N柳-3-((4-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS40-2-(O-(4-{4-(1，3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基}-氨基丁基)肟基)乙基hGH;N柳-2-(O-(4-(3-(mPEG(20k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肝基)乙基hGH;NS4('-2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;N綠)-2-(O-(4"5-(mPEG(20k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)朽基)乙基hGH;N糾)-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙-l-基氧基hGH;N"()-3-((4-(l，3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基卜氨基氧基)丙氧基hGH;N柳-H(4-(mPEG(20k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N柳-3-((4-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS化-3-((3-(mPEG(20k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N,-2-(O-(2-(3-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)將基)乙基hGH;N柳-3-((4-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N柳-2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基卜氨基丁基)肟基)乙基hGH;N柳-2-(O-(4-(3-(mPEG(30k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N,-2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙--基氧基)丁酰基〉氨基丁基)將基)乙基hGH;N柳-2-(O-(4-^-(mPEG(30k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS4()-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l，3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙小基氧基hGH;N,-3-((4-(l,3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基卜氨基氧基)丙氧基hGH;N柳-3-((4-(mPEG(30k)基氧基)亚丁基}氨基氧基)丙氧基hGH;N64Q-3-((4-(2，3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基}氨基氧基)丙氧基hGH;N,-3-((3-(mPEG(30k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N柳-2-(O-(2-(3-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;N柳-3-((4-(2，3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N柳-3-((4-K2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基)PEG基氧基！亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N,-2-((4-(4-((2,3-二(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁酰氨基)丁基)肟基)乙基hGH;Ne'"-[2-O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20K)氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH;N""-[2-(O-(4-(4-(mPEG(30K)氧基)丁酰氨基)-丁基)氧基亚氨基)-乙基〗hGH;Nf'"-(3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(20K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基)hGH;Ne'"-[2-(2-(2，3-(mPEG(20K)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基肟基)乙基]hGH;N""-[2-(O-(2-(2-(mPEG(40K)基氧基)乙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基]hGH;N""-[2-(3-(4-((l,3-二(mPEG(30K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基亚氨基)乙基]hGH;Ne"i柳-[2-O-(4-(4-(l，3-二(mPEG(20K)氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH;Nei4i/气[2一(o-^(4《mpEG(30K)氧基)丁酰氨基)-丁基)氧基亚氨基》乙基]hGH,Nei4i/，(3-((4乂2-(2《2-(^(4《,3-二(mpEG(20K)基氨基羰氧基)i丙氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基)hGH;Ne"冊-[2-(2-(2,3-(mPEG(20K)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基肟基)乙基]hGH;Nr""气[2-(O(2-(2-(mPEG(40K)基氧基)乙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基]hGH;N"4,-[2-(3-(4-((l，3-二(mPEG(30K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基亚氨基)乙基]hGH;N':40-[2-O-(4-(4-(1，3-二(mPEG(20K)氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH;N"()-[2-(O-(4-(4-(mPEG(30K)氧基)丁酰氨基)-丁基)氧基亚氨基)-乙基]hGH;1N,-(3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l，3-二(mPEG(20K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基)hGH;Ne，[2-(2-(2,3-(mPEG(20K)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基肟基)乙基]hGH;Ne化-[2-(O-(2-(2-(mPEG(40K)基氧基)乙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基〗hGH;Nf4G-[2-(3-(4-((l,3-二(mPEG(30K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)亚丁基)-氨基氧基)丙氧基亚氨基)乙基]hGH;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage159</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage160</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage161</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage162</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage163</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage164</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage165</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage166</formula>其中PP表示通过从存在于所述多肽中的两个谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(=0)-NH2获得的多肽基团；D表示-O-或者一个键；R表示C卜r'亚烷基、-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-、-(CH2)4-CH(NHCOCH3)-CO-NH-CHr或者C5—15杂亚烷基；A表示肟键；Z表示选自以下的部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage166</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage167</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage168</formula>条件是如果Z为那么mPEG为10kDa<formula>formulaseeoriginaldocumentpage169</formula>实施方案37.根据实施方案36的化合物，其中D表示-O-。实施方案38.根据实施方案36的化合物，其中D表示单键。实施方案39.根据实施方案36~38任一项的化合物，其中R表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage169</formula>实施方案40.根据实施方案36~38任一项的化合物，其中R表示6亚烷基。实施方案41.根据实施方案40的化合物，R表示C!-3亚烷基。实施方案42.根据实施方案41的化合物，其中R表示亚曱基或者亚丙基。实施方案43.实施方案36~42任一项的化合物，其中Z表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage169</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage170</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage171</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage172</formula>其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG,和PEG表示分子量为1kDa~10kDa的PEG;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage172</formula>条件是如果Z为HH22-5,那么PEG为10kDaPEG。实施方案44.根据实施方案36~43任一项的化合物，其中多肽为包含生长激素的谷氨酰胺残基，和PP表示通过从存在于生长激素中的两个谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(-0)-NH2获得的生长激素基团。实施方案45.根据实施方案44的化合物，其中GH表示通过从存在于包含SEQIDNo.1的氨基酸序列的hGH中的两个谷氨酰胺残基侧链上除去-C(-0)-NH2获得的基团。实施方案46.根据实施方案44的化合物，其中GH表示通过从存在于20kDahGH中的两个谷氨酰胺残基侧链上除去-C(K))-NH2获得的基团。实施方案47.根椐实施方案44的化合物，其中GH表示通过从对应于SEQIDNo.1的位置40的位置上的谷氨酰胺侧链上和从对应于SEQIDNo.1的位置141的位置上的谷氨酰胺残基側链上除去-C(K))-NH2获得的基团；或者GH表示通过从对应于SEQIDNo.1的位置40的位置上的谷氨酰胺残基侧链上除去-C(K))-NH2获得的基团，其中对应于SEQIDNo.1的位置Ml的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换，和通过从不同于对应于SEQIDNo.上位置40和141的位置的位置上存在的其它谷氨酰胺残基侧链上除去-C(-0)-NH2获得的基团；或者GH表示通过从对应于SEQIDNo.1的位置141的位置上的谷氨酰胺残基侧链上除去-C(K))-NH2获得的基团，其中对应于SEQIDNo.1的位置40的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换，和通过从不同于对应于SEQIDNo.1上位置40和141的位置的位置上存在的其它谷氨酰胺残基側链上除去-C(-0)-NH2获得的基团；或者GH表示通过从不同于对应于SEQIDNo.1的位置40和141的位置的位置上的hGH中存在的两个谷氨酰胺侧链上除去-C(-0)-NH2荻得的基团，其中在对应于SEQIDNo.1的位置40和141的位置上存在的任何谷氨酰胺残基已经被除去或者被其它氨基酸替换。实施方案48.人生长激素，其共价连接在包含PEG(并且特别是mPEG)的部分上，其中所迷含PEG部分连接在谷氨酰胺残基40的侧链上，连接在谷氨酰胺141的侧链上或者连接在人生长激素谷氨酰胺40和谷氨酰胺141的侧链上，条件是它不是1^'|41-[2-(4-(4-(1^￡0(2010基丁酰基)-氨基-丁氧基亚氨基)-乙基]hGH,N""-[2-(l-(十六烷酰基)哌啶-4-基)乙氧基亚氨基)-乙基]hGH,N""(2-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)丁氧基亚氨基)乙基)hGH,N'」"(2-(4-(2，6-二(mPEG(20k)基氧基羰基氨基)己酰基氨基)丁氧基亚氨基)乙基)hGH,N。l41(2-(4-(4-(mPEG(30k)基氧基)丁酰氨基)丁氧基亚氨基)乙基)hGH,]sr'"(2-(4-(4-(mPEG(20k)基氧基)丁酰氨基)丁氧基亚氨基)乙基)hGH,或者Nf;141(2-(4-(3-(mPEG(30k)基氧基)丙酰基氨基)丁氧基亚氨基)乙基)hGH。实施方案49.通过利用根据实施方案1-22任一项的方法获得的化合物。实施方案50.通过利用根据实施方案1-22任一项的方法可获得的化合物。实施方案51.通过利用根据实施方案19-22任一项的方法获得的化合物。实施方案52.通过利用根据实施方案19-22任一项的方法可获得的化合物。实施方案53.根据实施方案31~35任一项、实施方案44~52任一项、实施方案51或者实施方案52的化合物，其用于治疗。实施方案54.—种药物组合物，其包含根据实施方案31~35任一项、实施方案44~52任一项、实施方案51或者实施方案52的化合物。实施方案55.—种用于治疗以下疾病的方法，生长激素缺乏(GHD);特纳综合征；Prader-Willi综合征(PWS);Noonan综合征；唐氏综合征；慢性肾疾病，青少年类风湿性关节炎；嚢性纤维化，接受HAART治疗的儿童中的HIV-感染(HIV/HALS儿童)；对于胎龄而言矮小的矮小儿童(SGA);具有出生体重极低(VLBW)但是SGA的儿童中的矮小身材；骨骼发育异常；hypochondroplasia;软骨发育不全；自发性矮小身材(ISS);成人中的GHD;长骨中或长骨的骨折，比如胫骨、腓骨、股骨、肱骨、桡骨、尺骨、锁骨、matacarpea、matatarsea和指头；海绵状多孔骨骼中的骨折或海绵状多孔骨骼的骨折，比如尾推、手掌和食品基底；肌腱或者韧带手术之后的患者，例如手、膝或者肩；具有或者经受distractionoteogenesis的患者；髋或者囊盘替换、半月板修理、脊柱制动术或者假肢固定后的患者，比如在膝、髋、肩、肘、手腕或者颌中进行；已经在其中固定入骨接合材料的患者，比如钉子、螺钉和板；未连接或者连接不正的骨折患者；osteatomia之后的患者，例如来自胫骨或者第一脚趾；移植物植入之后的患者；由创伤或者关节炎引起的膝中关节软骨变性；患有特納综合征的患者的骨质疏松症；男性骨质疏松症；l曼性透析的成年患者(APCD);在APCD中营养不良相关的心血管疾病；APCD中恶病质的逆转；APCD中的癌症；APCD中的慢性抽象肺疾病；APCD中的HIV;患有APCD的老年人；APCD中的慢性肝病，APCD中的疲劳综合征；节段性回肠炎；削弱的肝功能；HIV感染的男性；短肠综合征；中心肥胖病；HIV-相关的脂肪营养不良综合征(HALS);男性不育症；主体选择性手术之后的患者；酒精/药物解毒或者神经学创伤；衰老；脆弱的老年人；骨关节炎；创伤性损伤的软骨；勃起功能障碍；纤维肉瘤；记忆疾病；抑郁症；创伤性脑损伤；蛛网膜下出血；极低出生体重；新陈代谢综合征；糖肾上腺皮质激素肌病；由于glucucorticoid治疗导致的儿童中的矮小身材；为了促进肌肉组织、神经组织或者创伤的愈合；促进或者改进受损伤组织的血液流动；或者降低受损伤组织中的感染率，所迷方法包含给药需要其的患者有效量的治疗有效量的根椐实施方案31-35任一项、实施方案44-52任一项、实施方案51或者实施方案52的化合物或者根据实施方案54的药物组合物。实施方案56.根据实施方案31~35任一项、实施方案44~52任一项、实施方案51或者实施方案52的化合物在制备用于治疗以下疾病的药物中的用途生长激素缺乏(GHD);特纳综合征；Prader-Willi综合征(PWS);Noonan综合征；唐氏综合征；慢性肾疾病，青少年类风湿性关节炎；嚢性纤维化，接受HAART治疗的儿童中的HIV-感染(HIV/HALS儿童)；对于胎龄而言矮小的矮小儿童(SGA);具有出生体重极低(VLBW)但是SGA的儿童中的矮小身材；骨骼发育异常；hypochondroplasia;软骨发育不全；自发性矮小身材(ISS);成人中的GHD;长骨中的长骨的骨折，比如胫骨、腓骨、股骨、肱骨、桡骨、尺骨、锁骨、matacarpea、matatarsea和指头；海绵状多孔骨骼中的骨折或海绵状多孔骨骼的骨折，比如尾推、手掌和食品基底；肌腱或者韧带手术之后的患者，例如手、膝或者肩；具有或者经受distractionoteogenesis的患者；髋或者囊盘替换、半月板修理、脊柱制动术或者假肢固定后的患者，比如在膝、髋、肩、肘、手腕或者颌中进行；已经在其中固定入骨接合材料的患者，比如钉子、螺钉和板；未连接或者连接不正的骨折患者；osteatomia之后的患者，例如来自胫骨或者第一脚趾；移植物植入之后的患者；由创伤或者关节炎引起的膝中关节软骨变性；患有特纳综合征的患者的骨质疏松症；男性骨质疏松症；慢性透析的成年患者(APCD);在APCD中营养不良相关的心血管疾病；APCD中恶病质的逆转；APCD中的癌症；APCD中的慢性抽象肺疾病；APCD中的HIV;患有APCD的老年人；APCD中的慢性肝病，APCD中的疲劳综合征；节段性回肠炎；削弱的肝功能；HIV感染的男性；短肠综合征；中心肥胖病；HIV-相关的脂肪营养不良综合征(HALS);男性不育症；主体选择性手术之后的患者；酒精/药物解毒或者神经学创伤；衰老；脆弱的老年人；骨关节炎；创伤性损伤的软骨；勃起机能障碍；纤维肉瘤；记忆疾病；抑郁症；创伤性脑损伤；蛛网膜下出血；极低出生体重；新陈代谢综合征；糖肾上腺皮质激素肌病；由于glucucorticoid治疗导致的儿童中的矮小身材；促进肌肉组织、神经组织或者创伤的愈合；促进或者改进受损伤组织的血液流动；或者降低受损伤组织中的感染率。所有在此引用的参考文献，包括出版物、专利申请和专利的全部内容都在此引入本文作为参考，达到就如各参考文献单独和明确表明在此引入本文作为参考并且其全文在此阐述(到法律允许的最大程度)的同关。所有标题和小标题在本文中都仅仅是为了方便起见使用，不应当认为其以任何方式限制本发明，除非在本文中另有说明或者上下文明显矛盾，以其所有可能变体的上述元素的任意组合都包括在本发明内。在描述本发明的上下文中的术语"a，，和"an"和"the"以及类似用语应当认为包括单数和复数形式，除非在本文中另有说明或者明显与上下文矛盾。例如，除非另有说明，短语"化合物"应当理解为是指本发明或者具体描迷的方面的各种"化合物"。本文中数值范围的描述仅仅意图充当各自援引落入该范围的各个分离值的简写方法，除非在本文中另有说明，各个单独值如同在本文中单独描述一样结合到说明书中。除非另有说明，所有的在此提供的准确值是相应近似值的代表性说明(例如，所有关于具体因素或者测量提供的准确例证性数值还可以认为提供了适当时由"约"修饰的相应近似测量值。)。所有在此所述的方法都可以以任何适宜的顺序进行，除非在本文中另有说明或者与上下文明显矛盾。在此提供的任何和所有实施例或者例证性语言(例如，"比如")的使用的意图仅仅是为了更好地说明本发明，并不是对本发明范围进行限制，除非另有说明。说明书中的语言都不应当視为表示任何对本发明实施而言必不可少的元素，除非同样明确说明。专利文献在本文中的引证和合并仅仅是为了方便起见实施，并不反映对所述专利文献的有效性、专利性和/或执行性的任何观点u在本文中，关于元素或元素们使用比如"包含"、"具有"、"包括"或者"含有"的术语的本发明任何方面或方面的说明意图为"由...组成"、"基本上由...组成"或者"基本上包含"该具体元素或元素们的本发明类似方面或方面提供支持，除非另有说明或者明显与上下文矛盾(例如，在此描述为包含具体元素的组合物应当理解为还描述了由该元素组成的组合物，除非另有说明或者明显与上下文矛盾)。关于本发明该方面的基本和新颖性能提供于此。本发明在可适用法律允许的最大程度上包括本文中存在的方面和权利要求书中所述的主题的所有变型和等价物。具体实施方式实施例在实施例中使用的TGase为根据US5156956得自于链轮丝菌属mobaraenae的微生物转谷氨酰胺酶或者根据WO9606931-A1得自于链霉菌属Lydicus的微生物转谷氨酰胺酶。分析方法Maldi-Tof质语分子量使用AutoflexMaldi-Tof仪器(Bmker)进行测定。样品根据夹层法进行制备。基质1为10mga-氰基-4-羟基肉桂酸的lml丙酮溶液。基质2为10mga-氰基-4-羟基肉桂酸的lml50%乙腈水溶液的溶液。样品在garget上按照以下顺序进行制备，施加基质1,风干，施加lpl3%三氟醋酸，施加lpl样品，施加lpl基质2，风干，通过用水充溢目标板进行洗涤和最后风干。光谱使用20%激光功率和标准方法，在仪器提供的3-20kDa的范围内获得。蛋白质的定量分析蛋白质浓度通过使用UV-spectrofotometer在280nm下测量吸光度进行估计。使用的摩尔摩尔消光系数为16170M+1cm"。用量根据体积和浓度进行计算。SDS记录(page)使用NuPAGE4%-12%Bis-Trisgels(InvitrogenNP0321BOX)进行SDS聚-丙烯酰胺凝胶电泳。凝胶为银白色着色(InvitrogenLC6100)或者Coomassie着色(InvitrogenLC6065)，和其中还用碘化钡对PEG进行相关着色，如M.M.Kurfurst，Anal.Biochem.200(2)，244-248(1992)所述。RP-HPLC分析系统A.:Merck-Hitachi系统，组成为L-7400UV检测器，L-7200自动取样器和L-7100泵。使用ZorbaxSB-3004.6mmx50mm5pmC-18二氧化娃柱(AgilentTechnologies)，和在214nm下通过UV进行检测。柱用0.1%三氟醋酸/1^20平衡，和在环境溫度下，在10分钟时间内由相对于0.1%三氟醋酸^20而言为0~90%的乙腈梯度进行洗脱，流速为1ml/min。CE(毛细管电泳)分析.'毛细管电泳使用AgilentTechnologies3DCE系统(AgilentTechnologies)进行。数据获取和信号处理使用AgilentTechnologies3DCEChemStation进行。毛细管为Agilent的64.5cm(56.0cm有效长度)50,d."ExtendedLightPathCapillary"。UV检测在200nm下进行(16nmBw，Reference380nm和50nmBw)。运行电解质为磷酸盐緩冲液50mMpH7(方法A)或者磷酸盐緩冲液50mMpH2.5(方法B)。毛细管用0.1MNaOH调节3min，然后用Milli-Q水调节2min和用电解质调节3min。在每次运行之后，毛细管用milli-Q水充溢2mm，然后用磷酸充溢2mm,和用milli-Q水充溢2min。水压注射在50毫巴下进行4.0s。电压为+25kV。毛细管温度为3(TC和运^亍时间为10.5min(方法A)或者20min(方法B)。实施例1和2用于提供使用潜在的醛进行氨基转移作用的hGH的PEG化的例证实施例一还参见WO2005070468。I.hGH,人生长激素II.N^/NK"、2-羟基-3-氨基-丙基)hGHIII.Ne40/N^-(2-氧代乙基)hGHIV.Ne4()/NKl41-[2-(0-(4-(4-(mPEG基氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH实施例NW-[2-O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20000)氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH的制备(a)hGH(I)的氨基转移化给出N""-(2-羟基-3-氨基丙基)hGH(II)将hGH(I)(200mg)溶于磷酸盐緩沖液(50mM,pH8.0,14ml)中。将该溶液与溶于磷酸盐緩沖液中的1,3-二氨基丙-2-醇(4mmo1,378mg)溶液(50mM，1ml,pH8.0,在溶解1,3-二氨基-丙-2-醇之后用稀盐酸将pH值调节至8.0)混合。最后加入溶于磷酸盐緩冲液(50mM，pH8.0,1ml)的TGase(18mg-40U)溶液，并且通过加入磷酸盐緩冲液(50mM，pH8.0)将体积调节为20ml,得到1,3-二氨基丙-2-醇的浓度为0.2M。在37。C下将合并的混合物培养4小时。将温度降低至室温并且将N-乙基马来酰亚胺加入其中，至最终浓度为mM。再过l小时之后，所得混合物用10体积的tris緩沖液(50mM,pH8.5)稀释。所得混合物的CE分析表明两个主峰对应于hGH和Nel41-(2-羟基-3-氨基丙基)hGH(II)和两个次要峰对应于N「'气(2-羟基-3-氨基丙基)hGH(n)和N"",N^-二(2-羟基-3-氨基丙基)hGHu在以下纯化期间最后两种组分被除去，但是它们已经;故回收。(b)N""-(2-羟基-3-氨基丙基)hGH(II)的离子交换色谱将得自于(a)的溶液施加到用緩沖液A(50mMtris，pH8.5)预平衡的MonoQ10/100GL柱(AmershamBiosciencescat.No.17-5167-01)上。然后，以2.5ml/min的流速用在緩冲液A中0%~100%緩冲液B(50mMtris，0.2MNaCl，pH8.5)的梯度洗脱63min。基于在280nm下的UV吸收收集级分，并且对选择的级分进行Maldi-Tof分析。对根据Mald-Tof质谱给出预期mw的对应于最大峰的级分进行收集。通过CE(方法A)发现，该收集物含有比例60:40的hGH(I)和N""-(2-羟基-3-氨基-丙基)hGH(11)。描述在国际申请WO2005DK000028中的肽图mapping实马全预先证明(a)和(b)的联合方法导致在Gln-4上的选择性衍生化作用。(c)N-(4-(叔丁氧羰基氨基氧基)丁基)邻笨二曱酰亚胺的合成282.14133.15334,37向搅拌着的N-(4-溴丁基)邻苯二曱酰亚胺(18.9g，67.0mmol)、MeCN(14ml)和N-Boc-羟胺(12.7g,95.4mmol)混合物中分份加入DBU(15.0ml，101mmol)。在50°C下将所得混合物搅拌24小时。将水(300ml)和12MHC1(10ml)加入其中，并且所得产品用AcOEt提取三次。合并的提取物用盐水洗涤、进行干燥(MgS〇4)并且在减压下进行浓缩。所得油(28g)通过色谱法(140gSi02，用庚烷/AcOEt梯度洗脱)进行純化。17.9g(80%)标题化合物获得为油状物。1HNMR(DMSO-d6)51.36(s,9H)，1.50(m,2H),1.67(m,2H),3.58(t,J-7Hz,2H),3.68(t,J=7Hz,2H),7,85(m,4H),9.90(s,1H>.(d)4-(叔丁氧羰基氨基氧基)丁胺的合成。向得自于(a)的N-(4-(叔丁氧羰基氨基氧基)丁基)邻苯二甲酰胺(8.35g,25.0mmol)的EtOH(10ml)溶液中加入水合肼(20ml),并且在8(TC下将所得混合物搅拌38小时。对混合物进行浓缩，和将所得残余物与EtOH和PhMe—起蒸发。向所得残余物中加入EtOH(50ml)，和将沉淀的酞腓(phthalhydrazide)滤出并且用EtOH(50ml)洗涤。对合并的滤液进行浓缩，得到5.08g油状物。将该油状物与K2C03(10g)的水(20ml)溶液混合，和所得产品用CH2Cl2提取。干燥(MgS04)和浓缩得到2.28g(45%)为油状物的标题化合物，其无需进一步纯化即可使用。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage181</formula>氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)-丁基)羟基-胺的合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage181</formula>将(mPeg(20000)-NH-CO-O-CH2)2CH-O-(CH2)3-CO-OSu(Nektar,2Z3Y0T01,2.0g，50,ol)与4-(Boc-氨基氧基)丁胺(187mg,915pmol)的DCM(12ml)溶液混合。在室温下搅拌43h之后，将混合物滴加加入到搅拌着的Et20(200ml)中。过滤，用Et20洗涤。将产品再溶解于DCMU0ml)中，并且在Et20(200ml)中再沉淀一次。重复沉淀三次。然后，将产品溶于DCM(100ml)中和用Amberlyst15(11g;用DCM洗涤)处理5min。在过滤和浓缩之后，产品如上所述从Et20中得到沉淀u过滤和在减压下进行干燥，得到1.98g为固体的标题化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage181</formula>)氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)-丁基)-羟胺的合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage182</formula>将得自于先前反应的产品(1.0g)溶于DCM中，并且将Amberlyst15(8.0g;用DCM洗涤)加入其中。搅拌10分钟之后，对混合物进行过滤并且对滤液进行浓缩。向所得残余物中加入DCM(25ml)和TFA(25ml)。在室温下放置0.5h小时之后，对混合物进行浓缩，将所得残余物与DCM和甲笨的混合物共蒸发两次，并且在减压下将其干燥过夜。将所得残余物溶于水(15ml)中，并且使用AmiconUltm-15超滤设备(Millipore)用水洗涤两次。然后，通过加入2-曱基吡啶将溶液中和至pH6。该溶液直接用于肟化反应。(g)将N""-(2-羟基-3-氨基丙基)hGH(II)氧化成N""-(2-氧代乙基)hGH(III)使用AmiconUltra-l5超滤设备(Millipore)，将从(b)2收集的含有53.8mg(I)和(II)的级分的緩沖液与15mM三乙醇胺/137mM3-(曱硫基)-l-丙醇pH8.5(用1N盐酸调节)緩沖液交换四次。然后，将溶液浓缩至5.4ml。向其中加入0.54ml25mM高碘酸钠的水溶液，并且在黑暗中，在室温下将混合物培养30分钟。然后，使用AmiconUltra-l5超滤设备(Millipore),用15mM三乙醇胺緩沖液pH8.5将溶液洗涤三次。然后，在水上对其进行冷却，并且将.62ml冰冷的N,N-二曱基甲酰胺加入其中。(h)用O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20000)氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)丁基)羟胺对Nf:l4l-(2-氧代乙基)hGH(111)进行肝化，从而给出NW-[2-(O-(4-(4-(l，3-二(mPEG(20000)氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH在温和混合下，将得自于(g)的混合物緩慢加入到得自于(f)的PEG溶液中，并且在室温下使反应进行72小时。(i)N""-[2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20000)氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH的离子交换色谱法将得自于(h)的溶液施加到用緩沖液A(0mMtris,pH8.0)预平衡的MonoQ10/100GL柱(AmershamBiosciencescat.No.17-5167-01)上。然后，以2.0ml/min的流速用在緩沖液A中的0%~100。/。緩沖液BU0mMtris,0.2MNaCl，pH8.0)的梯度洗脱79min。基于在280nm下的UV吸收对级分进行收集。对对应于期望峰的级分进行收集并且在AmiconUltra-15超滤设备(Millipore)上将其浓缩至10ml。(j)N""-[2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20000)氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH的筛析(sizeexdusion)色谱法将得自于(i)的浓缩溶液施加到用緩冲液C(50mM碳酸氢铵，pH8.0)预平4軒的HiLoad26/60Superdex200柱(AmershamBiosciencescat.No.17-1071-01)上。然后，以0.5ml/min緩冲液C的流速将其洗脱956min。基于在280nm下的UV吸收对级分进行收集，并且根据先前试验进行汇集。SDS记录(page)表明表观分子量大于120kDa的单波段(band)。实施例2N"41-[2-(0-(4-(4-(mPEG(30000)氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH的制备mPEG(30000)'(a)hGHO)的氨基转移化给出N""-(2-羟基-3-氨基丙基)hGH(II)将hGHU)(200mg)溶于磷酸盐緩沖液(50mM，pH8.0,14ml)中'，将该溶液与溶于磷酸盐緩沖液中的1,3-二氨基丙-2-醇(378mg)溶液(50mM，0.5ml,pH8.0，在溶解1,3-二氨基-丙-2-醇之后用稀盐酸将pH值调节至8.0)混合。最后加入溶于磷酸盐緩沖液(50mM，pH8.0，0,5ml)的TGase(18mg40U)溶液，并且通过加入磷酸盐緩冲液(50mM,pH8.0)将体积调节为20ml,得到1,3-二氨基-丙-2-醇的浓度为0.2M。在37。C下将合并的混合物培养4小时。将温度降低至室温并且将N-乙基-马来酰亚胺加入其中，至最终浓度为1mM。再过l小时之后，所得混合物用IO体积的tris緩沖液(50mM,pH8.5)稀释。所得混合物的CE分析表明两个主峰对应于hGH和Nel41-(2-羟基-3-氨基丙基)hGH(II)和两个次要峰对应于N""2-羟基-3-氨基丙基)hGH(II)，和N"N""-二(2-羟基-3-氨基丙基)hGH。在以下纯化期间最后两种组分被除去，但是它们已经被回收。(b)N"4'-(2-羟基-3-氨基-丙基)hGH(II)的离子交换色语将得自于(a)的溶液施加到用緩沖液A(50mMtris,pH8.5)预平衡的MonoQ10/100GL柱(AmershamBiosciencescat.No.17-5167-01)上。然后，在2ml/min的流速下通过以下步骤(step)梯度对其进行洗脱步骤1:在緩冲液A中0。/。60。/。緩冲液B(50mMtris，0.2MNaCl，pH8.5)洗脱12min;步骤2:在緩沖液A中60%-64%緩沖液B洗脱8mm;步骤3:在緩冲液A中64%緩沖液B洗脱16min;步骤4:在緩沖液A中64%~67%緩沖液8洗脱16min;步骤5:在緩冲液A中67。/。緩沖液B洗脱16min;步骤6:在緩冲液A中67%~100%緩冲液B洗脱12min。基于在280nm下的UV吸收对级分进行收集，并且将对应于最大峰的级分汇集。通过CE(方法A)发现，该汇集物含有比例58:42的hGH(I)和Ne"、2-羟基-3-氨基-丙基)hGH(11)。描述在国际申请WO2005DK000028中的肽图实验预先证明，(a)和(b)的联合方法导致在Gin-141上的选择性衍生化作用。(c)CK4-(4-(mPEG(30000)氧基)丁酰氨基)丁基)羟胺的合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage185</formula>向4-(N-Boc-氨基氧基)丁胺(0.43g，2.10mmo1)的DCM(40ml)溶液中加入mPeg(30000)-O-(CH2)3-CO-OSu(Nektar，2M450R01,MW30kDa,5.0g,0.17mmo1)。在室温下将所得混合物搅拌5天，在减压下进行浓缩，并且在真空下对所得残余物进行干燥。在iPrOH(4x80ml)中进行重结晶，随后与DCM进行共蒸发和在减压下进行干燥，得到4.14gBoc-保护的烷氧基胺。将得自于先前反应的产品(0.65g)溶于20mlDCM中，并且将Amberlyst15(6.0g;用DCM洗涂)加入其中。搅拌IO分钟之后，对混合物进行过滤并且对滤液进行浓缩。向所得残余物中加入DCM(20ml)和TFA(20ml)。在室温下放置0.5h小时之后，对混合物进行浓缩，将所得残余物与DCM和曱苯的混合物共蒸发两次，并且在减压下将其干燥过夜。将所得残余物溶于水(15ml)中，并且使用AmiconUltm-15超滤设备(Millipore)用水洗涂两次。然后，通过加入2-甲基吡啶将溶液中和至pH6。该溶液直接用于肟化反应。(d)氧化N""-(2-羟基-3-氨基丙基)hGH(II)从而给出N"4'-(2-氧代乙基)hGH(III)使用AmiconUltra-15超滤设备(MUlipore)，将从(b)收集的含有78.14mg(I)和(II)的级分的緩冲液与15mM三乙醇胺/137mM3-(甲硫基)-l-丙醇pH8.5(用1N盐酸调节)緩沖液交换四次。最后，将溶液浓缩至3.3ml。向其中加入0.33ml25mM高碘酸钠的水溶液，并且在黑暗中，在室温下将混合物培养30分钟。然后，使用AmiconUltra-l5超滤设备(Millipore),用15mM三乙醇胺緩冲液pH8.5将溶液洗涤三次。然后，在水上对其进行冷却，并且将1.0ml冰冷的N，N-二甲基甲酰胺加入其中。(e)用O-(4-(4-(mPEG(30000)氧基)丁酰氨基)丁基)-羟胺对Nel41-(2-氧代乙基)hGH(III)进行肝化，从而给出Nel4l-[2-(O-(4-(4-(mPEG(30000)氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH在温和搅拌下，将得自于(d)的混合物緩慢加入到得自于(c)的PEG溶液中，并且在室温下使反应进行144小时。(f)Nel41-[2-(0-(4-(4-(mPEG(30000)氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH的离子交换色谱法将得自于(e)的溶液施加到用緩冲液A(10mMtris，pH8.0)预平衡的MonoQ10/100GL柱(AmershamBiosciencescat.No.17-5167-01)上。然后，以1.5ml/min的流速用在緩沖液A中的0%~100y。緩冲液B(lOmMtris,0.2MNaCl，pH8.0)的梯度洗脱107min。基于在280nm下的UV吸收对级分进行收集。对对应于期望峰的级分进行收集并且在AmiconUltra-15超滤设备(Millipore)上将其浓缩至10mL(g)N"4l-[2-(0-(4-(4-(mPEG(30000)氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH的筛析色谱法将得自于(f)的浓缩溶液施加到用緩冲液C(50mM碳酸氢铵，pH8.0)预平4軒的HiLoad26/60Superdex200柱(AmershamBfoscfencescat.No.17-1071-01)上。然后，以0.5ml/mm緩沖液C的流速将其洗脱956min。基于在280nm下的UV吸收对级分进行收集，并且根据先前试验进行汇集。SDS记录表明表观分子量大约117kDa的单波段。实施例3N"4'-(3-((4-(2-〖2-(2-(2-(4-(U-二(mPeg(20000)基氨基羰氧基V2-丙氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基〗乙氧基)乙氧基〗亚丁基)氨基氧基)丙氣基)hGH(VII)的制备<image>imageseeoriginaldocumentpage186</image>在实施例3中，使用二-氨基氧基化合物进行氨基转移作用的使hGH与mPEG结合的方案。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage187</formula>(a)hGH(I)的氨基转移化给出N""-(3-(氨基氧基)丙氧基)hGH<formula>formulaseeoriginaldocumentpage187</formula>(V)制备以下溶液1)将100mghGH(I)溶于大约9mlNa-磷酸盐緩冲液(50mM,pH6.0)中。随后，使用Na-磷酸盐緩冲液(50mM,pH6.0)将pH调节为6和将体积调节为10ml。2)将2.00g1,3-二氨基氧基丙烷.2HCl(A.Shirayev，P.K.Thoolin,和I.K.Moiseev,Synthesis,38-40(1997))溶于大约5mlNa-磷酸盐緩沖液(50mM,pH6.0)中，随后如1所述调节pH值和体积。3)将30mg转谷氨酰胺酶ActivaWM(Ajinomoto,0.3mg酶)溶于大约9mlNa-磷酸盐緩沖液(50mM,pH6.0)中，随后如1所述调节pH值和体积。将溶液1+2+3混合，滤过0.45过滤器并且在22'C下使其反应2.5h期间。此时，CE(方法B)和Maldi-tof光谱学表明hGH大约转化<formula>formulaseeoriginaldocumentpage187</formula>50%，同时大约70%的产品为期望的hGH-衍生物(V)。向反应混合物中加入30ml2mM含水N-乙基马来酰亚胺(NEM)。将pH值调节为8.0,并且通过超过滤法(AmiconUltra15(Millipore)10000Da截止滤光片，3600RCF,室温，将体积降低为1/10)，使用含水NEM2mM和磷酸盐緩沖液50mMpH8.0的1:1混合物将溶液緩冲改变6次。(b)用4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPeg(20000)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)乙氧基)-乙氧基)乙氧基)乙氧基)丁醛(VI)对N""-(3-(氨基氧基)丙氧基)hGH(V)进行肟化，从而给出Nel41-(3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPeg(20000)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基)hGH(VII)在(a)中最后洗涤之后，将pH值调节为6.0。加入在10ml緩冲液中的180mgmPEG2-ButyrALD-40K(VI.,Nektar083Y0T01)。反应在3h内完成。RP-HPLC(系统A)和SDS-记录表明大约100%的hGH-衍生物V转化为PEG化的hGH(VII)。通过如上所述的超滤作用，用10mMTRIS緩冲液pH8.5将反应緩冲液改变3次。(c)N""-(3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPeg(20000)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基)hGH(VII)的离子交换色谱法。分别使用10mMTRISpH8.5(緩冲液A)和10mMTRISpH8.5+200mMNaCl(緩沖液B)作为启动和洗脱緩沖液，在MonoQ10/100阴离子交换柱(AmershamBiosciences)上对粗产品进行純化。在80分钟期间内，以2.0ml/min的流速用0~100%B的梯度进行洗脱。产品(VII)洗脱在大约24。/。緩沖液B中。将含有期望产品(VII)的级分收集，汇集并且用50mMNH4HCO3緩沖液pH8.0使其緩冲改变6次，和最后进行冻干。获得纯产品(VII)以及两种副产品大约20%的异构体，hGH在位置Gln-40上进行PEG化，和大约10%的二聚体，hGH在位置Gln-40和Gln-141两者上进行PEG化。这些产品可通过阴离子交换色谱法分离。产品的同一性通过肽图实验和SDS-记录进行证实u实施例4NT'412-(2-(2,3-二(mPeg(20000)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基肟基)乙基]hGH的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage189</formula>(a),(b)N""-(2-氧代乙基)hGHN""-(2-氧代乙基)hGH(252mg)如实施例1所述进行制备。(c)用O-(2-(2,3-(mPeg(20000)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基)羟胺(SunbnghtGL2-400CA,NOFCorp.,Tokyo，Japan)肟化N""-(2-氧代乙基)hGH(III.)，从而给出N""-[2-(2-(2，3-(mPeg(20000)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基肟基)乙基]hGH将氨基氧基-PEG衍生物(452mgSunbrightGL2-400CA,NOFCorp)溶于5.5ml緩冲液(2-(N-吗啉代)乙磺酸(MES)，0.3M,pH6.5)中。然后，由氧化得到的浓缩汇集液用1.25ml水冷的NMP稀释，并且将其緩緩加入到PEG试剂的溶液中。将上述混合物緩緩搅拌2天。(d)N""-[2-(2-(2,3-(mPeg(20000)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基肟基)乙基]hGH的离子交换色谱法使用脱盐柱(HiPrep26/10AmershamBiosciencescat.No.17-5087-01)，使得自于(c)的反应混合物与20mM三乙醇胺緩冲液pH8.5进行緩冲液交换，并且将蛋白质施加到已经用緩冲液A(20mM三乙醇胺，pH8.5)预平衡过的离子交换柱(HiLoad26/10QSepharoseHP,AmmershamBiosciences)上。然后，以5ml/min的流速用在緩冲液A中0%~100。/o緩冲液B(20mM三乙醇胺，0.2MNaCl，pH8.5)的梯度以10柱体积进行洗脱。基于在280nm下的UV吸收对级分进^f亍收集。将对应于期望的峰的级分进行汇集。(e)NW-[2-(2-(2，3-(mPeg(20000)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基肟基)乙基]hGH的筛析色谱法通过超滤将得自于(d)的汇集物浓缩至15ml,并且使用脱盐柱(HiPrep26/10AmershamBiosciencescat.No.17-5087-01),4吏蛋白质与50mM碳酸氢铵pH8.0进行緩沖液交换。然后，将蛋白质施加到用50mM碳酸氢铵pH8.0预平衡过的筛析柱(HiLoad26/10S叩erdex200,AmershamBiosciencescat.No.17-1071-01)上。然后，以1.0ml/min的流速对其进行洗脱。基于在280nm下的UV吸收对级分进行收集。实施例5Ne"i-『2-(GK2-(2-(mPEG(40000)基氣基)乙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基lhGH的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage190</formula>(a)氨基转移作用利用类似于实施例1(a)和(b)的方法，用1，3-二氨基丙烷-2-醇对hGH(I)(lOOmg)进行氨基转移化，并且对产品进行纯化。根据UV光谱分析和CE分析，由純化得到的汇集物含有30mg蛋白质，其中20mg为N^-(2-羟基-3-氨基丙基)hGH(II)。(b)O-(2-(2-(mPEG(40000k)基氧基)乙基氨基)-2-氧代乙基)羟胺的合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage190</formula>向二-Boc-氨基氧基乙酸(0.30mg,0.10mmol)的DMF(1ml)溶液中加入二异丙基乙胺(0.034ml,0,2mmol)、N-羟基琥珀酰亚胺(10mg，0.1mmol)和二异丙基碳化二亚胺(0.016ml,0.1mmol)。将上述混合物搅拌15分钟，并且将溶于最少量DCM中的mPeg(40000)-O-(CH2)2-NH2(产品008-028，ChirotechLtd.CambridgeUK，MW40kDa,l.Og，0.025mmol)加入其中。在室温下将所得混合物搅拌6小时，使产品沉淀并且用乙醚洗涤。将所得沉淀再溶解于0.5mlDMF和1mlDCM的混合物中，进行沉淀并且用乙醚洗涤。重复上述方法一次并且在干燥之后，分离得到770mg沉淀。将200mg无水沉淀溶于5mlDCM中，并且将5mlTFA加入其中。30分钟之后，在旋转蒸发器上对混合物进行浓缩并且使其与10ml乙醇一起汽提两次。将所得残余油状物再溶解于0.5mlDMF和2mlDCM的混合物中，进行沉淀并且用乙醚洗涤。重复上述步骤一次，对沉淀的PEG衍生物进行干燥并且将其溶于1ml緩沖液(0.3MMES,pH6.5)中。将在(a)中获得的氨基转移化产品溶于緩沖液(20mM三乙醇胺，pH8.5)中，并且将3-(甲硫基)-l-丙醇(1ml,683mM溶液)加入其中。然后将过碘酸钠(5mg,IO当量)加入其中，并且使混合物反应30分钟，随后用含水蛋氨酸溶液(168mM)将其洗涤三次，使用超滤设备(AmiconUltra-15,Millipore)将其浓缩至4.5ml。然后将0.5ml水冷的N-甲基-p比咯烷酮加入其中，并且将其緩緩加入到PEG衍生物溶液中，使所得混合物反应过夜。反应混合物的緩冲液在用緩沖液(tris10mM，pH8.5)预平衡过和洗脱的脱盐柱(HiPrep26/10AmershamBiosciencescatNo.17-5087-01)上进行交换，并且将汇集物施加到用10mMTrispH8.5预平衡过的离子交换柱(HiLoad26/10QSepharose,AmershamBiosciencescat.No.17-1066-01)上，并且以4ml/min的流速，用10柱体积的pH值8.5的0.2MNaCl的10mMTns梯度洗脱。将根据RP-HPLC含有PEG化的hGH的级分汇集，并且在用緩沖液(碳酸氢铵50mM，pH8.5)预平衡过的和洗脱的脱盐柱(HiPrep26/10AmershamBiosciencescat.No.17-5087-01)进行緩沖液交换。对汇集物进行冷冻干燥。目标化合物的产量为3.25mg。实施例61^'|4|^2_(3-(4-((1.3-二〖0^^(30000)基氨基羰氣基)-2-丙氣基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基亚氨基)乙基lhGH(VII.)的制备将hGHU00mg)溶于緩沖液(7ml，单磷酸钠25mM，pH6.0)中。将1,3-二-氨基氧基丙烷.2HCl(2.0g，在5.0ml125mM单磷酸钠中，调节至pH6.0)加入其中，最后将TGase(ActivaWM,Ajmomoto,30mg,在2ml单磷酸钠125mM中，pH6.0)加入其中并且用单磷酸钠緩冲液(125mM,pH6.0)将其体积调节至30ml。在37。C下4小时之后，通过加入NEM(100ul，100mMNEM)终止反应。在37。C下再过1小时之后，将过量二-氨基氧基丙烷除去，并且在用緩冲液(Tris10mM,pH8.5)预平衡过的和洗脱的脱盐柱(HiPrep26/10AmershamBiosciencescat.No.17-5087-01)进行緩沖液交换。向含有蛋白质的汇集物(32ml,含有82mg蛋白质)中滴加加入60kDa2-armPEG醛的溶液(Nektar,083Y0V01MPEG2-BUTYRALD-60K,800mg,在10ml水中)。在室温下培养过夜之后，将緩沖液分成四份在脱盐柱(HiPrep26/10AmershamBiosciencescat.No.17-5087-01)上与10mMTrispH8.5交换。将合并的含有蛋白质的汇集物分三份施加到用10mMTrispH8.5平衡的MonoQ10/100GL柱上，并且用在10mMTrisph8.5中的0.2MNaCl梯度以20柱体积以4ml/min的流速进行洗脱。对含有目标化合物的级分进行收集、緩冲液交换和如上所迷再次进行色谙分离。最后将含有目标化合物的级分汇集，并且将汇集物施加到用50mM碳酸氢铵预平衡和洗脱的HiLoad26/60Superdex200PG凝月交过滤柱(AmershamBiosciencescat.No.171071-01)上对含有目标化合物的级分进行汇集和冷冻干燥。得到35.74mg期望产品。药理学方法测定(I)确定体外生长激素活性的BAFhGH-R溯']定BAFhGH-R测定为体外增殖测定，其中BAF-3细胞已经改性为依赖于生长激素(GH)进行生长和存活。BAF-3是不灭的小鼠骨髓衍生的前-B细胞系。首先，BAF-3细胞依赖于IL-3进行生长和存活。当一个IL-3分子结合和二聚两个IL-3受体时，IL-3信号受到引发。这导致JAK-2/STAT信号途径的活化，从而调整对于生长和存活重要的基因转录。GH-受体(GH-R)属于与IL-3R相同的受体超家族(细胞因子/促红细胞生成素受体超家族)并且共享相同的JAK/STAT胞内信号途径。由此，在将人类GH-R转染入BAF-3细胞系之后，细胞系被转化为GH-依赖性细胞系。通过加入升高浓度的人类GH或者测试化合物，细胞系显示剂量相关的生长刺激作用。BAFhGH-R测定通过在37。C和5%C02下，缺乏(starving)hGH细胞(无hGH的培养介质)24小时得到引发。对细胞进行离心，将介质除去并且将所得细胞再悬浮于缺乏(starvation)介质中。将20.000细胞/孔播种入微孔板(96孔NUNCTCmicrowell96FSIw/lidNUNCLONDcat.No.167008)中。将人类GH(以不同的浓度)或者测试化合物(以不同的浓度)加入到细胞中，并且在37°。和5%C02下将板培养68小时。细胞的代谢活性通过AlamarBlue(BioSourcecatnoDal1025)进行测量。AlamarBlue是氧化还原指示剂，其通过对于细胞代谢固有的反应还原，和由此提供存活细胞数目的间接量度。将AlamarBlue⑧加入到各个孔中，并且将细胞另外培养4小时。在荧光板读数器上，使用544nM激发过滤器和590nM发射过滤器对吸光度进行测量。将样品的吸光度作为GH/测试化合物的浓度的函数绘制曲线。根据剂量响应曲线，可以对通过EC5o值(引起一半最大响应的GH/测试化合物的量)表达的效能进行计算。此外，测试化合物的相对体外活性可以通过定义为EC5(>(化合物)/EC5U(hGH)的比值进行描述超过1的比值表示同人类GH相比，测试化合物的效力更低。表1显示了如实施例中所述化合物的结果。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage194</column></row><table>药物动力学实施例的化合物的药物动力学在雄性SpraqueDawley大鼠中在静脉内(i.v.)和皮下(s.c.)单一剂量给药之后进行研究。在由以下组成的稀释緩冲液中将测试化合物稀释为最终浓度1mg/ml:甘氨酸20mg/ml，甘露醇2mg/ml,NaHC032.5mg/ml，pH调节为8.2。测试化合物在体重为250g的雄性spraqueDawley大鼠中进行研究。以]mg/kg体重的剂量，用25G针将测试化合物一次i.v.注射入尾部静脉或者s.c.注射入颈部给药。对于各个测试化合物，根据以下列于表2中给出的方案进行血样采集。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage195</column></row><table>在每次采样时间，使用25G针从尾部静脉提取0.25ml血液。将血液进样入EDTA涂覆的试管内和贮存在冰上，直至在4。C下1200xG离心10分钟为止。将血浆转入Micronic管中并且将其贮存在-2(TC下，直至进行分析为止。通过复合(sandwich)ELISA，使用豚鼠抗hGH多克隆抗体作为捕捉器，和生物素化的hGH结合-蛋白质(人类GH受体的可溶性部分)作为检测器，对测试化合物的浓度进行测定。测定的检测极限为0.2nM。在各种测试化合物的平均浓度-时间曲线上，使用WinNonlinProfessional(PharsightInc.,MountainView,CA,USA)进孑亍非区分(議-compartmental)药物动力学分析。终点半衰期(ti/2)和平均停留时间(MRT)的药物动力学参数估计在表3中提供。<table>tableseeoriginaldocumentpage196</column></row><table>权利要求1、一种将PEG共价连接到包含至少一个谷氨酰胺残基的多肽上的方法，所述方法包含在一个或者多个步骤中使含有式[I]表示的多肽的所述谷氨酰胺残基其中PP表示通过从存在于多肽中的谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(＝O)-NH2获得的多肽基团，与式[II]的含氮亲核试剂其中D表示-O-或者单键；R表示C1-6亚烷基、-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-、-(CH2)4-CH(NHCOCH3)-CO-NH-CH2-或者C5-15杂亚烷基；X表示-O-NH2、醛、酮，或者通过进一步反应可以转化为-O-NH2、醛或者酮的潜在基团；在转谷氨酰胺酶存在下反应，从而形成式[III]的氨基转移化的多肽任选地，如果X为潜在基团，将所述潜在基团转化为-O-NH2、醛或者酮，所述氨基转移化的多肽进一步与式[IV]的第二化合物反应其中Y，如果X表示醛、酮，或者通过进一步反应可以转化为醛或者酮的潜在基团，表示-O-NH2；或者，如果X表示-O-NH2，或者通过进一步反应可以转化为-O-NH2的潜在基团，表示醛或者酮；和Z表示选自以下的部分其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa～40kDa的mPEG，和PEG表示分子量为1kDa～10kDa的PEG；条件是如果Z为那么PEG为10kDaPEG，从而形成式[V]的PEG化的多肽其中A表示肟键；或者其任何药学上可接受的盐、前药或溶剂化物。2、根据权利要求1的方法，其中D表示-O-。3、根据权利要求1的方法，其中D表示单键。4、根据权利要求1~3任一项的方法，其中R表示-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH24*-(CH2)4-CH(NHCOCH3)-CO-NH-CH2-。5、根据权利要求13任一项的方法，其中R表示C"6亚烷基。6、根据权利要求5的方法，R表示Cw亚烷基。7、根据权利要求6的方法，其中R表示亚甲基或者亚丙基。8、根据权利要求17任一项的方法，其中Z表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG，和PEG表示分子量为1kDa~10kDa的PEG;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>条件是如果Z为HH2",那么PEG为10kDaPEG。9、根据权利要求18任一项的方法，其中Y表示-0-NH2，和X表示醛或者可以进一步反应形成醛的潜在基团。10、根据权利要求1~8任一项的方法，其中Y表示-0-NH2，和X表示酮或者可以进一步反应形成酮的潜在基团。11、根据权利要求9或者权利要求10的方法，其中式[IV]化合物Y-Z表示选自以下的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>和<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>其中，除非另有说明，mPEG是指分子量为10kDa、20kDa或者30kDa的mPEG，和PEG是指分子量为2kDa5kDa的PEG。12、根据权利要求1~8任一项的方法，其中Y表示醛和X表示-0-NH2或者通过进一步反应可以转化为-0-NH2的潜在基团。13、根据权利要求12的方法，其中式[IV]化合物表示选自以下的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>其中，除非另有说明，mPEG是指分子量为10kDa、20kDa或者30kDa的mPEG,和PEG是指分子量为2kDa5kDa的PEG。14、根据权利要求1~8任一项的方法，其中Y表示酮和X表示-0-NH2或者通过进一步反应可以转化为-〇-NH2的潜在基团。15、根据权利要求14的方法，其中式[IV]化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>表示选自以下的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>H2N-D-R-X表示1,3-二氨基氧基丙烷，和Y表示醛。16<image>imageseeoriginaldocumentpage14</image>17<image>imageseeoriginaldocumentpage14</image>18、一种改变生长激素的药理学性能的方法，所述方法包括根据权利要求~17任一项的方法将PEG共价连接在所述生长激素上。19、根据权利要求1~18任一项的方法，其中多肽为包含生长激素的谷氨酰胺残基，和PP表示通过从存在于生长激素中的谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(-0)-NH2获得的生长激素基团。20、根据权利要求19的方法，其中所述包含生长激素的谷氨酰胺残基表示人生长激素。21、根据权利要求20的方法，其中所述包含生长激素的谷氨酰胺残基表示a)包含SEQIDNo.l的氨基酸序列的hGH，b)20kDahGH，c)hGH，其中对应于SEQIDNo.1中位置40的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换d)hGH,其中对应于SEQIDNo.1中位置141的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换，或者e)hGH,其中对应于SEQIDNo.1中位置40的位置上的谷氨酰胺残基和对应于SEQIDNo.1中位置Ml的位置上的谷氨酰胺残基各自已经被除去或者被另一氨基酸替换和其中谷氨酰胺残基存在于生长激素中的另一位置上。22、根椐权利要求21的方法，其中所述生长激素表示hGH。23、根据式[V]的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>其中PP-C(=0)-NH2获得的多肽基团；D表示-O-或者一个键；R表示C"6亚烷基、-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-、-(CH2)4-CH(NHCOCH3)-CO-NH-CHr或者C5.i5杂亚烷基；A表示肟键；Z表示选自以下的部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG,和PEG表示分子量为1kDa~10kDa的PEG;及其任何药学上可接受的盐、前药或溶剂化物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>24、根据权利要求23的化合物，其中D表示-O-。25、根据权利要求23的化合物，其中D表示单键。26、根据权利要求23-25任一项的化合物，其中R表示-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH24*-(CH2VCH(NHCOCH3)-CO-NH-CH2-。27、根据权利要求23~25任一项的化合物，其中R表示CL6亚烷基。28、根据权利要求27的化合物，R表示Cw亚烷基。29、根据权利要求28的化合物，其中R表示亚甲基或者亚丙基。30、根据权利要求2329任一项的化合物，其中Z表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>激素的谷氨酰胺残基，和PP表示通过从存在于生长激素中的谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(K))-NH2获得的生长激素基团。31<image>imageseeoriginaldocumentpage21</image>32、根据权利要求31的化合物，其中GH表示通过从存在于包含SEQIDNo.l的氨基酸序列的hGH中的谷氨酰胺残基侧链上除去-C(-0)-NH2获得的基团。33、根据权利要求31的化合物，其中GH表示通过从存在于20kDahGH中的谷氨酰胺残基側链上除去-C(-0)-NH2获得的基团。34、根据权利要求31的化合物，其中GH表示通过从以下物质的侧链上除去-C(-0)-NH2荻得的基团a)在对应于SEQIDNo.1的位置40的位置上的谷氨酰胺残基；或者b)在对应于SEQIDNo.1的位置141的位置上的谷氨酰胺残基；或者GH表示通过从对应于SEQIDNo.1的位置40的位置上的谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(H3)-NH2获得的基团，其中在对应于SEQIDNo.1的位置141的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换；或者GH表示通过从对应于SEQIDNo.1的位置141的位置上的谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(0)-NH2获得的基团，其中在对应于SEQIDNo.1的位置40的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换；或者GH表示通过从不同于对应于SEQIDNo.1的位置40的位置的位置上和不同于对应于SEQIDNo.1中位置141的位置的位置上存在的谷氨酰胺残基的侧链上除去-C^O)-NH2获得的基团，其中在对应于SEQIDNo,1的位置40的位置上的谷氨酰胺残基和对应于SEQIDNo.1的位置Ml的位置上的谷氨酰胺残基各自已经被除去或者被另一氨基酸替换。35、根据权利要求23的化合物，其选自N6'4w('-2-(O-(4-H-(l，3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)氨基丁基)-肟基)乙基hGH;NW"化'-2-(O-(4-(4-(mPEG(10k)基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N引4歸-2-(O-(4-(3-(mPEG(10k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N^歸-2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基)氨基丁基)將基)乙基hGH;NS"菌-2-(O-(4-(5-(mPEG(10k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NSi4i/4。3((4—(2《2一(2^2《4-G,3-二(mpEGG0k)基氨基羰氧基)丙-2曙基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基}氨基氧基)丙-l-基氧基hGH;NS",-3-((4-(l,3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基}-氨基氧基)丙氧基hGH;Nsl4l/4。-3-((4-(mPEG(1Ok)基氧基)亚丁基}氨基氧基)丙氧基hGH;NM"气3-((4-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基〉氨基氧基)丙氧基hGH;NS"歸-3-((3-(mPEG(JOk)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NSM卵-2《o一(2《3乂2，3.二(mpEG(！ok)基氧基)丙氧基)丙基氨基)画2_氧代乙基)肟基)乙基hGH;NS"歸-3-((4-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NW湖-2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基}氨基丁基)-肟基)乙基hGH;NS""4()-2-(O-(4-P-(mPEG(20k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS""气2-(O-(4-H-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS""气2-(O-(4-(5-(mPEG(20k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH，NS",-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2画基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氡基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙--基氧基hGH;NS""气3-((4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基叛氧基)丙-2-基氧基)亚丁基卜氨基氧基)丙氧基hGH;NS"測-3-((4-(mPEG(20k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N5""气3-(《4-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N"4画-3-((3-(mPEG(20k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NSi4i/气2一(o《2-p《2,3-二(mpEG(20k)基氧基)丙氧基)丙基氨基》^氧代乙基)肟基)乙基hGH;N^，3-((4-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NW4"，2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)氨基丁基)-肟基)乙基hGH;NW"，2-(O-(4-(3-(mPEG(30k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS出"〔'-2-(O-(4-(4-(2，3-二(mPEG(30k)基氧基)丙小基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N6141/4()-2-(0-(4-(5-(mPEG(30k)基氧基-5-氧代戊酰基}氨基丁基)肟基)乙基hGH;^141/4°-3-({4-(2-(2-(2-(2-(4-(1,3-二(!^￡0(3010基氨基叛氧基)丙-2-基氧基)丁酰氦基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基}氨基氧基)丙-l-基氧基hGH;N^歸-3-((4-(U-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基)-氨基氧基)丙氧基hGH;NSi4i，3—(^(mpEG(30k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N6141/4"-3-((4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N^气3-((3-(mPEG(30k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NM4"气2《o《2乂；(2，^二(mpEG(30k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)1氧代乙基)肟基)乙基hGH;N副,-3-((4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氣基hGH;N化""('-3-((4-((2,3-二(mPEG(20k)基)丙-l-基氧基)PEG基氧基}亚丁基)氨基氣基)丙氧基hGH;N^脂-2-((4-(4-((2,3-二(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁酰氨基)丁基)肟基)乙基hGH;NS"'-2-(O-(4-(4-(l，3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基卜氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS出-2-(O-(4-(4-(mPEG(10k)基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH,NS"'-2-(O-(4-。-(mPEG(10k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS"'-2-(O-(4-(4-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;NW"-2-(O-(4-(5-(mPEG(10k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH,NW"-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基}氨基氧基)丙-1-基氧基hGH;>1841-3-({4-(1，3-二(11^￡0(1010基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基}-氨基氧基)丙氧基hGH;N""-3-((4-(mPEG(10k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N"4L3-(H-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH,NS'"-3-((3-(mPEG(10k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N""-2-(O-(2-(3-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;NS出-3-((4-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N""-2-(O-(4-H-(l，3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)-mmo丁基)肟基)乙基hGH;NS'"-2-(O-(4-p-(mPEG(20k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NW-2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(20k)基氣基)丙-l-基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N川'-2-(O-(4-(5-(mPEG(20k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;Nsl41-3-({4-(2-(2-(2-(2-(4-(1，3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基}氨基氧基)丙-1-基氧基hGH;NS"'-3-((4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基卜氨基氧基)丙氧基hGH;NS出-3-((4-(mPEG(20k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NW-3-((4-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS'"-3-((3-(mPEG(20k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS"J-2-(O-(2-(3-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;N""-3-((4-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS"'-2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基}-氨基丁基)肟基)乙基hGH;NS"'-2-(O-(4-(3-(mPEG(30k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N""-2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;N5"i-2-(O-(4-(S-(mPEG(30k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;NW-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基}氨基氧基)丙-1-基氧基hGH;NW"-3-((4-(l，3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基卜氨基氧基)丙氧基hGH;N^'-3-((4-(mPEG(30k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N^-3-((4-(2，3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS"'-3-((3-(mPEG(30k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NW-2-(O-(2-(3-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH;N""-3-((4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS出-3-((4-((2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基)PEG基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N5"'-2-((4-(4-((2，3-二(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氧基)丁酰氨基)丁基)將基)乙基hGH;NS气2-(O-(4-(4-(l，3-二(mPEG(10k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)-氨基丁基)肟基)乙基hGH;N54()-2-(0-(4-{4-(mPEG(10k)基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N,-2-(O-(4-(3-(mPEG(10k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH,N,-2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N,-2-(O-(4-(5-(mPEG(10k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N糾)-3-({4-(2-(2-(2-(2-(4-(1，3-二(mPEG(1Ok)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基}氨基氧基)丙小基氧基hGH，>454()-3-({4-(1,3-二(11^60(1010基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基}-氨基氧基)丙氧基hGH，NS4°-3-({4-(mPEG(1Ok)基氧基)亚丁基}氨基氧基)丙氧基hGH;N柳-3-((4-(2,3-二(mPEG(0k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N,-3-({3-(mPEG(1Ok)基氧基)亚丙基}氨基氧基)丙氧基hGH;N柳-2-(O-(2-(3-(2，3-二(mPEG(10k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)^t基)乙基hGH;N,-3-((4-(2,3-二(mPEG(10k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N糾)-2-(O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基}-氨基丁基)肟基)乙基hGH;N,-2-(O-(4-(3-(mPEG(20k)基氧基)丙酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N,-2-(O-(4-(4-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基〉氨基丁基)肟基)乙基hGH;N柳-2-(O-(4-(5-(mPEG(20k)基氧基-5-氧代戊酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH，N柳-3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基}氨基氧基)丙小基氧基hGH;]^4()-3-({4-(1,3-二(11^￡0(2010基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基}-氨基氧基)丙氧基hGH;N,-3-((4-(mPEG(20k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH,N柳-3-(H-(2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙--基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N柳-3-(P-(mPEG(20k)基氧基)亚丙基〉氨基氧基)丙氧基hGH;N,-2-(O-(2-(3-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肝基)乙基hGH;N柳-3-({4-(2,3-二(mPEG(20k)基氧基)丙-卜基氧基)亚丙基}氨基氧基)丙氧基hGH;N柳-2-(O-(4-H-(l,3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰基)-氨基丁基)肟基)乙基hGH;N膝)-2-(O-(4-(3-(mPEG(30k)基氧基)丙酰基}氨基丁基)肟基)乙基hGH;N柳-2-(O-(4-(4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)丁酰基)氨基丁基)肟基)乙基hGH;N54G-2-(0-(4-(5-(mPEG(30k)基氧基-5-氧代戊酰基}氨基丁基)肟基)乙基hGH;N,-3-({4-(2-(2-(2-(2-(4-(1，3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙小基氧基hGH;N柳-3-((4-(l，3-二(mPEG(30k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)亚丁基卜氨基氧基)丙氧基hGH;N,-3-((4-(mPEG(30k)基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;N5气3-((4-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙-l-基氧基)亚丁基〉氨基氧基)丙氧基hGH;NS气3-((3-(mPEG(30k)基氧基)亚丙基)氨基氧基)丙氧基hGH;N細-2-(O-(2-(3-(2,3-二(mPEG(30k)基氧基)丙氧基)丙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基hGH，NS4D-3-({4-(2，3-二(mPEG(30k)基氧基)丙小基氧基)亚丙基}氨基氧基)丙氧基hGH;N糾)-3-((4-((2，3-二(mPEG(20k)基氧基)丙小基)PEG基氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基hGH;NS40-2-((4-(4-((2,3-二(mPEG(20k)基)丙基)PEG基氡基)丁酰氨基)丁基)肟基)乙基hGH;N"4'-[2-O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20K)氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH;Ne'"-[2-(O-(4-(4-(mPEG(30K)氧基)丁酰氨基)-丁基)氧基亚氨基)-乙基〗hGH;N"4L(3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l，3-二(mPEG(20K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基)hGH;N""-[2-(2-(2，3-(mPEG(20K)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基肟基)乙基〗hGH;N""-[2-(CK2-(2-(mPEG(40K)基氧基)乙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基]hGH;N"4L[2-(3-(4-((l,3-二(mPEG(30K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基亚氨基)乙基]hGH;N"彻()-[2-O-(4-(4-(U-二(mPEG(20K)氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH;1^4歸_[2-(0_(4_(4_(11^￡(3(301<)氧基)丁酰氨基)-丁基)氧基亚氨基)-乙基]hGH;Nfi4圃-(3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l,3-二(mPEG(20K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基)hGH;Ne"歸-[2-(2-(2,3-(mPEG(20K)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基肟基)乙基]hGH;Ne""气[2-(O-(2-(2-(mPEG(40K)基氧基)乙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基]hGH;Ne'"湖-[2-(3-(4-((U-二(mPEG(30K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基亚氨基)乙基]hGH;N"0-[2-O-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20K)氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)丁基)氧基亚氨基)乙基]hGH;N"0-[2-(O-(4-(4-(mPEG(30K)氧基)丁酰氨基)-丁基)氧基亚氨基)-乙基]hGH;N"0-(3-((4-(2-(2-(2-(2-(4-(l，3-二(mPEG(20K)基氨基羰氧基)-2-丙氧基)丁酰氨基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)亚丁基)氨基氧基)丙氧基)hGH;Nf'气[2-(2-(2,3-(mPEG(20K)基氧基)丙氧基羰基氨基)乙基肟基)乙基]hGH;Ne4()-[2-(O-(2-(2-(mPEG(40K)基氧基)乙基氨基)-2-氧代乙基)肟基)乙基〗hGH;Ne4()-[2-(3-(4-((1，3-二(mPEG(30K)基氨基羰氧基)-2.丙氧基)亚丁基)-氨基氧基)丙氧基亚氨基)乙基]hGH;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>mPeg(30k)-O\mPeg(30kK>^OTC>itO、N^^YhGH(141)mPeg(10k)-O、OmP印(10k)-O^/^^0—Peg(2-5k)—0^f^M^f^^^O、N^^丫hGH(141)mPeg(20k)-O、OmPeg(20k)-O-^/^^、0—Peg(2-5k)—0^f^^O^N^O、N^^YhGH(141)H'。n^------…^iih。ti丫N^。、NNO6mPeg(30k)-O、mPeg(30k)-O^/OPo-Peg(2-5k)-0^^nA^^!I^O、n^^RhGH(141)mPeg(10k)-O、，。一———.？HmPeg(10k)-O^^"^P"0—Peg(2-5k)—O^^^A^O、^^^NYhGHd41)2HITOmP印(20k)-O、mPeg(30k)-O、入uaqmPeg(30k)-八-O^^O^lT"0—P印(2-5k)—0^^^NX^O、N^^^flhGH(141)2HI<formula>formulaseeoriginaldocumentpage35</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>36、根据式[VI]的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula>其中PP表示通过从存在于所述多肽中的两个谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(=0)-NH2获得的多肽基团；D表示-O-或者一个键；R表示C,-6亚烷基、-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-、-(CH2)4-CH(NHCOCH3)-CO-NH-CH2-或者C5.15杂亚烷基；A表示肝键；Z表示选自以下的部分<formula>formulaseeoriginaldocumentpage36</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage37</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula>mPEG-0，0HmPEG-0mPEG-0mPEG-0mPEG-01-10，和1-1。0—Peg—其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG,和PEG表示分子量为1kDa~0kDa的PEG;及其药学上可接受的盐、前药或溶剂化物；0mPEG-\条件是如果Z为N-HC-H'25,那么mPEG为10kDamPEG,37、根椐权利要求36的化合物，其中D表示-O-。38、根据权利要求36的化合物，其中D表示单键。39、根据权利要求36-38任一项的化合物，其中R表示-(CH2)4-CH(NH2)-CO-NH-CH2-或者-(CH2)4-CH(NHCOCH;0-CO-NH-CH2-。40、根据权利要求36-38任一项的化合物，其中R表示Cw亚烷基。41、根据权利要求40的化合物，R表示Cw亚烷基。42、根据权利要求41的化合物，其中R表示亚甲基或者亚丙基。43、权利要求36-42任一项的化合物，其中Z表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage40</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage41</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage42</formula>其中，除非另有说明，mPEG表示分子量为5kDa~40kDa的mPEG:和PEG表示分子量为1kDa-10kDa的PEG;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage42</formula>44、根据权利要求36-43任一项的化合物，其中多肽为包含生长激素的谷氨酰胺残基，和PP表示通过从存在于生长激素中的两个谷氨酰胺残基的侧链上除去-C^0)-NH2获得的生长激素基团。45、根据权利要求44的化合物，其中GH表示通过从存在于包含SEQIDNo.l的氨基酸序列的hGH中的两个谷氨酰胺残基侧链上除去-C(K))-NH2获得的基团。46、根据权利要求44的化合物，其中GH表示通过从存在于20kDahGH中的两个谷氨酰胺残基侧链上除去-C(-0)-NH2获得的基团。47、根据权利要求44的化合物，其中GH表示通过从对应于SEQID<formula>formulaseeoriginaldocumentpage42</formula>条件是如果Z为<formula>formulaseeoriginaldocumentpage42</formula>No.1中位置40的位置上的谷氨酰胺残基侧链上，和从对应于SEQIDNo.1中位置141的位置上的谷氨酰胺残基側链上除去-C(0)-NH2获得的基团；或者GH表示通过从对应于SEQIDNo.I的位置40的位置上的谷氨酰胺残基侧链上除去-C(-0)-NH2获得的基团，其中对应于SEQIDNo.1中位置141的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换，和通过从不同于对应于SEQIDNo.1中位置40和141的位置的位置上存在的其它谷氨酰胺残基的侧链上除去-C(-0)-NH2获得的基团；或者GH表示通过从对应于SEQIDNo.1的位置141的位置上的谷氨酰胺残基侧链上除去-C(K))-NH2获得的基团，其中对应于SEQIDNo.1的位置40的位置上的谷氨酰胺残基已经被除去或者被另一氨基酸替换，和通过从不同于对应于SEQIDNo.1上位置40和Ml的位置的位置上存在的其它谷氨酰胺残基侧链上除去-C(-0)-NH2获得的基团；或者GH表示通过从不同于对应于SEQIDNo.1的位置40和141的位置的位置上的hGH中存在的两个谷氨酰胺側链上除去-C(-0)-NH2获得的基团，其中在对应于SEQIDNo.1的位置40和141的位置上存在的任何谷氨酰胺残基已经被除去或者被其它氨基酸替换。48、人生长激素，其共价连接在包含PEG，并且特别是mPEG的部分上，其中所述包含PEG的部分连接在谷氨酰胺残基40的侧链上，连接在谷氨酰胺141的侧链上或者连接在人生长激素的谷氨酰胺40和谷氨酰胺141的侧链上，条件是它不是NR|4'-[2-(4-(4-(mPEG(20k)基丁酰基)-氨基-丁氧基亚氨基)-乙基]hGH,NFl41-[2-(1-(十六烷酰基)哌啶-4-基)乙氧基亚氨基)-乙基]hGH,N""(2-(4-(4-(l,3-二(mPEG(20k)基氨基羰氧基)丙-2-基氧基)丁酰氨基)丁氧基亚氨基)乙基)hGH,NT"'(2-(4-(2,6-二(mPEG(20k)基氧基羰基氨基)己酰基氨基)丁氧基亚氨基)乙基)hGH,N':l4l(2-(4-(4-(mPEG(30k)基氧基)丁酰氨基)丁氣基亚氨基)乙基)hGH,N141(2_(4-(4-(mPEG(20k)基氧基)丁酰氨基)丁氧基亚氨基)乙基)hGH,或者Ne出(2-(4-(3-(mPEG(30k)基氧基)丙酰基氨基)丁氧基亚氨基)乙基)hGH。49、通过利用根据权利要求1~22任一项的方法获得的化合物。50、通过利用根据权利要求1-22任一项的方法可获得的化合物。51、通过利用根据权利要求1922任一项的方法获得的化合物。52、通过利用根据权利要求1922任一项的方法可获得的化合物。53、根据权利要求31-35任一项、权利要求44-52任一项、权利要求51或者权利要求52的化合物，其用于治疗。54、一种药物组合物，其包含根据权利要求31-35任一项、权利要求44~52任一项、权利要求51或者权利要求52的化合物。55、一种用于治疗以下疾病的方法生长激素缺乏(GHD);特纳综合征；Prader-W川i综合征(PWS);Noonan综合征；唐氏综合征；慢性肾疾病，青少年类风湿性关节炎；嚢性纤维化，接受HAART治疗的儿童中的HIV-感染(HIV/HALS儿童)；对于胎龄而言矮小的矮小儿童(SGA);具有出生体重极低(VLBW)但是SGA的儿童中的矮小身材；骨骼发育异常；hypochondroplasia;软骨发育不全；自发性矮小身材(ISS);成人中的GHD;长骨中或长骨的骨折，比如胫骨、月非骨、股骨、肱骨、桡骨、尺骨、锁骨、matacarpea、matatarsea和指头；海绵状多孔骨骼中的骨折或海绵状多孔骨骼的骨折，比如尾推、手掌和食品基底；肌腱或者韧带手术之后的患者，例如手、膝或者肩；具有或者经受distractionoteogenesis的患者；髋或者囊盘替换、半月板修理、脊柱制动术或者假肢固定后的患者，比如在膝、髋、肩、肘、手腕或者颌中进行；已经在其中固定入骨接合材料的患者，比如钉子、螺钉和板；未连接或者连接不正的骨折患者；osteatomia之后的患者，例如来自胫骨或者第一脚处；移植物植入之后的患者；由创伤或者关节炎引起的膝中关节软骨变性；患有特纳综合征的患者的骨质疏松症；男性骨质疏松症；慢性透析的成年患者(APCD);在APCD中营养不良相关的心血管疾病；APCD中恶病质的逆转；APCD中的癌症；APCD中的慢性抽象肺疾病；APCD中的HIV;患有APCD的老年人；APCD中的慢性肝病，APCD中的疲劳综合征；节段性回肠炎；削弱的肝功能；HIV感染的男性；短肠综合征；中心肥胖病；HIV-相关的脂肪营养不良综合征(HALS);男性不育症；主体选择性手术之后的患者；酒精/药物解毒或者神经学创伤；衰老；脆弱的老年人；骨关节炎；创伤性损伤的软骨；勃起机能障碍；纤维肉瘤；记忆疾病；抑郁症；创伤性脑损伤；蛛网膜下出血；极低出生体重；新陈代-浙综合征；糖肾上腺皮质激素肌病；由于glucucorticoid治疗导致的儿童中的矮小身材；用于促进肌肉组织、神经组织或者创伤的愈合；促进或者改进受损伤组织的血液流动；或者降低受损伤组织中的感染率，所述方法包含给药需要其的患者治疗学有效量的有效量的根据权利要求31-35任一项、权利要求44-52任一项、权利要求5或者权利要求52的化合物或者根据权利要求54的药物组合物。56、根据权利要求31-35任一项、权利要求44-52任一项、权利要求51或者权利要求52的化合物在制备用于治疗以下疾病的药物中的用途生长激素缺乏(GHD);特纳综合征；Prader-Willi综合征(PWS);Noonan综合征；唐氏综合征；慢性肾疾病，青少年类风湿性关节炎；嚢性纤维化，接受HAART治疗的儿童中的HIV-感染(HIV/HALS儿童)；对于胎龄而言矮小的矮小儿童(SGA);具有出生体重极低(VLBW)但是SGA的儿童中的矮小身材；骨骼发育异常；hypochondroplasia;软骨发育不全；自发性矮小身材USS);成人中的GHD;长骨中或长骨的骨折，比如胫骨、腓骨、股骨、肱骨、桡骨、尺骨、锁骨、matacarpea、matatarsea和指头；海绵状多孔骨骼中的骨折或海绵状多孔骨骼的骨折，比如尾推、手掌和食品基底；肌腱或者韧带手术之后的患者，例如手、膝或者肩；具有或者经受distractionoteogenesis的患者；髋或者囊盘替换、半月板修理、脊柱制动术或者假肢固定后的患者，比如在膝、髋、肩、肘、手腕或者颌中进行；已经在其中固定入骨接合材料的患者，比如钉子、螺钉和板；未连接或者连接不正的骨折患者；osteatomia之后的患者，例如来自胫骨或者第一脚趾；移植物植入之后的患者；由创伤或者关节炎引起的膝中关节软骨变性；患有特納综合征的患者的骨质疏松症；男性骨质疏松症；慢性透析的成年患者(APCD);在APCD中营养不良相关的心血管疾病；APCD中恶病质的逆转；APCD中的癌症；APCD中的慢性抽象肺疾病；APCD中的HIV;患有APCD的老年人；APCD中的慢性肝病，APCD中的疲劳综合征；节段性回肠炎；削弱的肝功能；HIV感染的男性；短肠综合征；中心肥胖病；HIV-相关的脂肪营养不良综合征(HALS);男性不育症；主体选择性手术之后的患者；酒精/药物解毒或者神经学创伤；衰老；脆弱的老年人；骨关节炎；创伤性损伤的软骨；勃起机能障碍；纤维肉瘤；记忆疾病；抑郁症；创伤性脑损伤；蛛网膜下出血；极低出生体重；新陈代谢综合征；糖肾上腺皮质激素肌病；由于glucucorticoid治疗导致的儿童中的矮小身材；促进肌肉组织、神经组织或者创伤的愈合；促进或者改进受损伤组织的血液流动；或者降低受损伤组织中的感染率。全文摘要一种用于PEG化生长激素的方法，所述方法包含使生长激素与包含亲核试剂的胺反应，其进一步包含在TGase存在下的第一官能团以形成氨基转移化的生长激素，随后使所述氨基转移化的生长激素与已经用第二官能团官能化的PEG反应，其中对所述第一和第二官能团进行选择，使得它们能够反应以形成共价键。文档编号A61K38/00GK101365492SQ200680029853公开日2009年2月11日申请日期2006年6月15日优先权日2005年6月15日发明者F·Z·多沃尔德,L·F·伊弗森,N·L·约翰森申请人:诺沃-诺迪斯克保健股份有限公司