专利名称：：用于治疗与细胞因子信号传导相关的疾病和病症、牵涉与il-22和il-22r结合的抗体的组...的制作方法
技术领域：
：本发明涉及对于与细胞因子信号传导相关的疾病和病症的诊断和治疗有用的组合物和方法。
背景技术：
：多种疾病和病症与炎症相关。炎症是与炎性细胞(例如，白细胞)向损伤或感染的位点的募集相关的过程。炎症一般地保护躯体免于感染和损伤。然而，过度的或不当的炎症可具有有害的影响。自身免疫性病症，例如，通常触发引起正常身体组织破坏的炎症。炎症还与癌症有联系。参见，例如，Coussensetal.(2002)Nature420:860-867。例如，与炎性肠病(IBD)相关的慢性炎症与结肠癌发生强烈地相关。在炎性应答期间，某些炎性细胞产生促进血管发生的因子，降低细胞毒性T细胞的抗肿瘤活性，并i秀导DNA中的突变，从而创建促进肿瘤发展的环境。同上。IL-23是异二聚的细胞因子，其在自身免疫性/炎性病症、特别是慢性炎症中发挥显著作用。例如，小鼠中的研究揭示了，IL-23对于作为多发性硬化的模型的实验性变应性脑脊髓炎(脑的自身免疫性炎症)；作为类风湿性关节炎的模型的胶原诱导的关节炎；和迟发型超敏反应的发生是必需的。IL-23还起作用来维持已建立的结肠炎(IBD的一种形式)。IL-23的转基因表达引起全身性炎性应答，而且IL-23的失调引起湿渗性皮肤病(一种炎性皮肤疾患)。IL-23刺激独特的T细胞群体(Th!w7细胞)，其继而诱导IL-17和促炎性细胞因子的产生。对于IL-23在炎症和自身免疫性中的作用的综述，参见，例如Hunter(2005)Nat.Rev.Immunol.5:521-531;Holscher(2005)Curr.Opin.Invest.Drugs6:489-495。IL-23还显示了通过细胞毒性T细胞来降低肿瘤浸润和提高血管发生，从而促进肿瘤生长。Langowskietal.(2006)Nature442:461-465。发明概述提供了对于炎性病症和自身免疫性病症(例如，银屑病)的诊断和治疗有用的组合物和方法。进一步提供了对于调控IL-23或IL-22信号传导有用的组合物和方法。在此提供了本发明的这些和其他实施方案。本发明部分地基于一种信号传导途径的阐明，其中IL-23经由IL-22起作用，其通过诱导近来发现的辅助T细胞(Th纟田月包)子集即Th^7镨系的IL-22表达。在一个方面，提供了特异性结合IL-22的抗体，其中所述抗体是(a)由选自3F11.3(ATCC登记号PTA-7312)、杂交瘤11H4.4(ATCC登记号PTA-7315)和杂交瘤8E11.9(ATCC登记号PTA-7319)的杂交瘤产生的抗体；(b)(a)的抗体的亲和成熟的形式；(c)(a)或(b)的抗体的抗原结合片段；或(d)(a)、(b)或(c)的抗体的人源化的形式。在另一个方面，提供了特异性结合IL-22R的抗体，其中所述抗体是(a)由选自7E9(ATCC登记号PTA-7313)、杂交瘤8A12(ATCC登记号PTA-7318)和杂交瘤8H11(ATCC登记号PTA-7317)的杂交瘤产生的抗体；(b)(a)的抗体的亲和成熟的形式;(c)(a)或(b)的抗体的抗原结合片段；或(d)(a)、(b)或(c)的抗体的人源化的形式。在另一个方面，提供了治疗自身免疫性病症的方法，其中所述自身免疫性病症不是关节炎，所述方法包括向哺乳动物施用有效量的包含IL-22的拮抗剂的药用配制剂。在一个这样的实施方案中，所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22的抗体。在一个实施方案中，所述特异性结合IL-22的抗体是(a)由选自3F11.3(ATCC登记号PTA-7312)、杂交瘤11H4.4(ATCC登记号PTA-7315)和杂交瘤8E11.9(八丁(^登记号？丁八-7319)的杂交瘤产生的抗体；(b)(a)的抗体的亲和成熟的形式；(c)(a)或(b)的抗体的抗原结合片段；或(d)(a)、(b)或(c)的抗体的人源化的形式。在一个实施方案中，所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22R的抗体。在一个这样的实施方案中，所述特异性结合IL-22R的抗体是(a)由选自7E9(ATCC登记号PTA画7313)、杂交瘤8A12(ATCC登记号PTA-7318)和杂交瘤8H11(ATCC登记号PTA-7317)的杂交瘤产生的抗体；(b)(a)的抗体的亲和成熟的形式；(c)(a)或(b)的抗体的抗原结合片段；或(d)(a)、(b)或(c)的抗体的人源化的形式。在一个实施方案中，所述IL-22拮抗剂是IL-22BP。在一个实施方案中，所述自身免疫性病症是炎性肠病。在一个实施方案中，所述自身免疫性病症是银屑病。在一个实施方案中，所述方法进一步包括施用至少一种抗体，所述抗体选自特异性结合IL20Ra的抗体、特异性结合IL20Rb的抗体和特异性结合IL-22R的抗体。在一个实施方案中，所述方法进一步包括施用至少一种抗体，所述抗体选自特异性结合IL-22的抗体、特异性结合IL20Ra的抗体和特异性结合IL20Rb的抗体。在另一个方面，提供了治疗炎症的方法，其中所述炎症不是关节炎炎症，所述方法包括向哺乳动物施用有效量的包含IL-22的拮抗剂的药用配制剂。在一个实施方案中，所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22的抗体。在一个这样的实施方案中，所述特异性结合IL-22的抗体是(a)由选自3F11.3(ATCC登记号PTA-7312)、杂交瘤11H4.4(ATCC登记号PTA-7315)和杂交瘤8E11.9(ATCC登记号PTA-7319)的杂交瘤产生的抗体；(b)(a)的抗体的亲和成熟的形式；(c)(a)或(b)的抗体的抗原结合片段；或(d)(a)、(b)或(c)的抗体的人源化的形式。在一个实施方案中，所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22R的抗体。在一个这样的实施方案中，所述特异性结合IL-22R的抗体是(a)由选自7E9(ATCC登记号PTA-7313)、杂交瘤8A12(ATCC登记号PTA-7318)和杂交瘤8H11(ATCC登记号PTA-7317)的杂交瘤产生的抗体；(b)(a)的抗体的亲和成熟的形式；(c)(a)或(b)的抗体的抗原结合片段；或(d)(a)、(b)或(c)的抗体的人源化的形式。在一个实施方案中，所述IL-22拮抗剂是IL-22BP。在一个实施方案中，所述炎症是自身免疫性炎症。在一个实施方案中，所述炎症是皮肤炎症。在一个实施方案中，所述炎症是慢性炎症。在另一个方面，提供了抑制肿瘤发展的方法，所述方法包括向哺乳动物施用有效量的包含IL-22的拮抗剂的药用配制剂。在一个实施方案中，所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22的抗体。在一个这样的实施方案中，所述特异性结合IL-22的抗体是(a)由选自3F11.3(ATCC登记号PTA-7312)、杂交瘤11H4.4(ATCC登记号PTA-7315)和杂交瘤8E11.9(ATCC登记号PTA-7319)的杂交瘤产生的抗体；(b)(a)的抗体的亲和成熟的形式；(c)(a)或(b)的抗体的抗原结合片段；或(d)(a)、(b)或(c)的抗体的人源化的形式。在一个实施方案中，所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22R的抗体。在一个这样的实施方案中，所述特异性结合IL-22R的抗体是(a)由选自7E9(ATCC登记号PTA-7313)、杂交瘤8A12(ATCC登记号PTA-7318)和杂交瘤8H11(ATCC登记号PTA-7317)的杂交瘤产生的抗体；(b)(a)的抗体的亲和成熟的形式；(c)(a)或(b)的抗体的抗原结合片段；或(d)(a)、(b)或(c)的抗体的人源化的形式。在一个实施方案中，所述IL-22拮抗剂是IL-22BP。在另一个方面，提供了刺激生物学系统中IL-23介导的信号传导途径的方法，所述方法包括向所述生物学系统提供IL-22激动剂。在一个实施方案中，所述IL-22激动剂是IL-22。在另一个方面，提供了抑制生物学系统中IL-23介导的信号传导途径的方法，所述方法包括向所述生物学系统提供IL-22拮抗剂。在一个实施方案中，所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22的抗体。在一个实施方案中，所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22R的抗体。在另一个方面，提供了刺激Th,w7细胞功能的方法，所述方法包括使Th^7细胞暴露于IL-22激动剂。在一个实施方案中，所述IL-22激动剂是IL-22。在另一个方面，提供了抑制Th化-n细胞功能的方法，所述方法包括使ThL-n细胞暴露于IL-22拮抗剂。在一个实施方案中，所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22的抗体。在一个实施方案中，所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22R的抗体。附图简述图l显示了编码天然人类IL-22的cDNA的核苷酸序列(SEQIDNO:1)。图2显示了衍生自图1中所示SEQIDNO:l的编码序列的氨基酸序列(SEQIDNO:2)。图3显示了天然人类IL-22R的氨基酸序列(SEQIDNO:3)。图4显示了天然人类IL-22BP的氨基酸序列(SEQIDNO:4)。图5是如实施例1所描述的，所产生的所有IL-22抗体和它们的相应性质的列表。细胞内染色缩写为IC。图6显示了如实施例2所描述的，抗IL-22抗体能够阻断STAT3活化。图7显示了如实施例3描述的，三种特异性抗IL-22抗体以剂量依赖性方式阻断人类IL-22。图8显示了如实施例4描述的，三种特异性抗IL-22抗体能够以剂量依赖性方式阻断鼠IL-22。图9是如实施例5描述的，抗IL-22抗体对人类IL-22的亲和力的计算。图IO显示了如实施例6描述的，抗IL-22抗体检测IL-22的细胞内表达。图1l显示了如实施例6描述的，使用带标记物的抗IL-22抗体对IL-22的细胞内FACS染色。图12显示了如实施例7描述的，通过5'核酸酶分析测定的在鼠Thl细胞中IL-22的表达。图13显示了如实施例8描述的，通过5'核酸酶分析测定的在鼠y5T细胞中IL-22的表达。图14显示了如实施例9描述的，通过微阵列分析测定的在活化的人类T细胞中IL-22的表达。图15显示了如实施例IO描述的，通过FACS的IL-22在T细胞中的表达水平。图16显示了如实施例ll描述的，在表达IL-22R的293细胞上抗IL-22R抗体的测试。图17显示了如实施例12描述的，抗IL-22R抗体可以阻断STAT3"^艮告物构建体的IL-22诱导的表达。图18显示了如实施例13描述的，IL-22R和IL-10R2在原代角质形成细胞上的表达。图19显示了如实施例14描述的，IL-22诱导人类表皮的增厚。图20显示了如实施例14描述的，IL-22诱导角质形成细胞周转标志物细胞角蛋白16表达。图21显示了如实施例14描述的，用IL-22处理人类表皮引起了在银屑病中高度表达的基因牛皮癣素(psoriasin)表达的诱导。图22显示了如实施例15描述的，用IL-22处理角质形成细胞提高了几种基因的表达，包括牛皮癣素。图23显示了如实施例14描述的，通过用抗IL-22和抗IL-22R抗体处理降低了牛皮癣素表达。图24显示了如实施例14描述的，通过用抗IL-22和抗IL-22R抗体处理降低了表皮增厚。图25显示了如实施例14描述的，通过用抗IL-22和抗IL-22R抗体处理降低了表皮增厚。图26显示了如实施例16描述的，IL-23和IL-12诱导具有不同的组织学特征的表皮增厚。图27显示了如实施例17和18描述的，IL-23诱导IL-22的表达，而且IL-22诱导体内皮肤炎症和表皮增厚。图28显示了如实施例17描述的，IL-12和IL-23诱导不同的细胞因子集合的表达。图29显示了如实施例20描述的，用抗IL-22单克隆抗体处理显著地降低体内IL-23诱导的表皮棘层肥厚(acanthosis)。图30显示了如实施例20描述的，用于破坏小鼠中/丄-22基因的策略和确认了IL-22表达在IL-22-、鼠中不存在的证据。图31显示了如实施例20描述的，在IL-22缺陷小鼠中IL-23诱导的棘层肥厚被显著地降低了。图32显示了如实施例20描述的，IL-22缺陷对于IL-12诱导的棘层肥厚没有影响。图33显示了如实施例21描述的，IL-23诱导从多种IL-23活化的淋巴细胞产生IL-22。图34显示了如实施例22描述的，IL-22是来自11^.17语系的新的效应器细胞因子。图35显示了如实施例22描述的，IL-22和IL-17由相同的Th语系(ThIL.17)产生。图36显示了如实施例22描述的，在幼稚T细胞的活化时IL-23刺激IL-22产生。图37显示了如实施例23描述的，IL-19、IL-20、IL-22和IL-24诱导表皮增厚。图38显示了如实施例23描述的，IL-19、IL-20、IL-22和IL-24诱导的表皮棘层肥厚的量化。图39显示了如实施例24描述的，IL-19、IL-20和IL-22的受体的组分在人类角质形成细胞上表达。图40显示了如实施例24描述的，针对IL-19、IL-20和IL-22的受体组分的阻断性抗体降低牛皮癣素表达。图41显示了当组合使用时，针对IL20Ra和IL-22R的抗体有效地阻断IL-20诱导的牛皮癣素表达。发明详述I.定义术语"IL-22多肽"或"IL-22"指各种白介素-22多肽(在本领域还称为"白介素-22配体"或"IL-22L")。该术语涵盖天然序列IL-22多肽及其变体(在本文中有进一步定义)。本文中所描述的IL-22多肽可以从多种来源分离，诸如人的组织或其它来源，或者可以通过重组或合成方法制备。天然IL-22可以来自任何物种，例如鼠的("mlL-22")或人的("hlL-22")。术语"IL-22R多肽，，或"IL-22R"指白介素-22受体异二聚体或白介素-20受体异二聚体的多肽组分。该术语涵盖天然序列IL-22R多肽及其变体(在本文中有进一步定义)。本文中所描述的IL-22R多肽可以从多种来源分离，诸如人的组织或其它来源，或者可以通过重组或合成方法制备。天然IL-22R可以来自任何物种，例如鼠的("mlL-22R，，)或人的("hlL-22R")。天然序列IL-22R多肽在本领域还称为"IL-22R1"和"IL22RA"。"天然序列IL-22多肽"或"天然序列IL-22R多肽"指与衍生自自然界的相应IL-22或IL-22R多肽包含相同氨基酸序列的多肽。此类天然序列IL-22或IL-22R多肽可以从自然界分离，或者可以通过重组或合成手段生成。该术语明确涵盖天然存在的截短或分泌形式的特定IL-22或IL-22R多肽(例如缺少其相关信号肽的IL-22)、该多肽的天然存在变体形式(例如可变剪接形式)和天然存在等位变体。在本发明的各种实施方案中，本文中所披露的天然序列IL-22或IL-22R多肽是成熟的或全长的天然序列多肽。图2和图3分别显示了例示性的全长人IL-22和IL-22R。编码图2所示多肽的核酸显示于图1。起始和终止密码子在该图中以粗体和下划线显示。尽管附图中所披露的IL-22和IL-22R多肽序列显示为以本文中指定为第l位氨基酸的曱硫氨酸残基开始，想得到且有可能的是，可以采用位于图中第l位氨基酸上游或下游的其它曱硫氨酸残基作为IL-22或IL-22R多肽的起始氨基酸残基。"IL-22变体"、"IL-22R变体"、"IL-22变异多肽"或"IL-22R变异多肽，，意指与全长天然序列IL-22或IL-22R多肽序列具有至少约80%氨基酸序列同一性的上文所定义的活性IL-22或IL-22R多肽。通常，IL-22或IL-22R多肽变体与全长的或成熟的天然序列IL-22或IL-22R多肽序列将具有至少约80%的氨基酸序列同一性、或者至少约81%的氨基酸序列同一性、或者至少约82%的氨基酸序列同一性、或者至少约83%的氨基酸序列同一性、或者至少约84%的氨基^列同一性、或者至少约85%的氨基^列同一性、或者至少约86%的氨基#列同一性、或者至少约87%的氨基#列同一性、或者至少约88%的氨基酸序列同一性、或者至少约89。/。的氨基酸序列同一性、或者至少约90%的氨基酸序列同一性、或者至少约91%的氨基酸序列同一性、或者至少约92%的氨基酸序列同一性、或者至少约93%的氨基酸序列同一性、或者至少约94%的氨基^列同一性、或者至少约95%的氨基@^列同一性、或者至少约96%的氨基*列同一性、或者至少约97。/。的氨基^列同一性、或者至少约98%的氨基酸序列同一性、和或者至少约99。/。的氨基酸序列同一性。关于本文中所鉴定的IL-22或IL-22R多肽序列的"百分比(％)氨基酸序列同一性，，定义为对比序列并在必要时引入缺口以获取最大百分比序列同一性后，且不将任何保守替代视为序列同一性的一部分时，候选序列中与特定IL-22或IL-22R多肽序列中的氨基酸残基相同的氨基酸残基的百分率。为测定百分比氨基酸序列同一性目的的对比可以本领域技术范围内的多种方式进行，例如使用公众可得到的计算机软件，诸如BLAST、BLAST-2、ALIGN或Megalign(DNASTAR)软件。本领域技术人员可决定用于测量对比的适宜参数，包括对所比较序列全长获得最大对比所需的任何算法。对于氨基^列比较，给定氨基酸序列A相对于(to)、与(with)、或针对(against)给定氨基酸序列B的。/。氨基酸序列同一性(或者可表述为具有或包含相对于、与、或针对给定氨基酸序列B的某一。/。氨基酸序列同一性的给定氨基酸序列A)如下计算分数X/Y乘100其中X是由序列对比程序在该程序的A和B对比中评分为相同匹配的氨基酸残基数，且其中Y是B中的氨基酸残基总数。可以领会，若氨基酸序列A的长度与氨基酸序列B的长度不相等，则A相对于B的。/。氨基酸序列同一性将不等于B相对于A的。/。氨基酸序列同一性。作为使用这种方法计算％氨基酸序列同一性的例子，表2和3演示了如何计算指派为"比较蛋白质"的氨基S吏序列相对于指派为"IL-22或IL-22R"的氨基酸序列的°/。氨基酸序列同一性，其中"IL-22或IL-22R"代表感兴趣IL-22或IL-22R多肽的氨基酸序列，"比较蛋白质，，代表感兴趣"IL-22或IL-22R"多肽针对其进行比较的多肽的氨基酸序列，而"X"、"Y"和"Z"各自代表不同氨基酸残基。表2IL-22或IL-22RXXXXXXXXXXXXXXX(长度=15个氨基酸)比较蛋白质XXXXXYYYYYYY(长度=12个氨基酸)%氨基酸序列同一性=(两种多肽序列间相同匹配的氨基酸残基的数目)除以(IL-22或IL-22R多肽的氨基酸残基的总数)-5除以15=33.3%表3IL-22或IL-22RXXXXXXXXXX(长度=IO个氨基酸)比较蛋白质XXXXXYYYYYYZZYZ(长度=15个氨基酸)%氨基酸序列同一性=(两种多肽序列间相同匹配的氨基酸残基的数目)除以(IL-22或IL-22R多肽的氨基酸残基的总数)-5除以10=50%术语"IL-19"指来自任何脊推动物来源，包括哺乳动物，诸如灵长类(例如人和猴)和啮齿类(例如小鼠和大鼠)的任何天然IL-19，除非另有说明。该术语涵盖"全长的"、未加工的IL-19以及细胞内加工产生的任何形式IL-19。该术语还涵盖IL-19的天然存在变体，例如剪接变体、等位变体，和其它同工型(isoform)。该术语还涵盖维持IL-19的至少一种生物学活性的天然IL-19片段或变体。术语"IL-20"指来自任何脊推动物来源，包括哺乳动物，诸如灵长类(例如人和猴)和啮齿类(例如小鼠和大鼠)的任何天然IL-20，除非另有说明。该术语涵盖"全长的"、未加工的IL-20以及细胞内加工产生的任何形式IL-20。该术语还涵盖IL-20的天然存在变体，例如剪接变体、等位变体，和其它同工型(isoform)。该术语还涵盖维持IL-20的至少一种生物学活性的天然IL-20片段或变体。术语"IL-24"指来自任何脊推动物来源，包括哺乳动物，诸如灵长类(例如人和猴)和啮齿类(例如小鼠和大鼠)的任何天然IL-24，除非另有说明。该术语涵盖"全长的"、未加工的IL-24以及细胞内加工产生的任何形式IL-24。该术语还涵盖IL-24的天然存在变体，例如剪接变体、等位变体，和其它同工型(isoform)。该术语还涵盖维持IL-24的至少一种生物学活性的天然IL-24片段或变体。术语"IL-22BP"或"IL-22结合蛋白"在用于本文时指来自任何脊推动物来源，包括哺乳动物，诸如灵长类(例如人和猴)和啮齿类(例如小鼠和大鼠)的任何天然IL-22BP，除非另有说明。该术语涵盖"全长的"、未加工的IL-22BP以及细胞内加工产生的任何形式IL-22BP。该术语还涵盖IL-22BP的天然存在变体，例如剪接变体、等位变体，和其它同工型(isoform)。该术语还涵盖维持IL-22BP的至少一种生物学活性的天然IL-22BP片段或变体。天然IL-22BP在本领域中还称为"IL-22RA2"。术语IL-20Ra指IL-19受体异二聚体或IL-20受体异二聚体的多肽组分。该术语涵盖来自任何脊推动物来源，包括哺乳动物，诸如灵长类(例如人和猴)和啮齿类(例如小鼠和大鼠)的任何天然IL-20Ra,除非另有说明。该术语涵盖"全长的"、未加工的IL-20Ra以及细胞内加工产生的任何形式IL-20Ra。该术语还涵盖IL-20Ra的天然存在变体，例如剪接变体、等位变体，和其它同工型(isoform)。该术语还涵盖维持IL-20Ra的至少一种生物学活性的天然IL-20Ra片段或变体。天然IL-20Ra^本领域中还称为"IL-20R1"。术语IL-20Rb指IL-19受体异二聚体或IL-20受体异二聚体的多肽组分。该术语涵盖来自任何脊推动物来源，包括哺乳动物，诸如灵长类(例如人和猴)和啮齿类(例如小鼠和大鼠)的任何天然IL-20Rb，除非另有说明。该术语涵盖"全长的"、未加工的IL-20Rb以及细胞内加工产生的任何形式IL-20Rb。该术语还涵盖IL-20Rb的天然存在变体，例如剪接变体、等位变体，和其它同工型(isoform)。该术语还涵盖维持IL-20Rb的至少一种生物学活性的天然IL-20Rb片段或变体。天然IL-20Rb在本领域中还称为"IL-20R2"。术语"IL-10R2"指IL-22受体异二聚体或IL-20受体异二聚体的多肽组分。该术语涵盖来自任何脊推动物来源，包括哺乳动物，诸如灵长类(例如人和猴)和啮齿类(例如小鼠和大鼠)的任何天然IL-10R2。该术语涵盖"全长的"、未加工的IL-10R2以及细胞内加工产生的任何形式IL-10R2。该术语还涵盖IL-10R2的天然存在变体，例如剪接变体、等位变体，和其它同工型(isoform)。该术语还涵盖维持IL-10R2的至少一种生物学活性的天然IL-10R2片段或变体。天然IL-10R2在本领域中还称为"IL-10Rb"。"分离的"生物学分子，诸如本文中所披露的各种多肽、多核苷酸、和抗体，指已经鉴定且自其天然环境的至少一种成分分开和/或回收的生物学分子。"有活性的"或"活性"涉及IL-22或IL-22R时指天然IL-22或IL-22R的生物学和/或免疫学活性，其中"生物学"活性指由天然IL-22或IL-22R引起的，除诱导针对天然IL-22或IL-22R所拥有的抗原性表位的抗体生成的能力外的生物学功能。"免疫学"活性指诱导针对天然IL-22或IL-22R所拥有的抗原性表位的抗体生成的能力。术语"拮抗剂"以最广义使用，包括部分的或完全的阻断、抑制或中和多肽，诸如天然IL-22或IL-22R多肽的生物学活性的任何分子。"拮抗剂"还涵盖完全的或部分的抑制编码多肽的mRNA转录或翻译的分子。合适的拮抗剂分子包括例如拮抗性抗体或抗体片段；天然多肽；天然多肽的片段或氨基酸序列变体；肽；反义寡核苷酸；有机小分子；及编码多肽拮抗剂或拮抗性抗体的核酸。提及"一种"拮抗剂即涵盖单一拮抗剂或者两种或多种不同拮抗剂的组合。术语"激动剂"以最广义使用，包括部分的或完全的模拟多肽，诸如天然IL-22或IL-22R多肽的生物学活性的任何分子。"激动剂"还涵盖刺激编码多肽的mRNA转录或翻译的分子。合适的激动剂分子包括例如激动性抗体或抗体片段；天然多肽；天然多肽的片段或氨基酸序列变体；肽；反义寡核苷酸；有机小分子；及编码多肽激动剂或激动性抗体的核酸。提及"一种"激动剂即涵盖单一激动剂或者两种或多种不同激动剂的组合。"緩解，，或"减轻"(alleviation)指治疗性处理和预防性或防范性措施二者，其中目标是预防或减緩(减轻)所针对的病理疾患或病症。需要治疗的受试者包括那些早就患有病症的以及倾向于患上病症的或者要预防病症的。"长期"施用指与短期模式相反，以连续模式施用药剂，从而将初始治疗效果维持较长一段时间。"间歇"施用指不是无间断连续进行的治疗，而是本质上周期性的。为了治疗的目的，"哺乳动物"指归入哺乳类的任何动物，包括人，啮齿类(例如小鼠和大鼠)，和猴；家畜和牲畜；及动物园、运动、实验或宠物动物，诸如犬、猫、牛、马、绵羊、猪、山羊、兔、等。在有些实施方案中，哺乳动物选自人、啮齿类、或猴。"联合"一种或多种其它治疗剂的施用包括同时(共同)施用和任意次序的连续施用。"载体"在用于本文时包括药剂学可接受的载体、赋形剂或稳定剂，它们在所采用的剂量和浓度对暴露于其的细胞或哺乳动物是无毒的。通常，生理学可接受的载体是pH緩冲水溶液。生理学可接受载体的例子包括緩沖剂，诸如磷酸盐、柠檬酸盐和其它有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸；低分子量(少于约10个残基)多肽；蛋白质，诸如血清清蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，诸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，诸如EDTA;糖醇，诸如甘露醇或山梨醇；成盐反荷离子，诸如钠；和/或非离子表面活性剂，诸如TWEENTM、聚乙二醇(PEG)和PLURONICStm。"抗体"(Ab)和"免疫球蛋白"(Ig)是具有相似结构特征的糖蛋白。虽然抗体展现出对特定抗原的结合特异性，但是免疫球蛋白包括抗体和一般缺乏抗原特异性的其它抗体样分子二者。后一类多肽例如由淋巴系统以低水平生成而由骨髓瘤以升高的水平生成。术语"抗体"和"免疫球蛋白"以最广义互换使用，包括单克隆抗体(例如全长或完整单克隆抗体)、多克隆抗体、单价抗体、多价抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体，只要它们展现出期望的生物学活性)，而且还可以包括某些抗体片段(如本文中更为详细描述的)。抗体可以是嵌合的、人的、人源化的和/或亲和力成熟的。特异性结合特定抗原的抗体指能够以足够亲和力结合抗原，使得该抗体在靶向抗原中可用作诊断剂和/或治疗剂的抗体。优选的是，根据例如放射免疫测定法(RIA)的测量，此类抗体与非靶多肽的结合程度小于对靶抗原的结合的约10%。在某些实施方案中，结合靶抗原的抗体具有SlpM、Sl00nM、S10nM、SlnM、或^0.1nM的解离常数(Kd)。抗体的"可变区"或"可变域"指抗体重链或轻链的氨基末端结构域。重链的可变域可称为"VH"。轻链的可变域可称为"VL"。这些结构域一般是抗体的最易变部分且包含抗原结合位点。术语"可变的"指可变域中的某些部分在抗体间序列差异广泛且用于每种特定抗体对其特定抗原的结合和特异性的实情。然而，变异性并非均匀分布于抗体的整个可变域。它集中于轻链和重链可变域中称作互补决定区(CDR)或高变区(HVR)的三个区段。可变域中更加高度保守的部分称作框架区(FR)。天然重链和轻链的可变域各自包含四个FR，它们大多采取P-折叠片构象，通过形成环状连接且在有些情况中形成(3-折叠片结构一部分的三个CDR连接。每条链中的CDR通过FR非常接近的保持在一起，并与另一条链的CDR—起促成抗体的抗原结合位点的形成(参见KabatWa/.，S^we"c"o//Vofez'"sqf7mmimo/og7'ca//"ferest，第5版,NationalInstituteofHealth,Bethesda,MD(1991))。恒定域不直接参与抗体与抗原的结合，但展现出多种效应器功能，诸如抗体依赖性细胞的细胞毒性中抗体的参与。根据其恒定域的氨基酸序列，来自任何脊推动物物种的抗体(免疫球蛋白)的"轻链"可归入两种截然不同的型中的一种，称作卡巾白(K)和拉姆达(人)。根据其重链恒定域氨基酸序列，抗体(免疫球蛋白)可归入不同的类。免疫球蛋白分成五大类IgA、IgD、IgE、IgG和IgM,其中有些可进一步分为亚类(同种型)，例如IgG。IgG2、IgG3、IgG4、IgA,和IgA2。将与不同类的免疫球蛋白对应的重链恒定域分别称作a、S、s、Y和p。不同类别免疫球蛋白的亚基结构和三维构造是众所周知的，一般性描述于例如Abbasetal.，CellularandMol.Immunology,4thed.(2000)。抗体可以是抗体与一种或多种其它蛋白质或肽共价或非共价关联而形成的更大融合分子的一部分。术语"全长抗体"和"完整抗体"在本文中可互换使用，指基本上完整形式的抗体而非如下文所定义的抗体片段。该术语具体指重链包含Fc区的抗体。"抗体片段"只包含完整抗体的一部分，其中所述部分保留该部分存在于完整抗体中时通常与之有关的至少一项、多至大多^:或所有功能。在一个实施方案中，抗体片段包含完整抗体的抗原结合位点，如此保留结合抗原的能力。在另一个实施方案中，抗体片段，例如包含Fc区的抗体片段，保留通常与Fc区存在于完整抗体中时通常与之有关的至少一项生物学功能，诸如FcRn结合、抗体半衰期调控、ADCC功能和补体结合。在一个实施方案中，抗体片段是体内半衰期与完整抗体基本上相似的单价抗体。例如，这样的抗体片段可包含一个抗原结合臂且其与能够赋予该片段以体内稳定性的Fc序列相连。用木瓜蛋白酶消化抗体产生两个相同的抗原结合片段，称为"Fab"片段，各自具有一个抗原结合位点，及一个剩余的"Fc，，片段，其名称反映了它易于结晶的能力。胃蛋白酶处理产生一个F(ab')2片段，它具有两个抗原结合位点且仍能够交联抗原。"Fv"是包含完整抗原结合位点的最小抗体片段。在一个实施方案中，双链Fv种类由紧密、非共价结合的一个重链可变域和一个轻链可变域的二聚体组成。在单链Fv(scFv)种类中，一个重链可变域和一个轻链可变域可以通过柔性肽接头共价相连，使得轻链和重链在与双链Fv种类类似的"二聚体"结构中相结合。正是在这种构造中，各可变域的三个CDR相互作用而在VH-VL二聚体表面上确定了一个抗原结合位点。六个CDR共同赋予抗体以抗原结合特异性。然而，即使是单个可变域(或只包含对抗原特异的三个CDR的半个Fv)也具有识别和结合抗原的能力，只是亲和力低于完整结合位点。Fab片段包含重链和轻链可变域，而且还包含轻链的恒定域和重链的第一恒定域(CH1)。Fab'片段与Fab片段的不同之处在于重链CHl结构域的羧基末端增加了少数残基，包括来自抗体铰链区的一个或多个半胱氨酸。Fab'-SH是本文中对其中恒定域半胱氨酸残基携带游离硫醇基的Fab'的称谓。F(ab')2抗体片段最初是作为在Fab'片段之间有铰链半胱氨酸的成对Fab'片段生成的。还知道抗体片段的其它化学偶联。"单链Fv"或"scFv"抗体片段包含抗体的VH和VL结构域，其中这些结构域存在于一条多肽链上。一般而言，scFv多肽在VH与Vi结构域之间还包含多肽接头，使得scFv能够形成结合抗原的期望结构。关于scFv的综述参见Pluckthun，于T7ze尸/2cti7Wflco/ogyo/Mowoc/owa/爿加'6oW&s,vol.113，RosenburgandMoore编,Springer-Verlag，NewYork,pp.269-315(1994)。术语"双抗体"指具有两个抗原结合位点的小型抗体片段，该片段在同一条多肽链(Vh-Vl)中包含相连的重链可变域(VH)和轻链可变域(VO。通过使用过短的接头使得同一条链上的两个结构域之间不能配对，迫使这些结构域与另一条链的互补结构域配对，从而产生两个抗原结合位点。双抗体可以是二价的或双特异性的。双抗体更完整的记载于例如EP404,097;WO93/1161;Hudson"a/.(2003)Nat.Med.9:129-134;Hollinger"a/.，尸亂淑/.SW.90:6444-6448(1993)。三抗体(triabody)和四抗体(tetrabody)记载于Hudsona/.(2003)Nat.Med.9:129-134。术语"单克隆抗体，，在用于本文时指从一群基本上同质的抗体获得的抗体，即构成群体的各个抗体相同，除了可能以极小量存在的可能的突变，例如天然存在的突变。如此，修饰语"单克隆"表明抗体不是分立的抗体的混合物的特征。在某些实施方案中，此类单克隆抗体典型的包括包含结合耙物的多肽序列的抗体，其中靶物结合多肽序列是通过包括从众多多肽序列中选择单一靶物结合多肽序列在内的过程得到的。例如，选择过程可以是从众多克隆诸如杂交瘤克隆、噬菌体克隆或重组DNA克隆的集合中选择独特克隆。应当理解，所选择的靶物结合序列可进一步改变，例如为了提高对靶物的亲和力、将靶物结合序列人源化、提高其在细胞培养物中的产量、降低其在体内的免疫原性、创建多特异性抗体等，而且包含改变后的靶物结合序列的抗体也是本发明的单克隆抗体。与典型的包含针对不同决定簇(表位)的不同抗体的多克隆抗体制备物不同，单克隆抗体制备物的每种单克隆抗体针对抗原上的单一决定簇。在它们的特异性外，单克隆抗体制备物的优势在于它们通常未受到其它免疫球蛋白的污染。修饰语"单克隆"表明抗体从基本上同质的抗体群获得的特征，不应解释为要求通过任何特定方法来生产抗体。例如，将依照本发明^使用的单克隆抗体可通过多种技术来生成，包括例如杂交瘤法(例如Kohlerefa/.,A^fwe256:495(1975);Harlowefa/"^4"ri6od/es.'爿丄a6orato^Afawwa/，ColdSpringHarborLaboratoryPress,2nded.1988;Hammerling"a/"于Mowoc/owa/^""6oAesawdr-Ce〃/fy6"Woma5,563-681，Elsevier,N.Y"1981)、重组DNA法(参见例如美国专利No.4,816,567)、噬菌体展示技术(参见例如Clackson"a/.，Atoww352:624-628(1991);Marksa/.，《/Mo/.所o/.222:581-597(1992);SidhuWa/"JAfo/.所o/.338(2):299陽310(2004);LeeWa/.,/Mo/.Ao/.340(5):1073-1093(2004);Fellouse,尸rac.iVo/.^(cadOS^101(34):12467-12472(2004);Leea/.，//mmw"o/.MeAoA284(1-2):119-132(2004))、及用于在具有部分或整个人免疫球蛋白基因座或编码人免疫球蛋白序列的基因的动物中生成人或人样抗体的技术(参见例如WO98/24893;WO96/34096;WO96/33735;WO91/10741;Jakobovitsa/"尸rac.A^/.Jcad园90:2551(1993);Jakobovits"a/.，淑,362:255-258(1993);Bruggemanna/.,rear/"Tmw""a7:33(1993);美国专利No.5,545,807;5,545,806;5,569,825;5,625,126;5,633,425;5,661,016;Marks"a/.，历o/TecWogy10:779-783(1992);Lonberga/.,A^fww368:856-859(1994);Morrison,A^we368:812-813(1994);Fishwild&"/.,脂匿淑ec/wo/.14:845-851(1996);Neuberger,jVafweB/ofec/zwo/.14:826(1996);LonbergandHuszar，Twferw./麵画/.13:65-93(1995))。单克隆抗体在本文中明确包括"嵌合，，抗体，其中重链和/或轻链的一部分与衍生自特定物种或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，而链的剩余部分与衍生自另一物种或属于另一抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，以及此类抗体的片段，只要它们展现出期望的生物学活性(美国专利No.4，816，567;MorrisonWa/.,尸rac.A^/.爿caof.5W.C/SJ81:6851-6855(1984》。非人(例如鼠)抗体的"人源化"形式指最低P艮度包含衍生自非人免疫球蛋白的序列的嵌合抗体。在一个实施方案中，人源化抗体指人免疫球蛋白(受体抗体)中的高变区残基用具有期望特异性、亲和力和/或能力的非人物种(供体抗体)诸如小鼠、大鼠、兔或非人灵长类的高变区残基替换的免疫球蛋白。在有些情况中，将人免疫球蛋白的框架区(FR)残基用相应的非人残基替换。此外，人源化抗体可包含在受体抗体或供体抗体中没有找到的残基。进行这些修饰可以是为了进一步改进抗体的性能。一般而言，人源化抗体将包含至少一个、通常两个基本上整个如下可变域，其中所有或基本上所有高变环对应于非人免疫球蛋白的高变环，且所有或基本上所有FR是人免疫球蛋白序列的FR。人源化抗体任选还将包含至少部分免疫球蛋白恒定区(Fc)，通常是人免疫球蛋白的恒定区。更多细节参见Jones"a/.，321:522-525(1986);Riechmann"a/"胸,332:323-329(1988);Presta,C匿5"/rw".AW.2:593-596(1"2)。还可参见以下综述及其引用的参考文献VaswaniandHamilton,j〃ergy,/IsAma&/wwwwo/.1:105-115(1998);Harris,iSbc.7hmy"Wora23:1035-1038(1995);HurleandGross,CWk<9p.Bz.otec/z.5:428-433(1994)。"人抗体"指拥有与由人生成的抗体的氨基酸序列对应的氨基酸序列和定义明确排除包含非人抗原结合残基的人源化抗体。根据其重链恒定域的氨基酸序列，免疫球蛋白可归入不同的类。免疫球蛋白有五大类IgA、IgD、IgE、IgG和IgM,其中有些可进一步分为亚类(同种型)，例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgAl和IgA2。"亲和力成熟的'，抗体指在抗体的一个或多个HVR中具有一处或多处改抗体。在一个实施方案中，亲和力成熟的抗体具有纳摩尔或甚至皮摩尔量级的对靶抗原的亲和力。亲和力成熟的抗体可通过本领域已知规程来生成。Marksef<a/.，所o/Tec/z"o/ogy10:779-783(1992)记载了通过VH和VL结构域改组进行的亲和力成熟。以下文献记载了HVR和/或框架残基的随才几诱变Barbas&o/.,iVoc.7VaA^cad91:3809-3813(1994);Schier&a/.,Gewe169:147-155(1995);Yelton"a/"J/wmw"o/.155:1994-2004(1995);JacksonWa/.，《//mmw"o/.154(7):3310-9(1995);Hawkins"a/.，《/Mo/.历o/.226:889-896(1992)。"阻断性"抗体、"中和性"抗体或"拮抗性"抗体指抑制或降低其所结合的抗原的生物学活性的抗体。此类抗体可实质性的或完全的抑制抗原的生物学活性。"激动性抗体"在用于本文时指部分的或完全的;f莫拟感兴趣多肽的生物学活性的抗体。抗体"效应器功能"指那些可归于抗体Fc区(天然序列Fc区或氨基酸序列变体Fc区)且随抗体同种型而变化的生物学活性。抗体效应器功能的例子包括Clq结合和补体依赖性细胞毒性；Fc受体结合；抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC);吞噬作用；细胞表面受体(例如B细胞受体)下调；和B细胞活化。"结合亲和力，，通常指分子(例如抗体)的单一结合位点与其结合配偶体(例如抗原)之间全部非共价相互作用总和的强度。除非另有说明，在用于本文时，"结合亲和力"指反映结合对的成员(例如抗体与抗原)之间l:l相互作用的内在结合亲和力。分子X对其配偶体Y的亲和力通常可用解离常数(Kd)来表述。亲和力可通过本领域知道的常用方法来测量，包括本文中所描述的。低亲和力抗体通常緩慢的结合抗原且趋于容易解离，而高亲和力抗体通常更快速的结合抗原且趋于保持更长时间的结合。本领域知道测量结合亲和力的多种方法，其中任一种都可用于本发明的目的。下文描述了具体的示例性实施方案。在一个实施方案中，依照本发明的"Kd"或"Kd值"是通过如下测定法所述来测量的。通过在存在未标记抗原的滴定系列的条件下，用最小浓度的1251标记抗原平衡Fab，然后用抗Fab抗体包被的平板捕捉结合的抗原来测量Fab对抗原的溶液结合亲和力(Chen,etal.，JMolBiol293:865-881(1999》。为了确定测定条件，用50mM碳酸钠(pH9.6)中的5^ig/ml捕捉用抗Fab抗体(CappelLabs)包被微量滴定板(Dynex)过夜，随后用PBS中的2%(w/v)牛血清清蛋白在室温(约23。C)封闭2-5小时。在非吸附平板(Nunc存269620)中，将100pM或26pM[1251]-抗原与连续稀释的目的Fab混合(例如与Prestaetal.，CancerRes.57:4593-4599(1997)中抗VEGF抗体，Fab-12的评估一致)。然后将目的Fab保温过夜；不过，保温可持续更长时间(例如65个小时)以保证达到平衡。此后，将混合物转移至捕捉板以进行室温保温(例如l小时)。然后除去溶液，并用含0.1%Tween-20的PBS洗板8次。平板干燥后，加入150pl/孔闪烁液(MicroScint-20;Packard),然后在Topcount伽马计数器(Packard)上对平板计数IO分钟。选择各Fab给出小于或等于最大结合之20%的浓度用于竟争性结合测定法。依照另一实施方案，Kd或Kd值是通过表面等离振子共振测定法使用BIAcoreTM-2000或BIAcoreTM-3000(BIAcore，Inc.，Piscataway,NJ)在25。C使用固定化抗原CM5芯片在约10个响应单位(RU)测量的。简而言之，依照供应商的说明书用盐酸N-乙基-N，-(3-二曱基氨基丙基)-碳化二亚胺(EDC)和N-羟基BIAcoreInc.)。用10mM乙酸钠pH4.8将抗原稀释至5iig/ml(约0.2^M),然后以5|11/分钟的流速注入至获得约10个响应单位(RU)的偶联蛋白质。注入抗原后，注入1M乙醇胺以封闭未反应基团。为了进行动力学测量，在25。C以约25iil/分钟的流速注入在含0.05%Tween-20的PBS(PBST)中两倍连续稀释的Fab(0.78nM至500nM)。使用简单一对一朗格缪尔(Langmuir)结合模型(BIAcoreEvaluationSoftwareversion3.2)通过同时拟合结合和解离传感图计算结合速率(kon)和解离速率(koff)。平衡解离常数(Kd)以比率koff/k。n计算。参见例如Chen，Y.，etal.，JMolBiol293:865-881(1999)。如果根据上文表面等离振子共振测定法，结合速率超过1(^NT1s"，那么结合速率可使用荧光淬灭技术来测定，即根据分光计诸如配备了断流装置的分光光度计(astop-flow叫uippedspectrophometer)(AvivInstruments)或8000系歹'JSLM-Aminco分光光度计(ThermoSpectronic)中用搅拌比色杯的测量，在存在浓度渐增的抗原的条件下，测量PBS，pH7.2中的20nM抗抗原抗体(Fab形式)在25。C的荧光发射强度(激发二295nm;发射二340nm，16nm带通)的升高或降低。依照本发明的"结合速率，，(on画rate,rateofassociation,associationrate)或"k。n，，也可如上所述使用BIAcoreTM-2000或BIAcoreTM-3000系统(BIAcore,Inc.,Piscataway,NJ)来测定。"分离的，，抗体指已经鉴定且自其天然环境的一种成分分开和/或回收的抗体。其天然环境的污染性成分指将会干扰该抗体的诊断或治疗用途的物质，可包括酶、激素、和其它蛋白质性质或非蛋白质性质的溶质。在优选的实施方案中，将抗体纯化至(l)根据Lowry法的测定，抗体重量超过95%,最优选重量超过99%，(2)足以通过使用转杯式测序仪获得至少15个残基的N-末端或内部氨基酸序列的程度，或(3)根据还原性或非还原性条件下的SDS-PAGE及使用考马斯蓝或优选的银染色，达到同质。既然抗体天然环境的至少一种成分不会存在，那么分离的抗体包括重组细胞内的原位抗体。然而，分离的抗体通常将通过至少一个纯化步骤来制备。术语"标记物"在用于本文时指与某分子(诸如核酸、多肽、或抗体)直接或间接偶联以生成"经过标记的/带标记物的"分子的可检测化合物或组合物。标记物可以是自身可检测的(例如放射性同位素标记物或荧光标记物)，或者在酶标记物的情况中，可催化底物化合物或组合物发生化学改变，产生可检测的产物。"固相"意指某分子(诸如核酸、多肽或抗体可粘着其上的非水性基质。本文中所涵盖的固相的例子包括那些部分或完全由玻璃(例如可控孔径玻璃)、多糖(例如琼脂糖)、聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、聚乙烯醇和聚硅氧烷(silicone)制成的固相。在某些实施方案中，根据语境，固相可包括测定板的孔；在其它实施方案中，它指纯化柱(例如亲和层析柱)。此术语还包括离散颗粒的不连续固相，诸如美国专利No.4，275,149中所记载的。"脂质体"指由各种类型的脂质、磷脂和/或表面活性剂构成的，可用于对哺乳动物投递药物(诸如核酸、多肽、抗体、激动剂或拮抗剂)的小嚢泡。脂质体的成分通常排列成双层形式，与生物膜的脂质排列相似。"小分子"或"有机小分子"在本文中定义为分子量小于约500道尔顿的有机分子。结合靶多肽的"寡肽"指能够以足够亲和力结合靶多肽，使得该寡肽在靶向多肽中可用作诊断剂和/或治疗剂的寡肽。在某些实施方案中，根据例如表面等离振子共振测定法的测量，寡肽与无关的非靶多肽的结合程度小于该寡肽对靶多肽的结合的约10%。在某些实施方案中，寡肽以^lMM、Sl00nM、SlOnM、SlnM、或^0.1nM的解离常数(Kd)结合靶多肽。结合靶多肽的"有机分子，，指除本文中所定义的寡肽或抗体以外，能够以足够亲和力结合靶多肽，使得该有机分子在靶向多肽中可用作诊断剂和/或治疗剂的有机分子。在某些实施方案中，根据例如表面等离振子共振测定法的测量，有机分子与无关的非靶多肽的结合程度小于该有机分子对靶多肽的结合的约10%。在某些实施方案中，有机分子以^lpM、SlOOnM、兰10nM、SlnM、或^0.1nM的解离常数(Kd)结合靶多肽。"生物学系统，，指包含享有共同信号传导途径的哺乳动物细胞的体外、回体、或体内系统。术语"免疫相关疾病"指哺乳动物中由哺乳动物免疫系统成分引起、介导、或以其它方式促成发病的疾病。还包括刺激或干预免疫应答对疾病发展具有改善作用的疾病。该术语包括免疫介导的炎性疾病、非免疫介导的炎性疾病、传染病、免疫缺陷病、和瘤形成。术语"T细胞介导的疾病"指其中T细胞直接或间接介导或以其它方式促成哺乳动物发病的疾病。T细胞介导的疾病可能与细胞介导的效应、淋巴因子介导的效应等有关，甚至与B细胞有关的效应，如果B细胞得到剌激的话，例如受到由T细胞分泌的淋巴因子的刺激。在用于本文时，术语"银屑病"定义为特征为主要发生于肘、膝、头皮、或躯干的有范围限制的(circumscribed)、离散的和汇合的、微红的、银色鳞状斑丘渗爆发的疾患。术语"胂瘤"在用于本文时指所有赘生性细胞生长和增殖，无论是恶性的或者是良性的，及所有癌前的和癌的细胞和组织。术语"癌症"、"癌性"、"细胞增殖性病症"、"增殖性病症"和"肿瘤"在本文中提到时并不互相排斥。术语"肺瘤发^/进展"指肿瘤的生长和/或增殖。术语"癌症"和"癌性"指向或描述哺乳动物中特征通常为细胞生长/增殖不受调控的生理疾患。癌症的例子包括但不限于癌、淋巴瘤(例如何杰金氏(Hodgkin)淋巴瘤和非何杰金氏淋巴瘤)、母细胞瘤、肉瘤和白血病。此类癌症的更具体例子包括鳞状细胞癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、肺的腺癌、肺的鳞癌、腹膜癌、肝细胞癌、胃肠癌、胰腺癌、胶质瘤、宫颈癌、卵巢癌、肝癌(livercancer)、膀胱癌、肝瘤(hepatoma)、乳腺癌、结肠癌、直肠癌、胃癌、子宫内膜癌或子宫癌、唾液&i癌、肾癌、肝癌(livercancer)、前列腺癌、外阴癌、曱状腺癌、肝癌(hepaticcarcinoma)、白血病和其它淋巴增殖性病症、及各种类型的头和颈癌。"自身免疫性病症"或"自身免疫(性)"指其中发生了针对身体自己组织的体液或细胞介导的免疫应答的任何疾患。"IL-23介导的自身免疫性病症"指由IL-23活性引起的、维持的、或加剧的任何自身免疫性病症。"炎症，，指损伤或感染部位白细胞的积累和血管的扩张，典型的引起疼痛、肿胀、和发红。"慢性炎症"指引起炎症的原因持续存在且难以或不可能消除的炎症。"自身免疫性炎症"指与自身免疫性病症有关的炎症。"关节炎炎症"指与关节炎有关的炎症。"炎性肠病"或"IBD"指特征为胃肠道炎症的慢性病症。IBD涵盖溃疡性结肠炎，其影响大肠和/或直肠，及克罗恩氏病，其可以影响整个胃肠系统，但更常见的是影响小肠(回肠)和可能的大肠。"关节炎"指关节的炎症，包括但不限于骨关节炎、痛风、感染相关关节炎、莱特尔氏(Reiter)综合征关节炎、及与自身免疫性病症有关的关节炎，诸如类风湿性关节炎、4艮屑病关节炎、狼疮相关关节炎、脊推关节炎、和硬皮病相关关节炎。术语"有效量"指某分子(例如核酸、多肽、激动剂、或拮抗剂)导致具体所述目的实现的浓度或量。"有效量，，可以凭经验来确定。"治疗有效量"指某分子有效实现所述治疗效果的浓度或量。此量也可以凭经验来确定。术语"细胞毒剂，，在用于本文时指抑制或阻止细胞功能和/或引起细胞破坏的物质。该术语意图包括放射性同位素(例如I131、I125、Y卯和Re186)、化疗剂、和毒素诸如细菌、真菌、植物或动物起源的酶活毒素或其片段。"化疗剂"指可用于治疗癌症的化学化合物。化疗剂的例子包括阿霉素(adriamycin)、多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、5-氟尿。密咬(5-fluorouracil)、阿糖胞苷(cytosinearabinoside)("Am-C")、环磷酰胺(cyclophosphamide)、塞替p底(thiotepa)、白消安(busulfan)、cytoxin、类紫杉醇(taxoid)例i口巾白利4也塞(paclitaxel)(Taxol，Bristol-MyersSquibbOncology,Princeton,NJ)和多西他塞(doxetaxel)(Taxotere，Rhone-PoulencRorer,Antony,France)、toxotere、曱氨虫策呤(methotrexate)、顺柏(cisplatin)、美法仑(melphalan)、长春石威(vinblastine)、博来霉素(bleomycin)、依托泊香(etoposide)、异磷酰胺(ifosfamide)、丝裂霉素C(mitomycinC)、米托蒽S昆(mitoxantrone)、长春新石咸(vincristine)、长春瑞;宾(vinorelbine)、卡4白(carboplatin)、替尼泊香(teniposide)、道诺霉素(daunomycin)、洋红霉素(carminomycin)、氨基喋呤(aminopterin)、放线菌素D(dactinomycin)、丝裂霉素(mitomycins)、埃斯波霉素(esperamicins)(见美国专利No.4,675,187)、美法仑(melphalan)及其它相关氮芥(nitrogenmustards)。该定义还包括作用为调节或抑制激素对肿瘤的作用的激素剂，诸如他莫昔芬和奥那司酮。"生长抑制剂"在用于本文时指在体外或在体内抑制细胞，尤其是过表达本文中所鉴定的任何基因的癌细胞生长的化合物或组合物。如此，生长抑制剂是显著降低处于S期的过表达所述基因的细胞百分比的药剂。生长抑制剂的例子包括阻断细胞周期行进(处于S期以外的位置)的药剂，诸如诱导G1停滞和M期停滞的药剂。经典的M期阻断剂包括长春药类(vincas)(长春新碱(vincristine)和长春碱(vinblastine))、泰素(taxol)、和拓朴异构酶II抑制剂诸如多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、柔红霉素(daunorubicin)、依托泊苦(etoposide)和博来霉素(bleomycin)。那些阻滞G1的药剂也溢出进入S期停滞，例如DNA烷化剂类诸如他莫昔芬(tamoxifen)、泼尼松(prednisone)、达卡巴噪(dacarbazine)、双氯乙基曱胺(mechlorethamine)、顺铂(cisplatin)、曱氨喋呤(methotrexate)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)和ara-C。更多信息可参见77;eMo/ecw/ar5as^o/Ca"cer,MendelsohnandIsrael编,第l章,题为"Cellcycleregulation,oncogenes,andantineoplasticdrugs",Murakamia/.,WBSaunders,Philadelphia(1995),尤其是第13页。术语"细胞因子"是由一种细胞群释放，作为细胞间介质作用于另一细胞群的蛋白质的通称。此类细胞因子的例子有淋巴因子、单核因子和传统的多肽激素。细胞因子包括生长激素，诸如人生长激素、N-曱硫氨酰人生长激素和牛生长激素；曱状旁腺素；曱状腺素；胰岛素；胰岛素原；松驰素；松驰素原；糖蛋白激素类，诸如促卵泡激素(FSH)、促曱状腺激素(TSH)和促黄体激素(LH);肝生长因子；成纤维细胞生长因子；促乳素；胎盘催乳激素；肿瘤坏死因子-a和-(3;穆勒氏(Mullerian)抑制性物质；小鼠促性腺激素相关肽；抑制素；激活素；血管内皮生长因子；整联蛋白；血小板生成素(TPO);神经生长因子，诸如NGF-p;血小板衍生生长因子；转化生长因子(TGF)，诸如TGF-a和TGF-P;胰岛素样生长因子-I和-II;红细胞生成素(EPO);骨诱导因子(osteoinductivefactor);干扰素，诸如干扰素-a、-卩和-y;集落刺激因子(CSF)，诸如巨噬细胞CSF(M-CSF)、粒细胞-巨噬细胞CSF(GM-CSF)和粒细胞CSF(G-CSF);白介素(IL),诸如IL画1、IL-la、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-ll、IL-12;肿瘤坏死因子，诸如TNF-a或TNF-卩；及其它多肽因子，包括LIF和kit配体(KL)。在用于本文时，术语细胞因子包括来自天然来源或来自重组细胞培养物的蛋白质及天然序列细胞因子的生物学活性等效物。在用于本文时，术语"炎性细胞"指增强炎性应答的细胞，诸如单个核细胞、嗜曙红细胞、巨噬细胞和多形核嗜中性细胞(PMN)。H.本发明的组合物和方法A.IL-22或IL-22R多核苷酸和多肽本发明提供了分离的IL-22或IL-22R多肽和编码这些多肽的分离的核苷酸序列。IL-22或IL-22R多肽涵盖天然的全长的或成熟的IL-22或IL-22R多肽以及IL-22或IL-22R变体。IL-22或IL-22R变体可以通过向IL-22或IL-22RDNA中导入合适的核苷酸改变和/或通过合成期望的IL-22或IL-22R多肽来制备。本领域技术人员将领会，氨基酸变化可能改变IL-22或IL-22R的翻译后加工，诸如改变糖基化位点的数目或位置或改变膜锚定特征。如在此描述的，在天然IL-22或IL-22R中或在IL-22或IL-22R的各个结构域中的变异可以通过，例如，使用保守性和非保守性突变的任何技术和原则，例如美国专利No.5,364，934中所列举的来产生。变异可以是编码IL-22或IL-22R的一个或多个密码子的替代、删除或插入，其引起与天然序列IL-22或IL-22R相比IL-22或IL-22R的氨基酸序列中的变化。任选的，所述变异是在IL-22或IL-22R的一个或多个结构域中至少一个氨基酸用任何其他氨基酸替代。确定哪个氨基酸残基可以被插入、替代或删除而不会不利地影响期望活性的指导可以通过比较IL-22或IL-22R的序列与同源的已知蛋白分子的序列、并最小化在高同源性区域中进行的氨基酸序列改变的数目来发现。氨基酸替代可以是一个氨基酸用具有相似结构和/或化学性质的另一个氨基酸替换的结果，诸如用丝氨酸替换亮氨酸，即，保守性氨基酸替换。插入或删除可以任选地在约1到5个氨基酸的范围内。通过在序列中系统性地产生氨基酸的插入、删除或替代并对产生的变体测试由全长或成熟天然序列展现的活性，可以确定容许的变异。在特定的实施方案中，感兴趣的保守性替代在表6中优选替代表头下显示。如果这种替代引起生物学活性的改变，那么引入更为实质性的改变，在表6中称为例示替代，或下文对于氨基酸种类所进一步描述的，并筛选产物。<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>IL-22或IL-22R多肽的功能或免疫学身份中的实质性修饰可通过选择在保持以下方面的效果上显著不同的替代来完成(a)替代区域的多肽主链的结构，例如作为折叠片或螺旋构象，(b)靶位点处分子的电荷或疏水性，或(c)侧链的体积。基于共同的侧链特性，可以将天然存在残基如下分组(1)疏水性的正亮氨酸、met、ala、val、leu、ile;(2)中性、亲K性的cys、ser、thr;(3)酸性的asp、glu;(4)减性的asn、gln、his、lys、arg;(5)影响链取向的残基:gly、pro;和(6)芳香力臭的trp、tyr、phe。非保守性替代需要交换这些类别或其他类别之一的成员。这种替代的残基也可以被导入保守性替代位点，或更优选的，导入其余的(非保守性)位点。可以使用本领域已知的方法产生变异，诸如可以对克隆的DNA进行寡核苷酸介导的(定点)诱变、丙氨酸扫描和PCR诱变。定点诱变[Carteretal.,Nucl.AcidsRes"13:4331(1986);Zolleretal.，Nucl.AcidsRes"10:6487(1987)]、盒式诱变[Wellsetal.,Gene，34:315(1985)]、限制性选择诱变[Wellsetal.,Philos.Trans.R.Soc.LondonSerA，317:415(1986)]或其他已知的技术来产生IL-22或IL-22R变体DNA。在此还提供了IL-22或IL-22R多肽片段。这些片段可以是在N-末端或C-末端截短的，或可以缺少内部残基，例如，当与全长天然蛋白质相比较时。某些片段缺乏对于IL-22或IL-22R多肽的期望生物学活性非关键的氨基酸残基。因而，在某些实施方案中，IL-22或IL-22R的片段是有生物学活性的。在某些实施方案中，全长IL-22的片段缺少N-末端信号肽序列。在某些实施方案中，全长IL-22R的片段是IL-22R的可溶形式，其不是膜结合的，例如，缺少跨膜结构域的IL-22R的形式。例如，人类IL-22R的可溶形式可以缺少SEQIDNO:3的约氨基酸229-251的所有的或实质性部分的跨膜结构域。IL-22或IL-22R的共价修饰被包括在本发明的范围内。一种类型的共价修饰包括使IL-22或IL-22R多肽的目标氨基酸残基与有机衍生化试剂起反应，所述试剂能够与IL-22或IL-22R的选定的侧链或N-或C-末端残基起反应。使用双功能试剂衍生化是有用的，例如，对于将IL-22或IL-22R交联至水不溶性的支持基质或表面，用于纯化抗IL-22或IL-22R抗体的方法，反之亦然。通常使用的交联剂包括，例如，1，1-二(重氮乙酰基)-2-苯乙烷、戊二醛、N-羟基琥珀酰亚胺酯例如4-叠氮水杨酸的酯、同双功能亚氨酸酯包括双琥珀酰亚胺酯诸如3,3'-二疏代二(琥珀酰亚胺基丙酸酯)、双功能马来酰亚胺诸如二-N-马来酰亚胺基-l，8-辛垸、和试剂诸如3-[(p-叠氮苯基)二硫代]亚氨基丙酸曱酯。其他修饰包括谷氨酰胺酰基和天冬酰胺酰基残基分别向相应的谷氨酰和天冬氨酰残基的脱酰胺作用，脯氨酸和赖氨酸的羟基化作用，丝氨酰或苏氨酰残基的羟基的磷酸化，赖氨酸、精氨酸和组氨酸侧链的a氨基的曱基化[T.E.Creighton，Proteins:StructureandMolecularProperties,W,H.Freeman&Co.，SanFrancisco,pp.79-86(1983)]，N-末端胺的乙酰化和任何C-末端羧基的酰胺化。包括在本发明的范围内的IL-22或IL-22R多肽的另一种共价修饰包含改变多肽的天然糖基化模式。"改变天然的糖基化模式"在此意指删除天然序列IL-22或IL-22R中发现的一个或多个碳水化合物模块(通过除去&出的糖基化位点，或通过化学的和/或酶学的方法删除糖基化)，和/或添加天然序列IL-22或IL-22R中不存在的一个或多个糖基化位点。此外，该用语包括在天然蛋白质的糖基化方面的定性改变，包括在存在的各种碳水化合物模块的性质和比例方面的改变。本发明的IL-22或IL-22R多肽也可以以一定方式修饰来形成嵌合分子，其包含与另一个异源多肽或氨基酸序列融合的IL-22或IL-22R。在一个实施方案中，嵌合分子包含IL-22或IL-22R与标签多肽的融合物，该标签多肽提供了抗标签抗体可以选择性结合的表位。表位标签一般置于IL-22或IL-22R的氨基或羧基末端。IL-22或IL-22R的这种带表位标签的形式的存在可以使用针对所述标签多肽的抗体来检测。并且，提供表位标签使得IL-22或IL-22R可容易地通过使用抗标签抗体或其它结合表位标签的亲和基质的亲和纯化来纯化。各种标签多肽和它们相应的抗体是本领域公知的。实例包括聚组氨酸(poly-his)或聚组氨酸-甘氨酸(poly-his-gly)标签；流感HA标签多肽和它的抗体12CA5[Fieldetal，Mol.Cell.Biol,8:2159-2165(1988)];c-myc标签和它的抗体8F9、3C7、6E10、G4、B7和9E10[Evanetal.，MolecularandCellularBiology,5:3610-3616(I985)];以及单纯疱渗病毒糖蛋白D(gD)标签和它的抗体[Paborskyetal"ProteinEngineering,3(6):547画553(1990)]。其他的标签多肽包括Flag肽[Hoppetal.,BioTechnology，6:1204-1210(1988)];KT3表位肽[Martinetal.,Science,255:192-194(1992)];a-微管蛋白表位肽[Skinneretal.,J.Biol.Chem.，266:15163-15166(1991)];和T7基因10蛋白肽标签[Lutz-Freyermuthetal,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,87:6393-6397(1990)]。在另一个实施方案中，嵌合夯子可以包含IL-22或IL-22R多肽与免疫球蛋白或免疫球蛋白的特定区域的融合物。对于二价形式的嵌合分子(也称为"免疫粘附素")，这种融合物可以是IgG分子的Fc区。Ig融合物优选的包括可溶形式的IL-22或IL-22R多肽代替Ig分子内至少一个可变区的替代。在一个特别优选的实施方案中，免疫球蛋白融合物包括IgGl分子的铰链、CH2和CH3，或铰链、CH1、CH2和CH3区。关于免疫球蛋白融合物的生产也参见1995年6月27日授权的美国专利No.5,428,130。1.IL-22或IL-22R的制备IL-22或IL-22R的制备可以通过常规的重组方法，例如，培养用含编码IL-22或IL-22R的核酸的载体转化或转染的细胞，所述核酸如图l中所示的核酸所例示的，其编码IL-22。还提供了包含任何这样的载体的宿主细胞。举例来说，宿主细胞可以是CHO细胞、大肠杆菌或酵母。进一步提供了生产任何在此描述的多肽的方法，包括在适合于表达期望的多肽的条件下培养宿主细胞，并从细胞培养物回收期望的多肽。在其他实施方案中，本发明提供了嵌合分子，其包含融合有异源多肽或氨基酸序列的任何在此描述的多肽。这种嵌合分子的实例包括融合有表位标签序列或免疫球蛋白Fc区的任何在此描述的多肽。当然，设想了本领域公知的可选择的方法也可被用来制备IL-22或IL-22R。例如，IL-22或IL-22R序列、或其部分可以通过利用固相技术的直接肽合成来产生[参见，例如Stewartetal.，Solid-PhasePeptideSynthesis,W.H,FreemanCo.,SanFrancisco,CA(1969);Merrifield,J.Am.Chem.Soc,85:2149-2154(1963)]。可以利用人工技术或通过自动化进行体外蛋白质合成。举例来说，可以利用AppliedBiosystems肽合成仪(FosterCity,CA)利用厂商的说明实现自动化合成。可以分别化学合成此处描述的IL-22或IL-22R的各个部分，利用化学的或酶学的方法组合来产生全长IL-22或IL-22R。重组表达的IL-22或IL-22R可以从培养基或从宿主细胞溶胞产物回收。以下规程是适合的纯化规程的示范在离子交换柱上的分级；乙醇沉淀；反相HPLC;在硅土上或在阳离子交换树脂诸如DEAE上的层析；层析聚焦；SDS-PAGE;硫酸铵沉淀；利用例如SephadexG-75的凝胶过滤；蛋白ASepharsoe柱以除去污染物诸如IgG;和金属螯合柱来结合所述IL-22或IL-22R的带表位标签的形式。可以使用蛋白质纯化的各种方法，这样的方法是本领Jt或已》口的，在例》口Deutscher，MethodsinEnzvmology，182(1990);Scopes,ProteinPurification:PrinciplesandPractice,Springer-Verlag,NewYork(1982)中有描述。选择的纯化步骤将取决于，例如，采用的生产方法的性质，和生产的特定IL-22或IL-22R。2.基因表达的检测如，通过检测编码IL-22或IL-22R的mRNA的表达。如在此使用的，术语"检测"涵盖定量的或定性的4企测。通过检测IL-22或IL-22R基因表达，人们可以鉴定例如表达IL-22或IL-22R基因的那些组织。基因表达可以使用本领域技术人员已知的某些方法来测量，例如，Northern印迹(Thomas，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，77:5201-5205[1980]);定量PCR;或利用根据在此提供的序列的适当标记的探针的原位杂交。做为选择，基因表达可以通过免疫学的方法来测量，诸如对组织切片的免疫组织化学染色，和对细胞培养物或体液的分析，来直接测定基因产物的表达。对样品液体的免疫组织化学染色和/或分析有用的抗体涵盖在此提供的任何抗体。方便地，抗体可以针对IL-22或IL-22R多肽的天然序列；针对包含IL-22或IL-22R多肽序列的片段的合成肽；或针对融合至IL-22或IL-22R多肽或其片段的外源序列(包括合成肽)来制备。B.抗体提供了结合任何上述或下述多肽的抗体。在一个实施方案中，提供了结合IL國19、IL-20、IL-22、IL画24、IL-20Ra、IL-20Rb、IL-10R2、或IL-22R多肽的分离的抗体。例示性的抗体包括多克隆的、单克隆的、人源化的、人的、双特异性的、和异源偶联的抗体。抗体可以是抗体片段，例如Fab、Fab'-SH、Fv、scFv、或(Fab')2片段。在一个实施方案中，提供了结合IL-22或IL-22R的分离的抗体。在一个这样的实施方案中，抗体部分的或完全的阻断IL-22或IL-22R多肽的活性(即"阻断性"抗体)。本文中提供了结合IL-22和IL-22R的例示性单克隆抗体，在实施例中有进一步描述。那些抗体包括抗IL-22抗体，称为3F11.3("3Fir')、11H4.4("11H4")、和8E11,9("8Eir)，及抗IL誦22R抗体，称为7E9.10.8("7E9")、8A12.32("8A12")、8H11.32.28("8H11")、和12H5。在一个实施方案中，提供了生成任何那些抗体的杂交瘤。在一个实施方案中，提供了与3F11.3、11H4.4、或8E11.9竟争IL-22结合的单克隆抗体。在另一个实施方案中，提供了与3F11.3、11H4.4、或8E11.9结合相同表位的单克隆抗体抗体。在另一个实施方案中，提供了与7E9、8A12、8H11、或12H5竟争IL-22R结合的单克隆抗体。在一个实施方案中，提供了与7E9、8A12、8H11、或12H5结合相同表位的单克隆抗体。下文提供了抗体的各种实施方案1.多克隆抗体抗体可包括多克隆抗体。用于制备多克隆抗体的方法是本领域技术人员已知的。多克隆抗体可在哺乳动物中生成，例如通过一次或多次注射免疫剂和根据需要的佐剂。通常，免疫剂和/或佐剂将通过多次皮下或腹膜内注射而注射到哺乳动物中。免疫剂可包括感兴趣多肽或其融合蛋白。将免疫剂与已知在所免疫哺乳动物中有免疫原性的蛋白质偶联可能是有用的。此类免疫原性蛋白质的例子包括但不限于匙孔i戚血蓝蛋白、血清清蛋白、牛曱状腺球蛋白和大豆胰蛋白酶抑制剂。可采用的佐剂的例子包括弗氏完全佐剂和MPL-TDM佐剂(单磷酰基脂质A、合成的海藻糖dicorynomycolate)。免疫方案可以由本领域技术人员无需过多实验做出选择。2.单克隆抗体或者，抗体可以是单克隆抗体。单克隆抗体可使用杂交瘤法制备，诸如KohlerandMilstein,Nature256:495(1975)所述。在杂交瘤法中，小鼠、仓鼠或其它适宜的宿主动物通常用免疫剂免疫以引发生成或能够生成将特异性结合免疫剂的抗体的淋巴细胞。或者，可以在体外免疫淋巴细胞。免疫剂将通常包括感兴趣多肽或其融合蛋白。通常，或是使用外周血淋巴细胞("PBL")，若希望人起源的细胞，或是使用脾细胞或淋巴节细胞，若希望非人哺乳动物来源。然后，使用合适的融合剂，诸如聚乙二醇，将淋巴细胞与永生化细胞系融合以形成杂交瘤细胞(Goding，MonoclonalAntibodies:PrinciplesandPractice,AcademicPress(1986)，pp.59-103)。7乂生化细月包系通常是转化的哺乳动物细胞，特别是啮齿类、牛和人起源的骨髓瘤细胞。通常，采用大鼠或小鼠骨髓瘤细胞系。杂交瘤细胞可在合适的培养基中培养，所述培养基优选含有抑制未融合的永生化细胞生长或存活的一种或多种物质。例如，如果亲本细胞缺乏酶次黄噤呤鸟嗓呤磷酸核糖转移酶(HGPRT或HPRT),那么用于杂交瘤的培养基通常将含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸苷("HAT培养基")，这些物质阻止HGPRT缺陷细胞生长。优选的永生化细胞系是那些高效融合、支持选定的抗体生成细胞稳定的高水平的表达抗体、并对诸如HAT培养基等培养基敏感的细胞系。更优选的永生化细胞系是鼠源骨髓瘤系，可从例如索尔克研究所细胞分配中心(SalkInstituteCellDistributionCenter,SanDiege,Califomia)和美国典型培养物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection,Manassas,Virginia)获得。用于生成人单克隆抗体的人骨髓瘤和'J、鼠-人异源骨髓瘤细胞系也已有描述(Kozbor，J.Immunol.133:3001(1984);Brodeuretal.，MonoclonalAntibodyProductionTechniquesandApplications,MarcelDekker,Inc.,NewYork(1987)pp.51-63)。然后可对杂交瘤细胞在其中培养的培养基测定结合感兴趣多肽的单克隆抗体的存在。优选的是，通过免疫沉淀或通过体外结合测定法，诸如放射免疫测定法(RIA)或酶联免疫吸附测定法(ELISA)，测定由杂交瘤细胞生成的单克隆抗体的结合特异性。此类技术和测定法是本领域已知的。单克隆抗体的结合亲和力可通过例如MunsonandPollard,Anal.Biochem.107:220(1980)的Scatchard分析来测定。在鉴定得到期望的杂交瘤细胞后，该克隆可通过有限稀释流程进行亚克隆，并通过标准方法进行培养(Goding,见上文)。适于这一目的的培养基包括例如Dulbecco氏改良的Eagle氏培养基和RPMI-1640培养基。或者，杂交瘤细胞可在哺乳动物中作为腹水进行体内培养。可通过常规免疫球蛋白纯化流程，诸如例如蛋白A-Sepharose、羟磷灰石层析、凝胶电泳、透析或亲和层析，自培养基或腹水分离或纯化亚克隆分泌的单克隆抗体。单克隆抗体可以通过使用组合库筛选具有期望活性的抗体来创建。例如，本领域知道用于生成噬菌体展示文库和对此类文库筛选具有所需结合特性的抗体的多种方法。此类方法一般性的记载于Hoogenboometal.(2001)于:MethodsinMolecularBiology178:1-37(O'Brienetal,,ed.，HumanPress,Totowa,NJ),及Leeetal.(2004)J.Mol.Biol.340:1073-1093中的某些实施方案。在原理上，通过筛选噬菌体文库来选择合成抗体克隆，所述噬菌体文库含有展示融合至噬菌体外壳蛋白的各种抗体可变区(Fv)片段的噬菌体。通过针对所需抗原的亲和层析淘选此类噬菌体文库。表达能够结合所需抗原的Fv片段的克隆被吸附至抗原，从而与文库中不结合的克隆分开。然后将结合的克隆从抗原上洗脱，而且可以通过额外的抗原吸附/洗脱循环进一步富集。本发明的任何抗体可以如下获得，即设计合适的抗原筛选规程来选择感兴趣的噬菌体克隆，接着使用来自感兴趣的噬菌体克隆的Fv序列和Kabatetal.，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,FifthEdition,NIHPublication91-3242，BethesdaMD(1991),vols.l-3中记载的合适的恒定区(Fc)序列构建全长抗体克隆。单克隆抗体还可通过重组DNA方法来生成，诸如美国专利No.4,816,567中所述。编码本发明单克隆抗体的DNA易于使用常规流程分离和测序(例如使用能够特异性结合编码鼠源抗体重链和轻链的基因的寡核苷酸探针)。本发明的杂交瘤细胞是此类DNA的优选来源。一旦分离，可将DNA置于表达载体中，然后将该表达载体转染到不另外产生免疫球蛋白蛋白质的宿主细胞中，诸如猿猴COS细胞、中国仓鼠卵巢(CHO)细胞或骨髓瘤细胞，以在重组宿主细胞中获得单克隆抗体的合成。还可以修饰DNA，例如通过替代，即用人重链和轻链恒定区的编码序列代替同源鼠源序歹iJ(美国专利No.4,816,567;Morrisonetal.,见上文)，或者通过共价接合免疫球蛋白编码序列与非免疫球蛋白多肽的整个或部分编码序列。可用此类非免疫球蛋白多肽替代本发明抗体的恒定域，或者可用它替代本发明抗体的一个抗原结合位点的可变域以产生嵌合二价抗体。3.单价抗体还提供了单价抗体。用于制备单价抗体的方法是本领域众所周知的。例如，一种方法牵涉免疫球蛋白轻链和经过修饰的重链的重组表达。重链被截短了，一般在Fc区内的任何点，用以预防重链交联。或者，相关半胱氨酸残基被另一氨基酸残基替代或者被删除，用以预防交联。体外方法也适于制备单价抗体。消化抗体以生成其片段，特别是Fab片段，可以使用本领域知道的常规技术来实现。4.抗体片段还提供了抗体片段。抗体片段可以通过传统手段，诸如酶促消化，或者通过重组技术来生成。在某些情况中，使用抗体片段有优势，而不是完整抗体。片段的较小尺寸容许快速清除，而且可导致更易于接近实体瘤。关于某些抗体片段的综述参见Hudsonetal.(2003)Nat.Med.9:129-134。已经开发了用于生成抗体片段的多种技术。传统上，通过蛋白水解消化完整抗体来衍生这些片段(参见例如Morimotoetal.，JournalofBiochemicalandBiophysicalMethods24:107-117(1992);Bre廳netal"Science229:81(1985))。然而，现在可直4妾由重组宿主细胞生成这些片段。Fab、Fv和scFv抗体片段都可在大肠杆菌中表达及由大肠杆菌分泌，如此容许容易的生成大量的这些片段。可从上文讨论的噬菌体抗体库中分离抗体片段。或者，可直接从大肠杆菌回收Fab'-SH片段并化学偶联以形成F(ab')2片段(Carteretal.,Bio/Technology10:163-167(1992))。依照另一种方法，可直接从重组宿主细胞培养物分离F(ab')2片段。包含补救受体结合表位残基、具有延长的体内半衰期的Fab和F(ab')2片段记载于美国专利No.5,869,046。用于生成抗体片段的其它技术对于熟练从业人员将是显而易见的。在某些实施方案中，抗体是单链Fv片段(scFv)。参见WO93/16185;美国专利No.5,571,894;及5,587,458。Fv和scFv是具有完整结合位点、缺少恒定区的唯一类型；如此，它们可能适于在体内使用时降低非特异性结合。可构建scFv融合蛋白以生成效应器蛋白质在scFv的氨基或欵基末端的融合。参见AntibodyEngineering,Borrebaeck编，见上文。抗体片段还可以是"线性抗体"，例如如美国专利No.5，641,870中所记载的。此类线性抗体可以是单特异性的或双特异性的。5.人源化抗体还提供了人源化抗体。本领域知道用于将非人抗体人源化的多种方法。例如，人源化抗体可以具有一个或多个从非人来源引入的氨基酸残基。这些非人氨基酸残基常常称作"输入"残基，它们典型的取自"输入"可变域。人源化可基本上遵循Winter及其同事的方法进行(Jonesetal.(1986)Nature321:522-525;Riechmannetal.(1988)Nature332:323-327;Verhoeyenetal.(1988)Science239:1534-1536)，通过用高变区序列替代人抗体的相应序列。因此，此类"人源化"抗体是嵌合抗体(美国专利No.4,816,567)，其中基本上少于整个人可变域用来自非人物种的相应序列替代。在实践中，人源化抗体典型的是其中一些高变区残基和可能的一些FR残基用来自啮齿类抗体中类似位点的残基替代的人抗体。用于构建人源化抗体的人可变域的选择，包括轻链和重链二者，对于降低抗原性可以是重要。依照所谓的"最适"(best-fit)方法，用啮齿类抗体的可变域序列对已知的人可变域序列的整个文库进行筛选。然后选择与啮齿类序列最接近的人序列作为人源化抗体的人框架区(Simsetal.(1993)J.Immunol.151:2296;Chothiaetal.(1987)J.Mol.Biol.196:901)。另一种方法使用由特定轻链或重链亚组的所有人抗体的共有序列衍生的特定框架区。同一框架可用于数种不同的人源化抗体(Carteretal.(1992)Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:4285;Prestaetal.(1993)J.Immunol.151:2623)。一般希望抗体在人源化后保持对抗原的高亲和力和其它有利的生物学特性。为了实现这一目标，依照一种方法，通过使用亲本和人源化序列的三维免疫球蛋白模型是公众可获得的且为本领域技术人员所熟悉。可获得图解和显示所选候选免疫球蛋白序列的可能三维构象结构的计算机程序。检查这些显示图像容许分析残基在候选免疫球蛋白序列行使功能中的可能作用，即分析影响候选免疫球蛋白结合其抗原的能力的残基。这样，可以从受体和输入序列选出FR残基并进行组合，从而获得期望的抗体特征，诸如对靶抗原的亲和力提高。一般而言，高变区残基直接且最实质的涉及对抗原结合的影响。6.人抗体还提供了人抗体。人抗体可以通过如上所述联合选自人衍生噬菌体展示库的Fv克隆可变域序列与已知的人恒定域序列来构建。或者，可以通过杂交瘤方法来生成本发明的人单克隆抗体。用于生成人单克隆抗体的人骨髓瘤和小鼠-人异源骨髓瘤细胞系已有记载，例如KozborJ.Immunol"133:3001(1984);Brodeuretal"MonoclonalAntibodyProductionTechniquesandApplications,pp.51-63(MarcelDekker,Inc.,NewYork,1987》及Boerneretal"J.Immunol.,147:86(1991).例如，现在有可能生成在缺乏内源免疫球蛋白生成的情况下能够在免疫后生成人抗体完整全集的转基因动物(例如小鼠)。例如，已经记载了嵌合和种系突变小鼠中抗体重链连接区(JH)基因的纯合删除导致内源抗体生成的完全抑制。在此类种系突变小鼠中转移大量人种系免疫球蛋白基因将导致在抗原攻击后生成人抗体。参见例如Jakobovitsetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:2551(1993);Jakobovitsetal"Nature362:255-258(1993);Brugge腿nnetal.，YearinImmunol.7:33(1993)。基因改组也可用于自非人(例如啮齿类)抗体衍生人抗体，其中人抗体具有与起始非人抗体相似的亲和力和特异性。依照此方法，它也称为"表位印记"(epitopeimprinting),如本文所述通过噬菌体展示4支术得到的非人抗体片段的重链或轻链可变区用人V结构域基因全集替换，产生非人链-人链scFv或Fab嵌合物群。用抗原进行的选择导致非人链/人链嵌合scFv或Fab的分离，其中人链在一级噬菌体展示克隆中消除相应的非人链后恢复了抗原结合位点，即表位决定簇(印记，imprint)人链配偶体的选择。在重复该过程以替换剩余非人链时，得到人抗体(参见PCTWO93/06213,7>开于1993年4月1日)。与传统的通过CDR移植进行的非人抗体的人源化不同，此技术提供完全人的抗体，它们不含非人起源的FR或CDR残基。7.双特异性抗体还提供了双特异性抗体。双特异性抗体指对至少两种不同抗原具有结合特异性的单克隆抗体。在某些实施方案中，双特异性抗体是人抗体或人源化抗体。在某些实施方案中，结合特异性之一针对感兴趣的多肽，结合特异性之另一针对任何其它抗原。在某些实施方案中，双特异性抗体可结合感兴趣的多肽的两种不同表位。双特异性抗体还可用于将细胞毒剂定位于表达感兴趣多肽诸如细胞表面多肽的细胞。这些抗体拥有TAT226结合臂和结合细胞毒剂(诸如例如肥皂草毒蛋白、抗干扰素-a、长春花生物碱类、蓖麻毒蛋白A链、曱氨喋呤或放射性同位素半抗原)的臂。可将双特异性抗体制备成全长抗体或抗体片段(例如F(ab')2双特异性抗体)。用于构建双特异性抗体的方法是本领域已知的。传统的是，双特异性抗体的重组生产基于两对免疫球蛋白重链-轻链的共表达，其中两种重链具有不同的特异性(MillsteinandCuello,Nature305:537(1983))。由于免疫球蛋白重链和轻链的随机分配，这些杂交瘤(四源杂交瘤(quadroma))生成10种不同抗体分子的潜在混合物，其中只有一种具有正确的双特异性结构。通常通过亲和层析步骤进行的正确分子的纯化相当麻烦且产物产量低。类似的规程披露于1993年5月13日公布的WO93/08829及Trauneckeretal.,EMBOJ.10:3655(1991)。依照一种不同的办法，将具有期望结合特异性(抗体-抗原结合位点)的抗体可变域与免疫球蛋白恒定域序列融合。例如，与包含至少部分铰链、CH2和CH3区的免疫球蛋白重链恒定域进行融合。在某些实施方案中，在至少一种融合物中存在包含轻链结合所必需的位点的第一重链恒定区(CH1)。将编码免疫球蛋白重链融合物和，在需要时，免疫球蛋白轻链的DNA插入分开的表达载体，并共转染到合适的宿主生物体中。在用于构建的三种多肽链比例不等时提供最佳产量的实施方案中，这为调整三种多肽片段的相互比例提供了极大的灵活性。然而，在至少两种多肽链以相同比例表达导致高产量时或在该比例没有特别意义时，有可能将两种或所有三种多肽链的编码序列插入一个表达载体。在该方法的一个实施方案中，双特异性抗体由一个臂上具有第一结合特异性的杂合免疫球蛋白重链，和另一个臂上的杂合免疫球蛋白重链-轻链对(提供第二结合特异性)构成。由于免疫球蛋白轻链仅在半个双特异性分子中的存在提供了便利的分离途径，因此发现这种不对称结构便于将期望的双特异性复合物与不想要的免疫球蛋白链组合分开。该方法披露于wo94/04690。关于生成双特异性抗体的进一步详情参见例如Sureshetal.,MethodsinEnzymology121:210(1986)。依照另一种方法，可改造一对抗体分子间的界面，以将从重组细胞培养物回收的异二聚体的百分比最大化。界面包含至少部分抗体恒定域CH3结构域。在该方法中，将第一抗体分子界面的一个或多个小氨基酸侧链用较大侧链(例如酪氨酸或色氨酸)替换。通过将大氨基酸侧链用较小氨基酸侧链(例如丙氨酸或苏氨酸)替换，在第二抗体分子的界面上产生与大侧链相同或相似大小的补偿性"空腔"。这提供了较之其它不想要的终产物诸如同二聚体提高异二聚体产量的机制。双特异性抗体包括交联或"异源偶联"抗体。例如，异源偶联物中的一种抗体可与亲合素偶联，另一种抗体与生物素偶联。例如，此类抗体已经建议用于将免疫系统细胞靶向不想要的细胞(美国专利No.4,676,980)，及用于治疗HIV感染(WO91/00360,WO92/00373和EP03089)。可使用任何便利的交联方法来制备异源偶联抗体。合适的交联剂是本领域众所周知的，连同许多交联技术一起披露于美国专利No.4,676,980。文献中还记载了由抗体片段生成双特异性抗体的技术。例如，可使用化学连接来制备双特异性抗体。Brennanetal.,Science229:81(1985)记载了通过蛋白水解切割完整抗体以生成F(ab')2片段的规程。将这些片段在存在二硫醇络合剂亚砷酸钠的情况下还原，以稳定邻近的二硫醇并防止分子间二硫键的形成。然后将产生的Fab，片段转变为硫代硝基苯曱酸西旨(TNB)衍生物。然后将Fab'-TNB衍生物之一通过巯基乙胺的还原重新恢复成Fab'-硫醇，并与等摩尔量的另一种Fab'-TNB衍生物混合，以形成双特异性抗体。产生的双特异性抗体可用作酶的选择性固定化试剂。最新的进展便于从大肠杆菌直接回收Fab'-SH片段，这些片段可化学偶联以形成双特异性抗体。Shalabyetal.，J.Exp.Med.175:217-225(1992)记载了完全人源化的双特异性抗体F(ab')2分子的生成。由大肠杆菌分开分泌每种Fab'片段，并在体外进行定向化学偶联以形成双特异性抗体。如此形成的双特异性抗体能够结合过表达HER2受体的细胞和正常人T细胞，以及触发人细胞毒性淋巴细胞针对人乳瘤靶物的溶解活性。还记载了从重组细胞培养物直接生成和分离双特异性抗体片段的多种技术。例如，已使用亮氨酸拉链生成双特异性抗体。Kostelnyetal.，J.Immunol.148(5):1547-1553(1992)。将来自Fos和Jun蛋白的亮氨酸拉链肽通过基因融合与两种不同抗体的Fab'部分连接。抗体同二聚体在铰链区还原以形成单体，然后重新氧化以形成抗体异二聚体。这种方法也可用于生成抗体同二聚体。Hollingeretal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA卯:6444-6448(1993)记栽的"双抗体"技术提供了构建双特异性抗体片段的替代机制。该片段包含通过接头相连的重链可变域(VH)和轻链可变域(VL),所述接头太短使得同一条链上的两个结构域之间不能配对。因此，迫使一个片段上的VH和VL结构域与另一个片段上的互补VL和VH结构域配对，由此形成两个抗原结合位点。还报道了通过使用单链Fv(sFv)二聚体构建双特异性抗体片段的另一种策略。参见Gruberetal.，J.Immunol.152:5368(1994)。设想了具有超过两个效价的抗体。例如，可制备三特异性抗体。Tuttetal.，J.Immunol.147:60(1991)。8.多价抗体还提供了多价抗体。多价抗体可以比二价抗体更快的受到表达该抗体所结合抗原的细胞的内在化(和/或异化)。本发明的抗体可以是可容易的通过编码抗体多肽链的核酸的重组表达而生成的、具有三个或更多抗原结合位点(例如四价抗体)的多价抗体(IgM类别以外的)。多价抗体可包含二聚化结构域和三个或更多抗原结合位点。在某些实施方案中，二聚化结构域包含(或由其组成)Fc区或铰链区。在这种情况中，抗体将包含Fc区及Fc区氨基末端的三个或更多抗原结合位点。在某些实施方案中，多价抗体包含(或由其组成)三个至约八个抗原结合位点。在一个这样的实施方案中，多价抗体包含(或由其组成)四个抗原结合位点。多价抗体包含至少一条多肽链(例如两条多肽链)，其中所述多肽链包含两个或多个可变域。例如，多肽链可包含VDl-(Xl)n-VD2-(X2)n-Fc,其中VD1是第一可变域，VD2是第二可变域，Fc是Fc区的一条多肽链，X1和X2代表氨基酸或多肽，而n是0或l。例如，多肽链可包含VH-CHl-柔性接头-VH-CHl-Fc区链；或VH-CH1-VH-CH1-Fc区链。本文中的多价抗体可进一步包含至少两条(例如四条)轻链可变域多肽。本文中的多价抗体可包含例如约两条至约八条轻链可变域多肽。本文设想的轻链可变域多肽包含轻链可变域，且任选进一步包含CL结构域。9.单结构域抗体还提供了单结构域抗体。单结构域抗体是包含抗体的整个或部分重链可变域或整个或部分轻链可变区的单一多肽链。在某些实施方案中，单结构域抗体是人单结构域抗体(Domantis,Inc.，Waltham,MA;参见例如美国专利No.6，248，516Bl)。在一个实施方案中，单结构域抗体由整个或部分抗体重链可变域组成。10.抗体变体在有些实施方案中，设想了本文所述抗体的氨基酸序列修饰。例如，可能希望改进抗体的结合亲和力和/或其它生物学特性。抗体的氨基酸序列变体类修饰包括例如抗体氨基酸序列内的残基删除和/或插入和/或替代。可进行任何删除、插入和替代组合以获得最终的构建物，倘若最终的构建物具有期望的特征。可在制备序列时将氨基酸改变引入受试抗体氨基酸序列。可用于鉴定抗体中作为优选诱变位置的某些残基或区域的方法有"丙氨酸扫描诱变"，如CunninghamandWells,Science244:1081-1085(1989)中所述。这里，鉴定一个残基或一组靶残基(如带电荷的残基，诸如精氨酸、天冬氨酸、组氨酸、赖氨酸和谷氨酸)并用中性或带负电荷的氨基酸(例如丙氨酸或多聚丙氨酸)替代，以影响氨基酸与抗原的相互作用。然后通过在或对替代位点引入更多或其它变体，推敲对替代展示功能敏感性的氨基酸位置。由此，尽管用于引入氨基酸序列变异的位点是预先决定的，然而突变本身的本质不必预先决定。例如，为了分析指定位点处突变的后果，在靶密码子或区域进行丙氨酸扫描或随机诱变，并对所表达的免疫球蛋白筛选期望的活性。氨基酸序列插入包括氨基和/或羧基末端的融合，长度范围由一个残基至包含上百或更多残基的多肽，以及单个或多个氨基酸残基的序列内插入。末端插入的例子包括具有N端甲硫氨酰残基的抗体。抗体分子的其它插入变体包括将抗体的N或C端与酶(如用于ADEPT)或延长抗体血清半衰期的多肽融合。在某些实施方案中，本发明的抗体被改变以提高或降低抗体糖基化的程度。多肽的糖基化典型的或是N-连接的或是O-连接的。N-连接指碳水化合物模块附着于天冬酰胺残基的侧链。三肽序列天冬酰胺-X-丝氨酸和天冬酰胺-X-苏氨酸(其中X是除脯氨酸外的任何氨基酸)是将碳水化合物模块酶促附着于天冬酰胺侧链的识别序列。如此，多肽中这两种三肽序列任一的存在产生了潜在的糖基化位点。O-连接的糖基化指将糖类N-乙酰半乳糖胺、半乳糖或木糖之一附着于羟基氨基酸，最常见的是丝氨酸或苏氨酸，但也可使用5-羟脯氨酸或5-羟赖氨酸。向抗体中添加或删除糖基化位点可通过改变氨基酸序列从而创建或消除一个或多个上述三肽序列而便利的完成(用于N-连接的糖基化位点)。所述改变还可通过向原始抗体的序列中添加、删除、或替代一个或多个丝氨酸或苏氨酸残基来进行(用于O-连接的糖基化位点)。若抗体包含Fc区，则可改变附着其上的碳水化合物。例如，美国专利申请US2003/0157108(Presta,L.)中记载了有缺乏岩藻糖的成熟碳水化合物结构附着于抗体Fc区的抗体。还可参见US2004/0093621(KyowaHakkoKogyoCo"Ltd.)。WO2003/011878(Jean國Mairet等人)和美国专利No.6,602,684(Umana等人)中提到了在附着于抗体Fc区的碳水化合物中有等分N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)的抗体。WO1997/30087(Patel等人)中报告了在附着于抗体Fc区的寡糖中有至少一个半乳糖残基的抗体。关于有更改碳水化合物附着于其Fc区的抗体还可参见WO1998/58964(Raju，S.)和WO1999/22764(Raju,S.)。关于具有改良糖基化的抗原结合分子还可参见US2005/0123546(Umanaetal.)。在某些实施方案中，糖基化变体包含Fc区，其中附着于Fc区的碳水化合物结构缺乏岩藻糖。此类变体具有改进的ADCC功能。任选的是，Fc区还包含进一步改进ADCC的一个或多个氨基酸替代，例如Fc区位置298、333和/或334处的替代(Eu残基编号方式)。涉及"脱岩藻糖型"或"岩藻糖缺乏型"抗体的出版物的例子包括US2003/0157108;WO2000/61739;WO2001/29246;US2003/0115614;US2002/0164328;US2004/0093621;US2004/0132140;US2004/0110704;US2004/0110282;US2004/0109865;WO2003/085119;WO2003/084570;WO2005/035586;WO2005/035778;WO2005/053742;Okazakietal.J.Mol.Biol.336:1239-1249(2004);Yamane-Ohnukietal.Biotech.Bioeng.87:614(2004)。生成脱岩藻糖化抗体的细胞系的例子包括蛋白质岩藻糖化缺陷的Lec13CHO细胞(Ripkaetal.Arch.Biochem.Biophys.249:533-545(1986);美国专利申请US2003/0157108Al,Presta，L;及WO2004/056312Al,Adamsetal.,尤其是实施例ll)和敲除细胞系，诸如a-l,6-岩藻糖转移酶基因F"rS敲除的CHO细胞(Yamane-Ohnukietal.Biotech.Bioeng.87:614(2004))。另一类变体是氨基酸替代变体。这些变体在抗体分子中有至少一个氨基酸残基用不同残基替代。进行替代诱变的感兴趣位点包括高变区，但是也设想了FR改变。上文表6表头"优选替代"下显示了保守替代。如果此类替代导致所需生物学活性变化，那么可导入表6中称为"例示替代，，的更实质变化，或如上文参照氨基酸类别进一步所述，并对所得抗体筛选所需结合特性。一类替代变体牵涉替代亲本抗体(例如人源化或人抗体)的一个或多个高变区残基。通常，选择用于进一步开发的所得变体相对于产生它们的亲本抗体将具有改变的(例如改良的)生物学特性。用于生成此类替代变体的一种便利方法牵涉使用噬菌体展示的亲和力成熟。简而言之，将数个高变区位点(例如6-7个位点)突变，在各个位点产生所有可能的氨基酸替代。如此生成的抗体展示在丝状噬菌体颗粒上，作为与各个颗粒内包装的至少部分噬菌体外壳蛋白(例如M13基因III产物)的融合物。然后对噬菌体展示的变体筛选其生物学活性(例如结合亲和力)。为了鉴定用于修饰的候选高变区位点，可进行扫描诱变(例如丙氨酸扫描)以鉴定对抗原结合具有重要贡献的高变区残基。或者/另外，分析抗原-抗体复合物的晶体结构以鉴定抗体和抗原之间的接触点可能是有益的。所述接触残基及邻近残基是依照本领域知道的技术，包括本文详述的，进行替代的候选位点。一旦产生这样的变体，使用本领域知道的技术，包括本文所述的，对该组变体进行筛选，可选择在一种或多种相关测定法中具有优良特性的抗体用于进一步的开发。编码抗体氨基酸序列变体的核酸分子可通过本领域知道的多种方法来制备。这些方法包括但不限于从天然来源分离(在天然发生氨基酸序列变体的情况中)，或者通过对较早制备的变体或非变异型式的抗体进行寡核苷酸介导的(或定点)诱变、PCR诱变和盒式诱变来制备。可能希望在本发明抗体的Fc区中引入一处或多处氨基酸修饰，由此生成Fc区变体。Fc区变体可包括在一个或多个氨基酸位置(包括铰链半胱氨酸)包含氨基酸修饰(如替代)的人Fc区序列(如人IgGl、IgG2、IgG3或IgG4Fc区)。依照此描述和本领域的教导，设想了在有些实施方案中，本发明的抗体与野生型对应抗体相比可在例如Fc区中包含一处或多处改变。与它们的野生型对应物相比，这些抗体仍将基本上保留治疗功效所需要的相同特性。例如，认为可在Fc区中进行将会导致Clq结合和/或补体依赖性细胞毒性(CDC)改变(即或是增强或是削弱)的某些改变，例如W099/51642中所述。还可参见关注Fc区变体其它实例的DuncanandWinter,Nature322:738-40(1988);美国专利No.5,648,260;美国专利No.5,624,821;及W094/29351。WO00/42072(Presta)和WO2004/056312(Lowman)记载了对FcR的结合提高或降低的抗体变体。在此明确收入这些专利出版物的内容作为参考。还可参见Shieldsetal.J.Biol.Chem.9(2):6591-6604(2001)。半衰期延长且对新生儿Fc受体(FcRn)(它负责将母体IgG转移给胎儿)(Guyeretal.，J.Immunol,117:587(1976)及Kimetal.，J.Immunol.24:249(1994))的结合改良的抗体记载于US2005/0014934A1(Hintonetal.)。这些抗体包含具有一处或多处改进Fc区与FcRn结合的替代的Fc区。具有改变的Fc区氨基酸序列且Clq结合能力升高或降低的多肽变体记载于美国专利No.6,194，551B1，W099/51642。在此明确收入这些专利出版物的内容作为参考。还可参见Idusogieetal.J.Immunol.164:4178-4184(2000)。一方面，本发明提供了在构成Fc区的Fc多肽的界面中包含^f务饰的抗体，其中所述修饰便于和/或促进异型二聚化。这些修饰包括在第一Fc多肽中引入隆起(protuberance),在第二Fc多肽中引入空穴(cavity)，其中所述隆起可位于所述空穴中，从而促进第一和第二Fc多肽的复合。用于生成具有这些修_饰的抗体的方法是本领域已知的，例如美国专利No.5，731，168中所记载的。11.抗体衍生物可进一步修饰抗体以包含本领域知道的且易于获得的额外非蛋白质性质模块。优选的是，适于抗体衍生化的模块是水溶性聚合物。水溶性聚合物的非限制性实例包括但不限于聚乙二醇(PEG)、乙二醇/丙二醇共聚物、羧曱基纤维素、右旋糖苷、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚-l,3-二氧戊环、聚-1,3,6-三D恶烷、乙烯/马来酸酐共聚物、聚氨基酸(均聚物或随^/L共聚物)、和右旋糖苷或聚(n-乙烯吡咯烷酮)聚乙二醇、丙二醇均聚物、环氧丙烷/环氧乙烷共聚物、聚氧乙烯化多元醇(如甘油)、聚乙歸醇、及其混合物。由于其在水中的稳定性，聚乙二醇丙醛在生产中可能具有优势。聚合物可以是任何分子量，而且可以是分支的或不分支的。附着到抗体上的聚合物数目可以变化，而且如果附着了超过一个聚合物，那么它们可以是相同或不同的分子。一般而言，可根据下列考虑来确定用于衍生化的聚合物的数目和/或类型，包括但不限于待改进抗体的具体特性或功能、抗体衍生物是否将用于指定条件下的治疗等。在另一个实施方案中，提供了抗体与可通过暴露于辐射而选择性加热的非蛋白质性质模块的偶联物。在一个实施方案中，该非蛋白质性质模块是碳纳米管(Kametal.,Proc.Natl.Acad.Sci.102:11600-11605(2005))。辐射可以是任何波长的，包括但不限于对普通细胞无害但将非蛋白质性质模块加热至接近抗体-非蛋白质性质模块的细胞被杀死的温度的波长。在某些实施方案中，抗体可以是经过标记的和/或可以在固体支持物上固定化。在另一个方面，抗体是抗独特型抗体。12.异源偶联抗体还提供了异源偶联抗体。异源偶联抗体由两种共价连接的抗体构成。此类抗体建议用于例如将免疫系统细胞靶向不想要的细胞(美国专牙1j4,676,980)及用于治疗HIV感染(WO91/00360;WO92/200373;EP03089)。设想了可在体外使用合成蛋白质化学的已知方法制备抗体，包括那些涉及交联剂的方法。例如，可使用二硫化物交换反应或通过形成^j^建来构建免疫毒素。适于此目的的试剂的例子包括亚氨基疏醇酯/盐(iminothiolate)和4-巯基丁酰亚氨酸曱酉旨(methyl-4-mercaptobutyrimidate)及例如美国专利4，676，980中所公开的。13.细胞毒性抗体还提供了细胞毒性抗体。在某些实施方案中，细胞毒性抗体是抗IL22抗体，诸如下文所提供的，其发挥效应器功能和/或诱导细胞死亡。在某些实施方案中，细胞毒性抗IL-22R抗体结合IL-22R的胞外结构域。14.效应器功能工程可能希望在效应器功能方面修饰抗体，从而增强例如抗体在治疗疾病诸如癌症中的效力。例如，可向Fc区中引入半胱氨酸残基，从而使得在该区中形成链间二硫键。如此生成的同二聚体抗体可具有改善的内在化能力和/或提高的补体介导的细胞杀伤和抗体依赖性细胞细胞毒性(ADCC)。参见Caronetal.，J.Exp.Med.176:1191-1195(1992)和Shopes，J.Immunol.148:2918-2922(1992)。具有增强的抗肿瘤活性的同二聚体抗体还可如Wolffetal.,CancerResearch53:2560-2565(1993)所述使用异双功能交联剂来制备。或者，抗体可改造成具有双重Fc区，由此可具有增强的补体溶解和ADCC能力。参见Stevensonetal.,Anti-CancerDrugDesign3:219-230(1989)。15.载体、宿主细力包和重组方法为了重组生产抗体，在一个实施方案中，分离编码它的核酸，并将其插入可复制载体，用于进一步克隆(DNA扩增)或表达。可使用常规流程容易的分离编码抗体的DNA并测序(如使用能够与编码抗体重链和轻链的基因特异结合的寡核苷酸探针)。可利用许多载体。载体的选择部分取决于将要使用的宿主细胞。一般而言，宿主细胞是原核或真核(通常是哺乳动物)起源的。应当领会，任何同种型的恒定区可用于此目的，包括IgG、IgM、IgA、IgD和IgE恒定区，而且此类恒定区可以从任何人或动物物种获得。a)使用原核宿主细胞生成抗体(1)载体构建可使用标准重组技术来获得编码抗体多肽构件的多核苷酸序列。可从抗体生成细胞诸如杂交瘤细胞分离期望的多核苷酸序列并测序。或者，可使用核苷酸合成仪或PCR技术合成多核苷酸。一旦得到，将编码多肽的序列插入能够在原核宿主中复制并表达异源多核苷酸的重组载体。为了本发明，可使用本领域可获得的且知道的许多载体。适宜载体的选择将主要取决于将要插入载体的核酸的大小和将要用载体转化的具体宿主细胞。根据其功能(扩增或表达异源多核苷酸，或二者兼之)及其与它在其中驻留的具体宿主细胞的相容性，每种载体含有多种构件。载体构件通常包括但不限于复制起点、选择标志基因、启动子、核糖体结合位点(RBS)、信号序列、异源核酸插入片段、和转录终止序列。一般而言，包含衍生自与宿主相容物种的复制子和控制序列的质粒载体可以与这些宿主一起使用。载体通常携带复制位点，以及能够在转化细胞中提供表型选择的标志序列。例如，通常用衍生自大肠杆菌物种的质粒pBR322转化大肠杆菌。pBR322包含编码氨千青霉素(Amp)和四环素(Tet)抗性的基因，由此提供轻松鉴定转化细胞的手段。pBR322、其衍生物、或其它微生蛋白质的启动子。Carter等人，美国专利No.5，648,237中详细记载了用于表达特定抗体的pBR322衍生物的实例。另外，可将包含与宿主4效生物相容的复制子和控制序列的噬菌体载体用作这些宿主的转化载体。例如，可使用噬菌体诸如XGEM.TM,ll来构建可用于转化易感宿主细胞诸如大肠杆菌LE392的重组载体。本发明的表达栽体可包含两对或多对启动子-顺反子，它们编码每一种多肽构件。启动子是位于顺反子上游(5')的非翻译调控序列，它调控顺反子的表达。原核启动子通常分成两类，诱导型的和组成性的。诱导型启动子指响应培养条件的变化(如营养物的存在与否或温度变化)而启动受其控制的顺反子的升高水平转录的启动子。众所周知受到多种潜在宿主细胞识别的大量启动子。通过限制酶消化切下源DNA中的启动子并将分离的启动子序列插入本发明的栽体，由此可将选择的启动子与编码轻链或重链的顺反子DNA可操作连接。天然启动子序列和许多异源启动子都可用于指导靶基因的扩增和/或表达。在有些实施方案中，使用异源启动子，因为与天然靶多肽启动子相比，它们通常容许所表达靶基因的更高转录和更高产量。适用于原核宿主的启动子包括PhoA启动子、(3-半乳糖苷酶和乳糖启动子系统、色氨酸(trp)启动子系统、和杂合启动子诸如tac或trc启动子。然而，在细菌中有功能的其它启动子(诸如其它已知的细菌或噬菌体启动子)也是合适的。它们的核苷酸序列已经发表，由此熟练工作人员能够使用提供任何所需限制位点的接头或衔接头将它们与编码靶轻链和重链的顺反子可操作连接(Siebenlistetal"Cell20:269(1980))。在本发明的一个方面，重组载体内的每个顺反子都包含指导所表达多肽穿膜易位的分泌信号序列构件。一4殳而言，信号序列可以是载体的构件，或者它可以是插入载体的靶多肽DNA的一部分。为了本发明而选择的信号序列应当是受到宿主细胞识别并加工(即被信号肽酶切除)的信号序列。对于不识别并加工异源多肽的天然信号序列的原核宿主细胞，将信号序列用选自例如下组的原核信号序列替代碱性磷酸酶、青霉素酶、Ipp、或热稳定的肠毒素II(STII)前导序列、LamB、PhoE、Pe旧、OmpA和MBP。在本发明的一个实施方案中，表达系统的两个顺反子中都使用的信号序列是STII信号序列或其变体。在另一方面，依照本发明的免疫球蛋白的生成可在宿主细胞的细胞质中发生，因此不需要在每个顺反子内存在分泌信号序列。在那点上，免疫球蛋白轻链和重链在细胞质内表达、折叠和装配而形成功能性免疫球蛋白。某些宿主菌林(如大肠杆菌trxB-菌抹)提供有利于二硫键形成的细胞质条件，从而容许所表达蛋白质亚基的正确折叠和装配。ProbaandPluckthun，Gene159:203(1995)。本发明的抗体还可使用如下表达系统来生成，其中所表达多肽构件的数量比率可以受到调控，从而将分泌且正确装配的本发明抗体的产量最大化。这种调控是至少部分通过同时调控多肽构件的翻译强度而实现的。Simmons等人，美国专利No.5,840,523中公开了用于调控翻译强度的一种技术。它在顺反子内利用翻译起始区(TIR)的变体。对于指定TIR，可创建具有一定范围翻译强度的一系列氨基酸或核酸序列变体，由此提供针对特定链的期望表达水平调整此因素的方便手段。可通过常规诱变技术导致能改变氨基酸序列的密码子变化来生成TIR变体。在某些实施方案中，核苷酸序列中的变化是沉默的。TIR中的改变可包括例如Shine-Dalgarno序列的数目或间距的改变，及信号序列中的改变。用于生成突变型信号序列的一种方法是在编码序列的开端生成不改变信号序列氨基酸序列的"密码子库"(即变化是沉默的)。这可通过改变每个密码子的第三个核苷酸位置来实现；另外，有些氨基酸，诸如亮氨酸、丝氨酸、和精氨酸，具有多种第一个和第二个位置，这可在建库中增加复杂性。Yansuraetal.,METHODS:ACompaniontoMethodsinEnzymol.4:151-158(1992)中详细记载了这种诱变方法。在一个实施方案中，对于载体中的每个顺反子，生成具有一定范围TIR强度的一组载体。这个有限集合提供了每条链的表达水平以及期望抗体产物的产量在各种TIR强度组合下的比较。可通过量化报道基因的表达水平来测定TIR强度，Sitnmons等人，美国专利No.5，840，523中有详细描述。根据翻译强度的比较，选择期望的个别TIR在本发明的表达载体构建物中进行组合。适于表达本发明抗体的原核宿主细胞包^"古细菌(Archaebacteria)和真细菌(Eubacteria)，诸如革兰氏阴性或革兰氏阳性生物体。有用细菌的实例包括埃希氏菌属(Escherichia)(如大肠埃希氏菌E.coli)、芽孢杆菌属(Bacillus)(如枯草芽孢杆菌B.subtilis)、肠杆菌属(Enterobacterial假单胞菌属(Pseudomonas)(如铜绿，i单胞菌P.aeruginosa)物种、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)、粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescans)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、变形菌属(Proteus)、志贺氏菌属(Shigella)、根瘤菌属(Rhizobium)、透明顫菌属(Vitreoscilla)、或副J求菌属(Paracoccus)。在一个实施方案中，使用革兰氏阴性细胞。在一个实施方案中，使用大肠杆菌细胞作为本发明的宿主。大肠杆菌菌林的实例包括菌株W3110(Bachmann,CellularandMolecularBiology,第2巻，Washington,D.C.，美国微生物学学会，1987，第1190-1219页；ATCC保藏号27，325)及其衍生物，包括具有基因型W3110AfhuA(AtonA)ptr3lacIqlacL8AompTA(nmpc-fepE)degP41kanR的菌抹33D3(美国专利No.5，639，635)。其它菌抹及其衍生物，诸如大肠杆菌294(ATCC31,446)、大肠杆菌B、大肠杆菌入1776(ATCC31,537)和大肠杆菌RV308(ATCC31,608)也是合适的。这些实例只是例示而非限制。本领域知道用于构建具有指定基因型的任何上述细菌衍生物的方法，参见例如Bassetal.，Proteins8:309-314(1990)。通常必需考虑复制子在细菌细胞中的可复制性来选择适宜的细菌。例如，在使用众所周知的质粒诸如pBR322、pBR325、pACYC177或pKN410来提供复制子时，大肠杆菌、沙雷氏菌属、或沙门氏菌属物种可能适于用作宿主。通常，宿主细胞应当分泌最小量的蛋白水解酶，而且可能希望在细胞培养中掺入额外的蛋白酶抑制剂。(2)抗体生成用上述表达载体转化宿主细胞，并在为了诱导启动子、选择转化子或扩增编码期望序列的基因而适当改动的常规营养培养基中进行培养。转化即将DNA导入原核宿主，使得DNA能够进行复制，或是作为染色体外元件或是通过染色体成分。根据所用宿主细胞，使用适于这些细胞的标准技术进行转化。采用氯化钙的钙处理通常用于具有坚固细胞壁屏障的细菌细胞。另一种转化方法采用聚乙二醇/DMSO。使用的还有一种技术是电穿孑L在本领域知道的且适于培养选定宿主细胞的培养基中培养用于生成本发明多肽的原核细胞。合适培养基的实例包括添加了必需营养补充物的LB培养基(Luriabroth)。在有些实施方案中，培养基还含有根据表达载体的构建而选择的选择剂，以选择性容许包含表达载体的原核细胞生长。例如，向用于培养表达氨千青霉素抗性基因的细胞的培养基中添加氨苄青霉素。在碳、氮、和无机磷酸盐来源以外，还可含有适当浓度的任何必需补充物，或是单独加入或是作为与另一种补充物或培养基的混合物，诸如复合氮源。任选的是，培养基可含有一种或多种选自下组的还原剂谷胱甘肽、半胱氨酸、胱胺、巯基乙酸盐/S旨、二疏赤藓糖醇和二硫苏糖醇。在合适的温度培养原核宿主细胞。在某些实施方案中，对于培养大肠杆菌，培养的温度范围为约20。C至约39。C、约25。C至约37。C、或约30。C。主要取决于宿主生物体，培养基的pH可以是范围为约5至约9的任何pH。在某些实施方案中，对于大肠杆菌，pH为约6.8至约7.4、或约7.0。如果本发明的表达载体中使用诱导型启动子，那么在适于激活启动子的条件下诱导蛋白质表达。在本发明的一个方面，使用PhoA启动子来控制多肽的转录。因此，为了诱导，在磷酸盐限制培养基中培养经过转化的宿主细胞。在某些实施方案中，磷酸盐限制培养基是C.R.A.P培养基(参见例如Simmonsetal.,J.Immunol.Methods263:133-147(2002))。根据所采用的载体构建物，可采用多种其它诱导物，正如本领域所知道的。在一个实施方案中，所表达的本发明多肽分泌到宿主细胞的周质中并从中回收。蛋白质回收通常牵涉破坏微生物，通常通过诸如渗压震扰(osmoticshock)、超声处理或裂解等手段。一旦细胞遭到破坏，可通过离心或过滤清除细胞碎片或整个细胞。可以通过例如亲和树脂层析进一步纯化蛋白质。或者，蛋白质可能转运到培养液中并从中分离。可从培养液清除细胞，并将培养物上清液过滤和浓缩，用于进一步纯化所生成蛋白质。可使用普遍知道的方法诸如聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和Western印迹分析进一步分离和鉴定所表达蛋白质。在本发明的一个方面，通过发酵过程大量进行抗体生产。多种大规^^莫补料-分批发酵流程可用于生产重組蛋白。大规才莫发酵具有至少1000升的容量，在某些实施方案中是约1,000至100,000升的容量。这些发酵罐使用搅拌器叶轮来分配氧和养分，尤其是葡萄糖(优选的碳源/能源)。小规模发酵通常指在体积容量不超过约100升的发酵罐中进行的发酵，范围可以是约l升至约函升。在发酵过程中，通常在将细胞在合适条件下培养至期望密度(如OD550约180-220，在此阶段细胞处于早期稳定期)后启动蛋白质表达的诱导。根据所采用的载体构建物，可使用多种诱导物，正如本领域知道的和上文描述的。可在诱导前将细胞培养较短的时间。通常将细胞诱导约12-50小时，但是可使用更长或更短的诱导时间。为了提高本发明多肽的产量和质量，可修改多项发酵条件。例如，为了改善所分泌抗体多肽的正确装配和折叠，可使用过度表达伴侣蛋白诸如Dsb蛋白(DsbA、DsbB、DsbC、DsbD和/或DsbG)或FkpA(具有伴侣活性的一种肽基脯氨酰-顺式，反式-异构酶)的额外载体来共转化宿主原核细胞。已经证明伴侣蛋白促进在细菌宿主细胞中生成的异源蛋白质的正确折叠和溶解度。Chenetal"J.Biol.Chem.274:19601-19605(1999);Georgiou等人，美国专利No.6,083,715;Georgiou等人，美国专利No.6，027，888;BothmannandPluckthun，J.Biol.Chem.275:17100-17105(2000);RammandPluckthun，J,Biol.Chem.275:17106-17113(2000);Arieetal.，Mol.Microbiol.39:199-210(2001)。为了将所表达异源蛋白质(尤其是对蛋白水解敏感的异源蛋白质)的蛋白水解降至最低，可将蛋白水解酶缺陷的某些宿主菌林用于本发明。例如，可修饰宿主细胞菌抹，在编码已知细菌蛋白酶的基因中进行遗传突变，诸如蛋白酶III、OmpT、DegP、Tsp、蛋白酶I、蛋白酶Mi、蛋白酶V、蛋白酶VI及其组合。可以获得有些大肠杆菌蛋白酶缺陷菌株，参见例如Jolyetal.，(1998)见上文；Georgiou等人，美国专利No.5,264,365;Georgiou等人，美国专利No.5,508,192;Haraetal.,MicrobialDrugResistance2:63-72(1996)。在一个实施方案中，在本发明的表达系统中使用蛋白水解酶缺陷且经过过度表达一种或多种伴侣蛋白的质粒转化的大肠杆菌菌林作为宿主细胞。(3)抗体纯化在一个实施方案中，进一步纯化本文中生成的抗体以获得基本上同质的制品，用于进一步的测定和使用。可采用本领域知道的标准蛋白质纯化方法。下面的流程是合适纯化流程的例示免疫亲和或离子交换柱上的分级、乙醇沉淀、反相HPLC、硅土或阳离子交换树脂诸如DEAE上的层析、层析聚焦、SDS-PAGE、硫酸铵沉淀、和使用例如SephadexG-75的凝胶过滤。在一个方面，将固定在固相上的蛋白A用于本发明抗体产物的免疫亲和纯化。蛋白A是来自金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureas)的41kD细胞壁蛋白质，它以高亲和力结合抗体Fc区。Lindmarketal.，J.Immunol.Meth.62:1-13(1983)。蛋白A固定其上的固相可以是具有玻璃或石英表面的柱子，或者可控孔径玻璃柱或硅酸柱。在有些应用中，柱子以诸如甘油等试剂包被，用以有可能防止污染物的非特异粘附。作为纯化的第一步，可以将衍生自如上所述细胞培养物的制备物施加到蛋白A固定化固相上，使得目的抗体特异结合蛋白A。然后清洗固相以清除与固相非特异结合的污染物。最后通过洗脱从固相回收目的抗体。b)使用真核宿主细胞生成抗体用于真核宿主细胞的载体通常包括一种或多种如下非限制性构件信号序列、复制起点、一种或多种标志基因、增强子元件、启动子、和转录终止序列。(1)信号序列构件在真核宿主细胞中使用的载体还可在目的成熟蛋白质或多肽的N端包含信号序列或具有特异切割位点的其它多肽。可以选择受到宿主细胞识别并加工(即被信号肽酶切除)的异源信号序列。在哺乳动物细胞表达中，可利用哺乳动物信号序列以及病毒分泌前导，例如单纯疱渗病毒gD信号。将这些前体区的DNA以符合读码框的方式连接至编码抗体的DNA。(2)复制起点通常，哺乳动物表达载体不需要复制起点构件。例如，SV40起点通常可能只因包含早期启动子才使用。(3)选择基因构件表达和克隆载体可包含选择基因，也称为选择标志。典型的选择基因编码如下蛋白质(a)赋予对抗生素或其它毒素的抗性，如氨千青霉素、新霉素、曱氨蝶呤或四环素；(b)补足相应的营养缺陷；或(c)提供不能从复合培养基获得的关键营养物。选择方案的一个实例利用药物来阻滞宿主细胞的生长。经异源基因成功转化的那些细胞生成赋予药物抗性的蛋白质，因而幸免于选择方案。此类显性选择的实例使用药物新霉素、霉酚酸和潮霉素。适于哺乳动物细胞的选择标志的另一个实例是能够鉴定有能力摄取抗体核酸的细胞的选择标志，诸如DHFR、胸苷激酶、金属硫蛋白I和II(优选灵长类金属硫蛋白基因)、腺苷脱氨酶、鸟氨酸脱羧酶等。例如，在有些实施方案中，首先通过将所有转化子在含有甲氨蝶呤(Mtx,DHFR的一种竟争性拮抗剂)的培养基中进行培养来鉴定经DHFR选择基因转化的细胞。在有些实施方案中，在采用野生型DHFR时，适宜的宿主细胞是例如DHFR活性缺陷的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系(如ATCCCRL-9096)。或者，可通过在含有针对选择标志的选择剂诸如氨基糖苷抗生素如卡那霉素、新霉素或G418的培养基中培养细胞来选择经编码抗体、野生型DHFR蛋白、和另一种选择标志诸如氨基糖苷3'-磷酸转移酶(APH)的DNA序列转化或共转化的宿主细胞(特别是包含内源DHFR的野生型宿主)。参见美国专利No.4,965,199。(4)启动子构件表达和克隆载体通常包含受到宿主生物体识别的启动子，且与编码感兴趣多肽(例如抗体)的核酸可操作连接。已知真核细胞的启动子序列。例如，事实上，所有真核基因都具有富含AT区，它位于起始转录的位点上游约25至30个碱基处。在许多基因的转录起点上游70至80个碱基处发现的另一种序列是CNCAAT区，其中N可以是任何核苷酸。在大多数真核基因的3'端是AATAAA序列，它可能是向编码序列的3'端添加聚腺苷酸(polyA)尾的信号。在某些实施方案中，任何或所有这些序列可以合适的插入真核表达载体中。在哺乳动物宿主细胞中自载体转录受到例如从病毒(诸如多瘤病毒、禽痘病毒、腺病毒(诸如2型腺病毒)、牛乳头瘤病毒、禽类肉瘤病毒、巨细胞病毒、逆转录病毒、乙肝病毒、和猿猴病毒40(SV40))基因组获得的、来自异源哺乳动物启动子(如肌动蛋白启动子或免疫球蛋白启动子)的、来自热休克启动子的启动子的控制，倘若这些启动子与宿主细胞系统相容的话。方便的以SV40限制性片段的形式获得SV40病毒的早期和晚期启动子，该片段还包含SV40病毒复制起点。方便的以HindIIIE限制性片段的形式获得人巨细胞病毒的立即早期启动子。美国专利4，419,446中公开了使用牛乳头瘤病毒作为载体在哺乳动物宿主中表达DNA的系统。美国专利No.4,601，978中记载了该系统的一种修改。关于在小鼠细胞中在来自单纯疱渗病毒的胸苷激酶启动子的控制下表达人P-干扰素cDNA还可参见Reyesetal.，Nature297:598-601(1982)。或者，可使用劳氏肉瘤病毒长末端重复序列作为启动子。(5)增强子元件构件常常通过在载体中插入增强子序列来提高高等真核细胞对编码本发明抗体的DNA的转录。现在知道来自哺乳动物基因(球蛋白、弹性蛋白酶、清蛋白、Ot-胎蛋白和胰岛素)的许多增强子序列。然而，通常使用来自真核细胞病毒的增强子。实例包括SV40复制起点晚期侧的增强子(bp100-270)、巨细胞病毒早期启动子增强子、多瘤病毒复制起点晚期侧的增强子、'和腺病毒增强子。关于激活真核启动子的增强子元件还可参见Yaniv,Nature297:17-18(1982)。增强子可剪接到载体中，位于抗体多肽编码序列的5'或3'位置，但是一般位于启动子的5'位点。(6)转录终止构件在真核宿主细胞中使用的表达载体还可包含终止转录和稳定mRNA所必需的序列。此类序列通常可从真核或病毒DNA或cDNA非翻译区的5'端和偶尔的3'端获得。这些区域包含在编码抗体的mRNA的非翻译区中转录成聚腺苷酸化片段的核苦酸区段。一种有用的转录终止构件是牛生长激素聚腺苷酸化区。参见WO94/11026及其中公开的表达载体。(7)宿主细胞的选择和转化适于克隆或表达本文载体中的DNA的宿主细胞包括本文描述的高等真核细胞，包括脊推动物宿主细胞。脊推动物细胞在培养(组织培养)中的繁殖已经成为常规流程。有用哺乳动物宿主细胞系的实例有经SV40转化的猴肾CV1系(COS-7,ATCCCRL1651)、人胚肾系(293细胞或为悬浮培养而亚克隆的293细月包，Grahametal.,J.Gen.Virol.36:59(1977))、幼仓鼠肾细月包(BHK，ATCCCCL10)、中国仓鼠卵巢细胞ADHFR(CHO，Urlaubetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA77:4216(1980))、小鼠塞托利(Sertoli)细胞(TM4，Mather,Biol.R印rod.23:243-251(1980))、猴肾细胞(CVl，ATCCCCL70)、非洲绿猴肾细胞(VERO-76,ATCCCRL1587)、人宫颈癌细胞(HELA，ATCCCCL2)、犬肾细胞(MDCK，ATCCCCL34)、牛鼠(buffalorat)肝细胞(BRL3A，ATCCCRL1442)、人肺细胞(W138,ATCCCCL75)、人肝细胞(HepG2，HB8065)、小鼠乳瘤(MMT060562,ATCCCCL51)、TRI细胞(Matheretal.，AnnalsN.Y.Acad.Sci.383:44-68(1982))、MRC5细胞、FS4细月包、和人肝细胞瘤(hepatoma)系(HepG2)。为了生成抗体，用上文所述表达或克隆载体转化宿主细胞，并在为了诱导启动子、选择转化子或扩增编码期望序列的基因而适当改动的常规营养培养基中进行培养。(8)宿主细胞的培养可在多种培养基中培养用于生成本发明抗体的宿主细胞。商品化培养基诸如Ham氏FlO(Sigma)、极限必需培养基(MEM,Sigma)、RPMI-1640(Sigma)、和Dulbecco氏改良Eagle氏培养基(DMEM,Sigma)适于培养宿主细胞。另外，可使用下列文献中记载的任何培养基作为宿主细胞的培养基Hametal.，Meth.Enz.58:44(1979);Barnesetal.，Anal.Biochem.102:255(1980);美国专利No.4,767,704;4,657,866;4，927，762;4，560，655;5，122，469;WO90/03430;WO87/00195;或美国专利复审30，985。任何这些培养基可根据需要补充激素和/或其它生长因子(诸如胰岛素、运铁蛋白或表皮生长因子)、盐(诸如氯化钠、钙、镁和磷酸盐)、緩冲剂(诸如HEPES)、核苷酸(诸如腺苷和胸苦)、抗生素(诸如GENTAMYCINTM药物)、痕量元素(定义为通常以微摩尔范围的终浓度存在的无机化合物)、和葡萄糖或等效能源。还可以适宜浓度含有本领域技术人员知道的任何其它补充物。培养条件诸如温度、pH等即为表达而选择的宿主细胞先前所用的，这对于普通技术人员是显然的。(9)抗体的纯化在使用重组技术时，可在细胞内生成抗体，或者直接分泌到培养基中。如果在细胞内生成抗体，那么首先可以通过例如离心或超滤清除微粒碎片，或是宿主细胞或是裂解片段。如果抗体分泌到培养基中，那么可以首先使用商品化蛋白质浓缩滤器(例如Amicon或MilliporePellicon超滤单元)浓缩来自这些表达系统的上清液。可在任何上述步骤中包括蛋白酶抑制剂诸如PMSF以抑制蛋白水解，而且可包括抗生素以防止外来污染物的生长。可使用例如羟磷灰石层析、凝胶电泳、透析和亲和层析(亲和层析是一种便利的技术)来纯化从细胞制备的抗体组合物。蛋白A作为亲和配体的适宜性取决于抗体中存在的任何免疫球蛋白Fc结构域的种类和同种型。蛋白A可用于纯化基于人yl、丫2、或y4重链的抗体(Lindmarketal.,J.Immunol.Meth.62:1-13(1983))。蛋白G推荐用于所有小鼠同种型和人y3(Gussetal.，EMBO丄5:1567-1575(1986))。亲和配体所附着的基质可以是琼脂糖，但是可使用其它基质。物理稳定的基质诸如可控孔径玻璃或聚(苯乙烯二乙烯)苯能获得比琼脂糖更快的流速和更短的加工时间。若抗体包含CH3结构域，则可使用BakerbondABXTM树脂(J.T.Baker,Phillipsburg，NJ)进行纯化。根据待回收的抗体，也可使用其它蛋白质纯化技术诸如离子交换柱上的分级、乙醇沉淀、反相HPLC、硅土上的层析、肝素SEPHAROSETM上的层析、阴离子或阳离子交换树脂(诸如聚天冬氨酸柱)上的层析、层析聚焦、SDS-PAGE和硫酸铵沉淀。在任何初步纯化步骤之后，可将含有目的抗体和污染物的混合物进行进一步的纯化，例如低pH疏水相互作用层析，使用pH约2.5-4.5的洗脱緩沖液，优选在低盐浓度(如约0-0.25M盐)进行。一般而言，用于制备供研究、测试和临床使用的抗体的各种方法是本领域已完善建立的，与上文所述方法是一致的和/或本领域技术人员认为对于特定的感兴趣抗体是适宜的。C.免疫偶联物免疫偶联物或"抗体-药物偶联物"可用于在癌症治疗中局部投递细胞毒齐'J。参见侈寸^口Syrigosetal.(1999)AnticancerResearch19:605-614;Niculescu-Duvazetal.(1997)Adv.DrugDeliv.Rev.26:151-172;美国专利No.4,975,278。免疫偶联物容许将药物模块靶向投递至肿瘤，而系统施用未经偶联的细胞毒剂可能在试图消除的肺瘤细胞以外导致不可接受的对正常细胞的毒性水平。参见Baldwinetal.(Mar.15,1986)Lancetpp.603-05;Thorpe(1985)"AntibodyCarriersOfCytotoxicAgentsInCancerTherapy:AReview,"于MonoclonalAntibodies'84:BiologicalandClinicalApplications(A.Pincheraetal"eds.)pp.475-506。一方面，免疫偶联物包含结合IL-19、IL-20、IL-22、IL-24、IL22R、IL-20Ra、IL-20Rb、或IL-10R2的抗体，诸如本文中所提供的，及细胞毒剂，诸如化疗剂、生长抑制剂、毒素(如细菌、真菌、植物或动物起源的酶活性毒素或其片段)或放射性同位素(即放射偶联物)。上文已经描述了可用于生成此类免疫偶联物的化疗剂。可使用的酶活性毒素及其片段包括白喉毒素A链、白喉毒素的非结合活性片段、外毒素A链(来自铜绿假单胞菌尸wwofowo"osaerwg/"osG)、蓖麻毒蛋白(ricin)A链、相思豆毒蛋白(abrin)A链、蒴莲根毒蛋白(modeccin)A链、a-帚曲霉素(sarcin)、油桐(j/ew"tes/oratt)毒蛋白、香石竹(dianthin)毒蛋白、美洲商陆(尸/^o/"caamen'cawa)毒蛋白(PAPI、PAPII和PAP-S)、苦瓜(Afoworafcac/^ra""a)卞卩制物、麻疯树毒蛋白(curcin)、巴豆毒蛋白(crotin)、肥皂草Csa/ao"or/ao^c/"ato)抑制物、白树毒蛋白(gelonin)、丝林霉素(mitogellin)、局限曲菌素(restrictocin)、酚霉素(phenomycin)、依i若霉素(enomycin)和单端孑包菌素(trichothecenes)。多种放射性核素可用于生成放射偶联抗体。实例包括^Bi、131I、131In、9和186Re。抗体和细胞毒剂的偶联物可使用多种双功能蛋白质偶联剂来制备，诸如N-琥珀酰亚氨基-3-(2-吡啶基二硫代)丙酸酯(SPDP)、亚氨基硫烷(IT)、亚氨酸酯(诸如盐酸己二酰亚氨酸二曱酯)、活性酯类(诸如辛二酸二琥珀酰亚氨基酯)、醛类(诸如戊二醛)、双叠氮化合物(诸如双(对-叠氮苯曱酰基)己二胺)、双重氮衍生物(诸如双(对-重氮苯曱酰基)乙二胺)、二异氰酸酯(诸如曱笨2,6-二异氰酸酯)、和双活性氟化合物(诸如l,5-二氟-2,4-二硝基苯)的双功能衍生物。例如，可如Vitettaetal.，Science238:1098(1987)中所述制备蓖麻毒蛋白免疫毒素。碳-14标记的l-异硫氰酸苯曱基-3-曱基二亚乙基三胺五乙酸(MX-DTPA)是用于将放射性核苷酸与抗体偶联的例示性螯合剂。参见WO94/11026。本文还设想了抗体与一种或多种小分子毒素诸如加利车霉素(calicheamicin)、美登木素生物碱类(maytansinoids)、单端孑包霉素(trichothene)和CC1065及这些毒素具有毒素活性的衍生物的偶联物。1.美登素和美登木素生物碱类在一个实施方案中，免疫偶联物包含偶联有一个或多个美登木素生物碱分子的抗体。美登木素生物碱类是通过抑制微管蛋白多聚化来发挥作用的有丝分裂抑制剂。美登素最初从东非灌木齿叶美登木(Mqyfe"^"rrato)分离得到(美国专利No.3,896,111)。随后发现某些微生物也生成美登木素生物碱类，诸如美登醇和C-3美登醇酯(美国专利4，151，042)。例如下列美国专利公开了合成美登醇及其衍生物和类似物4,137,230;4,248,870;4,256,746;4,260,608;4,265,814;4,294,757;4，307，016;4，308，268;4,308,269;4,309,428;4,313,946;4,315,929;4,317,821;4,322,348;4,331,598;4,361,650;4,364,866;4,424,219;4,450,254;4，362，663;及4，371，533,明确将其公开内容收入本文作为参考。在改进其治疗指数的尝试中，已经将美登素和美登木素生物碱类与结合肿瘤细胞表面上的抗原的抗体偶联。例如下列专利公开了包含美登木素生物碱类的免疫偶联物及其治疗用途美国专利5，208，020;5,416,064;及欧洲专利EP0425235Bl，明确将其公开内容收入本文作为参考。Liuetal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA93:8618-8623(1996)记载了包含与针对人结肠直肠癌的单克隆抗体C242连接的称为DM1的美登木素生物碱的免疫偶联物。发现该偶联物具有针对培养的结肠癌细胞的高度细胞毒性，而且在体内肿瘤生长测定法中显示抗肺瘤活性。Charietal.,CancerResearch52:127-131(1992)记栽了其中美登木素生物碱经二硫化物接头与结合人结肠癌细胞系上抗原的鼠抗体A7或结合HER-2/"ew癌基因的另一种鼠单克隆抗体TA.l偶联的免疫偶联物。在体外在人乳癌细胞系SK-BR-3上测试了TA.1-美登木素生物碱偶联物的细胞毒性，该细胞系每个细胞表达3x1()S个HER-2表面抗原。药物偶联物达到了与游离美登木素生物碱药物相似的细胞毒性程度，这可通过增加每个抗体分子偶联的美登木素生物碱分子数目来提高。A7-美登木素生物碱偶联物在小鼠中显示低系统性细胞毒性。抗体-美登木素生物碱偶联物可通过将抗体与美登木素生物碱分子化学连接且不显著削弱抗体或美登木素生物碱分子的生物学活性来制备。每个抗体分子偶联平均3-4个美登木素生物碱分子在增强针对靶细胞的细胞毒性中显示功效，且对抗体的功能或溶解度没有负面影响，尽管预计甚至每个抗体带一个分子的毒素也将较之棵抗体的使用增强细胞毒性。美登木素生物石咸类在本领域是众所周知的，而且可使用已知技术合成或从天然来源分离。例如美登木素生物碱类。优选的美登木素生物碱类是美登醇和美登醇分子的芳香环或其它位置经过修饰的美登醇类似物，诸如各种美登醇酯。本领域知道许多连接基团可用于制备抗体-美登木素生物碱偶联物，包括例如美国专利5，208，020或欧洲专利0425235Bl及Charietal.，CancerResearch52:127-131(1992)中所公开的。连接基团包括二硫化物基团、硫醚基团、酸不稳定基团、光不稳定基团、肽酶不稳定基团、或酯酶不稳定基团，正如上文所述专利中所公开的，优选二硫化物和硫醚基团。可使用多种双功能蛋白质偶联剂来制备抗体和美登木素生物碱的偶联物，诸如N-琥珀酰亚氨基-3-(2-吡咬基二硫代)丙酸酯(SPDP)、琥珀酰亚氨基-4-(N-马来酰亚氨基曱基)环己烷-l-羧酸酯、亚氨基硫烷(IT)、亚氨酸酯(诸如盐酸己二酰亚氨酸二曱酯)、活性酯类(诸如辛二酸二琥珀酰亚氨基酯)、醛类(诸如戊二醛)、双叠氮化合物(诸如双(对-叠氮苯甲酰基)己二胺)、双重氮衍生物(诸如双(对-重氮苯曱酰基)-乙二胺)、二异氰酸酯(诸如甲苯2,6-二异氰酸酯)、和双活性氟化合物(诸如l，5-二氟-2,4-二硝基苯)的双功能衍生物。某些偶联剂，包括N-琥珀酰亚氨基-3-(2-吡咬基二硫代)丙酸酯(SPDP)(Carlssonetal.，Biochem.J.173:723-737(1978))和N-琥珀酰亚氨基-4-(2-吡啶基硫代)戊酸酯(SPP)，提供二硫键连接。根据连接的类型，可将接头附着于美登木素生物碱分子的多个位置。例如，可使用常规偶联技术通过与羟基的反应来形成酯键。反应可发生在具有羟基的C-3位置、经羟曱基修饰的C-14位置、经羟基修饰的C-15位置、和具有羟基的C-20位置。在一个优选的实施方案中，在美登醇或美登醇类似物的C-3位置形成键连接。2.Auristatin和多拉司他汀在有些实施方案中，免疫偶联物包含与多拉司他汀(dolastatin)或多拉司他汀肽类似物或衍生物例如auristatin偶联的抗体(美国专利No.5，635，483;5,780,588)。多拉司他汀类和auristatin类已经显示出干扰微管动力学、GTP水解、及核和细胞分裂(Woykeetal(2001)Antimicrob.AgentsandChemother.45(12):3580-3584)且具有抗癌(美国专利No.5,663，149)和抗真菌活性(Pettitetal(1998)Antimicrob.AgentsChemother.42:2961-2965)。多4立司他汀或auristatin药物模块可经由肽药物模块的N(氨基)末端或C(羧基)末端附着于抗体(WO02/088172)。例示性的auristatin实施方案包括N-末端连接的单曱基auristatin药物模块DE和DF,披露于"MonomethylvalineCompoundsCapableofConjugationtoLigands",美国专利申请公开No.2005-0238649Al，明确将其公开内容完整收入本文作为参考。典型的是，基于肽的药物模块可通过在两个或多个氨基酸和/或肽片段之间形成肽键来制备。此类肽键可依照例如肽化学领域众所周知的液相合成法来制备(参见E.Schr6derandK.LUbke,ThePeptides,volume1，pp76-136,1965:AcademicPress)。auristatin/多拉司他汀药物4莫块可依照以下文献中的方法来制备US5,635,483;US5,780,588;Pettitetal(1989)J.Am.Chem.Soc.111:5463-5465;Pettitetal(1998)Anti-CancerDrugDesign13:243-277;Pettit，G.R.，etal.Synthesis,1996，719-725;Pettitetal(1996)J.Chem.Soc.PerkinTrans.15:859-863;及Doronina(2003)NatBiotechnol21(7):778-784;美国专利申请爿^开No.2005-0238649Al，将其完整收入本文作为参考"皮露了例如制备诸如MMAE和MMAF偶联至接头的单曱基缬氨酸化合物的接头和方法)。3.加利车霉素另一种感兴趣的免疫偶联物包含与一个或多个加利车霉素分子偶联的抗体。加利车霉素抗生素家族能够在亚皮摩尔浓度生成双链DNA断裂。关于加利车霉素家族偶联物的制备参见美国专利5,712,374;5,714,586;5,739,116;5,767,285;5,770,701;5,770,710;5,773,001;5,877,296(都授予美国Cyanamid公司)。可用的加利车霉素结构类似物包括但不限于W、a、ci31、N-乙酰基-Yi1、PSAG和0、(Hinmanetal.,CancerResearch53:3336-3342(1993);Lodeetal.，CancerResearch58:2925-2928(1998);及上述授予美国Cyanamid公司的美国专利)。可与抗体偶联的另一种抗肿瘤药物是QFA，它是一种抗叶酸药物。加利车霉素和QFA都具有胞内作用位点，且不易穿过质膜。因此，这些试剂经由抗体介导的内在化的细胞摄取大大增强了它们的细胞毒效果。4.其它细胞毒剂可与抗体偶联的其它抗肿瘤剂包括BCNU、链佐星(streptozoicin)、长春新碱(vincristine)、5-氟尿嘧啶、美国专利5,053,394、5，770,710中记载的统称为LL-E33288复合物的试剂家族、及埃斯波霉素类(esperamicins)(美国专利5,877,296)。可用的酶活性毒素及其片段包括白喉毒素A链、白喉毒素的非结合活性片段、外毒素A链(来自铜绿假单胞菌尸化wcfowo"osaen^'"osa)、蓖麻毒蛋白(ricin)A链、相思豆毒蛋白(abrin)A链、蒴莲根毒蛋白(modeccin)A链、a-帚曲霉素(sarcin)、油桐04/ew故es/oni")毒蛋白、香石竹(dianthin)毒蛋白、美洲商陆(尸/^to/acaamen'cawa)毒蛋白(PAPI、PAPII和PAP-S)、苦瓜(MomoW/cac/7ara"ria)抑制物、麻疯树毒蛋白(curcin)、巴豆毒蛋白(crotin)、月巴皂草(■sapaowan'a0^cz'"afc)4中制物、白扭t毒蛋白(gelonin)、丝4木霉素(mitogellin)、局卩艮曲菌素(restrictocin)、酚霉素(phenomycin)、依i若霉素(enomycin)和单端孢菌素(trichothecenes)。参见例如1993年10月28日公布的WO93/21232。在另一个方面，免疫偶联物可以包含抗体和具有核酸降解活性的化合物(如核4唐核酸酶或DNA内切核酸酶，诸如脱氧核糖核酸酶；DNA酶)。为了选择性破坏肿瘤，免疫偶联物可包含抗FGFR2抗体和高度放射性原页子。多种放射性同位素可用于生成放射偶联的抗FGFR2抗体。实例包括At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32、Pb"2和Lu的放射性同位素。在将偶联物用于诊断时，可包含放射性原子用于闪烁照相研究，例如Tc"m或I123,或是包含自旋标记物用于核磁共振(NMR)成像(也称为磁共振成像，mri),诸如碘-123、換-131、铟-111、氟-19、碳-13、氮-15、氧-17、礼、锰或铁。可以已知方式将放射性或其它标记物掺入免疫偶联物。例如，可生物合成肽，或是通过化学氨基酸合成法合成肽，其中使用牵涉例如氟-19代替氢的合适氨基酸前体。可经肽中的半胱氨酸残基来附着标记物，诸如Tc"m或I123、Re186、Re"s和In川。可以经赖氨酸残基来附着钇-90。IODOGEN法(Frakeretal.，Biochem.Biophys,Res.Commun.80:49-57(1978))可用于掺入石典-123。《MonoclonalAntibodiesinImmunoscintigraphy》(Chatal,CRCPress,1989)详细记载了其它方法。D.拮抗剂和激动剂提供了IL-22的拮抗剂。这种拮抗剂包括直接作用于IL-22的那些(例如，抗IL-22抗体)和间接地影响IL-22活性的那些(例如，抗IL-22R抗体)。这种拮抗剂是有用的，例如，对于l)治疗炎性病症和自身免疫性病症，以及2)调控IL-23或IL-22信号传导。在一个特定的实施方案中，包含IL-22或IL-22R的拮抗剂的组合物对于降低哺乳动物中银屑病组织的量是有用的。在另一个特定的实施方案中，包含IL-22或IL-22R的拮抗剂的组合物对于部分或完全地抑制肺瘤细胞增殖是有用的。在一个方面，IL-22的拮抗剂是抗IL-22抗体或抗IL-22R抗体。在某些实施方案中，抗IL-22抗体是阻断性抗体，其完全或部分地阻断IL-22与其受体的相互作用。在某些实施方案中，抗IL-22RR抗体是阻断性抗体，其完全或部分地阻断IL-22R与IL-22的相互作用。在某些实施方案中，抗IL-22R抗体结合IL-22R的细胞外配体结合结构域。例如，抗IL-22R抗体可以结合人类IL-22R的细胞外配体结合结构域，其在SEQIDNO:3中从约氨基酸18-228中发现。在另一个方面，IL-22的拮抗剂是结合IL-22或IL-22R的寡肽。在一个实施方案中，寡肽结合IL-22R的细胞外配体结合结构域。寡肽可以使用已知的寡肽合成方法来化学地合成，或可以使用重组技术来制备和纯化。这种寡肽长度通常是至少约5个氨基酸，或者长度至少约6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、卯、91、92、93、94、95、96、97、98、99、或100个氨基酸。这种寡肽可以使用公知的技术不需过度实验地鉴定。对此，注意到，对寡肽库筛选能够特异性结合多肽靶物的寡肽是本领域公知的(参见，例如，美国专利No.5,556,762、5,750,373、4,708,871、4,833,092、5,223,409、5,403,484、5,571,689、5,663,143;PCT公开No.WO84/03506和WO84/03564;Geysenetal"Proc,Natl.Acad.Sci,U.S.A.,81:3998-4002(1984);Geysenetal"Proc.Natl.Acad.Sci.USA,82:178-182(1985);Geysenetal,于SyntheticPeptidesasAntigens,130-149(1986);Geysenetal.,J.Immunol.Meth.,102:259-274(1987);Schoofsetal.，J.Immunol,140:611-616(1988);Cwirla，S.E.etal.(1990)Proc.Natl.Acad.Sci.USA,87:6378;Lowman，H.B.etal.(1991)Biochemistry,30:10832;Clackson,T.etal.(1991)Nature,352:624;Marks,J.D.etal.(1991)J.Mol.Biol,222:581;Kang，A.S.etal.(1991)Proc.Natl.Acad.Sci.USA,88:8363;以及Smith,G.P.(1991)CurrentOpin.Biotechnol,2:668)。在某些实施方案中，寡肽可以偶联至细胞毒剂。在又一个方面，IL-22的拮抗剂是不同于在此描述的寡肽或抗体的、结合IL-22或IL-22R的有机分子。有机分子可以是，例如，小分子。在一个实施方案中，有机分子结合IL-22R的细胞外结构域。结合IL-22或IL-22R的有机分子可以使用公知的方法(参见，例如，PCT公开No.WO00/00823和WO00/39585)来鉴定和化学地合成。这种有机分子通常大小小于约2000道尔顿，或者大小小于约1500、750、500、250或200道尔顿,其中能够结合IL-22或IL-22R的这种有机分子可以使用公知的技术不需过度的实验来鉴定。就此来说，注意到，对有机分子库筛选能够结合多肽靶物的分子的技术是本领域公知的(参见，例如，PCT公开No.WO00/00823和WO00/39585)。在某些实施方案中，有机分子可以偶联至细胞毒剂。在又一个方面，IL-22拮抗剂是可溶的IL-22受体，例如，非膜结合的IL-22R形式。这种可溶形式的IL-22R可以与膜结合的IL-22R竟争结合IL-22。在某些实施方案中，可溶形式的IL-22R可以包含IL-22R的细胞外结构域的所有部分或配体结合部分，例如，包含SEQIDNO:3的氨基酸18-228的所有部分或配体结合部分。在某些实施方案中，可溶形式的IL-22R缺少跨膜结构域。例如，人类IL-22R的可溶形式可以缺少SEQIDNO:3的约氨基酸229-251的跨膜结构域的所有的或实质性的部分。已经报道了IL-22的天然发生的可溶受体。参见DumoutierL.etal.，"CloningandcharacterizationofIL-22bindingprotein,anaturalantagonistofIL-10-relatedTcell-derivedinduciblefactor/IL-22，"J.Immunol.166:7090-7095(2001);和XuW.etal.，"AsolubleclassIIcytokinereceptor,IL-22RA2,isanaturallyoccurringIL-22antagonist,"Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.98:9511-9516(2001)。本领域中，这种受体被不同地称为"IL-22BP，，或"IL-22RA2"。人类IL-22BP的序列在图4中显示。在此使用的术语"IL-22BP"或"IL-22结合蛋白"是指来自任何脊推动物来源，包括哺乳动物诸如灵长类(例如，人类和猴)和啮齿动物(例如，小鼠和大鼠)的任何天然的IL-22BP，除非另有陈述。在又一个方面，IL-22的拮抗剂是反义核酸，其降低IL-22或IL-22睹因的表达(即，其降低IL-22或IL-22It基因的转录和/或IL-22或IL-22RmRNA的翻译)。在某些实施方案中，反义核酸结合编码IL-22或IL-22R的核酸(DNA或RNA)。在某些实施方案中，反义核酸是长度约10-30个核苷酸的寡核苷酸(包括两个端点之间的所有点)。在某些实施方案中，反义寡核苷酸包含修饰的糖-磷酸二酯主干(或其他的糖键，包括硫代磷酸酯键和如WO91/06629中描述的键)，其中这种修饰的糖-磷酸二酯主干对内源核酸酶具有抗性。在一个实施方案中，反义核酸是寡脱氧核糖核苷酸，其引起编码IL-22或IL-22R的mRNA的降解和/或降低的转录或翻译。在某些实施方案中，反义核酸是通过"RNA干扰，，("RNAi")降低耙核酸的表达的RNA。对于RNAi的综述，参见，例如，Novinaetal.(2004)Nature430:161-164。这种RNA来源于，例如，短干扰RNA(siRNA)和microRNA。例如，siRNA可以作为长度约18-26个核苷酸的双链寡核糖核苷酸来合成。见上文。在又一个方面，提供了IL-22的激动剂。示范性的激动剂包括，但不限于，天然的IL-22或IL-22R;保持了天然多肽的至少一种活性的IL-22或IL-22R的片段、变体或修饰形式；能够结合并活化IL-22R的试剂；以及^"导IL-22或IL-22R或编码IL-22或IL-22R的核酸的过量表达的试剂。E.药用配制剂本发明提供了药用配制剂。在一个实施方案中，药用配制剂包含1)活性药剂，例如任何上文所述多肽、抗体、激动剂、或拮抗剂；和2)制药学可接受的载体。在另一个实施方案中，药用配制剂进一步包含至少一种别的治疗剂。治疗用配制剂可通过将具有期望纯度的药剂与任选的制药学可接受的载体、赋形剂或稳、定齐寸(/ew/"gtow's尸/2am7acewrica/5Wewcas,16thedition,Osol,A.Ed.,1980)混合，以冻干剂型或水溶液的形式制备供贮存。可接受的载体、赋形剂或稳定剂在所采用的剂量和浓度对接受者是无毒的，包括緩沖剂，诸如磷酸盐、柠檬酸盐和其它有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和曱硫氨酸；防腐剂(诸如氯化十八烷基二曱基千基铵；氯化己烷双胺；苯扎氯铵、苯索氯铵；酚、丁醇或苯曱醇；对羟基苯曱酸烷基酯，诸如对羟基苯曱酸曱酯或丙酯；邻苯二酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；和间曱酚)；低分子量(少于约10个残基)多肽；蛋白质，诸如血清清蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，诸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，诸如EDTA;糖类，诸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；成盐反荷离子，诸如钠；金属复合物(例如Zn-蛋白质复合物)；和/或非离子表面活性剂，诸如tweentm、PLURONICStm或聚乙二醇(PEG)。脂转染或脂质体也可用于将药剂投递入细胞。若药剂是抗体片段，则优选特异性结合靶蛋白质的最小抑制性片段。例如，根据抗体的可变区序列，可以设计保留结合靶蛋白质序列能力的肽分子。此类肽可以化学合成和/或通过重组DNA技术生成(参见例如Marascoetal,Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:7889-7893[1993])。本文中所公开的抗体还可配制成免疫脂质体。可通过本领域知道的方法来制备包含抗体的脂质体，诸如Epsteind"/.，尸rac.Ato/.爿cad5W,固82:3688(1985);Hwangda/"尸rac.胸/.^cad腦77:4030(1980);及美国专利No.4,485,045和4，544,545中所记载的。美国专利No.5，013，556中披露了循环时间延长的脂质体。特别有用的脂质体可用含有磷脂酰胆^S成、胆固醇和PEG衍生化磷脂酰乙醇胺(PEG-PE)的脂质组合物通过反相蒸发法生成。将脂质体挤过具有限定孔径的滤器，以产生具有期望直径的脂质体。可将本发明抗体的Fab，片段经二硫化物交换反应与脂质体偶联，如Martin"a/.,所o/.257:286-288(1982)中所记载的。任选在脂质体中包含化疗剂(诸如多柔比星)。参见Gabizon""/.，《/7Va"ow"/Owcer/mf.81(19):1484(1989)。药剂还可包载于例如通过凝聚技术或通过界面聚合制备的微胶嚢中(例如分别是羟曱基纤维素或明胶微胶嚢和聚(曱基丙烯酸曱酯)微胶嚢)、在胶状药物投递系统中(例如脂质体、清蛋白微球体、微乳剂、纳米颗粒和纳米胶嚢)、或在粗滴乳状液中。此类技术才皮露于例如i^m'"gto":sP/wrmaceM"ca/5We置s,16thedition,Osol，A.Ed.,1980。可制备药剂的持续释放制剂。持续释放制剂的合适例子包括含有药剂的固体疏水性聚合物半透性基质，该基质是定型产品的形式，例如薄膜或微胶嚢。持续释放基质的例子包括聚酯、水凝胶(例如聚(2-羟乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚交酯(美国专利No.3,773,919)、L-谷氨酸与L-谷氨酸Y乙酯的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯、可降解的乳酸-乙醇酸共聚物诸如LUPRONDEPOT(由乳酸-乙醇酸共聚物和醋酸亮丙瑞林构成的可注射微球体)及聚-D-(-)-3-羟基丁酸。虽然诸如乙烯-乙酸乙烯和乳酸-乙醇酸等聚合物能够释放分子达100天以上，但是某些水凝胶释放蛋白质的时间较短。当封装的抗体在体内长时间维持时，它们可能由于暴露于37。C的潮湿环境而变性或聚集，导致生物学活性损失和免疫原性可能改变。可以根据相关机制来设计合理的稳定化策略。例如，如果发现聚集机制是经由硫-二硫化物互换的分子间S-S键形成，那么可通过修饰巯基残基、由酸性溶液冻干、控制湿度、采用适宜添加剂和开发特定聚合物基质组合物来实现稳定。本文中的药用配制剂还可含有所治疗具体适应症所必需的超过一种活性化合物。例如，一方面，含有超过一种活性化合物的药用配制剂包含1)至少一种IL-22拮抗剂，例如结合IL-22的抗体和/或结合IL-22R的抗体；和2)至少一种结合IL-19、IL-20、IL-24、IL20Ra、IL-20Rb、或IL-10R2的抗体(其中可以以任何组合选择任何数目的2)中所列抗体)。另一方面，药用组合物包含两种或多种具有互补活性的活性化合物。例如，在一个实施方案中，药用組合物可以包含1)至少一种IL-22拮抗剂，例如结合IL-22的抗体和/或结合IL-22R的抗体；和2)TNF-a或IL-12的拮抗剂。又一方面，含有超过一种活性化合物的药用配制剂可以包含细胞毒剂或生长抑制剂。F.治疗方法提供了使用任何上述组合物或药用配制剂的治疗方法。除非另有陈述，这些方法包括体外的、回体的(exvivo)和体内的治疗方法。在各个方面，提供了刺激或抑制IL-23介导的信号传导途径的方法。提供了刺激或抑制Th^7细胞功能的方法。还提供了治疗炎性和/或自身免疫性病症的方法。进一步提供了治疗与IL-23或IL-22信号传导相关的病症的方法。还提供了治疗ThIL.17介导的病症的方法。以下提供了本发明的这些和其他方面。在一个方面，提供了刺激生物学系统中IL-23介导的信号传导途径的方法，所述方法包括向所述生物学系统提供IL-22激动剂。例如，生物学系统包括在体外细胞培养系统中或在有机体体内的哺乳动物细胞。模拟银屑病的示范性的生物学系统在实施例中提供，包括重构的人类表皮(RHE)(实施例14)或动物模型(实施例16)。在一个实施方案中，IL-22激动剂是IL-22。在另一个方面，提供了抑制生物学系统中IL-23介导的信号传导途径的方法，所述方法包括向所述生物学系统提供IL-22拮抗剂。在一个实施方案中，IL-22的拮抗剂是抗体，例如中和性抗IL-22抗体和/或中和性抗IL-22R抗体。在另一个方面，提供了刺激Th^7细胞功能的方法，所述方法包括使Th^7细胞暴露于IL-22激动剂。在一个实施方案中，IL-22激动剂是IL-22。在另一个方面，提供了抑制Thu7细胞功能的方法，所述方法包括使Thu7细胞暴露于IL-22拮抗剂。在一个实施方案中，IL-22拮抗剂是抗体，例如中和性抗IL-22抗体和/或中和性抗IL-22R抗体。示范性的Th^-n细胞功能包括，但不限于，刺激细胞介导的免疫(迟发型超敏反应)；先天免疫细胞，例如髓样细胞(例如，单核细胞和嗜中性细胞)向炎症部位的募集；以及刺激炎性细胞向组织中的浸润。在一个实施方案中，Thi.n细胞功能由IL-23介导。在又一个方面，提供了治疗炎症的方法，所述方法包括向需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的包含IL-22的拮抗剂的药用配制剂。在一个实施方案中，IL-22的拮抗剂是抗体，例如中和性抗IL-22抗体和/或中和性抗IL-22R抗体。炎症包括，但不限于，自身免疫性炎症(与自身免疫性病症相关的炎症)、慢性炎症、皮肤炎症、关节炎炎症(包括与类风湿性关节炎相关的炎症)和全身性炎性应答。在一个实施方案中，炎症由IL-23介导。在又一个方面，提供了治疗自身免疫性病症的方法，所述方法包括向需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的包含IL-22的拮抗剂的药用配制剂。在一个实施方案中，IL-22的拮抗剂是抗体，例如中和性抗IL-22抗体和/或中和性抗IL-22R抗体。自身免疫性病症包括，但不限于，结締组织疾病、多发性硬化、系统性红斑狼疮、炎性关节炎(例如，类风湿性关节炎)、自身免疫性肺部炎症、格-巴二氏综合征、自身免疫性曱状腺炎、胰岛素依赖性糖尿病、葡萄膜炎、重症肌无力、移植物抗宿主疾病、自身免疫性炎性眼病、银屑病、与自身免疫性相关的关节炎(例如，类风湿性关节炎)、脑的自身免疫性炎症、以及炎性肠病。在一个实施方案中，所述自身免疫性病症是IL-23介导的自身免疫性病症。在一个特定的方面，提供了治疗银屑病和/或以银屑病症状为特征的病症的方法。银屑病被认为是一种自身免疫性疾病，其中免疫系统的T细胞识别皮肤中的蛋白质并且攻击发现该蛋白质的区域，引起新的皮肤细胞的过快生长以及痛苦的、提高的鳞状病变。这些病变特征在于角质形成细胞的超增殖以及在银屑病病变的表皮中活化的T细胞的积累。虽然疾病的起始分子原因是未知的，已经对至少7种银屑病易感性基因座绘制了遗传连锁(6p21.3上的Psorl、17q上的Psor2、4q上的Psor3、1cent-q21上的Psor4、3q21上的Psor5、19pl3上的Psor以及lp上的Psor7)。这些基因座的某一些与其他自身免疫性/炎性疾病相关，包括类风湿性关节炎、特应性皮炎或炎性肠病(IBD)。治疗银屑病的当前的方法包括施用IL-12或TNF-a拮抗剂。参见，例如Nickoloffetal.(2004)J.Clin.Invest.113:1664-1675;Bowcocketal.(2005)NatRev.Immunol.5:699-711;Kauffmanetal.(2004)J.Invest.De腿tol.123:1037-1044。然而，此处提供的数据暗示了在银屑病的发病原理中有不同的IL-23/IL-22信号传导途径。因而，调控这种信号传导途径的治疗剂可以提供一种选择，或可以补充其他的银屑病治疗方法。在一个实施方案中，治疗银屑病的方法包括向患者施用有效量的包含IL-22拮抗剂的药用配制剂。在一个实施方案中，IL-22的拮抗剂是抗体，例如中和性抗IL-22抗体和/或中和性抗IL-22R抗体。在各种实施方案中，所述方法进一步包括施用(在同一药用配制剂或分开的药用配制剂中)至少一种别的治疗试剂。在一种这样的实施方案中，所述别的治疗试剂是选自IL-19、IL-20和IL-24的细胞因子的至少一种拮抗剂。这种拮抗剂包括，但不限于，结合IL-19、IL-20、IL-24、IL-20Ra、IL-20Rb或IL-10R2的抗体。可以以任何组合来选择任何数目的这些抗体。在另一个实施方案中，所述别的治疗试剂是已知在银屑病的治疗中有效的试剂。某些这样的治疗试剂已经有记载，例如，Nickoloffetal.(2004)J.Clin.Invest.113:1664-1675;Bowcocketal.(2005)Nat.Rev.Immunol.5:699-711;和Kauffinanetal.(2004)J.Invest.Dermatol.123:1037-1044。这些试剂包括，但不限于，耙向T细胞的治疗试剂,例如efalizumab和/或alefacept;IL-12的拮抗剂，例如结合IL-12或其受体的阻断性抗体；以及TNF-a的拮抗剂，例如结合TNF-a或其受体的阻断性抗体。在又一个方面，提供了抑制肺瘤发展的方法，所述方法包括向哺乳动物施用有效量的包含IL-22的拮抗剂的药用配制剂。在一个实施方案中，IL-22的拮抗剂是抗体，例如中和性抗IL-22抗体和/或中和性抗IL-22R抗体。在一个实施方案中，肿瘤发展由IL-23介导。本发明的组合物(例如，多肽、抗体、拮抗剂、激动剂和包含任何上述的药用配制剂)依照已知的方法施用给哺乳动物，优选人类，诸如，作为推注或通过一段时间的连续输注的静脉内施用，通过肌肉内的、腹膜内的、脑脊内的、皮下的、关节内的、滑膜内的、鞘内的、口腔的、体表的、或吸入(鼻内、肺内)路径。多肽和抗体的静脉内或吸入施用是优选的。在某些实施方案中，抗癌试剂的施用可以与本发明的组合物的施用组合。例如，要用本发明的组合物治疗的患者也可以接受抗癌试剂(化疗剂)或放射治疗。这种化疗剂的制备和给药方案可以依照厂家的说明书或如熟练医师经验性地所确定的使用。这种化疗的制备和给药方案还记载于ChemotherapyServiceEd"M.C.Perry,Williams&Wilkins，Baltimore,MD(1992)。化疗剂可以先于或晚于所述组合物的施用，或可以与之同时给予。另外，抗雌激素化合物例如他莫昔芬或抗孕酮诸如奥那司酮(参见，EP616812)也可以以这些分子已知的剂量给予。可能希望的是还施用针对其他疾病相关的或肿瘤相关的抗原的抗体，诸如，结合CD20、CDlla、CD18、ErbB2、EGFR、ErbB3、ErbB4或血管内皮因子(VEGF)的抗体。或者/另外，结合在此公开的相同的或两种或多种不同的抗原的两种或多种抗体可以共同施用给患者。在某些实施方案中，可能有益的是还向患者施用一种或多种细胞因子。在某些实施方案中，本发明的组合物与生长抑制试剂共同施用。例如，生长抑制试剂可以在组合物的施用之前、之后或同时地施用。生长抑制试剂的合适的剂量就是当前使用的那些，并且由于生长抑制试剂和组合物的组合作用(协同作用)可以被降低。对于治疗或降低免疫性疾病的严重度，本发明的组合物的适合的剂量将取决于如以上定义的要治疗的疾病的类型、疾病的严重度和进程、施用的试剂是预防还是治疗目的、早先的治疗、患者的疾病史和对化合物的应答、以及主治医师的判断。一次性或在一系列治疗中将化合物适当地施用给患者。例如，取决于疾病的类型和严重度，约lpg/kg到15mg/kg(例如，0.1-20mg/kg)的多肽或抗体是向患者施用的起始候选剂量，例如，无论是通过一次或多次分开的施用还是通过连续的输注。典型的每日剂量可以从约ljig/kg到100mg/kg或更多，取决于上述的因素。对于持续几天或更长时间的重复施用，取决于其状况，持续进行治疗直到产生期望的对疾病症状的抑制。然而，其他给药方案也是有用的。可以通过常规的技术和测定法来容易地监测治疗的进展。G.-珍断方法和4企测方法在一个方面，提供了诊断哺乳动物中银屑病的方法，所述方法包括检测获自所述哺乳动物的组织细胞的测试样品中编码IL-22或IL-22R多肽的基因的表达水平，其中与对照样品(例如，相同细胞类型的、已知正常的组织细胞的样品)相比在测试样品中更高的表达水平表明在获取所述测试样品的哺乳动物中存在银屑病。；险测可以是定性的或定量的。在一个实施方案中，所述测试样品包含血液或血清。在一个实施方案中，检测编码IL-22或IL-22R多肽的基因的表达水平包括(a)使抗IL-22或抗IL-22R抗体接触获自所述哺乳动物的测试样品，和(b)检测所述测试样品中所述抗体与IL-22或IL-22R多肽之间复合物的形成。所述抗体可以连接有可^r测标记物。复合物形成可以通过，例如，光学显微术、流式细胞计、荧光测定术或其他本领域已知的技术来监测。测试样品可以获自怀疑患有4艮屑病的个体。在一个实施方案中，检测编码IL-22或IL-22R多肽的基因的表达水平包括检测来自所述基因的mRNA转录水平。mRNA转录水平可以通过本领域技术人员已知的各种方法来定量地或定性地检测。mRNA转录水平也可以通过检测从所述mRNA产生的cDNA的水平来直接地或间接地检测。检测mRNA转录水平的示范性的方法包括，但不限于，实时定量RT-PCR和基于杂交的测定法，包括基于微阵列的测定法和基于滤膜的测定法，例如Northern印迹。在另一个实施方案中，本发明涉及诊断试剂盒，其含有适合的包装中的抗IL-22或抗IL-22R抗体。所述试剂盒优选的含有使用所述抗体来检测IL-22或IL-22R多肽的说明书。在一个方面，所述诊断试剂盒是银屑病的诊断试剂盒。H.测定法I.基于细胞的测定法和动物模型基于细胞的测定法和免疫性疾病的动物模型在实施本发明的某些实施方案中是有用的。在以下的实施例中提供的某些基于细胞的测定法是有用的，例如，用于测试IL-22拮抗剂或激动剂的效力。体内动物模型对于实施本发明的某些实施方案也是有用的。还在以下的实施例中描述了示范性的动物模型。这些模型的体内性质使得它们对于人类患者中的应答是预测性的。免疫相关疾病的动物模型包括非重组的和重组的(转基因的)动物。非重组动物模型包括，例如，啮齿动物，如鼠模型。这种模型可以通过使用标准技术将细胞导入同基因小鼠来产生，例如，皮下注射、尾静脉注射、脾脏植入、腹膜内植入、在肾嚢下植入、等等。移植物抗宿主疾病模型提供了评估针对MHC抗原和次要移植物抗原的T细胞反应性的手段。当免疫活性细胞被移植到免疫抑制的或耐受的患者中时，移植物抗宿主疾病发生。供体细胞识别并应答宿主抗原。应答可以从危及生命的严重炎症到腹泻和体重减轻的轻^(效病情。评定移植物抗宿主疾病的适合规程在CurrentProtocolsinImmunology,见上文，单元4.3中详细描述了。皮肤同种移植物排斥的动物模型是测试T细胞介导体内组织破坏的能力的手段，和它们在移植物排斥中的作用的度量。大多数常见的和公认的模型使用鼠尾部皮肤移植物。重复的实验已经显示了皮肤同种移植物排斥由T细胞、辅助T细胞和杀伤效应器T细胞而不是抗体来介导。Auchincloss,H.Jr.andSachs，D,H.,FundamentalImmunology,2nded,，W.E.Pauled.,RavenPress,NY，1989,889-992。在CurrentProtocolsinImmunology,上文，单元4.4中详细描述了适合的规程。可以用于测试本发明的化合物的其他移植排斥模型是Tanabe,M.etal,Transplantation(1994)58:23和Tinubu，S.A.etal,J.Immunol.(1994)4330-4338描述的同种异基因心脏移植物模型。接触超敏反应是细胞介导的免疫功能(迟发型超敏反应)的简单的体内分析。在这个过程中，皮肤暴露于引起迟发型超敏反应的外源半抗原，所述迟发型超敏反应被测量和定量。接触敏感性涉及起始的敏化阶段(sensitizingphase),接着是引发阶段(elicitationphase)。当T淋巴细胞遭遇它们早先接触过的抗原时，发生引发阶段。发生肺胀和发炎，使得它成为人类变应性接触性皮炎的极好的才莫型。在CurrentProtocolsinImmunology,Eds.J.E.Cologan,A.M.Kruisbeek,D.H.Margulies,E.M.ShevachandW.Strober，JohnWiley&Sons,Inc.,1994，unit4.2.中详细描述了适合的规程。还可参见Grabbe,S.andSchwarz,T,Immun.Today19(1):37-44(1998)。此外，本发明的组合物可以在银屑病样疾病的动物模型上测试。.例如，本发明的组合物可以在Schon，M.P.etal,Nat.Med.(1997)3:183描述的scid/scid小鼠模型中测试，其中小鼠展现了类似于银屑病的组织病理性皮肤损伤。另一种适合的模型是如Nickoloff,B.J.etal,Am.J.Path.(1995)146:580所述制备的人类皮肤/scid小鼠嵌合体。另一种适合的模型在Boymanetal.,JExpMed(2004)199(5):731-6中描述，其中人类前银屑病性(prepsoriatic)皮肤被移植到AGR129小鼠上，引起银屑病性皮肤损伤的发生/发展。可以构建具有缺陷的或改变的编码在此鉴定的多肽的基因的敲除动物，作为编码多肽的内源基因与该基因已经改变的DNA分子之间同源重组的结果。例如，编码特定多肽的cDNA可以用于依照建立的技术克隆编码该多肽的基因组DNA。编码特定多肽的基因组DNA的一部分可以被删除或用另一种基因替换，诸如，编码用于监测整合的可选择标志物的基因。一般地，几千个碱基的不变的侧翼DNA(在5'和3'两个末端)被包括在载体中[同源重组载体的描述参见，例如ThomasandCapecchi,Cell,51:503(1987)]。载体被导入胚胎干细胞系(例如，通过电穿孔)中，并且选择其中导入的DNA与内源DNA已经同源重组的细胞[参见，例如Lietal.,Cell,69:915(1992)]。选择的细胞然后注射到动物(例如，小鼠或大鼠)的胚泡中来形成聚集嵌合体[参见,1"列i口Bradley，于TeratocarcinomasandEmbryonicStemCells:APracticalApproach,E,J.Robertson,ed.(IRL,Oxford,1987)，pp.113-152]。然后，嵌合的胚胎能够植入适合的伪孕雌性养育动物中，并使胚胎足月妊娠来创建"敲除"动物。在它们的生殖细胞中携带同源重组的DNA的子代可以通过标准技术来鉴定，用于培育其中动物的所有细胞含有同源重组的DNA的动物。敲除动物可以特征在于，例如，它们抵御某些病理疾患的能力和它们由于缺乏所述多肽发生/发展病理疾患。2.药物候选物的筛选测定法药物候选物的筛选测定法设计用以鉴定与在此鉴定的多肽或其生物学活性片段结合或复合、或者感染多肽与其他细胞蛋白质的相互作用的化合物。这种筛选分析将包括可经受化学物质文库的高通量筛选，使得它们特别适合于鉴定小分子药物候选物的测定法。所设想的小分子包括合成的有机或无机化合物，包括肽、优选的可溶肽、(多)肽-免疫球蛋白融合物、以及特别是，抗体，包括但不限于，多克隆抗体和单克隆抗体以及抗体片段、单链抗体、抗独特型抗体、以及这些抗体或片段的嵌合的或人源化的版本，以及人类抗体和抗体片段。可以以各种形式实施测定法，包括蛋白质-蛋白质结合测定法、生物化学筛选测定法、免疫测定法和基于细胞的测定法，它们是本领域良好表征的。所有测定法在它们要求在一定条件下用在此鉴定的多肽接触测试化合物持续一定时间，足以容许所述多肽与测试化合物相互作用方面是共同的。在结合测定法中，相互作用是结合，形成的复合物可以分离和在反应混合物中检测。在一个特定的实施方案中，多肽或测试化合物通过共价的或非共价的附着而固定在固相上，例如，微量滴定板上。非共价附着一般通过用多肽或测试化合物的溶液包被固体表面并干燥来实现。或者，固定的抗体，例如对要固定的多肽特异的单克隆抗体可以用于将多肽锚定在固体表面。通过将用可^r测标记物标记的非固定成分添加至固定成分，例如，含有锚定成分的包被表面，来进行测定法。当反应完成时，未反应的成分被除去，例如，通过洗涤，检测锚定在固体表面的复合物。当最初的非固定成分带有可检测标记物时，固定在表面的标记物的检出表明发生了复合。当最初的非固定成分不携带标记物时，例如，通过使用特异性结合固定的复合物的带标记物的抗体，可以;险测复合。如果测试化合物相互作用于但不结合于在此鉴定的特定多肽，它与该蛋白质的相互作用可以通过检测蛋白质-蛋白质相互作用的公知方法来测定。这种测定法包括传统方法，诸如，交联、免疫共沉淀、以及通过梯度或层析柱的共纯化。此外，蛋白质-蛋白质相互作用可以通过如ChevrayandNathans,Proc.Natl.Acad.Sci.USA89，5789-5793(1991)所披露的、使用Fields和同事记载的基于酵母的遗传系统[FieldsandSong,Nature(London)340，245-246(1989);Chienetal，Proc.Natl.Acad.Sci.USA88,9578-9582(1991)]来监测。许多转录激活剂，诸如酵母GAL4，由两个物理上分立的^t块结构域组成，一个起到DNA结合结构域的作用，而另一个发挥转录激活结构域的功能。在上述公开物中描述的酵母表达系统(一般称为"双杂交系统")利用了这种性质，采用了两种杂合蛋白质(hybridprotein),在一种中，靶蛋白质融合至GAL4的DNA结合结构域，在另一种中，候选激活蛋白质融合至激活结构域。GAL1-lacZ报道基因在GAL4激活的启动子的控制之下的表达取决于经由蛋白质-蛋白质相互作用的GAL4活性的重构。用p-半乳糖苷酶的产色底物检测含有相互作用多肽的菌落。用于使用双杂交技术鉴定两种特定蛋白质之间的蛋白质-蛋白质相互作用的完整试剂盒(MATCHMAKERTM)可从Clontech购买。这种系统也可以扩展到绘制涉及特定蛋白质相互作用的蛋白质结构域，以及定位对这些相互作用决定性的氨基酸残基。为了鉴定干扰在此鉴定的多肽与其他细胞内或细胞外成分的相互作用多肽和所述成分的反应混合物。为了测试测试化合物抑制相互作用的能力，在缺乏或存在所述测试化合物的情况下制备反应混合物。如果在存在所述测试化合物的情况下所述多肽与所述成分的相互作用降^f氐，则称所述测试化合物抑制所述多肽与所述成分的相互作用。在某些实施方案中，鉴定IL-22或IL-22R多肽的激动剂或拮抗剂的方法包括使IL-22或IL-22R多肽接触候选激动剂或拮抗剂分子并测量在通常与所述IL-22或IL-22R多肽相关的一种或多种生物学活性方面可^r测的改变。这些活性包括但不限于，在以下的实施例中描述的那些。3.抗体结合测定法抗体结合研究可以以任何已知的测定法来进行，例如，竟争性结合测定法、直接和间接/三明治夹心式测定法、及免疫沉淀测定法。Zola,MonoclonalAntibodies:AManualofTechniques,pp.147-158(CRCPress,Inc.，1987)。竟争性结合测定法依靠标记的标准物与测试样品分析物竟争对有限量的抗体的结合的能力。测试样品中靶蛋白质的量与结合至抗体的标准物的量成反比。为了便于测定结合的标准物的量，优选在所述竟争之前或之后使抗物和分析物分开。夹心式测定法涉及使用两种抗体，每一种都能够结合要检测的蛋白质的不同的免疫原性部分，或表位。在夹心式测定法中，测试样品分析物被固定在固相支持物上的第一抗体结合，此后第二抗体结合至所述分析物，从而形成不溶的三部分复合物。参见，例如，美国专利No.4,376,110。第二抗体可以自身用可检测模块标记(直接夹心式测定法)，或可以使用用可检测模块标记的抗免疫球蛋白抗体来测量(间接夹心式测定法)。例如，一种类型的夹心式测定法是ELISA测定法，其中可检测模块是酶。免疫组织化学也可以用于确定抗体所结合的抗原的细胞位置。对于免疫组织化学，组织样品可以是新鲜的或冷冻的，或可以包埋入石蜡并用防腐剂例如福尔马片木固定。I.工业制品在另一个方面，提供了包含对于如上所述的病症的诊断或治疗有用的组合物的制品。所述制品包括容器和说明书。适合的容器包括，例如，瓶子、小瓶、注射器和试管。所述容器可以由各种材料诸如玻璃或塑料制成。容器装有对于所述疾患的诊断或治疗有效的组合物，并且可以具有无菌的存取口(例如，所述容器可以是具有可被皮下注射针刺穿的塞子的静脉内溶液袋或小瓶)。组合物中的活性试剂通常是本发明的多肽、抗体、激动剂或拮抗剂。在容器上、或与所述容器相连的说明书或标签表明了所述组合物是用于诊断或治疗所选的疾患。所述制品可以进一步包括第二容器，其中装有制药学可接受的緩沖液，例如磷酸盐緩沖盐水、林格氏溶液和右旋糖溶液。它可以进一步包括从商业和用户立场出发的其他可取的材料，包括其他的緩沖液、稀释剂、滤器、针、注射器和带使用说明书的包装插页。在一个实施方案中，本发明提供了一种制品，包括(a)包含IL-22或IL-22R的激动剂或拮抗剂的物质的组合物；(b)装有所述组合物的容器；和(c)附加在所述容器上的标签，或包括在所述容器中的包装插页，关于在免疫相关的疾病或癌症的治疗中使用所述拮抗剂。所述组合物可以包含有效量的拮抗剂。提供以下实施例仅为了说明目的，绝非意图限制本发明的范围。在本说明书中引用的所有专利和参考文献通过完全引用收入本文。实施例除非另有陈述，实施例中提及的商业上可获得的试剂根据厂家的说明书使用。在以下实施例中及在整个说明书中以ATCC登记号码鉴定的那些细胞的来源是美国典型培养物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection,Manassas,VA)。实施例l:抗IL-22和抗IL-22R抗体的产生这个实施例说明了特异性结合IL-22或IL-22R的单克隆抗体的制备。用于生产单克隆抗体的技术基于本领域已知的那些，例如，在Goding，同上中有描述。IL-22R(ML-22R)。简要地，用在佐剂中乳化的约1-100微克的ML-22或WL-22R免疫原免疫小鼠。然后在10到12天后用在佐剂中乳化的额外免疫原对免疫的小鼠进行强化。周期性地A/v小鼠获^lA清样品，在ELISA测定法中测试，用来检测抗IL-22或IL-22R抗体。在检出适合的抗体滴度之后，将对于抗体是"阳性"的动物处死，收获脾细胞。然后将脾细胞与鼠的骨髓瘤细胞系融合(使用35%聚乙二醇)。融合产生杂交瘤细胞，将其克隆和在含有HAT(次黄噪呤、氨基蝶呤和胸香)的培养基中培养。在ELISA中筛选杂交瘤细胞针对IL-22或IL-22R的反应性。(参见图5)。那些杂交瘤产生的抗体和它们相应性质的列表见图5。实施例2:IL-22信号传导受抗IL-22抗体阻断STAT3活化是IL-22受体活化和细胞内信号传导的标志。测试了针对人类IL-22产生的抗体阻断IL-22诱导的STAT3活化的能力。表达人类IL-22受体异二聚体(hlL-22R/WL-10R2)的293T细胞以0.2xl()6/孔铺在24孔板中。将细胞使用Lipofectamine2000(Invitrogen)用STAT3萤光素酶报道物(TK-S正-SRE-S)转染。因而，当STAT3活化时，细胞将产生萤光素酶，即可以通过添加萤光素来检测的酶活性。萤光素酶活性的降低意味着STAT3被阻断。第二天，与20昭/ml的抗体一同将0.5nM的hlL-22(R&DSystems)添加到每个孔。16小时后，裂解细胞，样品在光度计上读取。图6中显示的是相对于Renilla内部对照的萤光素酶活性，其是相关STAT3活化的度量。如图6所示，抗体3F11.3、11H4.4和8E11.9具有显著的阻断能力。实施例3:抗IL-22抗体的剂量-应答在STAT3活化测定法中对于阻断人类IL-22的能力，测试了针对人类IL-22产生的抗体的剂量范围。表达1111^221^1111^10R2的293细胞以0.2x106个/孔铺在24孔板中。细胞使用Lipofectamine2000(Invitrogen)用STAT3萤光素酶报道物(TK-SIE-SRE-S)转染。第二天，与不同浓度的抗IL-22抗体3F111、8Ell或llH4—同将0.5nM的hlL-22(R&DSystems)添加到每个孔。抗体的浓度范围从40[ig/ml开始，2倍稀释到0.012吗/ml的终浓度。16小时后，裂解细胞，样品在光度计上读取。如图7所示，三种抗体显示了对于阻断STAT3活化的相似的剂量/应答曲线。实施例4:抗IL-22抗体的剂量-应答在STAT3活化测定法中对于阻断鼠IL-22(mlL-22)的能力，测试了针对人类IL-22产生的抗体的剂量范围。表达mlL-22R/mlL-10Rb的293细胞以0.2x106个/孔铺在24孔板中。细胞使用Lipofectamine2000TM(Invitrogen)用STAT3萤光素酶报道物(TK-SIE-SRE-S)转染。第二天，与不同浓度的3F11、8E11或11H4一同将0.5nM的mlL-22(带聚组氨酸标签的)添加到每个孔。抗体的浓度范围从40iag/ml开始，2倍稀释到0.012吗/ml。16小时后，裂解细胞，样品在光度计上读取。图8显示了抗IL-22抗体与鼠IL-22起交叉反应，并显示了类似的、但不那么强烈的剂量/应答曲线。这显示了抗IL-22抗体可以用于鼠。实施例5:抗IL-22对于人类IL-22的亲和力图9显示了抗IL-22对于人类IL-22的亲和力。亲和力通过BIACore分析来测量。各种量的抗IL-22IgG经由N-乙基-N'-(3-二曱基氨基丙基)-碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)偶联化学而固定在CM5芯片上(对于11H4IgG为845RU(参考单位)，对于8E11IgG为1933RU，而对于3F11IgG为7914RU)。制备IL-22的两倍连续稀释物，覆盖0.5-250nM的范围。将抗原样品以20(il/分钟的流速在固定有IgG的表面上注射6分钟，容许结合的复合物解离10分钟。在每轮抗原注射之后，IgG表面用lOmMGly,pH1.5再生。作为阴性对照流动细胞，固定了无关IgG(3A5RF移植物)用于背景应答减除。对所有的样品稀释物使用运行緩沖液，即含有0.05%吐温20及0.01°/。NaN3的PBS，结合实验在25。C进行。通过l:l结合模型的全局拟合来分析数据。这些结果显示，抗IL-22抗体具有对人类IL-22的非常好的亲和力。实施例6:抗IL-22抗体检测细胞中的IL-22测试了针对IL-22的抗体检测细胞内IL-22的能力。对于IL-22的细胞内FACS染色，使用了以下的293细胞系表达hlL-22-GFP、mIL-22-GFP、mlL-20-GFP和仅GFP的细胞。测试的抗体是抗人类IL-22抗体3F11、8E11和17F6。小鼠抗gpl20用作同种型对照。使用的第二抗体是来自Jacksonlabs的抗小鼠IgG-PE。细胞用BrefeldinA温育2小时，在PBS中洗涤，然后在4。C用20/o多聚曱醛(paraformaldehyde)固定过夜。然后细胞在PBS中洗涤，在37。C在5mL0.2%Tween-20中温育30分钟。抗体染色在4。C进行30分钟，然后用Tween-20溶液洗涤。细胞重悬浮在FACS緩沖液中，在FACScan上分析。图10显示了FACS结果。FACS结果显示，抗体3F11和8E11引起细胞染色样式中的移动(shift),表明这些抗体结合鼠和人类的细胞内IL-22二者。将抗IL-22抗体3F1l用于别的细胞染色实验。将3F11抗体与藻红蛋白荧光团Alexa647偶联。将偶联有Alexa647的小鼠lgG2a用作同种型对照(Caltag)。分析表达hlL-^-GFP和仅GFP的293细胞系的:3Fll抗体结合。293细胞用2%多聚曱醛固定30分钟，然后用PBS/2。/。FCS洗涤两次。细胞重悬浮在0.5。/。皂角苷(saponin)中达15分钟。添加正常的小鼠血清，再过15分钟，然后以0.5iig/百万细胞添加抗体达30分钟。洗涤细胞并重悬浮在FACS緩冲液中，在FACScan上分析。图ll在左下画面中显示了细胞进入右上象限的移动(shift)。这个结果表明，偶联的3Fll抗体结合至细胞内IL-22。实施例7:IL-22在ThlT细胞中的表达当CD4+T细胞从胸腺成熟并进入外周淋巴系统时，在遭遇特异于它们的T细胞受体(TCR)的抗原之前，它们一般维持它们的幼稚表型[Sprentetal.,AnnuRevImmunol.(2002);20:551-79]。TCR与抗原呈递细胞(APC)呈现的特定抗原的结合引起T细胞活化。取决于环境和细胞因子刺激，CD4+T细胞可以分化成Thl或Th2表型并变为效应器或记忆细胞[Sprentetal.，AnnuRevImmunol.(2002);20:551-79和Murphyetal.,NatRevImmunol.(2002)Dec;2(12):933-44]。这种过程;故称为初级活化(primaryactivation)。经历了初级活化，CD4+T细胞变成效应器或记忆细胞，它们维持它们的表型为Thl或Th2。一旦这些细胞再次遭遇抗原，它们经历次级活化(secondaryactivation),但是这次对抗原的应答将比初级活化快，并引起由初级活化所确定的效应器细胞因子的产生[Sprentetal.,AnnuRevImmunol.(2002);20:55l-79和Murphyetal.，AnnuRevImmunol.2000;18:451-94]。研究发现，在CD4+T细胞的初级和刺激活化期间，某些基因的表达是可变的[Roggeetal.，NatureGenetics.(2000)25:96-101和Ouyangetal.,ProcNatlAcadSciUSA.(1999)Mar30;96(7):3888-93]。对于初级活化条件，幼稚T细胞可以被Ova和APC活化。分离自这种条件么细胞因子影响Thl和Th2发育期间的基因表达的信息。在初级活化之后，CD4+T细胞可以维持在培养物中。因为早先的活化和细胞因子处理已经在这些细胞中打上印记(imprint)，它们已经变为效应器或记忆细胞。在这期间，由于没有APC或抗原，CD4+T细胞进入静止期。这种静止期提供了关于幼稚细胞对记忆细胞以及静止的记忆Thl细胞对静止的记忆Th2细胞之间的差异的信息。其余的记忆Thl和Th2细胞然后经历抗CD3/CD28抗体的次级活化或IL-12/IL-18细胞因子的刺激。这些条件提供了关于活化的幼稚T细胞与活化的记忆T细胞之间的差异以及活化的记忆Th1细胞与活化的记忆Th2细胞之间的差异的信息。对于在图12中显示的实验，自DO11.10小鼠分离脾细胞，在Thl条件[IL-12(lng/ml)、IFN-y、和IL-4(1(a/ml)];Th0条件[抗IL12、抗IFN-y、和抗II^];或者tm条件[抗IL-12(0.5|ig/ml)、抗IFN-y/和IL4(5ng/ml)]中由OVA活化。48小时之后收获RNA(初级刺激)。其余的细胞维持在培养物中直到第7天，然后通过OVA和经过照射的Balb/c脾细胞再次刺激(刺激刺激)。来自Thl条件的细胞的子集还由单独的IL-12和IL-18刺激。48小时后收获RNA。通过5'核酸酶(TaqManTM)分析来分析这些RNA样品中IL-22、IFN-y和IL-4的表达。首先将表达相对于持家基因HPRT探针标准化，然后图示为与脾细胞的表达水平相比的倍数升高。结果在图12中显示，数据显示了IL-22在次级刺激时在Thl细胞中高度表达。因此，抗IL-22治疗剂将在靶向这些细胞中是有用的，或是当希望从血液中清除Thl细胞时，用于治疗Thl介导的病症，或是当怀疑IL-22起作用时作为Thl介导的病症的诊断剂。实施例8:IL-22由^T细胞产生为了分析IL-22在Y5T细胞中的表达，从小鼠脾脏分离细胞，通过MACS分选来分离yST细胞。GL4是抗^TCR抗体，其特异性地活化y5T细胞(Becton-Dickenson)。使用QiagenMINIRNA分离试剂盒从细胞分离RNA用于5'核酸酶(TaqManTM)分析。使用MasterMix单步骤RT-PCRMasterMix试剂(AppliedBiosystems;4309169),并使用持家基因RPL10和SPF31标准化。使用完整的脾细胞来测定IL-22表达的相对水平。图13显示了IL-22在用GL4抗体刺激的yST细胞中高度表达。实施例9:IL-22由活化的人类T细胞产生核酸微阵列对于鉴定与正常的对应物相比在疾病组织中差异表达的基因是有用的。利用核酸微阵列，将来自测试和对照组织样品的测试和对照mRNA样品逆转录和标记以产生cDNA^:针。然后将cDNA^:针与固定在固相支持物上的核酸的阵列杂交。配置阵列，使得阵列的每个成员的序列和位置是已知的。例如，可以将已知在某些疾病状况中表达的基因的选集排列在固相支持物上。经过标记的探针与特定阵列成员的杂交表明产生该探针的样品表达该基因。如果来自测试(在这种情况下，活化的CD4十T细胞)样品的探针的杂交信号大于来自对照(在这种情况下，未刺激的CD4+T细胞)样品的探针的杂交信号，则在测试组织中过表达的基因得到鉴定。这种结果的意义是，在测试组织中过表达的蛋白质不仅作为疾病状况存在的诊断标志物是有用的，而且作为治疗疾病状况的治疗靶物是有用的。核酸杂交和微阵列技术的方法是本领域公知的。例如，用于杂交的核酸利申请流水号PCT/US01/10482中详述，通过引用将其合并在此。在这个实验中，使用来自StemCellTechnologies(VancouverBC)的110336636顶方案从单个供体纯化004+T细胞，其利用了用于分离CD4十T细胞的抗CD8、抗CD16、抗CD19、抗CD36和抗CD56抗体。分离的CD4+T细胞用抗CD3抗体(以不刺激增殖的浓度使用)与ICAM-1或抗CD28抗体一起来活化。在24或72小时收获细胞，提取RNA，在Affimax(AffymetrixInc.,SantaClara,CA)微阵列芯片上运行分析。在纯化后立即收获未刺激的(静止)细胞，并进行相同的分析。比较在两个时点任一其表达在活化的细胞较之静止细胞上调的基因。这个实验的结果在图14中示出。微阵列结果支持了并符合实施例7中的数据。ThlT细胞在受到刺激时产生大量的IL-22,与产生IL-4或IL-5的Th2细胞相反。这个结果将容许根据细胞因子特征谱将Thl和Th2相关的免疫病症分开。表达IL-22和IFN-Y的Thl细胞可以用针对这些细胞因子的治疗剂来治疗，而不影响Th2细胞群体。实施例10:Thl细胞表达细胞内IL-22为了通过FACS测定IL-22在T细胞中的表达水平，对鼠Thl/Th2细胞进行细胞内染色。使原代(primary)脾细胞极化成Thl或Thl。为了FACS染色，在96孔板的每个孔中铺1百万个细胞，用PMA/伊屋诺霉素(Ionomycin)处理2小时，然后用BrefeldinA处理另外2小时。使用的抗体是抗人类IL-22(抗体3F11.1)，抗gpl20作为对照。抗小鼠IFN个FITC和抗小鼠IL-4-PE得自BDBioscience(SanDiegoCA)。偶联有PE的山羊抗小鼠IgG(也来自BDBioscience)用作二抗。细胞用2%多聚曱醛固定30分钟，然后用PBS/2。/oFCS洗涤两次。细胞重悬浮在0.5%皂角苷中15分钟，然后以0.5^ig/百万个细胞添加抗体30分钟。然后细胞洗涤两次，将二抗添加到0.5%皂角苷中15分钟。最后，洗涤细胞并重悬浮在FACS緩冲液中，在FACScan上分析。图15在上部小图中显示了Thl细胞可以与Th2细胞区分开来。Thl是IFN-y阳性、IL4阴性和IL-22阳性的。Th2细胞大多是IFN-y阴性、IL4阳性和IL-22阴性的。实施例ll:抗IL-22受体(IL-22R)的产生为了测试抗IL-22R抗体的结合，使用了表达hlL-22R的293细胞和表达GFP的细胞。以0.3昭/百万个细胞的浓度用不同的抗hlL-22R抗体染色一百万个细胞。测试的抗体是7E9、8A12、8H11和12H5。二抗是以1:200的稀释因数使用的PE偶联的山羊抗小鼠(JacksonLabs)。洗涤细胞，在FACS緩冲液中染色(0.5%BSA/PBS)。测试抗体染色在4。C进行15分钟，然后洗涤细胞，在4。C添加二抗另外15分钟。洗涤细胞两次，然后在FACScan上分析。结果在图16中示出。对于其中峰值不交叠的每个图，左侧的峰对应于对照，右側的峰对应于测试抗体。图16显示了测试的所有的四种抗IL-22R抗体对于结合经过转染的293细胞上的IL-22R是阳性的。抗体7E9、8A12、8H11和12H5给出了良好的结合，且背景非常少。实施例12:IL-22R阻断性抗体为了测试抗IL-22R抗体的阻断活性，使用了萤光素酶报道物构建体(如实施例2描述的)。如果抗体具有阻断活性，那么STAT3将不会被活化，萤光素酶应答将是低的。将表达WL-22R/hlL10Rb的细胞以0.2x106个细胞/孔平铺在24孔板中，萤光素酶报告物TK-SIE-SRE-S(0.8pg/孔)和RL-TK-Luc(0.16|ig/孔)转染到细胞中。第二天，以0.5nM将hlL-22添加到孔中，以20pg/ml添加每种抗体。测试的抗IL-22R抗体是7E9、8A12、8H11和12H5。使用的对照抗体是GP120和11H4，即在实施例2中显示具有阻断活性的抗hlL-22抗体。16小时后，裂解细胞，样品在光度计上读取来检测萤光素酶活性。图17显示了测试的所有四种抗IL-22R抗体阻断IL-22R-IL-22相互作用。实施例13:IL-22R在原代角质形成细胞上表达角质形成细胞是在银屑病期间过度增殖的细胞群。靶向角质形成细胞的治疗剂在银屑病的緩解中是有用的。通过FACS分析来测定原代人类角质形成细胞上IL-22R的表达。正常人表皮角质形成细胞(NHEK)供体批号0526得自CascadeBiologies,传代数2，生长到80%汇合，以每份样品300-600K细胞来染色。抗IL-22R血清以1:50的稀释度使用，预采血(pre-bleed)的血清以1:50的稀释度使用作为对照。为了IL10R2染色，与鼠IgGl-PE同种型对照(BDPharmingen弁33815X)—起，来自R&D的抗体(克隆#卯220，鼠IgGl)以每份样品0.3(ag使用。抗IL-22R血清的二抗是大鼠抗小鼠IgGl-PE(BDPharmingen#550083),以每份样品0.1吗4吏用。图18显示了IL-22R和IL10R2在NHEK上表达。因此，IL-22R或IL-22的阻断可以证明在减轻与角质形成细胞超增殖相关的病症诸如银屑病中是有用的。实施例14:IL-22对表皮培养物的影响重构的人类表皮(RHE)可以用作细胞因子对皮肤的影响的模型。RHE和培养基获自MatTek公司(Ashland，MA)。将RHE用0.9ml培养基在37。C、5%CO2平衡过夜(20-22小时)以在开始实验前从运输中恢复，然后用5mL培养基在37。C、5%C02下在气液界面上培养。使用三种不同的条件分析IL-22对RHE的影响。将IL-22(1.2nM)或表皮生长因子(EGF-R&DSystems)(1nM)添加到培养基中。对照由未处理的培养基组成。RHE培养4天，每两天更换培养基，添加新鲜的EGF或IL-22。收获RHE，在10%中性緩沖液福尔马林(NBF)中固定过夜，切片，用苏木色素和曙红(H&E)染色。图19显示了IL-22处理引起表皮的增厚。这表明，IL-22引起增生，或构成表皮的细胞的增殖。当这些切片对角质形成细胞增殖的标志物细胞角蛋白16(K16)染色时，用IL-22处理的RHE显示了显著更多的K16染色。K16仅在增殖中的皮肤细胞诸如在银屑病和伤口愈合中表达(综述见Freedbergetal,Soc.Invest.Derm.116:633-640(2001))。图20显示了在IL-22处理的RHE中相对于为处理的和EGF处理的RHE的K16染色。IL-22处理的RHE显示了K16遍及整个组织，而在未处理的和EGF处理的切片中染色是局部的。用IL-22处理RHE还诱导牛皮癣素，即在银屑病中高度表达的一种基因。牛皮癣素(S100A7)最初作为在银屑病中表达但不在正常皮肤中表达的蛋白质净^C现(MadsenP.，etal.,J.Invest.Derm.97:701-712(1991))。牛皮癣素在活化的培养的和恶性的角质形成细胞中、以及在恶性的乳腺上皮细胞中表达(Watsonetal.,Int.J.ofBiochem.andCellBio.30:567-571(1998》。当前的数据支持了牛皮癣素在炎性皮肤疾病、趋化性和乳瘤发展中的作用。牛皮癣素与皮肤的牛皮癣状增生的相关性说明了在角质形成细胞分化中的作用。牛皮癣素也可以是趋化性的，刺激表皮的嗜中性细胞和CD4+T淋巴细胞浸润，其是银屑病的标志。图21显示了用IL-22处理RHE诱导了高水平的牛皮癣素表达。这个结果证实了IL-22和IL-22R在银屑病中起到的作用。IL-22途径对于牛皮癣素的诱导效果可以用针对IL-22或IL-22R的抗体阻断。以20jig/ml的浓度施用的抗IL-22抗体8E11将牛皮癣素表达降低到不可检测的水平(参见图23)。当在20pg/ml的浓度使用时，抗IL-22R抗体(7E9)也显著地降低牛皮裤素表达，如图23所示。时观察到的表皮增厚。以20iig/ml的浓度施用的抗IL-22抗(8E11)显示了表皮增厚的明显降低(参见图24)。用IL-22处理的RHE达到80-90^im的厚度，用抗IL-22(8E11)抗体处理降低了RHE厚度到50-60nm(图25)。抗IL-22R抗体(7E9)也降低皮肤增厚。当在20pg/ml的浓度使用时，抗IL-22R抗体降低RHE厚度从80-90nm到55-60^m(图25)。这些数据显示了抗IL-22或抗IL-22R抗体可以减轻与4艮屑病相关的症状，诸如表皮的增殖和增厚。实施例15:IL-22诱导的基因的微阵列分析为了确定什么基因受IL-22诱导，平铺衍生自单个供体的正常人表皮角质形成细胞(NHEK),在70。/。汇合时用20ng/mlIL-22处理24小时。培养基和补充物(EpiLife⑧+HKGS)获自CascadeBiologies(Portland,OR)。将细胞洗涤并裂解。使用QiagenRNeasyMini试剂盒从NHEK细胞纯化总RNA。将RNA进行微阵列分析，对基因表达量定量(关于微阵列分析的描述参见上文实施例9)。牛皮癣素在IL-22刺激时被诱导81倍。SPR-2G被上调11倍(参见图22)。这些结果表明IL-22途径牵涉银屑病。因此，针对IL-22或IL-22R的拮抗剂和拮抗性抗体在减轻银屑病中是有用的。实施例16:IL-23在体内诱导银屑病的标志使用小鼠模型来比较IL-12和IL-23诱导银屑病皮肤特征的能力。C57B1/6小鼠在耳部皮下注射总体积20ialPBS中的500ng的重组IL-12或重组IL-23。对照小鼠仅用20W的PBS注射。每两天注射小鼠持续16天。每个实验組由五只小鼠组成。在注射之前和注射后多个时点用卡尺(MitutoyoAmericaCorpomtion)测量耳厚度，报道为均值土标准偏差。对于这个实验和随后的实验，利用Prism软件(GraphPad)通过单向或双向ANOVA计算统计显著性。所有的p值^).05认为是显著的。采集小鼠耳用于利用苏木精和曙红(H&E)染色的常规组织学分析。如图26A所示，IL-12和IL-23注射都早在第一次注射后一周诱导了显著的耳厚度增加。对于接受IL-12的小鼠，p是〈0.001(分别相对于PBS对照在第12、14和16天)。对于接受IL-23的小鼠，p是O.OOl(分别相对于PBS对照在第8、12、14和16天)。组织学分析揭示了与PBS处理的对照组相比，IL-12和IL-23注射的耳朵都发展出显著的炎性细胞浸润和表皮增厚(棘层肥厚)；然而，在这两个组之间存在着一些清楚的组织学差异。首先，与PBS对照组相比(图26B、C)，IL-12诱导轻微到中度的棘层肥厚，具有显著的、主型为单个核皮肤炎性细胞的浸润(图26D、E),而IL-23诱导显著的棘层肥厚，具有许多多形核白细胞的混合的皮肤炎症性细胞浸润(图26F、G)，包括嗜中性细胞(箭头)和嗜曙红细胞。表皮增生和多形核白细胞的存在是人类中银屑病的组织学标志，以及在银屑病的小鼠模型中的非常常见的组织学发现。参见P.C.vandeKerkhofetal,Dermatologica174:224(1987)和P,R.Manganetal，Nature(2006)441:235。实施例17:IL-22在体内作用于IL-23的下游为了鉴定潜在地在IL-12或IL-23的下游起作用的细胞因子，使用实时PCR来检查一组细胞因子来自注射IL-12或IL-23的耳部皮肤样品的表达。如之前的实施例所描述的进行耳部皮肤注射和组织学分析。在实验的第8天，从各个小鼠耳朵分离RNA,进行实时PCR对编码IFN-Y、IL-17和IL-22的mRNA的水平定量。具体地，通过RNeasyMini试剂盒(Qiagen,Valencia,CA)依照厂家的说明书分离RNA。使用ABI7500实时PCR系统(AppliedBiosystems，FosterCity,CA)使用引物和探针、利用TaqManOne-StepRT画PCRMasterMix试剂(AppliedBiosystems)进行实时RT-PCR。反应进行双份，样品针对对照的持家基因RPL-19标准化，依照AACt方法报告。如图27A所示，在第一次注射后八天的耳朵中，IL-12诱导了IFN-Y表达的显著提高。相对于PBS处理的对照组，IL-23诱导了IL-17产生并抑制IFN-Y产生(图27A)。有趣地，在IL-23注射之后，而不是在IL-12注射之后，IL-22也被显著地上调(图27A)。这些数据表明IL-23和IL-22之间有联系。为了确认由浸润耳朵的淋巴细胞产生的细胞因子，从处理的耳朵中洗提出淋巴细胞，在活化时通过ELISA测量细胞因子产生。与实时RT-PCR数据一致，来自IL-23注射的耳朵的细胞优先地产生IL-22和IL-17，而来自IL-12注射的耳朵的细胞分泌大量的IFN-Y(图28)。实施例18:IL-22在体内诱导皮肤炎症和表皮增生为了确定IL-22是否与IL-23—样能够在体内诱导银屑病皮肤特征，如上文实施例16所述，给小鼠耳部皮下注射IL-22或单独的PBS。如图27B所示，与PBS处理的组相比，IL-22诱导了耳朵厚度的显著增加。来自IL-10家族的另一种细胞因子IL-20仅诱导了非常轻微的和局部的耳朵厚度增加。这些发现与早先的报告相反，即IL-20的表皮转基因过表达诱导显著的表皮增生，该结果表明，IL-20可能在表皮功能以及银屑病中潜在地起到作用。参见Blumbergetal，Cell104:9(2001)。组织学分析显示，IL-22处理小鼠的耳具有与IL-23处理组的耳相似的组织学外观，在图26F和G中示出，展现了显著的棘层肥厚和混合型皮肤炎性细胞浸润(图27G、H),包括许多嗜中性细胞(箭头)和一些嗜曙红细胞。相比之下，相对于PBS处理组(图27C、F)，IL-20处理耳仅有轻度-中度的集中棘层肥厚，仅有中度的和非常集中的混合型炎症(图27D、E)。这些数据表明，IL-22是IL-23诱导的皮肤炎症和棘层肥厚所必需的。实施例19:抗IL-22阻断性抗体显著地降低IL-23诱导的棘层肥厚为了确认IL-23通过IL-22起作用来诱导银屑病皮肤特征，检查了抗IL-22单克隆抗体8Ell对IL-23诱导的皮肤炎症和棘层肥厚的影响。如上所述给小鼠耳部皮下注射IL-23或PBS(实施例16)，只是注射在14天的跨度上进行。小鼠还以200吗每只小鼠的浓度和每两天一次的频率腹膜内注射8E1l或IgGl同种型的对照单克隆抗体持续14天。在第14天，收集小鼠耳，用于利用H&E染色的组织学分析。如图29A所示，相对于对照IgGl抗体的处理，8E11("抗IL-22mAb，，)显著地降低IL-23诱导的表皮棘层肥厚(*p<0.001X还比较图29D和E(抗IL-22mAb)与B和C(对照IgGl))。此外，用抗IL-22mAb处理的小鼠还展现了皮肤炎症方面的中度降低。然而，当与用PBS处理的耳部皮肤相比时，用抗IL-22mAb处理的小鼠仍然展现了中度炎性细胞浸润(比较图29D和E(抗IL-22mAb)与F和G(PBS))。实施例20:IL-23诱导的棘层肥厚在IL-22缺陷小鼠中显著地降低为了进一步确认IL-23通过IL-22起作用来诱导银屑病皮肤特征，检查了IL-23对野生型和IL-22缺陷小鼠的影响。IL-22缺陷小鼠(即，纯合的IL-22敲除小鼠，称为"/丄-2,小鼠")通过依照图30A所述策略的目标基因破坏来产生。IL-22编码序列的外显子l-4(封闭的框)用侧翼为loxP位点的新霉素抗性盒替换。将携带条件等位基因的杂合小鼠与转基因系杂交，所述转基因系中鱼精蛋白l(Prm)启动子驱动Cre重组酶。在复合的杂合雄性(即，对于条件等位基因和PrmCre转基因是杂合的)中精子发生期间，条件等位基因被切除。将复合的杂合雄性与野生型雌性交配，对产生的子代筛选切除的等位基因和PrmCre转基因的丢失。将后代回交到C57Bl/6背景中至少六代。小鼠基因型通过利用图30B中标明的引物的PCR来确认。在来自野生型和/丄-22;小鼠的Th细月包中检查mRNA和蛋白质水平的IL-22表达。利用RT-PCR在来自野生型("+/+")和/丄-22一("-/-")小鼠的Thl、Th2和Thi-n细胞中检查IL-22mRNA表达(图30C),确认了IL-22mRNA没有在/丄-2Z,-小鼠中检测到。利用ELISA在来自野生型("WT")和/丄-2,("KO")小鼠的Thl、Th2和Thi.n细胞中检查IL-22、IL-17、IFN-y和IL-4的表达。对于IL-22、IL-17、IFN-y和IL-4的每一种，在图30D中显示了结果，在每个图表的顶部标明，实心的柱和空心的柱分别表明在WT和KO小鼠中的表达水平。另外，相对于野生型CD4T细胞，来自/L-2,小鼠的CD4T细胞能够被活化并分化成所有的T辅助细胞子集，并且能够产生正常水平的IL-17、IFN-y和IL-4。然而，如所预料的，/L-22一CD4T细胞没有IL-22。与野生型小鼠相比，观察到/丄-22一小鼠正常地发育，并且在检查的所有主要淋巴器官中具有类似的淋巴细胞组成和发育(数据未显示)。给/U,小鼠和野生型同窝小鼠如上所述(实施例16)在耳部皮下注射IL-23或PBS。在第16天，通过常规的组织学分析来分析小鼠耳。如图31A和B所示，与对照组相比，在/丄-W、鼠中，IL-23诱导了显著更小的耳朵厚度和表皮厚度(/丄-22一小鼠在这个图和图32中称为"KO"或"IL-22KO";野生型小鼠在这个图和图32中称为"WT"或"IL-22WT")。通过组织学染色，与IL-23处理的野生型同窝小鼠相比(分别为图31C和D)，表皮棘层肥厚和皮肤炎症在/丄-2,小鼠中显著降低(分别为图31E和F)。与这些结果相反，IL-22缺陷对IL-12诱导的耳部皮肤炎症根本没有影响(图32)。因此，数据显示，IL-22在IL-23诱导的、而非IL-12诱导的皮肤炎症和表皮棘层肥厚中起到决定性作用。实施例21:il-23诱导il-22从各种il-23活化的淋巴细胞产生为了进一步调查IL-23诱导IL-22的能力，分离了各种淋巴细胞群并在体外在图33标明的条件下刺激。进行ELISA来检测培养物上清液中的IL-22，在图33A中报告为均值±标准偏差。还检查了IL-23诱导除IL-22以外的IL-10家族细胞因子的能力。来自DOll.lOTCR转基因小鼠的脾细胞在标明的T辅助细胞极化条件下用0.3(iMOVA肽刺激4天，然后静息两天，用板结合的抗CD3(10ng/ml)和可溶的抗CD28(5pg/ml)再次刺激另外2天。对从所示条件下的细胞分离的RNA进行实时RT-PCR,来定量小鼠IL-19、IL-20和IL-24mRNA表达。还包括了来自正常小鼠脾细胞的RNA作为对照。如图33B所示，IL-23不诱导所测试的任何其他IL-10家族细胞因子的表达。实施例22:IL-22是来自Th^ni普系的新的效应器细胞因子近来，1!^23已经与新的化-17生产效应器004+T细胞谱系(ThIL.17)的发育联系起来。L.E.Harrington.,Nat.Immunol6:1123(2005);H.Park.,Nat.Immunol.6:1133(2005)。IL-23能够在存在APC和抗原的情况下自幼稚CD4十T细胞诱导Thi.n语系细胞，但是当施加至用抗CD3/抗CD28活化的幼稚T细胞时不能启动IL-17产生。L.E.Harringtonetal.，Nat.Immunol6:1123(2005);M.Veldhoenetal,Immunity24:179(2006)。此外，TGF-卩和IL-6已经表明是Th化.n子集分化的重新(denovo)因子。M.Veldhoenetal.，Immunity24:179(2006)。进行了实验来测试IL-22是否可能是在可信的(authentic)TCR刺激之下由IL-23诱导的其他效应器T细胞细胞因子。在早先描述的Thl极化(IL-12和抗IL-4)、Th2极化(IL-4、抗IL-12和抗IFN^)、Th比.n极化(IL-23、抗IFN-y和抗IL-4)或Th0(抗IL-12/23p40,抗IFN-y和抗IL-4)条件下用0.3pMOVA肽活化来自DO11.10TCR转基因小鼠的CD4十T细胞四天。L.E.Harringtonetal，NatImmunol6:1123(2005)。从细胞提取RNA，进行实时PCR来检测编码各种鼠细胞因子的mRNA的表达(如上所述，图34A中的图)。另外，对培养物上清液进行ELISA来检测在蛋白质水平各种细胞因子的表达。如图34A所示，IL-17被IL-23诱导，而IFN-y和IL-4分别由Thl和Th2细胞产生。在mRNA和蛋白水平上，从IL-17生产Th化-n细胞产生IL-22。为了确定IL-22是否是来自完全定型的(committed)ThIL—17"i|"系的新的效应器细胞因子，将如上所述的极化的T细胞静息两天，然后用板结合的抗CD3(10jig/ml)和可溶的抗CD28(5|ig/ml)在存在或不存在IL-23的情况下再次刺激2天。进行ELISA来检测在图34B的图上标明的鼠细胞因子的表达。结果表明，IL-n从Th化.n子集特异性地产生，甚至在没有IL-23的情况下，而且IL-23提高IL-17产量。IL-23未能促进IL-17从定型的Thl和Th2细胞产生。IL-22展现了与IL-17相同的表达样式，表明IL-22是由这种新的Th!L-n子集表达的真实的效应器细胞因子。早先，IL-23受体据报道在活化的/记忆T细胞上表达。C.Parhametal,JImmunol168:5699(2002)。以上实验没有排除IL-23作用于记忆T细胞来产生IL-22的可能性。为了更精密地解决这一点，使用分离自DO11.10TCR转基因小鼠的幼稚CD4十T细胞重复以上研究。具体而言，在图35A所注的Thl极化条件(IL-12和抗IL-4)、Th2极化条件(IL-4、抗IL-12和抗IFN-"y)、ThIL.I7极化(IL-23、抗IFN-y和抗IL-4)或其他条件下，用经OVA肽脉沖的BALB/c脾饲养细胞(经过照射的、f细胞消减的)刺激来自Aag2一DO11.10TCR转基因小鼠的CD4+T细胞。如该图所示，Th^n细胞生产了最高水平的IL-22，而Thl也分泌可检测水平的IL-22。此外，添加IFN-y或IL-4完全地消除了IL-17产生；然而，这两种细胞因子仅仅中等抑制IL-22产生(图35A)。这些数据表明IL-17与IL-22表达诱导有潜在不同的途径。然而，在标明的次级条件下再次刺激48小时时，完全建立的Th^7细胞生产IL-17和IL-22二者(图35B)。IL-23进一步以不受IFN-Y或IL-4阻断的方式提高这些细胞因子的水平(图35B)。这些数据确认了这种Th化.n谱系的稳定性。为了进一步调查IL-17和IL-22是否在活化期间由相同的细胞产生，用PMA和伊屋诺霉素刺激Th仏.n细胞，将针对IL-22或IL-17的抗体用于细胞内染色。如图35C中所示，IL-17生产细胞主要从Th^7轴观察到(左侧画面)。IL-22生产细胞也优先地从Thi-n镨系检测到(右側画面)。IL-22和IL-17的共染色揭示了，来自Th化-n系统的实质性部分的细胞同时产生IL-22和IL-17，表明IL-22和IL-17是由相同的细胞产生的。如以上讨论的，近来的研究还表明，来自APC的其他因子可能是自幼稚CD4+T细胞分化成IL-17生产T细胞之后的主要驱动力，因为IL-23未能诱导由纯化的幼稚CD4T细胞从头产生IL-17。M.Veldhoenetal.,Immunity24:179(2006)。对于由幼稚CD4T细胞生成IL-17至关重要的两种因子已经鉴定为TGF-(3和IL-6。见上文。为了确定这些因子是否对于小鼠中的IL-22产生也是关键的，用板结合的抗CD3(10呢/ml)和可溶的抗CD28(5吗/ml)刺激纯化的幼稚CD4丁细胞(>98%)。与公开的数据一致，TGF-j3和IL-6，而不是IL-23,诱导了IL-17产生(图36A，右侧画面)。令人惊讶地，与IL-17的诱导相反，IL-22仍然仅在存在IL-23的情况下诱导，并且不能被TGF-(3和IL-6诱导(图36A，左侧画面)。这些数据表明，IL-17和IL-22的转录可能受到不同地调节。然而，如早先报道的，没有IL-23时，TGF-j3和IL-6不能建立长期的IL-17生产T细胞语系(图36B)。因而该数据证明，IL-23可能是驱动T细胞子集产生IL-22的主要因子之一。接着，我们检查了相似的IL-22生产T细胞语系是否可以从人类CD4T细胞建立。我们发现，IL-23可以诱导在Th^7极化条件下用抗CD3/抗CD28刺激的纯化的幼稚人类CD4+T细胞分泌IL-22(图36C，左侧画面)。这些细胞可以在没有再次添加外源IL-23的再次激时产生IL-22(图36C,右側画面)，表明稳定的T细胞语系的形成。虽然这些细胞在与上述鼠研究相似的条件下培养，但是我们未能检测到测定法极限以上的IL-17产生(数据未显示)。总之，这些数据首次确定了，IL-23可以自鼠和人类幼稚CD4T细胞诱导IL-22生产T细胞子集。这种语系的IL-17产生取决于其他环境因素。而在可信的抗原和APC刺激条件下，IL-23驱动T细胞子集产生IL-22和IL-17二者。当幼稚T细胞被抗CD3和抗CD28活化时，IL-23还刺激IL-22产生。可以自幼稚T细胞诱导短暂IL-17产生而不是长期的谱系定型的TGF-P和IL-6，不能驱动IL-22产生。实施例23:IL-19、IL-20和IL-24也诱导表皮增厚IL-22属于包括IL-19、IL-20和IL-24的细胞因子家族，所有这些都显示了在银屑病皮肤中升高的表达。这些细胞因子也进行测试来确定它们是否像IL-22—样能够诱导表皮增生和棘层肥厚。将RHE培养四天，用20ng/ml的IL-19、IL-20、IL-22或IL-24或6ng/ml的EGF处理。经过处理的RHE用H&E染色。结果在图37A中示出。所有的细胞因子诱导活的有核表皮的棘层肥厚，如双头箭头的增加的长度所指示的。与早先的观察(上文)一致，IL-22诱导颗粒层减少，或颗粒细胞层的降低(箭头)，以及低位角质层的透明化作用(星号)。IL-22还在培养7天的RHE中诱导角化不全(数据未显示)。颗粒层减少和角化不全是频繁观察到的银屑病组织学特征。IL-19、IL-22和IL-24仅诱导表皮的棘层肥厚，对于颗粒细胞层或角质层有很少的影响或没有明显影响。EGF诱导伴有颗粒层内颗粒层增厚和角质形成细胞压紧(箭头)的表皮棘层肥厚。IL-19、IL-20、IL-22或IL-24诱导的表皮增厚在独立的实—睑中定量，在图38中图形地显示。IL-22具有最大的效果。被认为在银屑病中起作用的炎性细胞因子TNF-a、IFN-y和IL-1P不刺激此RHE系统中的角质形成细胞增殖(数据未显示)。因而，那些细胞因子可能在银屑病中起到次要作用，或者可能通过独立于IL-19、IL-20、IL-22和/或IL-24的途径起作用。使用免疫组织化学来检测细胞角蛋白16(K16),即表皮增生的一种标志物。IL-24、IL-22和EGF诱导遍及非角化表皮的CK16表达，而IL-19和IL-20仅在基底带诱导CK16表达(图37B)。还使用免疫组织化学来^f企测牛皮癣素(S100A7)，即在某些超增殖性和炎性皮肤疾患、包括银屑病中上调的数种S100家族蛋白质之一。IL-19、IL-20、IL-22和IL-24都诱导上基部表皮中的S100A7表达，IL-22和IL-24具有最大的效果(图37C)。S100A7染色在角质形成细胞的核和细胞质中观察到，有些蛋白质也在细胞外出现。将图37B和C中显示的结果定量，并在图37E和F中图形地显示。还使用免疫组织化学来检测pY(705)-STAT3，即STAT3的反式激活形式。活化的STAT3已经显示了在银屑病病变皮肤中升高。IL-19、IL-20、IL-22和IL-24都诱导所有活细胞层中发现的RHE角质形成细胞中的持久性STAT3活化，由它的核定位所展现(图37D)。实施例24:针对il-20和il-22的受体的阻断性抗体降低牛皮癣素表达IL-19和IL-20都通过IL20Ra和IL20Rb的受体异二聚体进行信号传导。IL20还通过IL-22R和IL-20Rb的受体异二聚体进行信号传导。IL-22通过IL-22R和IL10R2的异二聚体进行信号传导。这些受体组件在分离自RHE或分离自正常人表皮角质形成细胞(NHEK,来自捐赠的新生儿包皮)的原代培养物的角质形成细胞上的细胞表面表达通过流式细胞术来检查。将以下单克隆抗体用于流式细胞术抗IL20Ra(为这项研究的目的在小鼠中产生)；抗IL20Rb(为这项研究的目的在小鼠中产生)；抗IL-22R抗体7E9(如上所述的)；抗IL-10R2FAB874P(PE偶联的)(R&DSystems,Minneapolis,MN)。结果在图39中示出。每种抗体结合的受体组件在每个图的右上方显示(IL-22R-波称为"IL-22R1")。IL-20Rb和IL10R2在NHEK的表面一致地表达，不考虑汇合、传代数或培养基中的钙水平(图39A)。相反，在NHEK上IL-20Ra和IL-22R1的细胞表面表达是供体与供体间不同的，一致地是相对低^f旦是为可检测水平的(图39A和未显示的数据)。与单层NHEK中的表达水平相比，IL-20Ra和IL-22R在分离自RHE的角质形成细胞上以高得多的水平表达(图39B)。这种差异的原因是未知的。然而，尽管如此清楚的是，分析的所有受体组件在人类角质形成细胞上表达。没有检测到这些受体组件在免疫细胞(T细胞、B细胞、天然杀伤细胞和单核细胞)上的表达(数据未显示)。因而，这些受体组件的配体可能提供了免疫系统与角质形成细胞异常之间的联系。为了检查上述抗体是否可以阻断IL-19、IL-20和IL-22处理的效果，如在先前的实施例中描述的，将20微克/ml的抗IL20Ra、抗IL20Rb或抗IL-22R添加至RHE培养基，l小时之后添力o20ng/ml的IL-19、IL-20或IL-22。然后培养RHE四天，在第二天更换培养基(包括细胞因子和抗体的4.5ml新鲜培养基)。RHE然后针对牛皮癣素(S100A7)通过免疫组织化学来染色。结果在图40中示出。IL-19、IL-20和IL-22处理的RHE分别在第一、第二和第三行中显示。用抗IL20Ra(ocIL-20Ra)、抗IL20Rb(ocIL-20Rb)或抗IL-22R(ocIL-22Rl)预处理的RHE分别在第三、第四和第五列中显示。无抗体对照和同种型对照抗体在第一和第二列中显示。结果显示，抗IL20Ra或抗IL20Rb都有效地阻断IL-19诱导的牛皮癣素表达。类似地，抗IL-22R有效地阻断IL-22诱导的牛皮癣素表达。抗IL20Rb有效地阻断IL-20诱导的牛皮癣素表达，但抗IL20Ra没有。类似地，抗IL-22R不能阻断IL-20诱导的牛皮癣素表达。为了进一步调查抗IL-22R和抗IL20Ra对IL-20诱导的牛皮癣素表达的影响，将RHE用单独的或组合的那些抗体预处理，之后用IL-20处理。结果在图41中示出。如上所述，单独的抗IL-22R或抗IL20Ra不能够阻断IL-20诱导的牛皮癣素表达(两个画面的第二列)。然而，抗IL20Ra与抗IL-22R二者的组合有效地阻断IL-20诱导的牛皮癣素表达，表明IL-20Ra和IL-22R在人类角质形成细胞中的IL-20信号传导方面具有互补作用(左下画面)。实施例25:IL-19、IL-20、IL-22和IL-24诱导类似的基因表达谱为了鉴定IL-19、IL-20、IL-22和IL-24诱导的基因，用20ng/ml的IL-19、IL-20、IL-22或IL-24处理RHE四天。制备RNA,将cDNA与含有54,675个探针集的AffymetrixU133Plus基因芯片(Affymetrix,SantaClara,CA)杂交。对于其表达增加至少2倍的基因分析数据。IL-20、IL-22和IL-24显示了相似的基因表达谱。在共同由IL-20、IL-22和IL-24诱导的前20个基因中，七个是早先报道与银屑病相关的基因。这些基因是牛皮癣素(S100A7)、S100A12、SCCA2、SERP腿4、CCL20、CD36和Stat3。为了检查IL-20、IL-22和IL-24诱导的基因是否显示在4艮屑病中的上调，将上文描述的微阵列分析与早先的银屑病皮肤的微阵列研究相比较(Zhouetal.(2003)Physiol.Genomics13:69-78)。由于该研究是使用不同的微阵列芯片进行的，仅比较了在该研究与当前研究之间共同的参考序列(refseqs)。在银屑病皮肤中上调的468种参考序列中，356种被IL-20、IL-22和IL-24诱导，.它们中的188种是显著的(p<0.05)。结合起来，以上研究证明了由IL-20、IL-22实施例26:材料保藏以下杂交瘤细胞系已经保藏在美国典型培养物保藏中心，10801UniversityBlvd.,Manassas,VA20110-2209USA(ATCC):杂交瘤/抗体名称ATCC号抗隱IL-22(3F11.3)PTA-7312抗-IL-22(11H4.4)PTA-7315抗-IL画22(8E11.9)PTA-731抗-IL-22R(7E9.10.8)PTA-7313抗-IL-22R(8A12.32)PTA-7318抗-IL-22R(8H11.32.28)PTA-7317保藏曰期2006年1月13曰2006年1月13日2006年1月13日2006年1月13日2006年1月13曰2006年1月13日这些保藏是依据国际承认用于专利程序的微生物保藏布达佩斯条约(BudapestTreaty)及其(布达佩斯条约)实施细则的规定进行的。这保证了自保藏之日起维持存活培养物30年。细胞系可根据布达佩斯条约的条款通过ATCC获得，并服从Genentech公司与ATCC之间的协议，它保证了(a)在专利申请的待决期间对于由37CFR§1.14和35USC§122授权的官员确认的人，对培养物的接触是可行的，以及(b)关于这样保藏的培养物对于公众的可获得性的所有限制将在专利授权时被不可撤销地除去。本申请的受让人已同意，若保藏材料的培养物在合适条件下培养时死亡、丟失或遭到破坏，则他将在接到通知后迅速用同一培养物的存活标本更换。所保藏细胞系的可获得性并不解释为对违反任何政府机构依据其专利法所授予的权利实施本发明的许可。认为前述书面说明足以使本领域技术人员能够实践本发明。本发明并不限于所保藏材料的范围，因为所保藏实施方案意图作为本发明某些方面的单一例示，而且功能上相当的任何构建物都在本发明的范围内。本文中的材料保藏并非承认本文中所包含的书面说明不足以能够实践本发明的任何方面，包括其最佳模式，也不能解释为将权利要求的范围限制于它所描述的具体例示。实际上，根据上面的描述，除了本文所显示和描述的，本发明的多种修饰对于本领域技术人员是显而易见的，而且在所附权利要求的范围内。权利要求1.一种特异性结合IL-22的抗体，其中所述抗体是(a)由选自3F11.3(ATCC登记号PTA-7312)、杂交瘤11H4.4(ATCC登记号PTA-7315)和杂交瘤8E11.9(ATCC登记号PTA-7319)的杂交瘤产生的抗体；(b)(a)的抗体的亲和成熟的形式；(c)(a)或(b)的抗体的抗原结合片段；或(d)(a)、(b)或(c)的抗体的人源化形式。2.—种特异性结合IL-22R的抗体，其中所述抗体是(a)由选自7E9(ATCC登记号PTA-7313)、杂交瘤8A12(ATCC登记号PTA-7318)和杂交瘤8H11(ATCC登记号PTA-7317)的杂交瘤产生的抗体；(b)(a)的抗体的亲和成熟的形式；Cc)(a)或(b)的抗体的抗原结合片段；或(d)(a)、(b)或(c)的抗体的人源化形式。3.—种治疗自身免疫性病症的方法，其中所述自身免疫性病症不是关节炎，所述方法包括向哺乳动物施用有效量的包含IL-22的拮抗剂的药用配制剂。4.权利要求3的方法，其中所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22的抗体。5.权利要求4的方法，其中所述特异性结合IL-22的抗体是根据权利要求1的抗体。6.权利要求3的方法，其中所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22R的抗体。7.权利要求6的方法，其中所述特异性结合IL-22R的抗体是根据权利要求2的抗体。8.权利要求3的方法，其中所述IL-22拮抗剂是IL-22BP。9.权利要求3的方法，其中所述自身免疫性病症是炎性肠病。10.权利要求3的方法，其中所述自身免疫性病症是银屑病。11.权利要求10的方法，其中所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22的抗体。12.权利要求ll的方法，进一步包括施用选自特异性结合IL20Ra的抗体、特异性结合IL20Rb的抗体和特异性结合IL-22R的抗体的至少一种抗体。13.权利要求10的方法，其中所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22R的抗体。14.权利要求13的方法，进一步包括施用选自特异性结合IL-22的抗体、特异性结合IL20Ra的抗体和特异性结合IL20Rb的抗体的至少一种抗体。15.—种治疗炎症的方法，其中所述炎症不是关节炎炎症，所述方法包括向哺乳动物施用有效量的包含IL-22的拮抗剂的药用配制剂。16.权利要求15的方法，其中所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22的抗体。17.权利要求16的方法，其中所述特异性结合IL-22的抗体是根据权利要求1的抗体。18.权利要求15的方法，其中所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22R的抗体。19.权利要求18的方法，其中所述特异性结合IL-22R的抗体是根据权利要求2的抗体。20.权利要求15的方法，其中所述IL-22拮抗剂是IL-22BP。21.权利要求15的方法，其中所述炎症是自身免疫性炎症。22.权利要求15的方法，其中所述炎症是皮肤炎症。23.权利要求15的方法，其中所述炎症是慢性炎症。24.—种抑制肺瘤发展的方法，所述方法包括向哺乳动物施用有效量的包含IL-22的拮抗剂的药用配制剂。25.权利要求24的方法，其中所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22的抗体。26.权利要求25的方法，其中所述特异性结合IL-22的抗体是根据权利要求1的抗体。27.权利要求25的方法，其中所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22R的抗体。28.权利要求27的方法，其中所述特异性结合IL-22R的抗体是根据权利要求2的抗体。29.权利要求24的方法，其中所述IL-22拮抗剂是IL-22BP。30.—种剌激生物学系统中IL-23介导的信号传导途径的方法，所述方法包括向所述生物学系统提供IL-22激动剂。31.权利要求30的方法，其中所述IL-22激动剂是IL-22。32.—种抑制生物学系统中IL-23介导的信号传导途径的方法，所述方法包括向所述生物学系统提供IL-22拮抗剂。33.权利要求32的方法，其中所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22的抗体。34.权利要求32的方法，其中所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22R的抗体。35.—种刺激Th仏.n细胞功能的方法，所述方法包括使Thu7细胞暴露于IL-22激动剂。36.权利要求35的方法，其中所述IL-22激动剂是IL-22。37.—种抑制Thu7细胞功能的方法，所述方法包括使Th仏-n细胞暴露于IL-22拮抗剂。38.权利要求37的方法，其中所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22的抗体。39.权利要求37的方法，其中所述IL-22拮抗剂是特异性结合IL-22R的抗体。全文摘要提供了用于诊断和治疗炎症和自身免疫性病症，诸如银屑病的组合物和方法。提供了用于调控IL-23或IL-22信号传导的组合物和方法，包括与IL-22和IL-22R结合的抗体。文档编号A61K38/20GK101379087SQ200680052270公开日2009年3月4日申请日期2006年11月30日优先权日2005年12月2日发明者伊冯娜·陈,吴剑锋,帕特里夏·瓦尔德斯,欧阳文军,特伦斯·王,苏珊·萨,迪米特里·丹尼伦科,衍郑,阿南·邱恩撒拉派申请人:健泰科生物技术公司