专利名称：金枪鱼头免疫活性物质及其制备方法
技术领域：
本发明涉及生物技术应用及鱼类资源综合利用领域，特别是一种金枪鱼头 免疫活性物及其制备方法。
背景技术：
金枪鱼(Tunas)，也称鲔鱼、吞拿鱼，分布在太平洋、大西洋和印度洋 的广阔水域，属大洋性高度洄游鱼类，鱼体大而重，成鱼可达数十到上百公斤。 大多数金枪鱼栖息在100 400米深的海域，其洄游范围限于盐度高的外洋，较 少接触到污染较严重的近海和沿岸水域，其肉质受到近海的污染程度非常低， 因此金枪鱼作为一种深海鱼类，素来以营养价值高、纯天然、无污染而享誉国 际市场并有"海洋黄金"之称的金枪鱼。金枪鱼是世界远洋渔业的重要资源， 世界金枪鱼年产量近年来维持在350—400万吨水平，产值达300亿美元，是国际 水产贸易中的第三大种类。金枪鱼除少部分冰鲜销售外，大部分用于罐头、生 鱼片的加工，在加工过程中产生的下脚料大约占总重量的50% 70%，这些下脚 料包括鱼头、内脏、鳃、鱼皮等，下脚料中含有大量的蛋白质，脂肪、矿物质及多种生物活性物质，是值得开发利用的资源。目前，a:、缺乏有效的加工利用方法，国内外有很多企业将金枪鱼下脚料加工成饲料鱼粉，还有不少企业直接 将其作为废物处理，既浪费资源，又造成环境污染。如何深度开发这些下脚料 生产高附加值产品，不仅对于金枪鱼的综合利用和保护环境有重要意义，而且 可以提高金枪鱼的利用率和提高企业的竞争力。海洋生物中不但蛋白质含量丰富，而且在长期特异闭锁环境中进化的蛋白 质组成、结构与功能与陆地动植物有较大差异，因此是生产功能性活性物质很 好的特定的蛋白质资源。日本、欧美等国把海洋生物中功能性活性物质系列产 品的研究与开发作为发展海洋保健食品和药物的一个重要方向。酶水解蛋白质 具有反应条件温和、水解过程易控制、安全性高等优点。酶水解鱼蛋白不仅含有丰富的必需氨基酸、小肽、微量元素、维生素等多种小分子营养成分，具有 生物利用率高等优点，而且也含有牛磺酸、生物活性肽等多种活性成分，具有 显著的保健功效，能满足人们对营养与保健的双重追求。它还可广泛用作海鲜 调味料、膨化食品和方便、保健食品的基料，除满足一般消费者家庭需要外， 还适合生长期的婴幼儿、病后体质虚弱者及高血压患者作饮食佐料，其产品能 以粉状、液体和糊状等多种形态存在，便于按照不同生理状态人群、不同作业 条件下人群的营养特征和市场需求情况，与其它食品物料充分混合在一起，重 新加工成丰富多彩的海洋工程食品，具有很好的发展前景，市场潜力巨大。免疫功能是人体重要的防御功能，时刻保护了机体不受病菌的侵害，维持 着自身内部系统的稳定。环境污染的不断加剧，现代疾病发病率的上升，爱滋 病的危害，使人们对免疫缺损的严重后果有了更深刻的认识，因此寻找具有良好 免疫调节作用的保健食品与药物越来越受到世界各国科学工作者的关注。在功 能食品和保健食品中，免疫强化食品是重要组成部分，长期以来，增强免疫功 能食品一直受广大消费者欢迎，其销量一直呈稳定增长势头。寻找具有良好免 疫调节作用的活性物质，研究开发免疫功能增强食品，对增强机体免疫机能及 有关病人的体质恢复具有重要意义。发明内容本发明的目的是提供一种金枪鱼头免疫活性物质及其制备方法，用两种蛋 白酶同时水解金枪鱼头蛋白，经离心分离、超滤得到富含肽等具有免疫活性的 蛋白水解液，水解液进一步可加工成口服液、胶囊、片剂等，同时还可得到富 含多不饱和脂肪酸的鱼油，达到变废为宝、综合、高效利用金枪鱼头的目的。为实现上述发明目的本发明采取的技术方案是金枪鱼头免疫活性物质的制 备方法，按以下步骤(1) 前处理金枪鱼头清洗后，经80 90。C水煮10 15分钟后取肉搅碎；(2) 蛋白酶水解采用中性蛋白酶与木瓜蛋白酶双酶同时水解，肉与水按重量比为1:1.5 1 : 2,pH6.8 7. 0，温度50 55。C,时间2.5 3小时，中性蛋白酶1400IU/g原料， 木瓜蛋白酶1100KJ/g,水解结束后升温至85 9(TC灭酶10分钟；(3)油水分离:水解液经离心去渣,滤液经离心进行油水分离，分别得到蛋水解液及鱼油；(4)分级分离用超滤膜分离蛋白水解液，得到免疫活性物质。所述步骤(3)制得的金枪鱼水解蛋白液中加入调配物，按常规制得口服液、 胶囊或片剂；所述油相为金枪鱼头鱼油。一种金枪鱼头免疫活性物质，它是对金枪鱼头进行中性蛋白酶与木瓜蛋白 酶双酶同时水解经离心、超滤分离制备所得。该金枪鱼头免疫活性物质，其分子量范围在12000 3000道尔顿之间。本发明具有以下优点1、 本发明工艺科学合理，利用生物酶法水解制备免疫活性物质，反应过程 温和、易于控制，安全性高；2、 本发明制备的金枪鱼头免疫活性物质明显促进小鼠体液免疫、非特异性 免疫功能，提高或明显促进小鼠细胞免疫功能；3、 本发明制备的金枪鱼头水解蛋白是天然鱼蛋白经过生物酶降解得到的产 物，营养丰富，易于吸收，可广泛用作营养保健食品、海鲜调味料、膨化食品 等，也可作为病人的康复食品。4、 本发明制备的鱼油也可进一步处理成为富含DHA和EPA保健鱼油，可开 发成具有预防和治疗心血管疾病、健脑益智等功能性产品，具有广阔的市场前 景。
具体实施方式
本发明结合实施工艺实例做进一步说明-金枪鱼头解冻清洗后，于带夹层的贮罐中经80-9CTC水煮10-15分钟，使骨 肉分离。人工将肉等可食部分与骨头分离，经绞肉机绞碎；在带搅拌器的反应 釜中按照下列条件酶解温度5(TC，肉水按重量比为l: 2， p朋.8，中性蛋白 酶1400IU/g原料，木瓜蛋白酶1100IU/g原料，同时加入2种酶，水解2.5小时， 水解结束，升温至85-90'C灭酶10分钟；水解液经三足式离心机过滤后，滤液由 离心机进行油水分离，水相即蛋白水解液经超滤分级分离得到免疫活性物质， 加入调配物即制得口服液、胶囊或片剂；油相即为金枪鱼头鱼油。其中中性蛋 白酶为枯草芽孢杆菌中性蛋白酶。对金枪鱼头进行中性蛋白酶与木瓜蛋白酶双酶同时水解经超滤分离所制备的金枪鱼头免疫活性物质，其分子量范围在12000 3000道尔顿之间。
权利要求
1、一种金枪鱼头免疫活性物质的制备方法，按以下步骤(1)前处理金枪鱼头清洗后，经80～90℃水煮10～15分钟后取肉搅碎；(2)蛋白酶水解采用中性蛋白酶与木瓜蛋白酶双酶同时水解，肉与水按重量比为1∶1.5～1∶2，pH6.8～7.0，温度50～55℃，时间2.5～3小时，中性蛋白酶1400IU/g原料，木瓜蛋白酶1100IU/g，水解结束后升温至85～90℃灭酶10分钟；(3)油水分离水解液经离心去渣，滤液经离心进行油水分离，分别得到蛋白水解液及鱼油；(4)分级分离用超滤膜分离蛋白水解液，得到免疫活性物质。
2、 据权利要求1所述金枪鱼头免疫活性物质的制备方法，其特征在于所 述步骤(3)制得的金枪鱼水解蛋白液中加入调配物，按常规制得口服液、胶囊 或片剂；所述油相为金枪鱼头鱼油。
3、 一种金枪鱼头免疫活性物质，其特征在于是对金枪鱼进行中性蛋白酶与木瓜蛋白酶双酶同时水解经离心、超滤制备所得。
4、 据权利要求3所述金枪鱼头免疫活性物质，其特征在于其分子量范围 在12000 3000道尔顿之间。
5、 据权利要求3或4所述金枪鱼头免疫活性物质，其特征在于明显促进 小鼠体液免疫、非特异性免疫，提高或明显促进小鼠细胞免疫功能。
全文摘要
一种金枪鱼头免疫活性物质及其制备方法，其方法步骤为前处理清洗，搅碎；蛋白酶水解采用中性蛋白酶与木瓜蛋白酶双酶同时水解，油水分离水解液经离心去渣，滤液进行油水分离，分别得到蛋白水解液及鱼油；分级分离用超滤膜分离蛋白水解液，得到金枪鱼头免设活性物质。本发明用两种蛋白酶同时水解金枪鱼头蛋白，经离心分离得到富含肽等具有免疫活性的蛋白水解液，水解液进一步可加工成口服液、胶囊、片剂等，同时还可得到富含多不饱和脂肪酸的鱼油，达到变废为宝、综合、高效利用金枪鱼头的目的。该金枪鱼头免疫活性物质明显促进小鼠体液免疫、非特异性免疫功能，提高或明显促进小鼠细胞免疫功能。
文档编号A61K9/48GK101249103SQ200710031628
公开日2008年8月27日 申请日期2007年11月19日 优先权日2007年11月19日
发明者刘书成, 吉宏武, 静 张, 萍 杨, 洪鹏志, 章超桦, 郝记明 申请人:广东海洋大学