蒲公英中酚酸类有效部位治疗口腔溃疡的用途的制作方法

专利名称：蒲公英中酚酸类有效部位治疗口腔溃疡的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，具体而言，本发明涉及一种蒲公英植物酚酸类有效部位为主药配制的口含片、散剂、喷雾剂和口腔贴膜。其在预防以及治疗病毒感染等因素引起的口腔溃疡有显著效果，可预期成为防治I型单纯疱疹病毒感染等病因引起的口腔溃疡疾病药物。
背景技术：
口咽部疾病为人类的一大疾患，口腔溃疡为发病率在10-30％的常见病和多发病。中医认为口腔溃疡属于“口疮”、“口疳”范畴，各年龄段均有发生，发作时因强烈的自发性疼痛而影响进食与睡眠。其病因复杂，病种较多。中医理论认为口腔溃疡的主要病因如下一为脾胃积热内蕴、热郁上熏口腔及舌；二为心火炽盛，邪热循经上炎；三为阴虚火旺，素体阴虚或久病伤肾，真阴亏耗，阴液不足，虚火旺盛，上炎口腔。现代医学认为其可能与病毒感染、细菌感染、以及机体内的内分泌紊乱、免疫功能失调、维生素B2缺乏等因素有关。复发性口腔溃疡是口腔黏膜疾病中最常见的疾病，其中尤以疱疹性口腔溃疡为常见。而疱疹性口腔溃疡是由疱疹病毒引发的口腔溃疡，常见的为I型单纯疱疹病毒(HSV-1)引发的单纯疱疹型口腔溃疡，也是口腔溃疡的一个常见的重要类型。
口腔溃疡易反复发作，目前尚无特效治疗方法。目前临床上主要的治疗措施包括局部治疗和全身治疗，西医治疗以局部用碘甘油及维生素B1、B2和维生素C口服，一般疗效不甚明显。严重、顽固的口腔溃疡则需内服激素类药品、抗菌素类药品等，使用此类药物又存在较大的毒副作用和易使病人产生耐药性和菌群失调的不足之处。中药外用药可用包括锡类散、冰硼散等外用制剂，但治疗效果不十分理想；内服药包括牛黄解毒丸、牛黄上清丸等，对本病症无显著的针对性。近期出现的不少新的口腔含片类药物制剂如西瓜霜含片、华素片和溶菌酶含片等分别在口感、杀菌、抗炎方面有所进步，但是有些产品不适于哺乳期妇女、甲状腺功能亢进患者和碘过敏者。因此，应用现代病毒药理学技术、利用现代分离纯化手段，从中医药宝库中发掘出新的治疗口腔溃疡天然药物尤其是创新型中药是迫在眉睫的。
中药蒲公英为菊科植物蒲公英(Taraxacum mongolicum Hand-Mazz，也称蒙古蒲公英)或同属数种植物的干燥全草，为清热解毒中药，主治乳痈、疔疮、目赤、咽痛、湿热黄疸和热淋涩痛等。蒲公英主要含有三萜类、植物甾醇类、倍半萜内酯类、香豆素类、黄酮类、酚酸类化合物、胡萝卜素类和脂肪酸类。其药理作用有抗菌消炎、抗氧化、保肝利胆、免疫调节和抗肿瘤等。目前，利用蒲公英单味药制成的注射剂、片剂和颗粒剂等广泛用于临床，治疗各种炎症性疾病取得了较好的疗效。
蒲公英的药理作用主要为(1)广谱抗菌、抗病毒及其他病原体作用对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、卡他球菌、溶血性链球菌等具有较强杀灭作用，磺胺增效剂TMP可增强其抗菌作用。此外，对肺炎双球菌、脑膜炎球菌、白喉杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌、绿浓杆菌也有较强抑制作用。对结核杆菌、炭疽杆菌、幽门螺旋杆菌、皮肤真菌、单纯疱疹病毒、钩端螺旋体等也具一抑制作用。(2)抗炎作用临床上对乳腺炎、肝炎、支气管炎、咽喉炎、腮腺炎、胆囊炎、胃炎等炎症性疾病均具有较好的疗效。据报道，蒲公英乙酸乙酯提取物及其主要成分木犀草素和木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷能抑制脂多糖(LPS)刺激的小鼠RAW264.7巨噬细胞一氧化氮合成酶(iNOS)和环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达[Hu C，Kitts DD，Luteolin and luteolin-7-O-glucoside from dandelion flower suppress iNOSand COX-2 in RAW264.7 cells，Molecular and Cellular Biochemistry，2004，265107]。(3)抗氧化作用蒲公英提取物总黄酮具有类超氧化物歧化酶(SOD)作用，能有效清除超氧阴离子自由基和羟自由基。(4)保肝利胆作用蒲公英水提物和注射液具有保肝利胆作用，能降低四氯化碳诱导的肝损伤大鼠谷丙转氨酶(ALT)水平，并能改善肝细胞变性坏死。此外还有报道蒲公英的水提物和醇提物具有抗肿瘤作用，和免疫调节作用等。
在以往的试验中，我们用现代技术手段对蒲公英植物不同的提取部位进行纯化；发现蒲公英提取物的酚酸类有效部位具有强效的抗炎、抑制流感病毒的功效。其中含有多个木犀草素骨架的黄酮类化合物成分，并含有3，5-O-双咖啡酰基奎尼酸；3，4-O-双咖啡酰基奎尼酸；4，5-O-双咖啡酰基奎尼酸三结构相似的双咖啡酰奎尼酸类酚酸化合物活性物质，并据此结果申报了国家发明专利“蒲公英中酚酸类有效部位的制备及其抑制流感病毒的用途”(赵昱、于荣敏、李峰；受理号200610036674.2)。我们相信以该种药典用药、清热解毒“八大金刚”之一的蒲公英中提取出来的富含酚酸类成分的有效部位为原料药，开发出一种易使用、易携带、抗炎/抗病毒综合疗效的口腔溃疡药物将具有极大的应用价值。

发明内容
本发明的目的是提供了将蒲公英植物中富含酚酸类化合物的提取物用于抑制单纯疱疹病毒的用途。
本发明的再一目的是提供了一种以蒲公英植物酚酸类有效部位治疗口腔溃疡的用途。
本发明的又一目的是提供了一种防治口腔溃疡的药物或药物组合物。其特征为以蒲公英植物酚酸类有效部位为主药的口含片、散剂和喷雾剂。
本发明还提供了蒲公英提取物含片、散剂和喷雾剂的制备方法。
本发明中的口含片、散剂和喷雾剂含有1％至80％的蒲公英植物提取物喷干粉，其余为矫味剂、稀释剂、粘合剂和润滑剂。矫味剂选自薄荷、薄荷油、薄荷脑、冰片、食用香精、阿斯帕坦、柠檬酸、木糖醇、蔗糖、甜菊素、甘草、糖浆中的一种或几种；稀释剂选自乳糖、糖粉、甘露醇、糊精或麦芽糖糊精、淀粉、沉降碳酸钙、沉降磷酸钙、碳酸镁或白陶土中的一种或几种；粘合剂选自乙醇溶液、明胶、单糖浆、微晶纤维素或卡波姆中的一种或几种；润滑剂为硬脂酸镁。
本发明所涉及的药物具有体外强效抑制I型单纯疱疹病毒的作用，说明其对病毒性感染口腔溃疡有着显著的治疗作用。本发明还针对苯酚大鼠口腔溃疡和已发作口腔溃疡之患者进行了药效学试验和初步临床试验，发现与喷干粉灌胃给药相比，含片和散剂剂型更能加速减小溃疡面积和促进溃疡愈合。
蒲公英植物酚酸类有效部位治疗口腔溃疡药物含片的制备方法为将富含酚酸类成分的蒲公英提取物喷干粉、矫味剂和稀释剂分别过筛，过筛后混合均匀，用粘合剂制湿颗粒，烘箱干燥，过筛整粒，加入硬脂酸镁，混匀，压片即得。
本发明所提供的蒲公英植物酚酸类有效部位治疗口腔溃疡药物散剂由蒲公英植物酚类有效部位和稀释剂组成，其中稀释剂可以选自乳糖、淀粉糊精、蔗糖、葡萄糖、沉降葡萄糖、沉降磷酸钙、碳酸镁或白陶土中的一种或几种；通过下面的制备方法而实现取处方量的蒲公英提取物喷干粉末，100℃时干燥两小时，加入稀释剂，混匀，过100目筛，装瓶即可。
本发明中的蒲公英植物酚酸类有效部位治疗口腔溃疡药物喷雾液制备取处方量的蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉末，加入10倍量的双蒸水，超声溶解，继而加入阿斯帕坦，柠檬酸等调味剂，以及1％的环糊精，加热溶解，于超高温下135℃时5-10秒瞬时杀菌，无菌灌装喷雾瓶，再于100℃时二次杀菌30分钟，冷却后装箱即得。
本发明具有以下优点(1)去粗取精，将起抑制病毒和抗炎的有效成分集中在有效部位中，比起植物粗提物直接用药来说大大减少了用药量，相对集中了药物的浓度；(2)局部用药，使病变部位的药物浓度增高、持久；高强度地针对溃疡进行作用，避免了肝脏首过效应和其他肝肠代谢酶的未知作用，从而提高了疗效；(3)加入多种矫味剂，制成不同剂型及口味，适宜于不同年龄、不同口味偏好患者使用，从而增加了患者的依从度。
经过查新发现，以往均无相关由此富含酚酸类的蒲公英提取物有效部位作为主药进行配制的口含片、散剂、口服液、喷雾剂和口腔贴膜的报道或专利，更无运用上述制剂用于防治口腔溃疡的文献报道，据此完成本发明。
具体实施方案本发明人以往通过对蒲公英植物醇水提取物进行药效关系的追踪分离，根据不同提取部位对二甲苯致小鼠耳肿胀及对流感病毒抑制结果为活性指标发现其抗炎、抗病毒活性成分集中在植物提取物的大极性酚酸类部位，通过工艺优化，本发明人采用水或水醇溶剂提取辅以多种正、反相柱层析手段得到该有效部位。经一维和二维核磁共振波谱、质谱、红外、紫外等光谱数据，我们首次发现该大极性酚酸类有效部位含有两类化合物，一是具有木犀草素骨架的黄酮类化合物成分；再一类就是咖啡酸和绿原酸等传统酚酸类活性物质，以及三个结构相似的双咖啡酰奎尼酸类酚酸化合物，它们是3，5-O-双咖啡酰基奎尼酸；3，4-O-双咖啡酰基奎尼酸；4，5-O-双咖啡酰基奎尼酸。近代药理学试验研究表明此类木犀草素骨架的黄酮类化合物和单、双咖啡酰基奎尼酸类化合物具有多种重要生理活性，主要是针对免疫系统的作用表现在抑制白三烯合成和释放，抑制乙肝病毒和艾滋病毒，抑制组胺释放，从而可用于抗炎、抗病毒和治疗过敏性疾病。此外还发现其具有强效抗氧化作用、抑制脂氧酶抗动脉粥样硬化作用、抗血小板聚集活性以及降血脂作用等活性(文献李祖晟、朱志安，医学综述，2004，10(4)，249-250)。
同时，上述两类化合物在有效部位中含量颇高，总酚酸有效部位在蒲公英提取物中的含量超过了20％。本发明人进行的药效学实验结果表明，蒲公英提取物总酚酸有效部位在实验浓度下对Vero细胞的生长无明显抑制作用，TD50＞1000微克/毫升。实验结果表明，蒲公英提取物总酚酸有效部位有显著的抑制HSV-1的作用，其对HSV-1的半数抑制浓度为75.51±8.97微克/毫升，治疗指数为大于13.24；这说明蒲公英提取物总酚酸有效部位既能显著抑制HSV-1的复制，且没有明显的毒性。因而可以用于治疗相关的单纯疱疹病毒感染性疾病，从而可能开发出抗口腔溃疡药物。
在进一步的药效学研究试验中，本发明人用苯酚致大鼠口腔溃疡为模型，试验了蒲公英提取物总酚酸有效部制成的含片和散剂对减小溃疡面积的作用。发现给药第二天起到试验结束，蒲公英提取物总酚酸有效部位制成的含片高、中剂量组以及制成的散剂高、中剂量与模型组相比较均有显著性差异，而含片组比散剂组更能减小溃汤面积。说明蒲公英提取物总酚酸有效部位制成的含片和散剂具有明显促进溃疡愈合的功效。
本发明中的药材可以是一种或几种中国产的蒲公英属植物任一部位，即可以是蒲公英(又称蒙古蒲公英)(Taraxacum mongolicumHand-Mazz)、碱地蒲公英(又称华蒲公英)(Taraxacum sinicum Kitag)、热河蒲公英(又称白缘蒲公英)(Taraxacum platypecidumDiels)、东北蒲公英(Taraxacum ohwianumKitag)、、反苞蒲公英(Taraxacum grypodon Dahlst)、兴安蒲公英(Taraxacum falcilobumKitag)等中国药品市场上常见的蒲公英药材，还可以来源于主产于欧美的药用蒲公英(Taraxacum officinale)。可以是干品或鲜品，可以是蒲公英药材植物的根、茎、叶、花、种子、皮、果实，也可以是它们的混合物；优选全草。更优选蒲公英(又称蒙古蒲公英)(Taraxacum mongolicumHand-Mazz)和/或碱地蒲公英(又称华蒲公英)(Taraxacim sinicum Kitag)的全草部分。本发明之说明书中均简称蒲公英。
下面通过实施例进一步说明本发明。实施例描述了蒲公英提取物总酚酸有效部位的制备方法、以其为主药制成的含片、散剂和喷雾剂的制备方法，以及蒲公英提取物总酚酸有效部位在体外、体内试验的活性数据。必须说明下述实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。
实施例1蒲公英提取物总酚酸有效部位的制备取10公斤蒲公英药材风干的样品，切成小段，以50％乙醇水溶液加热提取两次，第一次用8倍量，第二次用6倍量。第1次提取2小时，第2次提取1.5小时，浓缩，上样于已处理好的大孔吸附树脂，以水洗至色较浅，继以50％乙醇洗脱至色浅，洗脱液减压回收，喷雾干燥得原料细粉，此即为本发明中蒲公英植物提取物的酚酸类化合物有效部位。采用比色法进行含测根据标准曲线计算含量，结果为蒲公英提取物喷干粉原料中总酚以咖啡酸为标准品计含量为36.27％。以高效液相色谱法进行含测喷干粉原料样品中咖啡酸含量为0.63％，木犀草素7-O-葡萄糖苷含量为1.00％，3，5-O-双咖啡酰基奎尼酸、3，4-O-双咖啡酰基奎尼酸、4，5-O-双咖啡酰基奎尼酸三者之和超过3％。
实施例2蒲公英植物酚类有效部位口含片的制备配方一按照处方量投料，将75克蒲公英提取物喷干粉原料、75克微晶纤维素、75克淀粉分别过80目筛，加入阿斯帕坦8克混匀、过筛，混匀后用60％乙醇制湿颗粒，50℃烘箱干燥2小时，加入薄荷香精2克、硬脂酸镁10克，混匀，压片制成1000片，片重约250毫克/片。
实施例3蒲公英植物酚酸类有效部位口含片的制备配方二(甜橙蒲公英含片)(1)蒲公英喷干粉的制备同实施例1。
(2)将75克蒲公英喷干粉、300克微晶纤维素、300克淀粉分别过80目筛，加入糖粉100克、甘露醇10克、阿斯帕坦40克混匀、过筛，混匀后用60％乙醇制湿颗粒，50℃烘箱干燥2小时，加入液态香橙香精30克、硬脂酸镁40克，混匀，椭圆形异型冲压片制成1000片，片重约900毫克/片。
实施例4蒲公英植物酚酸类有效部位口含片的制备配方三(1)蒲公英喷干粉的制备同实施例1；(2)将70克蒲公英喷干粉、40克糊精均匀，真空干燥，粉碎；(3)加入糖粉补至600克，85％乙醇制粒，干燥和整粒，加入硬脂酸镁，混匀、压片，制成1000片，每片重600毫克。
实施例4蒲公英植物酚酸类有效部位口含片的制备配方四(1)蒲公英喷干粉的制备同实施例1；(2)甜菊素50毫克，山梨酸钾150毫克，溶于5毫升水中，用40克淀粉吸收，并搅拌均匀。加入微晶纤维素50克，搅拌机内混匀10-20分钟，加入3毫升双蒸水润湿，颗粒机制粒，湿颗粒于60℃干燥，干颗粒再过12目筛整粒；(3)薄荷油75微升，薄荷脑100毫克，溶于2毫升95％乙醇溶液中，喷雾入上述干燥颗粒中。加入蒲公英喷干粉10克和2.5克硬脂酸镁，冲模压片制成200片。
实施例6蒲公英植物酚酸类有效部位喷雾剂的制备配方一(1)蒲公英喷干粉的制备同实施例1；(2)将焦亚硫酸钠(1克)和甜菊素(0.1克)加入约900毫升灭菌双蒸水中，搅拌均匀后，加入10克蒲公英喷干粉和50毫升丙二醇，添加双蒸水至1000毫升，搅拌溶解，过滤，滤液装入塑料喷雾器内，置阴凉干燥处保存。
实施例7蒲公英植物酚酸类有效部位喷雾剂的制备配方二(1)蒲公英喷干粉的制备同实施例1；(2)0.5毫升甘油和甜菊素(0.1克)溶于400毫升75％乙醇双蒸水溶液中，将蒲公英喷干粉(10克)加入后搅拌均匀，添加双蒸水至1000毫升，搅拌溶解，过滤，滤液装入塑料喷雾器内，置阴凉干燥处保存。
实施例8蒲公英植物酚酸类有效部位散剂的制备配方一(1)蒲公英喷干粉的制备同实施例1。
(2)按照处方量投料，将7.5克蒲公英提取物喷干粉原料、7克微晶纤维素、7克淀粉分别过6号100目筛，加入阿斯帕坦0.8克混匀，分装制成100袋，铝箔包装放置阴凉干燥处保存。
实施例9蒲公英植物酚酸类有效部位散剂的制备配方二(1)蒲公英喷干粉的制备同实施例1。
(2)将7.5克蒲公英喷干粉、30克微晶纤维素、30克淀粉分别过6号100目筛，加入糖粉10克、甘露醇1克、阿斯帕坦4克混匀、过筛，加入液态香橙香精3克，分装制成100袋，铝箔包装放置阴凉干燥处保存。
蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉原料以及上述实施例中所述的各种制剂具有重要的生物活性，本发明采用微量细胞病变抑制(CPE)法研究蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉对I型单纯疱疹病毒(HSV-1)的抑制作用试验，以阿昔络韦(ACV)为阳性对照药，发现蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉原料在体外具有较强抑制HSV-1的作用。
本发明的蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉原料及制剂还可以与现已上市的治疗口腔溃疡的常用药物联合使用，制备得到具有治疗口腔溃疡的组合物或复方制剂。
为了更好地理解本发明的实质和本发明所述蒲公英提取物酚酸性有效部位在药物开发上的应用前景，下面以药理实施例形式分别介绍采用微量细胞病变抑制法测定蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉原料抑制I型单纯疱疹病毒(HSV-1)的半数有效浓度(IC50)，治疗指数等药理实验结果，说明其在制药领域中的新用途。本发明药理实施例还给出了蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉及口含片制剂对苯酚致大鼠口腔溃疡抑制作用试验数据，以及蒲公英植物酚酸类有效部位口含片在临床口腔溃疡患者上的实际应用数据。药理实施例仅给出了具有代表性的部分活性数据。必须说明，本发明的药理实施例及所采用的药效学模型是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进，以及在本发明实施例所涵盖的病因基础上的简易扩充的其他适应症都属于本发明要求保护的范围。
药理实施例1微量细胞病变抑制(CPE)法研究实施例1制备得到的蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉对HSV-1的抑制作用试验1.1细胞培养和病毒传代将Vero细胞培养于含10％灭活小牛血清，100U/毫升青霉素和100微克/毫升的RPMI 1640培养基中，置37℃，5％二氧化碳，100％相对湿度的培养箱中培养。将HSV-1加入长有Vero细胞的细胞瓶中，置37℃，5％二氧化碳，100％相对湿度的培养箱中培养，收集培养上清，置低温下保存。
1.2实验方法采用MTT法测定蒲公英提取物喷干粉对Vero细胞生长的抑制作用取对数生长期的Vero细胞，用培养基将细胞稀释成1×105/ml，接种于96孔细胞培养板，每孔100微升，在37℃，5％CO2，100％相对湿度的培养箱中培养24小时后加入用培养基稀释的蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉，浓度分别为1000微克/毫升，200微克/毫升，40微克/毫升和8微克/毫升，置于培养箱中培养，培养72小时后，每孔加入MTT试剂10微升，继续培养4小时，弃去培养基，每孔加入二甲亚砜200微升，用振荡器振荡20分钟，在570nm波长下用酶标仪测定OD值。以只加培养基的培养孔为对照孔。抑制率(％)＝对照孔OD值-实验组OD值)/对照孔OD值×100％。实验重复三次。根据不同浓度下对细胞生长的抑制率，计算对细胞生长的半数抑制浓度(TD50)。
用微量细胞病变抑制法测定样品对病毒生长抑制作用取对数生长期的Vero细胞，用培养基将细胞稀释成1×105/毫升，接种于96孔细胞培养板，37℃，5％二氧化碳，100％相对湿度培养24小时，加入100TCID50的病毒100微升，倾出病毒，分别加入不同浓度的蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉，同时设正常细胞对照和病毒感染对照，37℃，5％二氧化碳，100％相对湿度培养48小时后在倒置显微镜下观察细胞病变。以五级标准作为判断细胞病变的标准，即“-”细胞无变化，分值为8分；“+”25％以下细胞出现病变，分值为6分；“++”25％～50％细胞出现病变，分值为4分；“+++”50％～75％细胞出现病变，分值为2分；“++++”75％以上细胞出现病变，分值为0分。计算半数抑制浓度(IC50)。同时用阿昔洛韦作为阳性对照药。计算样品治疗指数TI＝半数中毒浓度/半数抑制浓度。
1.3实验结果结果如表一显示，蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉能显著抑制HSV-1的复制，其对HSV-1的半数抑制浓度和治疗指数如表所示。
表一蒲公英植物酚酸类有效部位抑制HSV-1的复制作用

注TD50指样品对细胞生长的半数抑制浓度(微克/毫升)；IC50指样品对病毒复制的半数抑制浓度(微克/毫升)；TI指治疗指数，TI＝TD50/IC50。
1.4结论上述试验结果说明，蒲公英提取物酚酸性有效部位对I型单纯疱疹病毒有着强效的抑制作用，从而可以开发成为抑制口腔病毒性疱疹和口腔溃疡的药物。
药理实施例2蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉含片局部用药及蒲公英植物酚酸类效部部位喷干粉灌胃给药对苯酚致大鼠口腔溃疡抑制作用试验2.1模型动物雄性SD大鼠，体重220克左右，购自浙江省中医学院动物中心。乙醚麻醉后，用90％苯酚消毒棉球于直径为4毫米的玻璃管下口平置于大鼠一侧2毫米内的口角颊膜处，置放45秒后，灼烧出直径为4毫米左右的白色斑块。各手术大鼠中造模位置和白色板块直径均一者选用作口腔溃疡模型动物。
2.2待试样品及试剂(1)蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉含片(实施例一产品)，浙江海正天华新药研发有限公司提供；批号060330；规格600毫克/片；(2)蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉，浙江海正天华新药研发有限公司提供；批号051018；(3)阳性对照西瓜霜润喉片；桂林三金药业生产，规格600毫克/片；批号0603033。
2.3实验方法挑选出的造模成功SD大鼠24小时后随机分为六组，每组10只，分为(1)模型组(给只加辅料的含片)，每日给药五次；(2)含片高剂量组(1/3片，重200毫克)，每天给药七次；(3)含片中剂量组(1/3片，重200毫克)，每天给药五次；(4)含片低剂量组(1/3片，重200毫克)，每天给药三次；(5)阳性对照组(西瓜霜润喉片1/3片，重200毫克)，每天给药五次；(6)口服灌胃给药组(100毫克喷干粉/只)，1毫升双蒸水混悬后口服灌胃，每天五次给药。上述含片组及对照组各组给药时药片正好覆盖创面斑块。连续给药五天，给药前观察记录溃疡直径并记录为0天。给药后次日换药时观察记录溃疡直径大小，同时观察局部红肿症状和渗出物多少，溃疡面积大小以配伍t检验进行统计分析。结果见表2。
2.4实验结果结果表明，造模成功SD大鼠24小时后出现白色分泌物，观察期间，对照组SD大鼠白色分泌物明显多于其他组，给药组分泌物第三天开始明显减少，溃疡面积(以直径计)明显缩小，高中剂量给药第五天红肿基本消失。
表2SD大鼠各给药组的溃疡面积比较

注组别为1、模型组；2、含片高剂量组；3、含片中剂量组；4、含片低剂量组；5、阳性对照组；6、灌胃绐药组；溃疡面积

n＝10；*p＜0.05；**p＜0.01。
2.5试验结论以上结果表明，蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉含片对苯酚致SD大鼠口腔溃疡有着抑制作用，其中含片高剂量组(每天七次给药)和中剂量组(每天五次给药)对溃疡创伤面有着显著的促进愈合作用，其作用强度超过西瓜霜润喉片。低剂量和口服灌胃给药虽然也有显著作用，但其作用强度都低于西瓜霜含片，更低于蒲公英植物酚酸类有效部位含片高剂量组和中剂量组，说明蒲公植物酚酸类有效部位口含片在治疗口腔溃疡、促进溃疡愈合方面具有确切的疗效，并且局部给药之药效强于口服给药途径。
药理实施例2蒲公植物酚酸类有效部位喷干粉含片对口腔溃疡患者的临床试验选用10例口腔溃疡患者，溃疡面呈圆形或椭圆型，咽痒干咳、空咽时有痛感。治疗方案给口含片，将含片置于患部，自然含化，每天五次，每次一片。连续给药五天。其中显效(疼痛显著减轻，溃疡直径减小85％以上或愈合)4例；好转(溃疡面积减小50％以上，疼痛程度减轻，治疗后溃疡数目减少)5例；无效(溃疡面积减小＜50％者)l例。
结果说明蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉含片可以显著治愈口腔溃疡，有效率为90％左右。
权利要求
1.蒲公英植物酚酸类有效部位抑制单纯疱疹病毒的功能应用。
2.蒲公英植物酚酸类有效部位在制备预防和治疗口腔溃疡药物中的应用。
3.根据权利要求1和2所述的应用，其特征为含有1％至80％的蒲公英植物酚酸类有效部位喷干粉，其余为矫味利、稀释剂、粘台剂和润滑剂。
4.根据权利要求3所述的应用，矫味剂选自薄荷、薄荷油、薄荷脑、冰片、食用香精、阿斯帕坦、柠檬酸、木糖醇、蔗糖、甜菊素、甘草、糖浆中的一种或几种；稀释剂选自乳糖、糖粉、甘露醇、糊精或麦芽糖糊精、淀粉、沉降碳酸钙、沉降磷酸钙、碳酸镁或白陶土中的一种或几种；粘合剂选自乙醇溶液、明胶、单糖浆、徽晶纤维素或卡波姆中的一种或几种；润滑剂为硬脂酸镁。
5.根据权利要求2，其可以是口含片、喷雾剂、散剂、口腔贴膜，还可以采用现代制药界所公知的控释或缓释剂型或纳米制剂。
6.根据权利要求1和2所述的应用，其中蒲公英植物酚酸类有效部位是指用硅胶、反相硅胶、大孔树脂、离子交换树脂、氧化铝或葡聚糖凝胶(Sephadex)中的一种或几种为介质的柱层析法将蒲公英醇水提取物纯化得到的有效部位，其特征为提取物中酚酸类化合物的含量在20％及以上；木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷含量在0.5％及以上。
7.根据权利要求1和2的应用，其中蒲公英植物酚酸类有效部位的特征为该提取物中除含有咖啡酸、阿魏酸和绿原酸外，还含有三个结构相以的双咖啡酰奎尼酸类酚酸化合物活性物质，它们是3，5-O-双咖啡酰基奎尼酸；3，4-O-双咖啡酰基奎尼酸；4，5-O-双咖啡酰基奎尼酸，三个化合物总量在提取物中的含量大于3％。
8.根据权利要求1或2所述之蒲公英植物酚酸类有效部位的制备途径，蒲公英植物来源于一种或几种中国产的蒲公英属植物任一部位，即可以是蒲公英(又称蒙古蒲公英)(Taraxacum mongolicum Hand-Mazz)、碱地蒲公英(又称华蒲公英)(Taraxacum sinicumKitag)、热河蒲公英(又称白缘蒲公英)(TaraxacumplatypecidumDiels)、东北蒲公英(Taraxacum ohwianumKitag)、反苞蒲公英(Taraxacum grypodon Dahlst)、兴安蒲公英(Taraxacum falcilobumKitag)这些中国药品市场上常见的蒲公英药材；也可以来源于主产欧美的药用蒲公英(Taxacum officinale)；可以是干品或鲜品；可以是蒲公英药材植物的根、茎、叶、花、种子、皮、果实，也可以是它们的混合物及全草部分。
全文摘要
本发明涉及一种预防和治疗单纯疱疹病毒感染的蒲公英植物酚酸类有效部位及其在制备防治口腔溃疡药物中的应用。本发明中的蒲公英植物酚酸类有效部位由蒲公英植物鲜品或干品经醇水提取、柱层析、醇溶剂洗脱精制而成，提取物中酚酸类化合物为有效成分含量在20％以上。本发明中制得的以蒲公英植物酚酸类有效部位为主药的口含片、散剂、喷雾剂、颗粒剂和口服液在预防以及治疗口腔溃疡方面有显著效果。
文档编号A61K9/14GK101023972SQ20071006777
公开日2007年8月29日 申请日期2007年3月26日 优先权日2007年3月26日
发明者李峰, 瞿佳, 李校堃, 白骅, 于荣敏, 卢付生, 巫秀美, 赵昱 申请人:赵昱