专利名称：一种富含天麻素、有机硒的灰树花口服液及其制备方法
技术领域：
本发明涉及食用菌的加工，具体而言涉及含中药功能性成分、真菌多糖 成分的口服液的制备方法。
背景技术：
灰树花(^r/尸o/a /><9/ 0^^3 )又名贝叶多孑L菌(/7。///w〃51 /"ro/70^犯i1)， 灰树花是一种营养价值丰富且具有较强抗肿瘤活性的真菌，其深层发酵后的 灰树花多糖是发挥抗肿瘤作用的主要成分。近年来，尤其是2000年以来， 灰树花在防治肿瘤上的应用受到了人们的关注，涉及灰树花的专利申请多达 50多件，其中大多数是2000年以后的申请件。在这些申请件中，利用药用 真菌灰树花深层发酵生产灰树花口服液的有2件，即ZL200410083062. X号 "一种灰树花口服液及其生产方法"和200510062057.5号"一种微米灰树 三花灵芝孢抗肿瘤突变口服液制备方法"。
近年来人们研究表明，天麻对学生增智、健脑，保持良好的学习状态、 脑力劳动者保持清醒的头脑和充沛的精力、老年人延緩衰老等有良好作用； 在体内硒和维生素E协同，能够保护细胞膜，防止不饱和脂肪酸的氧化；微 量硒具有防癌作用及保护肝脏的作用。
可见如果将灰树花与天麻素、微量元素硒复合，就会得到具有更强的抗 肿瘤作用的产品。然而，迄今为止，尚无将灰树花与天麻素、微量元素竭复 合制成的口服液问世。
发明内容
本发明的目的在于提供一种富含天麻素、有机竭的灰树花口服液，具有 更强的抗肺瘤作用，为人类的健康服务。
本发明的另一目的在于提供富含天麻素、有机硒的灰树花口服液的制备 方法，使其能够实现规模化生产、供应市场需要。
发明人提供的富含天麻素、有机硒的灰树花口服液，是将新鲜天麻及苦 蒜经过预处理、干燥、粉碎，以粉状形式参与灰树花深层发酵，所制备得到 富含天麻素量、粗多糖和有机硒的口服液。
发明人指出新鲜天麻含有的天麻素(^^"(^//"e)是一种葡萄糖香， 分子式(:13111807,为中药天麻的有效成分；苦蒜是生长在贵州的一种野菜，苦 蒜中有机硒含量为0. 21 x 10-6 ( 0. 21ppm)是一种有机竭含量相对多的物质。
本发明的富含天麻素、有机硒的灰树花口服液的制备方法包括
(1) 灰树花斜面菌种培养从斜面母种中接出黄豆大小的菌丝块，置于 PDA斜面培养基中央，培养7-IO天；
(2) 液体种子培养将培养好的灰树花斜面菌种接入装有种子培养基的 摇瓶中；在500mL的三角瓶中装液150ml,培养7天；
(3) 天麻、苦蒜原料处理采用粉碎机将干天麻、苦蒜粉碎，备用；
(4) 发酵将培养好的一级液体种子接入15L发酵罐中罐装液9L,在搅 拌下培养3天；
(5) 产品后处理放罐后，发酵液用乳化机乳化，装于容器内，密封， 灭菌，冷却，即制得本发明的口服液。
上述方法的第一步中，培养温度为25。C。
上述方法的第二步中， 一支斜面接种一瓶；培养基组成为葡萄糖20 g/L，玉米粉20 g/L,麸皮粉IO g/L, K2HP04 1.5 g/L， KH2P04 1 g/L， MgSO, 1 g/L;培养的工艺条件为初始pH6. 5~7. 0，接种量为8%~12%，摇瓶转
速为130 - 160 r/min，培养温度25。C。
上述方法的第三步中，干天麻、苦蒜粉碎后的粒度为过60目筛。
上述方法的第四步中，发酵罐培养基组成为葡萄糖20 g/L，玉米粉 20 g/L，薏米粉10 g/L,天麻粉10 g/L，苦蒜粉7.5 g/L， K2HP04 0.60 -0.80 g/L， KH2P04 0.65 - 0.85 g/L， MgS04 0.60 — 0.85 g/L;培养的工艺条 件为初始pH 6.5-7.0,接种量为10%;搅拌机转速130 ~ 160r/min，罐压 为O. 05MPa，空气流速9L/min (标准状态)，空气压力为O. 2Mpa;培养温度 为25°C。
上述方法的第五步中，灭菌温度121。C，灭菌时间20min。
本发明方法所制备得到的口服液中，天麻素含量为2. 2~2. 8mg/100mL， 粗多糖含量4. 0 ~ 4. 8mg/L,有机硒含量为0. 11 x i(T6 ~ 0. 21 x 10 —6。
发明人在制备研究中发现添加天麻及苦蒜后，灰树花发酵的多糖产量 随发酵时间可绘出一条曲线，从曲线可看出，发酵第四天时，灰树花多糖产 量最高，以后逐天递减；培养基中添加天麻及苦蒜后，可使灰树花多糖产量 提高至3. 2g/L，且最适宜的添加比例为4: 3。
与现有技术相比，本发明的富含天麻素、有机硒的灰树花口服液能够发 挥更强的抗肿瘤作用，增强人体免疫力，在抑制、杀灭癌细胞的同时不伤及 人体正常细胞，为人类的健康服务；本发明方法可以将天麻、苦蒜与灰树花 共同发酵，制备富含天麻素量、粗多糖和有机硒的口服液，使其能够实现规 模化生产、供应市场需要。
具体实施例方式
实施例
灰树花(菌种编号50404 )菌种购自中国微生物菌种保藏管理委员会 普通微生物中心中科院微生物研究所。发酵工艺为(l)斜面菌种培养用PDA培养基在试管内培养斜面菌种， 温度25°C，时间8天，pH6. 5 ~ 7. 0; (2)摇瓶种子培养液体种子培养基为 葡萄糖20g/L,玉米粉20g/L，麸皮粉10g/L， K風1.5g/L, KH2P04lg/L， MgS04lg/L;培养条件将已活化的斜面菌种切割成黄豆大小的菌块，接种 2-3块于液体种子培养基中，于500ml三角瓶装液量150ml,旋转式摇床培 养，转速150r/min，培养温度25。C， pH6. 5-7. 0，培养时间7天；(3)天 麻、苦蒜原料处理采用粉碎机将干天麻、苦蒜粉碎，过60目筛；(4)15L 发酵罐发酵培养基成分葡萄糖20 g/L，玉米粉20 g/L,薏米粉10 g/L, 天麻粉IO g/L,苦蒜粉7. 5 g/L, K2HP04 0.75 g/L， KH2P04 0.75 g/L, MgS04 0.75g/L;培养条件将培养好的种子培养基按体积分数10 %的接种量接入 装有9L发酵培养基的全自动15L发酵罐中，搅拌转速150r/min,发酵温度 25°C，通气量39 L/min(标准状态)，气压0. 2MPa,罐压0. 05MPa，发酵过 程溶解氧(OD)值由溶氧电极在线检测，发酵时间至120h时，溶解氧下降至 35 % ~ 40 % ，即可终止发酵。
灰树花口服液的制备即上述发酵产物的后处理放罐后，发酵液用乳化 机乳化，装于容器内，密封，在12rC下进行灭菌20min，冷却，即制得本 发明的口服液。
权利要求
1一种富含天麻素、有机硒的灰树花口服液，其特征在于该口服液是将新鲜天麻及苦蒜经过预处理、干燥、粉碎，以粉状形式参与灰树花深层发酵，所制备得到富含天麻素量、粗多糖和有机硒的口服液。
2 按照权利要求1所述的灰树花口服液的制备方法，其特征包括(1) 灰树花斜面菌种培养从斜面母种中接出黄豆大小的菌丝块，置于 PDA斜面培养基中央，培养7-10天；(2) 液体种子培养将培养好的灰树花斜面菌种接入装有种子培养基的 摇瓶中；在500mL的三角瓶中装液150ml,培养7天；(3) 天麻、苦蒜原料处理采用粉碎机将干燥后的天麻、苦蒜粉碎，备用；(4) 发酵将培养好的一级液体种子接入15L发酵罐中罐装液9L，在搅 拌下培养3天；(5) 产品后处理放罐后，发酵液用乳化机乳化，装于容器内，密封， 灭菌，冷却，即制得本发明的口服液。3按照权利要求2所述的灰树花口服液的制备方法，其特征在于所述 方法的第一步中，培养温度为25。C。4按照权利要求2所述的灰树花口服液的制备方法，其特征在于所述方法的第二步中， 一支斜面接种一瓶；培养基组成为葡萄糖20g/L,玉米 粉20 g/L,麸皮粉10 g/L， K2HP04 1.5 g/L， KH2P04 1 g/L, MgS04 1 g/L; 培养的工艺条件为初始pH 6. 5~7. O，接种量为8% ~ 12%,摇弁瓦转速为130 ~ 160r/min,培养温度25。C。。5按照权利要求2所述的灰树花口服液的制备方法，其特征在于所述方法的第三步中，干天麻、苦蒜粉碎后的粒度为过60目筛。6按照权利要求2所述的灰树花口服液的制备方法，其特征在于所述 方法的第四步中，发酵罐培养基组成为葡萄糖20 g/L，玉米粉20 g/L， 薏米粉IO g/L，天麻粉IO g/L,苦蒜粉7. 5 g/L， K2HP04 0.60 - 0.80 g/L, KH2P04 0.65 - 0.85 g/L, MgS04 0.60-0- 85 g/L;培养的工艺条件为初始pH 6.5-7.0，接种量为10%;搅拌机转速130 - 60r/min，罐压为0. 05MPa,标准 状态下空气流速9L/min，空气压力为O. 2MPa;培养温度为25°C。7按照权利要求2所述的灰树花口服液的制备方法，其特征在于所述 方法的第五步中，灭菌温度12rC,灭菌时间20min。
全文摘要
本发明公开了一种富含天麻素、有机硒的灰树花口服液及其制备方法，该口服液是将新鲜天麻及苦蒜经过预处理、干燥、粉碎，以粉状形式参与灰树花深层发酵，制得富含天麻素量、粗多糖和有机硒的口服液。制备方法包括(1)灰树花斜面菌种培养；(2)液体种子培养；(3)天麻、苦蒜原料处理；(4)发酵；(5)产品后处理。本发明的口服液中，天麻素含量2.2～2.8mg/100mL，粗多糖含量4.0～4.8mg/L，有机硒含量0.11×10<sup>-6</sup>～0.21×10<sup>-6</sup>，与现有技术相比，本发明的口服液能发挥更强的抗肿瘤作用，增强人体免疫力，抑制、杀灭癌细胞，同时不伤及人体正常细胞，为人类健康服务；本发明方法可以将天麻、苦蒜与灰树花共同发酵，制备富含天麻素量、粗多糖和有机硒的口服液，使其能规模化生产。
文档编号A61K36/06GK101194917SQ20071007801
公开日2008年6月11日 申请日期2007年11月21日 优先权日2007年11月21日
发明者吴天祥 申请人:贵州大学