氟取代的环烷酸吲哚,含这种化合物的组合物和治疗方法

专利名称：氟取代的环烷酸吲哚,含这种化合物的组合物和治疗方法
本申请是申请日为2003年1月22日，申请号为03802675.9中国专利申请的分案申请。
背景技术：
本发明涉及用于治疗前列腺素传递的疾病的化合物和方法，和它们的某些药物组合物。更具体而言，本发明的化合物与类固醇、抗组胺剂或肾上腺素激动剂结构不同，是D型前列腺素的鼻与肺充血效应的拮抗剂。
有两篇评论文章描述了前列腺素类受体的特征和治疗关联性以及最常使用的选择性激动剂和拮抗剂类花生酸From Biotechnologyto Therapeutic Applications，Folco，Samuelsson，Maclouf，和Velo编著，Plenum Press，NewYork，1996，14章，137-154页，以及Journal of Lipid Mediators and Cell Signalling，1996，14，83-87。T.Tsuri等人在刊登于1997年的Journal of MedicinalChemistry，第40卷，3504-3507页上的一篇文章中指出，″PGD2被认为是各种变态反应性疾病如过敏性鼻炎、变应性哮喘、变应性结膜炎和特异性皮炎的重要介质″。近来，Matsuoka等人在Science(2000)，287，2013-7的文章中把PGD2描述为变应性哮喘中的关键介质。另外，诸如US4,808,608的专利中提到，前列腺素拮抗药可用于治疗变态反应性疾病，并且明确提到是变应性哮喘。在例如欧洲专利申请837,052和PCT申请WO98/25919，以及WO99/62555中也描述了PGD2拮抗剂。
US4,808,608公开了作为前列腺素拮抗剂的四氢咔唑-1-链烷酸衍生物。
PCT申请WO0179169公开了下式的PGD2拮抗剂
欧洲专利申请468,785公开了化合物4-[(4-氯苯基)甲基]-1，2，3，4-四氢-7-(2-喹啉基甲氧基)-环戊[b]吲哚-3-乙酸，它是一类被称为白细胞三烯生物合成抑制剂的化合物。
US3,535,326公开了下式的消炎化合物 发明概述本发明提供作为前列腺素受体拮抗剂的新型化合物；更具体地讲，它们是前列腺素D2受体(DP受体)拮抗剂。本发明的化合物可用于治疗各种前列腺素传递的疾病和病症；因此，本发明提供一种使用本发明所述新型化合物以及含有它们的药物组合物治疗前列腺素传递的疾病的方法。
发明详述本发明涉及式I的化合物 和其药学上可接受的盐，其中n是0或1；m是1、2或3；R1是H、C1-C3烷基、卤化的C1-C3烷基或者环丙基；R2是4-氯苯基或2，4，6-三氯苯基。
在式I的一个实施方案中，化合物是其中n为0的化合物。
在式I的另一个实施方案中，化合物是其中n为1的化合物。
在式I的另一个实施方案中，化合物是其中m为1的化合物。
在式I的另一个实施方案中，化合物是其中m为2的化合物。
在式I的另一个实施方案中，化合物是其中R1为H的化合物。
在式I的另一个实施方案中，化合物是其中R1为CH3的化合物。
在式I的另一个实施方案中，化合物是其中R2为4-氯苯基的化合物。
在式I的另一个实施方案中，化合物是其中R2为2，4，6-三氯苯基的化合物。
在式I的另一个实施方案中，化合物具有如下所示的立体构型(即手性中心具有R构型) 在本发明的另一方面，提供包括式I化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。
在一个实施方案中，所述药物组合物还包括选自抗组胺剂、白细胞三烯拮抗剂、白细胞三烯生物合成抑制剂、前列腺素受体拮抗体或者生物合成抑制剂、皮质甾类、细胞活素调节剂、抗IgE、抗胆碱能药物或者NSAIDS的第二活性成分。
在本发明的另一方面，提供一种治疗或者预防前列腺素D2传递的疾病的方法，其包括给予需要治疗的患者治疗有效量的式I化合物。
在本发明的一个实施方案中，提供的是治疗或者防止前列腺素D2传递的疾病的方法，其包括给予需要这种治疗的哺乳动物患者式I的化合物，式I化合物的量可有效治疗或者防止前列腺素D2传递的疾病，其中所述前列腺素传递的疾病是鼻充血、鼻炎，包括季节性变态反应性鼻炎和常年过敏性鼻炎、以及哮喘，包括变应性哮喘。
在本发明的另一实施方案中，提供的是在需要鼻充血治疗的患者中治疗鼻充血的方法，其包括给予所述患者治疗有效量的式I化合物。
在本发明的又一个实施方案中，提供的是在需要哮喘治疗的患者中治疗哮喘，包括变应性哮喘的方法，其包括给予所述患者治疗有效量的式I化合物。
在本发明的又一个实施方案中，提供的是在需要治疗过敏性鼻炎的患者中治疗过敏性鼻炎(季节的和常年的)的方法，其包括给予所述患者治疗有效量的式I化合物。
当m是1时，核心三环环系的编号如下所示 当m是2时，核心三环环系的编号如下所示 光学异构体-非对映体-互变异构体式I的化合物包含一个或多个不对称中心，因此可能以外消旋体和外消旋混合物、单一对映异构体、非对映混合物和单一非对映体的形式存在。本发明意味着包括式I化合物的所有这些异构形式。
本发明中描述的一些化合物可能存在不同的氢联结点，被称为互变异构体。这种实例可以是酮和其烯醇式，通称酮-烯醇互变异构体。式I的化合物包括单一的互变异构体以及其混合物。
式I的化合物可以通过，例如用适当的溶剂，例如甲醇或者乙酸乙酯或者其混合物进行分级结晶而分离成对映异构体的非对映异构体对。这样得到的对映异构体对可以通过传统方法，例如通过利用光学活性酸或者碱作为拆分试剂，或者通过手性分离方法，比如使用手性柱的HPLC分离而分离成单一的立体异构体。
或者，通式I或者Ia化合物的任何对映异构体可以通过使用构型已知的旋光纯的原料或者反应物进行立体有择合成来获得。
盐术语″药学上可接受的盐″是指从药学上可接受的无毒碱，包括无机碱和有机碱制备的盐。由无机碱获得的盐包括铝、铵、钙、铜、铁、亚铁、锂、镁、三价锰、二价锰、钾、钠、锌等盐。特别优选的是铵、钙、镁、钾、和钠盐。由药学上可接受的有机无毒碱获得的盐包括以下物种的盐伯、仲和叔胺，取代的胺，包括天然存在的取代的胺，环胺，和阳离子交换树脂，比如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N′-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、葡萄糖胺、组氨酸、hydrabamine、异丙胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、多胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、缓血酸胺、等。
当本发明的化合物呈碱性时，盐可以由药学上可接受的无毒酸，包括无机和有机酸制备。这种酸包括乙酸、苯磺酸、安息香酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙烷磺酸、反丁烯二酸、葡糖酸、谷氨酸、氢溴酸、盐酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲烷磺酸、粘酸、硝酸、双羟萘酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、对甲苯磺酸、等。特别优选的是柠檬酸、氢溴酸、盐酸、马来酸、磷酸、硫酸、和酒石酸。
很清楚，除非另作说明，提到式I化合物就意味着还包括其药学上可接受的盐。
应用式I的化合物是前列腺素D2的拮抗剂。式I化合物与前列腺素D2受体的相互作用能力使得它们可用于预防或者逆转哺乳动物，特别是人类患者中由前列腺素所引起的不希望有的症状。对前列腺素D2的拮抗作用表明，所述化合物和其药物组合物可用于治疗、预防、或者使哺乳动物，特别是人的如下病症减轻呼吸性状况、过敏状况、疼痛、炎症性状况、粘液分泌病症、骨骼病症、失眠、育龄妇女生育病症、凝血障碍、视力故障以及免疫和自身免疫疾病。另外，这种化合物还可以抑制细胞致瘤性转化和后肿瘤生长，由此可用于治疗癌症。式I的化合物还可以用于治疗和/或预防前列腺素D2传递的增殖病症，比如可以用于糖尿病性视网膜病和肿瘤血管生成的治疗和/或预防。式I的化合物还可以通过对抗有收缩性的前列腺素类激素或者模拟松驰前列腺素类激素而抑制前列腺素类激素引起的平滑肌收缩，由此可以用于治疗痛经、早产和与嗜曙红细胞有关的病症。
因此，本发明的另一方面提供一种治疗或者预防前列腺素D2传递的疾病的方法，包括给予需要这种治疗的哺乳动物患者其量可有效用于治疗或者预防所述前列腺素D2传递的疾病的式I化合物。前列腺素D2传递的疾病包括，但是不局限于，过敏性鼻炎，鼻充血，鼻溢，常年性鼻炎，鼻发炎，哮喘包括变应性哮喘，慢性梗阻性肺病及其他形式的肺炎；肺部血压过低；失眠和醒睡周期病症；与痛经和早产有关的前列腺素类激素引起的平滑肌收缩；与嗜曙红细胞有关的病症；血栓症；青光眼和视觉障碍；闭塞性血管疾病，例如动脉粥样硬化；充血性心力衰竭；需要抗凝血治疗的疾病或者状况，比如损伤后或者手术后治疗；类风湿性关节炎及其他炎症性疾病；坏疽；肢端动脉痉挛症；粘液分泌病症包括细胞肛；疼痛和偏头痛；需要控制骨形成和再吸收的疾病例如骨质疏松症；休克；热调节，包括发烧；器官移植和旁通手术排斥反应，以及其中希望有免疫调节的免疫病症或者状况。更具体地讲，待治疗的疾病是一种由前列腺素D2传递的疾病，比如鼻充血、过敏性鼻炎、肺充血、和哮喘，包括变应性哮喘。
剂量范围式I化合物的预防或者治疗剂量的数值当然将随即待治疗的状况的性质和严重程度、具体的式I化合物及其给药途径而变化。它也将根据各种因素，包括患者的年龄、体重、一般的健康状况、性别、饮食、给药时间、排泌速度、药物组合和个别患者的反应而变化。一般说来，日剂量是每公斤哺乳动物体重约0.001毫克-约100毫克，优选每千克体重0.01毫克-约10毫克。相反，有时候可能需要使用在这一范围之外的剂量。
可以与载体结合以产生单一剂型的活性成分的量将根据治疗的主体和特定的给药模式来变化。例如，设计用于人体口服的制剂可以包含0.05毫克-5克活性剂化合物与适当的和合理而可行的载体量，这种载体量可以为总组合物的约5％-约99.95％。单元剂量形式通常将包含约0.1毫克-约0.4克活性成分，通常是0.5毫克、1毫克、2毫克、5毫克、10毫克、25毫克、50毫克、100毫克、200毫克、或者400毫克。
药物组合物本发明的另一方面，提供包含式I化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。术语″组合物″，如药物组合物中的″组合物″用来包括含有活性成分、组成载体的非活性组份(药学上可接受的赋形剂)的产品，以及直接或者间接地由任意两种或多种成分组合、络合或者聚集，或者由一种或多种成分分解，或者由一种或多种成分的其他类型反应或者相互作用形成的任意的产品。因此，本发明的药物组合物包括通过混合式I的化合物、另外的活性成分、和药学上可接受的赋形剂而制备的任何组合物。
为了治疗任何前列腺素类激素传递的疾病，式(I)的化合物可以以含有通用的无毒的药学上可接受的载体、助剂和赋形剂的剂量单元形式经口给药、通过吸入喷雾给药、局部给药、不经肠道给药、或者直肠给药。这里使用的术语″不经肠″包括皮下注射、静脉注射、肌肉注射、膜注射或者输液方法。除了治疗恒温动物，比如小鼠、大鼠、马、牛、羊、狗、猫等之外、本发明的化合物可有效地用于治疗人。
含活性成分的药物组合物可以呈适合于口服使用的形式，例如片剂、锭剂、糖淀、水溶液或者油性悬浮液、可分散性粉剂或者颗粒、乳液、硬或软胶囊、或者糖浆或酏剂形式。设计用于口服的组合物可以根据本领域公知的用于制造药物组合物的任何方法制备，并且为了提供药学上精美的和适口的制剂，这种组合物可以包含一种或多种选自甜味剂、增香剂、着色剂和防腐剂的药剂。片剂中包含的活性成分与适合于制造片剂的无毒的药学上可接受的赋形剂形成混合物的形式。这些赋形剂可以是例如，惰性稀释剂，比如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；造粒和崩解剂，例如玉米淀粉或者藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶或者阿拉伯胶，以及脱模剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或者滑石。片剂可以是未涂覆的或者它们可以通过已知的方法进行涂敷以延迟崩解和胃肠道吸收并由此提供较长时间的持续作用。例如，可以使用延时物质，比如单硬脂酸甘油酯或者甘油基二硬脂酸酯。它们也可以通过US4,256,108；4,166,452；和4,265,874中描述的方法进行涂敷以形成用于控制释放的渗透性治疗片剂。
用于口服使用的制剂也可以以硬胶囊的形式存在，其中活性成分与惰性固体稀释剂，例如碳酸钙、磷酸钙或者高岭土混合在一起；或者以软胶囊的形式存在，其中活性成分与可与水混溶的溶剂比如丙二醇、PEG和乙醇，或者油介质例如花生油、液体石蜡或橄榄油混合在一起。
水悬剂包含的活性物质与适合于制造水悬剂的赋形剂混合。这种赋形剂是助悬剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍树胶和阿拉伯胶；分散或者润湿剂可以是天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或者是环氧烷与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或者是环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，例如十七乙烯基氧鲸蜡醇，或者是环氧乙烷与来自于脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物，比如聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯，或者是环氧乙烷与来自于脂肪酸和己糖醇酸酐的偏酯的缩合产物，比如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。水悬剂也可以包含一种或多种防腐剂，例如乙基或正丙基的对-羟基苯酸酯，一种或多种着色剂，一种或多种增香剂，以及一种或多种甜味剂，比如蔗糖、糖精或者芦笋。
油悬剂可以通过将活性成分悬浮在植物油，例如花生油、橄榄油、芝麻油或者椰子油中，或者悬浮在矿物油，比如液体石蜡中来配制。所述油悬剂可以包含增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或者鲸蜡醇。可以加入诸如以上列出的甜味剂和增香剂以提供适口的口服制剂。这些组合物在保藏时可以加入抗氧化剂，比如抗坏血酸。
适合于通过加入水来制备水悬剂的可分散性粉剂和颗粒提供活性成分，其与分散或润湿剂、助悬剂以及一种或多种防腐剂形成混合物的形式。适当的分散或者润湿剂和助悬剂的例子在上面已经提到过。还可以存在另外的赋形剂，例如增甜、增香和着色剂。
本发明的药物组合物还可以呈一种水包油型乳状液的形式。油相可以是植物油，例如橄榄油或者花生油，或者是矿物油，例如液体石蜡或者这些油的混合物。适当的乳化剂可以是天然存在的磷脂，例如黄豆、卵磷脂，和来自于脂肪酸与己糖醇酸酐的酯或者偏酯，例如去水山梨糖醇单油酸酯以及所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯去水山梨糖醇单油酸酯。所述乳液也可以包含增甜和增香剂。
糖浆和酏剂可以用甜味剂，例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖配制。这种制剂也可以包含缓和剂、防腐剂、增香剂和着色剂。药物组合物可以呈无菌可注射的水溶液或者油质悬浮液的形式。该悬浮液可以根据已知的方法使用上述适当的分散或润湿剂和助悬剂来配制。无菌可注射的制剂也可以为无菌的可注射溶液或者悬浮液形式，它们处于无毒的不经肠道可接受的稀释剂或者溶剂中，例如为1，3-丁烷二醇的溶液。在可接受的赋形剂和溶剂当中，可以使用的是水、生理盐水和等渗氯化钠溶液。也可以使用共溶剂，比如乙醇、丙二醇或者聚乙二醇。另外，无菌的硬化油通常用作溶剂或者悬浮介质。为了这一目的，可以使用任何温和的硬化油，包括人造甘油单酯或者二酯。另外，脂肪酸，比如油酸也可用于注射制剂中。
式I的化合物也可以以用于药物直肠给药的栓剂形式给药。这些组合物可以通过将药物与适当的无刺激性的赋形剂混合来制备，所述赋形剂在环境温度下是固体，但是在直肠温度下则变成液体，因此将会在直肠中融化以释放所述药物。这种物质是可可脂和聚乙二醇。
为了局部使用，要使用包含有式I化合物的膏、软膏、凝胶剂、溶液或者悬浮液等。(对于本申请来说，局部施用应该包括口腔洗涤和漱口)。局部制剂通常可以由药物载体、共溶剂、乳化剂、渗透增强剂、防腐剂系统、和润肤剂组成。
与其他药物的组合为了治疗和预防前列腺素传递的疾病，式I的化合物可以与其他的治疗剂一起共同给药。因此，在本发明的另一方面，提供用于治疗前列腺素D2传递的疾病的药物组合物，其包括治疗有效量的式I化合物和一种或多种其他的治疗剂。
用于与式I的化合物进行联合治疗的适当的治疗剂包括(1)前列腺素受体拮抗体；(2)皮质甾类，比如氟羟脱氢皮醇丙酮化合物；(3)β-激动剂，比如沙美特罗、营养药、叔丁喘宁、二羟苯基异丙氨基乙醇、舒喘宁等；(4)白细胞三烯改性剂如白细胞三烯拮抗剂，或者脂氧酶抑制剂如montelukast、zafirlukast、普仑司特、或者齐留通；(5)抗组胺剂(组胺H1拮抗剂)，比如溴苯拉敏，扑尔敏，右氯苯拉敏，吡咯烷甲苯基丙烯，克立马丁，可他敏，双苯拉林，吡下明，羟嗪，甲吡咯烷基甲吩噻嗪，普鲁米近，三甲泼拉嗪，阿扎他定，盐酸二苯环庚啶，安塔唑啉，抗感明，吡拉明，阿司咪唑，norastemizole，特非那定，氯雷他定，西替利嗪，levocetirizine，fexofenadine，desloratadine，等；(6)解充血药，包括苯肾上腺素，苯丙醇胺，伪麻黄碱，羟甲唑啉，ephinephrine，萘唑啉，丁下唑啉，六氢脱氧麻黄碱，或者左旋脱氧麻黄碱；
(7)抗咳嗽药，包括甲基吗啡，氢可酮，咳美芬，维静宁，或者dextramethorphan；(8)另一种前列腺素配体，包括前列腺素F激动剂比如拉坦前列素；迷索前列醇，恩前列素，利奥前列素，omoprostol或者罗沙前列醇；(9)利尿剂；(10)非甾族消炎剂(SADDS)，比如丙酸衍生物(阿明洛芬，苯恶洛芬，布氯酸，卡洛芬，联苯丁酮酸，非诺洛芬，氯洛芬，氟比洛芬，布洛芬，吲哚洛芬，酮洛芬，咪洛芬，萘普森，奥沙普秦，piyrofen，普拉洛芬，舒洛芬，噻咯酚酸，和硫恶咯酚)，乙酸衍生物(消炎痛，阿西美辛，阿氯芬酸，环氯茚酸，环氯拉嗪，芬氯酸，氯苯噻唑乙酸，芬替酸，呋罗芬酸，异丁苯乙酸，伊索克酸，oxpinac，舒林酸，硫平酸，甲苯酰吡啶乙酸，齐多美辛，和佐美酸)，灭酸衍生物(氟灭酸，甲氯灭酸，甲灭酸，尼氯灭酸和托灭酸)，联苯羧酸衍生物(二氟苯水杨酸和氟苯沙酸)，oxicams(异恶噻酰胺，吡罗昔康，舒多昔康和替诺昔康)，水杨酸盐(乙酰水杨酸，柳氮磺胺吡啶)和吡唑啉酮(炎爽痛，bezpiperylon，非泼拉酮，布他酮，羟保泰松，苯基保泰松)；(11)环加氧酶-2(COX-2)抑制剂，比如celecoxib和rofecoxib，etoricoxib和valdecoxib；(12)IV型磷酸二酯酶(PDE-IV)抑制剂， 例如Ariflo，roflumilast；(13)趋化因子受体拮抗剂，特别是CCR-1、CCR-2、和CCR-3拮抗剂；(14)胆甾醇降低剂，比如HMG-CoA还原酶抑制剂(洛弗斯特丁，辛伐他汀和普拉弗斯特丁，氟代他汀，atorvastatin，及其他抑制素)，多价螯合剂(消胆胺和降脂树脂II号)，烟酸、非诺贝酸衍生物(二甲苯氧庚酸，安妥明，非诺贝特和benzafibrate)，和丙丁酚；(15)抗糖尿病药，比如胰岛素，磺酰脲，双胍(二甲双胍)，α-葡糖苷酶抑制剂(阿卡波糖)和glitazones(曲格列酮，吡格列酮，恩格列酮，rosiglitazone等)；(16)干扰素β制剂(干扰素β-1a，干扰素β-1b)；(17)抗胆碱能药，比如muscarinic拮抗剂(药薯溴化物和噻托溴化物)，以及选择性的muscarinic M3拮抗剂；(18)甾体，比如倍氯米松，甲基强的松龙，倍他米松，强的松，地塞米松，和氢化可的松；(19)通常用于治疗偏头痛的triptans，比如sumitriptan和rizatriptan；(20)alendronate及其他骨质疏松症治疗剂；(21)其他化合物，比如5-氨基水杨酸和其潜药，抗代谢物如咪唑硫嘌呤和6-巯基嘌呤，细胞毒素癌症化疗剂，舒缓激肽(BK2或者BK1)拮抗剂，TP受体拮抗体如塞曲司特，神经激肽拮抗剂(NK1/NK2)，VLA-4拮抗剂如US5,510,332、WO97/03094、WO97/02289、WO96/40781、WO96/22966、WO96/20216、WO96/01644、WO96/06108、WO9515973和WO96/31206中描述的那些。
另外，本发明包括治疗前列腺素D2传递的疾病的方法，其包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的式I化合物、同时给以刚刚列出的上述一种或多种成分。活性成分的量可以是每一活性成分在单独给药时的通常用量，或者在有些情况下，对于一种或多种活性成分来说，活性成分的组合可以使其剂量降低。
使用的缩写Ac乙酰基AcOH 乙酸DDQ 2，3-二氯-5，6-二氰--1，4-苯醌DMF 二甲基甲酰胺eq. 当量Et乙基EtOAc 乙酸乙酯EtOH 乙醇HPLC 高压液相色谱IPA 异丙醇IPAc 醋酸异丙酯Me甲基MeOH 甲醇MHz 兆赫
MTBE 甲基叔丁基醚NMP N-甲基-2-吡咯烷酮NMR 核磁共振THF 四氢呋喃TLC 薄层层析合成方法本发明的式I化合物可以根据流程

图1-5列出的合成路线和按照这里描述的方法制备。
式IV的中间体可以通过流程图1中所列的方法由适当取代的苯基肼II制备。II与适当的环烷酮III在Fisher Indole或者相似的条件下反应(其中R是酯基如烷基)形成IV。
流程图1 式IV的化合物可以选择性地通过流程图2中所列的方法由适当取代的苯胺V制备。V与适当的环烷酮缩合随后在Heck或者类似的金属催化条件下环化形成吲哚IV。
流程图2 式III的化合物可以通过流程图3中所列的方法由适当取代的甲硅烷基烯醇醚VI或者适当取代的烯胺VII制备。在碱如烷基锂，或者路易斯酸如三氟醋酸银的存在下，适当的亲电试剂如Y-CH2CO2R(其中Y表示卤素或者离去基团)与甲硅烷基烯醇醚VI加成得到环烷酮III。式III的化合物可以选择性地通过在Stork Enamine或者相似的条件下将Y-CH2CO2R加成到适当取代的烯胺VII上制得。
流程图3 式VIII的中间体可以通过流程图4中所列的方法由适当取代的吲哚IV制备。IV的溴化可以由溴或者溴化剂如苯基偶氮二氨基吡啶三溴化物在碱性条件下在极性溶剂中实现，例如，通过在吡啶中进行反应或者通过在吡啶的存在下在诸如二氯甲烷的溶剂中进行反应而实现，随后在酸和还原金属条件下单还原二溴中间体生成溴代吲哚VIII。
流程图4 式I的化合物可以通过流程图5中所列的方法由适当取代的溴代吲哚VIII制备。用适当的亲电试剂比如(R1)(R2)CH-Y在碱存在下在适当的溶剂比如DMF中对VIII进行烷基化，得到N-烷基化的吲哚IX。在Cu(I)盐的存在下，用甲烷亚磺酸盐如甲烷亚磺酸钠对IX进行偶合生成式I的化合物，之后进行酯的水解。溴代吲哚酸(IX，R＝H)可以选择性地首先与适当的金属化试剂如正丁基锂反应，随后用亲电试剂如甲基二硫化物捕获，得到相应的甲硫醚，其在用例如过氧化氢/钨酸钠氧化时得到化合物IA。先进行溴代吲哚VIII的烷基化随后再进行磺酰化的步骤也可以反过来进行。这样，溴代吲哚磺酰化形成化合物X，然后使用前述相似的条件或者使用Mitsunobu反应条件对该化合物X进行烷基化，得到式IA化合物，随后进行酯的水解。
流程图5 化合物IB可以由保护的IA，例如IA的酯，通过用适当的氧化剂氧化随后水解来制备，如流程图6中所示。
流程图6 或者，IB也可以如流程图7中所示，通过用适当的氧化剂，如DDQ氧化IX，随后如流程图5中所述进行甲基磺酰化，之后水解来制备。
流程图7 生物活性测定试验使用以下试验可以测定式I化合物的体外和体内前列腺素类激素拮抗剂或者激动剂活性以及它们的选择性。举例说明的前列腺素受体活性是DP、EP1、EP2、EP3、EP4、FP、IP和TP。
前列腺素类激素受体在人体胚肾(HEK)293(ebna)细胞系中的稳定表达将相当于全长编码序列的前列腺素类激素受体cDNA亚克隆到哺乳动物表达载体的适当位置上并转染到HEK293(ebna)细胞中。选择生长表达个别cDNA的HEK293(ebna)细胞，在生长2-3周之后用克隆环法分离个别的群体，随后扩展成无性细胞系。
前列腺素类激素受体结合试验将HEK293(ebna)细胞保持在培养物中，采集并通过差速离心制备膜，之后在蛋白酶抑制剂存在下对细胞进行溶胞以用于受体结合试验。前列腺素类激素受体结合试验在含1mM EDTA、10mM二价阳离子以及适当放射性配体的10mM MES/KOH(pH值＝6.0)(EPs，FP和TP)或者10mM HEPES/KOH(pH值＝7.4)(DP和IP)中进行。通过添加膜蛋白启动反应。在二甲亚砜中加入配体，该配体在所有的培养过程中均保持在1％(v/v)。在1μM相应的非放射性前列腺素类激素存在下测定非特异性结合。培养在室温或者在30℃下进行60分钟，并通过快速过滤终止。通过从总的结合中减去非特异性结合计算出特异性结合。为了形成用于配体亲合性测定的S形浓度-响应曲线，计算出其余的每一配体浓度下的特异性结合并表示为配体浓度的涵数。
前列腺素类激素受体激动剂和拮抗剂试验为了测定受体配体是激动剂或者拮抗剂，进行整个细胞第二信使试验，测定激化(HEK293(ebna)细胞中的EP2、EP4、DP和IP)或者抑制(人体红白血病(HEL)细胞中的EP3)细胞内cAMP聚集或者使细胞内钙活化(稳定转染了阿朴水母发光蛋白的HEK293(ebna)细胞中的EP1、FP和TP)的情况。为了进行cAMP试验，采集细胞并将其再悬浮于含有25mMHEPES的pH值为7.4的HBSS中。培养基包括100μM RO-20174(磷酸二酯酶型IV抑制剂，得自Biomol)，在只进行EP3抑制试验的情况下，还包括15μM用来促进cAMP产生的毛喉素。样品在37℃培养10分钟，然后终止反应，测定cAMP量。对于钙活化试验来说，细胞中加入共因子还原的谷胱甘肽和coelenterazine，采集细胞并将其再悬浮于Ham的F12介质中。通过监测由结合到细胞内发光蛋白-水母发光蛋白上的钙所引起的发光来测定钙的活化。在二甲亚砜中加入配体，该配体在所有的培养过程中均保持在1％(v/v)。对于激动剂来说，第二信使响应表示为配体浓度的涵数，并通过与前列腺素类激素标准相比计算出EC50值和响应极限。对于拮抗剂来说，通过Schild分析测定配体抑制激动剂响应的能力，并计算出KB和斜率值。
在过敏的羊中预防PGD2或者过敏原引起的鼻充血动物准备使用健康的大龄羊(18-50公斤)。这些动物的选择是根据其对皮内注射的猪蛔虫萃取物的天然的阳性皮肤反应进行的。
鼻充血的测量在神智清醒的动物身上进行实验。将它们以俯卧姿势圈在小车里，头部固定。使用改性的mask rhinometry方法测定鼻气道阻力(NAR)。为了插入nasotracheal管，对鼻部通道实施局部麻醉(2％的利多卡因)。该管的最大端连接到呼吸速度描记器上，并在与计算机连接的示波器上记录流量和压力信号，以便在线计算NAR。通过给以雾化溶液(10喷/鼻孔)对鼻进行刺激。在此之前和在刺激后60-120分钟记录NAR充血方面的变化。
在弥猴中预防PGD2和过敏原引起的鼻阻塞动物准备使用健康的成年雄性弥猴(4-10公斤)。这些动物的选择是根据其对皮内注射的猪蛔虫萃取物的天然的阳性皮肤反应进行的。在每一实验之前，对选择用于研究的猴子通宵禁食，水的供应没有限制。次日早晨，在将其从笼中取出之前对该动物给以开他敏镇静剂(10-15毫克/公斤i.m.)。把它放在加热的桌子(36℃)上并注入propofol的丸剂量(5-12毫克/公斤i.v.)。对该动物插以卡夫气管内导管(内径4-6毫米)并通过连续的静脉内输液propofol(25-30毫克/公斤/小时)保持麻醉。在整个实验过程中监测生命体征(心率、血压、呼吸率、体温)。
鼻充血的测量通过连接到用来保证其正常的气管内导管上的呼吸速度描记器进行动物呼吸阻力的测量。Ecovision音响鼻腔计用来评价鼻充血。该方法给出鼻子内部非侵入的二维回声图。在10秒钟内通过装有定制软件(Hood Laboratories，Mass，U.S.A.)的便携式计算机计算鼻体积和沿着鼻腔长度方向的最小横截面积。通过直接输送到动物的鼻腔(50μL体积)内而进行鼻刺激。在此之前和在刺激后60-120分钟记录鼻充血方面的变化。如果发生鼻充血，它将转化成鼻体积的减少。
受训的神智清醒的松鼠猴的肺部力学试验方法包括把受训的松鼠猴放在气雾剂曝气仓的椅子上。为了控制起见，对呼吸性参数的肺部力学测量记录约30分钟的时间以确定每一猴子在那天的正常对照值。为了用于口服，将化合物溶解或者悬浮在1％的甲基纤维素溶液(甲基纤维素，65HG，400cps)中并以1毫升/公斤体重的量给药。为了进行化合物的气雾剂给药，利用的DeVilbiss超声喷雾器。在用气雾剂剂量的PGD2或者猪蛔虫抗原对猴子进行刺激之前，预处理5分钟-4小时的时间段，气雾剂的稀释比是1∶25。
刺激之后，用计算机计算出每一分钟的数值，对于每一种呼吸性参数，包括气道阻力(RL)和动态柔量(Cdyn)，均表示为相对于对照值的百分变化。随后，获取每一测试化合物的结果，取结果的时间为刺激后最少60分钟，然后与先前得到的那一猴子的历史基线对照值进行对比。另外，对每一猴子来说，均独立地计算刺激后60分钟的总值(历史基准值和测试值)的平均值，并用于计算被试验化合物抑制的介质或者Ascaris抗原响应的总百分数。为了统计分析，使用成对的T试验。(参考文献McFarlane，C.S.等人，Prostaglandins，28，173-182(1984)和McFarlane，C.S.等人，Agents Actions，22，63-68(1987))。
在过敏的羊中预防引起的支气管收缩动物准备使用平均重量为35公斤(范围为18-50公斤)的大龄羊。使用的所有动物均满足两个标准a)它们对于稀释比为1∶1,000或者1∶10,000的猪蛔虫萃取物具有天然的皮肤反应(Greer Diagnostics，Lenois，NC)；和b)它们对于猪蛔虫的吸入刺激预先响应为具有急性支气管收缩和后期支气管阻塞(W.M.Abraham等人，Am.Rev.Resp.Dis.，128，839-44(1983))。
导气管力学的测量将未加镇静剂的羊以俯卧姿势圈限制小车里，头部固定。用2％的利多卡因溶液将鼻部通道表面麻醉之后，把气囊导管通过一个鼻孔伸到下面的食管中。然后，使用可曲纤维支气管镜作为指引通过另一个鼻孔对该动物插入卡夫气管内导管。用食道气囊导管(充满1毫升空气)估算胸膜压力，食道气囊导管的位置使得吸气产生负压偏斜，同时可清楚地觉察到心脏发生的振动。用伸入并位于nasotracheal管顶端末梢的侧孔导管(内部尺寸为2.5毫米)测定气管中的侧压力。用压差传感器(DP45；Validyne Corp.，Northridge，CA)测定肺与肺内腔之间的压力，即气管压力胸膜压力之间的差。为了进行肺阻力(RL)的测量，将nasotrachel管的最大端连接到呼吸速度描记器上(Fleisch，Dyna Sciences，Blue Bell，PA)。流量以及肺与肺内腔之间的压力信号记录在示波器上(型号DR-12；Electronics forMedicine，White Plains，NY)，该示波器又连接到PDP-11数字计算机上(Digital Equipment Corp.，Maynard，MA)，用于从肺与肺内腔之间的压力、通过积分得到的呼吸体积和流量来在线计算RL。10-15次呼吸分析用于测定RL。胸腔气体容量(Vtg)是在用来得到特定肺阻力(SRL＝RL·Vtg)的体容积描记器中测定的。
为了举例说明本发明提供以下实施例，它们不允许被视为以任何方式限定本发明的范围。在实施例中，除非另有说明，-所有最终的式I产物均通过核磁共振、薄层色谱和元素分析或者质谱进行分析；、-中间体通过核磁共振和薄层色谱分析；-大部分化合物都通过在硅胶上进行急骤层析、重结晶和/或swish(悬浮在溶剂中随后过滤出固体)纯化；-反应过程之后进行薄层层析(TLC)，给出的反应时间仅仅用于举例说明；-对映异构过量是在使用手性柱Chiral Pak AD；250×4.6毫米的正相HPLC上测定的。
以下中间体是根据文献方法制备的或者是从以下供应商处购买的2-(2-氧代环戊基)乙酸乙酯Acros/Fisher Scientific。
4-氟-2-碘代苯胺Beugelmans，R.；Chbani，M.，Bull.Soc.Chim.Fr.，1995，132，306-313。
实施例1(-)-[4-(4-氯苄基)-7-氟-5-(甲基磺酰基)-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基]乙酸 步骤1(+/-)-(7-氟-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基)乙酸乙酯 将10.00克4-氟-2-碘代苯胺、6.57克2-(2-氧代环戊基)乙酸、121毫克对甲苯磺酸和100毫升苯的溶液在N2氮气中使用Dean-Stark分水器回流24小时。之后，蒸馏除去苯。然后，加入60毫升DMF，把溶液脱气，此后连续加入19毫升许尼希碱和405毫克Pd(OAc)2。溶液加热到115℃，加热3小时，然后冷却到室温。为了猝灭反应，加入300毫升1N的HCl和200毫升乙酸乙酯，混合物通过塞利特过滤。分离各相，酸性相用200毫升乙酸乙酯萃取两次。合并有机层，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，通过塞利特过滤并浓缩。粗料进一步通过用100％甲苯洗脱的急骤层析纯化，得到5.36克标题化合物，黄色固体。
1H NMR(丙酮-d6)δ9.76(brs，1H)，7.34(dd，1H)，7.03(d，1H)，6.78(td，1H)，4.14(q，2H)，3.57(m，1H)，2.85-2.55(m，5H)，2.15(m，1H)，1.22(t，3H).
步骤2(+/-)-(7-氟-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基)乙酸 在室温下，向1.24克步骤1的酯与14毫升四氢呋喃(THF)的溶液中加入7毫升MeOH，随后加入7毫升2N的NaOH。2.5小时之后，将反应混合物倾入到包含有乙酸乙酯(EtOAc)/1N HCl的分液漏斗中。分离各相，酸性相用EtOAc萃取两次。合并有机层，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，蒸干，得到1.08克粗且不稳定的蜡状棕色油，直接用于下一步(纯度＞90％)。
1H NMR(丙酮-d6)δ10.90(brs，1H)，9.77(brs，1H)，7.34(dd，1H)，7.04(dd，11H)，6.79(td，1H)，3.56(m，1H)，2.90-2.50(m，5H)，2.16(m，1H).MS(-APCI)m/z 232.2(M-H).
步骤3(+/-)-(5-溴-7-氟-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基)乙酸 在-40℃下，向2.20克步骤2的酸(纯度＞90％)与30毫升吡啶形成的溶液中加入6.85克吡啶嗡三溴化物(纯度为90％)。悬浮液在0℃下搅拌10分钟，并升温到室温搅拌30分钟。然后，在不加热的情况下在高真空下除去溶剂。将粗料溶于40毫升AcOH中，在0℃下向冷溶液中分步加入2.88克Zn粉。悬浮液在15℃搅拌15分钟并升温到室温另外搅拌15分钟。此时，通过加入1N HCl猝灭反应混合物，把该混合物倾入到含盐水/EtOAc的分液漏斗中。分离各层，有机层用水、盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并浓缩。该物质不进一步纯化即用于下一步。
1H NMR(丙酮-d6)δ10.77(br s，1H)，9.84(brs，1H)，7.09(m，2H)，3.60(m，1H)，2.95-2.65(m，4H)，2.56(dd，1H)，2.19(m，1H).
步骤4(+/-)-[5-溴-4-(4-氯苄基)-7-氟-1，2，3，4-四氢环戊[b]-吲哚-3-基]乙酸 向2.13克步骤3的酸与10毫升THF形成的溶液中，过量加入重氮甲烷的乙醚溶液，直到用TLC监测酸完成被消耗掉。然后，真空除去溶剂。在-78℃下，向这样形成的粗甲酯与20毫升DMF的溶液中加入539毫克NaH悬浮液(60％的油悬浮液)。该悬浮液在0℃搅拌10分钟，然后再次冷却到-78℃，并用1.70克4-氯苄基溴化物处理。5分钟后，温度升高到0℃，混合物搅拌20分钟。此时，通过加入2毫升AcOH猝灭反应，混合物倾入到包含1N HCl/EtOAc的分液漏斗中。分离各层，有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并浓缩。使用步骤2中描述的方法水解烷基化的物质。粗物质进一步通过用EtOAc/己烷研磨纯化，得到2.35克标题化合物，浅棕色固体。
1H NMR(丙酮-d6)δ10.70(brs，1H)，7.31(d，2H)，7.18(d，1H)，7.06(d，1H)，6.92(d，2H)，5.90(d，1H)，5.74(d，1H)，3.61(m，1H)，3.00-2.70(m，3H)，2.65(dd，1H)，2.39(dd，1H)，2.26(m，1H).MS(-APCI)m/z 436.3，434.5(M-H).
步骤5(+)-[5-溴-4-(4-氯苄基)-7-氟-1，2，3，4-四氢环戊[b]-吲哚-3-基]乙酸
在80℃下，向2.35克步骤4的酸与130毫升EtOH形成的溶液中加入780微升(S)-(-)-1-(1-萘基)乙胺。溶液冷却至室温并搅拌过夜。回收的盐(1.7克)再用200毫升EtOH重结晶。过滤后，得到的白色固体盐用1N HCl中和，用EtOAc萃取产物。有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并浓缩。所述物质经SiO2垫过滤，通过用EtOAc洗脱，得到500毫克标题对映异构体，白色固体。这两种对映异构体的保留时间分别是7.5分钟和9.4分钟[ChiralPak AD柱，己烷/2-丙醇/乙酸(95∶5∶0.1)]。极性较大的对映异构体呈98％的ee。
ee＝98％；保留时间＝9.4分钟[Chiral Pak AD柱250×4.6毫米，己烷/2-丙醇/乙酸(75∶25∶0.1)]；[α]D21＝+39.2度(c1.0，MeOH)。
步骤6(-)-[4-(4-氯苄基)-7-氟-5-(甲基磺酰基)-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基}乙酸和钠盐步骤5的酸(15.4克)首先用重氮甲烷酯化。通过将这样形成酯与16.3克甲烷亚磺酸钠盐以及30.2克CuI(I)在N-甲基吡咯烷酮中混合而完成磺酰化。悬浮液在N2流下进行脱气，加热到150℃并搅拌3小时，然后冷却到室温。为了猝灭反应，加入500毫升乙酸乙酯和500毫升己烷，混合物通过SiO2垫过滤，用EtOAc洗脱。浓缩有机相。粗油状物用EtOAc溶解，用水洗涤三次，用盐水洗涤一次，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗物质通过用100％甲苯-50％甲苯/EtOAc梯度洗脱的急骤层析进一步纯化，得到14克磺化的酯，该酯用步骤2中所述的方法水解，得到标题化合物(9.8克)，在两次连续的重结晶(先用醋酸异丙酯/庚烷，然后是CH2Cl2/己烷)之后，为白色固体。
1H NMR(500MHz丙酮-d6)δ10.73(brs，1H)，7.57(d，2H，J＝8.8Hz)，7.31(m，1H)，7.29(m，1H)，6.84(d，2H，J＝8.8Hz)，6.29(d，1H，JAB＝17.8Hz)，5.79(d，1H，JAB＝17.8Hz)，3.43(m，1H)，2.98(s，3H)，2.94(m，1H)，2.85-2.65(m，3H)，2.42(dd，1H，J1＝16.1Hz，J2＝10.3Hz)，2.27(m，1H).13C NMR(125MHz丙酮-d6)δ173.0，156.5(d，JCF＝237Hz)，153.9，139.2，133.7，133.3，130.0(d，JCF＝8.9Hz)，129.6，128.2，127.5(d，JCF＝7.6Hz)，122.2(d，JCF＝4.2Hz)，112.3(d，JCF＝29.4Hz)，111.0(d，JCF＝22.6Hz)，50.8，44.7，38.6，36.6，36.5，23.3.MS(-APCI)m/z 436.1，434.1(M-H).
ee＝97％；保留时间＝15.3分钟[Chiral Pak OD柱250×4.6毫米，己烷/2-丙醇/乙醇/乙酸(90∶5∶5∶0.2)]；[α]D21＝-29.3度(c1.0，MeOH)。
钠盐是通过在EtOH(100毫升)中用14.80毫升IN NaOH水溶液处理6.45克(14.80毫摩尔)上述酸化合物来制备的。真空除去有机溶剂，并将粗固体在回流下溶于1.2升异丙醇中。通过蒸馏溶剂将最终的体积降低到500毫升。通过冷却到室温而结晶出钠盐。把结晶的钠盐悬浮在水中，用干冰浴冷冻并在高真空下冷冻干燥，得到6.00克标题化合物，钠盐形式。
1H NMR(500MHz DMSO-d6)δ7.63(dd，1H，J1＝8.5Hz，J2＝2.6Hz)，7.47(dd，1H，J1＝9.7Hz，J2＝2.6Hz)，7.33(d，2H，J＝8.4Hz)，6.70(d，2H，J＝8.4Hz)，6.06(d，1H，JAB＝17.9Hz)，5.76(d，1H，JAB＝17.9Hz)，3.29(m，1H)，3.08(s，3H)，2.80(m，1H)，2.69(m，1H)，2.55(m，1H)，2.18(m，2H)，1.93(dd，1H，J1＝14.4Hz，J2＝9.7Hz).
实施例1A(+/-)-[5-溴-4-(4-氯苄基)-7-氟-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基]乙酸(实施例1，步骤4)的替代方法步骤1(+/-)-7-氟-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基)乙酸二环己胺(DCHA)盐将0.526M的2-溴-4-氟苯胺甲苯溶液与(2-氧代环戊基)乙酸乙酯(1.5当量)以及硫酸(0.02当量)一起加热回流20小时。用Dean-Stark设备共沸除去水。反应后用核磁共振检测，20小时之后，通常会观察到有80-85％转化为希望的亚胺中间体。反应混合物用1M碳酸氢钠(0.2体积)洗涤15分钟，蒸发有机馏份。剩余的浆液进行真空蒸馏(0.5毫米汞柱)。残余的二甲苯在30℃下蒸馏，然后在50-110℃范围内回收过量的酮和未反应的苯胺；在110-180℃回收亚胺，浅棕色澄清液，纯度为83％。
然后，把亚胺中间体加入到脱气后的乙酸钾(3当量)、四正丁基氯化铵一水化物(1当量)、乙酸钯(0.03当量)和N，N-二甲基乙酰胺(使亚胺的最后浓度＝0.365M)的混合物中。反应混合物加热到115℃，加热5小时，允许其冷却到室温。之后加入3N KOH(3当量)，混合物在室温下搅拌1小时。反应混合物用水(1.0体积)稀释，用甲苯(3×0.75体积)洗涤。水相用3N HCl酸化到pH值＝1，用甲基特丁基醚(2×0.75体积)萃取。合并的有机馏份用水(0.75体积)洗涤。向清澈的浅棕色溶液中加入二环己胺(1当量)，并把溶液在室温下搅拌16小时。过滤盐，用乙酸乙酯、甲基特丁基醚洗涤，并使其干燥，得到标题化合物，黄褐色固体。
评价94A％。
1H NMR(500mHz，CDCl3)δ9.24(s，1H)，7.16-7.08(m，2H)，6.82(t，1H)，6.2(br，2H)，3.6-3.5(m，1H)，3.04-2.97(m，2H)，2.88-2.70(m，3H)，2.66(dd，1H)，2.45-2.37(m，1H)，2.13-2.05(m，2.05)，1.83(d，4H)，1.67(d，2H)，1.55-1.43(m，4H)，1.33-1.11(m，6H).
步骤2步骤2(+/-)-(5-溴-7-氟-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基)乙酸将以上步骤1的DCHA盐与二氯甲烷(0.241M溶液)的浆液冷却-20到-15℃。一次性加入吡啶(2当量)并在30-45分钟内向浆液中滴加溴(2.5当量)，此过程中保持温度为-20℃到-15℃。在大约加入了1/3的溴时，反应混合物变得粘稠，需要有效的搅拌。最后，当加入约1/2的溴时，混合物再次变得″稀松″。加料结束后，反应混合物在-15℃下再放置1小时。然后在5分钟内加入乙酸(3.04当量)，并分步加入锌粉(3.04当量)。(一部分锌在-15℃下加入，并且将混合物放置约5分钟以确保温升过去(约-15℃到-10℃))。在约30分钟内锌的这一加料操作重复5次。当不再能观察到温升时，快速加入剩余的锌。全部操作花费约30-45分钟。
加料完成后，将这批料升温到室温，放置1小时，然后浓缩。反应混合物切换到甲基叔丁基醚(MTBE，0.8体积)中，加入10％的乙酸溶液(0.8体积)。混合物(盐，如吡啶盐的结晶)在室温下放置1小时，通过solka-floc过滤。对solka-floc垫用MTBE(大约0.2体积)冲洗，滤液(两相的，MTBE/水溶液)转移到提取器中。有机相用水(0.8体积)洗涤。浓缩MTBE萃取液并转入异丙醇(IPA，0.25体积)中以结晶出化合物。加入水(0.25体积)，并将这批料放置1小时。在1小时之内加入另外的水(0.33体积)。水的加料完成之后，批料另外放置1小时，过滤，并用30/70的IPA/水(0.15体积)冲洗。结晶的溴代酸在+45℃的烘箱中干燥。
步骤3(+/-)-[5-溴-4-(4-氯苄基)-7-氟-1，2，3，4-四氢环戊[b]-吲哚-3-基]乙酸将步骤2的溴代酸溶于二甲基乙酰胺(0.416M溶液)中，并一次性加入碳酸铯(2.5当量)。向浆液中一次性加入4-氯苄基氯化物(2.5当量)，批料加热到50℃，加热20小时。将批料冷却到室温，在5分钟之内加入5N的氢氧化钠(4.00当量)(温度升高到+40℃)。反应在50℃下进行约3小时，冷却到室温并转移到L萃取器中。用乙酸异丙酯(IPAc，2体积)稀释该溶液，冷却到+15℃。溶液用5N HCl酸化到pH约为2。分离各层，有机层用水(2×2体积)洗涤。浓缩IPAc溶液并转移到IPA(0.8体积)中以结晶出产品。在2小时内加入水(8升)，过滤批料，得到标题化合物，分离后的收率为88％。该批料可以在+40℃的烘箱中干燥24小时。
实施例2(+/-)-{4-[1-(4-氯苯基)乙基]-7-氟-5-甲基磺酰基-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基}乙酸 向1.5克实施例1步骤3的酸的甲酯(通过在四氢呋喃中用重氮甲烷对相应的酸进行酯化制得)、2.03克1-(-溴甲烷)-4-氯苯和50毫升乙腈的溶液中加入6.01克碳酸铯。所得混合物在剧烈搅拌下加热到回流反应3小时，然后把反应混合物冷却到室温，用50毫升乙酸乙酯稀释、过滤并蒸发溶剂。残余物通过急骤层析(硅胶，4％的EtOAc/己烷)纯化得到1.41克希望的苄化产物，根据核磁共振分析，为约1∶1的非对映体混合物。
向溶于80毫升NMP的上述酯(1.2克)中连续加入2.63克甲烷亚磺酸钠和3.7克Cu(I)Br。所得悬浮液在N2流下脱气，然后加热到140℃并剧烈搅拌8小时。之后，将反应混合物冷却到室温，用500毫升乙酸乙酯和500毫升己烷稀释。所得混合物通过硅胶垫过滤，进一步用EtOAc洗脱。滤液浓缩到体积为约300毫升，用水和盐水洗涤。分离出有机相，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗物质进一步通过硅胶急骤层析纯化，用30％的EtOAc/己烷洗脱，得到1.0克磺化物质。在室温下，使用10毫升2N NaOH在由10毫升THF和10毫升MeOH组成的溶剂混合物中将其水解3小时，形成相应的酸。反应混合物用1M HCl水溶液中和并用EtOAc萃取。分离后的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，并蒸发得到粗酸。使用制备HPLC(Zobax，含有0.2％AcOH的30％的EtOAC/己烷)分离两种非对映体，得到300毫克非对映体A(保留时间较短)和210毫克非对映体B(保留时间较长)。
非对映体 B1H NMR(丙酮-d6)δ10.70(br s，1H)，7.66(dd，1H)，7.56(dd，1H)，7.32(d，2H)，6.95(d，2H)，6.91(q，1H)，3.39(s，3H)，3.05-3.00(m，1H)，2.90-2.75(m，2H)，2.70(dd，1H)，2.44(dd，1H)，2.43-2.34(m，1H)，2.21(dd，1H)，2.11(d，3H).MS(-APCI)m/z 448.0(M-H).
实施例2A(+/-)-{4-[1-(4-氯苯基)乙基]-7-氟-5-甲烷磺酰基-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基}乙酸的另一种合成法向6.52实施例1步骤3的酸的甲酯(通过在四氢呋喃中用重氮甲烷对相应的酸进行酯化制得)和160毫升NMP的溶液中连续加入10.2克甲烷亚磺酸钠和19克CuI。所得悬浮液在N2流下脱气，然后加热到150℃并剧烈搅拌4小时。之后，将反应混合物冷却到室温，用500毫升乙酸乙酯和500毫升己烷稀释。所得混合物通过硅胶垫过滤，进一步用EtOAc洗脱。滤液浓缩到体积为约300毫升，用水和盐水洗涤。分离出有机相，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗物质进一步通过硅胶急骤层析纯化，用30％的EtOAc/己烷洗脱，得到4.7克磺化物质，将其溶于200毫升二氯甲烷中。向所得溶液中加入3.39克4-氯苯基甲基醇和5.68克三苯基膦，随后分批加入4.99克偶氮二羧酸二叔丁酯。反应混合物在室温下搅拌3小时，然后浓缩。将残余物加载到硅胶柱上，并用5％的EtOAc/己烷洗脱，得到5.1克标题化合物的甲酯，通过核磁共振氢谱分析大约为非对映体的1∶1混合物。遵循实施例2中描述的水解和纯化步骤，得到标题酸。
实施例3(+/-)-[9-(4-氯苄基)-6-氟-8-甲基磺酰基-2，3，4，9-四氢-1 H-咔唑-1-基]乙酸 步骤1(+/-)-(8-溴-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-1-基)乙酸乙酯 向7.24克(2-溴-4-氟苯基)肼盐酸盐在100毫升乙酸的悬浮液中加入5.5克2-(2-氧杂环己基)乙酸乙酯。所得混合物加热到回流加热1小时。然后加入10毫升乙醇，反应混合物在回流下加热过夜。蒸发溶剂，残余物用EtOAc稀释，连续用饱和NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤。分离出有机层，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残余物通过在硅胶上进行急骤层析纯化(5％的EtOAc/己烷)，得到3.12克希望的化合物。
1H NMR(丙酮-d6)δ9.97(brs，1H)，7.34(dd，1H)，7.13(dd，1H)，7.09(dd，1H)，4.16(q，2H)，3.43-3.35(m，5H)，3.05-2.88(m，1H)，2.76-2.53(m，3H)，2.10-2.00(m，1H)，1.96-1.87(m，1H)，1.82-1.72(m，H)，1.72-1.64(m，1H)，1.23(t，3H).
步骤2(+/-)[8-溴-9-(4-氯苄基)-6-氟-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-1-基]乙酸乙酯
向3.12克步骤1制备的酯和3.62克1-溴甲基-4-氯苯与30毫升乙腈的溶液中加入5.74克碳酸铯。所得混合物在回流下剧烈搅拌3小时。然后它冷却到室温，用最低量的EtOAc稀释，过滤并蒸发。残余物通过在硅胶上进行急骤层析纯化(50％的甲苯/己烷)，得到4.1克标题化合物。
1H NMR(丙酮-d6)δ7.32(d，2H)，7.24(dd，1H)，7.13(dd，1H)，6.86(d，2H)，6.00and 5.65(AB q，2H)，4.15-4.05(m，2H)，3.44-3.35(m，1H)，2.88-2.76(m，1H)，2.65-2.52(m，3H)，2.00-1.80(m，4H)，1.22(t，3H).
步骤3(+/-)-[9-(4-氯苄基)-6-氟-8-甲基磺酰基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-1-基]乙酸向478毫克步骤2制备的酯与8毫升NMP的溶液中连续加入510毫克甲烷亚磺酸钠和950毫克CuI(I)。所得混合物在N2流下脱气，然后在剧烈搅拌下在140℃加热8小时。反应混合物冷却到室温，用最低量的EtOAc/己烷的1∶1混合物稀释。所得混合物通过硅胶垫过滤，用EtOAc进一步洗脱。滤液浓缩到约50毫升，用水和盐水洗涤。收集有机相，经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残余物通过硅胶急骤层析纯化(30％的EtOAc/己烷)，得到320毫克希望的磺化物质，将其溶解在5毫升THF加上5毫升甲醇中。向所得溶液中加入5毫升2N NaOH，所得混合物在室温下搅拌6小时。反应混合物用1M HCl水溶液中和并用EtOAc萃取。分离的有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并蒸发。残余物在剧烈的搅拌下与己烷一起回流0.5小时。所得混合物在剧烈的搅拌下冷却到室温，过滤得到278毫克希望的酸。
1H NMR(500MHz丙酮-d6)δ10.73(brs，1H)，7.57(d，1H)，7.56(d，1H)，7.29(d，1H)，6.67(d，2H，)，6.47 and 5.61(AB q，2H)，3.27-3.21(m，1H)，2.98(s，3H)，2.85(dd，1H)，2.76-2.55(m，3H)，2.00-1.84(m，3H)，1.82-1.73(m，1H).MS(-APCI)m/z448.0(M-H).
实施例4[4-(4-氯苄基)-7-氟-5-甲基磺酰基-1-氧代-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基]乙酸
步骤1[5-溴-4-(4-氯苄基)-7-氟-1-氧代-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基]乙酸甲酯 将实施例1步骤5化合物的甲酯(1.00克，通过用过量的重氮甲烷处理相应的酸制得)与10毫升9∶1THF/H2O的溶液用2.52克DDQ处理。使得反应混合物在室温下搅拌过夜。此时将反应混合物倾入到包含EtOAc和盐水的分液漏斗中。合并的有机层用水、盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，并浓缩。所得物质进一步通过用30％EtOAc/己烷洗脱的急骤层析纯化。层析法再重复两次。得到350毫克上述酮，灰色固体。
步骤2[4-(4-氯苄基)-7-氟-5-甲基磺酰基-1-氧代-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基]乙酸将处于4毫升NMP中的来自于步骤1的溴化物(200毫克)用320毫克CuI和175毫克CH3SO2Na处理。使氮气鼓泡通过反应混合物大约1分钟，然后混合物在130℃加热6小时。此时，把反应混合物冷却到室温，用EtOAc稀释并通过硅胶垫过滤，残余物用另外的EtOAc冲洗。有机层用水、盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，并浓缩。所得的油状物通过用50％EtOAc/己烷洗脱的急骤层析纯化，得到54毫克相应的甲基砜，米色固体。
处于5毫升THF/H2O(1∶1)和5毫升MeOH中的上述甲酯用1毫升1NHCl溶液处理。该混合物在室温下搅拌2小时。此时，用1N HCl溶液将反应混合物酸化并倾入到含有水和EtOAc的分液漏斗中。分离各层，水层用EtOAc萃取。合并的有机层用水、盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并浓缩。所得物质进一步通过用含有1％AcOH的100％EtOAc洗脱的急骤层析纯化，得到26毫克标题酸，米色固体。
1H NMR(500MHz，丙酮-d6)δ11.0(br，1H)，7.85(m，1H)，7.80(m，1H)，7.38(d，J＝8Hz，2H)，7.04(d，J＝8Hz，2H)，6.42(d，JAB＝18Hz，1H)，6.08(d，JAB＝18Hz，1H)，3.78(m，1H)，3.28(m，1H)，3.10(m，1H)，3.05(s，3H)，2.65(m，2H).MS(-APCI)m/z 448.2(M-H)-.
权利要求
1.式I的化合物 和其药学上可接受的盐，其中n是0或1；m是1、2或3；R1是H、C1-C3烷基、卤化的C1-C3烷基或者环丙基；R2是4-氯苯基或2，4，6-三氯苯基。
2.权利要求1的化合物，其中n是0。
3.权利要求1的化合物，其中n是1。
4.权利要求1的化合物，其中m是1。
5.权利要求1的化合物，其中m是2。
6.权利要求1的化合物，其中R1是H。
7.权利要求1的化合物，其中R1是CH3。
8.权利要求1的化合物，其中R2是4-氯苯基。
9.权利要求1的化合物，其中R2是2，4，6-三氯苯基。
10.权利要求1的化合物，其具有如下所示的立体构型
11.权利要求1的化合物，其中n是0。
12.权利要求1的化合物，其中n是1。
13.权利要求1的化合物，其中m是1。
14.权利要求2的化合物，其中m是2。
15.权利要求1的化合物，其中R1是H。
16.权利要求1的化合物，其中R1是CH3。
17.权利要求1的化合物，其中R2是4-氯苯基。
18.权利要求1的化合物，其中R2是2，4，6-三氯苯基。
19.一种化合物，其选自[4-(4-氯苄基)-7-氟-5-(甲基磺酰基)-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基]乙酸，{4-[1-(4-氯苯基)乙基]-7-氟-5-甲烷磺酰基-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基}乙酸，[9-(4-氯苄基)-6-氟-8-甲基磺酰基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-1-基]乙酸，和[4-(4-氯苄基)-7-氟-5-甲基磺酰基-1-氧代-1，2，3，4-四氢化环戊[b]吲哚-3-基]乙酸，或者其药学上可接受的盐。
20.化合物(-)-[4-(4-氯苄基)-7-氟-5-(甲烷磺酰基)-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基]乙酸和其药学上可接受的盐。
21.化合物(+/-)-{4-[1-(4-氯苯基)乙基]-7-氟-5-甲烷磺酰基-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基}乙酸和其药学上可接受的盐。
22.化合物(+/-)-[9-(4-氯苄基)-6-氟-8-甲基磺酰基-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-1-基]乙酸和其药学上可接受的盐。
23.化合物[4-(4-氯苄基)-7-氟-5-甲烷磺酰基-1-氧代-1，2，3，4-四氢环戊[b]吲哚-3-基]乙酸和其药学上可接受的盐。
24.包含权利要求1-23任何一项的化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。
25.权利要求19的组合物，还包括选自抗组胺剂、白细胞三烯拮抗剂和白细胞三烯生物合成抑制剂的第二活性成分。
26.一种治疗前列腺素D2传递的疾病的方法，其包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的权利要求1的化合物。
27.一种治疗鼻充血的方法，其包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的权利要求1的化合物。
28.一种治疗变应性哮喘的方法，其包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的权利要求1的化合物。
29.一种治疗过敏性鼻炎的方法，其包括给予需要这种治疗的患者治疗有效量的权利要求1的化合物。
30.权利要求1-18任何一项所定义的式I化合物的药学上可接受的盐。
31.一种用于治疗或者预防前列腺素D2传递的疾病的药物组合物，其包括治疗有效量的权利要求1-18任何一项定义的式(I)化合物或者其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体的组合。
32.一种用于治疗或者预防前列腺素D2传递的疾病的药物组合物，其包括治疗有效量的权利要求19-23任何一项定义的化合物或者其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体的组合。
33.权利要求1-23任何一项的化合物或者盐在制造用于治疗前列腺素D2传递的疾病的药物中的用途。
34.根据权利要求33的用途，其中所述疾病是鼻充血、鼻炎或者哮喘。
35.用于医学治疗的权利要求1-23任何一项定义的化合物或者盐。
全文摘要
式(I)的氟取代的环烷酸吲哚衍生物和其药学上可接受的盐，其中n是0或1；m是1、2或3；R
文档编号A61P11/06GK101092388SQ20071012639
公开日2007年12月26日 申请日期2003年1月22日 优先权日2002年1月24日
发明者C·伯特莱特, N·拉钱斯, 李连海, C·斯图里诺, 王召印 申请人:默克弗罗斯特加拿大有限公司