药用可吸入微粒、使用其的肺部吸入制剂及其制备方法

专利名称：：药用可吸入微粒、使用其的肺部吸入制剂及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及药物制剂领域，尤其涉及药用可^A^U立以及使用该孩M立的肺部可pA7v制剂，例如定量"AA气雾剂或干粉。及入剂，还涉及该樣^i以及使用该凝啦的肺部可卩AA制剂的制备方法。
背景技术：
：肺部给药途径的应用已有几千年的历史。通过p^将药物传递到肺部是治疗多种病症的重要方式，可以质量的疾病包括普通的局部疾病，例如嚢性纤维性病变、肺炎、支气管哮喘和漫性阻塞W申部疾病等；以及一些系统疾病，如激素脊R、疼痛控制、免疫缺陷、红细胞生成、糖尿病等。与其他给药途纟劲目比，肺部给药有其独特的优势对于肺部和呼吸道局部用药，药物直接作用于病变部位，较小的剂量就能i^JU治疗目的，降低全身循环血药浓度，降低了药物的毒副作用；对于全身治疗，肺部提供了一个巨大的吸收面积(成AI申部面积通常为7(M40m2)、相对较高的血流量和膜通透性、相对较低的酶活性和上皮细胞屏障，避免首过效应。这意味着大多数的药物肖ti^申部得到快速全面的吸收。肺部吸入制剂包括雾化吸入剂(nebulizer)、定量吸入气雾剂(metereddoseinhaler,MDI)和干粉pil^剂(drypoweredinhaler,DPI)三类。其中，定量p^A气雾剂具有简洁、便携、多剂量、相对便宜、剂量重现性好、封闭系统(药物不易降解)、具有较高的病AJ'顷应性等优点，因此应用优势明显。传统的MDI以氟利昂(CFC)为旨剂，由于国际社会应环境保护的要求而逐步禁用CFC，目前国际上采用氩t^克(HFA)替代传统CFC，如HFA-134a和HFA-227。MDI中药物一般是以溶液、混悬液或乳浊液的形式存在。药物在混悬型MDI中通常具有较好的化学稳定性，可传递更大的剂量。但混悬微粒在抛射剂中通常存在相分离、絮凝和凝聚等物理不稳定性问题。这种物理不稳定性能导致剂量的不均匀性和可吸入药物樣M^立径大小和药物可pil7v性的不可预测性。相分离報与孩M立在滅剂中沉^i4^相关，通过混合两种密度不同的HFA抛射剂，或者通过制粒技^l空制微粒的密度，降^^斜立和^f剂之间的密M异，可减慢沉l^i1^,提高药物的物理稳定性。此外，降^A4a立径大小也可理论上降低药物微粒的沉降i4^变。但是孩M立在抛射剂中倾向于絮凝和凝聚，为有效控制微Ki的凝聚，提高微粒的絲性是混悬型MDI制剂的关键。传统CFC制剂中，通常使用表面活性剂防止药物微粒的絮凝和凝聚，以提高孩ife^t性和^L稳定性，从而提高制剂的均匀性和给药重复性。但是传统<錢的表面活性剂，如油酸，三油酸山梨坦和大豆磷酯，在HFA抛射剂中溶解性差，它们的溶解度只有0.005%-0.02%w/v,远低于实际#^乍中所需的0.1%-2.0%w/v。为提高表面活性剂在HFA中溶解度，需要使用乙醇等共溶剂，以助溶这些成分。通过添加共溶剂，可助溶传统的表面活性剂和其他具有提高分敎性的赋型剂，例如Steckel和Wehle利用乙醇和PEG30(H乍为共溶剂助溶了羟丙基a、(3和Y环糊精，利用环糊精iiJij了提高混悬型MDI物理稳定性的目的。但共溶剂通常与混悬药物《斜立的物理性质不相容，导致药物孩M立增大、药物本身结晶性质变化等现象，并降低药物可。A7v性。此外研究i^4明混悬型MDI中药物的可pA7v性和制剂中共溶剂^*瓶比。为避免使用共溶剂，国夕卜研究了一些可能在HFA婦剂中溶解的表面活性剂或其它添加剂，来替代传统表面活性剂，提高微粒的分散稳定性。例如，研究表明通过添加少量^6-15个乳酸片段寡聚乳酸作为混悬稳定剂，MDI中混悬药物微粒的^:性得到显著提高，因此其沉降速^1得到降低，并导致制剂的剂量均匀性得到显著提高。但是，通过利用抛射剂中溶解的添加剂提高药物錄性的方法本身M—定的缺点。因为在产生气雾后抛射剂挥发时，可溶性表面活性剂能导致微粒聚集，从而降j似敬粒的可pA7v性。MDI混悬制剂须使用表面活性剂的主要原因在于，传统使用的药物m^立主要通过球磨和^等微粉化技术来制备。这些微化法技术虽然可有效i4it过^4成能量将药物结晶粉碎到几何粒径大小在l-5微米之间，但是生产的微粒不能控制表面形态和密度，比方说表面形态上常常不规则，表面易带电荷，因此孩Mi容易絮凝和聚集。此外，这种利用机械能量粉碎药物的方法还会对包括蛋白质等在内的稳定性较差的药物产生化学降解，或转变药物的晶体性质，导致部分多晶态或玻璃态的产生。上述缺陷严重制约了MDI制剂在全身给药方面的应用性。为此，多种新型微粒制备技术被开发出，用于制备在不含可溶表面活性剂的抛射剂中可自分散的药物微粒。这些新的微炷制备技术包括有喷雾干燥、喷雾冷冻干燥、喷飼空制干燥、喷雾超临界干燥、控制结晶法、反溶剂微沉淀法、特^f磨法等等。混悬《斜立在抛射剂中絮凝和聚集的主要原因在于微粒之间的相互吸引力，也就是色散力、诱导力和取向力等3种类型的范德华力。控制HFA中微粒之间的相互作用力，便有可能提高混悬孩a立的物理稳定性。但是因为HFA在常温下为气体，在气雾罐中存在高压，微粒在抛射剂中相互吸引力很难直接测定。最近，研究人员通iti4用常温下为液体的2H,3H全氟戊烷(HPFP,全氟烷烃)作为HFA的替代品，利用原子力显微镜测定了混悬微粒间的相互吸可I力的性质和范围。该方法可奇&寸将来pMDI制剂中混悬樣M立制备的设计和优化有一定的指导意义。^J'J目前为止，新型微粒制备技术的应用主要还是基于经验和实验尝试，应用新型微粒制备技术提高混悬制剂物理稳定性的策略大致可分为控制微粒物理形态和表面包衣两类。控制微粒物理形态提高分散稳定性主要源于1997年发表在美国《科学》杂志上的多孔型低密度微粒的概念。制粒方法是选择添加聚合物或者非聚合型的赋型剂和特殊发泡剂，通过喷雾干燥或溶剂挥发的方法可制备多孑L型低密度高分散性微粒。Pulmosphere⑧是最先利用这个概念制备高度可^:微粒的专利技术；赋型剂选择了磷脂和专利含氟发泡剂-perflubronorperfluorooctylethane。实验结^^明这些方法制备的药物微粒可显著提高混悬樣妍立的物理稳定性和沉P争后的再^i性，并且体外评价表明pMDI制剂中高达约70%的微粒可吸入并沉降在下呼吸道，吸入效率远远高于含传统微粉化药物的商品制剂产品(1040%)。表面活性剂包衣的药物孩a立可提高药物在没有可溶表面活性剂的HFA抛射剂中的分散性和^:稳定性。用于包衣的表面活性剂，既可是那些在HFA中可溶的也可是不可溶的那些成分。Williams等Aif过将可溶性表面活性剂PluronicF77剂和曲安纳德一^^研磨而制备的表面活性剂包衣的药物微粒进而制成pMDI制剂后发现，药物的可p^/v性得到显著才是高。通过包衣，一方面可降4氐药物piL/v樣M立的MMAD,另一方面可显著冲是高混悬樣M:i在HFA中包括^i。、i4^和^:稳定性等在内的物理稳定性。类似地，通过不同制备方法所得的不溶性表面活性剂包衣的药物樣M議HFA婦剂中表现出了良好的物理稳定性和可p^7v性。此外，在一个最近的专利报道中，研究人员利用某些特殊的成^#^糾斜立的表面理化性质，降^tM立间的范德华力，从而提高HFA制剂中混悬《斜立的^:稳定性。M方法是通iti^择那些和抛射剂极化'^N近的材^H'l^微粒的表面，这样可降^^口贫i4立间范德华力成正比的Hamaker常数。因为折光率和Hamaker常数直接相关连，因此通iii4择那些和抛射剂折光率相近的物质，可提高微粒的分散稳定性。再通过结合多孔型微粒技术和控制微粒密度的方法可进一步提高混悬微4驢HFA中的物理稳定性。但是上述的方法M在众多局限性，多孔型低密度型微粒由于堆密度太低，在实际应用中载样量非常低，对需要传递较大剂量的药物不适用。表面活性剂包衣的药物蕃t粒中的表面活性剂由于熔点较低，容易存在物理稳定性问题
发明内容本发明的目的在于提供药用可pA/v微粒，该纟斜立适用于制备定量^7v气雾剂或干粉吸入剂等肺部吸入制剂，微粒在制剂中无需添加共溶剂或表面活性剂就具有很好的*性和^:稳定性，以;^申部可pA/v性。本发明的另一目的在于提供上述药用可。A/v微粒的制备方法。本发明的另一目的*于4€#^錢上述药用可口ilA^斜立的肺部pa^制剂，如定量pA/v气雾剂或干粉口AA剂。本发明的另一目的4于提^H吏用上述药用可。AA微粒的肺部p^v制剂的制备方法。以下对本发明进行详细描述。术语下文中使用的术语"微粒"、"药物樣M立"和"药用可吸入m^:立"的意思相同，可用于肺部欽制剂。下文中使用的术语"药物"，是指作为药用可级^U斜立或肺部pA7v制剂的治疗活性的药物成分。药用可pJlA^^立本发明A^现，和常规微粉制备的微未M目比，喷雾干燥制备的药物微粒无论在定量吸入气雾剂或干粉p^v剂中，可级人性均显著高于前者。本发明人还惊奇她友现，当药物微粒在表面形态上呈现出褶铍或多处均匀的凹陷时，这些《斜立在HFA抛射剂中没有出现絮凝，并表现出很好的M性和可^/v性；并且，在制备为干粉pA7v制剂时同样显示很好的特别地，发明人经il验、研究还发现，药物微粒的表面形态受制剂配方影响明显，而且，在能够得到呈褶铍状或凹陷状的表面形态的制剂配方情况下，喷雾干燥^^牛对表面形态也有一定影响。具体而言，当制剂配方中含有tt酸如亮氨酸，聚乙烯醇(PVA)如PVA80、PVA75,聚乙烯吡咯烷酮(PVP),白蛋白如牛血清蛋白，以及磷脂等成分时，有利于褶皱或凹陷的形成。而如果制剂配方中含有透明质酸(HA)、单糖、寡糖、多糖等成分，则不利于褶皱的形成。尽管如此，当HA和PVA共添加时，依然能够制备出褶铍状的药物#4立。此外，发明/Ji^现，在制剂中所用的辅料包含高分子聚合物和生物凝附剂时，可提高药物的生物利用度和肺部驻留时间。高分子聚合物可以是选自透明质酸(HA)、可溶性曱壳素及其衍生物、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP.)、羟乙基纤维素和牛血清蛋白中的一种或多种的混合物。尤其是当生物黏附剂包含有透明质酸(HA)日t,肺部驻留时间可显著增加。生物黏附剂可4顿透明质酸、可溶性曱壳素及期汙生物和/或粘蛋白。因此，本发明的药用可pA7v微粒，除了含有作为活性成分的药物夕卜，还含有成褶铍或凹陷物质、生物黏附剂和高^聚合物。其中，所用成褶皴或凹陷物质选自氨基酸(例如亮氨酸)、PVA、PVP、白蛋白和磷脂(例如1斜间酸碌脂,^威、卵磷脂等)中的一种或多种。其^^]量优选为药物樣M立总重量的5-60%,优选10-20%。所用生物黏附剂^j]透明质酸、可溶欧曱壳素及其衍生物和/或粘蛋白。其<錢量优选为药物微粒总重量的5-60%,优选10-20%。所用高分子聚合物可以是选自透明质酸、可溶性曱壳素及其衍生物、PVA、PVP、羟乙基纤维素和牛血清蛋白中的一种或多种。其j賴量优选为药物樣M立总重量的5-60%,优选10-20%。由于上fc种辅料中可用的具体物质有相互重叠之处，因此本发明中优选使用多重效果的同一物质。例如，优选^i]的PVA、PVP具有At習铍或凹陷作用，同时也是高^聚合物；透明质酸既是生物黏附剂，又是高分子聚合物。在本发明的一个优选实施方案中，成褶铍或凹陷物质使用亮氨酸、PVA和/或PVP，生物黏附剂使用透明质酸、三曱基甲壳素，高分子么合物选自透明质酸(HA)、PVA和PVP中的一种或多种。本发明中，作为活性成分的药物，可以是一4殳的肺部级人的药物，并没有特另'j限制。然而，所述药物优选使用奈多罗米钠、色甘酸钠、曲普坦类药物(例如，利扎曲普坦、佐米曲普坦等)、阿朴吗啡、灯盞花素或灯盞花素肝素钠复方等。发明^L发现，在喷雾干燥条件方面，温度、喷雾压力、喷雾液浓度与进津+速度四个参数均对微粒形态变化影响明显。《就粒表面的褶铍或凹陷程度，随温度的升高而升高，随喷雾压力的升高而降^氐，随喷雾液浓度的升高而降^氐，随进^N4度的升高而降低。为使药物能有效传递到肺部，即具有较好的可吸入性，药物微粒的粒度分布(空气动力学粒径)最好分布在10(Am以下，优选至少90%孩￡粒粒径小于10}im，70%以上分布在Ipm5^im范围内，微l^立径的平均几何值为5iim或更小。药用可pA7v孩財立的制名-方法
技术领域：
：本发明还提供了上述药用可"^v微粒的制备方法，该方法包括药物与辅料(成褶皱或凹陷物质、生物黏附剂和高分子聚合物)溶解于溶剂中，然后将药物与辅料的混合溶液通过喷雾干燥制成药用可"及\微粒其中，所用溶剂可以是水、緩冲液或乙醇等。为了让药物较好i4)容解，可以选择^^]适当的溶剂如果药物水溶性较好(大于IOmg/ml)，则优选水作为溶剂；如果药物在中性水中溶解度较低(小于1mg/ml),而且药物具有弱酸性、弱碱性或两性，则可以根据药物性质选择合适pH值的緩沖溶液，使药物能够较好的溶解；如果药物不溶于水，而较易溶于醇，则可以选择乙醇-水作为溶剂。这对于本领域技术人员而言，完全可以冲艮据JM技术知识和/或结合有限次试验确定的。对于药物和辅料的〉容解而言，溶解的方式可以^1各种各样的，例如，药物和辅料可以分别或同时、一起或分批iMl解于溶剂中。对于喷雾干燥制备微粒而言，进口温度、喷雾压力、喷雾液浓度与进^H^变的设置如下对于水溶液而言，进口温度范围可设定在70"-200。C之间，优选120-160。C;喷雾压力可设定在300"800NL/h，优选500-600NL/h;喷雾液浓度可设定在lmg/ml至200mg/ml，优选10-50mg/ml;进^it^可设定进料蠕动泵传输效率l。/rlO。/。之间，优选1-2%;对于含乙醇溶液而言，温度范围可设定在60-150。C之间，优选80-110。C;其余三个参凄t不变。对于不同的药物和辅料处方，上述优选^l丈可根据具体情况做适当调整。勤于于本领域技术人员而言，完全可以根据3M技术知识和/或结合有限次"^验确定。为使药物能有效传递到肺部，即具有较好的可口X/v性，药物孩i4立的粒度分布(空气动力学粒径)最好分布在IOpm以下，优选至少90。Af^i粒径小于10[im,50%以上分布在1pm~5ixm范围内，樣^i^立径的平均几^pf直为5)am或更小。药用可^JN^^立的肺部^A制剂上述喷雾干燥制备的药物微粒，经粒度分析仪测定粒度分布符合要求后，装入气雾剂容器中，压上阀门，灌入抛射剂，即制成定量pA7v气雾剂。气雾剂容器并没有特另'j限定，涂层或未涂层的均可，阳极防护处理或未处理的均可，如，铝、玻璃、不锈钢容器，以及利用环氧类树脂、环氧化合物等涂层的罐和容器。阀门选#11用于氲氟烷烂类抛射剂的定量阀门，优选剂量计量阀。抛射剂选择氢氟烷烃类抛射剂，如，HFA-134a、HFC-227等，优i^HFA-134a。该类型抛射剂不破坏臭氧层，对环iM好。药物孩i4立与抛射剂的比例，可以根据药物临床应用所需的具体剂量进行调整。本发明所制备的定量吸入气雾剂，在无需使用共溶剂如乙醇或表面活性剂情况下即可稳定，即药物微粒在抛射剂中具有很好的自分散性，不会发生明显聚集、絮凝等现象。这一方面可以提高制剂的安全性，另一方面也可以增加制剂的载药量，使制备高剂量的定量。A/v气雾剂成为可能，通过调节药物微粒与抛射剂的比例，可以制备AMWj高的较宽剂量范围的定量吸入气雾剂，适用于大多数药物的应用。图l表示实施例3中所测得的实施例l中制得的利扎曲普坦mii的粒度分布曲线图；图2表示实施例3中所测得的实施例2中制得的灯盞花素微粒的粒度分布曲线图；图3表示实施例4中MTR对照测定结果曲线图4表示实施例4中测得的经不同聚^4勿制得的纟斜立的MTR百分变化率图；图5表示实施例4中测得的经不同聚合物制得的微粒的MTR百分变化率图；图6表示实施例6不同处方微粒经大鼠气管给药后，血浆中药物浓度随时间变化曲线，其中國为孩M立1(利扎曲普坦+PVA80),令为mii2(利扎曲普坦+孝Uf唐)，A为孩妍立4(利扎曲普坦+羟乙基)，*为《斜立5(利扎曲普坦+牛血清蛋白)，*为^斜立6(利扎曲普坦+HA);均以1Omg/kg^合药；mean±SE，n=6;图7表示实施例6中利扎曲普坦经大鼠不同途径给药后，在血浆中的药物浓度随时间变化曲线，其中*为静脉注射给药，令为气管滴注给药，*为鼻腔给药，A为皮下注射，■为口月l灌胃；均以4mg/kgl合药；mean±SE，n=6;图8表示实施例7中3种灯盏花素微粒经大鼠肺部给药后血浆中药物浓度随时间变化曲线，其中令为微粒9(灯盏花素)，躍为微粒IO(灯盏花素+PVA80+PVAP),A为微粒11(灯盞花素+PVA8frfPVAP+HA);均以10mg/kg给药；mean±SE,n=6;图9表示实施例7中灯盏花素经大鼠不同途径给药后血浆中药物浓度随时间变化曲线，其中令为气管给药，隨为静脉注射给药，A为口服灌胃给药；其中气管给药和静脉注射给药剂量为10mg/kg，口月良灌胃给药剂量50mg/kg;为meariSE，n=6。具体实施例方式以下结合具体实施例来进一步描迷本发明。但这些实施例仅仅是范例性的，并不对本发明的保护范围构成^^可限制。本领域技术人员应该理解的是，在不违背本发明精神和范围的情况下，本发明有多种不同的实施方式，或者对本发明技术方案的细节有多种不同的修改或替换，这些均应落A^发明的范围内。实施例l制备利扎曲普坦#^立按下表l所列的处方，分别精密称4"毫明质酸、PVA80、PVA75、羟乙基纤维素或牛血清蛋白粉末，力。入双蒸水100ml，制成溶液。进.行以下喷雾干燥过程。使用布齐B-191小型喷雾干燥机进行喷雾干燥，设定喷雾条件进口溫度14(TC,出口温度90。C,喷口压力600NL/h,风i几风量为最^X量的100。/。，进#+蠕动泵传输效率1%。待^l丈稳^进行喷雾。喷雾完全后，关闭加热装置，待温度降到室温时收集收集器中的4斜封分末，称重后保存在干燥器中，即得利扎曲普坦微粒。表1利扎曲普坦#^立处方<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>实施例2喷雾干燥制备灯盞花素孩M立按下42所列的处方，分别精密称阜灯盞花素、PVP、PVA80、HA,加A200mlpH7.3的磷S^k緩沖溶液进行溶解，加7j^稀释至1000ml后即可进行以下喷雾干燥试验。使用布齐B-191小型喷雾干纟斜/Ui行喷雾干燥，设定喷雾^^牛进口温度140。C，喷口压力600NL/h，贝3几风量为最;^量的100%，进料蠕动泵传输效率1%。待参lt稳定后开始喷雾。喷雾完全后，关闭加热装置，待温度降到室温时收集收集器中的孩M立粉末，称重后^^在干燥器中。表2灯盞花素#*立处方<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>实施例3#|^4面特#粒^^布的测定本实施例采用商业化的日立扫描电镜(SEM)和马尔文激光衍射粒度测定仪，对实施例1和实施例2中制备的微粒的表面特征和粒度分布进行测定。用扫描电镜测定实施例1中制备的獨b粒7、8和实施例2中制备的微粒10、11,结^4明後W立7、8表面呈均匀凹陷型；樣M立IO、ll表面呈均匀的褶皴状。用激光衍射粒度测定仪，以0.1%卵磷脂环己》絲液为分散剂，分别测定实施例1中制备的微粒7和和实施例2中微粒11分布，结果如图1和图2所示，孩^i7的粒度90%分布在5.4inm以下，50%分布在2.4(am以下；微粒11的粒度90%分布在4.2Mm以下，50%分布在2.4^m以下。实施例4,生物縣附性的测定本实施例中，利用蟾蜍上颚粘膜测定微粒的生物l占附性。受试动物为中蜍，体重80-100克。受试药品为实施例1和实施例2中制备的利扎曲普坦微粒和灯盞花素微粒。测定的il睑过详呈首先进行蟾蜍上腭模型的制备破坏趟蜍脑#1逸H賴针对蛙头部和脊柱连接的孔穿刺)后，沿蛙的咽喉处剪断上颚。上腭立即用生理盐水冲洗，粘膜向上放在已润湿的棉花上，放置在恒温加热手术台，保#^显度在25摄]^1,平#!^上额5^4中后进行实验。待测药品溶液的配制由于喷雾干燥制得的微粒可溶于水，在实验中不能直接观察到微粒的移动情况，所以将其制成不同的聚合物溶液，均匀涂4錄粘膜表面，评价聚合物的粘膜粘性。具体而言，称取10mg喷雾干燥粉末，加入0.5ml生理盐水，充分混匀，制成待测的聚合物溶液。然后进行MTR^照的测定务沐而言，首先测定石墨粉末在蟾蜍上颚粘膜上的MTRs墨，方法如下，解剖4十沾耳又少量石墨4分&改于粘膜近口端，并计时，当石墨粉末移动10mm后停止计时，得时间t石墨(min)，计算Mms墨(MTR5flO/tE墨)(mm-min-l)。测定后用生理盐水冲洗干净，再向粘膜上均匀涂抹50^生理盐水，重复上述实验，取其平均值。然后向粘膜上均匀涂抹50W上述聚合物溶液，解剖针沾取少量石墨粉末放于粘膜近口端，并计时，计录石墨移动10mm所用时间，得时间t聚糊(min)，计算MTR^(MTRiR^H0/t3e^)(mnvmin-l)计算MTR百分变化率，公式如下MTR^=100(MTR石墨—MTR糊)/MTR石墨每只蛙粘膜重复实验三次，使用三只蛙上腭实验，每只蛙上腭分别计算MTR石墨，减小实验误差。依上述实验方法，在蟾蜍粘膜上直接放少许石墨粉末，记录时间，计算MTR石墨h清^^上腭粘膜均匀涂抹50ul生理盐水后再放少许石墨粉末，计算MTR石墨2，每只上腭粘膜重复实验三次，作图；五只蟾蛤上腭实验后MTR如图3所示。依上述实验方法，分别对实例1中制备的下述樣M立进行实验《斜立1、#^立2、农妍立3、樣M立4、微粒5、微粒6、微粒7。计算出各自的MRT,以MTR百分变化率的测定方法(Braga,Theeffectsofcalcitoninnasalpreparationsandtheirexcipientsonmucociliaryclearanceinanex-vivofrogpalatetest,丄Pharm.Pharmacol"1992,44(11):938陽940.Aspdenetal.Chitosanasanasaldeliverysystem:Evaluationoftheeffectofchitosanonmucociliaryclearancerateinthefrogpalatemodel.InternationalJournalofPharmaceutics,1995.122(l-2):69-78),测^JUTR百分变4b率并作图。使用不同聚合物经喷雾干燥制得微粒的MTR百分变化率如图4、5所示。实施例5^^立的肺部可^A性体夕hW可吸入评^介按照欧洲药典附录12F(2.9.18)中所乡会出的方法使月多级液态沉积仪(MLSI)的可口AA^^f立^H介方法ii4亍。称4又实施例1和实施例2中制备下述微粒各50mg:微粒11、微粒1、#4立6、孩M立7、微粒8加入到气雾剂罐中，并压加5克HFA134a抛射剂后超声震荡1分钟，放置24小时后进行可欽性刑介。可吸入性评价，参照英国药典2007版附录VEF.(AppendixXIIF.AerodynamicAssessmentofFineParticles-FineParticleDoseandParticleSizeDistribution)中多纟A^态撞击器(ApparatusC-Multi-stageliquidimpinger)部分对气雾剂可"iUv性评价的方法进行。表3孩妍立11重复三次可^AJ测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>表4孩纣立1、6、8在HFA定量气雾剂中可PAA性"W弯头l级2级3级4级微立l百分比"/c57.219.06.2腦5.32.3微立6百分比％27.458.65.82.61.442微立8百分比％20.68.515.434.017.44.1实施例6利扎曲普坦微粒药代动力学#大鼠30只，随机分^i组，每组6只，"^验前已禁食12h。4顿DP-4气管吹入器(Pe皿-century,美国)以12mg/kg剂量将实施例1中制备的利扎曲普坦樣M立樣M立1、微粒2、微粒4、微粒5、微粒6，喷进大鼠肺部，测定可吸入微粒的肺部生物利用度。于给药后不同时间(2,5，10,20,30,60,90,120，180,240min),在大鼠颈静脉#0.2ml,血样置于肝素钠处理过的离心管内，立即离心(4500r/min,5min),分离血浆，存于-2(TC冰箱中，待测。按文ifc^"法(ChunWang，Li-HuiQuan，YiGuo,Chun陽YuLiu,Yong-HongLiao.Uptakeandbiodistributionofrizatriptantobloodandbrainfollowingdifferentroutesofadministrationinrats.InternationalJournalofPharmaceutics.2007(337):155-160)对所耳^jk浆样品处理分析后，才艮据相应标准曲线计算不同样品中利扎曲普坦药物浓度。相同处方的相同时间点计算平均值及其偏差，其均值以时间为横坐标，药物浓度为纵坐标作图，绘制不同处方的药时曲线，结果见图6。通过药时曲线计算相关的药代动力学参数，消除速率常数Ke从静脉注射药时曲线消除段计算得到，药物半衰期丁1/2为0.693/Ke。在血浆中药物浓度一时间曲线下面积AUQ^使用梯形法计募，AUCVoc计算使用AUQH+C/Ke,其中Ct为t时间药物在血浆中的浓度，并计算体内吸收度。结果显示通过添加HA，药物微粒的生物利用度从75,2增加到90.9。为比较不同给药途径的药代动力学差别，利扎曲普坦溶液分别进行口服、皮下、鼻腔、静脉注射和气管五种方式给药。通过HPLC分析血药含量后，分别对5种给药途径血浆中利扎曲普坦药物浓度随时间变化绘制药时曲线，结果见图7,并计算药代动力学参数。计算得到的相关药代动力学.#1丈如下表5所示表5经不同途^^药血中药代动力学^lt<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>实施例7灯盞花素药代动力学，目的确定灯盞花素经大鼠静脉给药、气管喷雾给药和灌胃给药后的药代动力学特征，确定灯盞花素经大鼠气管喷雾给药的绝对和相对生物利用度。j64羊中药物^J:分析^^I美国Agilent公司Agilent1200高效液相色谱串联美国应用生物系统/>司3200QTRAP质谱系统，包括电喷雾电离源(ESI)及Analyst软件系统。色谱条件为色谱柱WatersXTrraC8反相柱(2.1x50mm，3.5pm);流动相乙腈1%甲酸7K溶液(20:80,v/v);if邊200pl/min;柱温40°C;进样量20pl。质谱^f牛为ESI离子源，加热毛细管温度350°C,喷雾电压-4500V,雾化气压60kPa，辅助气压力40kPa。负离子方式，选择性多反应监测(MRM),离子^分别为m/z461.0~285.0(灯盏乙素)和m/z445.0~269.0(黄茶苦，内标)，碰撞能量均为-32eV。il睑过程成年雄性大鼠36只，在SPF动物房祠养一周后，称重，随机分为6组，每组6只，实验前禁食12小时，自由饮水。取大鼠称重并编号，按40mg/kg的剂量船空注射8mg/ml戊巴比妥纳溶氣寐醉。第1组、第2组、第3组^iIDP-4气管吹入器(Penn-century,美国)以10mg/kg剂量分别将实施例2中制备的灯盞花素微粒微粒9、微粒10、微粒11,喷进大鼠肺部；第4组按10mg/kg的剂量静脉注射10mg/ml灯盞花素(98%纯品)溶液；第5组按10mg/kg的剂量气管喷雾给药10mg/ml灯盞花素(98%纯品)溶液；第6组按50mg/kg的剂量灌胃给药10mg/ml灯盞花素(98%纯品)溶液。分别在给大鼠给药后的5、15、30、45、60、120、180、240、360、480min时，经颈静》科又血200置于1.5ml离心管中，5000r/min离心5mm。移耳又上层血浆50nl,置于另一个1.5ml离心管中，加入IO|^120%的焦硫酸钠溶液，放置水箱中-20。CM絲。取所得血浆，加入黄茶普内标液(535ng/mL)50^1,力口1^2050^，再加入磷酸(50%)20^1，在快速混匀机上混匀，放置5mm,加入800mg乙酸乙酯，〉V曰e4口1min，10000r/min离心1min,耳又上层有^4目7()()mg,置于1.5ml离心管中，35°C氮气吹干，残留物加200^流动相[乙14腈1%曱酸7^溶液(20:80,v/v)]涡旋溶解，15000r/min离心1min,分取上清液，取20(il进行LC-MS/MS分析，按内标标准曲线法以峰面积比进行定量测定。实验结果分别对3种灯蓋花素微^ii会药后血中灯盞花素药物浓度随时间变fl^会制药时曲线，结果见图8。分别对3种给药途^jk浆中灯盞花素药物浓度随时间变^i会制药时曲线，结果见图9。药代动力学参数计算得到相关药代动力学参数，如下表6和表7所示表63种灯盞花素#^^药后血中药代动力学##!:_微立l_微立2_微立3AUC國(Mg/ml，min)130.6±3.7157.亂0183.3±7.8^生物利用度％69.2±2.083.2±3.297.2±4.2Cmax(ng/ml)>4990.9±509.8>5695.1±691.4〉3628.2.1±522.9T鹏(min)<5.0<5,0<5.0_表7经不同途^^药血中药代动力学M__静脉注射气管滴注_口月魄胃AUCo_24o(Mg/ml，min)188.6±9.4145.7±6.421.85±4.3^生物利用度％-77.2±3.72.3C咖x(ng/ml)>8232.4±790.9>1140.2±137.8<100T咖加in)<5.0<5.0>200权利要求1、一种药用可吸入微粒，除了含有作为活性成分的药物外，还含有成褶皱或凹陷物质、生物黏附剂和高分子聚合物，所述微粒通过喷雾干燥制备。2、如权利要求1所述的摆M立，其特4碌于，所述孩M立表面呈褶铍状或凹陷状。3、如权利要求1或2所述的微粒，其特;f正在于，所述彭習铍或凹陷物质选自tt酸、PVA、PVP、白蛋白和石痒脂(例如J^斜鹏臾磷脂咖a减、卵磷脂等)中的一种或多种；和/或所述生物私附剂使用透明质酸、可溶性曱壳素及期汙生物和/或粘蛋白；和/或所述高^"f聚^f勿是选自透明质酸、可溶性曱壳素及其衍生物、PVA、PVP、羟乙基纤维素和牛血清蛋白中的一种或多种。4、如权利要求3所述的摆M立，其特44于，所述成褶铍或凹陷物质的^^1量为药物贫M立总重量的5-60%,优选10-20%。所述生物教附剂的使用量为药物微粒总重量的5-60%,优选10-20%。所述高分子聚合物的使用量为药物孩i粒总重量的5-60%，优选10-20%。5、如权利要求1-4之一所述的微粒，其特征在于，所述药物为奈多罗米钠、色甘酸钠、曲普坦类药物(例如，利扎曲普坦、佐米曲普坦等)、阿朴吗啡、灯盞花素或灯盞花素肝素钠复方等，尤其是曲普坦和灯盞花素。6、权利要求1-5之一所迷的微粒，其特征在于，微^i4立径的平均几何值为lOpm或更小，优选至少90%#*封立径小于10(im，优选70。/。以上孩iif:ili径分布在lpm5nm范围内。7、权利要求l-6所述微粒的制备方法，该方法包括将药物与辅料(成褶铍或凹陷物质、生物黏附剂和高分子聚合物)溶解于溶剂中，然后将药物与辅料的';n溶液通过喷雾干燥制成药用可口A7v微粒。8、顿权利要求l-7所述微粒的肺部可级人制剂。9、如权利要求8所述的肺部可吸入制剂，其为定量^及入气雾剂，优选其中所用抛射剂为氛IU克烃类抛射剂，如HFA-134a、HFA-227等。10.'如权利要求8所述的肺部可吸入制剂，其为干斗分^及入剂。全文摘要本发明公开了一种药用可吸入微粒、使用其的肺部吸入制剂及其制备方法。所述药用可吸入微粒经喷雾干燥制备，其除了含有作为活性成分的药物外，还含有成褶皱或凹陷物质、生物黏附剂和高分子聚合物。该微粒在定量吸入气雾剂中，无需添加共溶剂或表面活性剂就具有很好的分散性和分散稳定性，没有发生明显聚集、絮凝等现象，还具有良好的肺部可吸入性。文档编号A61K47/24GK101433521SQ20071017732公开日2009年5月20日申请日期2007年11月14日优先权日2007年11月14日发明者刘春雨,刘晓彬,廖永红,权丽辉,淳王申请人:中国医学科学院药用植物研究所