专利名称：：一种全氟化碳乳剂及其制备方法
技术领域：
：本发明属于医药制备
技术领域：
，具体涉及一种全氟化碳乳剂及其制备方法。
背景技术：
：全氟碳化物具有疏水疏油性,其磁化率与水接近，，对气体的溶解能力高、密度大、易扩散。其携氧能力高，在病理状态可释放82%的氧，超过患者自身红细胞的供氧能力。其表面张力低、粘度适中、流动性好、蒸汽压高，便于经呼吸道排出，不参与人体新陈代谢。氟化碳液体具有人血样的重要功能，能将从肺部吸进的氧气输送到人体的各个部位，又能将各个脏器排出的二氧化碳输送到肺部排出体外。全氟化碳输送气体是个单纯的物理溶解过程，氧气和二氧化碳机易溶解在全氟化碳液体中，在流动中完成气体的传递。100毫升的全氟化碳能溶氧气50毫升，是人血载氧能力的50倍；全氟化碳和氧的结合速度是14-20毫秒，比红血球快得多。同时由于其呈化学和生物惰性，所以具有不需要配型，生物相容性好的优点，同时，全氟化碳可以通过呼吸完全排出体外。ttl此可见，全氟化碳是较理想的血液代用物。早在1966年Clark和Gollan就开始考虑将氟碳化合物作为红细胞代用品，并且进行了动物实验。1979年美国和R本分别开始研制可用于临床的氟碳化合物。因氟碳化合物粘稠，表面张力很小，难溶于水，直接静脉注射极易造成栓塞，但可以其为原料制成与人体血液的pH、电解质浓度、渗透压相似的并具有良好载氧功能的乳剂。全氟碳乳剂的优点在于其不参与生物代谢，输注时无需配型，携氧能力强(是人血的50倍)，保质期长(可达3年)，价格低廉，原料易得，粒径小(是红细胞体积的l/80);是一种新型的血液代用品。目前己经冇法闺、中国、俄罗斯、Fl本等国家在20世纪7080年代对全氟化碳乳剂进行了全面、详细的研究，部分产品进入临床试验。以上闺家研究的产品大多数采用了泊洛沙姆F-68为表面活性剂，虽然部分取得了成功，例如俄罗斯的Pt、rftoran在俄罗斯上巿销售，但是其共同的副作用在于可以使机体补体激活，导致血J丄:突将，白细胞升高。说明其生物相容性还不够好，同时该类产品还存在不能采用流通蒸汽灭菌及需要冷冻保存的缺点。氟碳乳不仅具有良好的扩容、携氧能力，而且可以避免输血可能带來的一系列fuj题，是一种新型的血液代用品，因此该项目的开展，必然有着深刻的现实意义。
发明内容针对
背景技术：
存在的缺陷或不足，本发明的目的是提供一种可非冷冻储存，副作用小的新型全氟化碳乳剂及其制备方法。为了实现上述任务，本发明采用如下的技术解决方案一种全氟化碳乳剂，其特征在于，该全氟化碳乳剂的平均粒径小于400nm，pH值为49.5，渗透压为270mMOS310mMOS;其中包含有作为药物的全氟萘烷和全氟-N-4-甲基环己基哌啶，它们在全氟化碳乳剂中的最终体积比例为5%30%，其中，全氟萘垸和全氟-14-甲基环己基哌啶的体积比为100%:00:100%;作为乳化剂的磷脂，该磷脂在全氟化碳乳剂中的最终浓度为0.5%4.0%。上述全氟化碳乳剂的制备方法，其特征在于，该方法包括以下歩骤(1)将适量的磷脂分散于水或者分散于含有稳定剂及渗透压调节剂的缓冲液中，制备磷脂分散液；(2)将全氟化合物全氟萘烷及全氟-N-4-甲基环己基哌啶按体积比混合制备氟碳混合液体；(3)将歩骤(2)中所得到的氟碳混合液体分散在歩骤(1)中得到的磷脂分散液中，形成初乳(4)将歩骤(3)中得到的初乳进行均质或微射流，形成稳定的乳液，将该乳液分装、灭菌，即得全氟化碳乳剂；或者将该乳液与含有稳定剂及渗透压调节剂的缓冲液按比例混合，分装、灭菌，即得全氟化碳乳剂。本发明的全氟碳乳剂具有粒径小，并可在非冷冻状态下储存，是--种新型的人工氧气载体制剂。图1是Per「toran0天的粒度分布图；阁2是l)erl'toran5天的粒度分布图；图3是Perftoranl()天的粒度分布图；图4是Perftoran30天的粒度分布图图5是Perftoran90天的粒度分布图图6是本发明的产品0天的粒度分布图；图7是本发明的产品5天的粒度分布图图8是本发明的产品IO天的粒度分布图；图9是本发明的产品30天的粒度分布图；图10是本发明的产品90天的粒度分布以下结合附图和发明人给出的实施例对本发明作进一步的详细说明。具体实施例方式本发明制备的全氟化碳乳剂，其平均粒径小于400nm，pH值为49.5，渗透压为270mMOS3iOmMOS;其中包含有作为表面活性剂的磷脂，该磷脂在全氟化碳乳剂中的最终浓度为0.5%4.0%;作为药物的全氟萘烷和全氟-N-4-甲基环己基哌啶，它们在全氟化碳乳剂中的最终比例为5%30%，其中，全氟萘烷和全氟-N-4-甲基环己基哌啶的体积比为100%:00:100%。其全氟化碳乳剂的制备方法包括以下步骤(1)将一定量的磷脂分散于水或者含有稳定剂及渗透压调节剂的缓冲液中，制备磷脂分散液。(2)将全氟化合物全氟萘烷(perfluorodecalin，PFD)及全氟-N-4-甲基环己基哌啶(perfluoro-N-(4iethylcyclohexyl)-piperidine，PFMCP)按一定体积比混合制备氟碳混合液体。(3)将步骤(2)中所得到的一定量的氟碳混合液分散在步骤U)中得到的磷脂分散液中，形成初乳。(4)将步骤(3)中得到的初乳在一定压力条件下均质或微射流形成稳定的乳液，完成后将该乳液分装、灭菌，即得全氟化碳乳剂；或者将该乳液与含有稳定剂及渗透压调节剂的缓冲液按比例彌含，分装、灭菌，即得全氟化碳乳剂。磷脂为蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂或氢化大豆卵ff森脂。其在乳剂中的最终浓度为0.54.0%(w/v)，其最佳浓度为1.23%(w/v)。磷脂分散在水中的方法可以是搅拃、高速剪切或者均质。磷脂分散温度为208(rC，最佳温度为3555X:。氣碳混合液体由全氟萘烷(perf丄uorodecalin,PFD)及全氟-N-4-甲基环己基哌喷(perfluoro-N-(4-methylcyclohexy1)-piperidine，PFMCP)组成，其组分体积比例为100:0%(v/v)0:100%(v/v)，其最佳比例为100%:0%(v/v)60%:40%(v/v)。氟碳混合液体在乳剂中的体积百分比例为5%30%(v/v)。可以用高速减切、高压均质或者微射流的方法将氟碳混合液体与憐脂分散液体混合而形成稳定的乳液。制备稳定乳液过程中的温度应当控制在208(TC，最佳温度为3555°C。将稳定的乳液与含有稳定剂及渗透压调节剂的缓冲液混合后分装灭菌，其体积比例是10:00:6,5，其最佳比例为10:02:1。缓冲液为磷酸盐缓冲液，拧檬酸盐缓冲液或者碳酸盐缓冲液等，其pH值范围为49.5。缓冲液含有稳定剂及渗透压调节剂。稳定剂可以是焦磷酸钠，焦亚磷酸钠，次亚磷酸钠，EDTA-2Na，a—生育酚，焦亚硫酸钠，亚硫酸氢钠，抗怀血酸等中的一种或多种。稳定剂在乳液中的最终含量为01.5%，在乳液中的最佳浓度为0.020.5%;渗透压调节剂可以是氯化钠，甘油，葡萄糖，氨基酸，山梨醇或者甘露醇中的一种或多种。以下是发明人给出的实施例，需要说明的是，这些是一些较佳的例子，本发明不限于这些实施例，根据申请人的实验证明，本发明给出的技术方案内，均可以达到本发明的目的。实施例1:处方PFD6(MPFMCP40m丄蛋黄卵磷脂5g磷酸氢二钠0.284g磷酸二氢钠0.24g甘油25g注射用水适量制法一整个过程在氮气保护下进行。取PFD和PFMCP，搅匀，加热至80'C土5'C，作为油相，备用。另取注射用水迠量，加热至8()°C±5°C，加入磷酸氢二钠和磷酸二氢钠和甘油，搅拌至溶解，然后加入蛋黄卵磷脂，强力搅拌至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时W，然后用高压均质机进行均质，保持均质温度为60°C±5°C，调节均质压力及均质次数，使平均粒径在400nm以下，加注射用水至1000ml，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(12rC、20分钟)，即得。制法二-整个过程在氮气保护下进行。取注射用水875ml，加入磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和甘油，搅拌至溶解，作为等渗缓冲液，备用。取PFD和PFMCP，搅匀，加热至8(TC土5。C，作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至8(TC土5。C，加入蛋黄卵磷脂，强力搅拌至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，然后用高压均质机进行均质，保持均质温度为60°C±5°C，调节均质压力及均质次数，使平均粒径在400nni以下，均质完毕，加入等渗缓冲液，加注射用水至1000ml，搅匀，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(12rC、20分钟)，即得。以上两种制法所得产品的pH值均为7.2±0.5，平均粒径约为28()rai，渗透压约为290m0sm士20m0sm。实施例2:处方PFD140mlPFMCP60ml蛋黄卵磷脂20g磷酸氢二钠0.284g磷酸二氢钠0.24g维生素E0.lg氯化钠7.92g注射用水适量全量l()()()ml.制法一整个过程在氮气保护下进行。取PFD和PFMCP，搅匀，加热至40t:土5。C，作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至4(TC士5。C，加入磷酸氢二钠和磷酸二氢钠和氯化钠，搅拌至溶解，然后加入维生素E和蛋黄卵磷脂，强力搅拌至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅袢一段时间，然后用高压均质机进行均质，保持均质温度为4(TC±5°C，调节均质压力及均质次数，使平均粒径在400nm以下，加注射用水至lOOOml，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(121°C、20分钟)，即得。制法二整个过程在氮气保护下进行。取注射用水500ml，加入磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和氯化钠，搅拌至溶解，作为等渗缓冲液，备用。取PFD和PFMCP，搅匀，加热至4(TC土5。C，作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至4(TC土5'C,加入维生素E和蛋黄卵磷脂，强力搅拌至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，然后用高压均质机进行均质，保持均质温度为4(TC土5"C，调节均质压力及均质次数，使平均粒径在400nm以下，均质完毕，加入等渗缓冲液，加注射用水至1000ml，搅匀，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(12rC、20分钟)，即得。以上两种制法所得产品的pH值均为7.2±0.5，平均粒径约为250nrn，渗透压约为290mOsm土20mOsm。实施例3:处方PFD300ml蛋黄卵磷脂40g柠檬酸钠1.55g盐酸(0.ltnol/L)40ml维生素Elg葡萄糖44.3g注射用水适量全量1000ml制法整个过程在氮气保护下进行。収注射用水适量，加入柠檬酸钠、盐酸(0.lmol/L)和葡萄糖，搅拌至溶解，然后加入维生袤E和蛋黄卵磷脂，高速剪切至分散均匀，缓缓加入PEI)，加完后再搅拌一段时间，然后用卨压均质机进行均质，保持均质温度为25°C±5'C,调节均质压力及均质次数，使平均粒径在400nm以下，加注射用水至100()ml，充氮分装，密封，湿热高压灭菌G2rC、15分钟)，即得。所得产品的pH值为4.5±0.5，平均粒径约为220nm，渗透压为290inO，土2(W)sm。实施例4:处方PFMCPIO(M氢化大豆磷脂5g磷酸二氢钾2.72g氢氧化钠0.285g维生素E5g甘露醇32.7g注射用水适量"1画ml制法整个过程在氮气保护下进行。取注射用水250ml，加入磷酸二氢钾、氢氧化钠和甘露醇，搅拌至溶解，作为等渗缓冲液，备用。取PFMCP，搅匀，加热至4(TC土5'C,作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至4CTC土5。C，加入维生素E和氢化大豆磷脂，高速剪切至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，然后用高压均质机进行均质，保持均质温度为4(TC土5。C，调节均质压力及均质次数，使平均粒径在400nm以下，均质宪毕，加入等渗缓冲液，加注射用水至lOOOml，搅匀，充氮分装，密封，湿热高压灭菌U21'C、20分钟)，即得。所得产品的pH值为6.5土0.5，平均粒径约为140隨，渗透压为29(M)sm土20m0sm。实施例5:处方PFD160m丄PI,CP40m丄氢化大豆磷脂20g甘氨酸3.56g氣化钠2.78g氢氧化钠0.lg焦磷酸钠()lg山梨醇12g注射用水_适量全量1000ml制法整个过程在氮气保护下进行。取PFD和PPMCP，搅匀，加热至40。C士5'C，作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至4(TC士5'C，加入甘氨酸、氯化钠、氢氧化钠、焦磷酸钠和山梨醇，搅拌至溶解，然后加入氢化大豆磷脂，高速剪切至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，然后用高压均质机进行均质，保持均质温度为4(TC土5。C，调节均质压力及均质次数，使平均粒径在400nm以下，加注射用水至1000ml,充氮分装，密封，湿热高压灭菌(L21°C、i5分钟)，即得。实施例6:处方-PFD30mlPFMCP27(M氢化大豆磷脂40g磷酸二氢钾5.07g碳酸氢钠0.48g焦磷酸钠5g注射用水__全量1000ml制法一整个过程在氮气保护下进行。取PFD和PFMCP,搅拌，加热至8(TC士5。C，作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至8(TC土5X:，加入磷酸二氢钾、碳酸氢钠和焦磷酸钠，搅拌至溶解，然后加入氢化大豆磷脂，强力搅拌至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，制得初乳，调P微射流袋压力，使初乳匀速通过微射流泵，保持乳液温度在W)。C士5。C'并使乳液的平均粒径在4()()nm以下，加注射用水至,ml，充氮分装，密封，湿热岛压灭菌(12TC、ir)分钟.)，即得。制法二整个过程在氮气保护下进行。取注射用水250ml，加入磷酸二氢钾、碳酸氢钠和焦磷酸钠，搅拌至溶解，作为等渗缓冲液，备用。取PFD和PFMCP，搅匀，加热至8(TC土5'C，作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至8crc土rrc，加入氢化大豆磷脂，强力搅拌至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，制得初乳，调节微射流泵压力，使初乳匀速通过微射流泵，保持乳液温度在60。C土5'C，并使乳液的平均粒径在400nm以下，加入等渗缓冲液，加注射用水至lOOOml,搅匀，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(12rC、15分钟)，即得。以上两种制法所得产品的pH值均为6.0±0.5，平均粒径约为l'30nm,渗透压约为290m0sm土20mOsm。实施例7:处方PFD70mlPFMCP30ml大豆磷脂5g醋酸1.77g醋酸钠5.78g焦磷酸钠10g注射用水__全量1000ml制法一整个过程在氮气保护下进行。取PFD和PFMCP，搅拌，加热至4(TC土5'C，作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至40'C±5°C，加入醋酸、醋酸钠和焦磷酸钠，搅拌至溶解，然后加入大豆磷脂，高速剪切至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，制得初乳，调节微射流泵压力，使初乳匀速通过微射流泵，保持乳液温度在40°C±5°C，并使乳液的平均粒径在4()0nm以下，加注射用水至10()0ml，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(12rC、15分钟)，即得。制法二整个过程在氮气保护下进行。取注射用水2()0ml.，加入醋酸、醋酸钠和焦磷酸钠，搅拌至溶解，搅拌至溶解，作为等渗缓冲液，备用。取PFD和PFMCP，搅匀，加热至4(TC土5r，作为油相，备用。另取注射用水适置，加热至40t:土5'C，加入大豆磷脂，高速剪切至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，制得初乳，调节微射流泵压力，使初乳匀速通过微射流泵，保持乳液温度在4(TC土5'C，并使乳液的平均粒径在4()()nm以下，加入等渗缓冲液，加注射用水至1000ml，搅匀，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(12rC、15分钟)，即得。以上两种制法所得产品的pH值均为5.0±0.5,平均粒径约为HOnm，渗透压约为290mOsm土20m()sm。实施例8:处方PFD70mlPFMCP30ml大豆磷脂20g酒石酸0.M3g酒石酸钠3.14g次亚磷酸钠0.lg甘油20.4g注射用水__全量1000ml制法整个过程在氮气保护下进行。取PFD和PFMCP，搅匀，作为油相，备用。另取注射用水适量，加入酒石酸、酒石酸钠、次亚磷酸钠和甘油，搅拌至溶解，然后加入大豆磷脂，强力搅拌至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，制得初乳，调节微射流泵压力，使初乳匀速通过微射流泵，保持乳液温度在25°C±5°C，并使乳液的平均粒径在400nni以下，加注射用水至1000ml，分装，湿热高压灭菌(U6°C、40分钟)，即得。所得产品的pH值为4.5±0.5，平均粒径约为180nm，渗透压为29(M3sm土20ni0sni。实施例9:处方PFD30mlPFMCP70ml大豆磷脂4()g乳酸0.27g乳酸钠10.86g次亚磷酸钠ig注射用水__全量1000ml制法整个过程在氮气保护下进行。取注射用水250ml，加入乳酸、乳酸钠和次亚磷酸钠，搅拌至溶解，作为等渗缓冲液，备用。取PFD和PFMCP，搅匀，作为油相，备用。另取注射用水适量，加入大豆磷脂，强力搅拌至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，然后用高压均质机进行均质，保持均质温度为25r土5t:,调节均质压力及均质次数，使平均粒径在400nm以下，加入等渗缓冲液，加入注射用水至1000ml，搅匀，分装，湿热高压灭菌(12rC、20分钟)，即得。得产品的pH值为4.5±0.5，平均粒径约为190nm，渗透压为290m0sm士20m0sm。实施例10-处方-PFD70mlPFMCP30ml氢化蛋黄卵磷脂5g氢氧化钠适量次亚磷酸钠5g果糖12g注射用水适量全量1000ml制法一取PFD和PFMCP，搅匀，加热至8(TC土5。C,作为油相，备用。另取注射用水适量，加入次亚磷酸钠和果糖，搅拌至溶解，然后用氢氧化钠调节pH值至8.5士().5，加热至8()°C±5°C，然后加入氢化蛋黄卵磷脂，高速剪切至分散均匀，缓缓加入油相，加完后界搅拌一段时间，然后用高压均质机进行均质，保持均质温度为60°C±5°C,调节均质压力及均质次数，使平均粒径在400nm以下，加注射用水至lOO()ml，分装，湿热卨压灭齒(il5'C、30分钟).即得。制法二取注射用水75()ml，加入次亚磷酸钠和果糖，搅拌至溶解，作为等淺缓冲液，备用。取PFD和PFMCP，搅匀，加热至8(TC土5r，作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至8(TC土5t:，加入氢化蛋黄卵磷脂，高速剪切至分散均匀，缓缓加入油相，加完后两搅拌一段时间，然后用高压均质机进行均质，保持均质温度为6(rc土5r，调节均质压力及均质次数，使平均粒径在400nm以下，加入等渗缓冲液，搅匀，用氢氧化钠调节pH值至8.5±0.5,加入注射用水至1000ml，搅匀，分装，湿热高压灭菌(115°C、30分钟)，即得。以上两种制法所得产品的pH值均为6.5±0.5，平均粒径约为160nm，渗透压约为290mOsm土20mOsm。实施例11:处方PFD90mlPFMCP編氢化蛋黄卵磷脂20g谷氨酸13gEDTA-2Na0.lg注射用水_55_全量1000ml制法一-整个过程在氮气保护下进行。取PFD和PFMCP，搅匀，加热至4(TC土5t:，作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至40'C土5t:，加入谷氨酸和EDTA-2Na，搅拌至溶解，然后加入氢化蛋黄卵磷脂，高速剪切至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，制得初乳，调节微射流泵压力，使初乳匀速通过微射流泵，保持乳液温度在4(rC±5°C，并使乳液的平均粒径在400,以下，加注射用水至1000ml，充氮分装，密封，湿热高压灭菌U2rC、15分钟)，即得。制法二整个过程在氮气保护下进行。取注射用水125ml，加入谷氨酸和EDTA-2Na，搅拌至溶解，作为等渗缓冲液，备用。取i刊和pfm(:p，搅匀，加热至4(rc土5。c，作为油相，各用。另取沐射用水适:I:，加热至40°C±5°C，加入氢化蛋黄卵磷脂，高速剪切至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，制得初乳，调节微射流泵压力，使初乳匀速通过微时流泵，保持乳液温度在4(TC土5。C,并使乳液的平均粒径在400nm以下，加入等渗缓冲液，加注射用水至i000iTi1，搅匀，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(121°C、15分钟)，即得。以上两种制法所得产品的pH值均为5.0±0.5,平均粒径约为M0師，渗透压约为2卯mOsm土20mOsm。实施例12:处方PFDSoilPFMCP95ml氢化蛋黄卵磷脂40g碳酸钠0.53g碳酸氢钠7.56gEDTA-2Na2g注射用水_51_全量1000ml制法取PFD和PFMCP，搅匀，作为油相，备用。另取注射用水适量，加入碳酸钠、碳酸氢钠和EDTA-2Na，搅拌至溶解，然后加入氢化蛋黄卵磷脂，强力搅拌至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，然后用高压均质机进行均质，调节均质压力及均质次数，使平均粒径在400師以下，加注射用水至1000ml，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(12rc、20分钟)，即得。所得产品的pH值为9.0±0.5，平均粒径约为170nm，渗透压为290mOsm土20m()sm。实施例13:处方PFD70mlPFMCP3C)tnL蛋黄卵磷脂2()g柠檬酸2.52g憐酸氢二钠7.85gEl)TA-2Na5g注射用水__制法取注射用水250ml，加入柠檬酸、磷酸氢二钠和EDTA-2Na，搅拌至溶解，作为等渗缓冲液，备用。取PTO和PFMCP，搅匀，加热至4(TC土5t:，作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至4(TC土5t:，加入蛋黄卵磷脂，强力搅拌至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，制得初乳，调节微射流泵压力，使初乳匀速通过微射流泵，保持乳液温度在40°C±5°C,并使乳液的平均粒径在400以下，加入等渗缓冲液，加注射用水至1000ml，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(12rC、20分钟)，即得。所得产品的pH值为6.3±0.5，平均粒径约为180nm，渗透压为290mOsm±20mOsin。实施例14:处方PFD70mlPFMCP30ml蛋黄卵磷脂20g行檬酸.2.52g磷酸氢二钠7.85gEDTA-2Na2g维生素E2g注射用水_5^_全量1000ml制法取PFD和PFMCP，搅匀，加热至4(TC土5'C，作为油相，备用。取注射用水适量，加入柠檬酸、磷酸氢二钠和EDTA-2Na，搅拌至溶解，加热至40°C土5。C，加入维生素和蛋黄卵磷脂，强力搅拌至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅袢一段时间，然后用高压均质机进行均质，调节均质压力及均质次数，使平均粒径在400nm以下，加注射用水至lO()Oml.，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(12TC、15分钟)，即得。所得产品的pH值为6.3±0.5，平均粒径约为180nm，渗透压为29()mOsm士2(M)sm。实施例15:处方卩卩D70ml.PFMCP30ml蛋黄卵磷脂20g磷酸氢二钠0.43g磷酸二氢钠0.36g焦磷酸钠5g维生素E2g氯化钾6.5g注射用水__全量1000ml制法取注射用水333ml，加入磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、焦磷酸钠和氯化钾，搅拌至溶解，作为等渗缓冲液，备用。取PFD和PFMCP，搅匀，备用。另取注射用水适量，加热至4(TC土5t:，加入维生素和蛋黄卵磷脂，强力搅拌至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，制得初乳，调节微射流泵压力，使初乳匀速通过微射流泵，并使乳液的平均粒径在400nm以下，加入等渗缓冲液，加注射用水至1000ml，充氮分装，密封，湿热高压灭菌G15。C、30分钟)，即得。所得产品的pH值为6.3±0.5，平均粒径约为180nm，渗透压为290mOsm土20m()sm。实施例16-处方PFD70mlPFMCP3(M蛋黄卵磷脂20g磷酸氢二钠0.57g磷酸二氢钠0.48g焦磷酸钠2gEDTA-2Na0.2g甘油10g氯化钠2.9g注射用水__全量1000m丄制法取PFD和PRCP，搅匀，作为油相，备用。取注射用水适量，加入磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、焦磷酸钠、E眼-2Na、氯化钠和甘油，搅拌至溶解，加热至40'C±5°C，加入蛋黄卵磷脂，强力搅拌至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌-一段时间，制得初乳，调节微射流泵压力，使初乳匀速通过微射流泵，并使乳液的平均粒径在400nm以下，加注射用水至K)00ml，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(12厂C、20分钟)，即得。所得产品的PH值为6.3±0.5，平均粒径约为180nm，渗透压为290m0sm士20m0sm。实施例17-处方PFD300ml蛋黄卵磷脂40g拧檬酸钠1.55g盐酸(0.lmol/L)40ml抗坏血酸lg亚硫酸氢钠0.5g葡萄糖44.3g注射用水适量錢1000ml制法-整个过程在氮气保护下进行。取注射用水适量，加入柠檬酸钠、盐酸(0.lmol/L)和葡萄糖，搅拌至溶解，然后加入维生素E和蛋黄卵磷脂，高速剪切至分散均匀，缓缓加入PED，加完后再搅拌一段时间，然后用高压均质机进行均质，保持均质温度为25°C±5°C，调节均质压力及均质次数，使平均粒径在40O圆以下，加注射用水至1000ml，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(12rC、15分钟)，即得。所得产品的pH值为4.5±0.5，平均粒径约为220nra，渗透压为29(kOs(n土2(M)sm。实施例18:处方PFMCPL00ml氢化大豆磷脂5g磷酸二'fi钾2.72g氢氧化钠().285g焦亚硫酸钠2g甘露醇32.7g注射用水适量全量1000ml制法整个过程在氮气保护下进行。取注射用水250ml，加入焦亚硫酸钠、磷酸二氢钾、氢氧化钠和甘露醇，搅拌至溶解，作为等渗缓冲液，备用。取PFMCP，搅匀，加热至4(TC土5'C，作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至4(TC土5。C，加入维生素E和氢化大豆磷脂，高速剪切至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，然后用高压均质机进行均质，保持均质温度为4(TC士5C调节均质压力及均质次数，使平均粒径在4()0nm以下，均质完毕，加入等渗缓冲液，加注射用水至1000ml，搅匀，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(12rC、20分钟)，即得。所得产品的pH值为6.5±0.5，平均粒径约为140nm，渗透压为290mOsm土20mOsm。实施例19:处方PFDl編PFMCP60ml蛋黄卵磷脂20g磷酸氢二钠0.284g磷酸二氢钠0.24g维生素E0.lg甘油22.5g注射用水适量全量1000m丄制法整个过程在氮气保护下进行。取PR)和PFMCP，搅匀，加热至4(TC士5。C，作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至犯'c士5r，加入磷酸氢二钠和磷酸二氢钠和甘油，搅拌至溶解，然后加入维生煮E和蛋黄卵(森脂.采用高剪切乳化剂分散，缓缓加入油相，加完后继续剪切至分散均匀，然后用高压均质机进行均质，保持均质温度为40'C土5'C，调节均质压力及均质次数，使平均粒径在200nm以下，加注射用水至l()O()ml,充氮分装，密封，湿热高压灭菌(121°C、20分钟)，即得。所得产品的[)H值均为7.2±0.5，平均粒径约为l'!2nm,渗透压约为290m0sm土2(M)sni。实施例20:处方PFD35mlPFMCP15ml蛋黄卵磷脂20g杆檬酸钠1.55g盐酸(0.1歸1/L)40ml泊洛沙姆1882g吐温803g维生素Elg葡萄糖44.3g注射用水适量全量翻ml制法整个过程在氮气保护下进行。取注射用水适量，加入柠檬酸钠、吐温80、泊洛沙姆188、盐酸(0.1mol/L)和葡萄糖，搅拌至溶解，然后加入维生素E和蛋黄卵磷脂，高速剪切至分散均匀，缓缓加入PED和PFMCP，加完后再搅拌一段时间，然后用高压均质机进行均质，保持均质温度为25°C±5°C，调节均质压力及均质次数，使平均粒径在400，以下，加注射用水至1000ml，充氮分装，密封，湿热高压灭菌(121'C、15分钟)，即得。所得产品的pH值为4.5±0.5，平均粒径约为220nin，渗透压为290mOsm土20mOsm。实施例21:处方PFD70mlPFMCP30ml大豆磷脂5g醋酸l.77g醋酸钠5.78g焦磷酸钠10g聚氧乙烯40硬脂酸酯4g注射用水_适量全量1000ml整个过程在氮气保护下进行。取PFD和PFMCP，搅拌，加热至4(TC土5'C，作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至4(TC土5。C，加入醋酸、醋酸钠、聚氧乙烯40硬脂酸酯和焦磷酸钠，搅拌至溶解，然后加入大豆磷脂，高速剪切至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，制得初乳，调节微射流泵压力，使初乳匀速通过微射流泵，保持乳液温度在4(TC±5°C，并使乳液的平均粒径在400nm以下，加注射用水至1000ml，充氮分装，密封，湿热高压灭菌U15。C、30分钟)，即得。上述制法所得产品的PH值均为5.0±0.5，平均粒径约为140nm，渗透压约为290mOsm土20mOsm。实施例22-处方PFD70mlPFMCP30ml氢化蛋黄卵磷脂5g聚氧乙烯蓖麻油甘油酯3g次亚磷酸钠5g果糖12g氢氧化钠适量注射用水_55_全量1000ml整个过程在氮气保护下进行。取注射用水750ml，加入次亚磷酸钠、聚氧乙烯蓖麻油甘油酯和果糖，搅拌至溶解，作为等渗缓冲液，备用。取pfd和pfmcp，搅匀，加热至8(rc土rrc，作为油相，备用。另取注射用水适量，加热至80°c±5r:，加入氢化蛋黄卵磷脂，高速剪切至分散均匀，缓缓加入油相，加完后再搅拌一段时间，然后用高压均质机进行均质，保持均质温度为6(TC士5。C，i周节均质压力及均质次数，使平均粒径在40()nm以下，加入等漆缓冲液，搅匀，用氢氧化钠调节pH值至8.5土0.5，加入注射用水至lOOOml，搅匀，分装，湿热高压灭菌(115匸、30分钟)，即得。上述制法所得产品的ph值均为6.5±0.5，平均粒径约为160niTi，渗透压约为29()mOsm土2()mOsm。上述实施例还可以例举许多，限于篇幅，不再一一列举，但只要在本发明技术方案给出的范围内，均可以达到本发明的目的。上述实施例的原辅料配比、乳剂的浓度，稳定剂的种类及用量、工艺参数等没有--一列举，经申请人的实践证明原辅料配比、乳剂的浓度，稳定剂的种类及用量均在本申请的技术方案的范围。稳定性考察和急性毒性试验1)稳定性考察取上述实施例制备的样品与perftoran同置于室温下，以粒径和pH为参数进行稳定性考察，结果见表1，图110.表l稳定性研究结果<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>2)急性毒性试验取上述实施例制备的样品，对该产品进行了药理学研究，采用大鼠进行急性试验，试验结果见表2.表2急性毒性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>从以上试验结果可以判断，两种制剂的毒性都非常小。以25mi/kg的剂量在家兔身上进行试验,结果发现注射Perft,的家兔在注射后l小时后出现血压下降，血小板计数下降，白细胞计数增多，24小时内恢复，而注射以本发明制备的样品，血压，血小板及白细胞水平没有发生波动，相对比较平稳。本发明生产的全氟化碳乳剂，性质稳定，可于非冷冻状态下贮存，适于工业化生产。本发明采用磷脂代替泊洛沙姆F-68，其良好的生物相容性可以明显改善以前产品的不足，同时，由于采用磷脂为表面活性剂，可以解决以前产品无法釆用流通蒸汽灭菌的问题，从而提高了安全性，同时也可以采用非冷冻条件保存该产品，所以临床上可以直接使用。本发明生产的全氟化碳乳剂与俄罗斯上市产品的进行了特性比较，结果详见表3。从表3可以看出，本发明的全氟化碳乳剂完全可以保证临床使用的安全性，并且降低临床使用过程中所发生的不良反应，可以认为是一种新型的人工氧气载体制剂。表
发明内容与Perftoran的比较<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>权利要求1、一种全氟化碳乳剂，其特征在于，制得的该全氟化碳乳剂的平均粒径小于400nm，pH值为4～9.5，渗透压为270mMOS～320mMOS；其中包含有作为药物的全氟萘烷和全氟-N-4-甲基环己基哌啶，它们在全氟化碳乳剂中的最终体积比例为5％～30％，其中，全氟萘烷和全氟-N-4-甲基环己基哌啶的体积比为100％∶0～0∶100％；作为乳化剂的磷脂，该磷脂在全氟化碳乳剂中的最终浓度为0.5％～4.0％。2、如权利要求l所述的全氟化碳乳剂，其特征在于，所述的磷脂为蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂和氢化大豆卵磷脂其中的一种。3、权利要求1所述的全氟化碳乳剂的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤(1)将适量的磷脂分散于水或者分散于含有稳定剂及渗透压调节剂的缓冲液中，制备磷脂分散液；(2)将全氟化合物全氟萘烷及全氟-N-4--甲基环己基哌啶按体积比混合制备氟碳混合液体；(3)将步骤(2)中所得到的氟碳混合液体分散在步骤(1)中得到的磷脂分散液中，形成初乳；(4)将步骤(3)中得到的初乳进行均质，形成稳定的乳液，将该乳液分装、灭菌，即得全氟化碳乳剂；或者将该乳液与含有稳定剂及渗透压调节剂的缓冲液按比例混合，分装、灭菌，即得全氟化碳乳剂。4、如权利要求3所述的全氟化碳乳剂的制备方法，其特征在于，所述的磷脂为蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂和氢化大豆卵磷脂其中的一种，磷脂在乳剂中的最终重量/体积浓度为0.5%4.0%。5、如权利要求3所述的全氟化碳乳剂的制备方法，其特征在于，所述的磷脂分散在水中的方法采用搅拌、高速剪切或者均质，磷脂分散于水的温度为2CTC8(TC，所述的氟碳混合液体与磷脂分散液体混合而形成稳定的乳液采用高速减切、高压均质或者微射流的方法，在制备稳定乳液过程中的温度控制在2080°C。6、如权利要求1所述的全氟化碳乳剂的制备方法，其特征在于，所述的含有稳定剂及渗透压调节剂的缓冲液，其中缓冲液是由磷酸盐、柠檬酸盐、碳酸盐、醋酸盐、氨基酸、酒石酸盐、乳酸盐等中的一种或几种组成的，其pH值范围为49.5;所述渗透压调节剂是氯化钠、甘油、葡萄糖、氨基酸、山梨醇或者甘露醇中的一种或几种组合。7、如权利要求1所述的全氟化碳乳剂的制备方法，其特征在于，所述的乳液与含有稳定剂及渗透压调节剂的缓冲液混合时，其体积比例是稳定剂渗透压调节剂=10:01:6.5。8、如权利要求1所述的全氟化碳乳剂的制备方法，其特征在于，所述的缓冲液中的稳定剂是焦磷酸钠、焦亚磷酸钠、次亚磷酸钠、EDTA-2Na、a一生育酚、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、抗坏血酸、泊洛沙姆、聚山梨酯、聚氧乙稀脂肪酸酯、聚氧乙稀脂肪醇醚中的一种或几种的组合，稳定剂在乳液中的最终含量为01.5%。9、如权利要求1所述的全氟化碳乳剂的制备方法，其特征在于，所述全氟化碳乳剂的最终pH值49.5;渗透压为270320mM0S。10、如权利要求1所述的全氟化碳乳剂的制备方法，其特征在于，所述的全氟化碳乳剂平均粒径小于400nm。全文摘要本发明公开了一种全氟化碳乳剂及其制备方法，制得的该全氟化碳乳剂的平均粒径小于400nm，pH值为4～9.5，渗透压为270mMOS～320mMOS；其中包含有全氟萘烷和全氟-N-4-甲基环己基哌啶，全氟萘烷和全氟-N-4-甲基环己基哌啶的体积比例为100％∶0～0∶100％，全氟萘烷和全氟-N-4-甲基环己基哌啶在全氟化碳乳剂中的体积百分比例为5％～30％，还包含有作为乳化剂的磷脂，其重量百分比为0.5％～4.0％。该全氟化碳乳剂采用高压均质或者微射流的方法制备，具有粒径小，可在非冷冻状态下储存的优点，是一种新型的人工氧气载体制剂。文档编号A61K33/16GK101199548SQ200710188560公开日2008年6月18日申请日期2007年12月11日优先权日2007年12月11日发明者李红英,欧根坭·马亚夫斯基,王九成,王智军,胡忍乐申请人:西安力邦医药科技有限责任公司