用于制备纳米粒形式的生物活性化合物的方法

专利名称：：用于制备纳米粒形式的生物活性化合物的方法
技术领域：
：本发明涉及用于制备纳米粒形式的生物活性化合物的方法。本发明还涉及通过所述方法产生的纳米粒形式的生物活性化合物，涉及包含这样的化合物的组合物，涉及使用所述纳米粒形式的生物活性化合物和/或组合物生产的药物，并且涉及使用以所述药物形式施用的治疗有效量的所述生物活性化合物治疗动物(包括人)的方法。
背景技术：
：不良的生物利用度是在治疗剂组合物的开发中面对的重要问题，特别是那些含有在生理pH下在水中可溶性差的生物活性化合物的化合物。活性化合物的生物利用度是在通过例如口服的或静脉内的方法全身给药以后活性化合物可供身体内的靶组织利用的程度。许多因素影响生物利用度，包括剂型和所述活性化合物的溶解度和溶出速率。差的和缓慢的水溶性化合物趋向于在被吸收到循环以前从胃肠道除去。另外，差的可溶活性剂对于静脉内给药倾向于是不利的或乃至不安全的，原因在于药剂颗粒阻塞通过毛细管的血流通过的风险。众所周知，微粒药物的溶出速率将随着表面积增加而增加。增加表面积的一种方法是减小粒度。因此，着眼于控制用于药物组合物的药物颗粒的尺寸和尺寸范围，已经研究了制造细碎的或大小分级的药物的方法。例如，已经将干磨技术用于减小粒度并且由此影响药物吸收。然而，在常规干磨中，精细的限度一般达到约IOO微米(IOO，OOOnm)的范围，在所述点，材料在研磨室上结块并且阻止任何进一步的粒度减小。备选地，可以采用湿磨法以减小粒度，但是絮凝将更低的粒度限度限制到大约10微米(10,000nm)。然而，湿磨法易受污染，因此导致药物领域对湿磨法的偏离。另一个备选的研磨技术，商业的空气喷射研磨，已经提供了平均尺寸在低至约1至约50微米(l,000-50,000nm)范围内的颗粒。7存在数种目前用于配制可溶性差的活性剂的方法。一种方法是制备作为可溶性盐的活性剂。在该方法不能采用的情况下，采用备选的(通常是物理的)方法以改善所述活性剂的溶解度。备选的方法一般使所述活性剂经受改变所述试剂的物理和或化学性质的物理条件，以改善它的溶解度。这些包括下列处理技术，诸如微电离，晶体或多晶结构的修饰，油基溶液的形成，助溶剂，表面稳定剂或配合剂，微乳液，超临界流体的使用和固体分散体或溶液的生产。可以组合使用超过一种的这些方法以改善具体治疗化合物的制剂。这些用于制备这样的药物组合物的技术往往是复杂的。例如，乳液聚合面对的主要的技术困难是在制造过程结束时除去污染物，诸如未反应的单体或引发剂(其可能具有不合需要的毒性水平)。提供减小的粒度的另一个方法是形成制药学的药物微胶囊，所述技术包括微粉化，聚合和共分散。然而，这些技术遭受许多缺点，至少包括，不能产生充分小的颗粒，诸如通过研磨所获得的那些，和存在难以除去的助溶剂和/或污染物诸如毒性单体，导致昂贵的制造方法。在过去二十年中，已经进行了深入的科学研究，通过用诸如研磨和磨碎的方法将所述试剂转化成超细粉末以改善活性剂的溶解度。这些技术可以用于通过增加总表面积和降低平均粒度来增加微粒固体的溶出速率。美国专利6,634,576公开了湿磨固体基质诸如药物活性化合物的实施例，以产生"协同作用的共混合物"。国际专利申请PCT/AU2005/001977(纳米粒组合物及其合成方法)特别描述了包括下列步骤的方法将前体化合物与共反应物在机械化学合成条件下接触，其中所述前体化合物和共反应物之间的固态化学反应产生分散在载体基体中的治疗活性的纳米粒。机械化学合成，如国际专利申请PCT/AU2005/001977中所论述，指的是使用机械能量以活化，引发或促进材料或材料混合物中的化学反应，晶体结构转化或相变，例如通过在研磨介质存在下搅拌反应混合物而将机械能量传递到所述反应混合物，并且非限制性地包括"机械化学活化"，"机械化学处理"，"反应性研磨"，和相关方法。本发明提供用于制备纳米粒形式的生物活性化合物的方法，所述方法改善现有技术伴随的一些问题，或对其提供备选方案。作为对这样的新化合物和合成它们的方法的需要，考虑骨质疏松症。骨质疏松症描述由多种病原学引起的一组疾病，但是其特征在于每单位体积的骨质量的净损失。该骨质量损失和导致的骨折的结果是骨架不能对于身体提供足够的支撑。骨质疏松症的最常见类型的一种与绝经有关。大多数妇女在月经停止以后的3至6年之内失去约20%至约60%的骨的小梁室中的骨质量。该迅速损失一般与骨再吸收和形成的增加有关。然而，再吸收的循环是更决定性的并且结果是骨质量的净损失。骨质疏松症在绝经后妇女中是常见的和严重的疾病。用于治疗绝经后骨质疏松症的最一般接受的方法是雌激素替换治疗。虽然治疗一般是成功的，但是患者与所述治疗的顺从性低，主要因为雌激素治疗经常产生不合需要的副作用。另外的治疗方法是施用双膦酸盐化合物，诸如，例如，FosamaxTM(默克有限公司(Merck&Co.，Inc))。在全部绝经前时间，大多数妇女具有比相同年龄男人更低的心血管疾病发生率。然而，在绝经以后，妇女中的心血管疾病比率缓慢增加而与男人中所见的比率相匹。该保护损失与雌激素损失有关，特别是，与雌激素调节血清脂质水平的能力有关。雌激素调节血清脂质的能力的本质还没有充分理解，但是迄今为止的证据显示雌激素可以上调肝中的低密度脂质(LDL)受体以除去过量的胆固醇。另外，雌激素呈现具有一些对胆固醇生物合成的作用，及其它对于心血管健康的有利作用。在在文献中已经报道，具有雌激素替换治疗的绝经后妇女的血清脂质水平返回到在绝经前状态中发现的浓度。由此，雌激素看起来是对于该病症的合理治疗。然而，雌激素替换治疗的副作用对于许多妇女是不可接受的，由此限制该治疗的应用。对于该病症的理想治疗是以类似于雌激素的方式调节血清脂质水平的试剂，但是所述试剂没有与雌激素治疗有关的副作用和风险。许多结构无关的化合物能够与雌激素受体相互作用并且产生独特的体内特性。体内特性典型地是"纯的，，拮抗药(例如，ICI164,384)或相对"纯的"激动剂(例如，np-雌二醇)的化合物代表该分类范围的相反末端。在这两个极端之间存在SERMS("选择性的雌激素受体调节剂")，其特征在于临床和/或临床前的充分的选择性或在某些所需组织(例如，骨)中的完全或部分激动剂，和生殖组织中的拮抗药或最小激动剂。在该药理学类别之内，单独的SERMs可以基于生殖组织中的活性特性而进一步分化。雷洛昔芬，第二代SERM,显示在子宫组织中潜在有用的选择性，具有超过三苯乙烯基的雌激素受体配体的显而易见的优点。因而，雷洛昔芬似乎至少充分适合于治疗绝经后的并发症，包括骨质疏松症和心血管疾病。预测，随着在雌激素受体活性剂的药理学和分子生物学中获得的进一步的进展，在将来可以与这些新类别的雌激素化合物的治疗效用的增加的理解一起而开展SERMs的进一步的细分类。雷洛昔芬的进展被它的物理特性特别是低溶解度所妨碍，其影响生物利用度。因此，雷洛昔芬的物理特性的任何改善将潜在提供更有利的治疗。特别是，对于现有技术将成为重要贡献的是提供具有增加的溶解度的雷洛昔芬形式，制备这样的形式的方法，包含这样的形式的药物制剂，和使用这样的制剂的方法。虽然在改善低的或缓慢的水溶性化合物的生物利用度的上下文中论述了本发明的背景，但是本发明方法的应用不局限于此，如从本发明的下列描述中是显然的。另外，虽然本发明的背景在改善治疗剂或药物化合物的生物利用度的上下文中大量论述，但是本发明方法的应用显然不限于此。例如，如从下列描述中是显然的，本发明方法的应用包括但不限于兽医治疗应用和农业化学应用，诸如农药和除草剂应用。发明概述本发明涉及下列不能预料的发现纳米粒形式的生物活性化合物可以通过将固体生物活性化合物与可研磨的磨剂(grindingcompoimd)—起干磨而生产，由此产生的分散在研磨的磨剂中的纳米粒生物活性化合物抗再附聚作用。由此，在一个方面中，本发明包括生产纳米粒形式的生物活性化合物的方法，所述方法包括下列步骤在包括多个研磨体的研磨机中将固体生物活性化合物和可研磨的磨剂的混合物干磨，以产生包括分散在至少部分研磨的磨剂中的纳米粒生物活性化合物的固体分散体或溶液。术语可研磨的指的是所述磨剂能够在本发明方法的干磨条件下物理降解。在本发明的一个实施方案中，研磨的磨剂具有与所述纳米粒生物活性化合物可比较的粒度。不希望受限于理论，相信通过作为比更大粒度的磨剂更有效的稀释剂，所述可研磨的磨剂的物理降解提供本发明的优点。在高度优选的形式中，磨剂比生物活性化合物更硬，并且因而能够在本发明的干磨条件之下物理降解这样的生物活性化合物。再次不希望受限于理论，在这些情况下，相信所述可研磨的磨剂通过第二路线提供本发明的优点，在干磨条件下生产的较小的磨剂颗粒使得能够生产较小的生物活性化合物颗粒。然后固体分散体或溶液可以从研磨体分离并且从所述研磨机除去。在一个优选的方面中，所述磨剂与分散体或溶液分离。在一个方面中，其中所述磨剂不完全地研磨，将未研磨的磨剂与纳米粒生物活性化合物分离。在另一个方面中，将至少一部分的研磨磨剂与纳米粒生物活性化合物分离。所述研磨体在干磨方法中基本上耐破碎和磨蚀。磨剂的数量相对于纳米粒形式的生物活性化合物的数量，以及所述磨剂的物理降解程度足以抑制纳米粒形式的生物活性化合物的再附聚作用。在本发明的研磨条件下，所述磨剂不与药物化合物化学反应。在另外的方面中，本发明还涉及通过所述方法产生的纳米粒形式的生物活性化合物，涉及包括所述化合物的组合物，涉及使用所述纳米粒形式的生物活性化合物和/或所述组合物生产的药物，并且涉及使用治疗有效量的以所述药物形式施用的所述生物活性化合物治疗动物(包括人)的方法。本发明的药物可以仅包括纳米粒形式的生物活性化合物或，更优选地，纳米粒形式的生物活性化合物可以与一种或多种药用载体以及任何所需的赋形剂或药物制备中通常使用的其它类似试剂组合。虽然本发明的方法在制备低水溶性的纳米粒形式的生物活性化合物中具有特殊的应用，但是本发明的范围不限于此。例如，本发明的方法使得能够生产高度水溶性的纳米粒形式的生物活性化合物。这样的化合物可以显示超过常规化合物的优点，例如通过更迅速的治疗作用或更低的剂量。相反，利用水(或其它同等的极性溶剂)的湿磨技术不能应用于这样的化合物，因为所述颗粒在所述溶剂中微溶。如随后将要描述，适当的磨剂的选择提供本发明方法的特别的高度有利的应用。通过不依赖于粒度的方法(这样的方法是不合适的，原因在于磨剂的降解)，适合于在本发明中使用的一些磨剂可以容易地从纳米粒形式的生物活性化合物分离。例如，选择还拥有不同于纳米粒形式的生物活性化合物的溶解度性质的适当磨剂，容许通过相对直接选择性的溶解技术而分离所述两种物质。这样的磨剂的实例提供于发明详述中。因而，本发明方法的特别有利的应用是使用作为磨剂的水溶性盐连同低水溶性生物活性化合物。再次，如随后将要描述，本发明的高度有利的方面是适合于在本发明的方法中使用的某些磨剂还适合于在药物中使用。本发明包括用于生产药物的方法，所述药物结合纳米粒形式的生物活性化合物和至少一部分磨剂这两者，如此生产的药物，以及作为所述药物使用治疗有效量的所述生物活性化合物治疗动物(包括人)的方法。类似地，如随后将要描述，本发明的一个高度有利的方面是适合于在本发明方法中使用的某些磨剂还适合于在用于农业化学品的载体中使用，所述农业化学品诸如农药或除草剂。本发明包括用于生产结合纳米粒形式的生物活性化合物和至少一部分磨剂两者的农业化学组合物的方法，以及如此生产的农业化学组合物。所述农业化合物可以仅包括与研磨的磨剂在一起的纳米粒形式的生物活性化合物，或更优选，所述纳米粒形式的生物活性化合物和研磨的磨剂可以与一种或多种药用载体以及任何所需的赋形剂或在药物制备中通常使用的其它类似试剂组合。所述农业化学组合物可以仅包括与研磨的磨剂在一起的纳米粒形式的生物活性化合物，或更优选，所述纳米粒形式的生物活性化合物和研磨12的磨剂可以与一种或多种药用载体以及任何所需的赋形剂或在农业化学组合物制备中通常使用的其它类似试剂组合。在本发明的一个特殊形式中，磨剂适合于在药物中使用并且可以容易地通过不依赖于粒度的方法与纳米粒形式的生物活性化合物分离。这样磨剂描述在下列发明详述中。这样的磨剂是高度有利的，因为它们提供如下程度上的重要灵活性，磨剂可以与纳米粒形式的生物活性化合物结合成药物。在一个方面中，本发明提供新的雷洛昔芬制剂。雷洛昔芬是[6-羟基-2-(4-羟苯基)苯并[b]噻吩-3-基][4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基_，还称为6-羟基-2-(4-羟苯基)-3-[4-(2-哌啶子基乙氧基)-苯甲酰基]苯并-[b]-噻吩。还可以在文献中发现雷洛昔芬的其它名称。在下面说明雷洛昔芬的结构式本发明提供具有平均粒度在约10nm和约500nm之间的微粒形式的雷洛昔芬，或其药用盐或溶剂合物。本发明还提供用于生产所述微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物的方法。本发明还提供药物组合物，所述药物组合物包括所述微粒雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物，或提供使用所述微粒雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物配制的药物组合物。本发明还提供所述微粒雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物在制造药物组合物中的应用，所述药物组合物用于减轻人的病变，包括骨质疏松症，降低血清脂质，和抑制子宫内膜异位，子宫纤维变性，和乳腺癌。本发明还提供包括所述雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物或使用所述雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物配制的这样的组合物的以下用途用于减轻人的病变，包括骨质疏松症，降低血清脂质，和抑制子宫内膜异位，子宫纤维变性，和乳腺癌。然后，在一个方面中，本发明提供用于生产包括生物活性化合物的纳米粒的组合物的方法，所述方法包括下列步骤在包括多个研磨体的研磨机中将固体生物活性化合物和可研磨的磨剂干磨一段时期，所述时期足以产生包括分散在至少部分研磨的磨剂中的所述生物活性化合物的纳米粒的固体分散体。药用载体还可以与这样的组合物组合以产生药物组合物，或药物。在另一个方面中，所述纳米粒的平均尺寸小于1000nm，小于500nm，小于350nm，小于200nm，小于100nm，小于75nm，小于50nm，或小于40nm。至少50%或75%的所述纳米粒的粒度可以在平均尺寸范围之内。研磨操作的时期优选在5分钟-8小时，更优选5分钟-2小时，更优选5分钟-4小时，优选5-45分钟，更优选5-30分钟30，最优选10-25分钟。在本发明的另一个方面中，研磨介质选自由陶瓷，玻璃，聚合物，铁磁质，和金属诸如钢球组成的组，其可以具有l-20mm，优选地2-15mm，更优选3-10mm的直径。本发明的方法适于研磨生物活性化合物，诸如生物制剂，氨基酸，蛋白质，肽，核苷酸，核酸，及其类似物同系物和一级衍生物。许多药物适合于本发明的方法，包括但不限于双氯芬酸，奥氮平，西地那非，雷洛昔芬，及其它。在另一个方面中，所述方法还包括除去至少部分研磨的磨剂的至少一部分的步骤。本发明还提供纳米粒组合物，所述纳米粒组合物包括生物活性化合物的纳米粒，所述生物活性化合物的纳米粒由下列方法形成在包括多个研磨体的研磨机中将固体生物活性化合物和可研磨的磨剂干磨一段时期，所述时期足以产生包括分散在至少部分研磨的磨剂中的所述生物活性化合物的纳米粒的固体分散体。这样的纳米粒组合物可以具有如上述的相同粒度范围。同样地，所述方法还可以包括除去至少部分研磨的磨剂的至少一14部分。在另一个方面中，本发明提供治疗需要这样治疗的人的方法，所述方法包括将药物有效量的如上所述的纳米粒组合物，药物组合物，或药物施用到这样的人的步骤。从随后描述的评述，本发明的其它方面和优点对于本领域技术人员将变得显而易见。附图简述图1显示随着NaCl磨剂中的双氯芬酸的体积百分数减小，双氯芬酸纳米粒的表面积增加(在通过洗涤除去磨剂以后的纳米粒)；图2说明通过在NaCl研磨介质中干磨15体积％双氯芬酸而获得的并且通过用0.01MHC1和1mMCTAB溶液洗涤而与研磨介质分离的双氯芬酸纳米粒。如关于(b)的强度(intensity)分布中可以看到，通过在3,000g离心1min而大量除去较大的颗粒以实现160±30nm的窄的大小分布，使其数量加权成为100%(a)。在分散体或溶液中的通过离心除去聚集体或较大颗粒以后的纳米粒的量大于80重量％，如通过强度加权大小分布(a)所确定的；图3包括用NaCl磨剂研磨180分钟后的奥氮平的SEM图像，显示(a)在10000放大倍数的奥氮平/磨剂混合物的团块形态，和(b)在100000放大倍数的奥氮平/磨剂混合物的纳米粒形态；图4包括洗涤的双氯芬酸纳米粒的高分辨率的SEM和TEM图像，双氯芬酸对磨剂的比率为5，10，15，30和50重量％;图5是用NH4C1研磨并用0.1MHC1和1mMCTAB洗涤并且在TEM格上干燥的双氯芬酸的TEM图像；图6图示用NH4C磨剂干磨的双氯芬酸对温度的热流，峰值在177°C，显示双氯芬酸的存在，并且194°C的峰值是由于NH4C1磨剂；图7说明使用NaCl磨剂，15体积％的增加研磨双氯芬酸的时间的作用，显示熔点移动到更低的温度，可能是由于双氯芬酸颗粒的直径减小；图8是本发明实施方案的微粒雷洛昔芬盐酸盐和商购雷洛昔芬盐酸盐在模拟的胃液和在模拟的肠液中的溶解特性的比较；15图9a至9d是扫描电子显微照片，其比较本发明实施方案的微粒雷洛昔芬盐酸盐和商购的雷洛昔芬盐酸盐；图10说明本发明实施方案的微粒雷洛昔芬盐酸盐的大小分布，由动态光散射计(DLS)所确定；图11比较本发明实施方案的微粒雷洛昔芬盐酸盐和商购的雷洛昔芬盐酸盐的熔点；图12比较本发明实施方案的微粒雷洛昔芬盐酸盐和商购的雷洛昔芬盐酸盐的XRD-光谱；图13是本发明实施方案的微粒雷洛昔芬盐酸盐的溶液'H-NMR光谱图14比较本发明实施方案的微粒雷洛昔芬盐酸盐与商购的雷洛昔芬盐酸盐的FT-IR光谱；图15比较在根据本发明方法的不同处理阶段的雷洛昔芬盐酸盐的XRD光谱；图16是根据本发明实施方案的微粒雷洛昔芬盐酸盐的扫描电子显微照片；图17比较在根据本发明方法的实施方案的不同处理阶段的雷洛昔芬盐酸盐的FT-IR光谱；图18是获得的(a和b)以及在通过用氯化钠研磨以后(c和d)的雷洛昔芬(游离碱)的扫描电子显微照片；图19显示在本发明方法的一些实施方案中使用的离子表面活性剂的结构；图20是根据本发明实施方案的微粒雷洛昔芬(游离碱)的扫描电子显微照片；图21比较在根据本发明方法的不同处理阶段的雷洛昔芬(游离碱)的XRD光谱；图22比较在根据本发明方法的实施方案的不同处理阶段的雷洛昔芬盐酸盐的FT-IR光谱；图23提供比较本发明的一个实施方案的微粒雷洛昔芬盐酸盐和商购的雷洛昔芬盐酸盐的动物实验的浓度对时间数据；图24提供图和表形式的图16的数据；图25提供表形式的平均药代动力学数据；和图26提供Cmax和AUCo-t结果的另外比较。图27包括高分辨率SEM想像，其显示通过在磨碎机中研磨30，45和60分钟而生产的洗涤的微粒非诺贝特。图28包括乳糖磨剂中的雷洛昔芬HC1的高分辨率SEM显微照片；图29比较雷洛昔芬用氯化钠和乳糖两者作为磨剂研磨和不除去所述磨剂的雷洛昔芬HC1API的体外溶出；和图30包括SEM显微照片，其显示奥氮平游离碱可以用乳糖研磨成含有一些较大团块的细粉(图30a)和约50-100nm的非常细的颗粒(图30b)。发明详述瓶要本领域技术人员将理解这里所描述的本发明易于变化和修改，不同于具体描述的那些。应当理解本发明包括全部这样的变化和修改。本发明还包括说明书中独立地或共同地参考或指出的全部步骤，特征，组合物和化合物，以及任意和全部组合或任何两个或多个步骤或特征。本发明不限于这里所描述的具体实施方案的范围，其仅为例证目的而设计。功能上等效的产品，组合物和方法显然在这里所描述的本发明范围内。这里所描述的本发明可以包括一个或多个数值范围(例如尺寸，浓度等)。数值范围将理解为包括所述范围内的全部值，包括限定所述范围的值，和临近且导致与接近限定所述范围边界的值直接邻近的值相同或基本上相同结果的范围的值。本文中引用的全部公布(包括专利，专利申请，期刊论文，实验室手册，书，或其它文件)的全部内容通过参考结合于此。包含不构成承认任何参考构成现有技术或属于本发明涉及领域中的工作人员的普通常识。贯穿本说明书，除非上下文另外需要，术语"包括"或变化，诸如"包括"或"包含"将理解为指的是包含整数，或整数的组，但是不排除任何其它的整数或整数组。还应当注意，在该公开内容中，并且特别是在权利要求和/或段落中，术语诸如"包含(comprises)"，"包含(comprised)"，"包含(comprising)"等可以具有属于它在美国专利法中的含义；例如，它们可以指的是"包括(includes)"，"包括(included)"，"包括(including)",等。关于治疗方法并且特别是药物剂量，如这里所用的"治疗有效量"应当指的是在显著数量的需要这样治疗的受试者中施用所述药物而提供具体药理学反应的那些剂量。应当强调，在特定情况下施用到特定受试者的"治疗有效量"不总是有效治疗这里所描述的疾病，即使这样的剂量被本领域技术人员认为是"治疗有效量"。还应当理解，在特定的情况下，将药物剂量测量为口服剂量，或关于血液中测量的药物水平。限定术语"抑制"以包括它的一般接受的含义，其包括禁止，预防，控制，和降低，停止，或逆转进行或严重性，和在产生的症状上的这种作用。因而本发明包括医学治疗的和预防的施用，视情况而定。术语"平均粒度"定义为通过激光衍射散射确定的当量球体直径。因为原始状态的颗粒以及在研磨或其它粒度减少技术以后的颗粒在形状上是不规则的，所以需要表征它们，不是通过测量实际的尺寸诸如厚度或长度，而是通过测量涉及由理论球形颗粒具有的试样性质的颗粒性质。因而对所述颗粒指定"当量球体直径"。从表征许多"未知的"颗粒而发现的值可以制图成频率对直径或以其它方法重量对直径，通常采用用于频率或重量的百分数筛下物(undersize)值。这给出了表示试样的大小分布的特性曲线，即，累积的百分数筛下物分布曲线。由此的值可以直接读出或在对数-概率纸上绘出以得到适当的直线。平均等价球形体积直径是50%的筛下物值。确定粒度的方法在本领域中是已知的，并且通过其测量本发明的盐酸雷洛昔芬的粒度的方法是这里所描述的。然而，可以采用其它的方法-见，例如，US4605517(Riley等)中描述的方法。如这里所用，粒度指的是通过本领域技术人员众所周知的常规粒度测量技术测量的数均粒度，所述常规粒度测量技术诸如沉降场流动分级，光子关联光谱学，或圆盘离心。通过"小于约400nm的有效平均粒度"意指当通过上述技术测量时，至少90%的所述颗粒具有小于约400nm的数均粒度。如这里所用，术语"有效平均粒径"定义为颗粒可以自由经过的最小圆孔的平均直径。例如，球形颗粒的有效平均粒径对应于平均粒径并且椭圆体颗粒的有效平均粒径对应于最长的短轴的平均长度。贯穿本说明书，除非上下文另外需要，术语"溶剂合物"用于描述包括一个或多个溶质分子与一个或多个溶剂分子的聚集体，所述溶质诸如雷洛昔芬。贯穿本说明书，除非上下文另外需要，所述术语"药用盐"指的是已知是非毒性的并且通常在制药学文献中使用的酸或碱加成盐。相比于衍生它们的化合物，药用盐一般具有提高的溶解度特征，并且因而经常更适合于作为液体或乳剂的制剂。本发明的方法使用的化合物主要与多种有机和无机酸形成药用酸加成盐，并且包括经常用于药物化学的生理可接受的盐。这种盐也是本发明的一部分。药用酸加成盐典型地通过使雷洛昔芬与等摩尔的或过量的酸反应而形成。所述反应物一般组合在互溶剂诸如二乙醚或乙酸乙酯中。所述盐通常在约1小时至10天之内从溶液中沉淀出并且可以通过过滤分离，或所述溶剂可以通过常规方法汽提(strip)。贯穿本说明书，除非上下文另外需要，短语"干磨(drymill)"或变体，诸如"干磨(drymilling)",应当理解为指的是以至少基本上没有液体的方式研磨。如果存在液体，则它们以这样的量存在，即研磨机的内容物保持糊剂或优选地是干粉的特征。"流动的"指的是粉末具有的物理特性，其使它适合于自动的或半自动的制造方法，例如，如将要用于制造药物组合物和制剂。本文中使用的用于选择的术语的其它定义可以在本发明详述中找到并且全文适用。除非另外限定，在本文中使用的全部其它科学和技术术语具有如本发明所属领域的普通技术人员所通常理解的相同含义。贯穿本说明书，除非上下文另外需要，术语"纳米粒形式"包括纳米粒组合物，其中所述组合物至少包括平均粒度小于1000nm的纳米粒。在上下文中"常规的"生物活性化合物，试剂或药物的形式指的是非纳米粒组合物。非纳米粒活性剂具有大于约2微米的有效平均粒度，指的是至少50%的活性剂颗粒具有大于约2微米的尺寸。19与存在的不同组分的数目无关，"固体溶液"仅由一个相组成。固体溶液可以分类为连续的，非连续的，取代的，填隙的或非晶态的。典型的固体溶液具有晶体结构，其中溶质分子可以是用于晶格中的溶剂分子的代用品或适应溶剂分子之间的间隙。当溶解的分子占据晶格中的溶剂分子之间的隙间空间时，产生隙间的结晶固体溶液。当溶质分子在无定形的溶剂内是分子地但是不规则地分散时，产生无定形固体溶液。术语"固体分散体"通常指的是包括至少两个组分的固态体系，其中一个组分或多或少均匀分散在整个另一个组分或另外多个组分中。本文中使用的用于选择的术语的其它定义可以在本发明详述中找到并且全文适用。除非另外限定，在本文中使用的全部其它科学和技术术语具有如本发明所属领域的普通技术人员所通常理解的相同含义。一智貧在一个实施方案中，本发明涉及生产方法，所述生产方法用于制备纳米粒形式的生物活性化合物，所述方法包括下列步骤在包括多个研磨体的研磨机中将固体生物活性化合物和可研磨的磨剂的混合物干磨，以产生包括分散在至少部分研磨的磨剂中的纳米粒生物活性化合物的固体分散体或溶液。然后，固体分散体或溶液可以从研磨体分离并且从所述研磨机除去。在一个方面中，将所述磨剂与分散体或溶液分离。在一个方面中，其中所述磨剂不完全地研磨，将未研磨的磨剂与纳米粒生物活性化合物分离。在另一个方面中，将至少一部分的研磨磨剂与纳米粒生物活性化合物分离。所述研磨体在干磨方法中基本上耐破碎和磨蚀。磨剂的数量相对于纳米粒形式的生物活性化合物的数量，以及所述磨剂的研磨程度足以抑制纳米粒形式的生物活性化合物的再附聚作用。在本发明方法中存在的条件下，所述磨剂与药物化合物既不是化学反应性的也不是机械反应性的。本发明还涉及通过所述方法生产的纳米粒形式的生物活性化合物，涉及使用所述纳米粒形式的生物活性化合物生产的药物并且涉及使用治疗20有效量的作为所述药物施用的所述生物活性化合物治疗包括人的动物的方法。蘑*如上所述，本发明的方法需要磨剂与药物化合物研磨；即，所述磨剂将在本发明的干磨条件下物理降解以促进纳米粒形式的生物活性化合物的形成和保持。需要的精确降解程度将取决于磨剂和生物活性化合物的某些性质(例如，引起磨剂对于生物活性化合物具有更大或更小亲和性的任何电荷分布或表面作用)，生物活性化合物对磨剂的比率，和包括纳米粒形式的生物活性化合物的纳米粒的所需粒度和粒度分布。在本发明的一个实施方案中，研磨的磨剂具有与所述纳米粒生物活性化合物可比较的粒度。为实现必要的降解所必需的磨剂的物理性质取决于精确的研磨条件。例如硬质磨剂可以降解到在更剧烈的干磨条件下所提供的充分程度。磨剂的物理性质与试剂在干磨条件下将要降解的程度有关，所述干磨条件包括硬度，脆碎度，如通过诸如破碎韧性和脆性指数的指标所测量。生物活性化合物的低硬度(典型地是小于7的莫氏硬度)是合乎需要的以保证所述颗粒在处理期间破碎，以便在研磨期间纳米复合材料微结构形成。优选地，所述磨剂具有低的磨蚀度。低的磨蚀度是合乎需要的，以便通过介质研磨机的研磨体和/或研磨室使磨剂中的纳米粒形式的生物活性化合物的分散体或溶液的污染最小化。磨蚀度的间接指标可以通过测量基于研磨的污染物水平而获得。优选地，所述磨剂在干磨期间具有低的附聚趋势。虽然难以客观地量化研磨期间的附聚趋势，但是可以通过在干磨进行时观察介质研磨机的研磨体和研磨室上的磨剂的"结块"水平而获得主观的测量。所述磨剂可以是无机的或有机的化合物。在一个实施方案中，所述磨剂选自下列硫酸氢钠，碳酸氢钠，氢氧化钠，或琥珀酸；结晶的有机酸，例如(但不限于)延胡索酸，马来酸，酒石酸，柠檬酸)；备选地是铵盐(或易挥发胺的盐)，例如(但不限于)氯化铵，盐酸甲胺，溴化铵，结晶的氢氧化物，碳酸氢盐，药用碱金属的碳酸氢盐，所述碱金属诸如然而不限于，钠，钾，锂，钙，和钡，硫酸钠，氯化钠，偏亚硫酸氢钠，硫代硫酸钠，氯化铵，芒硝，碳酸铵，硫酸氢钠，硫酸镁，明矾，氯化钾，碳酸钠，碳酸氢钠，碳酸钾，碳酸氢钾。在优选实施方案中，所述磨剂是药物领域的技术人员所考虑的GRAS(—般认为是安全的)的化合物。蘑鄉舰量磨剂的数量相对于纳米粒形式的生物活性化合物的数量和所述磨剂的物理降解程度，确定是否至少抑制纳米粒形式的生物活性化合物的再附聚作用。.另外，在本发明干磨条件下的磨剂降解程度可以影响需要产生纳米粒形式的生物活性化合物的磨剂数量，因此以较小的相对数量需要降解到更大程度的磨剂。例如，对于包括纳米粒形式的生物活性化合物的纳米粒的体积分数，可以大于理论渗滤阈限，对于球状颗粒的3-维随机分散体，是大约15体积％。在本发明一个优选形式中，包括纳米粒形式的生物活性化合物的纳米粒的体积分数小于约25体积％。更优选地，包括纳米粒形式的生物活性化合物的纳米粒的体积分数小于约20体积％。在本发明的一个高度优选的形式中，包括纳米粒形式的生物活性化合物的纳米粒的体积分数小于约15体积％。研藩在本发明的方法中，研磨体优选地是化学惰性的和刚性的。术语"化学惰性的"，如这里所用，指的是研磨体不与生物活性化合物或磨剂起化学反应。如上所述，在研磨方法中，所述研磨体基本上耐破碎和磨蚀。可以以具有各种光滑的，规则的形状，平面的或弯曲的表面，和没有锐利的或凸起的边缘的主体形式理想地提供研磨体。例如，适合的研磨体可以是具有椭圆体，卵形体，球形或正圆柱体形状的形式。优选地，以珠，球，球体，棒，圆柱体，鼓或半径-末端的圆柱体(g卩，具有具有与圆柱相同的半径的半球形底部的圆柱体)的一种或多种的形式提供研磨体。根据生物活性化合物基质和磨剂的属性，研磨介质体理想地具有约0.1至30mm之间的有效平均粒径(即"粒度")，更加优选地在约1至约15nm之间，还更优选在约3至10mm之间。所述研磨体可以以微粒形式包括不同材料诸如陶瓷，玻璃，金属或聚合的组合物。适合的金属研磨体典型地是球形的并且一般具有良好硬度(即RHC60-70),圆度，高耐磨性，和窄的大小分布，并且可以包括，例如，从52100型铬钢，316型或440C型不锈钢或1065型高碳钢制造的球。优选的陶瓷材料，例如，可以选自大量的陶瓷，所述陶瓷理想地具有充分的硬度和耐破碎性以使它们在研磨期间免于被切碎或压碎并且还具有充分高的密度。研磨介质的适合密度可以在约1至15g/ci^的范围内。优选的陶瓷材料可以选自滑石，氧化铝，锆氧化物，二氧化锆-硅石，三氧化二钇稳定的氧化锆，氧化镁稳定的氧化锆，氮化硅，碳化硅，钴稳定的碳化钨，等及其混合物。优选的玻璃研磨介质是球形的(例如珠)，具有窄的大小分布，是耐磨的，并且包括，例如，无铅的钠钙玻璃和硼硅酸盐玻璃。聚合的研磨介质优选基本上是球形的并且可以选自大量的聚合树脂，所述聚合树脂具有充分的硬度和脆碎度以使它们避免在研磨期间被切碎或压碎，具有耐磨性以使导致产物污染的磨损最小化，并且无杂质诸如金属，溶剂，和残留的单体。优选的聚合树脂，例如，可以选自交联的聚苯乙烯，诸如与二乙烯基苯交联的聚苯乙烯，苯乙烯共聚物，聚丙烯酸酯诸如聚甲基丙烯酸甲酯，聚碳酸酯，聚縮醛，氯乙烯聚合物和共聚物，聚氨酯，聚酰胺，高密度聚乙烯，聚丙烯，等。例如在美国专利5,478,705和5,500,331中公开了将聚合研磨介质用于研磨材料直到非常小的粒度(与机械化学合成相反)。聚合树脂典型地可以具有密度从约0.8至3.0g/cm3的密度。更高密度的聚合树脂是优选的。备选地，研磨介质可以是包括致密的芯颗粒的复合材料颗粒，具有聚合树脂粘合在其上。芯颗粒可以是选自已知用作研磨介质的材料，例如，玻璃，氧化铝，二氧化锆，硅石，锆氧化物，不锈钢，等。优选的芯材料具有大于约2.5g/cm3的密度。在本发明的一个实施方案中，研磨介质由铁磁材料组成，因此通过利用磁分离技术促进从研磨介质的磨损产生的污染物的除去。每个类型的研磨体具有它自身的优点。例如，金属具有最高的比重，其增加研磨效率，原因在于增加的冲击能量。金属成本在低至高的范围内，但是最终产品的金属污染可能是一个问题。根据小珠尺寸低到0.004mm的低成本和可利用性的观点看，玻璃是有利的。然而，玻璃的比重低于其它介质并且需要显著更多的研磨时间。最终，从低磨损和污染，容易清洁，和高硬度的观点看，陶瓷是有利的。f蘑在本发明的干磨方法中，晶体、粉末等形式的生物活性化合物基质(substmte)和磨剂与多个研磨体以适合的比例组合在机械搅拌(即，有或者没有搅拌)的研磨室中，以预定的搅动强度达预定的时期。典型地，研磨装置用于通过外部施加搅动而使所述研磨体运动，其中不同的平移的，转动的或翻转的运动或其组合被施加到研磨室和它的内容物，或通过连接叶片，螺旋桨，叶轮或平桨的旋转轴内部施加搅动而使所述研磨体运动，或通过两者作用的组合。在研磨期间，赋予研磨体的运动可以导致剪切力以及多种冲击或碰撞的施加，其在研磨体和反应物粉末的颗粒之间具有显著的强度。由研磨体施加到生物活性化合物和磨剂的力的属性和强度受多种工艺参数影响，所述工艺参数包括研磨装置的类型；产生的力的强度，所述方法的运动学方式；研磨体的尺寸，密度，形状，和组成；生物活性化合物和磨剂混合物对于研磨体的重量比；研磨的持续时间；生物活性化合物和磨剂两者的物理性质；在激活期间存在的大气；及其它。有利地，介质研磨能够将机械性压缩力和剪切应力重复或连续施加到生物活性化合物底物和磨剂。适合的介质研磨机包括但不限于下列高能球，砂，珠或珠(pearl)研磨机，篮式研磨机，轨道式研磨机振动作用球磨机，多轴振荡器/混合器，搅拌式球磨机，卧式小介质研磨机，多环粉碎研磨机，等，包括小的研磨介质。研磨装置还可以含有一个或多个旋转轴。在本发明的一个优选方式中，在球磨机中实现干磨。通过说明书的其余部分，将提及通过球磨机进行的干磨。这类研磨机的实例是立式研磨机(attritormills),盘旋研磨机(nutatingmills),塔式磨机，轨道式研磨机，振动研磨机和重力依赖型球磨机。应当理解，依照本发明方法的干磨还可以通过不同于球磨的任何合适的方法实现。例如，还可以使用喷射研磨机，棒研磨机，辊研磨机或破碎研磨机而实现千磨。生激活丝化合激生物活性化合物包括治疗活性化合物，包括用于兽和人使用的化合物，以及农业化合物例如杀虫剂，除草剂和杀真菌剂，发芽剂等。在本发明的一个优选形式中，生物活性化合物是有机化合物。在本发明的一个高度优选的形式中，生物活性化合物是用于兽或人使用的有机、治疗活性化合物。在本发明的一个高度优选的形式中，生物活性化合物是用于人使用的有机、治疗活性化合物。生物活性化合物基质通常是本领域的技术人员期望由较小的粒度产生改善的性质的化合物。生物活性化合物基质可以是常规的活性药剂或药物，尽管可以将本发明的方法应用于已经相对它们的常规形式而具有减小的粒度的制剂或药剂。适用于本发明的生物活性化合物包括生物制剂，氨基酸，蛋白，多肽，核酸，以及它们的类似物，同系物以及一级衍生物。生物活性化合物可以选自多种已知的药物种类，包括但不限于抗肥胖症药，中枢神经系统兴奋剂，类胡萝卜素，皮质类固醇，弹性蛋白酶抑制剂，抗-真菌药，肿瘤治疗剂，抗催吐药，镇痛药，心血管药，抗炎药，诸如NSAIDs和COX-2抑制剂，驱肠虫药，抗心律失常药，抗生素(包括青霉素)，抗凝血剂，抗抑郁药，抗糖尿病药剂，抗癫痫药，抗组胺药，抗高血压剂，抗毒蕈碱剂，抗分支杆菌剂，抗肿瘤剂，免疫抑制剂，抗甲状腺剂，抗病毒剂，抗焦虑药，镇静药(安眠药和神经安定药)，收敛剂，a-肾上腺素能受体阻断剂，(3-肾上腺素受体阻断剂，血液产品和替代物，心脏变力剂(cardiacinotropic25agents),造影剂，咳嗽抑制剂(祛痰药和粘液溶解药)，诊断剂，诊断成像剂，利尿药，多巴胺能药(抗帕金森病剂)，止血剂，免疫剂，脂质调节剂，肌肉弛缓药，拟副交感神经药，甲状旁腺降钙素和双膦酸盐，前列腺素，放射药物，性激素(包括类固醇)，抗过敏药，兴奋剂和减食欲药，拟交感神经药，甲状腺剂，血管扩张药，和黄嘌呤。对活性剂的这些种类以及在每一类中的类型的描述可以在通过引用而具体结合的马丁代尔大药典(Martindale'sTheExtraPharmacopoeia),第31版(药物出版社(ThePharmaceuticalPress),伦敦，1996)中发现。活性剂的另一个来源是本领域技术人员所熟悉的医师桌面参考(PhysidansDeskReference)(第60版，2005年出版)。该活性剂可以商购和/或可以通过本领域中已知的技术制备。对于本说明书，对适于本发明的方法的药物的详尽罗列将长得难以承受；然而，参考以上列出的一般药典，将使得本领域的技术人员能够实际上选择可以用于本发明的方法的任何药物。尽管本发明的方法的普通适用性，生物活性化合物的更具体的实例包括但不限于氟哌啶醇(多巴胺拮抗药)，DL盐酸异丙肾上腺素(卩-肾上腺素能激动剂)，特非那定(Hl-拮抗药)，盐酸普萘洛尔(卩-肾上腺素能拮抗药)，盐酸地昔帕明(抗抑郁药)，沙美特罗(b2-选择性肾上腺素能激动剂)，枸橼酸西地那非，他达那非和伐地那非。小的镇痛药(环加氧酶抑制剂)，芬那酸，吡罗昔康，Cox-2抑制剂和萘普生以及其它药物，全部可以受益于以纳米粒形式制备。.如关于本发明的背景内容中所讨论的，在生理pH值水溶性差的生物活性化合物将特别受益于以纳米粒形式制备，并且本发明的方法特别有利地被应用于在生理PH值水溶性差的化合物。这样的化合物包括但不限于阿苯达唑，阿苯达唑亚砜，阿法沙龙，醋地高辛，阿昔洛韦类似物，前列地尔，aminofostin，阿尼帕米，抗凝血酶III，阿替洛尔，叠氮胸苷，苄氯贝特，倍氯米松，bdomycin，苯佐卡因及衍生物，(3-胡萝卜素，|3-内啡肽，P-干扰素，苯扎贝特，binovum，比哌立登，溴西泮，溴隐定，布新洛尔，丁咯地尔，布比卡因，白消安，卡屈嗪，喜树碱，鸡油菌黄质，卡托普利，卡马西平，卡前列素，头孢氨苄，头孢噻吩，头孢孟多，头孢西酮，头孢呋辛(cefluoroxime)，头孢甲肟(cefinenoxime)，头孢哌酮，头孢噻肟，头孢西丁，头孢磺啶，头孢唑肟，苯丁酸氮芥，chromoglycinic酸，环烟酯，环格列酮，可乐定，脱氧可的松(cortexolone)，皮质酮，皮质醇，可的松，环磷酰胺，环孢素A和其它的环孢素，阿糖胞苷，地索隐亭(desocryptin)，去氧孕烯，地塞米松酯例如乙酸酯，地佐辛，地西泮，双氯芬酸，二脱氧腺苷，二脱氧肌苷，洋地黄毒苷，地高辛，双氢麦角胺，二氢麦角毒，尼尔硫卓，多巴胺拮抗药，多柔比星，益康唑，恩屈嗪，脑啡肽，依那普利，依前列醇，雌二醇，雌莫丁汀，依托贝特，依托泊苷，因子ix，因子vm，非尔氨酯，芬苯达唑，非诺贝特，非索非那定，氟桂利嗪，氟比洛芬，5-氟尿嘧啶，氟西泮，磷霉素，膦胺霉素，呋塞米，戈洛帕米，Y-干扰素，庆大霉素，吉培福林，格列齐特，格列吡嗪，灰黄霉素，结合球蛋白(haptoglobulin)，乙型肝炎疫苗，肼屈嗪，氢氯噻嗪，氢化可的松，布洛芬，异丁普生，茚地那韦，吲哚美锌，碘化芳族X-射线造影剂例如碘达胺，异丙托溴铵，酮康唑，酮洛芬，酮替芬，富马酸酮替芬，K-毒毛花苷，拉贝洛尔，乳酸杆菌疫苗，利多卡因，利多氟嗪，利舒脲，马来酸氢利舒脲，劳拉西泮，洛伐他汀，甲芬那酸，美法仑，美金刚，美舒麦角，甲麦角林，甲氨蝶呤，甲地高辛，甲泼尼龙，甲硝唑，异丙肌苷(metisoprenol),美替洛尔，美克法胺，美托拉宗，美托洛尔，酒石酸美托洛尔，咪康唑，硝酸咪康唑，米诺地尔，米索硝唑，吗西多明，纳多洛尔，萘维林，那法扎琼，萘普生，天然胰岛素，奈沙地尔，尼卡地平，尼可地尔，弥新平，尼鲁地平，尼莫地平，硝西泮，尼群地平，硝基喜树碱(nitrocamptothesin)，9-硝基喜树碱(9-nitrocamptothesin)，奥氮平，奥沙西泮，氧烯洛尔，土霉素，青霉素例如青霉素G苯乙苄胺(penecillinGbenethamine)，青霉素0,保泰松，吡考他胺，吲哚洛尔，哌泊舒凡，吡咯他尼，吡贝地尔，吡罗昔康，吡洛芬，纤溶酶原激活药，强的松，泼尼松，孕烯诺龙，甲基苄肼(procarbacin)，丙卡特罗，黄体酮，胰岛素原，普罗帕酮，普萘洛尔(pr叩anolol)，丙戊茶碱，丙泊酚，普萘洛尔(pr叩ranolol)，雷洛昔芬，利福喷汀，辛伐他汀，半合成胰岛素，索布瑞醇，somastotine及其衍生物，生长激素，思他宁，盐酸硫氧洛尔，磺吡酮，舒洛地尔，舒洛芬，硫前列酮，合成胰岛素，他林27洛尔，紫杉醇，泰索帝，睾酮，丙酸睾酮，十一酸睾酮，丁卡因(tetracane)HI,盐酸噻拉米特，托美丁，曲尼司特，特局乐，盐酸曲金刚胺，尿激酶，地西泮，维拉帕米，阿糖腺苷，阿糖腺苷磷酸钠盐，长春碱，长春布宁，长春胺，长春新碱，长春地辛，长春西汀，维生素A，维生素E琥珀酸酯，以及X-射线造影剂。药物可以是中性种类，或是碱性或酸性的，以及例如存在于水性缓冲液中的盐。另外，一些生物活性化合物在存在于纳米粒制剂中时，可以具有通过皮肤吸收的优点。这样的生物活性化合物包括但不限于扶他林(双氯芬酸)，罗非考昔和布洛芬。便利地，生物活性化合物能够经受典型在未冷却的干磨中的可能超过8(TC的温度。因此，具有约8(TC以上的熔点的化合物是适宜的。对于具有较低熔点的生物活性化合物，可以将介质磨冷却，从而使得可以根据本发明的方法处理具有显著的较低熔解温度的化合物。例如，简单的水冷磨将保持低于5(TC的温度，或冷水可以用于进一步降低研磨温度。本领域中的技术人员将理解的是，可以对反应磨进行设计，以使其在比方说-190至50(TC之间的任何温度运行。对于一些生物活性化合物，可以有利地将研磨温度控制到显著低于该生物活性化合物的熔点的温度。生物活性化合物基质以常规形似商购获得和/或通过本领域中已知的技术制备。优选但并非必须的是，如通过筛分析确定的，生物活性化合物的粒度小于约100pim。如果生物活性化合物的粗粒度大于约100pm，则优选的是，使用常规研磨方法例如空气喷射或碎裂研磨，将生物活性化合物的颗粒在尺寸上减小到小于100jim。^^e^^^c游主激活丝众合激优选地，纳米粒形式的生物活性化合物包括其平均粒度直径小于1000nm，优选小于500nm，优选小于350nm，优选小于200nm，优选小于100nm，优选小于75nm，更优选小于50nm，并且在一些情况下小于30nm的生物活性化合物的纳米粒。优选地，纳米粒形式的生物活性化合物包括在约1nm至约200nm之间，或更优选在约5nm至约100nm之间，更优选在约5至50nm之间，进一步更优选在约10nm至约40nm之间的生物活性化合物的纳米粒。在本发明的一个高度优选的实施方案中，生物活性化合物的纳米粒在尺寸上在约20nm和30nm之间。这些尺寸是指完全分散或部分附聚的纳米粒。例如，在两个20nm的颗粒附聚的情况下，导致的整体是在尺寸上约为40nm的纳米粒，并且因而仍被认为是在本发明的含义之内的纳米粒。备选陈述的是，在平均尺寸是指如上所述的完全分散或部分附聚的纳米粒的情况下，生物活性化合物的纳米粒将优选具有小于200nm，更优选小于100nm，更优选小于75nm，更优选小于50nm，并且更优选小于40nm的平均尺寸。优选地，纳米粒形式的生物活性化合物的纳米粒在尺寸上如此分布，使得至少50%，更优选至少60%,更优选至少70%的纳米粒具有在所述平均范围内的尺寸，并且进一步优选至少75%的纳米粒具有在所述平均范围内的尺寸。厥覆沐包含纳米粒形式的生物活性化合物的颗粒的附聚体应当被理解为落入本发明的范围之内，而不论该附聚体在尺寸上是否超过1000nm，所述颗粒具有在以上规定的范围内的平均粒度。优选地，将生物活性化合物基质和磨剂干磨达在磨剂中形成纳米粒形式的生物活性化合物的固体分散体或溶液所必需的最短时间，以使来自介质磨和/或多个研磨体的任何可能的污染最小化。取决于生物活性化合物和磨剂，此时间极大地变化，并且可以从像5分钟一样短变化到几小时。超过2小时的干磨时间可能导致纳米粒形式的生物活性化合物的降解以及增加的不希望有的污染物水平。对于研磨设备以及研磨介质的种类和尺寸，基质生物活性化合物和磨剂混合物与多个研磨体的重量比，基质生物活性化合物和磨剂的化学和物理性质，以及其它的可能被以经验为根据地优化的参数，调节适当的搅拌29速率和总的研磨时间。该时间可以在5分钟和2小时，5分钟和1小时，5分钟和45分钟，5分钟和30分钟，以及10分钟和20分钟之间的范围内。蘑^^謝术粒形式游生激活丝众合激游分庸在一个实施方案中，该方法进一步包括下列步骤从纳米粒形式的生物活性化合物分离研磨的磨剂的至少一部分。可以去除任意部分的磨剂，包括但不限于10%，25%,50%,75%,或基本上全部的磨剂。在本发明的一些实施方案中，相当部分的研磨的磨剂可以包含具有类似于和/或小于包含纳米粒形式的生物活性化合物的颗粒的尺寸的颗粒。在部分的要被从包含纳米粒形式的生物活性化合物的颗粒分离的研磨的磨剂包含这样的颗粒的情况下，所述颗粒具有类似于和/或小于包含纳米粒形式的生物活性化合物的颗粒的尺寸，基于尺寸分布的分离技术不适用。在这些情形下，本发明的方法可以包括通过包括但不限于静电分离，磁分离，离心(密度分离)，流体动力学分离，泡沫浮选的技术，从纳米粒形式的生物活性化合物分离至少一部分的研磨的磨剂。有利地，可以通过例如选择性溶解，洗涤或升华的手段，进行从纳米粒形式的生物活性化合物去除至少一部分的研磨的磨剂的步骤。在本发明的一个形式中，磨剂具有在不同于纳米粒形式的生物活性化合物的溶剂中的可溶性性质，并且通过用该溶剂洗涤纳米粒形式的生物活性化合物在磨剂中的固体分散体或溶液，进行从纳米粒形式的生物活性化合物去除至少一部分的磨剂的步骤。适当的溶剂可以是酸性，碱性或中性的水溶液，或有机溶剂。这可以是其中药物不能溶解而基体可溶，或者备选地，其中可以通过差示离心将纳米粒形式的生物活性化合物和磨剂分离的任意溶剂。如上所述，适当的磨剂包括许多高度水溶性无机盐。在生物活性化合物水溶性差的情况下，特别适当的磨剂因而是水溶性盐，因为这有助于通过将纳米粒形式的生物活性化合物在磨剂中的固体溶液或分散体与水接触，从而从纳米粒形式的生物活性化合物分离磨剂。以上提供了水溶性差的生物活性化合物的实例。水溶性无机盐的实例包括硫酸钠，氯化钠，焦亚硫酸钠，硫代硫酸钠，氯化铵，芒硝，碳酸铵，硫酸氢钠，硫酸镁，钾明矾，氯化钾，碳酸钠，碳酸氢钠，碳酸钾，碳酸氢钾。优选的水溶性无机盐包括氯化钠，氯化铵，钾明矾，氯化钾，溴化钾和硫酸钠，尤其是无水硫酸钠。在本发明的一个高度便利的形式中，磨剂是氯化钠。氯化钠可以以树枝状，颗粒状或通常的立方体形式提供。在一些情况下，从至少部分去除磨剂而形成的纳米粒形式的生物活性化合物可能需要用表面稳定剂稳定。表面稳定剂的实例包括CTAB，氯化十六垸基吡啶鎗，明胶，酪蛋白，磷脂，葡聚糖，甘油，阿拉伯树胶，胆固醇，黄蓍胶，硬脂酸，硬脂酸酯和盐，硬脂酸钙，单硬脂酸甘油酯，十八十六醇，聚西托醇乳化蜡，失水山梨醇酯，聚氧乙烯垸基醚，聚氧乙烯蓖麻油衍生物，聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯，聚乙二醇，十二烷基三甲基溴化铵，聚氧乙烯硬脂酸酯，胶体二氧化硅，磷酸酯，十二烷基硫酸钠，羧甲基纤维素钙，羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，羧甲基纤维素钠，甲基纤维素，羟乙基纤维素，邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素酯，非晶纤维素，硅酸镁铝，三乙醇胺，聚乙烯醇，聚乙烯基吡咯烷酮，具有氧化乙烯和甲醛的(4-(l,l，3，3-四甲基丁基)-酚聚合物，泊洛沙姆，泊洛沙胺，带电磷脂，二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(phophatidylglycerol),琥珀酸二辛基磺酸酯，磺基琥珀酸的二烷基酯，辛丁酯磺酸钠，十二烷基硫酸钠，烷基芳基聚醚磺酸盐，蔗糖硬脂酸酯和蔗糖二硬脂酸酯的混合物，结构为一(-PEO)一(-PBO-卜(-PEO+的三嵌段共聚物，对-异壬基苯氧基聚-(縮水甘油)，癸酰基-N-甲基葡糖胺；n-癸基(3-D-吡喃葡糖苷，n-癸基p-D-麦芽吡喃糖苷，n冲二烷基l3-D-吡喃葡糖苷，n-十二烷基(3-D-麦芽苷，庚酰基-N-甲基葡糖酰胺，n-庚基P-D-吡喃葡糖苷，n-庚基(3-D-硫代葡糖苷，n-己基P-D-吡喃葡糖苷，壬酰基-N-甲基葡糖酰胺，n-壬酰基(3-D-吡喃葡糖苷，辛酰基-N-甲基葡糖酰胺，n-辛基(3-D-吡喃葡糖苷，辛基(3-D-硫代吡喃葡糖苷，溶菌酶，PEG衍生的磷脂，PEG衍生的胆甾醇，PEG衍生的胆甾醇衍生物，PEG衍生的维生素A，PEG衍生的维生素E，以及乙酸乙烯酯和31乙烯基吡咯垸酮的无规共聚物，和/或上述化合物的任何一种的混合物。便利试剂还可以包括选自由聚合物，生物聚合物，多糖，纤维素衍生物，藻酸酯，非聚合化合物和磷脂组成的组中的至少一种阳离子表面稳定剂。便利的试剂还可以包括由下列化合物组成的组中的至少一种表面稳定剂阳离子类脂，苯扎氯胺，锍化物，磷鎿化合物，季铵化合物，苄基-二(2-氯乙基)乙基溴化铵，椰油基三甲基氯化铵，椰油基三甲基溴化铵，椰油基甲基二羟乙基氯化铵，椰油基甲基二羟乙基铵，十二烷基三乙基氯化铵，十二烷基二甲基羟乙基氯化铵，十二烷基二甲基羟乙基氯溴化铵，C,ws二甲基羟乙基氯化铵，C^5二甲基羟乙基氯溴化铵，椰油基二甲基羟乙基氯化铵，椰油基二甲基羟乙基溴化铵，肉豆蔻基三甲基甲基硫酸铵，月桂基二甲基苄基氯化铵，月桂基二甲基苄基溴化铵，月桂基二甲基(氧乙烯基)4氯化铵，月桂基二甲基(氧乙烯基)4溴化铵，N-垸基(C,2.,8)二甲基苄基氯化铵，N-烷基(C^8)二甲基-节基氯化铵，N冲四垸基二甲基苄基一水合氯化铵，二甲基二癸基氯化铵，N-烷基和(d2-,4)二甲基l-萘基甲基氯化铵，三甲基卤化铵，烷基-三甲基铵盐，二烷基-二甲基铵盐，月桂基三甲基氯化铵，乙氧基乙醇氨基烷基二烷基铵盐，乙氧基三烷基铵盐，二烷基苯二烷基氯化铵，N-二clecyl二甲基氯化铵，N-四癸基二甲基苄基一水合氯化铵，N-烷基(C^4)二甲基l-萘基甲基氯化铵，十二烷基二甲基苄基氯化铵，二烷基苯烷基氯化铵，月桂基三甲基氯化铵，烷基苄基甲基氯化铵，垸基苄基二甲基溴化铵，d2三甲基溴化铵，C,5三甲基溴化铵，Cn三甲基溴化铵，十二烷基苄基三乙基氯化铵，聚二烯丙基二甲基氯化铵(DADMAC)，二甲基氯化铵，垸基二甲基卤化铵，三鲸蜡基甲基氯化铵，癸基三甲基溴化铵，十二垸基三乙基溴化铵，四癸基三甲基溴化铵，甲基三辛基氯化铵，POLYQUAT10，四丁基溴化铵，苄基三甲基溴化铵，胆碱酯，苯扎氯胺，硬脂酰氯联二甲苯酰氨化合物，溴化鲸蜡基十六垸基吡啶，氯化鲸蜡基十六烷基吡啶，季铵化的聚氧乙烯烷基胺的卤化物盐，MIRAPOL，ALKAQUAT,烷基吡啶盐；胺，胺盐，胺氧化物，二酰亚胺唑鎗(azolinhim)盐，质子化的季丙烯酰胺，甲基化的季聚合物，阳离子瓜耳胶，聚甲基丙烯酸甲酯三甲基溴化铵，聚乙烯基吡咯焼酮-丙烯酸2-甲基氨基乙基甲酯二甲基硫酸盐，六癸基三甲基溴化铵，聚(2-甲基丙烯酰氧基乙基三甲基溴化铵)(S1001)，聚(N-乙烯基吡咯烷酮/丙烯酸2-二甲基氨基乙基甲酯)二甲基硫酸酯四元结构(S1002)，(S-630)聚(吡咯烷酮-共-乙酸乙烯酯)和聚(2-甲基丙烯酰氧基氨基丙基三甲基氯化铵)(S1004)。在一些情况下，优选的稳定剂是CTAB。本领域中的那些技术人员将意识到，多种的其它表面稳定剂适用于这样的稳定。如果纳米粒形式的生物活性化合物需要另外的纯化，则可以使用常规的纯化技术。适当的技术将取决于所需纯化的属性。本领域中的技术人员熟悉这样的技术，并且容易意识到将这样的技术适用于本发明的纳米粒形式的生物活性化合物。本发明包括通过上述方法至少部分地从磨剂分离的纳米粒形式的生物活性化合物；这种化合物在药物制备中的使用；以及通过给药治疗有效量的作为药物的纳米粒形式的生物活性化合物，对动物，包括人，进行治疗。本发明的一个高度有利的方面在于，某些适用于本发明的方法的磨剂(其中在干磨条件下，它们物理降低到理想的程度)也是药用的，并且因而适用于药物。在本发明的方法不包括从纳米粒形式的生物活性化合物完全分离磨剂的情况下，本发明包括用于制备将纳米粒形式的生物活性化合物与研磨的磨剂的至少一部分结合的药物的方法；如此制备的药物；以及使用治疗有效量的作为所述药物的所述生物活性化合物，对动物，包括人，进行治疗的方法。该药物可以仅包括纳米粒形式的生物活性化合物和磨剂，或更优选地，可以将纳米粒形式的生物活性化合物和磨剂与一种或多种药用载体，以及任何理想的赋形剂或普通应用于药物制备的其它的类似制剂混合。类似地，本发明的一个高度有利的方面在于，某些适用于本发明的方法的磨剂(其中在干磨条件下，它们物理降低到理想的程度)也适用于农业化学组合物。在本发明的方法不包括从纳米粒形式的生物活性化合物完全分离磨剂的情况下，本发明包括用于制备将纳米粒形式的生物活性化合物与研磨的磨剂的至少一部分结合的农业化学组合物的方法；如此制备的药物；以及这样的组合物的使用方法。该农业化学组合物可以仅包括纳米粒形式的生物活性化合物和磨剂，33或更优选地，可以将纳米粒形式的生物活性化合物和磨剂与一种或多种药用载体，以及任何理想的赋形剂或普通应用于农业化学组合物制备的其它的类似制剂相结合。在本发明的一个具体形式中，磨剂适用于药物，并且通过不依赖于粒度的方法可以容易地从纳米粒形式的生物活性化合物分离。这样的磨剂在本发明的以下详细说明中有描述。这样的磨剂的非常好的优点在于，它们提供了达到可以将该磨剂与纳米粒形式的生物活性化合物一起混合到药物中的程度的显著灵活性。因而，本发明包括一种用于制备含有纳米粒形式的治疗活性化合物的药物的方法，所述方法包括下列步骤在含有多个研磨体的磨机中，干磨固体生物活性化合物和可研磨的磨剂的混合物，以制备含有分散在至少部分研磨的磨剂中的纳米粒生物活性化合物的固体分散体或溶液；并且在药物的制造中使用所述固体分散体或溶液。然后可以将该固体分散体或溶液从研磨体分离，并且从磨机移去。在一个实施方案中，磨剂被从分散体或溶液分离。在没有完全研磨磨剂的情况下，未研磨的磨剂被从纳米粒生物活性化合物分离。在一个另外的方面中，研磨的磨剂的至少一部分被从纳米粒生物活性化合物分离。研磨体在干磨过程中本质上抵抗破裂和侵蚀。相对于纳米粒形式的生物活性化合物的量的磨剂的量，以及磨剂的研磨程度，足以抑制纳米粒形式的生物活性化合物的再附聚。在本发明的方法的干磨条件下，磨剂与药物化合物在化学上不起反应，在机械上也不起反应。优选地，药物是以固体剂量的形式，然而，本领域中的普通技术人员可以制备其它的剂型。在一个形式中，在将所述固体溶液或分散体从多个研磨体分离的步骤以后，并且在将所述固体溶液或分散体用于药物的制造的步骤以前，所述方法可以包括从所述固体分散体或溶液移去磨剂的一部分，以提供富含纳米粒形式的生物活性化合物的固体溶液或分散体的步骤；以及在药物的制造中使用所述固体溶液或分散体的步骤，更优选地，包括在药物的制造中使用富含纳米粒形式的生物活性化合物的固体溶液或分散体的步骤。在一个方面中，在没有完全研磨磨剂的情况下，未研磨的磨剂从纳米粒生物活性化合物分离。在进一步的一个方面中，研磨的磨剂的至少一部分被从纳米粒生物活性化合物分离。本发明包括通过所述方法制造的药物；以及通过给药治疗有效量的作为所述药物的纳米粒形式的生物活性化合物，对动物，包括人，进行治疗的方法。在本发明的另一个实施方案中，在要被研磨的混合物中还包含促进剂(facilitatingagent)。适用于本发明的这样的促进剂包括稀释剂，表面稳定剂，粘合剂，填充剂，润滑剂，甜味剂，增香剂，防腐剂，缓冲剂，湿润剂，崩解剂，泡腾剂，以及可以形成药物的一部分的试剂，包括固体剂型，或需要其它的特定药物递送的其它材料，例如以下在标题度学^7^^t智合#^Afe<i/c/"a/尸/zarmace"n'ca/Com/057'fz'ora」下歹U出的试剂禾口介质，或它们的任意组合。以上提供了表面活性剂的实例的目录。4^,/t^^C^主^^话丝众会^^/7资会激本发明包括根据本发明的方法制备的纳米粒形式的药用化合物和包括这种化合物的组合物，所述组合物包括与磨剂的至少一部分一起含有这种化合物的组合物。在选择性地充分去除磨剂以留下纯的纳米粒形式的药用化合物的情况下，有时可能发生颗粒的附聚，形成较大的颗粒。由于上述方法的独特属性，这些新的附聚的颗粒通过例如具有新的多晶型物结构或纳米结构形貌，可以具有独特的物理性质。独特的多晶型物结构和/或纳米结构形貌的存在可以导致包括改善的生物利用度的治疗有益性质。因而，在本发明的一些实施方案中，本发明的组合物包含基本上纯的纳米粒形式的药用化合物。在其它的实施方案中，特别是在磨剂的缺乏使得该过程中形成的纳米粒以不利于改善溶出速率的方式附聚的情况下，优选的组合物保持磨剂的至少一部分。在本发明的组合物中的纳米粒形式的药用化合物以在约0.1重量°/。和约99.0重量％之间的浓度存在。优选地，组合物中的纳米粒形式的药用化合物的浓度将是约5重量°/。至约80重量％，而10重量％至约50重量％的浓度是高度优选的。理想的是，对于在磨剂的任何部分的任何随后去除(需要时)之前的组合物，该浓度将在约10至15重量％，15至20重量％，20至25重量％，30至35重量％，35至40重量％，40至45重量°/。的范围内。在部分或全部的磨剂已经被去除的情况下，取决于被去除的磨剂的量，纳米粒形式的药用化合物的相对浓度可以相当高。例如，如果全部的磨剂被去除，则制剂中的纳米粒的浓度可以接近100重量％(取决于促进剂的存在)。纳米粒形式的药用化合物在磨剂中的分散将取决于纳米粒形式的药用化合物的重量百分比浓度。取决于该重量百分比浓度，如果至少0.1%的纳米粒被磨剂分离，则纳米粒形式的药用化合物的纳米粒将被"分散"在磨剂中。优选地，大于10%的纳米粒将被磨剂在空间上彼此分离。更优选地，至少15，20，30，40，50，55，60，65，70，75，80，85，90，92，95，98或99%的纳米粒将被磨剂在空间上彼此分离。根据本发明制备的组合物不限于包含单一种类的纳米粒形式的药用化合物。因此，在组合物中可以存在超过一种的纳米粒形式的药用化合物。在存在超过一种的纳米粒形式的药用化合物的情况下，这样形成的组合物可以在一个干磨步骤中制备，或者纳米粒形式的药用化合物可以分别制备，然后结合，以形成单一的组合物。微本发明的药物可以包括任选与磨剂的至少一部分一起的纳米粒形式的药用化合物，结合有一种或多种药用载体，以及其它的通常用于药用组合物制备的其它试剂。如本文中所使用的，"药用载体"包括任何和全部的生理相容的溶剂，分散介质，包衣物质，抗菌药和抗真菌药，等渗和吸收延迟剂等。优选地，该载体适于肠胃外给药，静脉内，腹膜内，肌内，舌下，经皮或经口给药。药用载体包括无菌水溶液或分散体，以及用于无菌可注射溶液或分散体的临时制备的粉末。用于药物制造的这样的介质和试剂的使用在本领域中是36熟知的。除与纳米粒形式的药用化合物不相容的任何常规的介质或试剂的范围以外，考虑它们在根据本发明的药物组合物的制造中的使用。根据本发明的药用载体可以包括下列实例的一种或多种(1)能够粘附到活性试剂的表面上，但是不参与或与该活性试剂(agent)本身进行任何化学反应的聚合物表面活性剂，例如包括但不限于下列化合物的聚合物表面稳定剂聚乙二醇(PEG)，聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)，聚乙烯醇，corspovidone,聚乙烯基吡咯垸酮-聚丙烯酸乙烯酯共聚物，纤维素衍生物，羟丙基甲基纤维素，羟丙基纤维素，羧甲基乙基纤维素，羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯，聚丙烯酸酯和聚甲基丙烯酸酯，脲，糖，多元醇以及它们的聚合物，乳化剂，糖胶(sugargum)，淀粉，有机酸和它们的盐，乙烯基吡咯烷酮和乙酸乙烯酯；和或(2)粘合剂，例如各种纤维素和交联的聚乙烯基吡咯烷酮，微晶纤维素；和或(3)填充剂，例如一水合乳糖，无水乳糖，以及各种淀粉；和或(4)润滑剂，例如对要被压縮的粉末的流动性起作用的试剂，包括胶体二氧化硅，滑石，硬脂酸，硬脂酸镁，硬脂酸钙，二氧化硅凝胶；和或(5)甜味剂，例如任何天然或人工甜味剂，包括蔗糖，木糖醇，糖精钠，环己基氨基磺酸酯，天冬甜素，以及安赛蜜(accsulfame)K;和或(6)增香剂；和或(7)防腐剂，例如山梨酸钾，羟苯甲酸甲酯，对羟苯甲酸甲酯，苯甲酸和它的盐，对羟基苯甲酸的其它的酯例如尼泊金丁酯，醇例如以及或苄基醇，酚类化合物例如苯酚，或四元化合物例如苯扎氯铵；和或(8)缓冲剂；和或(9)稀释剂，例如药用惰性填料，例如微晶纤维素，乳糖，磷酸氢钙，糖类和/或任何的上述化合物的混合物；和或(10)湿润齐I」，例如玉米淀粉(cornstarch)，马铃薯淀粉，玉米淀粉(maizestarch),以及改性淀粉，交联羧甲纤维素钠，交联聚乙烯基吡咯烷酮，羧基乙酸淀粉钠，以及它们的混合物；和或(11)崩解剂；和或(12)泡腾剂，例如泡腾对(effervescentcouple)，例如有机酸(例如，柠檬酸，酒石酸，苹果酸，富马酸，脂肪酸，琥珀酸和褐藻酸，以及酸酐和酸盐)，或碳酸盐(例如，碳酸钠，碳酸钾，碳酸镁，甘氨酸碳酸钠，L-赖氨酸碳酸盐和精氨酸碳酸盐)或碳酸氢盐(例如碳酸氢钠或碳酸氢钾)；和或(13)其它的药用赋形剂。适用于动物，并且特别适用于人的本发明的药物典型必须是无菌的，并且在制造和储存的条件下稳定。含有纳米粒形式的生物活性化合物的本发明的药物可以被配制成溶液，微乳液，脂质体，或适于高的药物浓度的其它有序结构。生物活性化合物在本发明的药物中的实际剂量水平可以根据下列内容而变化该生物活性化合物的属性，以及归因于提供并给药纳米粒形式的生物活性化合物的益处的潜在增加功效(例如，纳米粒形式的生物活性化合物的增加的溶解度。更迅速的溶出，增加的表面积)。因而，如本文中所使用的，"治疗有效量"将是指为了在动物体中实现治疗响应所需的纳米粒形式的生物活性化合物的量。有效用于这样的用途的量将取决于下列方面所需的治疗效果；给药的途径；生物活性化合物的功效；治疗的所需持续时间；被治疗的疾病的阶段和严重性；患者的体重和一般健康状态；以及处方医师的判断。在另一个实施方案中，本发明的任选与磨剂的至少一部分一起的纳米粒形式的生物活性化合物，可以与另一种生物活性化合物，乃至与相同的生物活性化合物一起结合到药物中。在后一实施方案中，可以获得提供不同的释放特征的药物-来自纳米粒形式的生物活性化合物的早期释放，以及来自纳米粒形式的较大平均尺寸的生物活性化合物或非-纳米粒生物活性化合物的后期释放。诊^"^^^^^式^^主^v^丝众合^^^^"^^^/^^";T式以任意的药用方式，例如，经口，直肠，肺，阴道内，局部(粉末，膏剂或滴剂)，经皮，或作为口或鼻的喷剂，本发明的药物可以给药于动物，包括人。用于经口给药的固体剂型包括胶囊，片剂，丸剂，散剂，小丸和颗粒。对于胶囊，片剂和丸剂，剂型还可以包含缓冲剂。此外，将普通使用的赋形剂的任何一种，例如之前列出的那些，与通常10-95%的纳米粒形式的生物活性试剂结合，并且更优选地以25%-75%的浓度，将形成药用无毒口服组合物。本发明的药物可以作为悬浮在可接受载体，优选水性载体中的纳米粒形式的生物活性试剂的溶液而肠胃外给药。可以使用多种水性载体，例如水，缓冲水，0.4%的盐水，0.3%的甘氨酸，透明质酸等。这些组合物可以通过常规的，熟知的灭菌技术除菌，或可以过滤除菌。产生的水溶液可以被包装以原样使用，或可以被冻干，并且在给药前将冻干的制剂与无菌溶液混合。对于气溶胶给药，本发明的药物优选与表面稳定剂和推进剂一起提供。表面稳定剂当然必须是非毒性的，并且优选在推进剂中可溶解。这样的试剂的代表是含有6至22个碳原子的脂肪酸例如，己酸，辛酸，月桂酸，棕榈酸，硬脂酸，亚油酸，亚麻酸，olesteric酸以及油酸和脂族多元醇或它的环状酐的酯或部分酯。可以使用混合的酯，例如混合或天然的甘油酯。表面稳定剂可以构成组合物重量的0.1%-20%,优选0.25%-5%。该组合物的余量通常是推进剂。在需要时，还可以包含载体，例如具有例如用于鼻内递送的磷脂酰胆碱。本发明的药物还可以经由脂质体给药，所述脂质体用于将活性试剂靶向具体组织例如淋巴组织，或选择性地靶向细胞。脂质体包括乳液，泡沫，微囊，不溶性单层，液晶，磷脂分散体，薄层等。在这些制剂中，纳米复合微结构组合物作为脂质体的一部分被单独掺入，或连同与结合到其它的治疗或免疫组合物上的分子一起掺入。如上所述，纳米粒形式的生物活性化合物可以与磨剂的至少一部分一起被配制成固体剂型(例如，对于经口或栓剂给药)，于是可以较少需要或不需要进一步稳定分散体，因为磨剂可以有效地起固态稳定剂的作用。然而，如果要将纳米粒形式的生物活性化合物应用于液态(或气态)悬浮体中，一旦已经将固体载体充分去除，以保证颗粒附聚的清除或至少最小化，含有纳米粒形式的生物活性化合物的纳米粒就可能需要进一步的稳定。洽柳途本发明的药物的治疗用途包括疼痛减轻，抗炎，偏头痛，哮喘，以及需要以高的生物利用度将该活性试剂给药的其它病症。需要生物活性化合物的迅速的生物利用度的主要领域之一在于疼痛的减轻。主要的镇痛药，例如环加氧酶抑制药(阿司匹林相关药物)，可以作为根据本发明的药物制备。本发明的药物还可以用于眼病症的治疗。即，为了在眼上给药，可以将纳米粒形式的生物活性化合物在生理盐水或凝胶中配制成水性悬浮体。另外，纳米粒形式的生物活性化合物可以以粉末的形式制备，以经由鼻给药而进行迅速的中枢神经系统渗透。心血管疾病的治疗也可以得益于根据本发明的纳米粒形式的生物活性化合物，例如心绞痛的治疗，并且具体地，吗西多明可以得益于更好的生物利用度。本发明的药物其它治疗用途包括治疗脱发，性功能障碍，或牛皮癣的皮肤治疗。现在将关于雷洛昔芬的制剂形式更加具体地描述本发明。,潜昔鄉腐本发明包括颗粒的无定形雷洛昔芬，药用雷洛昔芬盐和溶剂合物。用于制备这样的无定形化合物的方法描述于美国专利6713494(美国礼来公司(EliLillyandCompany))中。在雷洛昔芬或本发明的药用盐或溶剂合物是晶体的情况下，不应将本发明理解为是对它们的任何具体多晶型物的限制。本发明的药用盐可以由许多有机或无机盐形成。用于形成这样的盐的典型无机酸包括盐酸，氢溴酸，氢碘酸，硝酸，硫酸，磷酸，次磷酸等。还可以使用源自有机酸的盐，所述有机酸例如为脂族一元羧酸和二羧酸，苯基取代的链烷酸，羟基链烷酸和羟基链垸二酸(hydroxyalkandioicacid)，芳族酸，脂族和芳族磺酸。这样的药用盐因而包括乙酸盐，苯基乙酸盐，三氟乙酸盐，丙烯酸盐，抗坏血酸盐，苯甲酸盐，氯代苯甲酸盐，二硝基苯甲酸盐，羟基苯甲酸盐，甲氧基苯甲酸盐，甲基苯甲酸盐，邻-乙酰氧基苯甲酸盐，萘-2-苯甲酸盐，溴酸盐，异丁酸盐，苯基丁酸盐，卩-羟基丁酸盐，丁炔-l，4-二酮盐，己炔-l,4-二酮盐，己酸盐，辛酸盐，盐酸盐，肉桂酸盐，柠檬酸盐，甲酸盐，富马酸盐，乙醇酸盐，庚酸盐，马尿酸盐，乳酸盐，苹果酸盐，马来酸盐，羟基马来酸盐，丙二酸盐，扁桃酸盐，甲磺酸盐，烟酸盐，异烟酸盐，硝酸盐，草酸盐，邻苯二甲酸盐，对苯二酸盐，磷酸盐，磷酸一氢盐，磷酸二氢盐，偏磷酸盐，焦磷酸盐，丙炔酸盐，丙酸盐，苯基丙酸盐，水杨酸盐，癸二酸盐，琥珀酸盐，辛二酸盐，硫酸盐，硫酸氢盐，焦亚硫酸盐，亚硫酸盐，亚硫酸氢盐，磺酸盐，苯磺酸盐，对-溴代苯磺酸盐，氯代苯磺酸盐，乙磺酸盐，2-羟基乙磺酸盐，甲磺酸盐，萘-l-磺酸盐，萘-2-磺酸盐，对-甲苯磺酸盐，二甲苯磺酸盐，酒石酸盐等。出版的美国专利申请20060154966描述了下列化合物的制备雷洛昔芬D-乳酸盐，雷洛昔芬L-乳酸盐，雷洛昔芬DL-乳酸盐，半水合雷洛昔芬D-乳酸盐，1/4-水合雷洛昔芬D-乳酸盐，半水合雷洛昔芬L-乳酸盐，1/4-水合雷洛昔芬L-乳酸盐，半水合雷洛昔芬DL-乳酸盐和1/4-水合雷洛昔芬DL-乳酸盐。对于某些应用，优选的盐是盐酸盐。粒度与减小粒度相关的成本不限于直接的研磨成本。例如，US6894064(美国礼来公司(EliLillyandCompany);Benzothiapenes，含有其的制剂和方法(Benzothiapenes，formulationscontainingsameandmethods))解释的是，"非常细碎的材料在胶囊填充或片剂制备上带来了困难和成本，因为材料将不流动，而是变得在加工机器中结块"，以及"这样的加工困难在最终产品中产生了非-均匀性，这在药物物质中是不可接受的"。因此，"在产生最大的生物利用度(颗粒表面积)的性质和实际的制造限制之间经常存在动态"，并且"标记"最佳解决方案"的妥协的观点对于每一种情形是唯一的，而且关于它的目的也是唯一的"。现在已经发现，通过处理雷洛昔芬或它的药用盐或溶剂合物，以使粒度在特定范围内，可以制备与一些已知的雷洛昔芬盐酸盐形式相比，显示41了改善的体外溶出曲线和体内生物利用度的药物组合物。此外，在本发明的一些形式中，可以实现这些改善，而没有从制造的方面引入不利的特征。如上所述，本发明的特征在于，微粒雷洛昔芬，或它的以颗粒形式的药用盐或溶剂合物，具有在约10nm和约500nm之间的平均粒度。在本发明的一个形式中，平均粒度在约75nm和约500nm之间。在本发明的一个形式中，平均粒度在约75nm和约400nm之间。在本发明的一个形式中，平均粒度在约75nm和约300nm之间。在本发明的一个形式中，平均粒度在约75nm和约200nm之间。在本发明的一个形式中，平均粒度在约75nm和约100nm之间。尉分布在本发明的优选形式中，微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物，具有窄的粒度分布。在本发明的一个优选形式中，约90%的颗粒具有小于约500nm的粒度。借助于超声处理，并且在500rcf离心30秒以从分散体去除较大的附聚体以后，可以通过颗粒的分散体的动态光散射测量颗粒分布。用于测量粒度的其它手段例如为表面积测量以及电子显微镜，其可以被用于验证测量的颗粒分布。在本发明的一个形式中，约50%的颗粒具有小于500nm的粒度。在本发明的另一个形式中，约90%的颗粒具有小于500nm的粒度。在本发明的一个形式中，约90%的颗粒具有在约100nm和500nm之间的粒度。在本发明的一个形式中，约90%的颗粒具有在约75nm和约500nm之间的粒度。在本发明的一个形式中，约90。/。的颗粒具有在约75nm和约400nm之间的粒度。在本发明的一个形式中，约90%的颗粒具有在约75nm和约300nm之间的粒度。在本发明的一个形式中，约90%的颗粒具有在约750nm和约200nm之间的粒度。在本发明的一个形式中，约90%的颗粒具有在约75nm和约100nm之间的粒度。除粒度在体外溶出和体内吸收上的作用以外，另一个重要的方面是它在药物产品制造工艺的各种操作上的作用。虽然粒度的规格保证了药物分子在胃肠道中对吸收部位的连续递送，它还允许了片剂制造工艺的湿法造42粒步骤过程中的更好控制。通过控制粒度，减少了用于诱使造粒功率消耗曲线的适当进行所需的水的量的变化。通过将粒度维持在之前提及的限制之内，在用于常规成批制造(routinelotmanufacture)的制造计戈lj(manufacturingticket)中，可以控制确定量的水。造粒步骤对于许多片剂和胶囊制造操作是普通的，并且典型地由用于导致造粒的理想终点的水的加入来驱动。取决于造粒终点的下游单元操作是干法造粒的研磨，并且产生的粒度分布在造粒时得到。已经发现，引入的活性成分的粒度也影响在造粒过程中形成的干磨附聚体的最终粒度分布。对于固定的水量，较粗糙的分布将导致干磨的附聚体的更精细的尺寸分布。在压縮步骤中，过于精细的造粒分布可以导致差的造粒流动以及对单独的片剂重量的差的控制。因而，通过减少在造粒步骤以及制备适当分布的干磨颗粒过程中所需的水的变化，以防止在压縮过程中由于不可接受的片剂的重量而对片剂的拒绝，之前提及的窄的粒度限制也导致使得工艺更加容易受自动化控制。舰沐含有雷洛昔芬，它的药用盐和溶剂合物的颗粒的附聚体，所述颗粒具有在约10nm和约500nm之间的平均粒度，应当被理解为落入本发明的范围之内，而不管是否该附聚体在尺寸上超过500nm。对于本发明的微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物的某些应用，附聚体的形成是高度理想的。相对于一些已知的雷洛昔芬盐酸盐形式，本发明的雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物的颗粒的附聚体可以提供改善的体外溶出和体内生物利用度的优点，而不引起常规地与减小的粒度相关的处理缺点。將,在本发明的优选形式中，微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物具有超过5m々g的表面积。更优选地，微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物具有超过7m"g的表面积。更优选地，微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物具有超过IOmVg的表面积。更优选地，微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物具有超过15mVg的表面积。更优选地，微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物具有超过20mVg的表面积。更优选地，微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物具有超过25mVg的表面积。更优选地，微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物具有超过30mVg的表面积。更优选地，微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物具有超过35m"g的表面积。更优选地，微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物具有超过40m々g的表面积。更优选地，微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物具有超过50mVg的表面积。更优选地，微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物具有超过55mVg的表面积。更优选地，微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物具有高达约57m2/g的表面积。在本发明的一个方面中，在对狗经口给药时，提供了微粒的结晶雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物，显示了大于12ng/mL的血浆峰值浓度(CmJ。在本发明的一个方面中，在对狗经口给药时，提供了微粒的结晶雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物，显示了大于33ng.h/mL的在浓度对时间曲线下的面积(AUCo.t)。在本发明的一个方面中，在对狗经口给药时，提供了微粒的结晶雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物，显示了在1小时之内的对于血浆最大浓度(CmJ的中值时间。縱徵教,潜萝微麟游減如所概述的，本发明进一步提供了用于制备所述微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物的方法。具体地，本发明包括用于制备平均粒度在约10nm和约500nm之间的颗粒的雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物的方法，所述方法包括下列步骤在含有多个研磨体的磨机中，研磨固体雷洛昔芬盐酸盐和可研磨的磨剂的混合物，以制备含有分散在至少部分研磨的磨剂中的微粒雷洛昔芬或它的药用盐或溶剂合物的固体分散体或溶液，所述雷洛昔芬或它的药用盐或溶剂合物的平均颗粒尺寸在约10nm和500nm之间。在本发明的一个优选形式中，研磨步骤为干磨步骤。在本发明的一个形式中，平均粒度在约75nm和约500nm之间。在本发明的一个形式中，平均粒度在约75nm和约400nm之间。在本发明的一个形式中，平均粒度在约75nm和约300nm之间。在本发明的一个形式中，平均粒度在约75nm和约200nm之间。在本发明的一个形式中，平均粒度在约75nm和约100nm之间。在本发明的一个优选形式中，约50%的颗粒具有小于约500nm的粒度。在本发明的一个形式中，约90%的颗粒具有在约100nm和500nm之间的粒度。在本发明的一个形式中，约卯％的颗粒具有在约75nm和约500nm之间的粒度。在本发明的一个形式中，约90。/。的颗粒具有在约75nm和约400nm之间的粒度。在本发明的一个形式中，约90%的颗粒具有在约75nm和约300nm之间的粒度。在本发明的一个形式中，约90%的颗粒具有在约75nm和约200nm之间的粒度。在本发明的一个形式中，约90%的颗粒具有在约75nm和约100nm之间的粒度。术语"可研磨的"是指在本发明的方法的干磨条件下，磨剂能够被物理降解。在本发明的一个实施方案中，研磨的磨剂具有与纳米粒生物活性化合物类似的粒度。在一个高度优选的形式中，磨剂比固体雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物硬，并且因而能够在本发明的干磨条件下使所述固体雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物物理降解。此外，在不希望受理论束缚的情况下，在这些情形下，认为的是，通过干磨条件下产生的磨剂的更小的颗粒使得能够制备雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物的更小颗粒，可研磨的磨剂通过第二途径提供了本发明的优点。然后可以将雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物的固体分散体或溶液从研磨体分离，并且从磨机移去。在一个优选的方面中，研磨化合物被从分散体或溶液分离。在一个进一步的方面中，研磨的磨剂的至少一部分被从微粒雷洛昔芬盐酸盐分离。研磨体在干磨过程中基本上抵抗破裂和侵蚀。相对于颗粒的雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物的量的磨剂的量，以及磨剂的物理降解程度，足以抑制雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物的再附聚。在本发明的干磨条件下，磨剂与药物雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物不起化学反应。在本发明的一个实施方案中，研磨的磨剂具有与微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物类似的粒度。用于实现需要的降解所必须的磨剂的物理性质取决于精确的研磨条件。例如，在更加剧烈的干磨条件下，更硬的磨剂可以在充分的程度上降解。与试剂在干磨条件下将降解的程度相关的磨剂的物理性质包括硬度，脆性，如通过对指示物例如破裂韧性和脆性指数所测量的。优选地，磨剂具有低的磨蚀度。对于使微粒雷洛昔芬盐酸盐在磨剂中的分散体或溶液受研磨体和/或介质磨的研磨室的污染最小化，低的磨蚀度是理想的。通过测量研磨-基污染物的水平，可以得到磨蚀度的间接指示。优选地，在干磨过程中，磨剂对附聚体具有低的趋向。尽管难以客观地量化研磨过程中对附聚体的趋向，但是随着干磨的进行，通过观察磨剂在研磨体和介质磨的研磨室上的"结块"的水平，可以得到客观的测量。磨剂可以是无机或有机化合物。在一个实施方案中，磨剂选自下列化合物硫酸氢钠，碳酸氢钠，氢氧化钠或琥珀酸；结晶有机酸，例如(但不限于)富马酸，马来酸，酒石酸，柠檬酸)；备选地，铵盐(或挥发性胺的盐)，例如(但不限于)氯化铵，盐酸甲胺，溴化铵，结晶氢氧化物，碳酸氢盐，例如但不限于钠，钾，锂，钙和钡的药用碱金属的盐酸氢盐，硫酸钠，氯化钠，焦亚硫酸钠，硫代硫酸钠，氯化铵，芒硝，碳酸铵，硫酸氢钠，硫酸镁，明矾，氯化钾，碳酸钠，碳酸氢钠，碳酸钾，碳酸氢钾。适当的磨剂的选择提供了本发明的方法的特别高度有利的应用。通过不依赖于粒度的方法(取决于粒度的方法由于磨剂的降解而不适合)，一些适用于本发明的磨剂容易从微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物分离。例如，选择还拥有与微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物不同的溶解度性质的适当的磨剂，允许了通过相对直接的选择溶解技术来将两者分离。这样的磨剂的实例被提供于本发明的详细描述中。因而，本发明的方法的特别有利的应用是水溶性盐作为磨剂的使用。本发明的一个高度有利的方面在于，适用于本发明的方法的某些磨剂还适合在药物中使用。本发明包括用于制备将微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物与磨剂的至少一部分混合的药物的方法；以及使用治疗有效量46的所述生物活性化合物作为所述药物，对动物(包括人)进行治疗的方法。药物可以仅包括与研磨的磨剂一起的微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物，或者更优选地，可以将微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物和磨剂与一种或多种药用载体，以及任何理想的赋形剂或普通用于药物制备的其它的类似制剂混合。在本发明的一个具体形式中，磨剂不仅适合用于药物，并且还容易通过不依赖于粒度的方法从微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物分离。这样的磨剂在本发明的以下详细说明中有描述。这样的磨剂的非常好的优点在于，它们提供了达到可以将该磨剂与微粒雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物一起混合到药物中的程度的显著灵活性。在本发明的一个形式中，磨剂是氯化钠。在本发明的一个形式中，磨剂是碳酸钙。在一个优选的实施方案中，磨剂是由药物领域中的技术人员认定为GRAS(—般认为安全)的化合物。在本发明的一个优选的形式中，在下列步骤以前在含有多个研磨体的磨机中，研磨固体雷洛昔芬盐酸盐和可研磨的磨剂的混合物，以制备含有分散在至少部分研磨的磨剂中的微粒雷洛昔芬或它的药用盐或溶剂合物的固体分散体或溶液，所述雷洛昔芬或它的药用盐或溶剂合物的平均颗粒尺寸在约10nm和500nm之间；本发明的方法包括充分干燥固体雷洛昔芬或它的药用盐或溶剂合物的步骤。还优选地，在下列步骤以前在含有多个研磨体的磨机中，研磨固体雷洛昔芬盐酸盐和可研磨的磨剂的混合物，以制备含有分散在至少部分研磨的磨剂中的微粒雷洛昔芬或它的药用盐或溶剂合物的固体分散体或溶液，所述雷洛昔芬或它的药用盐或溶剂合物的平均颗粒尺寸在约10nm和500nm之间；本发明的方法包括充分干燥磨剂的步骤。本领域中的技术人员将知道用于从化合物去除水的许多技术。在本发明的一个形式中，充分干燥固体雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物的步骤是47通过下列方法进行的将雷洛昔芬盐酸盐在真空下暴露于干燥剂达适当的时期。本领域中的技术人员将知道适当的干燥剂的范围。在本发明的一个形式中，干燥剂是？205。可以变化研磨体的数量和尺寸，以改变在研磨期间施加的能量的量。这导致了产生的雷洛昔芬的尺寸和特性的变化。实施例显示了对于制造的当前范围而最优化的的某些组合，然而，本领域中的技术人员将理解，由于工艺依比例决定，因此将需要变化研磨介质尺寸，数量以及施加的能量，以制备相同的产品。优选地，固体雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物和可研磨的磨剂的混合物中的固体雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物的浓度在约5%和约25%v/v之间。更优选地，该浓度在约5%和约20%v/v之间。在本发明的一个高度优选的形式中，该浓度在约10%和约15Wv/v之间。在本发明的一个形式中，该浓度为约15%v/v。研房在本发明的方法中，研磨体优选地是化学惰性的和刚性的。术语"化学惰性的"，如这里所用，指的是研磨体不与雷洛昔芬或磨剂起化学反应。如上所述，在研磨方法中，所述研磨体基本上耐破碎和磨蚀。可以以具有各种光滑的，规则的形状，平面的或弯曲的表面，和没有锐利的或凸起的边缘的主体形式理想地提供研磨体。例如，适合的研磨体可以是具有椭圆体，卵形体，球形或正圆柱体形状的形式。优选地，以珠，球，球体，棒，圆柱体，鼓或半径-末端的圆柱体(即，具有具有与圆柱相同的半径的半球形底部的圆柱体)的一种或多种的形式提供研磨体。研磨介质体理想地具有在约0.1和30mm之间，更优选在约1和约15mm之间，再优选在约3和10mm之间的有效平均粒径(g卩，"粒度")。所述研磨体可以以颗粒形式包括不同材料诸如陶瓷，玻璃，金属或聚合组合物。适合的金属研磨体典型地是球形的并且一般具有良好硬度(即RHC60-70)，圆度，高耐磨性，和窄的大小分布，并且可以包括，例如，从52100型铬钢，316型或440C型不锈钢或1065型高碳钢制造的球。优选的陶瓷材料，例如，可以选自多种陶瓷，所述陶瓷理想地具有充分的硬度和耐破碎性以使它们在研磨期间免于被切碎或压碎并且还具有充分高的密度。研磨介质的适合密度可以在约1至15g/ci^的范围内。优选的陶瓷材料可以选自滑石，氧化铝，锆氧化物，二氧化锆-硅石，三氧化二钇稳定的氧化锆，氧化镁稳定的氧化锆，氮化硅，碳化硅，钴稳定的碳化钨，等及其混合物。优选的玻璃研磨介质是球形的(例如珠)，具有窄的大小分布，是耐磨的，并且包括，例如，无铅的钠钙玻璃和硼硅酸盐玻璃。聚合的研磨介质优选基本上是球形的并且可以选自大量的聚合树脂，所述聚合树脂具有充分的硬度和脆碎度以使它们避免在研磨期间被切碎或压碎，具有耐磨性以使导致产物污染的磨损最小化，并且无杂质诸如金属，溶剂，和残留的单体。优选的聚合树脂，例如，可以选自交联的聚苯乙烯，诸如与二乙烯基苯交联的聚苯乙烯，苯乙烯共聚物，聚丙烯酸酯诸如聚甲基丙烯酸甲酯，聚碳酸酯，聚縮醛，氯乙烯聚合物和共聚物，聚氨酯，酰胺，高密度聚乙烯，聚丙烯，等。例如在美国专利5,478,705和5,500,331中公开了将聚合研磨介质用于研磨材料直到非常小的粒度(与机械化学合成相反)。聚合树脂典型地可以具有密度从约0.8至3.0g/cm3的密度。更高密度的聚合树脂是优选的。备选地，研磨介质可以是包括致密的芯颗粒的复合材料颗粒，具有聚合树脂粘合在其上。芯颗粒可以是选自己知用作研磨介质的材料，例如，玻璃，氧化铝，二氧化锆，硅石，锆氧化物，不锈钢，等。优选的芯材料具有大于约2.5g/cm3的密度。在本发明的一个实施方案中，研磨介质由铁磁材料组成，因此通过利用磁分离技术促进从研磨介质的磨损产生的污染物的除去。每个类型的研磨体具有它自身的优点。例如，金属具有最高的比重，其增加研磨效率，原因在于增加的冲击能量。金属成本在低至高的范围内，但是最终产品的金属污染可能是一个问题。根据小珠尺寸低到0.004mm的低成本和可利用性的观点看，玻璃是有利的。然而，玻璃的比重低于其它介质并且需要显著更多的研磨时间。最终，从低磨损和污染，容易清洁，和高硬度的观点看，陶瓷是有利的。49在本发明的一个具体形式中，研磨体包括体积约为3crr^并且质量约为40g的多个钢球。f蘑在本发明的干磨方法中，以晶体，粉末等形式的固体雷洛昔芬，其药用盐或溶剂合物和磨剂与多个研磨体以适合的比例组合在机械搅拌(即，有或者没有搅拌)的研磨室中以预定的搅动强度达预定的时期。典型地，研磨装置用于通过外部施加搅动而使所述研磨体运动，其中不同的平移的，转动的或翻转的运动或其组合被施加到研磨室和它的内容物，或通过连接叶片，螺旋桨，叶轮或平桨的旋转轴内部施加搅动而使所述研磨体运动，或通过两者作用的组合。在研磨期间，赋予研磨体的运动可以导致剪切力以及多种冲击或碰撞的施加，其在研磨体和反应物粉末的颗粒之间具有显著的强度。固体雷洛昔芬盐酸盐和磨剂受多种工艺参数影响，所述工艺参数包括研磨装置的类型；产生的力的强度，所述方法的运动学方式；研磨体的尺寸，密度，形状，和组成；固体雷洛昔芬盐酸盐和磨剂混合物对于研磨体的重量比；研磨的持续时间；磨剂的物理性质；在激活期间存在的大气；及其它。有利地，介质研磨能够将机械性压縮力和剪切应力重复或连续施加到生物活性化合物基质和磨剂。适合的介质研磨机包括但不限于下列高能球，砂，珠或珠(pearl)研磨机，篮式研磨机，轨道研磨机，振动作用球磨机，多轴振荡器/混合器，搅拌球磨机，卧式小介质研磨机，多环粉碎研磨机，等，包括小的研磨介质。研磨装置还可以含有一个或多个旋转轴。在本发明的一个优选方式中，在球磨机中实现干磨。遍及说明书的其余部分，将对通过球磨机进行的干磨进行参考。这类研磨机的实例是立式研磨机(attritormills),盘旋研磨机(nutatingmills),塔式磨机，轨道研磨机，振动研磨机和重力依赖型球磨机。应当理解，依照本发明方法的干磨还可以通过不同于球磨的任何合适的方法实现。例如，还可以使用喷射研磨机，棒研磨机，辊研磨机或破碎研磨机而实现干磨。优选但并非必须的是，如通过筛分析确定的，固体雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物的粒度小于约100pm。如果固体雷洛昔芬或其药甩盐或溶剂合物的粗粒度大于约100pm，则优选的是，使用常规研磨方法例如空气喷射或碎裂研磨，将固体雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物的颗粒在尺寸上减小到小于100pm。包會赝控,潜劳芬或真药H或霧^/合欽或使l颡教,潜萝芬或真秀^#或,^/^激紀叙游裙薪本发剪游秀激邀^激如所概述的，本发明还提供了包含所述颗粒的雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物，或使用所述颗粒的雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物配制的药物组合物。本发明的药物组合物可以包含药用载体，其中"药用载体"包括任何和全部的生理相容的溶剂，分散介质，包衣材料，抗菌药和抗真菌药，等渗和吸收延迟剂等。优选地，该载体适于肠胃外给药，静脉内，腹膜内，肌内，舌下，经皮或经口给药。药用载体包括无菌水溶液或分散体，以及用于无菌可注射溶液或分散体的临时制备的粉末。用于药物的制造的这样的介质和试剂的使用在本领域中是熟知的。除与纳米粒形式的药用化合物不相容的任何常规的介质或试剂的范围以外，考虑它们在根据本发明的药物组合物的制造中的使用。根据本发明的药用载体可以包括下列实例的一种或多种(1)能够粘附到活性试剂的表面上，但是不参与或与该活性试剂(agent)本身进行任何化学反应的聚合物表面活性剂，例如包括但不限于下列化合物的聚合物表面稳定剂聚乙二斷PEG)，聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)，聚乙烯醇，corspovidone,聚乙烯基吡咯烷酮-聚丙烯酸乙烯酯共聚物，纤维素衍生物，羟丙基甲基纤维素，羟丙基纤维素，羧甲基乙基纤维素，羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯，聚丙烯酸酯和聚甲基丙烯酸酯，脲，糖，多元醇以及它们的聚合物，乳化剂，糖胶(sugargum)，淀粉，有机酸和它们的盐，乙烯基吡咯烷酮和乙酸乙烯酯；和或(2)粘合剂，例如各种纤维素和交联的聚乙烯基吡咯烷酮，微晶纤维素；和或(3)填充剂，例如一水合乳糖，无水乳糖，以及各种淀粉；和或(4)润滑剂，例如对要被压縮的粉末的流动性起作用的试剂，包括胶体二氧化硅，滑石，硬脂酸，硬脂酸镁，硬脂酸钙，二氧化硅凝胶；和或(5)甜味剂，例如任何天然或人工甜味剂，包括蔗糖，木糖醇，糖精钠，环己基氨基磺酸酯，天冬甜素，以及安赛蜜K;和或(6)增香剂；和或(7)防腐剂，例如山梨酸钾，羟苯甲酸甲酯，对羟苯甲酸甲酯，苯甲酸和它的盐，对羟基苯甲酸的其它的酯例如尼泊金丁酯，醇例如以及或节基醇，酚类化合物例如苯酚，或四元化合物例如苯扎氯铵；和或(8)缓冲剂；和或(9)稀释剂，例如药用惰性填料，例如微晶纤维素，乳糖，磷酸氢钙，糖类和/或任何的上述化合物的混合物；和或(10)湿润剂，例如玉米淀粉(comstarch)，马铃薯淀粉，玉米淀粉(maizestarch)，以及改性淀粉，交联羧甲纤维素钠，交联聚乙烯基吡咯烷酮，羧基乙酸淀粉钠，以及它们的混合物；和或(11)崩解剂；和或(12)泡腾剂，例如泡腾对(effervescentcouple)，例如有机酸(例如，柠檬酸，酒石酸，苹果酸，富马酸，脂肪酸，琥珀酸和褐藻酸，以及酸酐和酸盐)，或碳酸盐(例如，碳酸钠，碳酸钾，碳酸镁，甘氨酸碳酸钠，L-赖氨酸碳酸盐和精氨酸碳酸盐)或碳酸氢盐(例如碳酸氢钠或碳酸氢钾)；和或(13)其它的药用赋形剂。适用于动物，并且特别适用于人的本发明的药物组合物典型必须是无菌的，并且在制造和储存的条件下稳定。含有纳米粒的药物组合物可以被配制成溶液，微乳液，脂质体，或适于高的药物浓度的其它有序结构。以任意的药用方式，例如，经口，直肠，肺，阴道内，局部(粉末，膏剂或滴剂)，经皮，或作为口或鼻的喷剂，本发明的药物组合物可以给药于人和动物。雷洛昔芬遭受显著的初次通过(first-pass)新陈代谢，其影响生物利用度。通常认为常规配制的雷洛昔芬不适于经皮递送。然而，本发明的颗粒的雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物更适于这样的递送。用于经口给药的固体剂型包括胶囊，片剂，丸剂，散剂，小丸和颗粒52等。这样的剂型还可以包含缓冲剂。本发明的药物组合物可以作为悬浮在可接受载体，优选水性载体中的微粒雷洛昔芬盐酸盐的溶液而肠胃外给药。可以使用多种水性载体，例如水，缓冲水，0.4%的盐水，0.3%的甘氨酸，透明质酸等。这些组合物可以通过常规的，熟知的灭菌技术除菌，或可以过滤除菌。产生的水溶液可以被包装以原样使用，或可以被冻干，并且在给药前将冻干的制剂与无菌溶液混合。对于气溶胶给药，本发明的药物组合物优选与表面稳定剂和推进剂一起提供。表面稳定剂当然必须是非毒性的，并且优选在推进剂中可溶解。这样的试剂的代表是含有6至22个碳原子的脂肪酸例如，己酸，辛酸，月桂酸，棕榈酸，硬脂酸，亚油酸，亚麻酸，olesteric酸以及油酸和脂族多元醇或它的环状酐的酯或部分酯。可以使用混合的酯，例如混合或天然的甘油酯。表面稳定剂可以构成组合物重量的0.1%-20%，优选0.25%-5%。该组合物的余量通常是推进剂。在需要时，还可以包含载体，例如具有例如用于鼻内递送的磷脂酰胆碱。本发明的药物还可以经由脂质体给药，所述脂质体用于将活性试剂靶向具体组织例如淋巴组织，或选择性地靶向细胞。脂质体包括乳液，泡沫，微囊，不溶性单层，液晶，磷脂分散体，薄层等。在这些制剂中，纳米复合微结构组合物作为脂质体的一部分被单独掺入，或连同与结合到其它的治疗或免疫组合物上的分子一起惨入。另外，本发明的化合物非常适于作为持续释放剂型的制剂。该制剂还可以如此构造，使得它们仅或优选在肠管道的具体部位中和/或在一定时期内，释放活性成分。这样的制剂可以包括涂剂，包剂，或可以由聚合物或蜡制成的保护性基质。适当的表面稳定剂可以包括CTAB，氯化十六烷基吡啶鑰，明胶，酪蛋白，磷脂，葡聚糖，甘油，阿拉伯树胶，胆固醇，黄蓍胶，硬脂酸，硬脂酸酯和盐，硬脂酸钙，单硬脂酸甘油酯，十八十六醇，聚西托醇乳化蜡，失水山梨醇酯，聚氧乙烯烷基醚，聚氧乙烯蓖麻油衍生物，聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯，聚乙二醇，十二垸基三甲基溴化铵，聚氧乙烯硬脂酸酯，胶体二氧化硅，磷酸酯，十二烷基硫酸钠，羧甲基纤维素钙，羟丙基纤维53素，羟丙基甲基纤维素，羧甲基纤维素钠，甲基纤维素，羟乙基纤维素，邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素酯，非晶纤维素，硅酸镁铝，三乙醇胺，聚乙烯醇，聚乙烯基吡咯烷酮，具有氧化乙烯和甲醛的(4-(1,1,3，3-四甲基丁基)-酚聚合物，泊洛沙姆，泊洛沙胺，带电磷脂，二肉豆蔻酰磷脂酰甘油，琥珀酸二辛基磺酸酯，磺基琥珀酸的二烷基酯，辛丁酯磺酸钠，十二烷基硫酸钠，烷基芳基聚醚磺酸盐，蔗糖硬脂酸酯和蔗糖二硬脂酸酯的混合物，结构为-(-PEO)—(-PBO-)—(-PEO-)-的三嵌段共聚物，对-异壬基苯氧基聚-(缩水甘油)，癸酰基-N-甲基葡糖胺；n-癸基卩-D-吡喃葡糖苷，n-癸基卩-D-麦芽吡喃糖苷，n-十二烷基(3-D-吡喃葡糖苷，n-十二烷基(3-D-麦芽苷，庚酰基-N-甲基葡糖酰胺，n-庚基(3-D-吡喃葡糖苷，n-庚基(3-D-硫代葡糖苷，n-己基P-D-吡喃葡糖苷，壬酰基-N-甲基葡糖酰胺，n-壬酰基(3-D-吡喃葡糖苷，辛酰基-N-甲基葡糖酰胺，n-辛基(3-D-吡喃葡糖苷，辛基(3-D-硫代吡喃葡糖苷，溶菌酶，PEG衍生的磷脂，PEG衍生的胆甾醇，PEG衍生的胆甾醇衍生物，PEG衍生的维生素A，PEG衍生的维生素E，以及乙酸乙烯酯和乙烯基吡咯烷酮的无规共聚物，和/或上述化合物的任何一种的混合物。适当的表面稳定剂还可以包括选自由聚合物，生物聚合物，多糖，纤维素衍生物，藻酸酯，非聚合化合物和磷脂组成的组中的阳离子表面稳定剂。适当的表面稳定剂还可以包括由下列化合物组成的组中的表面稳定剂阳离子类脂，氯化苯甲烃胺，锍化物，磷鐵化合物，季铵化合物，苄基-二(2-氯乙基)乙基溴化铵，椰油基三甲基氯化铵，椰油基三甲基溴化铵，椰油基甲基二羟乙基氯化铵，椰油基甲基二羟乙基铵，十二垸基三乙基氯化铵，十二烷基二甲基羟乙基氯化铵，十二烷基二甲基羟乙基氯溴化铵，C,2-,5二甲基羟乙基氯化铵，C,2.,5二甲基羟乙基氯溴化铵，椰油基二甲基羟乙基氯化铵，椰油基二甲基羟乙基溴化铵，肉豆蔻基三甲基甲基硫酸铵，月桂基二甲基苄基氯化铵，月桂基二甲基苄基溴化铵，月桂基二甲基(氧乙烯基)4氯化铵，月桂基二甲基(氧乙烯基)4溴化铵，n-垸基(<:12.18)二甲基苄基氯化铵，『烷基((:14.18)二甲基-节基氯化铵，N-十四烷基二甲基苄基一水合氯化铵，二甲基二癸基氯化铵，N-烷基和(C^4)二甲基l-萘基甲基氯化铵，三甲基卤化铵，烷基-三甲基铵盐，二烷基-二甲基铵盐，月桂基三甲基氯化铵，乙氧基乙醇氨基垸基二烷基铵盐，乙氧基三烷基铵盐，二烷基苯二烷基氯化铵，N-二clecyl二甲基氯化铵，N-四癸基二甲基苄基一水合氯化铵，N-垸基(dw4)二甲基l-萘基甲基氯化铵，十二烷基二甲基苄基氯化铵，二垸基苯烷基氯化铵，月桂基三甲基氯化铵，烷基苄基甲基氯化铵，烷基苄基二甲基溴化铵，C,2三甲基溴化铵，C,5三甲基溴化铵，C17三甲基溴化铵，十二垸基苄基三乙基氯化铵，聚二烯丙基二甲基氯化铵(DADMAC)，二甲基氯化铵，烷基二甲基卤化铵，三鲸蜡基甲基氯化铵，癸基三甲基溴化铵，十二烷基三乙基溴化铵，四癸基三甲基溴化铵，甲基三辛基氯化铵，POLYQUAT10,四丁基溴化铵，苄基三甲基溴化铵，胆碱酯，苯扎氯胺，硬脂酰氯联二甲苯酰氨(stearalkoniumchloride)化合物，溴化鲸蜡基十六烷基吡啶，氯化鲸蜡基十六垸基吡啶，季铵化的聚氧乙烯垸基胺的氯化物盐，MIRAPOL,ALKAQUAT,烷基吡啶盐；胺，胺盐，胺氧化物，二酰亚胺唑鎰(azolinium)盐，质子化的四元丙烯酰胺，甲基化的四元聚合物，阳离子瓜耳胶，聚甲基丙烯酸甲酯三甲基溴化铵，聚乙烯基吡咯烷酮-丙烯酸2-甲基氨基乙基甲酯二甲基硫酸盐，六癸基三甲基溴化铵，聚(2-甲基丙烯酰氧基乙基三甲基溴化铵)(S1001)，聚(N-乙烯基吡咯烷酮/丙烯酸2-二甲基氨基乙基甲酯)二甲基硫酸酯四元结构(S1002)，(S-630)聚(吡咯烷酮-共-乙酸乙烯酯)和聚(2-甲基丙烯酰氧基氨基丙基三甲基氯化铵)(S1004)。在一些实施方案中，优选的表面稳定剂是CTAB。在其中使用本发明的方法制备微粒雷洛昔芬盐酸盐，并且所述本发明的方法利用表面稳定剂的一些实施方案中，在本发明的一个优选的形式中，药物组合物的表面稳定剂是与本发明中使用的表面活性剂相同的表面稳定剂。本领域中的技术人员将理解，理想的是，为了制备药物组合物，向微粒雷洛昔芬盐酸盐中加入进一步量的表面稳定剂。在其中使用本发明的方法制备颗粒的雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物，并且所述本发明的方法利用磨剂的一些实施方案中，在本发明的一个优选的形式中，药物组合物的水溶性稀释剂与本发明中使用的磨剂相同。本领域中的技术人员将理解，理想的是，为了制备药物组合物，向微粒雷55洛昔芬盐酸盐中加入进一步量的水溶性稀释剂，或在组合物的制备以前，移去磨剂的一些。在一个形式中，本发明的药物组合物是口服剂型，所述口服剂型含有根据本发明的微粒雷洛昔芬，或根据本发明的它的药用盐或溶剂合物的，以CTAB形式的表面活性剂，以及以氯化钠形式的水溶性稀释剂。作为本发明的进一步的实施方案，颗粒的雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物，可以与有效量的另外的治疗剂一起给药，所述另外的治疗剂包括但不限于雌激素；黄体酮；包括雷洛昔芬的苯并噻吩化合物；具有抗雌激素活性的萘基化合物；双膦酸酯化合物例如阿仑膦酸盐和替鲁膦酸盐；甲状旁腺激素(PTH)，包括PTH的截短和重组形式，例如PTH(l-34);降钙素；骨形态发生蛋白(BMP);或它们的组合。可获得的这些另外的治疗剂的不同形式，以及与其相关的各种效用和可应用的剂量给药方法对于本领域中的技术人员是熟知的。雌激素和黄体酮的各种形式是可商购的。如本文中所使用的，术语"雌激素"包括具有雌激素活性的化合物以及雌激素-基药剂。用于本发明的实践的雌激素化合物包括，例如，雌二醇雌酮，雌三醇，马烯雌酮，马萘雌酮，环丙酸雌二醇，戊酸雌二醇，乙炔基雌二醇，聚磷酸雌二醇，硫酸哌嗪雌酮，己烯雌酚，己二烯雌酚，氯烯雌醚，以及它们的混合物。雌激素-基药剂包括，例如，17-a-乙炔基雌二醇(0.01-0.03mg/天)，美雌醇(05-0.15mg/天)，以及缀合的雌激素例如PremarinTM(Wyeth-Ayerst;0.2-2.5mg/天)。如本文中所使用的，术语"黄体酮"包括例如具有孕酮活性的化合物，例如，孕酮，异炔诺酮，甲基炔诺酮，甲地孕酮，炔诺酮，黄体酮-基药剂等。黄体酮-基药剂包括，例如，甲孕酮例如ProveraTM(Upjohn;2.5-10mg/天)，异炔诺酮(1.0-10.0mg/天)和炔诺酮(0.5-2.0mg/天)。优选的雌激素-基化合物是PremarinTM，并且异炔诺酮和炔诺酮是优选的黄体酮-基药剂。每一种雌激素-基化合物和黄体酮-基药剂的给药方法与本领域中己知的给药方法一致。现在将通过参考下列非限制性实施例描述本发明。对实施例的描述绝不是对此说明书的前述段落的限制，而是对本发明的方法和组合物提供示例。实施例对于材料和药物领域中的技术人员将显然的是，在不背离基本的发明概念的情况下，可以对上述方法进行多种改进和更改。例如，在一些应用中，生物活性化合物基质可以被预处理并且供给到以预处理形式的工序。全部的这样的更改和改进被认为在本发明的范围内，所述发明的本质应当从前述的说明以及后附权利要求书确定。此外，下列实施例仅为了示意性的目的而提供，并且不意欲限制本发明的方法或组合物的范围。A双i芬麼与富化斜蘑，游必^使用具有含有10个10mm(40g)的不锈钢球作为研磨介质的70cm3的硬化钢球磨机容器的Spex8000D混合机/磨机，将由以0.439g的双氯芬酸(DCA)形式的生物活性化合物与以3.681g的氯化钠形式的磨剂组成的混合物(因而，以分别相应于15和85体积％的、10.7和89.3重量％提供了混合物，并且总体积为2cm"干磨15分钟。这导致了分散在磨剂氯化钠中的纳米粒形式的含有DCA的分散体的形成。为了考察DCA与NaCl的体积比对粒度的影响，在下列情况下进行研磨实验DCA与NaCl相比为5体积％(3.43重量°/。)，10体积％(7重量%)，30体积％(22.5重量％)以及50体积°/。(45重量％)(总体积为2cm3，研磨时间为15分钟)。通过用稀盐酸洗涤来去除磨剂，回收纳米粒形式的双氯芬酸超细颗粒。随后将洗涤的粉末在空气中室温干燥几小时。为了从纳米粒形式的双氯芬酸去除磨剂，以如下方法洗涤分散体。为了得到0.25§的双氯芬酸颗粒，在取决于体积百分比情况下，使用不同量的分散体。对于15体积％的DCA分散体，将2339g缓慢加入到锥形瓶中的0.01MHC1和1mMCTAB(十六垸基三甲基溴化铵)的剧烈搅拌的溶液中。将试样搅拌30分钟，并且装入15mL的离心用塑料管(福尔肯管)中。然后对该试样重复3次下列操作离心(其中对于每一个洗涤步骤，将离心速度从5,000g增加到8,000g并且最终到12,000g，历时3分钟的时期)；去除上层清液；加入0.01MHC1和lmMCTAB;以及通过涡旋和超声波处理(每次5-10秒)再分散。SEM和TEM图像(图4)显示，洗涤后的纳米粒的直径在约100-200nm的尺寸范围内。图1中示例的BET结果显示对于5体积。/。DCA得到的最高表面积(11.755士0.1035m2/g)。如可从图2看到的，动态光散射(DLS)分析显示了160士30nm的粒度。对于用表面稳定剂CTAB稳定的关于15体积％试样而得到的分散体，发现其包含双氯芬酸形式的药物(通过XRD，FTIR和DSC)，具有小于200nm的纳米粒，并且大部分约为30-50nm。纳米粒形式的DCA的TEM(在洗涤分散体并且用表面稳定剂CTAB稳定以后)还显示了球形和非球形纳米粒，所述非球形纳米粒显示为棒状，具有约30nm的短轴直径以及约150nm的长轴直径。对纳米粒形式的DCA的熔点进行DSC分析，确定它与双氯芬酸相同，具有在175-185'C范围内的烙点。图7示例了增加双氯芬酸使用NaCl磨剂(15体积％)的研磨时间的影响，显示很可能由于双氯芬酸的粒径的减小，熔点移动到的较低的温度。及,氮^与氯众斜^^/游必遝将以0.39g的常规奥氮平粉末形式的生物活性化合物放置到具有3.68g的NaCl形式的磨剂的研磨设备(70cm3的不锈钢球磨机容器)中，从而以分别相应于15和85体积％的、9.6和90.4的重量％提供58了混合物，并且总体积为2cm^在容器中使用包含40g的lOmm钢球(lO个)的研磨介质。在研磨之前，将研磨设备在室真空(housevacuum)下密闭。用压缩气流(100kcpa)实现冷却。将混合物干磨15分钟和180分钟，在对于两个时间的研磨后得到的组合物含有分散在研磨介质NaCl中的纳米粒形式的奥氮平。如可从图3看到的，得到的分散体的扫描电子显微镜(SEM)显示了约100nm的奥氮平的纳米结晶结构和纳米粒。在两个分开的研磨试验(nm)中，测定的研磨时间包括15和18分钟。对在180分钟的研磨时期制备的纳米粒的熔点分析证实，得到的组合物是奥氮平，具有在20(TC范围内的熔点。材料在180分钟显示了一些脱色，这是由于药物的降解。C.双翥,凝与氯众祭蘑莉游必^将以0.439g的常规DCA粉末形式的生物活性化合物放置到具有2.596g的NH4C1形式的磨剂的研磨设备(70cm3的不锈钢球磨机容器)中，从而以分别相应于15和85体积％的、14.5和85.5重量％提供了混合物，并且总体积为2cm3。在磨机中使用包含40g的10mm钢球(10个)的研磨介质。用压縮气流(IOOkcpa)实现冷却。研磨时间为15分钟，并且在研磨后得到的组合物含有分散在NH4C1磨剂中的纳米粒形式的DCA。纳米尺寸可以从洗涤后的代表性的TEM(图5)看到，并且在直径上为约200nm(像对于DCANaCl研磨所述的一样，进行使用0.01MHCI和1mMCTAB的洗涤)。DSC的熔点显示，得到的纳米粒为双氯芬酸(图6)。依照文献双氯芬酸的熔点为182°C，可以看到熔点为177°C，该移动可能归因于小的粒度。在194'C的大峰归因于NH4C1。59在一些实施方案中，使用本发明的方法制备微粒雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物，并且所述本发明的方法利用磨剂，在本发明的一个优选的形式中，药物组合物的水溶性稀释剂与本发明中使用的磨剂相同。本领域中的技术人员将理解，理想的是，为了制备药物组合物，向微粒雷洛昔芬盐酸盐中加入进一步量的水溶性稀释剂，或在组合物的制备以前，相对于方法中使用的磨剂的量，移去磨剂的一些。在一个形式中，本发明的药物组合物是口服剂型，所述口服剂型含有根据本发明的微粒雷洛昔芬，或根据本发明的它的药用盐或溶剂合物，CTAB形式的表面活性剂，以及氯化钠形式的水溶性稀释剂。作为本发明的进一步的实施方案，颗粒雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物可以与有效量的另外的治疗剂一起给药，所述另外的治疗剂包括但不限于雌激素；黄体酮；包括雷洛昔芬的苯并噻吩化合物；具有抗雌激素活性的萘基化合物；双膦酸酯化合物例如阿仑膦酸盐和替鲁膦酸盐；甲状旁腺激素(PTH)，包括PTH的截短和/或重组形式，例如PTH(l-34);降钙素；骨形态发生蛋白(BMP);或它们的组合。可获得的这些另外的治疗剂的不同形式，以及与其相关的各种效用和可应用的给药方法对于本领域中的技术人员是熟知的。雌激素和黄体酮的各种形式是可商购的。如本文中所使用的，术语"雌激素"包括具有雌激素活性的化合物以及雌激素-基药剂。用于本发明的实践的雌激素化合物包括，例如，雌二醇雌酮，雌三醇，马烯雌酮，马萘雌酮，环丙酸雌二醇，戊酸雌二醇，乙炔基雌二醇，聚磷酸雌二醇，硫酸哌嗪雌酮，己烯雌酚，己二烯雌酚，氯烯雌醚，以及它们的混合物。雌激素-基药剂包括，例如，17-(x-乙炔基雌二醇(0.01-0.03mg/天)，美雌醇(05-0.15mg/天)，以及缀合的雌激素例如PremarinTM(Wyeth-Ayerst;0.2-2.5mg/天)。如本文中所使用的，术语"黄体酮"包括例如具有孕酮活性的化合物，例如，孕酮，异炔诺酮，甲基炔诺酮，甲地孕酮，炔诺酮，黄体酮-基药剂等。黄体酮-基药剂包括，例如，甲孕酮例如ProveraTM(Upjohn;2.5-10mg/天)，异炔诺酮(l.0-10.0mg/天)和炔诺酮(0.5-2.0mg/天)。优选的雌激素-基化合物是Premarin，并且异炔诺酮和炔诺酮是优选的黄体酮-基药剂。每一种雌激素-基化合物和黄体酮-基药剂的给药方法与本领域中已知的给药方法一致。舒縦微卿遂如在概述中所述的，本发明还提供所述微粒雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物在制造药物中的应用，所述药物用于减轻病理，包括骨质疏松症，降低血清脂质，和抑制子宫内膜异位，子宫纤维变性，和乳腺癌；以及包含微粒雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物或使用所述雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物配制的组合物的用途，用于减轻人的病理，包括骨质疏松症，降低血清脂质，和抑制子宫内膜异位，子宫纤维变性，和乳腺癌。本发明提供了一种通过给药治疗有效量的根据本发明的微粒雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物，以治疗病理例如骨质疏松症，降低血清脂质，和抑制子宫内膜异位，子宫纤维变性，和乳腺癌的方法。根据本发明用于治疗、抑制或预防患有以上疾病的哺乳动物(包括人)的症状和/或疾病所需的微粒雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物的具体剂量，将取决于具体疾病，症状和严重性，以及归因于雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物的微粒形式的潜在增加的功效(例如，增加的溶解度，更加迅速的溶出，增加的表面积)。有效用于这样的用途的量将取决于下列方面所需的治疗效果；给药的途径；生物活性剂的功效；治疗的所需持续时间；被治疗的疾病的阶段和严重性；患者的体重和一般健康状态；以及处方医师的判断。通常，接受并有效的剂量将是15mg至1000mg，并且更典型地，15至80mg。这样的剂量将被每天给药于需要治疗的患者1至3次，或为了功效而每当在需要时给药，通常历时至少2个月的时期，更典型地，至少6个月，或长期给药。如上所述，本发明的微粒雷洛昔芬或其药用盐或溶剂合物可以通过各种途径给药，所述途径的选择将由主治医师决定。本发明的雷洛昔芬化合物可以根据己建立的工艺制成，例如美国专利4,133,814，4,418，068和4,380,635，以及由Kjell等在1995年8月30日提交，在1996年3日6日公开的公开号为0699672的欧洲专利申请95306050.6，所述专利通过引用而结合在此。另外，将1995年9月6日公开的欧洲专利申请0670162Al中公开的信息通过引用而结合在此。用于制备无定形雷洛昔芬盐以及特定药用盐的方法在本说明书的前面有讨论。d入,潜,芬m:/将常规活性药物化合物雷洛昔芬盐酸盐(0.5805g)与NaC1(5.5208g)—起引入到具有包含10x10mm钢球的研磨体的钢容器(75cm"中。雷洛昔芬盐酸盐/盐混合物的总体积为3cm3，具有15体积％的药物。通过在真空下并且在P205上储存，在研磨前将雷洛昔芬盐酸盐和氯化钠磨剂保持干燥。在真空下将钢研磨室封闭，以去除湿气和空气，减少降解/氧化。将研磨室安装在Spex球磨机上，并且振荡15分钟，并且通过压缩空气流冷却。这导致了由分散在细小NaCl的基体中的雷洛昔芬盐酸盐组成的固体分散体的形成。然后，将研磨室小心打开以释放真空，并且封闭以使得任何空气传送的颗粒沉降。然后将研磨室在通风橱中打开以防止细小颗粒的吸入，并且将内容物通过2mm的筛(用于去除研磨体)转移到8mL的玻璃瓶中，并且在真空干燥器中于P205上储存。为了从研磨的雷洛昔芬去除氯化钠，按照下列方法洗涤固体分散体。将固体分散体与0.1g的表面活性剂CTAB混合，并且放置在25mL的Schott瓶中。加入20mL0.1MHC1和1mM十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)的冰冷却的溶液。将瓶封闭，立即安装在Spex球磨机中，并且振荡3分钟。在振荡工序以后，形成浅黄色的分散体，并且将所述浅黄色的分散体在离心前储存在冰浴中。然后对该试样进行下列操作(3x):离心(对于每一个洗涤步骤，将离心速度从6000g增加到8000g并且最终到12000g，每次历时3分钟的时期)；去除上层清液；加入0.01MHC1和1mMCTAB;以及通过涡旋混合再分散。然后将分散体转移到表面皿上，并且在空气流上干燥。在干燥约3小时以后，分散体完全干燥，从而在玻璃表面上形成干层，将所述干层于真空干燥器中在P20s上储存过夜。这产生了0.48g的干燥粉末，所述干燥粉62末被储存在真空千燥器中的玻璃瓶中。在模拟胃的条件下，用USP设备测试微粒雷洛昔芬盐酸盐的溶出性质，并且与商购雷洛昔芬盐酸盐比较。将约60mg的微粒雷洛昔芬盐酸盐和商购雷洛昔芬盐酸盐分别引入到明胶胶囊中。作为溶液浓度对时间的函数，得出溶出性质。溶出条件如下在USP中使溶出容器与浆相配，将含有2gNaCl的1L0.1MHC1脱气并且使之达到37。C，并且在约80rpm搅拌。用金属沉锤(sinker)测试作为粉末或处于明胶胶囊中的雷洛昔芬盐酸盐。对于每个时间点，从该溶液移出2mL的试样，为了取得较大的聚集体，将它在10000g离心1分钟，并且从溶液的顶部取1.5ml，使用WatersHPLC测量浓度，所述HPLC运行对于特异性，线性，精确度以及可重复性有效的方法。图8中的溶出曲线显示了与商购雷洛昔芬盐酸盐相反的微粒雷洛昔芬盐酸盐的显著增强的溶解度性质，这可以例如在下列方面中看到模拟的肠液中的溶液浓度在50分钟以后增加接近5倍。为了理解这些数据，需要强调的是，使条件接近雷洛昔芬的上市剂量，并且60mg药物/升的浓度大大高于溶解度。如可以从图9a中的扫描电子显微照片看到，商购雷洛昔芬HC1颗粒看来具有宽的尺寸分布，并且玻璃状颗粒达到几个微米。在将雷洛昔芬HCl和NaCI的盐研磨以后，在尺寸上约为100-200nm的小结构是主要的特征(图9b)。在洗涤工序和千燥以后，小的结构可以归因于是雷洛昔芬HCl颗粒(因为盐基体通过洗涤被去除)，所述颗粒-样结构显示了约100-200nm的尺寸(图9c和d)。通过SEM确定的尺寸与通过动态光散射(DLS)确定的干燥前的分散体的尺寸分布(图IO)很符合。这里，粒度是用MaWemHPPS动态光散射设备测定的，在强度128士53nm(数量加权)数字之后的大小分布，检测到了300nm的第二峰。在测量以前，通过在6000g离心1分钟去除任何较大的聚集体或附聚物，并且仅分析上层清液。这表明，研磨过程中得到的颗粒在洗涤工序中没有显著生长。关于在研磨和洗涤之后的减小的粒度的其它的证据是BET表面积，所述BET表面积从商购雷洛昔芬HC1的0.1m2/g增加到微粒雷洛昔芬盐酸63盐的约7至20m2/g，这可以由在粒径减小时表面积对质量比率增加来解释。以下将不同的实施例的表面积列表。<table>tableseeoriginaldocumentpage64</column></row><table>作为减小的粒度的其它证据，熔点显示与商购产品相比，纳米粒雷洛昔芬HC1的起始点(onset)降低IO摄氏度(图11)。XRD-光谱(图12)显示，纳米粒雷洛昔芬HC1似乎处于与商购雷洛昔芬HC1相同的结晶相，并且表明，颗粒保持结晶。与商购雷洛昔芬相比，纳米粒雷洛昔芬的峰的相对加宽是减小的粒度的另外的指示。图13中显示的溶液^-NMR-光谱证实该化合物与商购雷洛昔芬HC1相同，还证实的是，在洗涤和干燥以后，存在约2重量％的表面活性剂CTAB。该溶液'H-NMR-光谱是从溶解在t/6-DMSO中的约10mg的微粒雷洛昔芬HC1和商购雷洛昔芬HC1(数据未示出)测量的。FT-IR-光谱(图14)进一步显示了雷洛昔芬HC1和纳米粒雷洛昔芬HC1的化学同一性。洗涤后的盐含量可以忽略不计，并且如通过ICP测定的，仅保留了约0.65重量％的NaCl，而商购试样显示具有约0.08重量°/。的NaCl，不具有显著更低的盐浓度。此观察也由下列方面支持与盐研磨以后直接测量的试样相比(数据未显示)，在洗涤后的试样的XRD-光谱中，NaCl图案消失。雷洛昔芬HC1的化学同一性由IR光谱的类似性进一步证实，所述IR光谱几乎同样。这还证实洗涤后的CTAB的量非常小(图14)。然而，；-电势的反转似乎显示，表面活性剂也不起重要的作用。D么就昔芬7/C7汰定形场将常规活性药物化合物雷洛昔芬盐酸盐(0.3867g)与NaC1(3.672g)—起引入到具有含有10x10mm钢球的研磨体的钢容器(75cm"中。雷洛昔芬盐酸盐/盐混合物的总体积为2cm3，具有15体积％的药物。在研磨前没有任何另外的干燥步骤的情况下，使用雷洛昔芬盐酸盐和氯化钠磨剂。在真空下将钢研磨室封闭，以从空气中去除湿气并且减小降解/氧化。将研磨室安装在Spex球磨机上，并且振荡15分钟，并且通过压縮空气流冷却。这导致了由分散在细小NaCl的基体中的雷洛昔芬盐酸组成的固体分散体的形成。然后，将研磨室小心打开以释放真空，并且封闭以使得任何空气传送的颗粒沉降。然后将研磨室在通风橱中打开以防止细小颗粒的吸入，并且将内容物通过2mm的筛(用于去除研磨体)转移到8mL的玻璃瓶中，并且在真空干燥器中于P205上储存。为了从研磨的雷洛昔芬盐酸盐去除氯化钠，按照下列方法洗涤固体分散体。将约4.1g固体分散体放置在25mL的Schott瓶中，并且加入20mL0.1MHC1和lmM十二烷基硫酸钠(SDS)的冰冷却的溶液。将瓶封闭，立即安装在Spex球磨机中，并且振荡l分钟。在振荡工序以后，形成浅黄色的分散体，并且将所述浅黄色的分散体在离心前储存在冰浴中。然后对65该试样进行在6000g历时3分钟的离心步骤，并且将上层清液去除。用4mL的0.1MHC1和1mMSDS溶液分散该试样。然后将分散体转移到表面皿上，并且在空气流上干燥。在干燥约3小时以后，分散体完全干燥，从而在玻璃表面上形成干层，将所述干层于真空干燥器中在P20s上储存过夜。XRD显示，在研磨和洗涤以后，雷洛昔芬失去晶体结构，并且从10至35(2e)在强度上的宽度增加是非晶相的指示(图15)。XRD光谱显示了研磨前，研磨后以及洗涤后的不同处理阶段。商购雷洛昔芬显示了归因于它的结晶态的显著峰。盐研磨后的主峰(Prevalentpeak)大部分归因于氯化钠以及铝试样支持物的使用，雷洛昔芬HC1的峰不能确定，因为它们在基体中过于稀释。在一个洗涤步骤以后，氯化钠的一些峰保留，但是仅可以看到归因于非晶相的雷洛昔芬HC1的宽条带。仅存在少许与相关的雷洛昔芬HC1晶体有关的峰，表明形成了一些晶序。XRD光谱还显示，仍有一些氯化钠保留在试样中，如可以从在约27(20)的峰看出。SEM显示，以约100-200nm的尺寸形成了一些小的颗粒。该颗粒的一些看来稍微细长(图16)。BET表面积据测量为10.6mVg，这证实形成了具有高的表面积的材料，并且得到来自SEM图像的结果的支持。IR-光谱，具体地，在2960cm"的峰显示，雷洛昔芬HC1盐存在于研磨的试样以及研磨并洗涤的试样中(图17)。与纯的雷洛昔芬HC1光谱中的峰相比，一些峰较不突出，但这可能归因于残留的盐。D3.認昔芬辦减用10个10mm的钢球将0.3640g雷洛昔芬游离碱和3.6725gNaC1(20体积％药物)在室温研磨15分钟。开始的SEM显示大块的玻璃样的雷洛昔芬碱，并且没有细小的结构，但是非常平滑(图18a和b)。相反，在盐研磨以后的SEM显示了具有直径约100nm的小颗粒的细小结构，其形成较大的附聚体(图18c和d)。该颗粒看来形状均匀，并且不能观察到盐或药物之间的区别。66在球磨以后，通过在pH9的缓冲液中分散来大部分地去除盐，在所述缓冲液中，雷洛昔芬的溶解度非常低，但是NaCl将溶解(O.OlM的TRIS-缓冲液，用HCl调节pH值)(TRIS:三(羟甲基)氨基甲垸盐酸盐)。为了胶体稳定颗粒，并且为了防止聚集，加入非离子表面活性剂PlasdoneS-630(0.5g/mL)和离子表面活性剂十二烷基硫酸钠SDS(0.2mM)(图19)。在50mL之前提及的混合物中用磁力搅拌棒搅拌分散体15分钟，随后在水浴中超声处理几秒钟。然后，使用15mL的法尔康管和5,000g的离心速度，通过离心洗涤该分散体。将上层清液弃除，并且通过振荡，用30mL的0.01MTris-缓冲液(pH9)和1mMSDS分散沉淀物。随后进行在5,000g的进一步的离心，并且用3mL的0.01MTris(pH9)和1mMSDS分散沉淀。将分散体在氮气流上干燥，并且真空干燥。图20中的SEM图像揭示了在纳米尺度上的细小结构，其显示了小于100nm的结构。颗粒看来具有可能由聚合物表面活性剂Plasdone桥接的干燥的网络样结构。BET表面积显示了57.7178±0.4095m2/g的非常大的表面积。以1.3g/cm3的密度计算，并且假定是单分散的纳米粒，具有这样的表面积的粒径将是约80nm(对于1.2g/cm3的密度，85nm;并且对于1.4g/cm3，70nm)。XRD显示，雷洛昔芬碱是无定形的，并且在洗涤后得到的产物同样是无定形的，它还显示了与雷洛昔芬HC1盐显著不同的峰(图21)。粉末XRD显示，在研磨和洗涤以后，雷洛昔芬(雷洛昔芬(ralox))游离碱得以保留。盐研磨试样的光谱由NaCl的强峰占优；在洗涤以后，NaCl峰的更低的强度显示NaCl的量大大减少，并且揭示了雷洛昔芬游离碱的无定形相。与直接在盐研磨以后、在去除盐基体以前的试样相比，雷洛昔芬游离碱似乎仍包含少量的NaCl。根据漫反射IR，显示在球磨以后并且在基体的溶解以后，游离碱得以保留(图22)，如在约2900cm'1的峰显示的。在基体的溶解以后，在约1750cm'1的另外的峰最可能归因于非离子表面活性剂PlasdoneS-630,所述非离子表面活性剂PlasdoneS-630可能覆盖纳米粒的表面。可以得出结论，可以形成覆盖有非离子表面活性剂Plasdone的无定形雷洛昔芬游离碱的小于100nm的颗粒。此研究包括在将两种剂型对12只雄性和雌性的小猎兔犬(beagledog)经口给药以后，对雷洛昔芬盐酸盐的药代动力学进行研究。研究的该两种剂型为l)根据本发明的方法开发的雷洛昔芬盐酸盐颗粒，和2)标准API。两种形式都作为由TetraQ药物实验室(PharmaceuticslaboratoryofTetraQ)制备的胶囊来给药。如在对狗给药之前测试的，微粒雷洛昔芬盐酸盐具有下列性质>75%的颗粒的尺寸在220-350nm的范围内，并且>90%的颗粒的尺寸在160-342nm的范围内。差示扫描量热法，或DSC，显示了与参比API相比熔化起始点(onset)约降低10°C。微粒雷洛昔芬在标准条件下，在模拟的胃液和模拟的肠液中的溶出(在1L液体中为60mg)显示了与参比API相比的在溶出方面的显著增加。对于SGF，在加入后90分钟，相对于8mg/L的参比API，约15mg/L的微粒雷洛昔芬被检测到；并且对于SIF，在加入后90分钟，相对于0.75mg/L的参比API，约4.5mg/L的微粒雷洛昔芬被检测到。注意的是，当没有对试样进行使用研钵和研杵的短暂研磨时，观察到较不显著的增加。研磨对参比API的溶出曲线不起作用，然而，增加了雷洛昔芬盐酸盐的溶出速率和溶解度。这与微粒雷洛昔芬中存在疏松的附聚体而参比API中不存在疏松的附聚体相一致。该研究被设计作为在6只雄性和6只雌性健康的小猎兔犬中进行的交叉试验。将雷洛昔芬作为一个口服剂量对3只雄性加上3只雌性狗给药，所述3只雄性加上3只雌性狗各自在两种给药情形的每一种上接受两种剂型中的一种。在每次给药以后，在24小时时期内从每只动物收集11个血浆试样，并且这些全部可用于雷洛昔芬浓度的测定。将血浆试样在干冰上运输到TetraQ-ADME实验室，并且全部的血浆试样在到达时处于完整(冷冻)的状态。通过由TetraQ-ADME开发并验证的LC-MS/MS化验测定血浆试样中的雷洛昔芬浓度。使用Excel软件用目的-书写宏(purpose-writtenmacros)进行药代动力学分析。使用标准的与模型无关的药代动力学方法。在该计算中，使用了指定取样时间(i)C最大(ii)T最大(iii)ke(iv)t'/2(v)AUC。-t(Vi)AUCt.oo(vii)AUC。國血浆雷洛昔芬浓度用于确定下列参数最大血浆浓度，直接从原始数据读取。达到C^的时间，也直接从原始数据读取。末端清除速率常数，所述最终清除速率常数被确定为与近似10g-线性末端消除阶段拟合最好的回归线的斜率(使用Excd2003软件中的最小二乘线性回归功能)。来自最终的3或4个可测量浓度的数据被用于全部的数据组的回归分析。最终清除半衰期-ln2/ke面积，所述面积即为在血浆浓度-时间曲线以下、从时间零点至测定的定量下限以上的最后可测量的雷洛昔芬浓度的时间的面积，其通过梯形规则积分法确定。将在第一个可测量浓度之前出现的小于定量下限(LLOQ)的浓度值设定为零。面积，所述面积是在血浆-浓度-时间曲线以下、从最后测量血浆浓度的时间点至无限的面积，其通过公式CVke确定，其中，Ct是在最后测量血浆浓度出现时拟合最好的直线上计算的浓度值，并且ke是如上所述的末端清除速率常数。AUC(M和AUCt.oo的总和。单独的受试者数据已经使用线性浓度标度绘出，并且显示在图23中。iCeutica雷洛昔芬HC1纳米粒通常被标记为试验物1，而商购雷洛昔芬HC1被标记为试验物2。在对于每个剂量给药组的每个指定取样时间的平均值土SD值显示在图24的表和图形式中。对于每一个剂量给药组的平均值士SD数据显示于图25中。在图26中，对两个剂量给药组的C^和AUQ-t结果进行另外比较。与在给药商购API以后的最大血浆浓度(C^c)和在浓度对时间曲线下的面积(AUCo.t)相比，微粒雷洛昔芬HC1的给药导致最大血浆浓度(C最大)增加约59%，并且在浓度对时间曲线下的面积(AUCo-t)增加56%(分别地，6912.26±5.47和7.69±4.54ng/mL，以及33.39±20.54和21.36±16.79ng.h/mL)。另外，与在给药商购API以后相比，在给药微粒雷洛昔芬HC1以后的对于最大浓度的中值时间(T^)更短(分别地，l.OO对1.50小时)。对单独动物的AUQ.t和C駄的分析显示，与商购API相比，在给药微粒雷洛昔芬HC1以后所有动物都遵循更高结果的模式，除了关于一只雌性动物的那些数据以外，对于该只雌性动物，在给药微粒雷洛昔芬HC1以后得到较低的AUCo-t和C最大结果。该狗的结果明显与其它动物的那些结果不一致；然而，对于该结果的明显不一致性不能提供解释。在给药两种制剂以后，得到的结果之间的变化相当大。还没有对该数据进行正式的统计比较。然而，更高的C最大和AUC。—t结果以及更短的T最大结果表明，本发明的制剂具有以导致更高的血浆浓度的方式影响雷洛昔芬的血浆药代动力学的潜能，所述更高的血浆浓度在治疗时期的最初以及整个过程中达到。求诺^特与富众欽蘑淑在冷效游磨,教炉游必^以20mL的体积，对应于1:7的体积比(15%:85%)，将以5g非诺贝特形式的生物活性剂化合物与37g氯化钠放置在具有约1kg的0.25英寸不锈钢磨球的110mL磨碎机(UnionProcess,01-HD改进型)中。通过使用外部循环冷冻器将研磨容器维持在0。C，并且在氩气流下进行研磨。研磨在500rpm进行30，45和60分钟，并且将颗粒在去离子水中洗涤，以去除氯化钠。图27显示得到的约700nm，500nm以及小于50nm的颗粒。使鹏鰣舰蘑游,潜萝,船将常规活性剂药物化合物雷洛昔芬盐酸盐(0.5805g)与乳糖(4.284g)—起引入到具有含有10x10mm钢球的研磨体的钢容器(75cm"中。雷洛昔芬70盐酸盐/乳糖混合物的总体积为3cm3，并且15体积％为药物。在研磨前，通过在真空下并且在P205上储存，将雷洛昔芬盐酸盐和乳糖磨剂保持干燥。在真空下将钢研磨室封闭，以去除湿气和空气，减少降解/氧化。将研磨室安装在Spex球磨机上，并且振荡15分钟，并且通过压缩空气流冷却。这导致了由分散在乳糖基体中的雷洛昔芬盐酸盐组成的固体分散体的形成。然后，将研磨室小心打开以释放真空，并且使得任何空气传送的颗粒沉降。然后将研磨室在通风橱中打开以防止细小颗粒的吸入，并且将内容物通过2mm的筛(用于去除研磨体)转移到8mL的玻璃瓶中，并且在真空干燥器中于P20s上储存。如可以从SEM图像(图28)看到的，药物和乳糖磨剂的混合物包含小于100nm的颗粒，所述颗粒据认为表示雷洛昔芬药物。图28a显示在研磨以后，形成了远小于5微米的一些小的颗粒。在更大的放大倍数下，可以看到显示具有约100nm的纳米粒单元的颗粒的亚结构。将颗粒在乳糖和NaCl磨剂中的溶出与商购API比较(图29)。乳糖和NaCl研磨的雷洛昔芬显示了相对于API增加的溶出性质，这证明了使用多种磨剂增强药物的溶出性质的能力，并且还表明在配制以前，不需要将磨剂从API分离，以保持这些增强的性质。G柳晃辦舰蘼鹏舒游庸滅将常规活性药物化合物奥氮平游离碱(0.5846g)与乳銜4.284g)—起引入到具有含有10x10mm钢球的研磨体的钢容器(75cm"中。奥氮平/乳糖混合物的总体积为3cm3，并且15体积％为药物。在研磨前，通过在真空下并且在P205上储存，将奥氮平游离碱和乳糖磨剂保持干燥。在真空下将钢研磨室封闭，以去除湿气和空气，减小降解/氧化。将研磨室安装在Spex球磨机上，并且振荡15分钟，并且通过压缩空气流冷却。这导致了由分散在乳糖磨剂中的奥氮平游离碱组成的固体分散体的形成。然后，将研磨室小心打开以释放真空，并且使得任何空气传送的颗粒沉降。然后将研磨室在通风橱中打开以防止细小颗粒的吸入，并且将内容71物通过2mm的筛(用于去除研磨体)转移到8mL的玻璃瓶中，并且在真空干燥器中于P20s上储存。如可从图30看到的，在乳糖磨剂中研磨以后，可以得到细小颗粒。期望的是，广泛范围的GRAS化合物可以被用作用于本发明的目的的磨剂。然而，一些磨剂可以提供特定的优点。例如，在与奥氮平-氯化钠磨剂混合物类似的条件下制备的奥氮平-乳糖磨剂混合物似乎显示了优异的流动性，这在自动配制系统中是有利的。对于材料和药物领域中的技术人员将显然的是，在不背离基本的发明概念的情况下，可以对上述方法进行多种提高和更改。例如，在一些应用中，前体生物活性剂化合物可以被预处理并且以预处理的形式供给到工序。全部的这样的更改和提高被认为属于本发明的范围内，本发明的本质应当从前述的说明以及后附权利要求书确定。此外，前述实施例仅为了举例说明的目的而提供，并且不意欲限制本发明的方法或组合物的范围。权利要求1.一种方法，所述方法用于生产包含生物活性化合物的纳米粒的组合物，所述方法包括下列步骤在包括多个研磨体的研磨机中将固体生物活性化合物和可研磨的磨剂干磨一段时期，所述时期足以产生固体分散体，所述固体分散体包含分散在至少部分研磨的磨剂中的所述生物活性化合物的纳米粒。2.权利要求1的方法，其中所述纳米粒的平均尺寸小于选自由200nm，100nm，75nm，50nm，和40nm组成的组的一个尺寸。3.权利要求2的方法，其中至少50%的所述纳米粒的粒度在所述平均尺寸范围内。4.权利要求3的方法，其中至少75%的所述纳米粒的粒度在所述平均尺寸范围内。5.任一在前权利要求的方法，其中所述时期是选自由下列组成的组的范围5分钟-2小时，5分钟-l小时，5分钟-45分钟，5分钟-30分钟，和10分钟-25分钟。6.权利要求1-5的任一项的方法，其中所述研磨介质选自由陶瓷，玻璃，聚合物，铁磁质，和金属组成的组。7.权利要求6的方法，其中所述研磨介质是钢球，所述钢球的直径选自由下列组成的组1-20mm，2-15mm，禾Q3-10mm。8.任一在前权利要求的方法，其中所述生物活性化合物选自由下列组成的组生物制剂，氨基酸，蛋白质，肽，核苷酸，核酸，和类似物，同系物和一级衍生物。9.权利要求8的方法，其中所述生物活性化合物选自由下列组成的组抗肥胖症药，中枢神经系统兴奋剂，类胡萝卜素，皮质类固醇，弹性蛋白酶抑制剂，抗-真菌药，肿瘤治疗剂，抗催吐药，镇痛药，心血管药，抗炎药，诸如NSAIDs和C0X-2抑制剂，驱肠虫药，抗心律失常药，抗生素(包括青霉素)，抗凝血剂，抗抑郁药，抗糖尿病药剂，抗癫痫药，抗组胺药，抗高血压剂，抗毒蕈碱剂，抗分支杆菌剂，抗肿瘤剂，免疫抑制剂，抗甲状腺剂，抗病毒剂，抗焦虑药，镇静药(安眠药和神经安定药)，收敛剂，a-肾上腺素能受体阻断剂，(3-肾上腺素受体阻断剂，血液产品和替代物，心脏变力剂，造影剂，咳嗽抑制剂(祛痰药和粘液溶解药)，诊断剂，诊断成像剂，利尿药，多巴胺能药(抗帕金森病剂)，止血剂，免疫剂，脂质调节剂，肌肉弛缓药，拟副交感神经药，甲状旁腺降钙素和双膦酸盐，前列腺素，放射药物，性激素(包括类固醇)，抗过敏药，兴奋剂和减食欲药，拟交感神经药，甲状腺剂，血管扩张药，和黄嘌呤。10.权利要求9的方法，其中所述生物活性化合物选自由下列组成的组氟哌啶醇，盐酸DL异丙肾上腺素，特非那定，盐酸普萘洛尔，盐酸地昔帕明，沙美特罗，柠檬酸西地那非，他达拉非，伐地那非，芬那酸，吡罗昔康，萘普生，扶他林片(双氯芬酸)，罗非考昔，布洛芬昂丹司琼，舒马曲坦，那拉曲坦，酒石酸麦角胺加咖啡因，methylsegide，奥氮平，雷洛昔芬，和非诺贝特。11.任一在前权利要求的方法，其中所述磨剂选自由下列组成的组硫酸氢钠，碳酸氢钠，氢氧化钠，琥珀酸，延胡索酸，马来酸，酒石酸，柠檬酸，氯化铵，甲胺盐酸盐，溴化铵，结晶氢氧化物，碳酸氢盐，药用碱金属的碳酸氢盐，硫酸钠，氯化钠，偏亚硫酸氢钠，硫代硫酸钠，氯化铵，芒硝，碳酸铵，硫酸氢钠，硫酸镁，明矾，氯化钾，碳酸钠，碳酸氢钠，碳酸钾，碳酸氢钾，和乳糖。12.任一在前权利要求的方法，所述方法还包括除去至少一部分的所述至少部分研磨的磨剂，其中所述纳米粒具有小于200nm的平均粒度。13.权利要求12的方法，其中除去所述至少部分研磨的磨剂的至少25%。14.权利要求13的方法，其中除去所述至少部分研磨的磨剂的至少50%。15.权利要求14的方法，其中除去所述至少部分研磨的磨剂的至少75%。16.权利要求15的方法，其中除去基本上全部的所述至少部分研磨的磨剂。17.—种用于制造药物的方法，所述方法包括权利要求1-16的任一项的方法，并且还包括将治疗有效量的由此产生的所述纳米粒组合物与药用载体组合的步骤。18.—种纳米粒组合物，所述纳米粒组合物包含通过权利要求1-16的任一项的方法产生的生物活性化合物的纳米粒。19.一种药物组合物，所述药物组合物包含通过权利要求17的方法产生的生物活性化合物的纳米粒。20.权利要求18的纳米粒组合物，其中所述纳米粒的平均尺寸小于选自由200nm，100nm，75nm，50nm，和40nm组成的组的一个尺寸。21.权利要求20的纳米粒组合物，其中至少50%的所述纳米粒的粒度在平均尺寸范围内。22.权利要求21的纳米粒组合物，其中至少75%的所述纳米粒的粒度在平均尺寸范围内。23.权利要求19的药物组合物，其中所述纳米粒的平均尺寸小于选自由200nm，100nm，75nm，50nm，和40nm组成的组的一个尺寸。24.权利要求23的药物组合物，其中至少50%的所述纳米粒的粒度在平均尺寸范围内。25.权利要求24的药物组合物，其中至少75%的所述纳米粒的粒度在平均尺寸范围内。26.权利要求20-22的任一项的纳米粒组合物，其中所述生物活性化合物是双氯芬酸。27.权利要求26的纳米粒组合物，其中所述磨剂是选自由下列组成的组的至少一个成员Na2C03，NaHC03，NH4C1，和NaCl。28.权利要求23-25的任一项的药物组合物，其中所述生物活性化合物是双氯芬酸。29.权利要求28的药物组合物，其中所述磨剂是选自由下列组成的组的至少一个成员Na2C03，NaHC03，NH4C1，和NaCl。30.权利要求20-22的任一项的纳米粒组合物，其中所述生物活性化合物是萘普生。31.权利要求30的纳米粒组合物，其中所述磨剂是选自由下列组成的组的至少一个成员Na2C03，NaHC03，NH4C1，和NaCl。32.权利要求23-25的任一项的药物组合物，其中所述生物活性化合物是萘普生。33.权利要求32的药物组合物，其中所述磨剂是选自由下列组成的组的至少一个成员Na2C03，NaHC03，NH4C1，和NaCl。34.权利要求20-22的任一项的纳米粒组合物，其中所述生物活性化合物是奥氮平。35.权利要求34的纳米粒组合物，其中所述磨剂是NH4C1。36.权利要求23-25的任一项的药物组合物，其中所述生物活性化合物是奥氮平。37.权利要求36的药物组合物，其中所述磨剂是NH4C1。38.权利要求20-22的任一项的纳米粒组合物，其中所述生物活性化合物是西地那非。39.权利要求38的纳米粒组合物，其中所述磨剂是柠檬酸。40.权利要求23-25的任一项的药物组合物，其中所述生物活性化合物是西地那非。41.权利要求40的药物组合物，其中所述磨剂是柠檬酸。42.权利要求20-22的任一项的纳米粒组合物，其中所述生物活性化合物是雷洛昔芬。43.权利要求42的纳米粒组合物，其中所述磨剂是NaCl。44.权利要求23-25的任一项的药物组合物，其中所述生物活性化合物是西地那非。45.权利要求44的药物组合物，其中所述磨剂是NaCl。46.—种纳米粒组合物，所述纳米粒组合物包含生物活性化合物的纳米粒，所述生物活性化合物的纳米粒由下列方法形成在包括多个研磨体的研磨机中将固体生物活性化合物和可研磨的磨剂干磨一段时期，所述时期足以产生固体分散体，所述固体分散体包含分散在至少部分研磨的磨剂中的所述生物活性化合物的纳米粒。47.权利要求46的纳米粒组合物，其中所述纳米粒的平均尺寸小于选自由200nm，100nm，75nm，50nm，和40nm组成的组的一个尺寸。48.权利要求47的纳米粒组合物，其中至少50%的所述纳米粒的粒度在平均尺寸范围内。49.权利要求48的纳米粒组合物，其中至少75%的所述纳米粒的粒度在平均尺寸范围内。50.权利要求46-49的任一项的纳米粒组合物，其中所述方法还包括除去所述至少部分研磨的磨剂的至少一部分的步骤。51.—种治疗需要该治疗的人的方法，所述方法包括以下步骤施用药物有效量的选自由任一在前权利要求的纳米粒组合物、任一在前权利要求的药物组合物、和任一在前权利要求的药物组成的组的一个成员。全文摘要一种方法，所述方法用于生产包含生物活性化合物的纳米粒的组合物。文档编号A61K9/51GK101568330SQ200780024802公开日2009年10月28日申请日期2007年6月29日优先权日2006年6月30日发明者弗兰克·卡鲁索,拉法埃莱·卡马拉诺,费利克斯·迈泽尔,阿尔马·波斯特马申请人:伊休蒂卡有限公司