专利名称：改进的心肌梗死再灌注模型及制备使用方法
技术领域：
本发明属于生命科学领域，特别是心肌梗死的再灌注模型技术领域。
技术背景以往采用直接结扎或縮窄环闭塞冠状动脉制备心肌梗死模型，制备心肌梗 死再灌注模型需要二次手术剪开结扎线或松开縮窄环。因此对实验动物的创伤比较严重，且要进行二次麻醉，模型制备相对烦杂，也使动物死亡的机率增大， 同时，实验的成本也较高。发明内容针对以上两种模型制备过程复杂、成本高的缺点，本发明的目的是提供 一种更简单的方法制备心肌梗死再灌注动物模型，用于各种小型动物的冠心病 心肌梗死再灌注的实验研究，减少实验动物的损伤及死亡率，也可降低成本。为达到上述目的，本发明的解决方案是采用一次复杂手术结合一次丝线 的抽出代替两次复杂手术才能完成的模型制备过程。本方法可以广泛应用于各 种小型动物的冠心病心肌梗死再灌注研究。具体是改进的实验动物心肌梗死再灌注模型，将实验动物的LAD与直径在一定范 围内的丝线平行设置且一起结扎，丝线的至少一端位于近体表处。如上所述得模型，其中丝线直径大于实验动物LAD的直径，且平行置于LAD 刖万。如上所述得模型，其中所述的实验动物为兔，丝线直径大于等于兔LAD直径。如上所述得模型，其中丝线在径向的形变量小于等于5%。 如上所述得模型，其中结扎缝线将丝线划分至少为长、短两段，短段为不 易滑脱，又易于抽出的长度，长段以其末端到达动物近体表处为限、并向着心 尖方向；短段优选在4-6mm之间，长段优选在15-20mm之间，根据实验动物的 具体情况调整。如上所述得模型，其中丝线长段末端位于近体表处是指将丝线长段末端包 埋于皮下或将丝线长段外头与引流纱条一起露在皮肤伤口的外面。 制备如上所述模型的方法，包括如下步骤(a) 将LAD与丝线并行结扎；(b) 结扎线将LAD前方的丝线划分为长、短两段，长段向着心尖方向，观察丝 线无松动，为结扎成功；(c) 逐层缝合心包、胸骨和肌肉，将丝线长段穿过心包、胸骨和肌肉，剪去多 余部分，将丝线长段末端置于近体表处。使用如上所述模型的方法，具体是需要再灌注时在皮下找出丝线长段末 端，将其抽出，或直接将露在皮肤伤口外面的丝线抽出，即可制备心肌梗死再 灌注模型。由于采用了上述方案，本发明的优点是①用此模型制备方法手术方法及过程明显简化， 一次复杂手术过程结合一次丝线的抽出即可代替两次复杂手术过程才能完成的模型制备过程；②只需一次手术，减少动物损伤的痛苦和死亡 的机率；③降低了实验的成本；④本方法可以广泛应用于各种较小动物制备模 型对冠心病心肌梗死再灌注的研究，具有很强的应用前景和较大的经济实用价 值。
图l本发明方法步骤l示意图； 图2本发明方法步骤2示意图； 图3本发明方法步骤3示意图； 图4本发明方法步骤4示意图；图5使用本发明方法后的心肌梗死再灌注模型示意图。
具体实施方式
采用光滑丝线与冠脉并行结扎法3%戊巴比妥钠30mg/kg体重耳缘静脉注 射麻醉；不用气管插管及呼吸机，保持兔自然呼吸状态下；兔仰卧固定于手术 台，剪除胸前区兔毛以备皮，碘伏消毒，铺无菌洞巾；沿胸骨正中切口开胸， 防止损伤胸廓内动脉，充分暴露纵隔及心脏，保持两侧胸膜完整，以防止气胸； 纵行剪开心包膜，充分显露心脏及LAD，步骤l，如图1所示，图中A0为主动脉，PA为肺动脉。用显微外科钳轻轻提起 左心室前壁，于左心耳下方约2mm即LAD距根部5rran处，用7/0无损伤缝合线 缝过LAD下方，用手术镊子将165咖长光滑丝线(直径大于lmm的丝线，径向 形变量小于等于5%)平行置于LAD前方，(之所以选择直径大于ltnra的丝线是由 于我们在研究中观察到兔心的LAD根部直径约lmm，所以当丝线与LAD —起结扎 时，如抽出丝线，LAD可以充分扩张到它本来的粗细)，步骤2,如图2所示，将丝线与LAD—起结扎，结扎线将LAD前缘的丝线划分为 长、短两段，短段留约5mm，不易滑脱，但又易于抽出，长段约160mm左右并向着心尖方向，观察丝线无松动，结扎处LAD远段血管萎陷变细，左心室前壁及 心尖部心肌颜色变紫，ECG显示兔心前壁有缺血表现表明结扎成功。 步骤3，如图3所示，逐层缝合心包、胸骨和肌肉，将丝线长段穿过心包、胸骨 和肌肉，剪去多余的丝线(留20-30ram的丝线长段外侧头)，将丝线长段外侧头 埋于皮下，需要再灌注时再打开皮肤切口，找出皮下留置丝线长段的外侧头， 将丝线抽出即可制备心肌梗死再灌注模型；步骤4 ，如图4所示，(RV为右心室)如在心肌梗死后较短的时间内再灌注， 也可逐层缝合心包、胸骨、肌肉和皮肤，将丝线长段穿过心包、胸骨、肌肉和 皮肤，使丝线长段的外头与引流油纱条一起露在皮肤伤口的外面，剪去多余的 丝线(留20-30mm的丝线长段在皮肤外)，包扎伤口。使用方法如图5所示，需要再灌注时直接抽出丝线即可制备心肌梗死再灌注模 型。本发明(改进的心肌梗死再灌注模型制备方法)可以取代两次复杂手术才 能完成的心肌梗死再灌注模型的制备过程，手术比较简单， 一次复杂手术结合 一次丝线的抽出即可达到两次复杂手术才能完成的心肌梗死再灌注模型的制备 过程，减少实验动物的损伤和痛苦，也降低了实验动物的手术死亡率，还可大 大降低成本。本方法可以广泛应用于各种较小动物(如大鼠、小鼠等)制备模 型对冠心病心肌梗死再灌注的研究，具有非常广泛的应用前景和较大的经济实 用价值。
权利要求
1、改进的实验动物心肌梗死再灌注模型，其特征在于将实验动物的LAD与直径在一定范围内的丝线平行设置且一起结扎，丝线的至少一端位于近体表处。
2、 根据权利要求1所述的模型，其特征在于丝线直径大于等于实验动物LAD 的直径，且平行置于LAD前方。
3、 根据权利要求2所述的模型，其特征在于所述的实验动物为兔，丝线直 径大于等于兔LAD直径。
4、 根据权利要求1所述的模型，其特征在于丝线在径向的形变量小于等于 5%0
5、 根据权利要求1所述的模型，其特征在于结扎缝线将丝线划分至少为长、 短两段，短段为不易滑脱，又易于抽出的长度，长段以其末端到达动物近 体表处为限、并向着心尖方向；短段优选在4-6mm之间，长段优选在15_20, 之间。
6、 根据权利要求5所述的模型，其特征在于丝线长段末端位于近体表处是 指将丝线长段末端包埋于皮下或将丝线长段外头与引流纱条一起露在皮肤 伤口的外面。
7、 制备权利要求1-6中任一所述模型的方法，其特征在于包括如下步骤(a) 将LAD与丝线并行结扎；(b) 结扎线将LAD前方的丝线划分为长、短两段，长段向着心尖方向，观 察丝线无松动，为结扎成功；(c) 逐层缝合心包、胸骨和肌肉，将丝线长段穿过心包、胸骨和肌肉，剪 去多余部分，将丝线长段末端置于近体表处。
8、 使用权利要求1-6中任一所述模型的方法，其特征在于需要再灌注时在 皮下找出丝线长段末端，将其抽出，或直接将露在皮肤伤口外面的丝线抽 出，即可制备心肌梗死再灌注模型。
全文摘要
改进的兔心肌梗死再灌注模型及制备方法，其特点是将直径不小于兔左冠状动脉前降支(LAD)的丝线平行置于LAD前缘，将丝线与LAD一起结扎，结扎线将丝线分为长、短两段，短段留约5mm，长段约160mm并向着心尖方向，检查丝线无松动，即心肌梗死模型制备成功。逐层缝合，将丝线长段穿过心包、胸骨和肌肉，可埋于皮下，也可将丝线的外头露在皮肤伤口的外面。再灌注时，可打开皮肤切口，找出丝线的外头抽出，或直接将丝线抽出即可制备心肌梗死再灌注模型。本发明可以取代两次复杂手术才能完成的心肌梗死再灌注模型的制备过程，手术比较简单，一次复杂手术结合一次丝线的抽出即可完成心肌梗死再灌注模型的制备，减少了动物的损伤，也降低模型制备的成本。
文档编号A61B19/00GK101243994SQ200810034358
公开日2008年8月20日 申请日期2008年3月7日 优先权日2008年3月7日
发明者瑶 何, 炯 倪, 铭 李, 嘉 杨, 赵江民, 邵志宏 申请人:同济大学