专利名称：一种应用膜过滤技术制备黄柏提取物的方法
技术领域：
本发明涉及一种中药制备方法，尤其涉及一种中药有效成分的提取纯 化方法，具体涉及一种应用膜过滤技术制备黄柏提取物的方法。
背景技术：
黄柏为芸香科植物黄皮树Phellodendron chinense Schneid.或黄檗 Phellodendronamurense Rupr.的干燥树皮。前者习称"川黄柏"，后者 习称"关黄柏"。黄柏为常用中药，气微，味甚苦，嚼之有黏性，具有清 热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮，用于湿热泻痢，黄疸，带下，热淋，脚气， 骨蒸劳热，盗汗，遗精，疮疡肿毒，湿疹瘙痒。盐黄柏滋阴降火，用于阴 虚火旺，盗汗骨蒸。
黄柏所含以盐酸小檗碱为代表的生物碱类成分是其主要有效成分。目 前从黄柏中提取生物碱类成分的方法通常采用温浸法、水煮法、醇提取等， 纯化方法多采用醇沉法、水醇法、萃取法、大孔树脂吸附法等；其中醇沉 法和水沉法只能达到初步纯化的目的，其收膏量大，生物碱含量低。萃取 法及大孔树脂吸附法分别单独应用对一些要求较高的制剂也还存在着一 些不足，比如，萃取法色素较多，提取物粘度大，使制剂颜色较深，大孔 树脂吸附法需要反复处理，操作麻烦，重现性较差，并且还存在有机残留 问题，这些直接影响了制剂的安全性和稳定性。
中国有多篇专利是介绍黄柏提取物制备方法的，但均存在收膏率较高、含量较低、转移率低、操作复杂等问题。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种应用膜过滤技术制备黄柏提取 物的方法，用于解决目前黄柏提取工艺中盐酸小檗碱转移率低、工艺成本 高、制剂工艺稳定性差等技术问题，本发明通过如下技术方案实现 本发明提供一种黄柏提取物的制备方法，该方法包括以下步骤
(1) 煎煮提取取黄柏药材，加水进行煎煮l-2小时，滤取药液，药 渣再加水煎煮0.5-l小时，滤取药液，弃去药渣；合并两次药液，将药液 浓縮至相对密度1. 0-1. 1 (6(TC测)，冷却至室温得煎煮液；
(2) 粗分离将煎煮液离心分离，转速4000-6000转/分钟，离心10-20 分钟，取上清液，进行微滤膜分离，控制流速为5 10ml/min，并用蒸馏 水或纯化水进行洗滤，合并滤液，得粗提物；
(3) 精制将粗提物进行超滤膜分离，控制流速1 5ml/min，并用蒸 馏水或纯化水进行洗滤，合并滤液，减压浓縮，真空干燥，即得黄柏提取 物。
步骤(1)中所述水采用纯化水、蒸馏水或注射用水。在本发明方法 的步骤(1)煎煮提取中， 一般都是采用纯化水、蒸馏水或注射用水进行 煎煮，这主要是为了符合临床用药安全的需要。其第一次煎煮的加水量为 煎煮药材重量的8wt-18wt倍量水，第二次煎煮的加水量为煎煮药材重量 的6wt-12wt倍量水。提取温度一般控制在95"C，保持溶液微沸即可。步骤(2)中所使用的微滤膜规格为0. 42-0. 65micron或50000-300000 NMWC，流速为5 10ml/min，并进行2-5次的蒸馏水或纯化水洗滤，保证 盐酸小檗碱等有效成分尽可能透过膜层。
步骤(3)中所使用的超滤膜规格为1000-30000NMWC，流速为l 5ml/min，并进行2-5次的蒸馏水或纯化水洗滤，保证盐酸小檗碱等有效 成分尽可能透过膜层。浓縮时采用减压浓縮，干燥采用真空干燥，温度均 控制在50-70°C，以保证盐酸小檗碱等有效成分的受热分解。
膜分离(膜过滤)技术是一项新兴的高效分离技术，已被国际公认为 20世纪末到21世纪中期最有发展前途的一项重大高新生产技术。超滤技 术是20世纪60 70年代发展起来的一种膜分离技术，它是用多孔性半透 膜为介质，以错流方式进行过滤。超滤膜的孔径极小，能阻拦溶液中的各 种微粒、胶体以及大分子溶质，以达到浓縮或净化除杂的目的。与通常的 分离方法相比，超滤具有不必经过相的转换、不需要添加化学试剂、滤膜 不易堵塞和耐用等优点。
根据化学性质和结构，膜材料可以分为两大类有机膜和无机膜。实 践证明有机膜始终存在着不能解决膜污染、不能抗高压和高温等问题，所 以人们开始制造无机分离膜及其材料来弥补有机膜的诸多缺点，因此无机 膜分离设备在中药提取分离中前景广阔。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果基于上述技术方案，申 请人经过试验证实，若采用膜过滤技术制备黄柏提取物，可显著提高黄柏 提取物中有效成分的含量，提高盐酸小檗碱的转移率，不仅可以节约药材 成本，更能简化工业生产步骤，操作简单，能够提供更有利于工业生产地的工艺条件，并确保工艺的稳定性和安全性，使这一传统中药尽可能发挥 其功效。本发明的特点为黄柏提取时，微沸即可，这样即能保证有效成 分的提取，又能减少杂质的溶出；能有效地除去杂质，减少致敏成分，并 使总有效成分的含量提高。采用微滤和超滤相结合的方法，可有效去除树 脂、鞣质、粘液质、色素等无效成分，同时避免使用有机试剂减少工业生 产污染;更重要的是避免了盐酸小檗碱为主的活性成分在其它复杂制备工 艺中的损失，本方法可使盐酸小檗碱转移率达到90%以上，能最大化提 高黄柏药材的药用价值。
具体实施例方式
以下通过实施例进一步说明本发明，但应理解，这些实施例只是示例 性的，本发明并不局限于此。 实施例1:
称取黄柏200g，加12倍水2400ml微沸煎煮(95°C) 1. 5小时，过滤， 药渣加10倍水2000ml微沸煎煮(95°C) 1.0小时，过滤，合并滤液，分 成两份， 一份进行膜过滤分离， 一份进行醇沉分离。
1. 膜过滤分离取提取液，60。C减压浓缩至比重为1. 1 (60°C)， 4500 转/分钟的速度离心15分钟，取上清液，过微滤膜(0.65Micron)，控制 流速10ml/min，用蒸馏水洗滤3次，每次100ml;微滤液过超滤膜(10000 NMWC)，控制流速为5ml/min，用蒸馏水洗滤3次，每次50ml，将超滤液 6(TC减压浓缩至比重为1.2 (60°C)，真空干燥，得到黄柏提取物干粉。
2. 醇沉分离取提取液，60。C减压浓縮至比重为1.15 (60°C)，加 95°%乙醇至含醇量为70%,搅拌均匀，静置过夜，离心得到上清液，回收乙醇，真空干燥，得醇沉工艺制得的黄柏提取物。 3.检测结果
3. 1盐酸小檗碱含量和转移率: 样品名称 盐酸小檗碱含量 膜过滤工艺 8.0%
醇沉工艺 3.3%
干浸膏得率
4% 7%
3. 2膜过滤成本分析表
工艺种类时间 耗材
膜过滤工艺 过滤速度5ml/min 膜材
醇沉工艺 一般需静置12-24hr 95%乙醇
盐酸小檗碱转移率 92% 67%
工艺过程 过滤、浓縮 浓縮、醇沉、浓縮
对于黄柏来说，以主要功效成分盐酸小檗碱为考察指标，膜过滤工艺 转移率高，工艺过程简单，基本可以除去大分子的淀粉、糖类、鞣质、叶 绿素等。此外，膜过滤生产成本较醇沉工艺低，生产环境更优，并能縮短 生产周期，有利于该工艺的推广应用。以上对比实验将采用本发明膜过滤 工艺和采用传统工艺醇沉工艺制备黄柏提取物进行比较，实验结果充分体 现了采用本发明膜过滤工艺制备黄柏提取物的高效率、低成本、低污染、 高转移率、高纯度的优势。
实施例2:
称取黄柏200g，加8倍水1600ml微沸煎煮(95°C) 1小时，过滤， 药渣加6倍水1200ml微沸煎煮(95°C) 0. 5小时，过滤，合并滤液，将 滤液6(TC减压浓縮至比重为1.05 (60°C)， 4000转/分钟的速度离心20 分钟，取上清液，过微滤膜(0.42 Micron),控制流速5ml/min，用蒸馏 水洗滤2次，每次100ml;微滤液过超滤膜(1000 NMWC)，控制流速为lml/min，用蒸馏水洗滤2次，每次50ml，将超滤液6(TC减压浓缩至比重 为1.2 (60°C)，真空干燥，得到黄柏提取物干粉。 实施例3:
称取黄柏200g，加18倍水3600ml微沸煎煮(95°C) 2小时，过滤， 药渣加12倍水2400ml微沸煎煮(95°C) 0. 8小时，过滤，合并滤液，将 滤液6(TC减压浓縮至比重为1. 0 (60°C)， 5000转/分钟的速度离心15分 钟，取上清液，过微滤膜(0.5 Micron)，控制流速7ml/min，用蒸馏水 洗滤5次，每次100ml;微滤液过超滤膜(30000 NMWC)，控制流速为 3ml/min，用蒸馏水洗滤5次，每次50ml，将超滤液6(TC减压浓縮至比重 为1.2 (6(TC)，真空干燥，得到黄柏提取物干粉。
实施例4:
称取黄柏200g，加15倍水3000ml微沸煎煮(95°C) 1. 5小时，过滤， 药渣加10倍水2000ml微沸煎煮(95°C) 0. 8小时，过滤，合并滤液，将 滤液6(TC减压浓縮至比重为1. 1 (60°C)， 6000转/分钟的速度离心10分 钟，取上清液，过微滤膜(0.5 Micron)，控制流速8ml/min，用蒸馏水 洗滤3次，每次100ml;微滤液过超滤膜(20000 NMWC)，控制流速为 3ml/min,用蒸馏水洗滤3次，每次50ml，将超滤液60。C减压浓縮至比重 为1.2 (6CTC)，真空干燥，得到黄柏提取物干粉。
权利要求
1、一种应用膜过滤技术制备黄柏提取物的方法，该方法包括以下步骤(1)煎煮提取取黄柏药材，加水进行煎煮1-2小时，滤取药液，药渣再加水煎煮0.5-1小时，滤取药液，弃去药渣；合并两次药液，将药液浓缩至相对密度1.0-1.1，冷却至室温得煎煮液；(2)粗分离将煎煮液离心分离，转速4000-6000转/分钟，离心10-20分钟，取上清液，进行微滤膜分离，控制流速为5～10ml/min，并用蒸馏水或纯化水进行洗滤，合并滤液，得粗提物；(3)精制将粗提物进行超滤膜分离，控制流速1～5ml/min，并用蒸馏水或纯化水进行洗滤，合并滤液，减压浓缩，真空干燥，即得黄柏提取物。
2、 根据权利要求1所述的应用膜过滤技术制备黄柏提取物的方法， 其特征在于，步骤(1)中所述水采用纯化水、蒸馏水或注射用水。
3、 根据权利要求1或2所述的应用膜过滤技术制备黄柏提取物的方 法，其特征在于，在步骤(1)中，第一次煎煮的加水量为煎煮药材重量 的8wt-18wt倍量水，第二次煎煮的加水量为煎煮药材重量的6wt-12wt 倍量水。
4、 根据权利要求1所述的应用膜过滤技术制备黄桕提取物的方法， 其特征在于，步骤(2)中所使用的微滤膜规格为0.42—0.65micron或 50000-300000丽C，流速为5 10ml/min。
5、 根据权利要求1所述的应用膜过滤技术制备黄柏提取物的方法，其特征在于，步骤(3)中所使用的超滤膜规格为1000-30000NMWC，流速 为1 5ml/miru
6、 根据权利要求1所述的应用膜过滤技术制备黄柏提取物的方法， 其特征在于，在步骤(2)中，微滤膜分离中洗滤次数为2-5次；在步骤(3)中，超滤膜分离中洗滤次数为2-5次。
全文摘要
本发明提供了一种应用膜过滤技术制备黄柏提取物的方法，该方法包括先将黄柏加水煎煮提取，减压浓缩离心，用微滤膜除去大部分杂质，再用超滤膜进一步精制。与现有技术相比，本发明方法既能保证黄柏有效成分的提取，又能减少杂质的溶出；能有效地除去杂质，减少致敏成分，并使总有效成分的含量提高。因而该方法能克服现有技术的缺陷，操作简单，被分离物回收率高，又能够提供更有利于工业生产的工艺条件。
文档编号A61K36/185GK101530495SQ20081004305
公开日2009年9月16日 申请日期2008年1月22日 优先权日2008年1月22日
发明者洁 丁, 刘志远, 英 唐, 茜 王, 路钧镧 申请人:上海中药制药技术有限公司