专利名称：：西黄丸的质量控制方法
技术领域：
：本发明涉及一种中药的质量控制方法，具体地本发明涉及一种西黄丸的质量控制方法。
背景技术：
：西黄丸处方来源于部颁中药成方制剂9册71页，标准号为WS3-B-1734-94，其功能主治为清热解毒，和营消肿，用于痈疽疔毒，瘰疬，流注，癌肿等。该西黄丸处方如下处方牛黄15g、麝香15g、乳香(醋制)550g、没药(醋制)550g制法以上四味，牛黄、麝香研细，另取黄米350g，蒸熟烘干，与乳香、没药粉碎成细粉，过筛，再与牛黄、麝香粉末配研，过筛，混匀。用水泛丸，置通风干燥处阴干，即得。但是该处方的质量控制方法如下(1)取本品，置显微镜下观察无定形团块淡黄棕色，埋有细小方形结晶。(2)取本品5丸，研碎，加乙醚5ml，浸泡振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加发烟硝酸l滴，即显紫红色。只是简单的显微鉴别和显色反应，这会影响产品的质量和疗效，不利于药品的标准化生产及提高生产效率，也不符合现代中药发展的趋势。
发明内容本发明的目的是提供一种对所述的西黄丸进行质量控制的方法，以保证药品的安全性和有效性，提高产品质量，便于药品的标准化、现代化生产。为了达到上述目的，本发明提供了一种西黄丸的质量控制方法，该方法包括下列A、B、C三种检测中的至少一种检测A.没药的定性检测取本品，加乙醚，超声处理，取出，室温浸渍，取上清液作为供试品溶液。另取没药对照药材，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。B.牛黄的定性检测取本品，加三氯甲垸，超声处理，滤过，滤液作为供试品溶液。另取胆红素对照品，加三氯甲烷制成对照品溶液。照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂，甲醇一三氯甲烷一1%磷酸为流动相；检测波长为450nm。分别取对照品溶液和供试品溶液适量，注入液相色谱仪。供试品应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。C.麝香的定量检测色谱柱HP25柱以交联5。/。苯基甲基聚硅氧浣为固定相;柱温采用程序升温起始12(TC，IO'Ctnin"升至180。C，保持16min;气化温度25(rC;检测器温度28(rC;进样量luL,分流比为2:l;流速为1.3mL;在此条件下，理论板数按麝香酮峰计算，大于IOOOOO，分离度均大于1.5;取麝香酮对照品，精密称定，用无水乙醇溶解配制成每lmL含0.4mg的溶液；取本品，精密称定，精密加入无水乙醇，密塞，振摇，放置，滤过，取续滤液作为供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入气相色谱仪，测定。优选地，本发明的一种西黄丸的质量控制方法，该方法包括下列A、B、C三种检测中的至少一种检测A.没药的定性检测取本品细粉0.5g，加乙醚lml，超声处理(功率250W，频率25kHz)10分钟，取出，室温浸渍1小时，取上清液作为供试品溶液。另取没药对照药材0.28，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各1li1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(6090°C)-乙酸乙酯(9:1)为展开剂，展开，取出，晾干，銜以5%香草醛硫酸溶液，稍微加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。'B.牛黄的定性检测取本品细粉lg，加三氯甲垸5ml，超声处理(功率250W，频率25kHz)30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取胆红素对照品，加三氯甲烷制成每lml含10ug的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VID)测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇一三氯甲烷一1%磷酸(84:9:7)为流动相；检测波长为450nm。分别取对照品溶液和供试品溶液适量，注入液相色谱仪。供试品应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。C.麝香的定量检测色谱柱HP25柱(30mmX0.32mm，0.25Um)以交联5。/。苯基甲基聚硅氧烷为固定相;柱温采用程序升温起始12(TC，l(TC'min"升至180。C，保持16min;气化温度25(TC;检测器温度28(TC;进样量luL，分流比为2:l;流速为1.3mL。在此条件下，理论板数按麝香酮峰计算，大于IOOOOO，分离度均大于1.5。取麝香酮对照品，精密称定，用无水乙醇溶解配制成每lmL含0.4mg的溶液。取本品研细，取0.15g，精密称定，精密加入无水乙醇5mL，密塞，振摇，放置lh，滤过，取续滤液作为供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入气相色谱仪，测定。每10g含麝香以麝香酮(d6H3oO)计，不少于1.8mg。本发明的西黄丸质量控制方法，便于药品的标准化、现代化生产，有利于提高生产效率，保证了药品的安全性和有效性。为了更好地理解本发明，现在结合具体实施例对本发明进行详细的说明。具体实施例方式实验例l鉴别方法实验研究没药鉴别试验筛选(1)供试品溶液的制备方法一取本品细粉0.5g，加乙醚lml，超声处理(功率250W，频率25kHz)5分钟，取出，室温浸渍1.5小时，取上清液作为供试品溶液。方法二取本品细粉0.5g，加乙醚lml，超声处理(功率250W，频率25kHz)10分钟，取出，室温浸渍l小时，取上清液作为供试品溶液。方法三取本品细粉0,5g，加甲醇lml，超声处理(功率250W，频率25kHz)15分钟，取出，室温浸渍l小时，取上清液作为供试品溶液。另取没药对照药材0.28，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各1lU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(609(TC)-乙酸乙酯(9:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，稍微加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>(2)展开剂配比的优选:展开剂一石油醚(6090°C)-乙酸乙酯(7:3)为展开剂展开剂二石油醚(6090°C)-乙酸乙酯(8:2)为展开剂展开剂三石油醚(6090°C)-乙酸乙酯(9:1)为展开剂取本品细粉0.5g，加乙醚lml，超声处理(功率250W，频率25kHz)10分钟，取出，室温浸渍1小时，取上清液作为供试品溶液。另取没药对照药材0.2g，同法制成对照捕fe溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各1u1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂一、二、三，分别展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，稍微加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。^<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>从上表可以看出展开剂为石油醚(609(TC)-乙酸乙酯(9:1)时，在薄层板上展开效果好，主斑点清晰，无拖尾，与对照品的斑点位置及颜色相同，适合试验要求。(3)样品溶液点样量的优选取本品细粉0.5g，加乙醚lml，超声处理(功率250W，频率25kHz)10分钟，取出，室温浸渍1小时，取上清液作为供试品溶液。另取没药对照药材0.2g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各lpl、3pl、5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(609(TC)-乙酸乙酯(9:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，稍微加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。样品溶液点样量优选实验结果表<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>从上表可以看出供试品点样量在1u1时，在薄层板上显色效果已经达到试验要求。实验例2牛黄定性鉴别实验研究l.供试品溶液的制备方法一取本品细粉lg，加三氯甲垸5ml，超声处理(功率250W，频率25kHz)20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。方法二取本品细粉lg，加三氯甲烷5ml，超声处理(功率250W，频率25kHz)30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。方法三取本品细粉lg，加甲醇5ml，超声处理(功率250W，频率25kHz)30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取胆红素对照品，加三氯甲烷制成每lml含10ug的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VID)测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇一三氯甲烷一r^磷酸(84:9:7)为流动相；检测波长为450nm。分别取对照品溶液和供试品溶液适量，注入液相色谱仪。供试品应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>2.流动相的选择流动相一甲醇一三氯甲垸一2%磷酸(84:9:7)为流动相流动相二甲醇一三氯甲烷一1%磷酸(80:10:IO)为流动相流动相三甲醇一三氯甲垸一1%磷酸(84:9:7)为流动相取实施例1细粉lg，加三氯甲垸5ml，超声处理(功率250W，频率25kHz)30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取胆红素对照品，加三氯甲垸制成每lml含10ug的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VID)测定，以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂，流动相一、流动相二、流动相三分别为流动相进行检测；检测波长为450nm。分别取对照品溶液和供试品溶液适量，注入液相色谱仪。供试品应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。拖尾情况干扰情况流动相一有无流动相二无有流动相三无无从上表可以看出流动相为甲醇一三氯甲烷一1%磷酸(84:9:7)时，峰形好，无拖尾，供试品应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰，适合试验要求。实验例3麝香含量测定气相色谱实验研究1仪器与试药6890N气相色谱仪(安捷伦):色谱柱为HP25柱(安捷伦);FID检测器;高纯氮(纯度99.999%以上)。3批实施例1方法自制样品。麝香酮对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号:1107192200409)，其余试剂均为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱:HP25柱(30mmX0.32mm,0.25um)以交联5。/。苯基甲基聚硅氧烷为固定相;柱温采用程序升温:起始120°C,10°Cmin"升至18(TC，保持16min;气化温度:25(TC;检测器温度:28(TC;进样量1uL,分流比为2:l;流速为1.3mL。在此条件下，理论板数按麝香酮峰计算,大于100000，分离度均大于1.5。2.2对照品溶液的制备取麝香酮对照品,精密称定,用无水乙醇溶解配制成每lmL含0.4mg的溶液。2.3供试品溶液的制备取实施例1研细，取0.15g,精密称定,精密加入无水乙醇5mL，密塞，振摇,放置lh,滤过，取续滤液作为供试品溶液。2.4线性关系考察精密称取麝香酮对照品40mg，置50mL量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度,配制成每lmL含0.8mg的对照品溶液。分别精密吸取麝香酮对照品溶液各0.5,1.0,2.0,4.0，6.0，8.0mL,置10mL量瓶中,加无水乙醇稀释至刻度。按上述色谱条件进样测定，以峰面积为纵坐标，以浓度(mgmL")为横坐标,计算回归方程。麝香酮回归方程为Y-3883.1X+33.5382，产0.9994,表明麝香酮浓度在(0.040.64)mgmU1范围内呈良好的线性关系。2.5精密度试验取同一对照品溶液luL,重复进样5次,结果峰面积平均值为1698.340,RSD为1.70%，表明精密度良好。2.6稳定性试验对同一对照品溶液,分别在0,2,4，8,16h进样，结果峰面积平均值为81688.194,RSD为1.38%,表明在16h内较稳定。2.7重复性试验取同批样品5份，按供试品溶液的制备及测定项下方法平行试验，测得样品中麝香酮的含量为0.95%,RSD为2.04%。加样回收率试验结果样品量(mg)对照品加入量(mg)测得总量(mg)回收率(0/。)平均回收率(％)RSD(%)0.8400.8401.66097.6297.982.140.8860.8401.71398.450.8090.8401.61195.480.8420.8401.65897.140.9030.8401.753101.192.8加样回收率试验精密称取已知含量的本品细粉约0.09g，分别精密加入一定量的对照品,按供试品溶液的制备及样品测定项下操作，结果见表1。2.9样品的测定吸取供试品溶液1PL，注入气相色谱仪中,依法测定峰面积,按外标法计算含量,3批样品含量测定结果为0.91,0.73,0.93%。实施例l称取下列重量份(kg)的原料药处方体外培育牛黄3、人工麝香3、乳香(醋制)IIO、没药(醋制)IIO制法以上四味，体外培育牛黄、人工麝香研细，另取黄米70kg，蒸熟烘干，与乳香、没药粉碎成细粉，过筛，再与体外培育牛黄、人工麝香粉末配研，过筛，混匀。制丸，置通风干燥处阴干，即得。实施例2称取下列重量份(kg)的原料药处方牛黄15、麝香15、乳香(醋制)550、没药(醋制)550制法以上四味，牛黄、麝香研细，另取黄米350kg，蒸熟烘干，与乳香、.没药粉碎成细粉，过筛，再与牛黄、麝香粉末配研，过筛，混匀。用水泛丸，置通风干燥处阴干，即实施例3-4按照实施例1相同的方法和用量，中试生产2批本发明的丸剂。实施例5-6按照实施例2相同的方法和用量，中试生产2批本发明的丸剂。(1)取实施例1的丸剂细粉0.5g，加乙醚lml，超声处理(功率250W，频率25kHz)10分钟，取出，室温浸渍l小时，取上清液作为供试品溶液。另取没药对照药材0.28，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各lnl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(6090°C)-乙酸乙酯(9:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，稍微加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)取实施例1的丸剂细粉lg，加三氯甲烷5ml，超声处理(功率250W，频率25kHz)30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取胆红素对照品，加三氯甲烷制成每lml含10ug的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VID)测定，以十八垸基硅垸键合硅胶为填充剂，甲醇一三氯甲烷_1%磷酸(84:9:7)为流动相；检测波长为450nm。分别取对照品溶液和供试品溶液适量，注入液相色谱仪。供试品应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。(3)照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VIE)测定。色谱条件与系统适用性试验色谱柱HP25柱以交联5e/。苯基甲基聚硅氧垸为固定相;柱温采用程序升温起始12(TC，IO'C.min-l升至180。C，保持16min;气化温度250'C;检测器温度28(TC;进样量lyL，分流比为2:l;流速为1.3mL。在此条件下，理论板数按麝香酮峰计算，大于IOOOOO，分离度均大于1.5。对照品溶液的制备取麝香酮对照品，精密称定，用无水乙醇溶解配制成每lmL含0.4mg的溶液。供试品溶液的制备取实施例l的丸剂研细，取0.15g，精密称定，精密加入无水乙醇，密塞，振摇，放置，滤过，取续滤液作为供试品溶液。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入气相色谱仪，测定。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液lwL，注入气相色谱仪，观啶。每10g含麝香以麝香酮(d6H3()O)计，不少于1.8mg。同样本发明实施例2-6所制得的丸剂也进行了上述质量控制，证明实施例2-6所制得的丸剂完全符合本发明的质量控制标准。实施例1-6的麝香酮含量测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>另外，也以处方原料药的比例和制备工艺制成了不含没药的阴性样品，按照质量控制方法中供试样品的制备方法制备了阴性对照溶液，在硅胶G薄层板上，所述的阴性样品在相应位置上未出现斑点，经反复试验，该质量控制方法专属性、重复性好，因此做为西黄丸的质量控制定性检测方法，对西黄丸进行质量控制。权利要求1、一种西黄丸的质量控制方法，该方法包括下列A、B、C三种检测中的至少一种检测A.没药的定性检测取本品，加乙醚，超声处理，取出，室温浸渍，取上清液作为供试品溶液；另取没药对照药材，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；B.牛黄的定性检测取本品，加三氯甲烷，超声处理，滤过，滤液作为供试品溶液；另取胆红素对照品，加三氯甲烷制成对照品溶液；照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-三氯甲烷-1％磷酸为流动相；检测波长为450nm；分别取对照品溶液和供试品溶液适量，注入液相色谱仪；供试品应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰；C.麝香的定量检测色谱柱HP25柱以交联5％苯基甲基聚硅氧烷为固定相；柱温采用程序升温；气化温度250℃；检测器温度280℃；进样量1μL，分流比为2∶1；流速为1.3mL；在此条件下，理论板数按麝香酮峰计算，大于100000，分离度均大于1.5；取麝香酮对照品，精密称定，用无水乙醇溶解配制成每1mL含0.4mg的溶液；取本品，精密称定，精密加入无水乙醇，密塞，振摇，放置，滤过，取续滤液作为供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入气相色谱仪，测定。2、如权利要求1所述的一种西黄丸的质量控制方法，该方法包括下列A、B、C三种检测中的至少一种检测A.没药的定性检测取本品细粉0.5g，加乙醚lml，超声处理(功率250W，频率25kHz)10分钟，取出，室温浸渍1小时，取上清液作为供试品溶液；另取没药对照药材0,2g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各1!i1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9:1比例的石油醚(6090°C)-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，稍微加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；B.牛黄的定性检测取本品细粉lg，加三氯甲烷5ml，超声处理(功率250W，频率25kHz)30分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取胆红素对照品，加三氯甲垸制成每lml含10ug的溶液，作为对照品溶液；照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VID)测定，以十八烷基硅垸键合硅胶为填充齐U，84:9:7比例的甲醇_三氯甲垸一1%磷酸为流动相；检测波长为450nm;分别取对照品溶液和供试品溶液适量，注入液相色谱仪；供试品应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰;C.麝香的定量检测色谱柱HP25柱(30mmX0.32mm，0.25ym)以交联5。/。苯基甲基聚硅氧垸为固定相;柱温采用程序升温起始120。C，10°C'min"升至18(TC，保持16min;气化温度25(TC;检测器温度280'C;进样量lwL，分流比为2:l;流速为1.3mL;在此条件下，理论板数按麝香酮峰计算，大于IOOOOO，分离度均大于1.5;取麝香酮对照品，精密称定，用无水乙醇溶解配制成每lmL含0.4mg的溶液；取本品研细，取0.15g，精密称定，精密加入无水乙醇5mL，密塞，振摇，放置lh，滤过，取续滤液作为供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入气相色谱仪，测定；每10g含麝香以麝香酮(d6H3oO)计，不少于1.8mg。全文摘要本发明公开了一种西黄丸的质量控制方法，增加了对没药、牛黄的定性鉴定，还增加了麝香含量的定量测定，保证了药品的安全性和有效性，提高了产品质量，便于药品的标准化生产。文档编号A61K9/20GK101524391SQ20081010133公开日2009年9月9日申请日期2008年3月4日优先权日2008年3月4日发明者付建家,付立家申请人:北京亚东生物制药有限公司