专利名称：：一种治疗子宫肌瘤的药物组合物的制作方法
技术领域：
：本发明属于中药制药领域，具体涉及一种治疗子宫肌瘤的药物组合物。
背景技术：
：子宫肌瘤是女性生殖器最常见的良性肿瘤，生育期妇女发病率约为25%，因此，全世界有上千万的女性患者正经受着子宫肌瘤病魔的折磨。其最常见的临床症状为子宫出血，下腹疼痛和痛经，压迫症状，阴道分泌物增多，贫血，甚至造成不孕。严重地影响妇女的身体健康和日常生活工作，如不及时治疗，有可能转变为恶性肿瘤。子宫肌瘤是子宫平滑肌组织增生而形成，其中含少量纤维结缔组织。现代医学研究认为，子宫肌瘤是一种多源性克隆性肿瘤，其发生有赖于肌细胞的遗传物质的改变——即染色体突变后发生。根据子宫肌瘤发生部位，大体上可分为肌壁间肌瘤，浆膜下肌瘤，粘膜下肌瘤等三种，其中以肌壁间肌瘤最常见。子宫肌瘤的临床表现取决于肌瘤的部位、种类、大小、生长速度和是否有合并症出现。子宫肌瘤多发于生育年龄妇女，且可继续生长和发展，绝经后停止生长，以致萎縮，揭示子宫肌瘤的发生和生长与雌激素孕激素有关，也说明子宫肌瘤是一种激素依赖性肿瘤。对于子宫肌瘤发生机制的研究，目前尚未完全清楚，国内外的学者仍在继续努力探索和研究。西医对子宫肌瘤的治疗主要以手术治疗伴以药物治疗。但手术治疗给患者带来较大的创伤，延长恢复期。而药物治疗，则多采用雄性激素治疗，此法有可能影响人体内部正常的激素分泌水平，破坏人体正常生理平衡，出现程度不同的男性化，因而有其局限性。目前用于治疗子宫肌瘤的主要药物还有促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-A)与米非司酮(mifepristone，RU486)两种。但由于人体激素的分泌是维持人体正常生理功能的必需物质，长期抑制一些激素的分泌肯定不利于人体健康，而且分泌激素是人体一些器官的功能，一旦一些抑制因素消失，激素分泌的功能也得以恢复，子宫肌瘤也会重新复发。这就是用男性激素、GnRH、RU486治疗子宫肌瘤难以得到根治的原因。祖国医学把子宫肌瘤包括在"癥瘕"、"带下"、"崩漏"等疾病中，如《灵枢.水胀篇》说"石瘕何如......石瘕生于胞中，寒气客于子门，子门闭塞，气不得通，恶血当泻不泻，衄以留止，日以增大，状如怀子，月事不以时下......"。又《金匮-妇人妊娠病篇》说"女人宿有瘕病，经断未及三月而得漏下不止。胎动在脐上者，为癥痼害，妊娠六月动者，前三月经水利时胎也，下血(漏经)者后断三月Jlf也所以血不止者，其癥不去故也"。中医认为其病机为气滞、血瘀、痰湿，七情太过，肝失条达，冲任失调，气郁则血郁，气滞则血滞，气血失和，搏于宫内，由此癥痼，石瘕乃生。对于子宫肌瘤的治疗，中医治疗原则以破血消坚，理气化滞为主要法则，在化瘀的基础上必须舒肝理气，调理冲任，以治其本，阻止疾病的向前发展及瘤体的日益增大，讲求辨证施治。对气滞血瘀型以破瘀散结，行气活血药方为主；对寒凝血瘀型，则以温经散寒，活血化瘀药方为主；对肝郁气滞型，则以舒肝理气，活血化瘀方剂；对温热下注型，则用清热解毒，活血化瘀方剂。也有用针刺疗法，每次取主穴一个，配穴二个，用中强度剌激，留针20~30分钟等治疗方法。由于人们对中医药理论精华的重新再认识，用中医药的方法来解决子宫肌瘤问题越来越受到重视，中药在子宫肌瘤治疗上，有以下优势l.治疗效果显著。2.无任何毒副作用。3.无手术创伤。4.患者恢复快。因此，用中医中药来解决临床上子宫肌瘤问题已成为医药发展的新动向，其独特的疗效以及克服西医手术带来的创伤，使患者的痛苦大大减少。但目前以专治子宫肌瘤为主症的中药开发尚属新的领域，对此类药物的研制与开发有着广阔的发展前景。
发明内容基于上述原因，我公司科技人员，在査阅古今中外有关子宫肌瘤治疗的文献资料，根据中医学理论以及在临床经验方的基础上，并结合现代科研对本药方中各味药的化学成分研究及其药理作用研究，研究证明，方中药味丹参、赤芍、三棱、莪术、甘草有明显的抗肿瘤作用，能抑制肿瘤细胞的生长；具有破瘀散结，行气活血之功效。用于气滞血瘀所致的子宫肌瘤，症见经行量多或淋漓不净，乳房胀痛，腹部包块，腰背酸痛及腹痛带下者。能显著改善子宫肌瘤症状，抑制和消除子宫肌瘤，为数以千万计的女性患者解除疾苦，提高生活质量。本发明通过以下技术方案实现的。一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其特征在于丹参1一10重量份，赤芍1一10重量份，三棱1—5重量份，莪术1一5重量份，甘草0.5—3重量份。其中优选药物组合物丹参5—10重量份，赤芍5—10重量份，三棱3—5重量份，莪术3—5重量份，甘草1一2重量份。其中更进一步优选的药物组合物为丹参6重量份，赤芍6重量份，三棱3.6重量份，莪术3.6重量份，甘草1.5重量份。上述药物组合物可以按照现有技术进行指标成药剂学上可以接受的制剂，也可以按照下述方法制备取丹参用乙醇提取，收集提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓縮浓縮液经干燥，得丹参干膏粉，丹参醇提后的药渣与赤芍、三棱、莪术、甘草加水煎煮，滤过，滤液干燥，得干粉，与丹参干膏粉混合均匀，按照药剂学常规要求制备成制剂。药理实施例1、抗肿瘤作用的实验研究实验动物U14小鼠子宫颈癌瘤株，同性别615近交系小鼠，体重1822g。饲养条件动物进入实验室后，雌雄分开，每笼放养5只，适应性词养3天，观察其活动、饮食、大小便无异常后启用。实验动物由专人饲养管理。动物室光照充足，通风和空调设备良好，室温控制在20-25°C，相对湿度为40-70%。实验室按常规定期消毒。实验方法剥离U14荷瘤615小鼠的瘤块，用剪刀剪成lmm直径的小块，以PBS冲洗5次，冰浴备用。以戊巴比妥钠45mg/kg腹腔注射麻醉615小鼠。右侧背部皮肤消毒，用剪刀切开皮肤和肌肉，开lcm的小口。用镊子夹出右肾。用骨穿刺针吸住瘤块，穿透肾包囊膜，把瘤块接种于肾包囊膜下。把右肾放回腹腔，缝合切口。将动物随机分成6组空白对照，阳性对照，本发明药物组合物高、中、低剂量组，每组20只。各组按相应剂量每天灌胃1次，连续15天。灌胃结束后，将小鼠颈椎脱臼处死，取出右肾。称小鼠体重、右肾重，观察小鼠有无腹水存在。解剖显微镜下测量右肾上肿瘤的长、短径。按公式V:长径x短径2—2计算肿瘤体积。用10%甲醛固定右肾，病理组织学切片观察。肿瘤肾实质侵袭程度以下述组织学分级参考标准分级。I级癌组织增殖生长，癌组织内有大量核分裂像，癌细胞开始侵袭沿肾小管侵袭。II级癌细胞向周围肾组织侵袭达1020层细胞，或离原移植部位有23个肾小管的距离，周围有细胞浸润。被侵袭的肾小管尚未见明显的变性。III级癌细胞侵袭面积增大，大量的肾小管已经变性、萎縮，有的肾小球己受侵犯。IV级癌细胞侵袭生长面积达肾组织的50%以上。大量的肾小管、肾小球萎縮，癌组织内出现坏死。按相同方法重复实验2次。剂量设置取27.12g/kg、13.56和6.78三个剂量，剂量设置同前。给药途径ig，与拟推荐的临床用药途径一致。试验对照空白对照组ig给药，给予等体积生理盐水，0.2ml/10g体重。阳性对照组以桂枝茯苓胶囊作为阳性对照药，小鼠用量等效剂量为0.54g/kg。本实验小鼠剂量取其等效量的2倍，即1.08g/kg。用蒸馏水将药物溶解后配成所需浓度，ig给药。实验结果实验结果发现，本发明药物组合物连续灌胃15天，对615小鼠肾包囊膜瘤体生长有明显抑制作用，可减少肿瘤体积，显著减轻肿瘤对肾实质的侵害。实验重复2次，结果相似。见表13。表1本发明药物组合物对小鼠子宫颈癌U14肾包囊膜下移植后肾侵袭程度的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>物桂枝茯芩胶囊13.5627.121.0820.6±0.8321.2±0.4520.5±0.7381.5±41.6*48.2±37.2**75.3±30.2*I级10个，I级12个，I级15个，n级7个，m级3个n级3个，m级5个u级3个，ni级2个与模型组比较*P<0.05;**P<0.01.表3本发明药物组合物对小鼠子宫颈癌U14肾包囊;膜下移植后肾侵袭程度的影口向(第3批，n=20，;±s)組.别空白对照模型组本发明药物组合物桂枝茯芩胶囊剂量6.78体重(g)21.0±0.3621細.6221.2±0.80肿瘤体积(mm3)0152.4±68,176.4±59.7*H级6个,I级14个，肾实质侵袭0III级IO个，IV级4个n级4个，m级2个13.5627.121,0820.5±0.7220.4±0.6921.2±0.6859.3士39.2"48.3±33.4**68.4±54.3*I级8个，I级14个，I级14个，n级6个，m级6个n级4个，m级2个n级4个，m级2个与模型组比较*P<0.05;**P<0.01.结论本实验结果表明，本发明药物组合物连续灌胃15天，对U14小鼠子宫颈癌瘤株肾包囊膜下移植后对肾侵袭程度有明显的抑制作用，减少肿瘤体积，减轻肿瘤对肾实质的侵害。实验重复2次，结果相似。2、对豚鼠实验性子宫平滑肌瘤的影响动物成年未孕豚鼠90只，体重380-420g。饲养条件动物进入实验室后，分笼，每笼放养5只，适应性饲养3天，观察其活动、饮食、大小便无异常后启用。实验动物由专人词养管理。动物室光照充足，通风和空调设备良好，室温控制在20-25°C，相对湿度为40-70%。实验室按常规定期消毒。剂量设置本发明药物组合物成人临床用法用量口服，46.4g生药/次，2次/天，每天相当于用生药92.8g。按成人60kg计算，即成人日用量为1.55g生药/kg，分别取成人日用量的20、10和5倍，即含生药量为31g/kg，15.5g/kg和7.75g/kg作为三个实验剂量。给药途径ig，与拟推荐的临床用药途径一致。试验对照空白对照组给予等体积生理盐水。实验方法动物及分组选用成年未孕豚鼠90只，随机分为正常对照组，造模组，桂枝茯苓丸组，本发明药物组合物高、中、低剂量组，每组15只。正常对照组常规饲养，并每日灌喂生理盐水2ml。其余五组造模方法为肌肉注射苯甲醇雌二醇，0.2mg/只，3次/周，连续3月后，加黄体酮1.5mg/只肌注，2次/周，连续一月。在造模同时，模型组每日温水冲服灌喂桂枝茯苓丸lg/只(约相当于成人常规用量的20倍)，本发明药物组合物高、中、低剂量组分别每日灌喂本发明药物组合物31g/kg、15.5g/kg和7.75g/kg。四个月后所有动物称重，击头处死，剖腹观察子宫大体形态，沿子宫膀胱连接处剪取子宫，称重，计算子宫系数(子宫重/体重)，量取子宫颈以上及分角子宫根部横径，而后于20%中性福尔马林中固定，子宫分角以上相同部位横切取材0.5cm，每侧取材3块，石蜡包埋，HE染色。光镜观察子宫组织形态，每张切片选取5个部位，在10x10镜下以显微测微尺测量平滑肌厚度，取平均值。结果子宫重量模型组子宫重量增加，与对照组相比，差异有极显著意义(PO.Ol)，本发明药物组合物高、中、低三个剂量组与模型组相比，重量减轻，差异有显著意义(P0.05)。桂枝茯苓丸组与模型组相比有减轻趋热(PX).05)。见表4。表4子宫重量比较分组S体重(g)W,子宫重(mg)W2子宫系数x励0正常对照组10616.0±68.011.25±0.263.08±0.07模型组10446.4±39.704.21±0.73**9.43±2.02'*桂枝茯苓丸组10427.6±24.083.45±0.518.07±1.72本发明药物高剂量组10428.1±32.832.78±0.536.49±1.89#中剂量组0431.0±38.742.93±0.586.80±1,64*低剂量组10429.2±33.883.69±0.718.59±1.77**P<0.01与正常对照组比较；#P<0.05与模型组比较。子宫横径变化结果显示，模型组两处子宫横径较正常对照组增粗，差异有显著意义(PO.Ol)，本发明药物组合物高、中、二个剂量组横径均小于模型组，差异有显著意义(P0.05)。见表5。表5子宫横径比较(cm)分组正常对照组模型组桂枝茯苓丸组本发明药物组合物高剂量组中剂量组低剂量组N101010101010分角下0.54±0.061.37±0.05'*1.16±0.10#1.09±0.07#U7土0.08'1.23±0.04分角根部0.28±0.030.60±0.07"0.46±0.06'0.35±0.03#0.44土0.04"10.49±0.04**P<0.01与正常对照组比较；评<0.05落与模型组比较子宫组织形态变化镜下观察，造模组分角子宫根部平滑肌层明显呈不均解剖学增厚，且平滑肌细胞排列紊乱，呈巻云状或编织状，病变近似瘤样增生；本发明药物组合物及桂枝苓丸组分角子宫平滑肌层薄于造模组(P〈0.05)，排列规整。子宫平滑肌厚度变化模型组子宫平滑肌较正常对照组明显增厚(pO.Ol)，桂枝茯苓丸和本发明药物组合物组子宫平滑肌厚度较模型组(P〈0.05)，与正常对照组相比无显著差异(pX).05)。(见表6)。表6子宫平滑肌厚度比较(以目镜测微尺小格数目为厚度单位)分组正常对照组模型组桂枝茯苓丸组本发明药物组合物高剂量组中剂量组低剂量组N101010101010;c±s26.72±2.0254.49±6.44"35.89±6.17#28.48±4.43#34.10±5.42#43.37±5.41#*P<0.01与正常对照组比较；#P<0.05与模型组比较结论本发明药物组合物以三种不同剂量连续灌服豚鼠120天，结果发现各给药组均可不同程度地抑制雌、孕激素诱发的子宫平滑肌瘤样增生、减轻增重子宫的重量及其平滑肌层增厚等病理现象，提示该药物对子宫肌瘤的防治有较好疗效。3、抗炎作用的研究动物ICR小鼠，61、？各半，20-22g。Wistar大鼠，体重180-230g，。饲养条件动物进入实验室后，雌雄分开，每笼放养5只，适应性词养3天，观察其活动、饮食、大小便无异常后启用。实验动物由专人饲养管理。动物室光照充足，通风和空调设备良好，室温控制在20-25°C，相对湿度为40-70%。实验室按常规定期消毒。实验方法(1)毛细血管通透性实验取ICR小鼠50只，随机分成五组，即空白对照组，本发明药物组合物低、中、高剂量组和阳性对照组。各组动物禁食12小时后，按剂量灌胃给药，0.2ml/10g体重。2小时后由尾静脉注入0.5。/。伊文思兰0.2ml/只，同时腹腔注射0.6%醋酸，0.2m1/只，20分钟后将小鼠处死，剖开腹腔，用生理盐水冲洗腹腔数次，吸取腹腔液，离心，取上清液于590nm处比色，测定其光密度(OD值)。(2)二甲苯诱发的小鼠耳廓肿胀的影响取ICR小鼠50只，随机分成五组，即空白对照组，本发明药物组合物低、中、高剂量组和阳性对照组。各组动物均按剂量灌胃给药，0.2ml/10g体重，连续7天。末次给药后1小时，分别用二甲苯棉球深入涂抹各组小鼠左耳廓前后两面，30min后处死动物，剪下左右两耳廓，用9mm直径打孔器分别在左右耳廓同一部位取下同样大小的耳片，称重，以左右耳片重量之差为其肿胀程度指标，比较各组间差异，求出抑制率。(3)蛋清所致大鼠足跖肿胀试验取大鼠50只，随机分5组，即空白对照组，本发明药物组合物低、中、高剂量组和阳性对照组，每组10只。各组动物均按剂量灌胃给药，0.5ml/100g体重，连续7天。末次给药后1小时，用排水法测定装置测每只大鼠左后爪体积，然后用0.25ml注射器吸取新鲜配制好的蛋清液，用4号针头注入大鼠左后脚趾皮下，注射量为0.05ml/爪，于l小时后再测鼠爪体积，计算鼠爪肿胀百分率鼠爪肿胀率(％)=(致炎后鼠爪体积-致炎前鼠爪体积)+致炎前鼠爪体积x100。/。抑制率(％)=(给药组肿胀率-空白对照组肿胀率)—空白对照组肿胀率><100%剂量设置本发明药物组合物成人临床用法用量口服，46.4g生药/次，2次/天，每天相当于用生药92.8g。按成人60kg计算，即成人日用量为1.55g生药/kg,每次用量为0.78g生药/kg。大鼠(ig)用量等效量-1.55x35—6二6.78g生药/kg设大鼠(ig)用量低剂量=6.78x0.5=3.39g生药/kg中剂量=6.78x1=6.78g生药/kg高剂量=6.78x2=13.56g生药/kg小鼠剂量设置同前给药途径ig，与拟推荐的临床用药途径一致。试验对照空白对照组ig给药，用等体积生理盐水。阳性对照组以桂枝茯苓胶囊作为阳性对照药，大鼠用量等效剂量为0.27g/kg。本实验大鼠剂量取其等效量的2倍，即0.54g/kg。小鼠用量等效剂量为0.54g/kg。本实验小鼠剂量取其等效量的2倍，即1.08g/kg。用蒸馏水将药物溶解后配成所需浓度，ig给药。实验结果-(1)药物对小鼠毛细血管通透性的影响实验结果表明，本发明药物组合物中、高剂量组及阳性对照组OD值与空白对照组相比，有非常显著的差异性，PO.05或PO.Ol。本发明药物组合物中、低剂量组与阳性对照组相比，也有显著差异性，P<0.01。(2)药物对小鼠耳廓肿胀的影响给小鼠涂抹二甲苯后，小鼠耳廓呈明显肿胀。本发明药物组合物低、中、高三剂量组及阳性对照组小鼠耳廓肿胀程度明显减轻。各给药组显示明显的抗炎作用，给药组与空白对照组相比，均有非常显著的差异性，P<0.05或P〈0.01。本发明药物组合物三剂量组与阳性对照组相比，无显著差异性，P>0.05。(3)药物对大鼠蛋清所致足跖肿胀的影响由表3可见，本发明药物组合物各剂量组及阳性对照药组与空白对照组相比，大鼠足跖的肿胀程度均明显减轻，PO.05或PO.01，有非常显著的差异性。本发明药物组合物高剂量组对炎症的抑制率约达50%。结论本实验结果表明，本发明药物组合物能明显降低小鼠毛细血管通透性，减少渗出。对二甲苯诱导的小鼠耳廓水肿及蛋清所致的大鼠足跖肿胀均有明显的抑制作用。本发明药物组合物的抗炎作用随剂量加大而增强。制备实施例实施例1一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其中丹参100g，赤芍100g，三棱100g，莪术100g，甘草50g。实施例2一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其中丹参1000g，赤芍1000g，三棱500g，莪术500g，甘草300g。实施例3一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其中丹参500g，赤芍500g，三棱300g，莪术300g，甘草100g。实施例4一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其中丹参1000g，赤芍1000g，三棱500g，莪术500g，甘草200g。实施例5一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其中丹参600g，赤芍600g，三棱360g，莪术360g，甘草150g。实施例6一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其中丹参200g，赤芍950g，三棱120g，莪术450g，甘草90g。实施例7一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其中丹参950g，赤芍110g，三棱480g，莪术105g，甘草270g。实施例8一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其中丹参120g，赤芍150g，三棱110g，莪术120g，甘草70g。实施例9一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其中丹参950g,赤芍980g，三棱420g，莪术420g，甘草290g。实施例10一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其中丹参500g，赤芍500g，三棱300g，莪术250g，甘草200g。上述实施例I一IO的药物组合物，可以按照现有技术制备成药剂学可以接受的药物制剂，也可以按照下述方法进行制备实施例11取丹参用乙醇提取，收集提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓縮浓縮液经干燥，得丹参干膏粉，丹参醇提后的药渣与赤芍、三棱、莪术、甘草加水煎煮，滤过，滤液干燥，得干粉，与丹参干膏粉混合均匀，按照药剂学常规要求制备成制剂1000单位。权利要求1.一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其特征在于它是由丹参1-10重量份，赤芍1-10重量份，三棱1-5重量份，莪术1-5重量份，甘草0.5-3重量份组成。2.根据权利要求l所述的一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其中丹参5—10重量份，赤芍5—10重量份，三棱3—5重量份，莪术3—5重量份，甘草1一2重量份。3.根据权利要求l所述的一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其中丹参6重量份，赤芍6重量份，三棱3.6重量份，莪术3.6重量份，甘草1.5重量份。4.根据权利要求1一3任一项所述的一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其制备方法为取丹参用乙醇提取，收集提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓縮浓縮液经干燥，得丹参干膏粉，丹参醇提后的药渣与赤芍、三棱、莪术、甘草加水煎煮，滤过，滤液干燥，得干粉，与丹参干膏粉混合均匀，按照药剂学常规要求制备成制剂。全文摘要本发明公开了一种治疗子宫肌瘤的药物组合物，其特征在于它是由丹参1-10重量份，赤芍1-10重量份，三棱1-5重量份，莪术1-5重量份，甘草0.5-3重量份组成。药效学研究表明，本发明药物组合物具有很好的药理作用。文档编号A61K36/88GK101549122SQ20081010327公开日2009年10月7日申请日期2008年4月2日优先权日2008年4月2日发明者伟李,王爱民申请人:北京卓越同创药物研究院