抗il-13抗体调配物和其用途的制作方法

专利名称：：抗il-13抗体调配物和其用途的制作方法
技术领域：
：本申请案是关于抗体领域，且更具体地说是关于抗体的储存。
背景技术：
：抗体和源自抗体的蛋白质具有许多应用。通过使用相对简单的调配物将抗体储存在促进抗体在各种条件下稳定性的调配物中会促进抗体在所述应用中的使用。若调配物用于治疗用途，则重要的是调配物允许储存而活性组份的活性没有无法接受的损失，使不期望产品(例如无活性聚集物)的积聚降到最低，供给适当浓度的活性组份，且不包含与治疗应用不相容的组份。用于储存欲用于下游处理的蛋白质(例如，欲偶联到另一实体以制造治疗剂的蛋白质)的调配物必须不含将干扰制造过程的组份。
发明内容本发明是关于用于储存抗IL-13抗体的调配物。所述调配物是用作(例如)医药调配物。因此，在一方面，本发明是关于抗IL-I3抗体调配物，其包括(a)抗IL-13抗体；(b)冷冻保护剂；和(c)缓冲液，以使所述调配物的pH为约5.5到6.5。在一些实施例中，所述调配物是液体调配物、冻干调配物、可重构冻千调配物、或气溶胶调配物。在某些实施例中，抗IL-13在调配物中的浓度为约0.5mg/ml到约250mg/ml、约0.5mg/ml到约45mg/ml、约0.5mg/ml到约100mg/ml、约100mg/ml到约200mg/ml、或约50mg/ml到约250mg/ml。在调配物的一些实施例中，抗IL-13抗体是人源化抗体(例如，部分人源化抗体或完全人源化抗体)。在一些情况下，抗体是K轻链构建抗体。在一些实施例中，抗体是IgGl抗体、IgG2抗体或IgG4抗体。在某些实施例中，调配物中的抗IL-13抗体是单克隆抗体。在一些情况下，调配物的抗IL-13抗体是在美国专利申请案第11/M9，309号(美国专利公开案第20060073148号)、美国专利申请案第11/155,843号(美国专利公开案第20060063228号)或WO2006/085938中阐述的抗体。在特定实施例中，抗IL-13抗体是IMA-638(参见图34)或IMA-026(参见图35)。调配物的冷冻保护剂可为(例如)约2.5%到约10%(重量/体积)的蔗糖或海藻糖。在一些情况下，调配物的冷冻保护剂不是组氨酸。在一些实施例中，调配物中的缓冲液为约4mM到约60mM的组氨酸缓冲液、约5mM到约25mM的琥珀酸盐缓冲液、或约5mM到约25mM的乙酸盐缓冲液。调配物缓冲液的pH通常在约5.0与7.0之间。在一些特定实施例中，调配物缓冲液的pH为5.0、5.5、6.0或6.5。除冷冻保护剂和缓冲液以外，本发明的调配物可含有其它赋形剂。在一些实施例中，调配物包括浓度为约0%到0.2%的表面活性剂。在一些情况下，调配物含有大于0%且至多约0.2%的聚山梨醇酯-20、聚山梨醇酯-40、聚山梨醇酯-60、聚山梨醇酯-65、聚山梨醇酯-80或聚山梨醇酯-85。在特定实施例中，调配物含有0.001%、0.002%、0.003%、0.004%、0.005%、0.006%、0.007%、0.008%、0.009%、0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.06%、0.07%、0.08%、0.09%、0.1%、0.11%、0.12%、0.13%、0.14%、0.15%、0.16%、0.17%、0.18%、0.19%或0.2%的聚山梨醇酯-80。调配物还可包括约0.01%到约5%的精氨酸。在特定实施例中，调配物含有0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.06%、0.07%、0.08%、0.09%、0.1%、0.11%、0.12%、0.13%、0.14%、0.15%、0.16%、0.17%、0.18%、0.19%或0.2%、0.3%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%、0.9%、1.0%、1.1%、1.2%、1.30%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.5%、3%、3.5%、4.0%、4.5%或5%的精氨酸。在一些实施例中，调配物还包括约0.001%到约0.05%的吐温(Tween)20或吐温80。在特定实施例中，调配物含有0.005%、0.008%、0.01%、0.2%、0.03%、0.04%、或0.05%的吐温20或吐温80。在某些实施例中，本发明的调配物可含有表面活性剂和精氨酸、精氨酸和吐温、或精氮酸、吐温和除吐温以外的表面活性剂。在其它实施例中，调配物还可包括以下物质中的一种或多种约1%到约10%的山梨醇、约0.1%到约2%的甘氨酸、约5mM到约150mM的甲硫氨酸、和约5mM到约100mM的氯化钠。调配物还可包括第二抗体或其抗原结合片段。例如，第二抗体可为抗IL-13抗体或其IL-13结合片段，其中所述第二IL-13抗体的表位特异性不同于调配物的第一IL-13抗体。可与抗IL-13抗体共同调配的抗体的其它非限制性实例包括抗IgE抗体或其IgE结合片段、抗IL-4抗体或其IL-4结合片段、抗TNF-a抗体或其TNF-a结合片段、抗C5抗体或其补体结合片段、和抗IL-9抗体或其IL-9结合片段。调配物还可包括用于治疗炎性病症的第二治疗或药理活性剂。在调配物的某些实施例中，(a)抗体是人源化鼠抗IL-13抗体；(b)冷冻保护剂是约0.02%到约10%(重量/体积)的蔗糖或海藻糖；且(c)缓冲液是约4mM到约60mM的组氨酸缓冲液。在一些情况下，此调配物还含有约0.01%到约5%的精氨酸。在某些情况下，此调配物还含有约0.001%到约0.05%的吐温。在其它情况下，此调配物含有约0.01%到约5%的精氨酸和约0.001%到约0.05%的吐温。在一些实施例中，调配物进一步包含以下物质中的一种或多种约1%到约10%的山梨醇、约0.1%到约2%的甘氨酸、约5mM到约150mM的甲硫氨酸、和约5mM到约100mM的氯化钠。在一些情况下，此调配物还含有大于0%且至多约0.2%的表面活性剂(例如，聚山梨醇酯-20、聚山梨醇酯-40、聚山梨醇酯-45、聚山梨醇酯-60、聚山梨醇酯-65、聚山梨醇酯-80、聚山梨醇酯-85)。在调配物的某些实施例中，(a)抗体是IMA-638或IMA-026;(b)冷冻保护剂是约0.02%到约10%(重量/体积)的蔗糖或海藻糖；且(c)缓冲液是约10mM的琥珀酸盐缓冲液，pH6.0。在调配物的其它实施例中，(a)抗体是IMA-638或IMA-026抗体；(b)冷冻保护剂是约0.02%到约10%(重量/体积)的蔗糖或海藻糖；且(c)缓冲液是约IOmM的乙酸盐缓冲液，pH6.0。在另一方面，提供包含以下物质的气溶胶调配物(a)抗IL-13抗体；(b)约5%到约10%(重量/体积)的蔗糖或海藻糖；和(c)pH为约5.5到6.5的缓冲液。在一些情况下，此调配物还含有约0.01%到约5%的精氨酸。在某些情况下，此调配物还含有约0.001%到约0.05%的吐温。在其它情况下，此调配物含有约0.01%到约5%的精氨酸和约0.001%到约0.05%的吐温。在一些实施例中，此调配物包含以下物质中的一种或多种约1%到约10X的山梨醇、约0.1X到约2X的甘氨酸、约5mM到约150mM的甲硫氨酸、和约5mM到约100mM的氯化钠。在一些情况下，此调配物含有大于0%且至多约0.2%的表面活性剂(例如，聚山梨醇酯-20、聚山梨醇酯-40、聚山梨醇酯-60、聚山梨醇酯-65、聚山梨醇酯-80、聚山梨醇酯-85)。在一些情况下，气溶胶调配物还包括用于治疗哮喘或慢性阻塞性肺病的治疗剂。在另一方面，提供包含以下物质的冻干调配物(a)抗IL-13抗体；(b)约5%到约10%(重量/体积)的蔗糖或海藻糖；和(c)pH为约5.5到6.5的缓冲液。在一些情况下，此调配物还含有约0.01%到约5%的精氨酸。在某些情况下，此调配物还含有约0.001%到约0.05%的吐温。在其它情况下，此调配物含有约0.01%到约5%的精氨酸和约0.001%到约0.05%的吐温。在一些实施例中，调配物包含以下物质中的一种或多种约1%到约10%的山梨醇、约0.1%到约2%的甘氨酸、约5mM到约150mM的甲硫氨酸、和约5mM到约100mM的氯化钠。在一些情况下，此调配物含有大于0%且至多约0.2%的表面活性剂(例如，聚山梨醇酯-20、聚山梨醇酯-40、聚山梨醇酯-60、聚山梨醇酯-65、聚山梨醇酯-80、聚山梨醇酯-85)。在一些情况下，冻干调配物还包括用于治疗哮喘或慢性阻塞性肺病的治疗剂。在某些实施例中，在调配物中在-8(TC下储存至少18个月之后、在-8(TC下储存至少24个月之后、在-2(TC下储存至少18个月之后、在-2(TC下储存至少24个月之后、在2。C到8。C下储存至少18个月之后、在2。C到8匸下储存至少24个月之后、在25。C下储存至少18个月之后、或在25'C下储存至少24个月之后维持抗体的完整性。在一些情况下，在-8(TC下储存至少18个月之后、在-80'C下储存至少24个月之后、在-20。C下储存至少18个月之后、在-20'C下储存至少24个月之后、在2'C到8'C下储存至少18个月之后、在2'C到8'C下储存至少24个月之后、在25t下储存至少18个月之后、或在25'C下储存至少24个月之后，调配物包括小于10X的高分子量(HMW)物质。本发明包括其中使用尺寸排除-高效液相色谱(SEC-HPLC)分析HMW物质的实施例。本发明还包括以下实施例其中在-8(TC下至少18个月之后、在-8(TC下至少24个月之后、在-20。C下至少18个月之后、在-20。C下至少24个月之后、在2。C到8。C下至少18个月之后、在2'C到8'C下至少24个月之后、在25'C下至少18个月之后、或在25'C下至少24个月之后，调配物包含小于10X的低分子量(LMW)物质。在某些情况下，LMW物质是使用SEC-HPLC进行分析。在调配物的一些实施例中，一旦对冻干抗体调配物进行重构，则与冻干之前的调配物相比调配物保持至少90%的抗体结构。抗体结构是通过(例如)结合分析、表面电荷分析、生物分析、或HMW物质与LMW物质的比例来测定。在另一方面，本发明是关于用于治疗IL-13相关病症的医药组合物。医药组合物包括本文所述的抗IL-13抗体调配物(例如，包含人源化抗体的调配物)和本文所述的其它特征。在另一方面，本发明是关于医药组合物的制品，所述组合物包括抗体调配物，所述调配物包括(a)抗IL-13抗体；(b)冷冻保护剂；和(c)缓冲液，以使所述调配物的pH为约5.5到6.5。在一些情况下，医药组合物的抗IL-13抗体是在美国专利申请案第11/149,309号(美国专利公开案第20060073148号)、美国专利申请案第11/155,843号(美国专利公开案第20060063228号)或WO2006/085938中阐述的抗体。在特定实施例中，抗IL-13抗体是IMA-638或IMA-026。在一些情况下，医药组合物还含有约0.01%到约5%的精氨酸。在某些情况下，医药组合物还含有约0.001%到约0.05%的吐温。在其它情况下，医药组合物含有约0.01%到约5%的精氨酸和约0.001%到约0.05%的吐温。在一些实施例中，医药组合物包含以下物质中的一种或多种约1%到约10%的山梨醇、约0.1%到约2%的甘氨酸、约5mM到约150mM的甲硫氨酸、和约5mM到约100mM的氯化钠。在一些情况下，此调配物含有大于0%且至多约0.2%的表面活性剂(例如，聚山梨醇酯-20、聚山梨醇酯-40、聚山梨醇酯-60、聚山梨醇酯-65、聚山梨醇酯-80、聚山梨醇酯-85)。在另一方面，本发明是关于治疗IL-13相关病症的方法，所述方法包含投与医药有效量的IL-13抗体调配物。调配物包括(a)抗IL-13抗体；(b)冷冻保护剂；和(c)缓冲液，以使所述调配物的pH为约5.5到6.5。在一些情况下，调配物的抗IL-13抗体是在美国专利申请案第11/149,309号(美国专利公开案第20060073148号)、美国专利申请案第11/155,843号(美国专利公开案第20060063228号)或WO2006/085938中阐述的抗体。在特定实施例中，抗IL-13抗体是IMA-638或IMA-026。在一些情况下，调配物还含有约0.01%到约5%的精氨酸。在某些情况下，调配物还含有约0.001%到约0.05%的吐温。在其它情况下，调配物含有约0.01%到约5%的精氨酸和约0.001%到约0.05%的吐温。在一些实施例中，调配物包含以下物质中的一种或多种约1%到约10%的山梨醇、约0.1%到约2%的甘氨酸、约5mM到约150mM的甲硫氨酸、和约5mM到约100mM的氯化钠。在一些情况下，此调配物含有大于0%且至多约0.2%的表面活性剂(例如，聚山梨醇酯-20、聚山梨醇酯-40、聚山梨醇酯-60、聚山梨醇酯-65、聚山梨醇酯-80、聚山梨醇酯-85)。在一些实施例中，本发明方法包括联合治疗。联合治疗是指两种或两种以上的不同治疗化合物组合的任何投与形式，以使当先前投与的治疗化合物在体内仍提供有效作用时投与第二种化合物(例如，所述两种化合物同时在患者体内提供有效作用，其可包括所述两种化合物的协同效应)。联合治疗可包括抗IL-13抗体分子与一种或多种额外治疗剂共同调配和/或共同投与，例如，一种或多种细胞因子和生长因子抑制剂、免疫抑制剂、抗炎剂(例如，全身性抗炎剂)、代谢抑制剂、酶抑制剂、和/或细胞毒性或细胞生长抑制剂。IL-13结合剂和其它治疗剂可也分开投与。在方法的某些实施例中，IL-13相关病症是炎性疾病。在一些实施例中，炎性疾病是选自由关节炎、哮喘、炎性肠病、炎性皮肤病、多发性硬化、骨质疏松症、肌腱炎、过敏性病症、由宿主损伤导致的炎症、败血症、类风湿性关节炎、骨关节炎、易激性肠病、溃疡性结肠炎、牛皮癣、全身性红斑性狼疮、和任何其它自身免疫疾病组成的群组。在方法的某些实施例中，IL-13相关病症是过敏性哮喘、非过敏性哮喘、过敏性哮喘和非过敏性哮喘的组合、运动诱发哮喘、药物诱发哮喘、职业性哮喘、晚期哮喘、B-细胞慢性淋巴细胞白血病(B-细胞CLL)、何杰金氏病(Hodgkin，sdisease)、血吸虫病中的组织纤维化、自身免疫风湿性疾病、炎性肠病症、类风湿性关节炎、涉及气管发炎的病状、嗜酸性细胞增多症、纤维化和过度粘液产生(例如，囊性纤维化和肺纤维化)；特应性病症(例如，过敏性鼻炎)；皮肤的炎性和/或自身免疫病状(例如，特应性皮炎)、胃肠道器官的炎性和/或自身免疫病状(例如，炎性肠病(IBD))、肝的炎性和/或自身免疫病状(例如，肝硬化)；病毒感染；其它器官的硬皮病和纤维化(例如肝纤维化)、过敏性结膜炎、湿疹、荨麻疹、食物过敏、慢性阻塞性肺病(COPD)、溃疡性结肠炎、劳氏肉瘤病毒(RousSarcomaVirus)感染、葡萄膜炎、硬皮病、或骨质疏松症。在方法的一些实施例中，抗体调配物是通过吸入、喷雾或注射来投与。在一些实施例中，提供包含本文所述调配物的预装填溶液的可注射注射器。在特定实施例中，预装填注射器包含100mg/ml的抗IL-13抗体(例如，IMA-026、IMA-638)、10mM的组氨酸、5%的蔗糖、0.01%的吐温-80、40mM的NaCl，pH6.0。在另一特定实施例中，预装填注射器中的调配物进一步包含约0.1%与约2%之间的精氨酸。在一些情况下，注射器提供有自动注射器装置。在其它实施例中，提供用于经鼻投与本文所述调配物的装置。在一些情况下，提供用于投与本文所述调配物的经皮贴片。在另一些方面，提供用于投与本文所述调配物的静脉输注袋。在特定实施例中，静脉输注袋提供有生理盐水或5%葡萄糖。在其它实施例中，提供包含本文所述调配物的容器的试剂盒。所述试剂盒可任选的包括使用说明书。在一些情况下，试剂盒中的容器是塑料或玻璃小瓶或可注射注射器。除非另有说明，否则本文所用所有技术和科学术语具有与熟习本发明所属
技术领域：
者通常所了解的含义相同的含义。尽管与本文所述方法和材料类似或等同的方法和材料皆可用于实践或试验本发明，但下文描述适宜的方法和材料。本文所提及的所有出版物、专利申请案、专利、和其它参考文献的全部内容皆以引用方式并入本文中。此外，所述材料、方法和实例仅是例示性而非意欲限制本发明。依据详细说明、图式和权利要求书，本发明的其它特征和优点将显而易见。图1是描绘试验结果的图表，其中经冻干储存的抗IL-13抗体调配物在适当时间点重构后的XHMW物质是使用尺寸排除色谱-高效液相色谱(SEC-HPLC)测定。％HMW=HMW物质中总蛋白质的百分比。将试样在4"C、25X:和4(TC下储存长达24个月，然后进行重构。图2是描绘试验结果的图表，其中经冻干储存的抗IL-13抗体调配物在适当时间点重构后的生物活性是作为抗IL-13抗体标准物的百分比来测定。数据表示为比活性(以单位/毫克蛋白质表示)。将试样在4T:、25'C和4(TC下储存长达24个月，然后进行重构。图3是描绘试验结果的图表，其中100mg/ml液体抗IL-13抗体调配物中HMW物质的百分比是在4'C、15°C、25X:和4(TC下储存长达24个月后使用SEC-HPLC测定。图4是描绘试验结果的图表，其中100mg/ml液体抗IL-13抗体调配物中LMW物质的百分比是在4。C、15°C、25'C和40。C下储存长达24个月后使用SEC-HPLC测定。图5是描绘试验结果的图表，其中液体调配物中抗IL-13抗体的％结合活性是在4°C、15°C、25。C和4(TC下储存长达6个月之后进行分析。结合活性表示为相对于标准物的百分比。图6是描绘试验结果的图表，其中100mg/ml的抗IL-13抗体调配物的生物活性是作为抗IL-13抗体标准物的百分比来测定。数据表示为比活性(以单位/毫克蛋白质表示)。试样已在4。C、15°C、25。C和40。C下储存长达24个月。图7是描绘分析在4。C、15°C、25。C和4(TC下储存长达24个月的液体调配物中蛋白质浓度的试验结果的图表。图8是用以测定冷冻浓縮无定形相的玻璃转化温度的次周围环境调制式差示扫描量热法(mDSC)的图表。图9A是抗IL-13抗体在-25'C下的冷冻干燥显微镜图像的复制品。图9B是从-25'C升高到-15T:的抗IL-13抗体的冷冻干燥显微镜图像的复制品。图9C是从-15。C降到-18。C的抗IL-13抗体的冷冻干燥显微镜图像的复制品。图9D是从-18'C升高到-8i:的抗IL-13抗体的冷冻干燥显微镜图像的复制品。图9E是从-8T:升高到-4r的抗IL-13抗体的冷冻干燥显微镜图像的复制品。图9F是从-4。C降到-16'C的抗IL-13抗体的冷冻干燥显微镜图像的复制品。图10是描绘攻击性冻干循环的循环轨迹的图表。展示两种不同抗体组合物(标记为MYO-029和IMA-638)的存架温度(shelf)和露点温度。所示压力是使用电容式压力计和皮拉尼真空计(Piranigauge)进行分析。图11是描绘对照冻干循环的循环轨迹的图表。温度和压力试样如同图IO—样。图12是描绘退火冻干循环的循环轨迹的图表。温度和压力试样如同图IO—样。图13是描绘在初次干燥期间分别对应于图10-12的攻击性冻干循环、对照冻干和退火冻干循环的产品温度的图表。图14是描绘对照试样的调制式差示扫描量热温度记录图。观察到两个玻璃转化温度(对可逆热流进行测量)，一个在51.3'C处开始且一个在74.5"C处开始。图15是描绘三个试样(对照、攻击性和退火)在酰胺I区中傅里叶(Fourier)变换红外光谱结果的图表。图16是描绘试样的重构时间随储存时间变化的图表。试样是对照、攻击性和退火试样，且在5'C或5(TC下储存。图17是描绘蛋白质浓度的图表，如使用UV-可见光光谱(A，)所分析。试样与用于图16的一样。图18是描绘溶液光散射的图表，如通过UV-可见光光谱(A42o)所分析。试样与用于图16的一样。图19是描绘使用SEC-HPL分析CHMW物质结果的图表。试样与用于图16的一样。图20是描绘测试抗体的结合亲和力随储存时间变化的图表。试样与用于图16的一样。图21是描绘在小瓶和注射器中所实施的IMA-638赋形剂筛选中％回收的条形图，其中IMA-638抗体的浓度是通过UV/Vis测量。图22是描绘在小瓶和注射器中所实施的IMA-638赋形剂筛选中在4(TC下从t=0到6周HMW物质的％变化的条形图。图23是描绘在小瓶和注射器中所实施的IMA-638赋形剂筛选中在40'C下从t=0到6周LMW物质的X变化的条形图。图24是描绘在室温下在凝胶振荡器上以约200rpm振荡24小时之后有或没有吐温的调配物中IMA-638浓度的条形图。图25是描绘在室温下在凝胶振荡器上以约200rpm振荡24小时之后有或没有吐温的调配物中IMA-638的XHMW物质的条形图。图26是描绘在一个(FT1)、三个(FT3)和五个(FT5)冷冻-解冻循环(冷冻循环在-80。C下；解冻循环在37。C下)之后有或没有吐温的调配物中IMA-638浓度的条形图。图27是描绘在一个(FT1)、三个(FT3)和五个(FT5)冷冻-解冻循环(冷冻循环在-80'C下；解冻循环在37'C下)之后有或没有吐温的调配物中IMA-638的XHMW物质的条形图。图28是描绘在注射器中在4'C下储存长达7个月的IMA-638液体调配物中的％HMW物质的图表。图29是描绘在注射器中在25t:下储存长达7个月的IMA-638液体调配物中的％HMW物质的图表。图30是描绘在注射器中在40'C下储存长达7个月的IMA-638液体调配物中的％HMW物质的图表。图31是描绘在注射器中在40'C下储存长达28周的IMA-638液体调配物中的％HMW物质的图表，所述调配物含有0.01%的吐温和0%与2%之间的精氨酸。图32是描绘IL-13抗体IMA-026的XHMW物质的图表，所述IMA-026是在冻干并在4°C、25'C和4(TC下储存长达12个月之后进行重构。图33是描绘IMA-026抗体生物活性的图表，所述IMA-026是在冻干并在4°C、25'C和4(TC下储存长达12个月之后进行重构。图34提供IMA-638抗体重链(SEQIDNO:l)和轻链(SEQIDN0:2)的氨基酸序列。仅在成熟分泌型IMA-638中观察到少量由重链DNA序列编码的最后一个氨基酸残基Lys448且预期在通过中国仓鼠卵巢(CHO)细胞蛋白酶进行细胞内处理期间去除大部分单克隆抗体。因此，IMA-638重链的羧基末端是Gly447。已在重组和血浆来源抗体中观察到羧基末端赖氨酸处理且看来并不影响其功能。图35提供IMA-026抗体重链(SEQIDNO:3)和轻链(SEQIDNO:4)的氨基酸序列。具体实施例方式己鉴别出适用于储存抗IL-13抗体的包括抗IL-13抗体的调配物("调配物")。作为液体或作为冻干产品在各种条件下长期储存之后调配物中的抗体通常维持完整性。例如，暴露于宽范围的储存温度(例如，-S(TC到40°C)、剪切应力(例如，振荡)和界面应力(冷冻-解冻循环)之后充分维持抗体的完整性。此外，对于冻干物质，在重构过程期间充分维持抗体的完整性。另外，充分维持抗体完整性以用作药剂，如由LMW物质和HMW物质相对较低的积聚、活体外生物活性、活体外结合活性和喷雾后的稳定性所表明。调配物本文所述的抗IL-13抗体调配物包括抗IL-13抗体、可用作冷冻保护剂的化合物、和缓冲液。调配物的pH通常为pH5.5-6.5。在一些实施例中，调配物是作为液体储存。在其它实施例中，将调配物制成液体且然后通过(例如)冻干或喷雾干燥来干燥，然后储存。干燥调配物可作为干燥复合物(例如，气溶胶或粉末)使用，或使用(例如)水、缓冲液或其它适当液体重构到其初始或另一浓度。抗体纯化工艺经设计以将15抗体转移到适用于作为冷冻液体长期储存且随后用于冷冻干燥的调配物中(例如，使用组氨酸/蔗糖调配物)。调配物冻干后具有特定浓度的蛋白质。然后冻干调配物可视需要利用适宜稀释剂(例如，水)重构以使最初调配物组份重新溶解到期望浓度，所述浓度通常与冻干前的浓度相同或比所述浓度高。冻干调配物可经重构以产生浓度不同于初始浓度(即，冻干前)的调配物，此取决于添加到冻干物中的水或稀释剂相对于开始冷冻-干燥时液体的体积的量(例如，实例6，参见下文)。适宜抗IL-B抗体调配物可通过分析抗体完整性的一个或多个参数来鉴别。所分析的参数通常是HMW物质的百分比或LMW物质的百分比。HMW物质或LMW物质的百分比是作为调配物中总蛋白质含量的百分比或作为百分比增加随时间的变化(即，在储存期间)来测定。可接受调配物作为冻干物或液体在2x:到4(rc下(例如，在2'C到25。C下、在2。C到15'C下、在2'C到8'C下、在约2。C下或在约25"C下)储存至少1年后其中HMW物质的总百分比为不大于10X的HMW物质或作为冻干物或液体在2'C至U4(TC下储存至少1年后不大于约10%的LMW物质。"约"是指所列举数值±20%。因此，"约20。C"是指16。C到24。C。通常，稳定性范围对于冷藏产品是在2°C-8'C下、且对于室温产品是在25T:下具有小于10X的HMW/LMW。作为冻干物储存的调配物中的HMW物质或LMW物质是在冻干物重构之后进行分析。4(TC是通常用于测试稳定性并测定短期暴露于非储存条件(例如，在产品转移期间或运输期间可能出现的条件)下的稳定性的加速条件。当所分析参数是HMW物质或LMW物质的百分比变化时，将储存后一种或两种物质中的％总蛋白质与储存前(例如，调配物刚制备完时)一种或两种物质中的％总蛋白质相比较。测定百分比差异。通常，在2。-8'C或25'C下储存约18到24个月之后液体调配物中HMW物质或LMW物质中蛋白质的X变化不大于10%，例如，不大于约8%、不大于约7%、不大于约6%、不大于约5%、不大于约4%、或不大于约3%。"约"是指所列举数值±20%。因此，约10%是指8%到12%。作为冻干产品储存的调配物在2'C-8'C(例如，4°C)下储存约18到24个月之后重构后其通常具有小于约5%、小于约4%、小于约3%、或小于约2XHMW物质或小于约5%、小于约4%、小于约3%、或小于约2X的LMW物质。调配物可作为冻干物储存(例如)至少2年、至少3年、至少4年、或至少5年。在一个实例中，抗IL-13抗体调配物含有100mg/ml的抗IL-13抗体、10mM的组氨酸、5%的蔗糖，且pH为6.0。在另一实例中，抗IL-13抗体调配物含有100mg/ml的抗IL-13抗体、lOmM的组氨酸、5%的蔗糖、0.01%的吐温80、2%的精氨酸，且pH为6.0。在另一实例中，调配物含有0.5mg/ml的抗IL-13抗体、10mM的组氨酸、5%的蔗糖，且pH为6.0。在再一实例中，调配物含有0.5mg/ml的抗IL-13抗体、10mM的组氨酸、5%的蔗糖、0.01%的吐温80、2%的精氨酸，且pH为6.0。关于调配物的组份和分析调配物中抗IL-13抗体完整性的方法的其它细节提供于下文中。抗IL-13抗体是本文所述调配物的组份。如本文所用，除非另外指明，否则术语"抗体"包括多克隆抗体、单克隆抗体、具有多表位特异性的抗体组合物、生物特异性抗体、双特异抗体、形成抗体一部分的单链分子、杂交抗体(例如完全或部分人源化抗体)、抗原结合抗体片段(例如Fab片段、F(ab')2片段和Fv片段)、和上述抗体的修饰抗体(例如，聚乙二醇抗体或抗体片段)。调配物中所用的抗IL-13抗体分子可为有效地人类蛋白质、人源化蛋白质、CDR接枝蛋白质、嵌合蛋白质、成熟蛋白质、亲和力成熟蛋白质、去免疫蛋白质、合成蛋白质、或者在活体外产生的蛋白质。在一个实施例中，抗IL-13抗体是人源化抗体。在一个实施例中，IL-13抗体在人类中不是抗原且不会造成HAMA反应。抗IL-13抗体分子可用于在活体内调节(例如，抑制)至少一种IL-13相关活性。IL-13抗体可用于治疗或预防IL-13相关病症，或用于改善其至少一种症状。实例性IL-13相关病症包括炎性病症(例如，肺部炎症)、呼吸病(例如，包括过敏性和非过敏性哮喘在内的哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD))、以及涉及气管发炎的病状、嗜酸性细胞增多症、纤维化病症(例如，囊性纤维化、肝纤维化、和肺纤维化)、硬皮病、过度粘液产生；特应性病症(例如，特应性皮炎、荨麻疹、湿疹、过敏性鼻炎、和过敏性肠胃炎)、IL-13相关癌症(例如，白血病、胶质母细胞瘤、或淋巴瘤，例如，何杰金氏淋巴瘤)、胃肠道病症(例如，炎性肠病)、肝病(例如，肝硬化)、和病毒感染。抗体在调配物中的浓度通常在约0.1mg/ml与约250mg/ml之间，例如，约0.5mg/ml与约100mg/ml、约0.5mg/ml与约1.0mg/ml、约0.5mg/ml与约45mg/ml、约1mg/ml与约10mg/ml、约10mg/ml与约40mg/ml、约10mg/ml与约50mg/ml、约50mg/ml与约100mg/ml、约100mg/ml与约200mg/ml、约200mg/ml与约250mg/ml的抗IL-13。在上下文的范围内，"约"是指所列举数值范围下限-20%和所列举数值范围上限+20%。在上下文的范围内，例如，约10mg/ml到约100mg/ml此是指在8mg/ml到120mg/ml之间。在一些情况下，抗体在调配物中的浓度可为(例如)在0.1mg/ml与200mg/ml之间，例如，0.5mg/ml与100mg/ml、0.5mg/ml与1.0mg/ml、0.5mg/ml与45mg/ml、1mg/ml与10mg/ml、10mg/ml与40mg/ml、10mg/ml与50mg/ml、50mg/ml与100mg/ml、100mg/ml与200mg/ml的抗IL-13。所述抗体调配物可用作治疗剂。因此，抗体在调配物中的浓度应足以在一定体积的调配物中提供所治疗的患者耐受且适于投与方法的剂量。在一个非限制实例中，为经皮下供应其中体积上限小(例如，每次注射约1ml到1.2ml)的高剂量，抗体的浓度通常为至少100mg/ml或更高，例如，100mg/ml到500mg/ml、100mg/ml到250mg/ml、或100mg/ml到150mg/ml。所述高浓度可通过(例如)将冻干调配物在适宜体积的稀释剂(例如，注射用无菌水、缓冲盐水)中重构来获得。在一些情况下，重构调配物的浓度在约100mg/ml与500mg/ml之间(例如，100mg/ml、125mg/ml、150mg/ml、175mg/ml、200mg/ml、250mg/ml、275mg/ml、300mg/ml、350mg/ml、375mg/ml、400mg/ml、425mg/ml、450mg/ml、475mg/ml和500mg/ml)。为了经由吸入递送，调配物通常稍经浓縮(例如，在约100mg/ml与500mg/ml之间)以便在有限的气溶胶体积中提供充分剂量用于吸入。在一些情况下，使用低浓度(例如，在约0.05mg/ml与1mg/ml之间)。使所递送剂量适于递送方法的方法已为此项技术习知，例如，喷射式喷雾器或计量气溶胶。可用于抗IL-13抗体调配物的抗体包括(例如)鼠和人源化鼠抗IL-13抗体。抗体可为k轻链抗体。抗体可为天然的或设计成IgG、IgE、IgA、IgM抗体或IL-13-结合片段，如上文所述。在一些情况下，抗体是IgGl、IgG2、或lgG4抗体。用于本发明的抗IL-13抗体的实例阐述于美国专利申请案第11/155、843号、美国专利申请案第11/149、309号、和WO2006/085938中，其内容以引用的方式并入本文中。用于本发明的抗IL-13抗体的非限制实例包括IMA-638(图34)禾卩IMA-026(图35)。在一些实施例中，抗IL-13抗体重链与SEQIDNO:l的序列一致性为约80%、约85%、约卯％、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、或约99%且轻链与SEQIDNO:2的序列一致性为约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、或约99%，且抗体结合IL-13。在一些实施例中，抗IL-13抗体重链与SEQIDNO:3的序列一致性为约80%、约85%、约卯％、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、或约99X且轻链与SEQIDNO:4的序列一致性为约80X、约85%、约卯％、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、或约99%，且抗体结合IL-13。在某些实施例中，抗IL-13抗体以一定亲和力结合IL-13，所述亲和力对应于小于5xl0—7M、lxi(r7M、5xl(T8M、lxi(T8M、5xIf)-9M、1x10-9M、更通常小于5x10"°M、1x10"。M、5xM、1xl(T11M或更好的KD。在蛋白质中引入取代的方法己为此项技术习知。在一个实施例中，IL-13抗体可与IL-13联接，其中动力学在10s到l()SM"s"的范围内，通常104到107]VrV1。在又一实施例中，IL-13结合剂具有在10'2到10'6s"范围内、通常10—2到10—5s"的解离动力学。在一个实施例中，IL-13结合剂结合IL-13(例如人类IL-13),其亲和力和/或动力学类似于单克隆抗体MJ2-7或C65(例如，在其20、10或5倍以内)(参见，美国专利公开案第20060073148号)、或其修饰形式，例如嵌合形式或其人源化形式(例如，本文所述的人源化形式)。IL-13结合剂的亲和力和结合动力学可使用(例如)生物传感器技术(BIACORETM)来测试。餅郝蔣疾，本文所述调配物的pH通常在约pH5.0到约7.0之间，例如约pH5.5到约6.5、约pH5.5至lj约6.0、约pH6.0到约6.5、pH5.5、pH6.0、或pH6.5。通常，使用可使溶液的pH维持在5.5到6.5的缓冲液来制备调配物，例如pKA为约6.0的缓冲液。适宜缓冲液包括(但不限于)组氨酸缓冲液、2-吗啉乙磺酸(MES)、二甲砷酸盐、磷酸盐、乙酸盐、琥珀酸盐、和柠檬酸盐。缓冲液的浓度在约4mM与约60mM之间(例如约5mM到约25mM)，例如组氨酸通常以最高60mM的浓度使用。在一些情况下，组氨酸缓冲液是以约5mM或约10mM的浓度使用。在其它情况下，乙酸盐或琥珀酸盐缓冲液是以约5mM或约10mM的浓度使用。抗IL-13抗体调配物包括冷冻保护剂。冷冻保护剂已为此项技术习知且包括(例如)蔗糖、海藻糖、和甘油。通常使用在生物系统中展示低毒性的冷冻保护剂。冷冻保护剂是以约0.5%至(」15%、约0.5%至1」2%、约2%到5%、约5%到10%、约10%到15%、和约5%(重量/体积)的浓度包括在调配物中。在抗IL-13抗体调配物中可用作缓冲液的组氨酸缓冲液可具有冷冻保护剂性质。在本发明的一些实施例中，组氨酸缓冲液与冷冻保护剂(例如糖，例如蔗糖)联合使用。本发明的调配物可明确排除以任何实质数量使用组氨酸，例如调配物的缓冲液或冷冻保护剂组份均不是组氨酸。调配物的粘度通常为与调配物的投与途径相容的粘度。在一些实施例中，调配物的粘度在1cP禾B2cP之间，或类似于水(约1cP)。在其它实施例中，调配物的粘度在约5cP与约40cP之间。在特定实施例中，调配物的粘度为1cP、2cP、3cP、4cP、5cP、10cP、15cP、20cP、25cP、30cP、35cP、或40cP。表臓飾在某些实施例中，调配物中包括表面活性剂。表面活性剂的实例包括(但不限于)非离子表面活性剂，例如聚山梨醇酯(例如，聚山梨醇酯-20、聚山梨醇酯-40、聚山梨醇酯-60、聚山梨醇酯-65、聚山梨醇酯-80、或聚山梨醇酯-85);泊洛沙姆(poloxamer)(例如，泊洛沙姆188);曲拉通(Triton)TM;十二垸基硫酸钠(SDS);月桂基硫酸钠；辛基葡糖苷钠；月桂基-磺基甜菜碱、肉豆蔻基-磺基甜菜碱、亚油酰基-磺基甜菜碱、硬脂酰基-磺基甜菜碱、月桂基-肌氨酸、肉豆蔻基-肌氨酸、亚油酰基-肌氨酸、硬脂酰基-肌氨酸、亚油酰基-甜菜碱、肉豆蔻基-甜菜碱、十六垸基-甜菜碱、月桂酰胺丙基-甜菜碱、椰油酰胺丙基-甜菜碱、亚油酰胺丙基-甜菜碱、肉豆蔻酰胺丙基-甜菜碱、棕榈酰胺丙基-甜菜碱、异硬脂酰胺丙基-甜菜碱(例如，月桂酰胺丙基)、肉豆蔻酰胺丙基-二甲胺、棕榈酰胺丙基-二甲胺、或异硬脂酰胺丙基-二甲胺；甲基椰油酰基牛磺酸钠、或甲基油酰基牛磺酸钠；和MonaquatTM系列(梦娜工业公司(MonaIndustries),帕特森(Paterson),新泽西(N丄))、聚乙二醇、聚丙二醇、和乙烯与丙二醇的共聚物(例如，普朗尼克类(pluronics),PF68)。所添加表面活性剂的量应使重构蛋白质的积聚降至可接受水平，如使用(例如)HMW物质或LMW物质的SEC-HPLC所分析，并使抗IL-13抗体调配物的冻干物重构之后颗粒的形成减到最低限度。表面活性剂的添加还展示降低抗IL-13抗体冻干调配物的重构时间，且帮助溶液脱气。例如，表面活性剂可以约0.001%到0.5%(例如约0.005%到0.05%、约0.005%到约0.2%、和约0.01%到0.2%)的量存在于调配物中(液体或冻干之前)。贫/丄-/3鄉激膝雄i/19调配物是作为无菌溶液或无菌冻干物储存。还可通过在调配物中包括至少一种抗细菌剂和/或抗真菌剂(例如羟基苯甲酸酯类、氯丁醇、苯酚、抗坏血酸、水杨乙汞(thimerosal)等)来防止调配物中微生物的作用。在一些情况下，冻干物是利用抑菌水(例如，含0.9%苯甲醇的水)重构。对于在调配物中包括防腐剂的考虑因素己作为鉴别与特定调配物和递送方法相容的防腐剂的方法为此项技术习知(例如，参见古普塔(Gupta)等人(2003)，美国药学科学家协会医药科学(AAPSPharm.Sci.)5:第8章，第1-9页)。在一些情况下，调配物等渗。通常，可向调配物中添加此项技术中习知有助于溶液渗透性/张力的任何组份(例如，盐、糖、多元醇、或其组合)。通常通过以等渗浓度使用基本调配物的组份(例如蔗糖)或通过添加额外组份(例如，糖、多元醇(例如甘露醇或山梨醇)、或盐(例如氯化钠))来获得等渗性。在一些情况下，抗IL-13抗体调配物中使用盐以(例如)获得等渗性或增加调配物抗IL-13抗体的完整性。适宜使用的盐讨论于上文中。盐浓度可为0mM到约300m]VL在某些情况下，调配物是利用吐温(例如，吐温⑧20、吐温㊣80)来制备以降低界面降解。吐温浓度可为约0.001%到约0.05%。在一个实例中，吐温80是以0.01%的浓度用于调配物中。在某些其它情况下，调配物是利用精氨酸制备。精氨酸在调配物中的浓度可为约0.01%到约5%。在一个实例中，精氨酸是以2%的浓度用于调配物中。在一些情况下，将吐温和精氨酸都添加于本文所述的IL-13调配物。在其它情况中，调配物可利用一下物质中的至少一种来制备山梨醇、甘氨酸、甲硫氨酸、或氯化钠。若调配物中包括山梨醇，则其可以约1%与约10%之间的浓度添加。在一个实例中，发现山梨醇以5%的浓度存于调配物中。若调配物中包括甘氨酸，则其可以约0.1%到约2%之间的浓度添加。在一个实例中，发现甘氨酸以1%的浓度存于调配物中。若调配物中包括甲硫氨酸，则其可以约5mM与约150mM之间的浓度添加。在一个实例中，甲硫氨酸是以100mM的浓度添加到调配物中。在另一实例中，甲硫氨酸是以70mM的度添加到调配物中。若调配物中包括氯化钠，则其可以约5mM与约100mM之间的浓度添加。在一个实例中，氯化钠是以55mM的浓度添加到调配物中。錄吝方法冷冻在一些情况下，含有抗体的调配物是冷冻储存。因此，希望调配物在包括冷冻-解冻循环在内的所述条件下相对稳定。一种测定调配物适宜性的方法是使试样调配物经受至少两个(例如三个、四个、五个、八个、十个或更多个)冷冻(在例如-2(TC或-S(TC下)与解冻(例如通过在37'C水浴中快速解冻或在2'C-8°0下缓慢解冻)循环，测定冷冻-解冻循环后积聚的LMW物质和/或HMW物质的量并将此量与冷冻-解冻程序之前试样中存在的LMW物质或HMW物质的量相比较。LMW或HMW物质的增加表明稳定性降低。茶f调配物可冻干后储存。因此，针对冻干后调配物蛋白质组份的稳定性测试调配物用于测定调配物的稳定性。此方法类似于上文针对冷冻所阐述的方法，只是试样调配物经冻干而不是冷冻，经重构达到其初始体积，并测试是否存在LMW物质和/或HMW物质。将经冻干试样调配物与未冻干的相应试样调配物相比较。与相应试样相比经冻干试样中LMW或HMW物质的增加表明冻干试样中稳定性降低。下文实例5中还提供了适于测试冻干方案的方法的实例。通常，冻干方案包括将试样装载于冷冻真空干燥箱中，预冷时期，冷冻，真空开始，斜坡变化至初次干燥温度，初次干燥，斜坡变化至二次干燥温度，二次干燥，及将试样用塞子塞住。可选择用于冻干方案的其它参数包括真空(例如，以微米汞柱为单位)和冷凝器温度。适宜的温度斜坡速率在约0.rC/min.到2'C/min.之间，例如0.1°C/minJIJ1.0°C/min.、0.rC/min.至U0.5°C/min.、0.2。C/min.到0.5°C/min.、0.rC/min.、0.2°C/min.、0.3°C/min.、0.4°C/min.、0.5°C/min.、0.6°C/min.、0.7°C/min.、0.8°C/min.、0.9°C/min^n1.0°C/min.。冻干循环的冷冻期间适宜地搁架温度通常为约-55。C到-5i:、-25。C到-5。C、-20。C到-5。C、陽15。C到-5。C、.10。C到-5。C、-l(TC、-ll'C、-12°C、-13°C、-14°C、-15°C、-16°C、-17°C、隱18。C、墨19。C、-20°C、陽21。C、-22°C、-23。C、-2化或-25°C。对于初次干燥和二次干燥而言搁架温度可不同，例如初次干燥可在比二次干燥低的温度下实施。在非限制实例中，初次干燥可在0'C下实施且二次干燥在25X:下实施，在一些情况下，冷冻期间且在真空开始之前使用退火方案。在所述情况下，退火时间必须经选择且温度通常高于组合物的玻璃转化温度。通常，退火时间是约2到15小时、约3到12小时、约2到10小时、约3到5小时、约3到4小时、约2小时、约3小时、约5小时、约8小时、约10小时、约12小时或约15小时。退火温度通常为约-35。C到约-5。C，例如约-25。C到约-8。C、约-20。C到约-10。C、约-25。C、约-20。C、约-15。C、约0。C或约-5。C。在一些情况下，退火温度通常为-35'C到5'C，例如25'C到-8°C、-20。C到-10。C、-25。C、隱20。C、-15°C、0。C或5。C。在一个实例中，本文所述调配物中的抗IL-B抗体展示耐受各种冻干参数，所述参数包括有或没有在玻璃转化温度(Tg')以上的预真空热处理(退火)步骤，初次干燥搁架温度从-25'C到30°C，且二次干燥在25°-3(TC下的持续时间为2小时到9小时。在一个非限制实例中，将10mM的组氨酸、5%的蔗糖的调配物(pH6.0)以50mg/mLIL-13的蛋白质浓度调配在一起并冻干。冻干后，用大约一半的充满体积重构产品从而以100mg/ml递送蛋白质。已证实IL-13抗体在冻干之后可耐受产品极限温度(参见下文实例和图10-12)。在5(TC下储存四周后的稳定性范围与使用各种冷冻干燥循环制得的物质的范围一致(例如，参见图16-20)，其中一些在初次干燥干燥期间产品温度有接近l(TC的差异(例如，图13)。通常，冻干循环可运行10小时到100小时，例如20小时到80小时、30小时到60小时、40小时到60小时、45小时到50小时、50小时到65小时。抗体调配物储存温度范围的非限制实例为约-2(rC到约5(TC(例如)约-15'C到约30°C、约-15。C到约20。C、约5。C到约25。C、约5。C到约2(TC、约5"C到约15'C、约2。C到约12。C、约2。C到约10。C、约2。C到约8。C、约2。C到约6。C、2°C、3°C、4°C、5°C、6°C、7°C、8°C、10°C、15。C或25°C。在某些情况下，尽管给出储存温度，但试样在所述组合物可预计的储存和运送条件下可能暂时出现的温度变化下稳定。在一些情况下，调配物经喷雾干燥且然后储存。喷雾干燥是使用此项技术中已知的方法来实施，且可经修改以使用液体或冷冻喷雾干燥(例如，使用那些例如来自尼洛公司(NiroInc.)(麦迪逊，威斯康星州(Madison，WI))、安珀汤粒子技术(UppertonParticleTechnologies)(诺丁汉，英国(Nottingham,England))、或布奇(Buchi)(布林曼仪器公司，西布雷，纽约(BrinkmanInstrumentsInc.,Westbury,NY))、或美国专利公开案第20030072718号和第20030082276号的方法)。抗体完整性的测定LMW物质和HMW物质的积聚是抗体稳定性的有用量度。调配物中LMW或HMW的积聚均指示作为调配物的一部分储存的蛋白质的不稳定性。尺寸排除色谱连同HPLC可用于测定是否存在LMW和HMW物质。用于所述测量的适当系统己为此项技术习知，例如HPLC系统(沃特斯(Waters)，米尔福德，马萨诸塞州(Milford，MA))。可使用此项技术中习知的其它系统来评价调配物中抗体的完整性，例如SDS-PAGE(用于监测HMW和LMW物质)，抗体活性的生物分析、酶联免疫吸附分析、结合纯化IL-13蛋白质的能力、和阳离子交换-HPLC(CEX-HPLC;用以检测变体和监测表面电荷)。在一个实例中，生物分析是基于细胞的分析，其中在不同浓度经调配抗体的存在下检查IL-13依赖性细胞增殖的抑制来证实生物活性，即，结合IL-13并使其与细胞隔离的能力。制造物件本申请案还提供制造物件，其包括本文所述的调配物且提供调配物的使用说明书。制造物件可包含适用于容纳调配物的容器。适宜容器可为(但不限于)瓶子、小瓶、注射器、试管、喷雾器(例如，超声波或振动筛喷雾器)、静脉内溶液袋、或吸入器(例如，定量吸入器(MDI)或干粉吸入器(DPI))。容器可由任何适宜材料形成，例如玻璃、金属或塑料(例如聚碳酸酯、聚苯乙烯或聚丙烯)。通常，容器的材料是不会从调配物中吸收大量蛋白质且不会与调配物的组份反应的材料。在一些实施例中，容器是带有维斯特(West)4432/501319硅灰色塞子或维斯特4023杜若弗酪(Durafluor)塞子的透明玻璃小瓶。在一些实施例中，容器为注射器。在特定实施例中，调配物包含100mg/ml的抗IL-13抗体(例如，IMA-026、IMA-638)、lOmM的组氨酸、5%的蔗糖、0.01%的吐温-80、40mM的NaCl，其pH为6.0且在预装填注射器中。在某些实施例中，注射器适于与自动注射器装置配合使用。在非限制实例中，喷雾器的实例包括喷射式喷雾器、超声波喷雾器、和振动筛喷雾器。这些类型使用不同的方法来从液体产生气溶胶。通常，可维持这些调配物中蛋白质完整性的任一气溶胶产生装置均适用于递送本文所述的调配物。欲投与给个体的调配物(例如作为医药)必须无菌。此可使用此项技术中习知的方法来实现，例如通过在将液体进行调配或冻干并重构之前或之后通过无菌过滤膜进行过滤。或者，在不破坏结构的情况下，调配物的组份可通过高压杀菌来灭菌，且然后与经过滤器或辐射灭菌的组份组合以制备调配物。治疗方法抗IL-13抗体调配物用于治疗与IL-13的不期望表达或活性相关的病症。所述病症包括炎性病症，例如关节炎、哮喘、炎性肠病、炎性皮肤病、多发性硬化、骨质疏松症、肌腱炎、过敏性病症、由宿主损伤导致的炎症、败血症、类风湿性关节炎、骨关节炎、易激性肠病、溃疡性结肠炎、牛皮癣、全身性红斑性狼疮、和任何其它自身免疫疾病。在所述方法的某些实施例中，IL-13相关病症是过敏性哮喘、非过敏性哮喘、B-细胞慢性淋巴细胞白血病(B-细胞CLL)、何杰金氏病、血吸虫病中的组织纤维化、自身免疫风湿性疾病、炎性肠病症、类风湿性关节炎、涉及气管发炎的病状、嗜酸性细胞增多症、纤维化和过度粘液产生(例如，囊性纤维化和肺纤维化)；特应性病症(例如，过敏性鼻炎)；皮肤的炎性和/或自身免疫病状(例如，特应性皮炎)、胃肠道器官的炎性和/或自身免疫病状(例如，炎性肠病(IBD))、肝的炎性和/或自身免疫病状(例如，肝硬化)；病毒感染；其它器官的硬皮病和纤维化，例如肝纤维化；过敏性结膜炎、湿疹、荨麻疹、食物过敏、慢性阻塞性肺病(COPD)、溃殇性结肠炎、呼吸道合胞病毒感染、葡萄膜炎、硬皮病或骨质疏松症。因此，抗IL-13抗体调配物可用作医药组合物。本发明提供预防和治疗方法，其用于治疗具有患与异常或不需要的IL-13表达或活性相关的病症的危险(或易得所述病症)或者患有所述病症或所述病症的并发症的个体。如本文所用，术语"治疗"是定义为将治疗剂施加或投与给个体、或将治疗剂施加或投与给个体的独立组织或细胞，所述个体患有疾病、具有所述疾病的症状或易患所述疾病，其中目的是治愈、痊愈、减轻、减缓、改变、医治、改善、改进或影响所述疾病、所述疾病的症状或易患所述疾病的倾向。可使用此项技术中习知的方法将抗IL-13抗体调配物投与给需要治疗的个体，所述方法包括经口、非经肠、皮下、肌内、静脉内、关节内、支气管内、腹内、囊内、软骨内、腔内、体腔内、小脑内、脑室内、结肠内、宫颈内、胃内、肝内、心肌内、眼内、骨内、骨盆内、心包内、腹膜内、胸膜内、前列腺内、肺内、直肠内、肾内、视网膜内、脊柱内、滑膜内、胸内、子宫内、膀胱内、病灶内、推注、阴道、直肠、经口腔、经舌下、鼻内、经皮(局部)、或经粘膜投与。对于通过吸入投与来说，可将化合物从含有适宜推进剂(例如二氧化碳等气体)的加压容器或分配器或喷雾器以气溶胶喷雾形式投与。在某些实施例中，调配物是作为持续释放、延长释放、定时释放、控制释放、或连续释放调配物来投与。在一些实施例中，使用储积式调配物将抗体投与给需要其的个体。经口或非经肠组合物可制成剂量单元形式以便于投与并保持剂量一致性。本文所用"剂量单元形式"是指适合作为单位剂量供待治疗个体使用的物理分散单元；每一单元含有经计算以产生期望治疗效果的预定量活性化合物连同所选医药载剂。在吸入方法的情况下(例如定量吸入器)，装置经设计以递送适当量的调配物。调配物的毒性和治疗功效可使用(例如)细胞培养物或实验动物通过此项技术中已知的医药程序来测定，例如，用于测定LDs。(导致群体50%死亡的剂量)禾HEDso(在50%群体中具有治疗效果的剂量)的程序。毒性和治疗效果之间的剂量比即为治疗指数，且其可表示为比率LD5。/ED^。自细胞培养分析和动物研究所获得的数据可用于拟定适用于人类的剂量范围。所述调配物的剂量通常在包括ED5o的循环浓度范围内，同时具有较低毒性或没有毒性。剂量可视所用剂型和所用投与途径在此范围内变化。对于本发明方法中所用的任一调配物来说，都可根据细胞培养分析来初步估测治疗有效剂量。可在动物模型中调配剂量以获得循环血浆浓度范围，其包括IQo(即可对症状达成半数最大抑制的测试化合物的浓度)，如在细胞培养物中所测定。此信息可用于更精确地确定人类中的有用剂量。血浆中的水平可通过(例如)高效液相色谱或特异性结合分析(例如，ELISA)来测量。适宜动物模型已为此项技术习知且包括(但不限于)对抗原攻击展示出功效的非人类灵长类动物、及在抗原攻击后对抗原敏感的绵羊、和豚鼠。调配物通常经递送以便剂量为至少约0.1mg抗IL-13抗体/kg体重(通常约1mg/kg到约10mg/kg)。若抗体是在大脑中起作用，则50mg/kg至l」100mg/kg的剂量可能是合适的。当直接递送至作用位点(例如当通过吸入直接投与给肺组织)时，可减少剂量(与非经肠投与相比)。本文所述的调配物可用于制备用于任一本文所述治疗方法中的药剂。在本发明某些方面，本文所述调配物可经修饰以便作为联合治疗的一部分与其它试剂一起投与。联合治疗是指两种或两种以上的不同治疗化合物组合的任何投与形式，以便当先前投与的治疗化合物在体内仍提供有效作用时投与第二种化合物(例如，所述两种化合物同时在患者体内提供有效作用，其可包括所述两种化合物的协同效应)。例如，不同治疗化合物可在同一调配物投与或在单独调配物中同时或相继投与。因此，接受所述治疗的个体可具有不同治疗化合物的组合(联合)效果。可与IL-13抗体共同投与和/或共同调配的优选的额外治疗剂的实例包括吸入型类固醇；p-激动剂，例如短效或长效P-激动剂；白细胞三烯或白细胞三烯受体的拮抗剂；组合药物，例如ADVAIR;IgE抑制齐l」，例如抗IgE抗体(例如，XOLAIR);磷酸二酯酶抑制剂(例如，PDE4抑制剂)；黄嘌呤；抗胆碱药；肥大细胞稳定剂，例如色甘酸钠(cromolyn);IL-4抑制剂；IL-5抑制剂；嗜酸细胞活化趋化因子/CCR3抑制剂；和抗组胺剂。所述组合可用于治疗哮喘和其它呼吸病。可与IL-13抗体共同投与和/或共同调配的治疗剂的额外实例尤其包括以下一种或多种TNF拮抗剂(例如，TNF受体的可溶片段，例如p55或p75人类TNF受体或其衍生物，例如75kdTNFR-IgG(75kDTNF受体-IgG融合蛋白，ENBREL));TNF酶拮抗剂，例如TNFa转化酶(TACE)抑制剂；毒蕈碱受体拮抗剂；TGF-P拮抗剂；干扰素Y;吡非尼酮(perfenidone);化学治疗剂，例如甲氨蝶呤、来氟米特(leflunomide)、或西罗莫司(sirolimus)(雷帕霉素(rapamycin))或其类似物，例如CCI-779;COX2禾卩cPLA2抑制齐U;NSAID;免疫调节剂；p38抑制剂、TPL-2、Mk-2禾卩NFkB抑制剂。例如，在炎性病状的情况下，本文所述抗IL-13抗体调配物可与一种或多种用于治疗炎性疾病或病状的其它药剂组合投与。这些药剂可与抗IL-13抗体一起进行调配，或者作为单独调配物基本同时或相继投与。在一些情况下，药剂可为表位不同于调配物的抗IL-13抗体的IL-13抗体。用于治疗炎性疾病或病状的其它药剂包括(但不限于)抗炎剂或消炎剂。消炎剂包括(例如)糖皮质激素类，例如可的松(cortisone)、氢化可的松(hydrocortisone)、、泼尼禾公(prednisone)、泼尼松、龙(prednisolone)、氟可龙(fluocortolone)、曲安西龙(triamcinolone)、甲泼尼龙(methylprednisolone)、泼尼立定(prednylidene)、巾白拉米松(paramethasone)、地塞米松(dexamethasone)、倍他米松(betamethasone)、倍氯米松(beclomethasone)、氟泼尼定(fluprednylidene)、脱氧米塞松(desoxymethasone)、肤轻松(fluocinolone)、氟米松(flumethasone)、二氟可龙(diflucortolone)、氯可托龙(clocortolone)、氯倍他索(clobetasol)和氟考丁酯(fluocortinbutylester);免疫抑制剂，例如抗TNF齐l」，例如，依那西普(etanercept)、英夫利昔单抗(infliximab)和IL-1抑制剂；青霉胺(penicillamine);非类固醇类抗炎药(NSAID)，其涵盖抗炎药、镇痛药和退热药，例如水杨酸、青霉胺(celecoxib)、氟苯水杨酸(difunisal)和来自经取代苯基乙酸盐或2-苯基丙酸盐者，例如阿氯芬酸(alclofenac)、异丁芬酸(ibufenac)、布洛芬(ibuprofen)、克林奈克(clindanac)、苯克洛酸(fenclorac)、酮洛芬(ketoprofen)、非诺洛芬(fenoprofen)、吲哚洛芬(ind叩rofen)、芬氯酸(fenclofenac)、双氯芬酸(diclofenac)、氟比洛芬(flurbiprofen)、吡洛芬(pirprofen)、萘普生(naproxen)、苯噁洛芬(benoxaprofen)、卡洛芬(carprofen)和环洛芬(cicloprofen);昔康(oxican)衍生物，例如吡罗昔康(piroxican);邻氨基苯甲酸衍生物，例如甲芬那酸(mefenamicacid)、氟芬那酸(flufenamicacid)、托芬那酸(tolfenamicacid)和甲氯芬那酸(meclofenamicacid)、经苯胺基取代的烟酸衍生物，例如灭酸酯类(fenamates)尼氟灭酸(niflumicacid)、氯尼辛(clonkin)和氟尼辛(flunixin);杂芳基乙酸，其中杂芳基是2-吲哚-3-基或吡咯-2-基，例如U引哚美辛(indomethacin)、奥沙美辛(oxametacin)、吲四唑(intrazole)、阿西美辛(acemetacin)、桂美辛(cinmetacin)、佐美酸(zomepirac)、托美丁(tolmetin)、考皮若可(colpirac)和噻洛芬酸(tiaprofenicacid);舒林酸(sulindac)型茚基乙酸；具有止痛活性的杂芳基乙酸，例如本泽达可(benzadac);保泰松(phenylbutazone);依托度酸(etodolac);25萘丁美酮(nabumetone);和疾病修饰抗风湿药物(disease-modifyingantirheumaticdrug)(DMARD),例如甲氨蝶呤、金盐、羟氯喹(hydroxychloroquine)、柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)、环包素(ciclosporin)、硫唑嘌呤(azathioprine)、和来氟米特。用于治疗炎性疾病或病状的其它治疗剂包括抗氧化剂。抗氧化剂可为天然或合成抗氧化剂。抗氧化剂为(例如)超氧化物歧化酶(SOD)、21-氨基类固醇/氨基色满、维生素C或E等。许多其它抗氧化剂已为所属领域的技术人员习知。本文所述抗IL-13抗体调配物可作为炎性病状治疗方案的一部分，其可与许多不同抗炎剂组合。例如，本文所述抗IL-13抗体调配物可与IL-4抑制剂、IL-5抑制剂、IgE抑制剂、IL-9抑制剂、TNF拮抗剂、嗜酸细胞活化趋化因子/CCR3拮抗剂、NSAID、DMARD、免疫抑制剂、磷酸二酯酶抑制剂、或抗组胺剂中的一种或多种组合投与。在应用的一个实施例中，本文所述抗IL-13抗体调配物可与甲氨蝶呤组合投与。在另一实施例中，本文所述抗IL-13抗体调配物可与TNF-ot抑制剂组合投与。在哮喘的情况下，本文所述的抗IL-13抗体调配物可与NSAID、皮质类固醇、白细胞三烯修饰剂、长效(3-肾上腺素能激动药、茶碱、抗组胺剂、和色甘酸钠中的一种或多种组合投与。在癌症的情况下，本文所述的抗IL-13抗体调配物可与一种或多种抗血管生成因子、化学治疗剂组合投与，或作为放射线疗法的辅助剂。进一步预计，投与本文所述的抗IL-13抗体调配物将作为癌症治疗方案的一部分，所述调配物可与许多不同癌症治疗剂组合。在易激性肠病(IBD)的情况下，本文所述的抗IL-13抗体调配物可与一种或多种抗炎剂一起投与且此外可与改变饮食方案进行组合。实通过下列若干实例进一步阐释本发明。这些实例仅出于例示性目的而提供。不应将其理解为以任何方式限制本发明的范围或内容。实例1:经冻干抗IL-13调配物的稳定性一种储存欲用于(例如)治疗应用的抗体的方法是作为通过冻干制得的干粉末来储存。因此，研究经冻干抗IL-13调配物的长期稳定性。简而言之，通过无菌过滤制得含人源化抗IL-13抗体(50mg/ml)、10mM的组氨酸、5%的蔗糖(重量/体积)的调配物(pH6.0)并将大约3.2ml分配于5ml去热原玻璃管式小瓶中，且然后冻干。将调配物在4。C、25。C或40。C下储存1个月、2个月、3个月、6个月和12个月，以及在4。C和25'C下储存18个月和24个月，然后利用1.3ml无菌水(USP)进行重构以使经重构调配物达约1.6ml，以便调配物是100mg/ml的抗IL-13抗体、20mM的组氨酸、和10%的蔗糖，pH6.0。使用SEC-HPLC分析HMW物质的百分比。冻干和重构之前调配物中HMW物质的百分比在调配物中总蛋白质的1%-1.5%之间且在4°<:和25:(:下储存后所有试样还在约1%-2%之间(图l)。于40'C下储存12个月之后，调配物有约3.5XHMW物质(图l)。因此，于5'C和25。C下储存24个月的试样中HMW物质的水平并无实质增加。还使用基于细胞的分析对经冻干抗IL-13抗体调配物的生物活性进行分析，其中在不同浓度的经调配抗体的存在下检查IL-13依赖性细胞增殖的抑制来证实生物活性，即，结合IL-13并使其与细胞隔离的能力。将分析结果与使用未经储存的不同抗IL-13抗体所得结果相比较。图2绘示来自此一组生物分析的数据。大体上，储存24个月之后任何试样中生物活性的量并无实质变化。因此，如通过生物活性所测定，所述调配物适于将冻干调配物储存至少24个月。这些数据表明本文所述的经冻干抗IL-13调配物适于储存至少24个月。实例2:高浓度液体调配物的稳定性在一些情况下，期望以液体形式储存抗IL-13抗体调配物。因此，研究含相对较高浓度抗IL-13抗体的液体抗IL-13调配物的长期稳定性。简而言之，通过无菌过滤含人源化抗IL-13抗体(100mg/ml)、lOmM的组氨酸、5%的蔗糖(重量/体积)的调配物(pH为6.0)制备所述调配物以储存在去热原玻璃小瓶中。将调配物于2'C-8°C、15°C、或25'C下储存约6周、3个月、6个月、9个月、12个月、18个月和24个月或在4CTC下储存约6周、3个月和6个月，且每次分析是否存在HMW物质、LMW物质、生物活性、和浓度。使用SEC-HPLC分析HMW物质的百分比。储存之前调配物中高分子量物质的百分比为调配物中总蛋白质的2%-3%且在2°。-8°C、15。C和25。C下(图3)储存长达9个月的试样中在约2%-4%之间，且在2°-8°。和15T:下储存长达24个月后在约2%-4%之间。于40。C下储存6个月后，调配物包含小于9X的HMW物质(图3)。因此，在低温条件下储存24个月的试样中HMW物质的水平并无实质增加。还在100mg/ml的抗IL-13抗体调配物中分析抗IL-13抗体调配物中LMW物质的百分比。储存之前调配物中LMW物质的百分比为储存之前调配物中总蛋白质的约1%-2%且在2"-8°C、15'C和25'C下(图4)储存长达9个月储存时间的试样中在约1%-3%之间，且在2。-8。C下储存长达24个月后在1%-3%之间。于4(TC下储存6个月后，调配物包含小于11^的LMW物质(图4)。因此，在低温条件下储存24个月的试样中LMW物质的水平并无实质增加。使用100mg/ml的抗IL-13抗体调配物检验另一稳定性参数，即，结合活性。在这些试验中，在2。C-8°C、15°C、25t:和4(TC下储存1个月、3个月和6个月、及仅在2。C-8。C和25。C下储存9个月之后测定调配物结合活性相对于对照的百分比。分析特定监测抗IL-13对经标记IL-13细胞因子试剂的结合亲和力。调配物的初始结合活性为参考试样的约120%且对于任何试样在6个月的测试时期内实质上没有变化(图5)。经测量，结合活性高达参考的约200%，已知此分析中通常观察到误差，此反映出试样的结合活性随时间基本上无变化，且结合结果没有温度相关倾向。还使用生物分析作为100mg/ml的抗IL-13抗体调配物的稳定性参数。所述分析是如上文实例1中所阐述来实施。试样在2°(:-8'C、15'C和25'C下储存约6周、3个月、6个月、9个月、12个月、18个月或24个月或在40。C下储存约6周、3个月或6个月。数据表示为结合单位/毫克(图6)。储存之前试样为约4.5x107U/mg且培养之后为约4.5-7.5x107U/mg。此反映了在储存期间试样的生物活性基本上无变化。数值的变化性反映了分析中固有的变化性。由于试样中生物活性的量没有降低，所以这些数据为所述调配物储存抗IL-13的适宜性提供进一步支持。还通过UV/Vis分析100mg/ml的抗IL-13抗体调配物在2°C-8°C、15。C和25°C下储存约6周、3个月、6个月、9个月、12个月、18个月或24个月、或在4(TC下储存约6周、3个月或6个月后的浓度。在所有所研究温度下液体调配物的浓度实质上相似(图7)。实例3:低浓度液体调配物的储存为进一步检验本发明调配物和其用于储存抗IL-13抗体的适宜性，测试含相对低浓度抗IL-13的调配物。所述调配物是含0.5mg/ml人源化抗IL13抗体、10mM的组氨酸、5%的蔗糖的液体调配物，pH为6.0。将试样于5'C下储存6个月和12个月之后对其进行测试，且然后测试各种稳定性参数HMW物质、LMW物质、蛋白质浓度、和结合活性。HMW物质和LMW物质是使用上文所阐述的方法进行分析。蛋白质浓度是使用UV-可见光谱通过测量试样在280nm下的光密度并减去在320nm下的散射来分析，并使用蛋白质的摩尔吸光系数来计算。结果汇总于表l中。<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>这些数据表明，实质上任何所分析稳定性参数均无变化，此支持含相对较低浓度抗IL-13抗体的抗IL-13抗体调配物的适宜性。实例4:雾化抗IL-13调配物的适宜性抗IL-13抗体调配物的一个用途是(例如)通过喷雾直接投与给肺系统。为测试调配物喷雾的适宜性，使用市售喷雾器使0.5mg/ml人源化抗IL-13抗体、10mM的组氨酸、5%的蔗糖的调配物(pH6.0)雾化，回收气溶胶，并通过分析降解(HMW物质的形成)测试完整性，使用SEC-HPLC测试回收率、和结合活性。结果汇总于表2中。表2参数(方法)对照(喷雾前)喷雾后%HMW物质0.750.80(SEC-HPLC)X回收(SEC-HPLC)100%99%浓度(uv-可见光谱)20.7mg/ml21.3mg/mlX结合活性(ELBA)189%186%这些数据表明，实质上任何所测试稳定性参数均无变化，此支持抗IL-13抗体调配物作为对喷雾剂型使用的适宜性。实例5:混合和过滤己证实，上述调配物中的抗IL-13抗体耐受混合和过滤，混合和过滤是两个通用制造单元作业。简而言之，将抗IL-13抗体以50mg/mL的蛋白质浓度以相当于制造期间所利用的渐增叶轮速度和时间进行混合。所收集的每一试样相对于开始物质在浓度(如使用UV-可见光谱所分析)、高分子量物质(使用SEC-HPLC进行分析)和生物活性(使用结合分析来分析)方面均无变化。混合研究之后，利用氮加压使抗IL-13抗体通过通用0.22nm无菌过滤器。通常，氮压力低于约30psig。过滤之后，其浓度(使用UV-可见光谱来分析)、HMW物质(使用SEC-HPLC进行分析)和生物活性(使用结合分析来分析)相对于开始物质未展示变化。实例6:冻干和重构在用于抗体的冻干和重构条件方案的一个非限制实例中，将3.2ml以50mg/ml浓度存于调配物lOmM的组氨酸、5X(50mg/ml)蔗糖(pH6.0)中的抗体分配于透明玻璃管式小瓶(带有维斯特(West)4432/501319硅灰色塞子)中并冷冻-干燥。冷冻干燥后，小瓶的干燥内容物如下160mg抗体、3.2x10'5摩尔组氨酸和160mg蔗糖。冷冻干燥所得固体滤饼构成大约0.32ml的体积，此是基于固体的密度(约320mg,密度为约lg/ml)。为使试样重构，将1.3ml水添加到小瓶内容物中。将小瓶的内容物溶于稀释剂体积(1.3ml)中，加上固体本身的体积(0.3mL)总共约1.6ml，且调配物的浓度为约100mg/ml的抗体、约20mM的组氨酸、和约10%的蔗糖，pH6.0。实例7:试样的制备和冻干拔/丄-"贫沐试摔激吝将以约85mg/mL的浓度存于20mM的组氨酸、10%的蔗糖(pH6.0)中的人源化抗IL-13抗体的冷冻试样在37。C水浴中解冻。以10mM的组氨酸、5%的蔗糖(pH6.0)使用6kD-8kD分子量截留谱/Por透析管对125mL等份解冻物质进行透析。利29用10mM的组氨酸、5%的蔗糖(pH6.0)将所得溶液稀释至目标值50mg/mL(用作药物的抗IL-13抗体调配物)。茶嫂嫂在各轮作业中，在高度为63mm的搁架和门前面使用铝箔屏蔽以将冷冻真空干燥箱内的辐射降至最低。在所有实验中，有一个盘完全充满以维持冷冻真空干燥箱上的一致负载。所有蛋白质小瓶的塞子均经高压灭菌并干燥。所有蛋白质试样的小瓶均用去离子水洗涤并去热原。用于填充盘剩余部分的小瓶和塞子未经处理。接种有抗IL-13抗体调配物的小瓶是以无菌方式在生物安全橱中以160mg/小瓶的目标值制得。在每次作业之前使用于稳定性研究的小瓶充满3.2ml实例6所述的新鲜调配物(事先未经冻干的材料)。冻干期间，使额外的小瓶充满与目标冻干循环适宜的适宜缓冲液以维持冷冻真空干燥箱的一致负载。通过在蛋白质阵列内使用热电偶来监测冻干作用。谬縦差示械着雄—卿用于mDSC的所有试样均以经调制模式实施，其中幅值为0.5'C且时期为100秒。对于冻干后粉末来说，将试样以2r/min，加热到15CTC。所有粉末试样均使用氮气吹扫手套箱制备。对于液体试样来说，所有温度斜坡上升均以0.5。C/min.实施且温度与冻干循环中所用的温度相匹配。最后加热斜坡上升以2。C/min.实施以放大玻璃转化作用。液体试样是在试验台上制备。冷茶f灤f微术为实施冷冻干燥显微术，将试样以0.5。C/min冷冻至-40。C，以模拟冻干。抽真空开始后，使温度逐渐增加以观察在升华期间试样的结构随温度的变化。冷冻干燥显微镜不允许进行压力对照，因此试样是在完全真空下干燥。水分藩使用卡尔'费歇尔滴定法(KarlFischertitration)来分析冻干试样中的水分。用3ml甲醇对冻干试样进行重构。实施两次或三次500pL的注射。之后注射1%水标准物用作适宜性检查。艘〃使敝//力架卿FTIR测量呈干粉状态的抗体的二级结构。压制含分散于300mgKBr中的大约1mg经调配干燥的蛋白质小片并扫描200次。收集数据之后，分析涉及蔗糖对照剂的光谱差减、基线校正、平滑、二阶导数和面积标准化。稳定丝分析调配物中冻干抗体的稳定性随储存时间和温度的变化。冻干后于2汇-8"C下储存4周和于50。C下储存2周和4周后分析冻干抗IL-13抗体的试样。冷藏试样是储存在人可进入的冷藏冷冻室中。高温试样是储存在设定为5(TC的雷伯拉恩英派瑞恒温箱(LabLineImperialIncubator)中。在适当时间点时不再储存试样并使其升温或冷却至室温，然后分析。重雌观货層在用1.2ml注射用无菌水重构之前、期间和之后目测检査来自冻干后分析和储存稳定性分析的冻干调配物的小瓶。在重构之前在灯箱中针对黑色和白色背景检查小瓶的块状物颜色、完整性、水分、颗粒和缺陷。目测检査冻干块状物之后，用启盖器去除小瓶的帽和巻边密封。去除塞子并使用适当的移液管将注射用无菌水缓慢分配于小瓶中。利用漩涡运动分配稀释剂以确保块状物完全润湿。一旦稀释剂完全分配，利用标准实验室计时器对重构进行计时并将小瓶重新盖上。当最后的片状固体溶解时完成重构。在两手之间晃动小瓶以促进重构。当冻干块状物处于重构过程时，记录关于正溶解溶液状态的观察结果，例如澄清、起泡和有泡沫。一旦完成重构，记录重构时间并使小瓶在试验台上静置数分钟以使所得溶液能够沉降并使重构期间所形成的大部分气泡散逸。然后在灯箱中针对黑色和白色背景检查重构溶液的颜色、透明度和颗粒。庸资/^#/#餘色谱f^C-7ff丄Q将2微升纯净抗IL-13抗体调配物试样注入带有保护柱的G3000swxl柱上(陶色哈斯(TosoHaas)部件编号为08541和08543)。流动相是添加有250mM的氯化钠的磷酸盐缓冲盐水(PBS)。流速为0.75ml/min.且运行时间为30分钟。紫外吸光度是在280nm的波长下监测。使用沃特因帕沃(WatersEmpower)TM软件对色谱图进行积分以将主抗IL-13抗体峰与高分子量和低分子量物质分开。舒浓度,定游鮮^週;^瓶W分别通过将10pi试样添加到19卯pi和3990|il由10mM的组氨酸和5%的蔗糖形成的混合物(pH6.0)中将抗体浓度为100mg/ml的调配物试样稀释至大约0.5mg/ml和0.25mg/ml。将200微升的所得溶液连同缓冲液空白放置于96孔微量滴定板中的各孔中。在斯佩克特麦克斯(Spectramax)⑥Plus板读数器中读取板在280nm和320nm波长下的紫外吸光度。280nm下的吸光度减去320下的吸光度并除以消光系数(1.405mL/mg-cm)乘路径长度(1cm)来测定每一孔中溶液的蛋白质浓度。利用适当的稀释倍数，并测定平均蛋白质浓度。^7_^敦浙游/-^€欲^度,谱AW将200微升欲分析的每一抗IL-13抗体试样等份添加于96孔微量滴定板的各孔中。缓冲液空白作为对照。在斯佩克特麦克斯普拉斯(SpectramaxPlus)板中读取板在420nm波长处的可见吸光度。冶众学^<^)潜会分折利用大肠杆菌(E.coli)Flag抗IL-13抗体结合分析格式(波沃斯(BioVeris),盖瑟斯堡，马里兰(Gaithersburg,MD))对试样进行结合分析。分析是对等份添加于96孔板格式上的试样实施。拔/丄-/3拔沐f激分界使用TF-1细胞增殖生物分析来测试试样的生物活性。IL-13抗体阻断在活体内IL-13细胞因子至细胞表面受体的结合，此阻止与过敏性疾病和哮喘的发病机制有关的具有受体的细胞活化。此分析中所用活体外生物分析模型是由细胞系(人类TF1红白血病细胞系；ATCCCRL-2003)构成，所述细胞系表达IL-13受体且在IL-13细胞因子的存在下增殖。使用4-参数逻辑斯谛方程(logisticequation)来拟合IL-13抗体对TF1细胞的IL-13反应的抑制作用。生物活性(相对功效)是通过将IL-13抗体测试试样的抑制曲线与用作分析标准物的参考物质的抑制曲线相比较来测定。利用一系列连续步骤(下文所述)来开发冻干循环。游,产/^蕴度滞抗IL-13抗体的临界产品温度是通过两种正交方法(即，调制式差示扫描量热法(mDSC)和冷冻干燥显微术)来鉴别。此两种方法用于鉴别冷冻产品的玻璃转化温度(mDSC)和所得對塌温度(冷冻干燥显微术)。在初次干燥期间将产品维持在此温度下的冻干循环将获得完整块状物结构。假设最低适宜温度是-25'C，且因此当开发调配物和抗体冻干的方法时此温度通常包括在经设计用以测试条件和调配物的程序中，如本文所述。冻f翁翠教/:f根据来自上文所述研究的结果，实施三个不同的冻干循环以检验在开发适宜冻干程序中三个所关注参数，所述冻干程序用于制备适于储存或其它程序的冻干调配物。所检验的第一参数是对照循环，其重复先前稳定性研究的循环。所有此前开发的稳定性循环均利用此循环，因此其作为此分析的起点。第二参数是退火影响。利用以上对照循环冻干的抗IL-13抗体调配物的重构时间相当长，例如约100sec.到500sec(图16)。包括高于冷冻溶液的玻璃转化温度以上的退火作为冷冻热处理期间的额外步骤用以增加抽真空开始之前的冰晶尺寸。此增加的冰晶尺寸致使在冻干结束时干燥块状物的孔尺寸增加。较大的孔可促使水渗到冻干块状物中并改良重构。第三个测试参数是攻击性循环。使初次干燥温度增加明显高于对照循环设定点可明显增加初次干燥期间的抗IL-13抗体调配物产品温度。此冻干循环用于评价在冻干期间抗IL-13抗体调配物对产品温度的敏感性，且可用于在实行正式冻干耐受性研究之前在早期临床试验期间评价制造偏差。茶于脾鮮仿针对抗IL-13抗体调配物所选冻干循环的评估分为两个方面基于冻干后所实施测试的直接比较，和在加速条件下培养之后所造成的潜在较长期影响。郝产/^溢度，抗IL-13抗体调配物产品含有接近50%的蛋白质。因此，预计蛋白质控制冷冻和冻干状态的物理性质。冻干之前，利用次周围环境调制式差示扫描量热法(mDSC)探求调配物冷冻浓縮无定形相的玻璃转化温度。在此试验中，抗IL-13抗体在5X的蔗糖、的浓度为50mg/ml。在这些条件下，经鉴别最低转化温度为-ll'C(图8)。临界温度是通过分析冷冻干燥显微术温度推移(图9A-9F)来证实。在这些试验中，通过从-25。C加热到-15'C而失去结构并通过冷却至-18'C再次获得结构。通过从-10'C加热到-4"C的熔融起始点再次失去结构。所有变化均可逆，如由当试样冷却至-16'C时所观察到的相当结构所指示。因此，在约-15'C下观察到可逆转化，且另一转化在-l(TC与-6'C之间。使温度降至低于-16"C获得与初始结构相当的干燥结构。根据此信息，选择-15"C的产品温作为临界温度以在冻干期间维持低于此温度。此方法阐释用于选择冻干的临界温度的方法。连续执行三个冻干循环。循环轨迹展示于图10-12中。所有循环在初次和二次干燥期间均维持100mT的室压力。对于所有斜坡上升斜坡速率均为0.5'C/min.，除了在图11和12中初次与二次干燥之间这些循环的速率为0.2°C/min.)。可变参数汇总于表3中。表3.冻干参数白勺比较(最后一个热电偶达到搁架温度的初次干燥时间).步骤攻击性对照退火退火--8小时1°干燥12小时21小时21小时2°干燥3小时4小时4小时茶于蘇鮮汰.茶f后在初次干燥期间三个循环(对照、攻击性和退火)中每一个的产品(抗IL-13抗体)温度范围展示于图13中。退火产品与对照产品的热电偶相似，而攻击性循环的高搁架温度导致在初次干燥期间增加接近io°c。冻干后，针对来自三个冻干循环中每一个的抗IL-13抗体调配物的小瓶测试固体和重构液体二者的生物化学完整性。固态是使用以下方法测量mDSC(测量玻璃转化温度)、BET表面积测量、卡尔'费歇尔水分滴定法、傅里叶变换红外光谱(测量蛋白质二级结构)、和块状物外观。通过以下评估重构液体重构时间、视觉外观、用于测定蛋白质浓度的280nm下的紫外吸光度、用于测定光散射的420nm下的可见光吸光度、用于高分子量定量的SEC-HPLC、用于测定表面电荷不均匀性和IGEN结合的CEX-HPLC、和用于测定生物活性的TF-1生物分析。所有三个循环均产生白色固体块，其中不存在包括颗粒或水分在内的明显缺陷。对照循环的mDSC温度记录图展示于图14中。表5汇总了每一循环初次热转化的结果。在53'C下的转化量值不算大，但在其它两个冻干循环中仍可检测到。当在5(TC下加速储存时，此转化看起来并不影响蛋白质的稳定性。比较冻干后调配物的二级结构显示，在三个试样之间蛋白质二级结构相当(表4，图15)。在图15中，其展示在试样抗体的酰胺I区中粉末傅里叶变换红外光谱(FTIR)的二阶导数，每次扫描的积分面积标准化成1。表4中包括的信息表示在P-折叠带33(卩-sheetband)(1624-1657cr^)中总面积的分数作为试样间比较的基础。当比较呈液态的调配物与呈干燥状态的调配物的二级结构时，相关(3-折叠区域中的差异很明显(液体的0.37对冻干粉末的0.25-0.27)。此不同很可能是由于不存在呈冻干状态的水和蛋白质构型的相应变化。表4.冻干后所测量的玻璃转化温度(Tg)、BET表面积、残余水分和二级结构循环Tg(。C)BET表面积(m2/g)水分卩-折叠带的深度攻击性860.480.45%0.255对照840.640.73%0.249退火850.590.59%0.270将来自每一循环的一个小瓶用1.2ml注射用无菌水重构。记录每一循环重构期间的外观、重构时间、和重构后60分钟的外观并汇总于表6中。所有三个循环均需要物理摇动(在两手之间晃动)以使块状物溶解。攻击性循环(循环1)和对照循环(循环2)的块状物首先破碎并在适于生产的时间范围内溶解重构时间分别为140sec.和73sec。重构时间的大部分花费在溶解较小较难溶的块状物碎块上。退火循环试样(循环3)重构花费的时间最长。此结果反驳了退火步骤可能由于形成较多孔的块状物而获得较短重构时间的理论。重构后块状物保持完整并在373sec内缓慢溶解，此类似于溶解LifesaverTM。所有三个循环均在重构期间产生不同量的泡沫。对照循环产生的泡沫量最多，之后是退火循环，然后是攻击性循环，如通过在420nm下的UV/Vis的溶液散射所看出(表5)。重构后，使试样沉降60分钟。在此期间，大部分泡沫散逸且当使用灯箱针对黑色和白色背景进行检查时所有三种溶液具有相似外观。所有三个循环具有浅黄色且稍微发乳白色，其中退火试样稍更多的发乳白色。所有三个试样均使用本文所述的分析来分析生物化学完整性。这些数据表明，重构之后抗IL-13抗体调配物的完整性随冻干循环变化无明显差异。如通过测量抗体在调配物中的浓度所表明，所有三个循环所回收蛋白质的量基本上相等。调配物中高分子量化合物的量(如通过尺寸排除色谱所测量)和表面电荷不均匀性的量(如通过阳离子交换色谱所测量)对于所有三个循环来说基本上相同。没有鉴别出分子的功能性(如通过IGEN结合分析和TF-1生物分析所测量)随冻干循环而变化。表5.重构后的数据1.2-mL重构(100mg/mL目标值，计及块状物)分析循环1(攻击性)循环2(对照)循环3(对照，采取8hr退火)重构期间的外观相当易起泡沫，快速散逸大片块状物难以重构剧烈摇晃以进入溶液极易起泡沫，散逸较不快.大片块状物难以重构剧烈摇晃以进入溶液极易起泡沫，较大气泡散逸慢得多。极缓慢重构期间块状物维持其形状。剧烈摇晃以进入溶液重构之后的外观(60分钟)稍微发乳白色，带浅黄色。仍留有气泡。显然更具乳白色，带浅黄色。仍留有气泡。稍微发乳白色，带浅黄色。仍留有气泡。<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>稳定丝尽管所研究冻干循环并未显示对本文所述调配物中抗IL-13抗体的完整性具有直接冻干后影响，但评估储存稳定性是否随冻干循环而变化很重要。为对此进行测试，如以上章节"稳定性"中所概述执行短期加速稳定性研究。监测试样的重构时间、通过UV/Vis在280nm下监测蛋白质浓度的改变、通过UV/Vis在420nm下监测溶液光散射、通过SEC-HPLC监测高分子量聚集物的变化、和通过IGEN结合分析监测结合活性的变化。图16经绘制以展示重构时间随储存时间和储存温度的变化。尽管重构时间的绝对数存在可变性，但除了在5。C下储存的攻击性循环和退火循环以外，此趋势类似于在冻干后分析中所观察到的趋势。对照循环试样重构最快，之后是攻击性循环试样。退火循环试样重构最慢。于5'C下储存的攻击性和退火试样的时间点变化和偏离冻干后趋势可能是由于一个或多个控制欠佳的变量所致。这些包括重构期间块状物润湿的速率、当将注射用水分配于小瓶中时多少和哪部分块状物被润湿、和在重构期间搅动小瓶造成的攻击性程度。所有这些变量均是主观的且取决于操作人员，且可能影响重构时间和光散射。在储存期间(零到4周)或随着温度变化(5"C和5(TC)，图17中所展示的蛋白质浓度在三个所测试循环之间并无明显改变。从初始时间点到2周时浓度的增加可能是由于在时间点之间重构体积的测量精度的不同。在储存期间或随着温度变化，图18中所展示的溶液散光在三个循环之间并无明显改变。对照循环开始时间点处的结果升高是由于试样处理而造成额外气泡夹带，而不是由于循环不同。还分析了储存期间试样中所存在HMW物质的百分比。分析是使用SEC-HPLC来实施。图19中展示的数据表明，储存期间三个不同的冻干循环之间高分子量聚集物的百分比并无明显改变。还使用板分析在96孔格式中分析试样的结合(IGEN)。图20展示，在4周的时期内在2°C-8'C或5(TC下调配物中抗IL-13抗体的结合在冻干循环期间并无明显变化。这些数据表明，调配物中的抗IL-13抗体在所研究的三个冻干循环期间均具有相当的稳定性范围。退火步骤的添加看起来使重构变差，而非对其进行改进。攻击性循环由于在初次干燥期间观察到产品温度增加接近1(TC而将起到耐受性评估的作用。潜论已证实，调配物中的抗IL-13抗体在冻干期间可耐受产品极限温度。在5(TC下储存4周的稳定性范围大约与初次干燥期间产品温度相差近l(TC的物质相同。实例8:IL-13抗体调配物为了筛选用于IL-13抗体液体调配物的可能赋形剂，使用0.5ml的100mg/mlIMA-638抗体在带有维斯特4432/50塞子的13mm维斯特玻璃小瓶中或BDHypak预装填注射器中在4(TC的储存温度下储存6周实施短期加速稳定性研究。然后通过使用在280nm下的吸光度和SEC-HPLC测量浓度来测试抗体的稳定性。所测试调配物包括pH从5.0变化至5.5变化至6.0;不同缓冲液，例如组氨酸、琥珀酸钠和乙酸钠；不同蔗糖浓度(0%、2.5%、5.0%和10%);和其它添加剂，例如山梨醇、甘氨酸、精氨酸、和甲硫氨酸。下表6提供此筛选中所测试的调配物。表6.液体调配物编号调配物1，10mM的组氨酸、0%的蔗糖，pH6.02.lOmM的组氨酸、2.5%的蔗糖，pH6.03.lOmM的组氨酸、5%的蔗糖，pH6.04.10mM的组氨酸、10%的蔗糖，pH6.05.10mM的组氨酸、0%的蔗糖，pH5.56.10mM的组氨酸、2.5%的蔗糖，pH5.57.lOmM的组氨酸、5%的蔗糖，pH5.58.10mM的组氨酸、10%的蔗糖，pH5.59.10mM的组氨酸、5%的山梨醇，pH6.010.10mM的组氨酸、1%的甘氨酸，pH6.036<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>于4(TC下储存6周后的％回收是通过UV/Vis测定抗体浓度来评估且展示于图21中。在各调配物之间回收率实质上相似，但调配物4和8的回收率最高。于4(TC下储存6周后高分子量物质的％增加展示于图22中。预装填注射器的高分子量聚集物比小瓶少(参见图22，调配物4)。调配物6、8、14和15展示高分子量物质的增加最少(在0.5%与1.25%之间)。于4(TC下储存6周后低分子量物质的^增加展示于图23中。与HMW相反，预装填注射器的LMW物质的增加通常比玻璃小瓶少。调配物1-13的XLMW变化为约3%-4%。总之，大多数调配物显示可接受的稳定性范围，此证明最适宜pH为5-6.5，且允许包括不同适宜赋形剂，这是因为不会有赋形剂对蛋白质的稳定性有害。实例9:评估调配物中是否需要吐温为了在界面降解情形下阐述来自实例8的首选候选调配物中是否需要吐温，使用表7中所列出的8个首选候选物实施振荡研究和冷冻-解冻研究。表7.首选候选物<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>振荡研究是通过使用在玻璃小瓶中的0.25ml的100mg/mlIMA-638液体调配物并于室温下在凝胶振荡器上将玻璃小瓶以大约200rpm振荡24小时来实施。将经振荡试样的浓度与未经振荡试样(对照)的浓度相比较。不同抗体调配物振荡后的IMA-638浓度展示于图24中。各调配物之间的浓度实质上相似。图25提供IMA-638调配物振荡之后的^HMW物质。各调配物之中的HMW物质在约1.2%到约1.5%之间的范围内。冷冻-解冻研究是通过使用在聚丙烯试管中的0.25m的100mg/mlIMA-638液体调配物来实施，其中冷冻循环是在-80'C下实施且解冻循环是在37。C下实施。冷冻-解冻循环实施1次(FT1)、3次(FT3)或5次(FT5)。各冷冻-解冻循环之后试样的浓度与未经受冷冻-解冻循环的对照试样浓度的比较展示于图26中。也测定了冷冻-解冻循环之后的XHMW物质并展示于图27中。冷冻-解冻之后各调配物中的XHMW物质在约1.2%到约1.5%之间的范围内。吐温(Tween)的存在未展示对保护不受这些条件下的剪切敏感性有明确影响。实例10:预装填注射器中的液体IL-13抗体调配物的评估下表8中所列示的100mg/mlIMA-638抗体调配物的稳定性是通过测定在4°C、25'C和4(TC下在7个月内XHMW物质来评估，所述调配物包装成在带有维斯特4432/50塞子的BDHypakTM预装填注射器中的1ml调配物。这些研究的结果展示于图28、29和30中。表8.HypakTM预装填注射器调配物<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>在4。C下从t:O个月到t=7个月有介于0.70%与0.90%之间的11^1\^物质。在25'C下，有介于约0.75X与约2.00X之间的HMW物质，其中聚集物随时间流失而增加。在40。C下，对于调配物l-3和5所有调配物中的聚集物随时间流失在7个月时增加到4.5%到6.5%之间。在调配物4中观察到聚集物的增加最少(在7个月时约3%)。将精氨酸和吐温添加到由10mM的组氨酸和5X的蔗糖构成的调配物中看起来改良在所有所研究温度下在预装填注射器中的IL-13抗体的稳定性。因此，这些赋形剂中的一种或两种可为抗IL-13调配物提供额外稳定性益处。实例11:精氨酸对预装填注射器中的IMA-638液体调配物的影响添加低浓度精氨酸(0.1%-2%)对调配于10mM的组氨酸、5%的蔗糖和0.01%的吐温80中的100mg/mlIMA-638抗体调配物的稳定性的影响是通过将带有维斯特W4023杜若弗酪(Durafluor)塞子的预装填1mlBDHypakSCF在40。C下储存4周、8周、12周和28周之后HMW物质的X变化来研究。此研究的结果展示于图31中。数据表明，添加精氨酸使随时间流失所形成的HMW聚集的量降低。实例12:来自PARILCPlus喷雾器的IMA-638气溶胶的表征本发明的IL-13抗体调配物可通过包括气溶胶在内的各种方式投与给个体。气溶胶是液体或固体粒子于空气中的悬浮液。在本发明的一些实施例中，IL-13抗体调配物用于肺递送。用于肺递送的药物粒子的特征通常在于空气动力学直径而不是几何直径。空气动力学直径是单位密度(lg/ml)球体的直径，所述球体具有与所讨论粒子相同的重力沉降速度。空气动力学直径考虑了反影响粒子在空气中性质的物理性质(例如密度和形状)。粒子沉降速度与空气动力学直径成比例。气载粒子质量的分布相对于空气动力学直径的中值称为质量中值空气动力学直径(MMAD)。几何标准偏差(GSD)是关于MMAD散布的量度。最后，微粒分数(FPF)是低于特定空气动力学直径(小于4.7nm)的粒子的分数。MMAD、GSD和FPF均通过安德森阶式撞击取样器(AndersonCascadeImpactor)(ACI)来测量。ACI测量由喷雾器、定量吸入器、干粉吸入器、环境等所产生的液体/粒子的尺寸分布。在此试验中，测定从PARILCPlus喷雾器中由50mg/ml和0.5mg/mlIMA-638调配物(10mM的组氨酸、5%的蔗糖，pH6.0)所产生气溶胶的MMAD、GSD和FPF。表9提供此研究的结果。表9<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>所评价IMA-638调配物提供完全适用于通过喷雾来肺递送抗IL-13抗体的气溶胶特性(包括粒径和蛋白质完整性)。实例13:经冻干IL-13抗体IMA-026的稳定性研究经冻干抗IL-13抗体调配物的长期稳定性。简而言之，通过无菌过滤制备含抗IL-13抗体IMA-026(50mg/ml)、10mM的组氨酸、5%的蔗糖(重量/体积)的调配物(pH6.0)并将大约3.2ml分配于带有维斯特4432/501319硅灰色塞子的5ml去热原玻璃管式小瓶中，且然后冻干。将调配物在4。C、25。C或40。C下储存1个月、2个月、3个月、6个月和12个月，然后使用1.3ml无菌水(USP)将冻干物重构以使重构调配物达到约1.6ml，以便调配物有100mg/ml的抗IL-13抗体、20mM的组氨酸和10%的蔗糖，pH6.0。使用SEC-HPLC分析HMW物质的百分比。冻干和重构之前调配物中HMW物质的百分比为调配物中总蛋白质的约1%且在4'C和25'C下储存的所有试样中仍为约1%(图32)。于40'C下储存12个月之后，调配物有约3.0X的HMW物质(图32)。因此，在5"C和25匸下储存12个月的试样中HWM物质的水平并无实质增加。还使用基于细胞的分析对经冻干抗IL-13抗体调配物的生物活性进行分析，其中在不同浓度的经调配抗体的存在下检查IL-13依赖性细胞增殖的抑制来证实生物活性，即，结合IL-13并使其与细胞隔离的能力。将分析结果与使用未经储存的抗IL-13抗体所得结果相比较。图33绘示来自此一组生物分析的数据。大体上，储存12个月之后任何试样中生物活性的量并无实质变化。因此，如通过生物活性所测定，所述调配物适于将冻干调配物储存至少12个月。这些数据表明，本文所述的经冻干抗IL-13调配物适于储存至少12个月。实例14:经冻干IL-13抗体IMA-026的稳定性此试验是如实例1中所述来试实施，只是所用抗体是IMA-026。所用IMA-026调配物是50mg/ml的IMA-026、10mM的组氨酸、5%的蔗糖、0.01%的吐温80,pH6.0。结果实质上类似于实例1中所获得的结果。因此，经冻干IMA-026与经冻干IMA-638—样是适宜调配物。实例15:IMA-026在有和没有吐温的情况下的雾化在此试验中，研究IMA-026的雾化对XHMW、％回收和生物活性的影响。来自此试验的数据展示于下表10中。表IO%HMW%回收*生物活性(U/mg)喷雾前0.13100.06.40E+07喷雾-无吐温0.1376.07.30E+07喷雾-有吐温0.1481.36.08E+07*=通过SEC-HP1X如从表10中可看出，喷雾前和喷雾后，在有或没有吐温的情况下IMA-026的性质实质上相似。因此，IMA-026适宜用作气溶胶调配物。其它实施例应了解，尽管己结合本发明的详细说明阐述本发明，但以上说明书意欲阐释而非限制本发明的范围，本发明的范围是由随附权利要求书的范围来界定。其它方面、优点、和修改皆在以上权利要求书的范围内。40权利要求1、一种抗IL-13抗体调配物，其包含(a)抗IL-13抗体；(b)冷冻保护剂；和(c)缓冲液，其中所述调配物的pH为约5.5到约6.5。2、如权利要求1所述的调配物，其中所述调配物是液体调配物、冻干调配物、可重构成液体的冻干调配物、或气溶胶调配物。3、如权利要求1所述的调配物，其中所述抗IL-13抗体在所述调配物中的浓度为约0.5mg/ml到约250mg/ml、约0.5mg/ml到约45mg/ml、约0.5mg/ml到约100mg/ml、约100mg/ml到约200mg/ml、或约50mg/ml到约250mg/ml。4、如权利要求1所述的调配物，其中所述抗IL-13抗体是人源化抗体。5、如权利要求4所述的调配物，其中所述抗体是K轻链构建抗体。6、如权利要求4所述的调配物，其中所述抗体选自由IgGl抗体、和lgG2抗体和lgG4抗体组成的群组。7、如权利要求1所述的调配物，其中所述抗IL-13抗体是单克隆抗体。8、如权利要求1所述的调配物，其中所述抗IL-13抗体是IMA-638或IMA-026。9、如权利要求l所述的调配物，其中所述冷冻保护剂是约2.5%到约10%(重量/体积)的蔗糖或海藻糖。10、如权利要求1所述的调配物，其中所述缓冲液是约4mM到约60mM组氨酸缓冲液、约5mM到约25mM琥珀酸盐缓冲液、或约5mM到25mM乙酸盐缓冲液。11、如权利要求1所述的调配物，其中所述调配物进一步包含浓度为约0%到约0.2%的表面活性剂。12、如权利要求4所述的调配物，其中所述表面活性剂选自由聚山梨醇酯-20、聚山梨醇酯-40、聚山梨醇酯-60、聚山梨醇酯-65、聚山梨醇酯-80、聚山梨醇酯-85、和其组合组成的群组。13、如权利要求1所述的调配物，其中所述调配物进一步包含约0.01%到约5%的精氨酸。14、如权利要求1所述的调配物，其中所述调配物进一步包含约0.001%到约0.05X的吐温(Tween)。15、如权利要求1所述的调配物，其中所述调配物进一步包含以下物质中的至少一种约1%到约10%的山梨醇、约0.1%到约2%的甘氨酸、约5mM到约150mM的甲硫氨酸、和约5mM到约100mM的氯化钠。16、如权利要求1所述的调配物，其中所述调配物进一步包含第二抗体或其抗原结合片段，其中所述第二抗体选自由以下组成的群组具有不同于所述调配物的所述IL-13抗体的表位特异性的抗IL-13抗体、抗IgE抗体、抗C5抗体、抗IL-4抗体、抗TNF-a抗体和抗IL-9抗体。17、如权利要求1所述的调配物，其中所述调配物进一步包含用于治疗炎性病症的第二治疗或药理活性剂，所述活性剂选自由抗组胺剂、抗炎剂、长效支气管扩张剂(LABA)、吸入性皮质类固醇(ICS)和白细胞三烯抑制剂组成的群组。18、如权利要求1所述的调配物，其中(a)所述抗体是人源化鼠抗IL-13抗体；(b)所述冷冻保护剂是约0.02%到约10%(重量/体积)的蔗糖或海藻糖；且(c)所述缓冲液是约4mM到约60mM的组氨酸缓冲液，pH6.0。19、如权利要求18所述的调配物，其中所述调配物进一步包含约0.01%到约5%的精氨酸。20、如权利要求18所述的调配物，其中所述调配物进一步包含约0.001%到约0.05%的吐温。21、如权利要求18所述的调配物，其中所述调配物进一步包含以下物质中的至少一种约1%到约10%的山梨醇、约0.1%到约2%的甘氨酸、约5mM到约150mM的甲硫氨酸、和约5mM到约100mM的氯化钠。22、如权利要求18所述的调配物，其进一步包含大于0%且至多约0.2%的聚山梨醇酯80。23、如权利要求1所述的调配物，其中(a)所述抗体是IMA-638或IMA-026;(b)所述冷冻保护剂是约0.02%到约10%(重量/体积)的蔗糖或海藻糖；且(c)所述缓冲液是10mM的琥珀酸盐缓冲液，pH6.0。24、如权利要求1所述的调配物，其中(a)所述抗体是IMA-638或IMA-026;(b)所述冷冻保护剂是约0.02%到约10%(重量/体积)的蔗糖或海藻糖；且(c)所述缓冲液是10mM的乙酸盐缓冲液，pH6.0。25、一种抗IL-13抗体的气溶胶调配物，其包含(a)抗IL-13抗体；(b)约5%到约10%(重量/体积)的蔗糖或海藻糖；和(c)pH为约5.5到6.5的缓冲液。26、如权利要求1所述的调配物，其中所述调配物进一步包含约0.01%到约5%的精氨酸。27、如权利要求1所述的调配物，其中所述调配物进一步包含约0.001%到约0.05%的吐温。28、如权利要求1所述的调配物，其中所述调配物进一步包含以下物质中的至少一种约1%到约10%的山梨醇、约0.1%到约2%的甘氨酸、约5mM到约150mM的甲硫氨酸、和约5mM到约100mM的氯化钠。29、如权利要求25所述的气溶胶调配物，其进一步包含用于治疗哮喘或慢性阻塞性肺病的治疗剂。30、一种抗IL-13抗体的冻干调配物，其包含(a)抗IL-13抗体；(b)约5%到约10%(重量/体积)的蔗糖或海藻糖；和(c)pH为约5.5到6.5的缓冲液。31、如权利要求1所述的调配物，其中在-80。C下至少18个月后、在-80'C下至少24个月后、在-20'C下至少18个月后、在-20。C下至少24个月后、在2'C到8X:下至少18个月后、在2'C到8'C下至少24个月后、在25'C下至少18个月后、或在25'C下至少24个月后，高分子量(HMW)物质和低分子量(LMW)物质相比于所述初始调配物的%增加小于5%。32、如权利要求31所述的调配物，其中HMW和LMW物质使用尺寸排除-高效液相色谱(SEC-HPLC)来分析。33、如权利要求1所述的调配物，其中所述IL-13抗体在2"C到8'C下储存至少18个月、或在2。C到8。C下储存至少24个月之后，至少90%的所述抗体是单体抗体。34、如权利要求33所述的调配物，其中所述抗体的单体性质通过结合分析、表面电荷分析、生物分析、或HMW物质与LMW物质的比例来测定。35、一种用于治疗IL-13相关病症的医药组合物，所述医药组合物包含如权利要求1所述的抗IL-13抗体调配物。36、如权利要求35所述的医药组合物，其中所述组合物进一步包含约0.01%到约5%的精氨酸。37、如权利要求35所述的医药组合物，其中所述组合物进一步包含约0.001%到约0.05%的吐温。38、如权利要求35所述的医药组合物，其中所述组合物进一步包含以下物质中的至少一种约1%到约10%的山梨醇、约0.1%到约2%的甘氨酸、约5mM到约150mM的甲硫氨酸、约5mM到约100mM的氯化钠、和大于0%且至多约0.2%的表面活性剂。39、如权利要求35所述的医药组合物，其中所述组合物包含人源化IL-13抗体。40、一种医药组合物的制品，所述组合物包含含以下物质的抗体调配物(a)抗IL-13抗体；(b)冷冻保护剂；和(c)缓冲液，其中所述调配物的pH为约5.5到6.5。41、一种治疗IL-13相关病症的方法，所述方法包含投与医药有效量的抗体调配物，所述调配物包含(a)抗IL-13抗体；(b)冷冻保护剂；和(c)缓冲液，其中所述调配物的pH为约5.5到6.5。42、如权利要求41所述的方法，其中所述IL-13相关病症选自由以下组成的群组过敏性哮喘、非过敏性哮喘、过敏性哮喘和非过敏性哮喘的组合、运动诱发哮喘、药物诱发哮喘、职业性哮喘、晚期哮喘、慢性阻塞性肺病、关节炎、炎性肠病、炎性皮肤病、多发性硬化、骨质疏松症、肌腱炎、过敏性病症、由宿主损伤导致的炎症、败血症、类风湿性关节炎、骨关节炎、易激性肠病、溃疡性结肠炎、牛皮癣、全身性红斑性狼疮、自身免疫疾病、B-细胞慢性淋巴细胞白血病(B-细胞CLL)、何杰金氏病(Hodgkin，sdisease)、和血吸虫病中的组织纤维化。43、如权利要求41所述的方法，其中所述抗体调配物通过选自由以下组成的群组的方法来投与经口、经鼻、储积式、非经肠、皮下、肌内、静脉内、关节内、支气管内、腹内、囊内、软骨内、腔内、体腔内、小脑内、脑室内、结肠内、宫颈内、胃内、肝内、心肌内、眼内、骨内、骨盆内、心包内、腹膜内、胸膜内、前列腺内、肺内、直肠内、肾内、视网膜内、脊柱内、滑膜内、胸内、子宫内、膀胱内、病灶内、推注、经阴道、经直肠、经口腔、经舌下、经皮(局部)、经粘膜、或持续释放投与。44、一种可注射注射器，其包含如权利要求1所述的调配物的预装填溶液。45、一种用于经鼻投与的装置，其包含如权利要求1所述的调配物和医药上可接受的分散剂。46、一种经皮贴片，其包含如权利要求1所述的调配物和任选的医药上可接受的载剂。47、一种静脉输注袋，其包含如权利要求1所述的调配物和任选的生理盐水或5%葡萄糖。48、一种试剂盒，其包含至少一个包含如权利要求1所述的调配物的容器和使用说明书。49、如权利要求48所述的试剂盒，其中所述容器是玻璃小瓶或可注射注射器。50、一种预装填可注射注射器，其包含以下物质的调配物:(a)100mg/ml的抗IL-13抗体；(b)10mM的组氨酸；(c)5%的蔗糖；(d)0.01%的吐温-80;(e)40mM的NaCl，其中所述调配物的pH为6.0。全文摘要本发明提供适用于治疗与IL-13的不期望表达或活性有关的病症的调配物。文档编号A61K9/00GK101600457SQ200880001927公开日2009年12月9日申请日期2008年1月9日优先权日2007年1月9日发明者丹尼尔·A·狄克逊,埃林·克里斯蒂娜·索利,安东尼·B·巴里,托马斯·J·克劳利申请人:惠氏公司