包含鸟羽毛和鱼鳞的混合物作为活性成分的用于预防和治疗细胞增殖疾病的药物组合物的制作方法

专利名称：：包含鸟羽毛和鱼鳞的混合物作为活性成分的用于预防和治疗细胞增殖疾病的药物组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种用于预防和治疗细胞增殖疾病的药物组合物，所述组合物包含鸟羽毛和鱼鳞、转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞作为活性成分。更具体而言，本发明涉及一种用于预防和治疗细胞增殖疾病的药物组合物，所述组合物包含这样的混合物作为活性成分70重量％85重量％的鸟羽毛和15重量％30重量％的鱼鳞、转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质麟。
背景技术：
：癌症是源于转化细胞的失控增殖和非系统性生长的一类疾病。通常，癌症由环境、遗传或其它原因所造成的致癌基因和肿瘤抑制基因的突变所引起。在早期阶段，癌细胞增殖并入侵和破坏附近的组织。在晚期阶段，癌细胞入侵循环系统并扩散至远处的区域，最终导致罹患者死亡。为治疗癌症，手术、放射疗法和化学疗法等得到了应用，已知具有抗癌作用的各种物质也获得了使用。虽然大多数化学抗癌剂表现出控制细胞生长的作用，但是它们不具有针对癌细胞的选择性，因而倾向于显示出对正常细胞的毒性。因此，需要开发下述新型抗癌齐U，所述新型抗癌剂提供针对癌细胞的优异的选择性，具有较低的毒性，并且能够克服耐药性。羽毛是一种表皮变体，其形成了鸟身上的独具特色的外部遮盖物。羽毛的主要组分是角蛋白。从胚胎学方面来看，羽毛对应着哺乳动物的毛发或爬行动物的鳞片。鸟的羽毛由插入皮肤上的小囊中的羽根(或中空轴)、连接于羽根并作为主轴的羽轴和由羽轴分枝的多个羽支构成。小羽支相互交缠形成羽片。一般而言，羽毛具有棕色素颜料或黑色素颜料，因而具有颜色。通常，羽毛由不溶于水或盐水溶液的纤维状硬质蛋白组成。羽毛衍生自骨骼并且富含钙。通过钙链的连接，羽毛具有透气性，并且在结构上适于飞翔。鱼鳞是指覆盖鱼类皮肤的小硬片。鱼鳞源于真皮(由结缔组织构成)。因物种的不同，其具有各种形状和数量。例如，关于纵向排列的鱼鳞的数目，鲤鱼为33，鲫鱼为27，鲑鱼为150，鳟鱼为118。鳞片的化学组成为41%84%的干燥有机组分和约59%的灰组分。大多数有机组分是硬质胶原蛋白(24%)和4-甲基喹啉(76%)。至于鲤鱼，其灰组分占29.58%ο它们是Ca3(PO4)2(51.42%)、Mg3(PO4)2(6.45%)和CaCO3(42.17%)。磷酸钙和碳酸钙的含量基本相同。鳞片在处理鱼的过程中作为副产品而获得，但是它们通常都被抛弃。部分鳞片在加热后粉碎，以用作饲料或肥料。本发明的发明人为从天然产物中发现可预防和抑制癌细胞增殖的物质而进行了研究。结果，我们发现，包含鸟羽毛(特别是羽根和羽轴)和鱼鳞、转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞的组合物具有优异的抗癌作用，由此完成了本发明。
发明内容技术问题因此，本发明的目的是提供用于预防和治疗细胞增殖疾病的组合物。技术方案为实现前述目的，一方面，本发明提供一种用于预防和治疗细胞增殖疾病的组合物，所述组合物包含粉末形式的鸟羽毛和鱼鳞、转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞。另一方面，本发明提供了一种用于制备鸟羽毛粉末的方法。再一方面，本发明提供了一种用于制备鱼鳞粉末的方法。再一方面，本发明提供了一种用于制备转化自真皮的鳞片等的粉末的方法。再一方面，本发明提供了一种用于口服本发明的组合物的方法。有利效果用于预防和治疗细胞增殖疾病的本发明的组合物具有抑制和预防癌细胞生长的作用。因此，用于预防和治疗细胞增殖疾病的本发明的组合物可用于抗癌目的，以预防、改善或治疗癌症。通过结合附图提供的以下详细描述，本发明的上述和其它目的、特征及其它优点将会得到更加清楚的理解，附图中图1是显示移植有人结肠癌细胞(HCT-15)的裸鼠的肿瘤体积变化的图，其中Gl对照组G2阿霉素，2mg/kgG3本发明的抗癌组合物，75mg/kgG4本发明的抗癌组合物，150mg/kgG5本发明的抗癌组合物，300mg/kgG6本发明的抗癌组合物，300mg/kg(经预治疗)具体实施例方式下面将更详细地描述本发明。本发明的药物组合物的特征在于，包含鸟羽毛和鱼鳞、转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞的粉末作为活性成分。用于制备本发明的药物组合物的鸟羽毛不受特别限制。但是，优选的是，可以使用鸡毛、鸭毛、火鸡毛、鹅毛或鸵鸟毛。更优选的是，可以使用鸡毛。如上所述，鸟的羽毛包含羽根、羽轴和羽支。鸟的羽毛可以整根使用。但是，优选的是，可以只使用鸟羽毛的羽根和羽轴。特别是，鸟羽毛的表现出颜色的部分包含许多褐黑素或黑色素。根据实验，包含这些部分的组合物表现了优异的作用。因此，优选使用含有许多黑素的部分。可以进行从鸟羽毛中分离羽根、羽轴和含有许多黑素的部分而不受特别限制。优选的是，可以通过水合鸟羽毛来将其分离，所述水合鸟羽毛通过将鸟羽毛浸泡在水中然后施加外力(例如使用刀)来进行。用于浸泡羽毛的水不受特别限制。优选的是，可以使用普通自来水或蒸馏水，并且优选温度为20°C77°C的水。如果水温超过77°C，则表皮组织会变形。此外，如果水温低于20°C，则水合可能不够充分。可根据材料的条件来控制浸泡时间，以获得充分的水合。优选的是，浸泡时间可以为1分钟2小时。如果浸泡时间短于1分钟，则水合会不充分。此外，浸泡时间超过2小时是不经济的，并可能导致组织变形。本发明的药物组合物包含鸟的整根羽毛的粉末或者鸟羽毛的羽根或羽轴的粉末，它们通过以下步骤制备(a)将鸟羽毛在20°C77°C的水中浸泡1分钟2小时。(b)在盐度为4.06.0的盐水中对经浸泡的羽毛消毒10分钟2小时。(c)使用流动的水洗涤羽毛以除去杂质。(d)将羽毛在0.1重量％0.2重量％(ν/ν)的氯化钠(NaCl)溶液中浸泡并消毒5分钟1小时。(e)在15°C30°C干燥羽毛30分钟72小时。(f)通过照射IOnm400nm的紫外线10分钟2小时对经干燥的羽毛消毒。(g)从经消毒的羽毛中分离羽根或羽轴。(h)通过照射IOnm400nm的紫外线10分钟2小时对经分离的羽根或羽轴消毒。(i)将经消毒的羽根或羽轴切割为2mm7mm以便于研磨。(j)通过照射IOnm400nm的紫外线10分钟2小时对经切割的羽毛消毒。(k)研磨经切割和消毒的羽根或羽轴。(1)通过照射IOnm400nm的紫外线10分钟2小时对所获得的粉末消毒。在上述制备方法中，用于浸泡和水合羽毛的水不受特别限制。优选的是，可以使用普通自来水或蒸馏水，并且优选温度为20°C77°C的水。如果水温超过77°C，则表皮组织会变形。此外，如果水温低于20°C，则水合可能不够充分。可根据材料的条件来控制浸泡时间，以获得充分的水合。优选的是，浸泡时间可以为1分钟2小时。如果浸泡时间短于1分钟，则水合会不充分。此外，浸泡时间超过2小时是不经济的，并可能导致组织变形。此外，进行消毒以从羽毛上除去浸泡过程中所增殖的腐生菌。消毒方法可以是本领域中已知的任一种方法，只要羽毛不变形即可。优选的是，将羽毛在盐度为4.06.0的盐水中浸泡10分钟2小时。接下来，在除去杂质之后，在IL水中加入Ig2gNaCl，并进行浸泡和消毒5分钟1小时。完成浸泡之后且在干燥之前，使用自来水或蒸馏水洗涤羽毛，以除去残留的NaCl。在羽毛通过浸泡而得到充分水合之后，通过施加外力来除去杂质。用于干燥经洗涤的鸟羽毛的方法不受特别限制。优选的是，在通风良好、避免阳光直射的地方干燥羽毛。优选的是，在15°C30°C，优选在约25°C的室温将羽毛完全干燥30分钟72小时。然后，如下所述进行紫外线照射。如下进行羽根和羽轴的分离。可以使用整根的经干燥的羽毛。但是，更优选的是，从羽毛中筛选出具有良好的光学性能和多层结构且富含角蛋白的羽根部分和富含角蛋白和黑素的羽轴部分。由经干燥的羽毛，通过施加外力从羽轴上除去(脱除)羽根部分和羽轴部分以外的部分，即羽支和羽片。如果经分离的羽根或羽轴状况较差，或者如果羽根的下部或羽轴的上部过于单薄，则可以只选择状况良好的部分使用。然后，如下所述进行紫外线照射。使用研磨机将整根的经分离的羽毛或选定的羽根或羽轴部分研磨成粉末。如果需要，可预先对它们进行精细的切割(2mm7mm)以便于研磨。使用紫外线对获得的粉末消毒。使用无热辐射的紫外线消毒器，以距粉末IOcm50cm的距离照射波长为IOnm400nm的紫外线。照射时间不受特别限制，不过优选为10分钟2小时。用于制备本发明的药物组合物的鱼鳞、转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞不受特别限制。不过，优选的是，可以使用具有许多鳞片的海水鱼(例如鲻鱼、鲈鱼和六线鱼(rocktrout))或者具有许多鳞片的淡水鱼(例如鲤鱼、鲫鱼和鳟鱼)的鳞片。更优选的是，可以使用鲻鱼的鳞片。爬行动物不受特别限制，不过优选蛇。鱼鳞可以通过从鱼身上取下鳞片随后洗涤并优选粉末化而制备。制备方法不受特别限制，可以包括下述步骤(a)将鱼在20°C77°C的水中浸泡1分钟2小时，并分离和洗涤鱼鳞。(b)将步骤(a)中所洗涤的鱼鳞在0.1重量％0.2重量％(w/v)的NaCl溶液中浸泡并消毒5分钟1小时。(c)将步骤(b)中所浸泡的鳞片在1重量％3重量％(ν/ν)的醋溶液中浸泡并消毒15分钟20分钟。(d)在30°C70°C干燥步骤(c)中所浸泡的鳞片5分钟48小时。(e)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对步骤⑷中所干燥的鳞片消毒。(f)将步骤(e)中所消毒的鳞片切割为2mm7mm以便于研磨。(g)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对步骤(f)中所切割的鳞片消毒。(h)使用研磨机研磨步骤(g)中所消毒的鳞片。(i)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对步骤(h)中所获得的粉末消毒。浸泡、洗涤、干燥、消毒和紫外线处理的程序与上述程序相同。此外，转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞的粉末可以通过下述步骤制备(a)对鱼或爬行动物的死体施加外力以分离鳞片或皮肤；(b)在盐度为4.06.0的盐水中对经分离的鳞片或皮肤消毒10分钟2小时；(c)将鳞片或皮肤在3%(ν/ν)的醋溶液中浸泡10分钟20分钟并消毒；(d)使用流动的水洗涤鳞片或皮肤以除去杂质；(e)在20°C70°C干燥经洗涤的鳞片或皮肤5分钟72小时；⑴通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对经干燥的鳞片或皮肤消毒；(g)将鳞片或皮肤在宽度和长度方向上切割为3mm4mm；(h)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对经切割的鳞片或皮肤消毒；⑴使用研磨机研磨鳞片或皮肤；和(j)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对所获得的粉末消毒。浸泡、洗涤、干燥、消毒和紫外线处理的程序与上述程序相同。本发明的抗癌药物组合物可以通过混合前述成分而制备。优选的是，可以将70重量％85重量％的鸟羽毛与15重量％30重量％的鱼鳞、转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞混合。更优选的是，可以将80重量％的鸟羽毛与20重量％的鱼鳞、转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞混合。在本发明的一个实施例中，将鸡、鸭、火鸡和鹅的羽根和羽轴用作鸟的羽毛，并将它们与鱼鳞、转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞的粉末混合，以制备本发明的组合物。在本发明的一个测试例中，将本发明的组合物施用于已移植有结肠癌细胞的裸鼠，以确认抗癌效果。随后测量抑制癌细胞的效果。结果，与什么都没有施用的对照组相比，确认了约60%以上的癌细胞生长抑制作用。因此，本发明提供了用于预防和治疗细胞增殖疾病的药物组合物，所述组合物能够抑制和预防癌细胞生长。本发明的药物组合物可以仅包含药用有效量的通过本发明而制备的材料，也可以还包含至少一种可药用的载体。此处所用的术语“药用有效量”是指与对照组相比可获得较好效果的量，并且优选对于治疗或预防细胞增殖疾病有效的量。本发明的药物组合物的药用有效量可以是IOmg/日/kg体重IOOOmg/日/kg体重，优选为150mg/日/kg体重600mg/日/kg体重。然而，药用有效量可随各种因素而充分变化，所述因素包括患者的具体疾病及其严重性、年龄、体重、身体状况和性别、施用途径和疗程等。本发明的药物组合物适用的疾病为免疫缺陷性疾病和细胞增殖疾病。细胞增殖疾病是肿瘤所引起的肿瘤性疾病，可以是例如癌症。癌症包括但不限于大肠癌、脾癌、结肠癌、肺癌、肝癌、胃癌、食道癌、胰腺癌、胆囊癌、肾癌、膀胱癌、前列腺癌、睾丸癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、绒毛膜癌、卵巢癌、乳腺癌、甲状腺癌、脑癌、头颈部癌、恶性黑素瘤、淋巴瘤、骨癌、软组织肉瘤和脊柱癌等。此处所用的短语“可药用”是指载体为生理上可接受的，当施用于人体时不抑制活性成分的作用，并且是无毒的，不会带来诸如胃肠道问题和眩晕等过敏反应或其它不良反应。载体包括所有类型的溶剂、分散介质、水包油或油包水型乳剂、水性组合物、脂质体、微珠和微粒体。此外，可以根据施用途径，将本发明的药物组合物与适当的载体一起配制。本发明的药物组合物的施用途径不受特别限制，不过施用途径可以为口服。当口服本发明的药物组合物时，可以通过本领域已知的方法，将本发明的药物组合物与适当的口服用载体一起配制为粉末、颗粒、片剂、丸剂、糖衣片、胶囊、液体、凝胶、糖浆、悬浮液或薄片等。适当的载体的实例可以包括糖类，如乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇和麦芽糖醇等；淀粉类，如玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉和马铃薯淀粉等；纤维素类，如纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和羟丙基甲基纤维素等；和填料，如明胶和聚乙烯吡咯烷酮等。此外，还可以加入交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、藻酸和藻酸钠等作为崩解剂。另外，所述组合物还可以包含抗凝血剂、表面活性剂、润湿剂、香味剂或杀菌剂等。此外，还可以使用下述文献中描述的物质作为可药用载体Remington'sPharmaceuticalSciences,第19片反，MackPublishingCompany,·其jf屯页，宾夕夕去尼亚州，1995。此外，本发明的药物组合物可以包含至少一种缓冲剂(例如盐水或PBS)、碳水化合物(例如葡萄糖、甘露糖、蔗糖或右旋糖酐)、抗氧化剂、抑菌剂、螯合剂(例如EDTA或谷胱甘肽)、佐剂(例如氢氧化铝)、悬浮剂、增稠剂和/或防腐剂。此外，可以通过本领域已知的方法将本发明的药物组合物制备成下述制剂，所述制剂可以在施用于哺乳动物之后提供活性成分的速释、缓释或延时释放。此外，本发明的药物组合物还可以与已知具有预防或治疗癌症作用的化合物组合施用。此外，本发明提供了一种用于制备鸟羽毛粉末的方法。如前所述，制备方法包括以下步骤(a)将鸟羽毛在20°C77°C的水中浸泡1分钟2小时；(b)在盐度为4.06.0的盐水中对经浸泡的羽毛消毒10分钟2小时；(c)使用流动的水适当地洗涤羽毛以除去杂质；⑷将羽毛在0.1重量％0.2重量％(ν/ν)的NaCl溶液中浸泡5分钟1小时并对其消毒；(e)在15°C30°C干燥羽毛30分钟72小时；(f)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对经干燥的羽毛消毒；(g)从经消毒的羽毛中分离羽根或羽轴；(h)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对经分离的羽根或羽轴消毒；(i)将经消毒的羽根或羽轴切割为2mm7mm以便于研磨；(j)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对经切割的羽毛消毒；(k)研磨经切割和消毒的羽根或羽轴；和(1)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对所获得的粉末消毒。浸泡、洗涤、干燥、消毒和紫外线处理的程序与上述程序相同。此外，本发明提供了一种用于制备鱼鳞粉末的方法。如前所述，制备方法包括以下步骤(a)将鱼在20°C77°C的水中浸泡1分钟2小时并分离和洗涤鱼鳞；(b)将步骤(a)中所洗涤的鳞片在0.1重量％0.2重量％(w/v)的NaCl溶液中浸泡并消毒5分钟1小时；(c)将步骤(b)中所浸泡的鳞片在1重量％3重量％(ν/ν)的醋溶液中浸泡并消毒15分钟20分钟；(d)在30°C70°C干燥步骤(c)中所浸泡的鳞片5分钟48小时；(e)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对步骤(d)中所干燥的鳞片消毒；(f)将步骤(e)中所消毒的鳞片切割为2mm7mm以便于研磨；(g)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对步骤⑴中所切割的鳞片消毒；(h)使用研磨机研磨步骤(g)中所消毒的鳞片；和⑴通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对步骤(h)中所获得的粉末消毒。浸泡、洗涤、干燥、消毒和紫外线处理的程序与上述程序相同。本发明还提供了一种用于制备转化自真皮的鳞片等的粉末的方法。如前所述，制备方法包括以下步骤(a)通过施加外力从死体上分离转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞；(b)在盐度为4.06.0的盐水中对经分离的鳞片或皮肤消毒10分钟2小时；(c)将鳞片或皮肤在3%(ν/ν)的醋溶液中浸泡并消毒10分钟20分钟；(d)使用流动的水洗涤鳞片或皮肤以除去杂质；(e)在20°C70°C干燥经洗涤的鳞片或皮肤5分钟72小时；(f)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对经干燥的鳞片或皮肤消毒；(g)将鳞片或皮肤在宽度和长度方向上切割为3mm4mm；(h)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对经切割的鳞片或皮肤消毒；(i)使用研磨机研磨鳞片或皮肤；和(j)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对所获得的粉末消毒。浸泡、洗涤、干燥、消毒和紫外线处理的程序与上述程序相同。上述制备方法还可以包括以下步骤使用盐度为4.06.0的盐水和3%(ν/ν)的醋溶液消毒；和通过以IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时来消毒。本发明还提供了用于口服本发明的组合物的方法。本发明的组合物的组分与上述组分相同，并且用于口服的方法可以是本领域中已知的方法。实施例下面将通过实施例更加详细地描述本发明。然而，以下实施例仅出于说明的目的而提供，它们并非意在限制本发明。实施例1制备本发明的组合物1-1.制备鸟羽毛(鸡毛)粉末将鸡毛在77°C的水中浸泡20分钟，然后在盐度为4的盐水中浸泡30分钟。使用流动的水充分洗涤后，将该羽毛在0.的NaCl溶液中浸泡10分钟，并除去杂质。接下来，在室温于通风良好的地方干燥该羽毛48小时。利用紫外灯(Birtcher，美国；无热辐射型)，在距离该羽毛30cm处，以紫外线照射经干燥的羽毛1小时。通过施加外力(用手)除去羽根或羽轴之外的其它部分。在距离30cm处利用紫外灯以紫外线照射1小时以上后，使用切割机将它们切割为约5mm大小。在30cm距离处利用紫外灯以紫外线照射1小时后，接着使用研磨机进行研磨，在距离30cm处利用紫外灯以紫外线照射所获得的粉末1小时，由此制备鸡毛粉末。1-2.制备鳞片粉末将鲻鱼的死体在50°C的水中浸泡20分钟。使用软质洗刷物(或刷子)清洁外表面，并施加外力来分离鳞片。充分洗涤所分离的鳞片，并将其在0.1重量％(w/v)的盐水中浸泡10分钟，然后在1重量％(ν/ν)的醋溶液中浸泡20分钟。接下来，通过使用流动的水充分洗涤来完全除去杂质。在室温(约25°C)完全干燥鳞片24小时。随后，在距离鳞片30cm处利用紫外灯照射紫外线1小时。使用切割机切割为约5mm后，照射紫外线1小时。使用研磨机研磨后，在距离30cm处利用紫外灯以紫外线照射所获得的粉末1小时，由此制备鳞片粉末。同样，由爬行动物死体的鳞片、皮肤或角质鳞分离出皮肤。将所分离的皮肤在盐度为4.0的盐水中浸泡数分钟。使用流动的水充分洗涤之后，将所述皮肤在1重量％(ν/ν)的醋溶液中浸泡20分钟。接下来，通过使用流动的水充分洗涤来完全除去杂质。在室温干燥48小时后，在通风良好的地方，在距离30cm处利用紫外灯来照射紫外线1小时。使用切割机切割为约3mm4mm后，在距离30cm处照射紫外线1小时。使用研磨机研磨后，在距离30cm处利用紫外灯以紫外线照射所获得的粉末1小时，由此制备鳞片粉末。1-3.制备本发明的组合物分别以80重量％和20重量％的比例，混合实施例1-1和1-2中所制备的鸡毛粉末和鲻鱼的鳞片粉末，以制备本发明的抗癌组合物。实施例2制备本发明的组合物以与实施例1-3相同的方式制备本发明的组合物，不同之处在于在实施例1-1中使用鸭毛。实施例3制备本发明的组合物以与实施例1-3相同的方式制备本发明的组合物，不同之处在于在实施例1-1中使用火鸡毛。实施例4制备本发明的组合物以与实施例1-3相同的方式制备本发明的组合物，不同之处在于在实施例1-1中使用鹅毛。测试例测量本发明的抗癌组合物的抗癌作用使用移植有人结肠癌细胞的裸鼠，在ChemonPreclinicalResearchCenter(经KGLP审批)测试本发明的组合物的抗癌作用。对7周龄的无特定病原体(SPF)级无胸腺的BALB/C裸鼠(SLCJapan,日本)称重，并将其分为如下6组，每组10只阴性对照组(1)、阳性对照组(1)和试验组(4)。通过笼子的识别标签和耳孔法来识别小鼠。试验组如表1中所设计。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>Gl阴性对照组(赋形剂)G2阳性对照组(每2日腹腔注射阳性对照物质一次)G3G6试验物质施用组(对于G6，在移植结肠癌细胞之前已经施用试验物质3周)尽快地在37°C的恒温水浴中解冻结肠癌细胞(HCT15)。在与IOmLRPMI1640培养基(SigmaAldrich，美国)充分混合后，以IOOOrpm的转速离心分离10分钟。将获得的细胞团与5mL含有10%胎牛血清(FBS)的RPMI1640培养基充分混合，并在37°C和5%CO2的条件下于细胞培养瓶中培养所述细胞。将培养的癌细胞悬浮在生理盐水中，使其浓度为IXlO7个细胞/mL，并皮下移植给小鼠，每只小鼠移植0.3mL(3XIO6个细胞)。将实施例1中所制备的组合物以不同浓度悬浮在作为赋形剂的注射用无菌蒸馏水(ChoongwaePharmaCorporation，韩国)中，使用研磨机(均化器)进行研磨，并使小鼠分别以75mg/kg体重(G3)U50mg/kg体重(G4)或300mg/kg体重(G5)的剂量口服3周(每日两次)。在试验组中，预先施用组(G6)在移植癌细胞之前已经以300mg/kg体重的剂量口服了所述组合物3周(每日两次)。移植癌细胞之后，它们以同样的方式再口服3周。在阴性对照组(Gl)中，口服赋形剂而非本发明的抗癌组合物3周(每日两次)。在阳性对照组(G2)中，以2mg/kg体重的剂量口服阿霉素而非本发明的抗癌组合物3周(每2日一次)。通过本领域中已知的方法将阿霉素溶解在赋形剂中，由此制备阿霉素溶液。在试验中，小鼠处于23士3°C和相对湿度为55士15%的条件下，并被允许自由地进行饮食。在接种癌细胞后的第12、15、19和22天测量肿瘤体积。使用游标卡尺测量肿瘤的长、宽和高，并通过以下公式计算肿瘤体积肿瘤体积=(长X宽X高)+2肿瘤体积测量结果提供在表2中(单位mm3)。表2在第19天和第22天，与阴性对照组(Gl)相比，在所有施用本发明的组合物的试验组(G3G6)中都观察到了肿瘤体积的统计学显著(ρ<0.05)降低。在第22天(进行尸体解剖时)，组G3G6显示出肿瘤抑制作用([1-(施用组的肿瘤体积/阴性对照组的肿瘤体积)]X100(%))分别为64.3%、66.6%、67.和69.6%。它们都优于阿霉素施用组的肿瘤抑制作用(G2；59.5%)0未观察到与施用本发明的组合物相关的反常症状，并且未观察到体重的显著变化，如表3(单位g)中所示。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>由上可以确认，本发明的组合物在抑制肿瘤细胞的增殖方面是有效的。制备例制备包含本发明的组合物的胶囊均勻地混合100.Omg实施例1中制备的组合物、83.Omg玉米淀粉、175.Omg乳糖和2.Omg硬脂酸镁，并将其填充至明胶胶囊中，使得每个胶囊的内容物的重量为360mg。工业实用性由上可以看出，用于预防和治疗细胞增殖疾病的本发明的组合物具有抑制和预防癌细胞生长的作用。因此，用于预防和治疗细胞增殖疾病的本发明的组合物可用于抗癌目的，以预防、改善或治疗癌症。权利要求一种用于预防和治疗细胞增殖疾病的药物组合物，所述组合物包含70重量％～85重量％的鸟羽毛和15重量％～30重量％的鱼鳞作为活性成分。2.一种用于预防和治疗细胞增殖疾病的药物组合物，所述组合物包含70重量％85重量％的鸟羽毛和15重量％30重量％的鱼鳞、转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞作为活性成分。3.如权利要求1或2所述的组合物，其中，所述鸟羽毛是整根羽毛、羽根或羽轴的粉末。4.如权利要求3所述的组合物，其中，所述羽根或羽轴的粉末通过包括以下步骤的方法制备(a)将鸟羽毛在20°C77°C的水中浸泡1分钟2小时；(b)在盐度为4.06.0的盐水中对经浸泡的所述羽毛消毒10分钟2小时；(c)使用流动的水洗涤所述羽毛以除去杂质；(d)将所述羽毛在0.1重量％0.2重量％(ν/ν)的氯化钠(NaCl)溶液中浸泡并消毒5分钟1小时；(e)在15°C30°C干燥所述羽毛30分钟72小时；(f)通过照射IOnm400nm的紫外线10分钟2小时对经干燥的所述羽毛消毒；(g)从经消毒的所述羽毛中分离羽根或羽轴；(h)通过照射IOnm400nm的紫外线10分钟2小时对经分离的所述羽根或羽轴消毒；(i)将经消毒的所述羽根或羽轴切割为2mm7mm以便于研磨；(j)通过照射IOnm400nm的紫外线10分钟2小时对经切割的所述羽毛消毒；(k)研磨经切割和消毒的所述羽根或羽轴；(1)通过照射IOnm400nm的紫外线10分钟2小时对获得的所述粉末消毒。5.如权利要求1或2所述的组合物，其中，所述鸟选自由鸡、鸭、火鸡、鹅和鸵鸟组成的组。6.如权利要求1所述的组合物，其中，所述鱼鳞通过包括以下步骤的方法制备(a)将鱼在20°C77°C的水中浸泡1分钟2小时，并分离和洗涤所述鱼的鳞片；(b)将步骤(a)中洗涤的所述鳞片在0.1重量％0.2重量％(w/v)的NaCl溶液中浸泡并消毒5分钟1小时；(c)将步骤(b)中浸泡的所述鳞片在1重量％3重量％(ν/ν)的醋溶液中浸泡并消毒15分钟20分钟；(d)将步骤(c)中浸泡的所述鳞片在30°C70°C干燥5分钟48小时；(e)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对步骤(d)中干燥的所述鳞片消毒；(f)将步骤(e)中消毒的所述鳞片切割为2mm7mm以便于研磨；(g)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对步骤(f)中切割的所述鳞片消毒；(h)使用研磨机研磨步骤(g)中消毒的所述鳞片；(i)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对步骤(h)中获得的所述粉末消毒。7.如权利要求1所述的组合物，其中，所述鱼选自由鲻鱼、鲈鱼和六线鱼、鲤鱼、鲫鱼和鳟鱼组成的组。8.如权利要求1或2所述的组合物，其中，所述细胞增殖疾病为肿瘤所引起的肿瘤性疾病。9.如权利要求8所述的组合物，其中，所述肿瘤性疾病是癌。10.如权利要求9所述的组合物，其中，所述癌选自由大肠癌、脾癌、结肠癌、肺癌、肝癌、胃癌、食道癌、胰腺癌、胆囊癌、肾癌、膀胱癌、前列腺癌、睾丸癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、绒毛膜癌、卵巢癌、乳腺癌、甲状腺癌、脑癌、头颈部癌、恶性黑素瘤、淋巴瘤、骨癌、软组织肉瘤和脊柱癌组成的组。11.如权利要求2所述的组合物，其中，所述转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞通过包括下述步骤的方法制备(a)对鱼或爬行动物的死体施加外力以分离所述鳞片或皮肤；(b)在盐度为4.06.0的盐水中对经分离的所述鳞片或皮肤消毒10分钟2小时；(c)将所述鳞片或皮肤在3%(ν/ν)的醋溶液中浸泡10分钟20分钟并消毒；(d)使用流动的水洗涤所述鳞片或皮肤以除去杂质；(e)将经洗涤的所述鳞片或皮肤在20°C70°C干燥5分钟72小时；(f)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对经干燥的所述鳞片或皮肤消毒；(g)将所述鳞片或皮肤在宽度和长度方向上切割为3mm4mm；(h)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对经切割的所述鳞片或皮肤消毒；(i)使用研磨机研磨所述鳞片或皮肤；和(j)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对获得的所述粉末消毒。12.如权利要求2所述的组合物，其中，所述爬行动物是蛇。13.一种用于制备羽根或羽轴的粉末的方法，所述方法包括以下步骤(a)将鸟羽毛在20°C77°C的水中浸泡1分钟2小时；(b)在盐度为4.06.0的盐水中对经浸泡的所述羽毛消毒10分钟2小时；(c)使用流动的水充分洗涤所述羽毛以除去杂质；(d)将所述羽毛在0.1重量％0.2重量％(ν/ν)的氯化钠(NaCl)溶液中浸泡5分钟1小时并对其消毒；(e)在15°C30°C干燥所述羽毛30分钟72小时；(f)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对经干燥的所述羽毛消毒；(g)从经消毒的所述羽毛中分离羽根或羽轴；(h)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对经分离的所述羽根或羽轴消毒；(i)将经消毒的所述羽根或羽轴切割为2mm7mm以便于研磨；(j)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对经切割的所述羽毛消毒；(k)研磨经切割和消毒的所述羽根或羽轴；和(1)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对获得的所述粉末消毒。14.一种用于制备鱼鳞粉末的方法，所述方法包括以下步骤(a)将鱼在20°C77°C的水中浸泡1分钟2小时，并分离和洗涤所述鱼的鳞片；(b)将步骤(a)中洗涤的所述鳞片在0.1重量％0.2重量％(w/v)的NaCl溶液中浸泡并消毒5分钟1小时；(c)将步骤(b)中浸泡的所述鳞片在1重量％3重量％(ν/ν)的醋溶液中浸泡并消毒15分钟20分钟；(d)将步骤(c)中浸泡的所述鳞片在30°C70°C干燥5分钟48小时；(e)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对步骤(d)中干燥的所述鳞片消毒；(f)将步骤(e)中消毒的所述鳞片切割为2mm7mm以便于研磨；(g)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对步骤(f)中切割的所述鳞片消毒；(h)使用研磨机研磨步骤(g)中消毒的所述鳞片；和(i)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对步骤(h)中获得的所述粉末消毒。15.一种用于制备转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞的粉末的方法，所述方法包括以下步骤(a)通过施加外力从死体上分离转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞；(b)在盐度为4.06.0的盐水中对经分离的所述鳞片或皮肤消毒10分钟2小时；(c)将所述鳞片或皮肤在3%(ν/ν)的醋溶液中浸泡并消毒10分钟20分钟；(d)使用流动的水洗涤所述鳞片或皮肤以除去杂质；(e)将经洗涤的所述鳞片或皮肤在20°C70°C干燥5分钟72小时；(f)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对经干燥的所述鳞片或皮肤消毒；(g)将所述鳞片或皮肤在宽度和长度方向上切割为3mm4mm；(h)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对经切割的所述鳞片或皮肤消毒；(i)使用研磨机研磨所述鳞片或皮肤；和(j)通过使用IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时对获得的所述粉末消毒。16.一种权利要求1或2所述的组合物的施用方法，其中，所述方法为口服。17.如权利要求1315中任一项所述的方法，其中，所述方法还包括以下步骤使用盐度为4.06.0的盐水和3%(ν/ν)的醋溶液消毒；和通过以IOnm400nm的紫外线照射10分钟2小时来消毒。全文摘要本发明涉及一种用于预防和治疗细胞增殖疾病的药物组合物，所述组合物包含鸟羽毛和鱼鳞、转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞作为活性成分。更具体而言，本发明涉及一种用于预防和治疗细胞增殖疾病的药物组合物，所述组合物包含下述混合物作为活性成分70重量％～85重量％的鸟羽毛和15重量％～30重量％的鱼鳞、转化自真皮的鳞片、鳞片的退化或角化变体或者爬行动物的鳞片或角质鳞。本发明的组合物具有抑制和预防癌细胞生长的作用。因此，本发明的组合物可用于抗癌目的，以预防、改善或治疗癌症。文档编号A61K35/12GK101801395SQ200880106864公开日2010年8月11日申请日期2008年8月12日优先权日2007年8月16日发明者李相汶申请人:李相汶