专利名称：用于预防白发和治疗白斑的含有竹芋淀粉的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于预防白发(gray hair)和治疗白斑的组合物，其含有竹芋淀粉 (arrowroot)作为活性成分，更具体地，涉及用于预防白发和治疗白斑的组合物，其旨在提 高黑素细胞中小眼相关性转录因子(MITF)的表达，进而活化黑素细胞并提高黑色素合成。
背景技术：
随着年龄的增加，人们的头发一般会变白。由于白发会使人看上去显老，染发剂被开发并用于遮掩白发并使其恢复成黑色或其它颜色。但是，染发仅能暂时地持续。随着白 发的生长，还需要再进行染发。此外，现在使用的氧化性染发剂由于其含有的氧化剂等可能 会导致皮肤损伤。已经公开以下所述作为白发抑制剂黑芝麻、核桃、墨旱莲(Eclipta prostrate) 和蜂蜜，它们与配料熟地黄、天冬(asparagus)和麦冬(Liriope platyphylla)混合；火炭 母、侧柏叶、女贞子、墨旱莲、矿块盐(rock salt)、熟地黄、天冬芦笋、阔叶山麦冬和黑豆，在 50°C煎煮；黑芝麻、红松叶(Korean black pine leaf)和昆布；刺五加(Eleutherococcus senticosus)提取物；垂体激素；c_AMP(3’，5’ -环磷酸腺苷)；以及维生素D3等。但是，它 们提供的效果均不明显。
发明内容
技术问题本发明人注意到，在众多的草药中，竹芋淀粉具有提高黑素细胞中小眼相关性转 录因子(MITF)的表达的效力，进而提高黑色素的生成。当施用于白斑模型小鼠时，发现竹 芋淀粉具有抑制毛发变白的进展的效力。因此，本发明的目的是提供用于预防白发和治疗 白斑的组合物，其含有竹芋淀粉作为活性成分。技术方案一方面，本发明提供用于预防白发和治疗白斑的组合物，其含有竹芋淀粉作为活 性成分。所述组合物提高黑素细胞中小眼相关性转录因子(MITF)的表达，进而提高黑色素 的生成。有益效果本发明公开的含有竹芋淀粉作为活性成分的用于预防白发和治疗白斑的组合物， 提高黑素细胞中MITF的表达，进而活化黑素细胞并提高黑色素的合成。当施用于白斑模型 小鼠时，它具有抑制毛发变白的进展的效力。
通过以下的详细说明，结合附图，所公开的示例性实施方案的以上及其他的方面、 特征和优点将会更加清楚，附图中图1显示竹芋淀粉提高黑色素生成的效力；
图2显示蛋白质印迹带(图2a)和蛋白测定结果(图2b)，表明竹芋淀粉提高小眼 相关性转录因子(MITF)和酪氨酸酶的表达的效力；和图3显示照片(图3a)和毛发中黑色素含量的图表(图3b)，表明竹芋淀粉预防白 斑模型小鼠的白毛的效力。最佳实施方式下文中，结合其中显示示例性实施方案的附图，更充分地说明示例性的实施方案。 但是，本发明还可以体现为许多不同的形式，而且不应解释为本发明仅限于以下所述的示 例性实施方案。相反，提供这些示例性的实施方案是为了使本发明详尽和完整，并向本领域 的技术人员充分传达本发明的范围。本发明中使用的术语只是出于描述特定实施方案的目的，并不是为了限制本发明。如本文中使用的，英文单数形式“a”、“an”和“the”也意在包括复数形式，除非上下文 中有其他明确的指示。此外，英文用语a、an等并不表示对量的限定，而表示存在所述项目 中的至少一个(种)。另外应该理解，当在该说明书中使用时，术语“包含(comprises)”和 /或“包含(comprising)”、或者“包括(includes) ”和/或“包括(including) ”详细列出 存在所述的特征、区域、整数、步骤、操作、元素和/或组分，但不排除存在或加入一种或多 种其他特征、区域、整数、步骤、操作、元素、组分和/或它们的组。除非另外有定义，本文使用的所有术语(包括技术和科学术语)的意义与本领域 的普通技术人员通常理解的意义相同。另外应该理解，术语如那些在常用词典中定义的术 语，应解释为其意义与它们在相关技术领域和本发明中的意义一致，并且不应以理想化的 或过于形式上的方式加以解释，除非本文明确地这样定义。毛发变白被认为是由于黑素干细胞的减少和黑素细胞活性的降低引起的。特别 地，已知与年龄相关的毛发变白主要有黑素干细胞的减少引起，而过早的白发则是由现代 社会的环境或精神压力引起的黑素细胞活性降低造成的。黑素细胞的黑色素合成活性主要受小眼相关性转录因子(MITF)活性的影响。本 文公开的含有竹芋淀粉的组合物可以显著的提高黑素细胞中MITF的表达，进而预防白发。当本文公开的组合物用于化妆品时，它可以包含化妆品可接受的介质或载体 (support)。所述组合物可以任意的可局部施用的制剂形式提供，如溶液剂、凝胶剂、无水固 体或糊剂、水包油型乳剂、混悬剂、微乳、微囊、微粒、离子型(脂质体的)和/或非离子型囊 泡分散液、乳膏、化妆水(toner)、洗剂、散剂、软膏剂、喷雾剂或遮瑕棒。这些制剂可以通过 本领域常用的方法制备。特别地，所述组合物可以方便的制成施用于头皮或毛发的制剂，如 香波、润发露(rinse)、护发素(conditioner)、生发油或头皮精华。本文公开的组合物可以 包含美容领域常用的辅剂，如脂肪、有机溶剂、增溶剂、浓缩剂、胶凝剂、柔软剂、抗氧化剂、 助悬剂、稳定剂、发泡剂、芳香剂、表面活性剂、水、离子型或非离子型乳化剂、填充剂、多价 螯合剂、螯合剂、防腐剂、维生素、阻滞剂(blocker)、润湿剂、精油、染料、色素、亲水性或亲 脂性活化剂、脂质囊泡等。所包含的这些辅剂的量可以是化妆品领域常用的量。当本文公开的组合物用于药物时，通过向所述活性成分竹芋淀粉添加常用的无机 或有机载体，可以将所述组合物制成固体、半固体或液体的肠胃外给药形式(用于透皮给 药或外用)。用于肠胃外给药的制剂的实例可以包括软膏剂、洗剂、喷雾剂、混悬剂等。本文 公开的活性成分可以通过本领域公知的方法方便地制成这样的制剂。可以适当地使用表面活性剂、赋形剂、着色剂、香料、防腐剂、稳定剂、缓冲剂、混悬剂或其他常用的辅剂。本文公开的含有竹芋淀粉的组合物的给药剂量可以根据需要治疗的个体的年龄、 性别和体重、待治疗的具体疾病或病症、疾病或病症的严重性、给药途径或医嘱而变化。本 领域技术人员容易理解考虑这些因素来决定给药剂量。所述组合物可外用于出现白发或白 斑的区域。通常的给药剂量可以为约0.001-约2，000mg/kg/天。更具体地，所述给药剂量 可以为约0. 2-5mg/kg/天。
实施例下面将描述实施例和实验。下述实施例和实验仅是为了说明而不是为了限制本发明的范围。试验例1 竹芋淀粉提高黑饩素牛成的效力将培养于含有5%胎牛血清(FBS) UOOIU的青霉素G和0.2μ M TPA的罗Roswell Park Memorial Institute (RPMI)培养基中的 Melan-a 细胞以 50，000 个细胞 / 孔置于 24 孔微量滴定板中。第二天，用终浓度为IOppm和50ppm的供试物竹芋淀粉(1，OOOx母液)、 作为阴性对照物的0. 1% DMS0、或作为阳性对照物的100 μ MIBMX对细胞进行处理，然后在 37°C下培养3天。随后，在用PBS清洗各孔后，通过向各孔中加入IOOyL IN NaOH，溶解细 胞中的黑色素。使用酶标仪在405nm下测量溶解的黑色素的吸光度。图1比较了竹芋淀粉 和对照物提高黑色素生成的效力，如图1所示，竹芋淀粉提高了黑素细胞中黑色素的合成， 进而提高黑色素的生成。特别的，在50ppm时，其提高黑色素生成的效力高于阳性对照物。i式验例2 竹芋淀卞対是高H素细朐,中MITF禾的表达伯效力将501mel细胞以500，000个细胞/孔置于6孔微量滴定板中。用作为阴性对照物 的0. DMS0、作为阳性对照物的100 μ M IBMX或作为供试物的IOppm竹芋淀粉处理各孔。 在37°C下培养细胞24、48和72小时后，获取蛋白质。使用小眼相关性转录因子(MITF)和 酪氨酸酶抗体对如此得到的蛋白质进行蛋白质印迹试验。通过本领域技术人员常用的标准 方法进行蛋白质提取和蛋白质印迹试验。图2a(蛋白质印迹带图像)和图2b (蛋白质测定 结果)显示了结果。如图2a和图2b所示，竹芋淀粉提高了黑素细胞中MITF和酪氨酸酶蛋 白质的表达。实验例3竹芋淀粉制本抑制毛炉变白导至她勺白斑小薩调白发阶效力白斑小鼠(C57bl/6-MITFmi_vit)得自The Jackson Lab (USA)。实验方法如下。通 过脱毛除去12周龄小鼠的背部毛发。所有个体小鼠的脱毛面积是恒定的。从第二天起，在 脱毛区域上施用抑制毛发变白的物质，每天两次。使用Et0H、l，3-BG和DW(3 2 5 ν/ ν/ν)的混合物作为所述抑制毛发变白物质的媒介物(vehicle)。该媒介物本身用作阴性对 照物，加入到该媒介物中的50mM IBMX用作阳性对照物。加入到该媒介物中的2. 5%竹芋 淀粉用作供试物。大约3周后，当这些物质抑制白发的效力用肉眼看见时，收集新长出来的 毛发并测定这些毛发中黑色素的含量。使用蛋白酶EsperasdNovozymes)来测定这些毛发 中黑色素的含量。通过将Esperase溶于缓冲液(50mM Tris_HCl，5mM DTT, ρΗ 9. 3)，将反 应缓冲液制成INPU/mL的浓度。将5mg的小鼠毛发加入到ImL的反应缓冲液中，在37°C在 1，OOOrpm振摇下，反应13小时。然后，通过离心立即将毛发与反应溶液分离。将如此获得 的反应溶液置于96孔板中，并在405nm下测量吸光度，以测定反应溶液中黑色素的含量。
图3显示了用阴性对照物、阳性对照物和供试物治疗毛发变白导致的白斑小鼠后 的肉眼观察和毛发中黑色素测定的结果。图3a显示施用3周后小鼠后背上生长的毛发的 照片。图3b的图表显示生长的毛发中黑色素的含量。如图3所示，竹芋淀粉在毛发变白导 致的小鼠中在体预防白发并提高毛发中黑色素的含量。本文公开的组合物可以如下制备。但是，下述制备例并不是为了限制本发明。制备例1 洗发香波 制备例2 护发素 制备例3 头皮牛发油 制备例4 头皮精华 制备例5 软膏剂 制备例6 洗剂 虽然已经展示和描述了示例性的实施方案，但本领域的技术人员会理解，在不背 离所附权利要求所限定的本发明的精神和范围的情况下，可以对本发明作出各种形式和细 节方面的变化。此外，在不背离本发明的基本范围的情况下，在本发明的教导下，可以对本发明进 行许多修改，以适应特定的情况或材料。因此，本发明不限于所公开的作为用于实施本发明 的最佳方式的示例性实施方案，而是包括所有落入所附权利要求的范围内的实施方案。
权利要求
用于预防白发的组合物，其含有竹芋淀粉作为活性成分。
2.如权利要求1所述的用于预防白发的组合物，其通过提高黑素细胞中小眼相关性转 录因子(MITF)的表达来提高毛发中黑色素的生成。
3.如权利要求1所述的用于预防白发的组合物，其通过提高黑素细胞中酪氨酸酶的表 达来提高毛发中黑色素的生成。
4.如权利要求1-3任一项所述的用于预防白发的组合物，其施用于头皮或毛发。
5.如权利要求4所述的用于预防白发的组合物，其被制备成香波、润发露、护发素、生 发油或头皮精华的形式。
6.用于治疗白斑的组合物，其含有竹芋淀粉作为活性成分。
7.如权利要求6所述的用于治疗白斑的组合物，其通过提高黑素细胞中MITF的表达来 提高毛发中黑色素的生成。
8.如权利要求6所述的用于治疗白斑的组合物，其通过增强黑素细胞中酪氨酸酶的表 达来提高毛发中黑色素的生成。
全文摘要
本发明公开了用于预防白发和治疗白斑的组合物，其含有竹芋淀粉作为活性成分。所述用于预防白发和治疗白斑的组合物提高黑素细胞中小眼相关性转录因子(MITF)的表达，进而活化黑素细胞并提高黑色素的合成。
文档编号A61K36/488GK101868244SQ200880117377
公开日2010年10月20日 申请日期2008年11月20日 优先权日2007年11月21日
发明者D-j·闵, I-S·张, J-S·黄, N-H·朴, W-S·朴 申请人:株式会社太平洋