免疫调节化合物在治疗与内皮功能障碍有关的紊乱中的用途的制作方法

专利名称：免疫调节化合物在治疗与内皮功能障碍有关的紊乱中的用途的制作方法
技术领域：
本发明提供了治疗、预防或控制各种与内皮功能障碍有关的紊乱的方法。还提供 了使用免疫调节化合物以及任选的其它第二活性剂的药物组合物和给药方案。
2.
背景技术：
2. 1内皮功能障碍内皮功能障碍是由内皮(衬在血管如动脉和静脉内表面的细胞)进行的正常生化 过程的生理障碍。内皮功能障碍的特征在于内皮细胞正常功能受到损害，所述内皮细胞功 能包括介导凝结、血小板吸附、免疫功能、控制血管内和血管外空间的体积和电解质含量。尽管多种因素可导致内皮功能障碍，其中一种因素是内皮祖细胞(“EPC")至功 能性内皮细胞的分化受到损伤。一般而言，现在通常使用两种治疗方法来增加EPC，从而加 强向功能性内皮细胞的分化。第一种方法涉及使用生长因子如GM-CSF、G-CSF或VEGF，或 者小分子如抑制素来扩增和动员EPC。第二种方法涉及通过静脉输注进入周身循环或在局 部缺血位点主动脉内灌注来移植EPC。尽管这些方法可能取得不同程度的成功，仍需要促进EPC分化成为正常和功能性 内皮细胞的有效方法。2. 2免疫调节药物为提供能够安全有效地治疗与TNF-α异常生成相关的疾病的化合物，人 们已经进行了 一系列研究。例如，参见Marriott, J. B.，等人，Expert Opin. Biol. Ther. 1 (4) 1-8 (2001) ；G. W. Muller,等人·，Journal of MedicinalChemistry 39(17) 3238-3240(1996)；以及 G. W. Muller，等人.，Bioorganic Medicinal Chemistry Letters 8 =2669-2674(1998)。一些研究关注于一组由于其有效抑制LPS刺激PBMC生成TNF-α的能 力而被选择的化合物。L. G. Corral，等人· ,Ann. Rheum. Dis. 58 (SupplI) 1107-1113(1999)。 这些被称为免疫调节药物的化合物不仅有效抑制了 TNF-α，还显著抑制了 LPS诱导的单核 细胞ILl β和IL12的生成。LPS诱导的IL6也被免疫调节化合物所抑制，尽管是部分抑制。 这些化合物是LPS诱导的ILlO的有效刺激素。免疫调节药物的部分示例包括但不限于， G. W. Muller等人在美国专利号6，281，230和6，316，471中描述的取代的2- (2,6- 二氧代哌 啶-3-基)邻苯二甲酰亚胺和取代的2-(2，6- 二氧代哌啶-3-基)-1_氧代异吲哚。3.发明概述本发明提供了促进EPC分化成为功能性内皮细胞的方法。在一个实施方式中，该 方法包括任选地在生长因子(例如，但不限于，VEGF、FGF和SCF)存在下将此处提供的免疫 调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物(例如，水合物)、立体异构体或前药与EPC接 触。在另一实施方式中，该方法包括向患有或可能患有内皮功能障碍的患者施用有效量的 此处提供的免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物(例如，水合物)、立体异构体 或前药，任选地联合使用生长因子，例如但不限于，VEGF, FGF和SCF。
本发明还提供了治疗和预防各种与内皮功能障碍有关的紊乱的方法。该方法包括 向患者施用治疗或预防有效量的免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物(例如， 水合物)、立体异构体或前药。本发明还提供了控制各种与内皮功能障碍有关的紊乱的方法，其包括向患者施用 治疗或预防有效量的此处提供的免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物、立体异 构体或前药。在一些实施方式中，免疫调节化合物与常规用于治疗、预防或控制与内皮功能障 碍有关的紊乱的疗法联合施用。这些常规疗法的实例包括但不限于，化学药剂和适合的免 疫疗法。本发明还提供了包含免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物、立体异构 体或前药以及第二或其它活性剂的药物组合物、单一单位剂型、给药方案和试剂盒。第二活 性剂包括药物的特定组合或“鸡尾酒”。
4.


图1是研究免疫调节化合物对CD133+祖细胞内皮分化的作用的方法示意图。图2显示了在免疫调节化合物2-氨基-N-(2_(3-甲基_2，6_ 二氧代哌 啶-3-基)-1，3- 二氧代异吲哚啉-4-基)乙酰胺氢氯化物存在下，被内皮生长因子分化的 ⑶133+细胞的形态。图3A是在生长因子和免疫调节化合物2-氨基-N-(2_(3-甲基_2，6_ 二氧代哌 啶-3-基)-1，3- 二氧代异吲哚啉-4-基)乙酰胺氢氯化物的存在下，或者仅生长因子的存在 下，被不同血清(FBS和HS:条件1 ；或者仅FBS 条件2)分化的CD133+细胞表型的一览表。图3B显示了在标明的各种条件下VEGFR-2 (KDR)的表面表达。图3C显示了在标明的各种条件下VE-钙粘蛋白的表面表达。图3D是在标明的各种因子存在下⑶133+细胞分化的一览表。图4显示了向内皮细胞系分化的CD 133+细胞的功能鉴定。通过流式细胞仪测定， 在生长因子、0. 05%和0. 1%01^0、2-氨基4-(2-(3_甲基_2，6-二氧代哌啶-3-基)-1， 3- 二氧代异吲哚啉-4-基)乙酰胺氢氯化物、1-氧代-2- (2,6- 二氧代哌啶-3-基)-4-氨 基异吲哚啉以及沙利度胺存在下培养的UAEl-凝集素表达细胞对乙酰基LDL的重摄取。图5显示了在生长因子、2-氨基-N-(2_(3-甲基_2，6_ 二氧代哌啶_3_基)_1， 3- 二氧代异吲哚啉-4-基)乙酰胺氢氯化物、DMS0、1，3- 二氧代-2- (2，6- 二氧代哌 啶-3-基)-4-氨基异吲哚啉、1-氧代-2- (2,6- 二氧代哌啶-3-基)-4-氨基异吲哚啉以及 沙利度胺存在下培养的CD 133+细胞中内皮标记物的调节。在图2、3A、3B、3C、3D、4和5中，化合物1指2_氨基-N-(2-(3-甲基-2,6- 二氧代 哌啶-3-基)-1，3- 二氧代异吲哚啉-4-基)乙酰胺氢氯化物。5.发明详述在一个实施方式中，本发明提供了促进EPC分化成为功能性内皮细胞的方法。在 一个实施方式中，该方法包括任选地在生长因子(例如，但不限于，VEGF, FGF和SCF)存在 下将此处提供的免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物(例如，水合物)、立体异 构体或前药与EPC接触。在另一实施方式中，该方法包括向患有或可能患有内皮功能障碍的患者施用有效量的此处提供的免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物(例如， 水合物)、立体异构体或前药，任选地联合使用生长因子，例如，但不限于，VEGF、FGF和SCF。在另一实施方式中，本发明提供了治疗、控制和/或预防与内皮功能障碍有关的 紊乱的方法，其包括向患者施用治疗或预防有效量的此处提供的免疫调节化合物或其药学 可接受的盐、溶剂化物、立体异构体或前药。在一些实施方式中，所述免疫调节化合物与另一药物(“第二活性剂”)或者治疗、 控制和/或预防该种紊乱的方法联合使用。第二活性剂包括，但不限于，小分子和大分子 (例如，蛋白质和抗体)，此处提供了它们的实例。本发明还提供了可用于此处披露的方法的药物组合物(例如，单一单位剂型)。特 定的药物组合物包含此处提供的免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物、立体异 构体或前药以及第二活性剂。5. 1 定义除非另行指明，此处所用的术语“药学可接受的盐”包括该术语所指的化合物的无 毒性的酸和碱加成盐。可接受的无毒酸加成盐包括由本领域已知的有机和无机酸或碱(包 括，例如，盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、甲烷磺酸、醋酸、酒石酸、乳酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、 马来酸、山梨酸、乌头酸、水杨酸、酞酸、栓塞酸、庚酸等)所得的盐。天然呈酸性的化合物可与各种药学可接受的碱形成盐。可用于制备该种酸性化合 物的药学可接受碱加成盐的碱基为可形成无毒碱加成盐的碱基，即，包含药理学可接受阳 离子的盐，例如，但不限于，碱金属或碱土金属以及特别是钙、镁、钠或钾盐。适用的有机碱 包括，但不限于，N，N-二苄乙烯二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(N-甲基 葡萄糖胺)、赖氨酸以及普鲁卡因。除非另行指明，此处所用的术语“前药”指能在生物条件下(体外或体内)水解、 氧化或以其它方式反应提供该化合物的化合物衍生物。前药的实例包括，但不限于，包含 如可生物水解的酰胺基、可生物水解的酯、可生物水解的氨基甲酸盐、可生物水解的碳酸 盐、可生物水解的酰脲、以及可生物水解的磷酸盐类似物的可生物水解部分的免疫调节化 合物。前药的其它实例包括包含-NO、-NO2, -ONO或-ONO2部分的免疫调节化合物的衍生 物。前药通常可通过公知技术进行制备，例如可参见Burger' s MedicinalChemistry and Drug Discovery, 172-178,949-982 (Manfred Ε. Wolff ed.，5thed. 1995)以及 Design of Prodrugs(H. Bundgaard ed. , Elselvier, New Yorkl985)。除非另行指明，此处所用的术语可“生物水解的酰胺”、“可生物水解的酯”、“可生 物水解的氨基甲酸盐”、“可生物水解的碳酸盐”、“可生物水解的酰脲”以及“可生物水解的 磷酸盐”分别指具有以下特征的化合物的酰胺、酯、氨基甲酸盐、碳酸盐、酰脲以及磷酸盐 1)不干扰该化合物的生物活性，但可赋予该化合物摄取、作用时间或作用开始等有利特性； 或者2)无生物活性，但在体内可转化为生物活性化合物。可生物水解的酯的实例包括，但 不限于，低级烷基酯、低级酰氧基烷基酯(例如乙酰氧基甲基、乙酰氧基乙基、氨基羧甲基、 戊酰氧基甲基以及戊酰氧基乙基酯)、内酰基酯(例如酞酸酯和硫酞酸酯)、低级烷氧基酰 氧基烷基酯(例如，甲氧基羧甲基、乙氧基羧乙基以及异丙氧基羧乙基酯)、烷氧基烷基酯、 胆碱酯以及酰氨基烷基酯(例如，乙酰氨甲基酯)。可生物降解的酰胺的实例包括，但不限 于，低级烷基酰胺、α-氨基酸酰胺、烷氧酰基酰胺以及烷氨烷羰基酰胺。可生物水解氨基
6甲酸盐包括，但不限于，低级烷胺基、取代乙撑二胺、氨基酸、羟烷胺基、杂环和杂芳环胺以 及聚醚胺。用于所述方法和组合物的免疫调节化合物具有手性中心，因此可以作为R和S对 映体的外消旋混合物存在。此处提供的方法和组合物包括了该化合物立体异构纯形式的使 用，以及这些形式的混合物的使用。例如，含有等量或不等量对映体的混合物可用于本发明 提供的方法和组合物。这些异构体可通过如手性柱或手性拆分剂等标准技术进行不对称合 成或拆分° 例如，参见 Jacques, J.,等人，Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, New York, 1981) ；Wilen，S. H.，等人，Tetrahedron 33:2725(1977) ；Eliel, Ε. L. ,Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw Hill,NY, 1962)；以及 Wilen, S. H., Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions第268页(E. L. Eliel,Ed. ,Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN,1972)。除非另行指明，此处所用的术语“立体异构纯的”指主要包含一种立体异构体而基 本没有另一立体异构体的化合物。例如，具有一个手性中心的立体异构纯的化合物主要包 含一种对映异构体而基本不含相对的对映异构体。具有两个手性中心的立体异构纯的化 合物主要包含一种立体异构体(例如，非对映异构体)，并基本不含该化合物的其它非对映 异构体。典型的立体异构纯的化合物包含重量含量大于约80%的该化合物的一种立体异 构体和重量含量少于约20%的该化合物另一立体异构体、重量含量大于约90%的该化合 物的一种立体异构体和重量含量少于约10%的该化合物另一立体异构体、重量含量大于约 95%的该化合物的一种立体异构体和重量含量少于约5%的该化合物另一立体异构体、或 者重量含量大于约97%的该化合物的一种立体异构体和重量含量少于约3%的该化合物 另一立体异构体。除非另行指明，此处所用的术语“立体异构富集的”指包含重量含量大于 约55%、重量含量大于约60%、重量含量大于约70%或重量含量大于约75%的化合物的一 种立体异构体的组合物。除非另行指明，此处所用的术语“光学纯”指具有一个手性中心的 化合物的立体异构纯组合物。类似地，术语“对映体富集的”指具有一个手性中心的化合物 的立体异构富集的组合物。换言之，本发明提供的方法包括使用免疫调节化合物的R或S 对映体。除非另行指明，此处所用的术语“治疗”指在特定疾病的症状发作后，施用此处提 供的化合物，联合使用或不联合使用其它额外的活性剂。除非另行指明，此处所用的术语“预防”指在症状发作前，特别对于具有罹患内皮 功能障碍和/或与之相关的紊乱的风险的患者，施用免疫调节化合物或用免疫调节化合物 治疗，联合使用或不联合使用其它额外的活性化合物。术语“预防”包括对特定疾病的症状 的抑制或减少。在特定的实施方式中，具有疾病家族史的患者被特别作为预防性方案的候 选者。此外，具有复发症状史的患者也是潜在的预防候选者。就此而言，术语“预防”可与 术语“预防性治疗”互换使用。除非另行指明，此处所用的术语“控制”包括为了预防或最小化疾病的复发和/或 减少患者的死亡率而治疗患有特定疾病的患者。5. 2免疫调节化合物除非另行指明，此处所用的术语“免疫调节化合物”包括抑制LPS诱导的单核细胞 TNF-α、IL-I β、IL-12、IL-6、MIP-la、MCP-l、GM-CSF、G_CSF 和 C0X-2 生成的特定小有机分子。下文讨论了具体的免疫调节化合物。TNF-α是一种在急性炎症过程中由巨噬细胞和单核细胞生成的炎症细胞因子。 TNF-α负责细胞内众多信号转导事件。不希望受限于特定理论，此处提供的免疫调节化合 物发挥的生物作用之一是减少骨髓细胞TNF-α生成。此处提供的免疫调节化合物可增加 TNF- α mRNA 的降解。免疫调节化合物的具体实例包括例如披露于美国专利号5，929，117中的取代的 苯乙烯的氰基和羧基衍生物；例如披露于美国专利号5，874，448和5，955，476中的1_氧 代-2-(2，6- 二氧代-3-氟哌啶-3-基)异吲哚啉和1，3_ 二氧代-2-(2，6- 二氧代-3-氟 哌啶-3-基)异吲哚啉；美国专利号5，798，368中披露的四取代的2- (2，6- 二氧代哌 啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉；1-氧代和1，3- 二氧代-2- (2,6- 二氧代哌啶-3-基)异吲哚 啉(例如，沙利度胺的4-甲基衍生物)、取代的2-(2，6-二氧代哌啶-3-基)酞酰亚胺和取 代的2-(2，6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉，包括但不限于美国专利号5，635，517、 6，281，230,6, 316，471,6, 403，613,6, 476，052 和 6，555，554 中披露的那些；美国专利号 6，380，239中所述的在吲哚啉环4或5位取代的1_氧代和1，3_ 二氧代异吲哚啉(例如， 4-(4-氨基-1，3- 二氧代异吲哚啉-2-基)-4-甲氨酰丁酸)；美国专利号6，458，810所述 的在2位以2，6- 二氧代-3-羟基哌啶-5-基取代的异吲哚啉-1-酮和异吲哚啉-1，3- 二 酮(例如，2-(2，6_ 二氧代-3-羟基-5-氟哌啶-5-基)-4_氨基异吲哚啉-1-酮)；美国专 利号5，698，579和5，877，200中披露的一类非多肽环酰胺；以及异吲哚啉-酰亚胺化合物， 例如描述于2003年3月6日公布的美国专利申请公布号2003/0045552、2003年5月22日 公布的美国专利申请公布号2003/0096841以及国际申请号PCT/US01/50401 (国际公布号 W002/059106)中的那些。此处指出的各专利和专利申请的全文在此引用作为参考。免疫调 节化合物不包括沙利度胺。此处提供的各种免疫调节化合物包含一个或多个手性中心，并可作为对映体 外消旋混合物或非对映体混合物存在。此处的方法和组合物包括了该化合物立体异构 体纯形式的使用，以及这些形式的混合物的使用。例如，含有等量或不等量的特定免疫 调节化合物对映体的混合物可用于此处提供的方法和组合物。这些异构体可通过如 手性柱或手性拆分剂等标准技术进行不对称合成或拆分。例如，参见Jacques，J.，等 人，Enantiomers, Racematesand Resolutions(Wiley Interscience, New York,1981)； ffilen, S. H.,等 人’ Tetrahedron 33 2725 (1977) ；Eliel, Ε. L. , Stereochemistry of CarbonCompounds (McGraw Hill,NY, 1962)；以及Wilen, S. H. , Tables of ResolvingAgents and Optical Resolutions 第 268 页(Ε. L. Eliel, Ed. , Univ. of Notre DamePress, Notre Dame,IN, 1972)。在一个实施方式中，提供的免疫调节化合物包括，但不限于，以氨基在苯环上取 代的1-氧代和1，3_ 二氧代-2-(2，6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚啉，参见美国专利号 5，635，517，在此引入作为参考。这些化合物具有结构I 其中X和Y之一为C = 0，X和Y的另一个为C = 0或CH2,而R2为氢或低级烷基， 特别是甲基。具体的免疫调节化合物包括，但不限于
1-氧代-2- (2，6- 二氧代哌啶-3-基)-4-氨基异吲哚啉；
1，3- 二氧代-2- (2,6- 二氧代哌啶-3-基)-4-氨基异吲哚
1,3- 二氧代-2- (3-甲基-2，6- 二氧代哌啶-3-基)-4-氨
基异吲哚，以及其光学纯异构体。所述化合物可通过标准合成方法获取(例如参见美国专 利号5，635，517，在此引用作为参考)。所述化合物还可从CelgeneCorporation，Warren, NJ购得。其它具体免疫调节化合物属于一类取代的2-(2，6_ 二氧代哌啶-3-基)邻苯二 甲酰亚胺和取代的2-(2，6_ 二氧代哌啶3-基)-1_氧代异吲哚，例如可参见美国专利号 6，281，230,6, 316，471,6, 335，349 和 6，476，052，以及国际专利申请号 PCT/US97/13375 (国 际公布号WO 98/03502)，分别在此引入作为参考。代表性的化合物具有化学式 其中X和Y之一为C = 0，X禾口 Y另一个为C = 0或CH2 ；(i)R1、R2、R3和R4各自独立地为卤素、1至4个碳原子的烷基、或1至4个碳原子 的烷氧基，或者(ii) R\R2> R3和R4之一为-NHR5且R1、R2、R3和R4中剩余的为氢；R5为氢或1至8个碳原子的烷基；R6为氢、1至8个碳原子的烷基、苯甲基或卤素；
及其药学可接受的盐、水合物、溶剂化物、笼形化合物、对映体、非对映体、外消旋 体或立体异构体混合物，其中X和Y之一为C = 0，另一个为CH2或0 = 0 ；R1为H、(C1-C8)烷基、(C3-C7)环烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、苯甲基、芳基、 (C0-C4)烷基-(CfC6)杂环烷基、(C0-C4)烧基-(C2-C5)杂芳基、C(O) R3、C (S)R3、C(O) OR4、 (C1-C8)烧基-N(R6)2、(C1-C8)烷基-OR5、(C1-C8)烷基-C(O) OR5、C(O) NHR3、C(S)NHR3, C(O) NR3R3 ‘ ,C(S) NR3R3 ‘或(C1-C8)烷基-0 (CO) R5 ；R2 为 H、F、苯甲基、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基或(C2-C8)炔基；R3 和 R3'独立地为(C1-C8)烷基、(C3-C7)环烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、 苯甲基、芳基、(C0-C4)烷基-(C1-C6)杂环烷基、(C0-C4)烷基-(C2-C5)杂芳基、(C0-C8)烧 基-N(R6)2、(C1-C8)烷基-OR5、(C1-C8)烷基-C(O) OR5、(C1-C8)烷基-0 (CO) R5 或 C (0) OR5 ；R4 为(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2_C8)炔基、(C1-C4)烷基-0R5、苯甲基、芳基、 (C0-C4)烷基-(C1-C6)杂环烷基或(Ctl-C4)烷基-(C2-C5)杂芳基；R5为(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、苯甲基、芳基或(C2-C5)杂芳基；R6每次出现独立地为H、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、苯甲基、芳基、 (C2-C5)杂芳基或(Ctl-C8)烷基-C(O)O-R5,或者R6基团可联合形成杂环烷基基团； 当X 和 Y 为 C = 0，且(i) R1、R2、R3 和 R4 每一个为氟或者(ii) R1、R2、R3 或 R4 之一
为氨基时，R6不是氢。代表这一类的化合物具有化学式 其中R1为氢或甲基。在另一个实施方式中，本发明提供的方法和组合物包括使用 这些化合物的光学纯形式(例如，光学纯的(R)或(S)对映体)。其它特定免疫调节化合物属于一类异吲哚-酰亚胺，披露于美国专利申请公布号 US 2003/0096841 和 US 2003/0045552,以及国际申请号 PCT/US01/50401 (国际公布号 WO 02/059106)，分别在此引入作为参考。代表性的化合物具有化学式II
η 为 0 或 1 ；且*代表手性-碳中心。在式II的具体化合物中，当η为0时，R1为(C3-C7)环烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8) 炔基、苯甲基、芳基、(Ctl-C4)烷基-(C1-C6)杂环烷基、(Cq-C4)烷基-(C2-C5)杂芳基、C(0)R3、 C(O) OR4^(C1-C8)烷基-N (R6)2、(C1-C8)烷基-OR5、(C1-C8)烷基-C (0) OR5、C (S) NHR3 或(C1-C8) 烷基-O(CO)R5 ；R2 为 H 或(C1-C8)烷基；且R3为(C1-C8)烷基、(C3-C7)环烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、苯甲基、芳基、 (C0-C4)烷基-(C1-C6)杂环烷基、(C0-C4)烷基-(C2-C5)杂芳基、(C5-C8)烷基-N (R6)2、(C0-C8) 烷基-NH-C (0) O-R5、(C1-C8)烷基-OR5、(C1-C8)烷基-C (0) OR5、(C1-C8)烷基-0 (CO) R5 或 C (0) OR5 ；且其它的变体具有相同的定义。在式II的其它具体化合物中，R2为H或(C1-C4)烷基。在式II的其它具体化合物中，R1为(C1-C8)烷基或苯甲基。在式II的其它具体化合物中，R1为H、(C1-C8)烷基、苯甲基、CH20CH3、CH2CH2OCH3或 在式II的化合物的另一实施方式中，R1为 其中Q为0或S，且每个R7独立地为H、(C1-C8)烷基、(C3-C7)环烷基、(C2-C8)烯基、 (C2-C8)炔基、苯甲基、芳基、卤素、(Ctl-C4)烷基-(C1-C6)杂环烷基、(Cq-C4)烷基-(C2-C5)杂 芳基、(C0-C8)烷基-N(R6)2、(C1-C8)烷基-OR5、(C1-C8)烷基-C(O) OR5、(C1-C8)烷基-O(CO) R5、或C(0)0R5、或邻近的R7结合形成二环烷基或芳基环。在式II的其它具体化合物中，R1为C(0)R3。在式II的其它具体化合物中，R3为(Ctl-C4)烧基-(C2-C5)杂芳基、(C1-C8)烷基、 芳基或(Ctl-C4)烷基-0R5。在式II的其它具体化合物中，杂芳基为吡啶基、呋喃基或噻吩基。在式II的其它具体化合物中，R1为C(O)R4。在式II的其它具体化合物中，C(O)NHC(O)的H可被(C1-C4)烷基、芳基或苯甲基 所替换。这类化合物的其它实例包括，但不限于[2- (2,6- 二氧代-哌啶-3-基)-1，3_ 二 氧代-2，3- 二氢-IH-异吲哚-4-基甲基]-酰胺、(2- (2，6- 二氧代-哌啶-3-基)-1，3- 二 氧代-2，3-二氢-IH-异吲哚-4-基甲基)-氨基甲酸叔丁酯、4-(氨甲基)-2-(2，6_ 二氧代 (3-哌啶基))-异吲哚啉-1，3- 二酮、N- (2- (2,6- 二氧代-哌啶-3-基)_1，3- 二氧代-2， 3- 二氢-IH-异吲哚-4-基甲基)-乙酰胺、N- {(2- (2,6- 二氧代(3-哌啶基)-1，3- 二氧 代异吲哚啉-4-基)甲基}环丙基-甲酰胺、2-氯-N- {(2- (2,6- 二氧代(3-哌啶基))-1， 3-二氧代异吲哚啉-4-基)甲基}乙酰胺、N-(2-(2，6-二氧代(3-哌啶基))-1，3_ 二氧代异吲哚啉-4-基)-3_吡啶基甲酰胺、3-{1-氧代_4-(苄基氨基)异吲哚啉_2_基}哌啶-2， 6-二酮、2-(2，6_ 二氧代(3-哌啶基))-4-(苄基氨基)异吲哚啉-1，3-二酮、N-{(2-(2， 6-二氧代(3-哌啶基))-1，3-二氧代异吲哚啉-4-基)甲基}丙酰胺、N-{(2-(2，6-二氧代 (3-哌啶基))-1，3-二氧代异吲哚啉-4-基)甲基}-3_吡啶基甲酰胺、N-{(2-(2，6-二氧代 (3-哌啶基))-1，3-二氧代异吲哚啉-4-基)甲基}庚酰胺、N-{(2-(2，6-二氧代(3-哌啶 基))-1，3-二氧代异吲哚啉-4-基)甲基}-2_呋喃基甲酰胺、{N-(2-(2，6-二氧代(3-哌 啶基))_1，3-二氧代异吲哚啉-4-基)氨甲酰基}甲基乙酸酯、N-(2-(2，6-二氧代(3-哌 啶基))_1，3-二氧代异吲哚啉-4-基)戊酰胺、N-(2-(2，6-二氧代(3-哌啶基))-1，3_ 二 氧代异吲哚啉-4-基)-2_噻吩基甲酰胺、N-{[2-(2，6- 二氧代(3-哌啶基))_1，3_ 二氧代 异吲哚啉-4-基]甲基} (丁氨基)甲酰胺、N-{[2-(2，6-二氧代(3-哌啶基))-1，3_ 二氧 代异吲哚啉-4-基]甲基}(辛氨基)甲酰胺、以及N-{[2-(2，6-二氧代(3-哌啶基))-1， 3-二氧代异吲哚啉-4-基]甲基}(苄基氨基)甲酰胺。其它具体免疫调节化合物属于异吲哚_酰亚胺类，披露于美国专利申请公布号US 2002/0045643、国际公布号WO 98/54170以及美国专利号6，395，754中，分别在此引入作为
参考。代表性的化合物具有化学式III 及其药学可接受的盐、水合物、溶剂化物、笼形化合物、对映体、非对映体、外消旋 体或立体异构体混合物，其中X和Y之一为C = 0，另一个为CH2或0 = 0;R 为 H 或 CH2OCOR'；(i)R1、R2、R3或R4各自独立地为卤素、1至4个碳原子的烷基、或1至4个碳原子 的烷氧基，或者(ii) R1、R2、R3或R4之一为硝基或-NHR5，且R1、R2、R3或R4中剩余的为氢；R5为氢或1至8个碳的烷基；R6为氢、1至8个碳原子的烷基、苯、氯或氟；R'为 R7-CHRici-N(R8R9)；R7为间苯撑基或对苯撑基或-(CnH2n)-,其中η的值介于0至4 ；R8和R9各自独立地为氢或1至8个碳原子的烷基，或者R8和R9共同形成四亚甲 基、五亚甲基、六亚甲基或-CH2CH2X1CH2CH2-，其中X1为_0_，-S-或-NH-；R10为氢、1至8个碳原子的烷基、或苯基；且*代表手性-碳中心。其它代表性的化合物具有化学式
其中 (i)R1、R2、R3或R4各自独立地为卤素、1至4个碳原子的烷基，或是1至4个碳原 子的烷氧基，或者(ii) R1、R2、R3和R4之一为-NHR5，且R1、R2、R3和R4中剩余的为氢；R5为氢或1至8个碳原子的烷基；R6为氢、1至8个碳原子的烷基、苯、氯或氟；R7为间苯撑基或对苯撑基或-(CnH2n)-,其中η的值介于0至4 ；R8和R9各自独立地为氢或1至8个碳原子的烷基，或者R8和R9共同形成四亚甲 基、五亚甲基、六亚甲基或-CH2CH2X1CH2CH2-，其中X1为_0_、-S-或-NH-；且Rltl为氢、1至8个碳原子的烷基、或苯基。其它代表性的化合物具有化学式 其中 (i)R1、R2、R3和R4各自独立地为卤素、1至4个碳原子的烷基、或1至4个碳原子 的烷氧基，或者(ii) R1、R2、R3和R4之一为硝基或受保护的氨基，且R1、R2、R3和R4中剩余的 为氢；且R6为氢、1至8个碳原子的烷基、苯、氯或氟。其它代表性的化合物具有化学式其中X和Y之一为C = 0，X和Y另一个为C = 0或CH2 ；(i)R1、R2、R3和R4各自独立地为卤素、1至4个碳原子的烷基、或1至4个碳原子 的烷氧基，或者(ii) R1、R2、R3和R4之一为-NHR5，且R1、R2、R3和R4中剩余的为氢；R5为氢、1至8个碳原子的烷基、或CO-R7-CH(Riq) NR8R9,其中R7、R8、R9和R10分别如 此处所定义；且
R6为1至8个碳原子的烷基、苯、氯或氟。所述化合物的具体实例具有化学式 其中X和Y之一为C = 0，X禾口 Y另一个为C = 0或CH2 ；R6为氢、1至8个碳原子的烷基、苯甲基、氯或氟；R7为间苯撑基、对苯撑基或-(CnH2n)-,其中η的值介于0至4 ;R8和R9各自独立 地为氢或1至8个碳原子的烷基，或者R8和R9共同形成四亚甲基、五亚甲基、六亚甲基 或-CH2CH2X1CH2CH2-，其中 X1 为 _0_、-S-或-NH-；且R10为氢、1至8个碳原子的烷基、或苯基。其它具体免疫调节化合物包括，但不限于，1-氧代-2-(2，6_ 二氧代-3-氟哌 啶-3-基)异吲哚啉和1，3-二氧代-2-(2，6-二氧代-3-氟哌啶-3-基)异吲哚啉，例如 美国专利号5，874，448和5，955，476中的化合物，各专利的全文在此引入作为参考。代表
性的化合物具有化学式 其中Y为氧或H2，且Ri、R2、R3和R4各自独立地为氢、卤素、1至4个碳原子的烷烃、1至4个碳原子的烷
氧基、或氨基。其它具体免疫调节化合物包括，但不限于，描述于美国专利号5，798，368 (在此引 入作为参考)的四取代2-(2，6_ 二氧代哌啶-3-基)-1_氧代异吲哚啉。代表性的化合物
具有化学式 其中，R1、R2、R3和R4各自独立地为卤素、1至4个碳原子的烷基、或1至4个碳原 子的烷氧基。其它具体免疫调节化合物包括，但不限于，描述于美国专利号6，403，613 (在此引 入作为参考)的1-氧代和1，3_ 二氧代-2-(2，6-二氧代哌啶-3-基)异吲哚啉。代表性的化合物具有化学式
其中Y 为氧或 H2,R1和R2之一为卤素、烷基、烷氧基、烷氨基、二烷氨基、氰基或氨甲酰基，R1和R2中 的另一个，独立于前一个，为氢、卤素、烷基、烷氧基、烷氨基、二烷氨基、氰基或氨甲酰基，且R3为氢、烷基或苯甲基。所述化合物的具体实例具有化学式 其中，R1和R2之一为卤素、1至4个碳原子的烷基、1至4个碳原子的烷氧基、二烷氨基 (其中每个烷基均为1至4个碳原子)、氰基或氨甲酰基；R1和R2中的另一个，独立于前一个，为氢、卤素、1至4个碳原子的烷基、1至4个
碳原子的烷氧基、烷氨基(其中烷基为1至4个碳原子)、二烷氨基(其中各烷基为1至4 个碳原子)、氰基或氨甲酰基，且R3为氢、1至4个碳原子的烷基、或苯甲基。具体实例包括，但不限于1-氧代_2-(2， 6- 二氧代哌啶-3-基)-4-甲基异吲哚啉。其它代表性的化合物具有化学式 其中R1和R2之一为卤素、1至4个碳原子的烷基、1至4个碳原子的烷氧基、二烷氨基 (其中每个烷基均为1至4个碳原子)、氰基或氨甲酰基；R1和R2中的另一个，独立于前一个，为氢、卤素、1至4个碳原子的烷基、1至4个 碳原子的烷氧基、烷氨基(其中烷基为1至4个碳原子)、二烷氨基(其中各烷基为1至4 个碳原子)、氰基或氨甲酰基，且R3为氢、1至4个碳原子的烷基、或苯甲基。
其它具体免疫调节化合物包括，但不限于，在吲哚啉环的4或5位取代的1-氧代 和1，3-二氧代异吲哚啉，其描述参见美国专利号6，380，239以及2006年4月20日公布的 美国申请公布号2006/0084815 (在此引入作为参考)。代表性的化合物具有化学式 其中由Cf表示的碳原子构成手性中心(当η非零，且R1与R2不同时)J1和X2之 一为氨基、硝基、1至6个碳的烷基、或ΝΗ-Ζ，而X1或X2的另一个为氢；R1和R2各自独立地 为羟基或NH-Z ；R3为氢、1至6个碳的烷基、卤素或卤烷基；Z为氢、芳基、1至6个碳的烷基、 甲酰基、或1至6个碳的酰基；而η的值为0、1或2 ；条件是如果X1为氨基，而η为1或2， 则R1和R2不同时为羟基；及其盐。其它代表性的化合物具有化学式 其中由Cf表示的碳原子构成手性中心(当η非零，且R1与R2不同时)J1和X2之 一为氨基、硝基、1至6个碳的烷基、或ΝΗ-Ζ，而X1或X2的另一个为氢；R1和R2各自独立地 为羟基或NH-Z ；R3为1至6个碳的烷基、卤素或氢；Z为氢、芳基、或1至6个碳的烷基或酰 基；而η的值为0、1或2。具体实例包括，但不限于，2- (4-氨基-1-氧代-1，3- 二氢-异吲哚_2_基)_4_氨 甲酰基_ 丁酸和4- (4-氨基-1-氧代-1，3- 二氢-异吲哚-2-基)-4-氨甲酰基-丁酸(其 分别具有如下结构)，及其药学可接受的盐、溶剂化物、前药和立体异构体。
其它代表性的化合物具有化学式 其中由Cf表示的碳原子构成手性中心(当η非零，且R1与R2不同时)J1和X2之 一为氨基、硝基、1至6个碳的烷基、或ΝΗ-Ζ，而X1或X2的另一个为氢；R1和R2各自独立地 为羟基或NH-Z ；R3为1至6个碳的烷基、卤素、或氢；Z为氢、芳基、或1至6个碳的烷基或 酰基；而η的值为0、1或2 ；及其盐。具体的实例包括，但不限于，4-氨甲酰基-4- {4-[(呋喃-2-基-甲基)-氨基]-1， 3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基}-丁酸、4-氨甲酰基-2-{4-[(呋喃-2-基-甲基)-氨 基]-1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基}-丁酸、2-{4-[(呋喃-2-基-甲基)-氨 基]-1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基}-4_苯基氨甲酰基-丁酸以及2-{4_[(呋 喃-2-基-甲基)_氨基]-1，3- 二氧代-1，3- 二氢-异吲哚-2-基}-戊二酸(其分别具
有如下结构)，及其药学可接受的盐、溶剂化物、前药和立体异构体
化合物的其它具体实例具有化学式
-个为氢；
其中
X1和X2之一为硝基或ΝΗ-Ζ, X1和X2的另-R1和R2各自独立地为羟基或NH-Z ； R3为1至6个碳的烷基、卤素或氢； Z为氢、苯基、1至6个碳的酰基、或1至6个碳的烷基；且 η的值为0、1或2;且
如果-COR2与-(CH2)nCOR1不同，则由Cf表示的碳原子构成手性中心t 其它代表性的化合物具有化学式 其中X1和X2之一为1至6个碳的烷基；R1和R2各自独立地为羟基或NH-Z ；R3为1至6个碳的烷基、卤素或氢；Z为氢、苯基、1至6个碳的酰基、或1至6个碳的烷基；且η的值为0、1或2;且如果-COR2与-(CH2)nCOR1不同，则由C*表示的碳原子构成手性中心。其它具体免疫调节化合物包括，但不限于，美国专利号6，458，810 (在此引入作为 参考)所述的在2位以2，6- 二氧代-3-羟基哌啶-5-基取代的异吲哚啉-1-酮和异吲哚 啉-1，3-二酮。代表性的化合物具有化学式 其中由Cf表示的碳原子构成手性中心；X 为-C(O)-或-CH2-；R1为1至8个碳原子的烷基、或-NHR3 ；R2为氢、1至8个碳原子的烷基、或卤素；且R3 为氢，1至8个碳原子的烷基，被1至8个碳原子的烷氧基、卤素、氨基、或1至4个碳原 子的烷氨基取代或未取代，3至18个碳原子的环烷基，苯基，被1至8个碳原子的烷基、1至8个碳原子的烷氧基、卤素、氨基、或1至4个 碳原子的烷氨基取代或未取代，苯甲基，被1至8个碳原子的烷基、1至8个碳原子的烷氧基、卤素、氨基、或1至4 个碳原子的烷氨基、或-COR4取代或未取代，其中R4 为氢，1至8个碳原子的烷基，被1至8个碳原子的烷氧基、卤素、氨基、或1至4个碳原 子的烷氨基取代或未取代，3至18个碳原子的环烷基，苯基，被1至8个碳原子的烷基、1至8个碳原子的烷氧基、卤素、氨基、或1至4个 碳原子的烷氨基取代或未取代，或者苯甲基，被1至8个碳原子的烷基、1至8个碳原子的烷氧基、卤素、氨基、或1至4个碳原子的烷氨基取代或未取代。此处所述的所有化合物可从市场上购买或参照此处披露的专利或专利公布中描 述的方法进行制备。此外，光学纯的化合物可通过已知的拆分剂或手性柱以及其它标准合 成有机化学技术进行不对称合成或拆分。此处所用的化合物可以为分子量小于约lOOOg/mol的小有机分子，而非蛋白质、
肽、寡聚核苷酸、寡糖或其它大分子。应当指出如果在所示结构和赋予该结构的名称之间存在差异，则应当侧重所示的 结构。此外，如果一种结构或结构部分的立体化学未通过如粗线或虚线等线条标明，则该结 构或结构部分应解释为包含了其所有的立体异构体。5. 3治疗、预防和控制方法本发明提供了治疗、预防或控制内皮功能障碍和/或各种与内皮功能障碍有关的 紊乱的方法。不受特定理论的限制，EPC的动员是细胞和组织损伤修复过程中正常生理应 答的一部分。一些生理事件和响应因子将EPC驱动至血管再生位点，并使得EPC在体内分 化成为内皮细胞。此外不受特定理论限制，相信此处提供的免疫调节化合物可以以迅速和 可控的方式促进这些自然分化过程。本发明提供的方法包括向罹患或可能罹患内皮功能障碍和/或各种与内皮功能 障碍相关的各种紊乱(例如，此处提供的紊乱)的患者(例如，人类)施用此处提供的一种 或多种免疫调节化合物或药学可接受的盐、溶剂化物、立体异构体或前药。在本发明的一个实施方式中，此处提供的免疫调节化合物可以以约0. 10至约 150mg/天的量以每日单次剂量或分次剂量进行口服施用。在具体的实施方式中，4-(氨 基)-2-(2，6_ 二氧代(3-哌啶基))-异吲哚啉-1，3-二酮可以以约0. 1至约Img/天、或 以每隔一天约0. 1至约5mg的量进行施用。在另一实施方式中，3-(4_氨基-1-氧代-1， 3- 二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2，6- 二酮可以以约1至约25mg/天或以每隔一天约10至 约50mg的量进行施用。在另一特定实施方式中，2-氨基-N-(2-(3-甲基_2，6-二氧代哌 啶-3-基)-1，3_ 二氧代异吲哚啉-4-基)乙酰胺氢氯化物可以以约0. 10至约150mg/天 的量施用。在一个实施方式中，4-(氨基)-2-(2，6-二氧代(3_哌啶基))-异吲哚啉_1，3_ 二 酮可以以约1、2或5mg/天的量施用于患者。在特定的实施方式中，3-(4_氨基-1-氧代-1， 3- 二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2，6- 二酮的施用量最初为Img/天，然后剂量可每周逐步 上升至10、20、25、30和50mg/天。在另一实施方式中，3-(4-氨基-1-氧代-1，3- 二氢-异 吲哚-2-基)-哌啶-2，6-二酮可以以最大约30mg/天的量施用于患者。在另一实施方式 中，3- (4-氨基-1-氧代-1，3- 二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2，6- 二酮可以以最大约40mg/ 天的量施用于患者。在一个实施方式中，4-(氨基)-2-(2，6-二氧代(3_哌啶基))-异吲哚啉_1，3_ 二 酮可以以约0. 1至约Img/天、或以每隔一天约0. 1至约5mg的量施用于患者。在另一实施方式中，3-(4_氨基-1-氧代-1，3- 二氢-异吲哚_2_基)-哌啶_2， 6- 二酮可以以约1至约25mg/天、或以每隔一天约10至约50mg/天的量施用于患者。本发明还提供了通过离体(ex vivo)疗法治疗、预防、和/或控制内皮功能障碍和 /或各种与内皮功能障碍有关的紊乱的方法。该方法包括将EPC与免疫调节化合物接触，并将与免疫调节化合物接触的EPC施用(例如，接种)于患者。不受特定理论限制，相信此处 提供的免疫调节化合物可刺激或增强离体的EPC扩增，由此扩增的EPC可被施用于患者以 治疗、预防和/或控制内皮功能障碍和/或各种与之相关的紊乱，例如，此处提到的紊乱。通过此处提供的免疫调节化合物治疗、预防或控制的紊乱的实例包括，但不限于， 心血管紊乱，例如，但不限于，动脉压过高、体位性低血压、晕厥、动脉硬化、冠状动脉疾病、 心力衰竭、休克、心律失常、瓣膜性心脏病、心内膜炎、心包疾病、外周动脉疾病、心脏肿瘤、 以及大动脉和分支疾病；糖尿病；系统性硬化以及慢性肾衰竭。动脉压过高的实例包括，但不限于，肾血管性高血压和高血压性脑病。在一个实施 方式中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为动脉压过高。动脉硬化的实例包括，但不限于，动脉粥样硬化和非粥样动脉硬化。在一个实施方 式中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为动脉硬化。在一个实施方式中， 通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为非粥样动脉硬化。在一个实施方式中， 通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱不是动脉粥样硬化。心力衰竭的实例包括，但不限于，充血性心力衰竭、心肌症、慢性心力衰竭以及肺 动脉高血压。在一个实施方式中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为心力 衰竭。在一个实施方式中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为慢性心力衰 竭。在一个实施方式中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱不是充血性心力 衰竭或肺动脉高血压。瓣膜性心脏病的实例包括，但不限于二尖瓣疾病(例如，二尖瓣脱垂、二尖瓣回流 和二尖瓣狭窄)、主动脉瓣疾病(例如，主动脉回流、肺动脉返流、主动脉狭窄以及肺动脉狭 窄)和三尖瓣疾病(例如三尖瓣回流和三尖瓣狭窄)。在一个实施方式中，通过此处提供 的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为瓣膜性心脏病。在一个实施方式中，通过此处提供的 方法治疗、预防和/或控制的紊乱为二尖瓣疾病。在一个实施方式中，通过此处提供的方法 治疗、预防和/或控制的紊乱为主动脉瓣疾病。在一个实施方式中，通过此处提供的方法治 疗、预防和/或控制的紊乱为三尖瓣疾病。心内膜炎的实例包括，但不限于，感染性心内膜炎和非感染性心内膜炎。在一个实 施方式中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为心内膜炎。大动脉和其分支的疾病的实例包括，但不限于，动脉瘤、主动脉壁夹层形成、大动 脉炎(例如，高安氏动脉炎)以及大动脉及其分支的阻塞。在一个实施方式中，通过此处提 供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为大动脉和其分支的疾病。在一个实施方式中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为体位性 低血压。在一个实施方式中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为晕厥。在 一个实施方式中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为冠状动脉疾病。在一 个实施方式中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为休克。在一个实施方式 中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为心律失常。在一个实施方式中，通 过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为心包疾病(例如，心包炎)。在一个实施 方式中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为外周动脉疾病。在一个实施方式中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为糖尿病。 在另一实施方式中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为慢性肾衰竭。在一
20个实施方式中，通过此处提供的方法治疗、预防和/或控制的紊乱为系统性硬化。在另一实施方式中，此处提供的免疫调节化合物被用于促进伤口愈合。不受 特定理论限制，EPC已显示在伤口愈合中具有作用。例如，据报道血管生成和血管发生 可通过刺激骨髓衍生的祖细胞动员和归巢，诱导新血管的生长和刺激伤口愈合。(参见 Velazquez, Journal of Vascular Surgery, 45 (6) :A39_47 (2007))。在一个实施方式中， 免疫调节化合物被用于促进伤口愈合，该免疫调节化合物不是1-氧代-2-(2，6- 二氧代哌 啶-3-基)-4_甲基异吲哚啉。此处披露的免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物或前药的剂量可随多 种因素变化，例如待治疗、预防和/或控制的特定适应症；患者的年龄和状况；以及第二活 性剂(如有)的用量。一般而言，此处披露的免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化 物、立体异构体或其前药可以以约0. Img至约500mg/天的量使用，并可以以常规方式调节 (例如，在治疗、预防或控制周期内每天以相同的量使用)、周期施用(例如，用一周，停一 周)或在治疗、预防或控制过程中量增加或下降。在另一实施方式中，所述剂量可以为约Img至约300mg、为约0. Img至约150mg、为 约Img至约200mg、为约IOmg至约lOOmg、为约0. Img至约50mg、为约Img至约50mg、为约 IOmg至约50mg、为约IOmg至约25mg、为约20mg至约30mg、或为约Img至约20mg。5. 4与第二活性剂的联合疗法5. 4. 1第二活性剂在此处提供的方法和组合物中，免疫调节化合物可以与其它药理活性化合物(“第 二活性剂或成分”)联合使用。相信一些组合可在此处提供的方法中协同作用。免疫调节 化合物还可以减轻与一些第二活性剂相关的副作用，而一些第二活性剂可用于减轻与本发 明的免疫调节化合物相关的副作用。在此处所述的方法和组合物中，一种或多种第二活性成分或药剂可以同免疫调节 化合物一起使用。第二活性剂可以是大分子(例如，蛋白质)或小分子(例如，合成的无机 分子、有机金属分子或有机分子)。在一个实施方式中，在治疗、预防和/或控制心血管紊乱时，第二活性剂包括，但 不限于利尿剂，例如，但不限于，氢氯噻嗪、苄氟噻嗪、氯噻嗪、氯噻酮、氢氟甲噻嗪、茚磺苯 酰胺、甲氯噻嗪、美托拉宗、丁苯氧酸、利尿酸、利尿磺胺、托塞米、氨氯吡嗪脒、安体舒通、以 及氨苯蝶啶；阻断剂，例如，但不限于，醋丁洛尔、倍他洛尔、普萘洛尔、美托洛尔、阿替 洛尔、噻吗洛尔、比索洛尔、卡替洛尔、卡维洛尔、拉贝洛尔、纳多洛尔、喷布洛尔、和吲哚洛 尔；Ca通道阻断剂，例如，但不限于，硫氮草酮、维拉帕米、氨氯地平、非洛地平、依拉地平、 尼卡地平、硝苯地平和尼索地平；ACE抑制剂，例如，但不限于，贝那普利、卡托普利、恩纳普 利、福森普利、赖诺普利、莫昔普利、喹那普利、雷米普利、和群多普利；血管紧缩素受体阻断 剂，例如，但不限于，依贝沙坦、氯沙坦和缬沙坦；肾上腺素阻断剂，例如，但不限于，可乐定、 氯压胍、胍法辛、甲基多巴、拉贝洛尔、艾司洛尔、酚妥拉明、多沙唑嗪、派唑嗪、特拉唑嗪、胍 那决尔、胍乙啶、萝芙木碱、和利血平；血管扩张剂，例如，但不限于、硝普钠、尼卡地平、非 诺多巴、硝化甘油、依那普利拉、酰胼、二氮嗪、和米诺地尔；抗血小板活性剂，例如，但不限 于，阿斯匹林和噻氯匹啶；Na通道阻断剂，例如，但不限于，奎纳定、普鲁卡因酰胺、双异丙 吡胺、利多卡因、脉律定、托卡胺、莫里西嗪、苯妥英、氟卡胺、和普罗帕酮；钾通道阻断剂，例如，但不限于，胺碘酮、索他洛尔、和溴苄胺；抗生素，例如，但不限于，盘尼西林、阿莫西林、 氨比西林、氯洁霉素、头孢菌素、头孢羟氨苄、阿齐红霉素、克拉仙霉素、和头孢噻吩；及其混 合物。在一个实施方式中，在治疗、预防和/或控制糖尿病时，第二活性剂包括，但不限 于胰岛素；磺酰脲，例如，但不限于，甲苯磺丁脲、氯磺丙脲、醋磺环己脲、甲磺吖庚脲、格 列本脲和格列美脲；抗高血糖药，例如，但不限于，二甲双胍、阿卡玻糖、曲格列酮、和瑞格列 奈；及其混合物。在一个实施方式中，此处提供的免疫调节化合物可与生长因子例如，但不限于， VEGF、FGF和SCF联合施用。在一个实施方式中，免疫调节化合物可与其它治疗、预防或控制内皮功能障碍以 及此处提供的其它紊乱的医疗步骤联合使用。所述其它步骤的实例包括，但不限于，饮食限 制、锻炼、血管成形术、动脉插管以及外科手术。5. 4. 2联合疗法在一些实施方式中，所述免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物(例如， 水合物)、立体异构体、笼形化物或前药，与例如此处披露的一种或多种第二活性剂联合使 用和/或与例如此处披露的其它医疗步骤联合使用。免疫调节化合物和所述第二活性剂可通过相同或不同的给药途径同时或顺序向 患者施用。对于特定活性剂的具体施用途径的适宜性将取决于活性剂本身(例如，它是否 可以进行口服给药而不会在进入血流前或进入时分解)和待治疗的疾病。在一个实施方式 中，此处提供的免疫调节化合物通过口服施用。此处提供的第二活性剂或成分的典型给药 途径为本领域技术人员所公知。例如，参见Physicians Desk Reference, (2006)。还可以使用联合疗法，其中此处提供的免疫调节化合物与已知用于此处提供的紊 乱的治疗方案联合施用。此处提供的免疫调节化合物与常规疗法的联合使用可对一些患者 提供具有效的独特治疗方案。未受理论限定，据认为此处提供的免疫调节化合物在与其它 疗法同时使用时可提供加成或协同作用。在本发明的一个实施方式中，所述第二活性剂以约1至约l，000mg、约5至约 500mg、约10至约350mg、或约50至约200mg的量每日一次或每日两次静脉或皮下施用。所 述第二活性剂的具体数量将取决于所用的具体药剂、待治疗、预防或控制的疾病类型、疾病 的严重性和阶段以及同时向患者施用的本发明免疫调节化合物和任何选用的其它活性剂的量。在另一实施方式中，免疫调节化合物以约0. Img-约150mg/天的量与第二活性剂 联合施用于患者。本发明还提供了安全和有效提高施用于患者的治疗剂的剂量的方法，其包括向患 者(例如，人)施用此处提供的免疫调节化合物，或其药学可接受的盐、溶剂化物、立体异构 体或前药。可受益于这种方法的患者为可能发生与此处提供的治疗剂相关的副作用的患 者。施用此处提供的免疫调节化合物可减轻或减少副作用，否则该副作用的严重性将限制 治疗剂的量。在一个实施方式中，本发明的免疫调节化合物可在施用于患者的治疗剂的副作用 发生之前、同时或之后以每日约0. 1至约150mg、约1至约50mg以及约2至约25mg的量每日口服施用。在另一实施方式中，本发明提供了治疗、预防和/或控制此处提供的紊乱的方法， 其包括施用本发明的免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物、立体异构体或前药， 联合(例如，施用前、施用时或施用后)其它此处所述的医疗步骤。本发明的免疫调节化合 物与医疗步骤的联合使用可提供对一些患者具有意料不到的效果的独特治疗方案。未受理 论限定，据认为此处提供的免疫调节化合物在与所述步骤同时施用时可提供加成或协同作 用。例如，此处提供的免疫调节化合物可有效减少、治疗和/或预防与用于治疗内皮 功能障碍和其它此处所述紊乱的常规医疗步骤相关的副作用或不良作用。在一个实施方式 中，此处提供的一种或多种免疫调节化合物在与常规疗法相关的副作用发生前、发生时或 发生后被施用于患者。在一个实施方式中，本发明的免疫调节化合物可在传统疗法的使用之前、同时或 之后以每日约0. 1至约150mg、约1至约25mg、约2至约IOmg的量单独施用或与此处披露 的第二活性剂联合口服施用。5. 5周期疗法在一些实施方式中，此处披露的预防或治疗剂被周期性施用于患者。周期疗法包 括在一段时间内施用一种活性剂，随后停用一段时间，然后重复该顺序施用。周期疗法可减 少对一种或多种疗法的耐受性、避免或减少该疗法的副作用和/或提高治疗的效率。因此，在本发明的一个实施方式中，在四至六周的周期中，此处提供的免疫调节化 合物以每日单次或分次剂量施用，并具有约一至两周的停用期。在其它实施方式中，可增加 给药周期的频率、次数和长度。因此，此处还提供了比通常情况施用更多周期的免疫调节化 合物。在另一个实施方式中，免疫调节化合物施用的周期数超过在未施用第二活性成分的 患者中引起剂量限制性毒性的通常周期数。在一个实施方式中，此处提供的免疫调节化合物以约0. 1至约150mg/天的剂量每 日施用连续三或四周并继以一或两周的停用。4-(氨基)-2-(2，6_二氧代(3-哌啶基))-异 吲哚啉-1，3- 二酮优选每天施用，初始剂量为0. 1至5mg/天，只要该疗法允许，剂量逐步上 升至1至IOmg/天(每周)直到最大剂量为50mg/天。在一个特定实施方式中，在一个四 或六周的周期中，3-(4_氨基-1-氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2，6-二酮以约 1、5、10或25mg/天，优选约IOmg/天的量施用三至四周，再继以一周或两周的停用。在一个实施方式中，在一个四至六周的周期中，此处提供的免疫调节化合物与一 种第二活性成分通过口服施用，免疫调节化合物在施用第二活性成分前30至60分钟施 用。在另一实施方式中，此处提供的免疫调节化合物与第二活性成分的组合以每个周期约 90分钟进行静脉输注。在一个实施方式中，一个周期包括了每日施用约1至约25mg/天的 3- (4-氨基-1-氧代-1，3- 二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2，6- 二酮以及约50至约200mg/ m2/天的第二活性成分三至四周，然后停用一或两周。在另一实施方式中，一个周期包括了 每日施用约5至约IOmg/天的4-(氨基)-2-(2，6_ 二氧代(3-哌啶基))-异吲哚啉_1， 3_ 二酮以及约50至约200mg/m2/天的第二活性成分三至四周，然后停用一或两周。向患者 施用组合治疗的周期数通常为约1个至约24个周期、约2个至约16个周期、以及约4个至 约3个周期。
5. 6药物组合物及剂型药物组合物可用于制备独立的、单一单位剂型。此处提供的药物组合物和剂型包 含此处提供的免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物(例如，水合物)、立体异构 体、笼形化合物或前药。此处提供的药物组合物或剂型可进一步包含一种或多种赋形剂。此处提供的药物组合物和剂型还可包含一种或多种附加活性剂。相应地，此处的 药物组合物和剂型包含了此处披露的活性成分(例如，免疫调节化合物和第二活性剂)。任 选的第二或附加活性成分的实例在本文别处进行了描述。此处提供的单一单位剂型适于通过口服、粘膜、肠胃外(例如，皮下、静脉、弹丸注 射、肌肉内或动脉内)、表面、经皮或透皮施用于患者。剂型的实例包括，但不限于片剂，囊 片，胶囊(如软凝胶胶囊)，扁囊剂，锭剂，糖锭，分散剂，栓剂，粉末，凝胶，适于向患者进行 口服或粘膜施用的液体剂型，包括悬浮剂(例如，水或非水性液体悬浮剂、水包油型乳剂、 或油包水型乳剂)、溶液和酏剂，适于肠胃外施用于患者的液体剂型，以及可以复原为可通 过肠胃外施用于患者的液体剂型的无菌固体(例如，结晶或无定型固体)。此处提供的剂型的组成、形状和类型通常取决于其用途。例如，用于短期治疗一 种疾病的剂型可比用于长期治疗同种疾病的剂型包含更大量的一种或多种活性成分。类 似地，一种肠胃外剂型可比用于治疗同种疾病的口服剂型包含更少量的一种或多种活性成 分。具体剂型的各种使用方式彼此不同，并对本领域的技术人员而言是显而易见的。例 如，参见 Remington ‘ s Pharmaceutical Sciences, 20th ed. , Mack Publishing, Easton PA (2000)。典型的药物组合物和剂型包含一种或多种赋形剂。适用的赋形剂已为制药领域技 术人员所公知，且不限于此处提供的适用赋形剂的实例。一种特定赋形剂是否适合用于药 物组合物或剂型取决于本领域公知的多种因素，其包括但不限于，该剂型向患者施用的途 径。例如，如片剂等口服剂型可包含不适用于肠胃外剂型的赋形剂。特定赋形剂的适用性 还取决于剂型中的特定活性成分。例如，某些活性成分可通过如乳糖等赋形剂或在暴露至 水中时加速分解。包含伯胺或仲胺的活性成分特别容易产生该种加速分解。因此，一些实 施方式中提供了可包含极少量(如有)乳糖或其它单或双糖的药物组合物和剂型。此处所 用的术语“无乳糖”指当存在乳糖时其数量不足以显著提高活性成分的降解速率。无乳糖组合物可包含本领域公知的以及如在美国药典(USP) 25-NF20 (2002)中列 举的赋形剂。一般而言，无乳糖组合物包含药学相容且药学可接受量的活性成分、粘合剂/ 填充剂以及润滑剂。在一个实施方式中，无乳糖剂型包含活性成分、微晶纤维素、预胶化淀 粉以及硬脂酸镁。由于水可以促进一些化合物的降解，本发明进一步包括了包含活性成分的无水药 物组合物和剂型。例如，水的添加(例如，5%)是制药领域广泛采用的一种模拟长期贮存 以测定如保质期或制剂长期稳定性等特性的方法。例如，参见Jens T. Carstensen, Drug Stability principles & Practice，2d. Ed.，Marcel Dekker, NY, NY，1995，第 379—80 页。 实际上，水和热可加速一些化合物的分解。因此，水的作用对制剂可能具有非常重要的影 响，因为在制剂的生产、处理、包装、贮存、运输以及使用中常遇到水分和/或湿气。此处提供的无水药物组合物和剂型可采用无水或低含水量的成分并在低水分或 低湿度条件下制备。如果预期在生产、包装和/或贮存过程中与水分和/或湿气发生实质性接触，包含了乳糖和至少一种具有伯胺或仲胺的活性成分的药物组合物和剂型是无水的。无水药物组合物的制备和贮存应当保持其无水性质。相应的，无水组合物例如使 用本领域已知的防水材料进行包装从而可包含在适当的制剂试剂盒中。适当包装的实例包 括，但不限于，密封箔、塑胶、单位剂量容器(例如，小药水瓶)、泡罩包装以及条状包装。此外提供了包含一种或多种能降低活性成分分解速率的化合物的药物组合物和 剂型。这种在此被称为“稳定剂”的化合物包括，但不限于，抗氧化剂如抗坏血酸等、PH缓冲 液或盐缓冲液。与赋形剂的数量和类型相似，一种剂型中活性成分的量和具体类型可取决于多种 因素，例如，但不限于，它向患者施用的途径。在一些实施方式中，所述剂型包含数量为约
0.10至约150mg的此处提供的免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物(例如，水 合物)、立体异构体、笼形化合物或前药。在其它实施方式中，所述剂型包含数量为约0. 1、
1、2·5、5、7· 5、10、12· 5、15、17· 5、20、25、50、100、150 或 200mg 的此处提供的免疫调节化合 物或其药学可接受的盐、溶剂化物(例如，水合物)、立体异构体、笼形化合物或前药。在一 个实施方式中，所述剂型包含数量为约1、2.5、5、10、15、20、25或50!1^的3-(4-氨基-1-氧 代-1，3- 二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2，6- 二酮。在一些实施方式中，所述剂型包含数量 为1至约lOOOmg、约5至约500mg、约10至约350mg或约50至约200mg的第二活性成分。 第二活性剂的具体数量将取决于所采用的具体药剂、待治疗或控制的疾病的类型、以及此 处提供的免疫调节化合物和同时向患者施用的任何可选的其它活性剂的量。5. 6.1 口 服剂型可进行口服施用的药物组合物可作为分散剂型提供，例如，但不限于，片剂(例 如，咀嚼片)、囊片、胶囊和液体(例如，果露糖浆)。这种剂型包含预定量的活性成分，并 可通过本领域技术人员公知的方法制备。一般可参见Remington' s Pharmaceutical Sciences,20th ed.，Mack Publishing, Easton PA(2000)。在一个实施方式中，所述剂型为包含数量为约1、2. 5、5、10、15、20、25或50mg的 3-(4-氨基-1-氧代-1，3- 二氢-异吲哚-2-基)-哌啶-2，6- 二酮的胶囊或片剂。在一 个实施方式中，所述胶囊或片剂包含了数量为约5或IOmg的3- (4-氨基-1-氧代-1，3- 二 氢_异吲哚-2-基)-哌啶-2，6- 二酮。在一些实施方式中，此处提供的口服剂型可通过将活性成分与至少一种赋形剂参 照传统药物配制技术充分混合进行制备。赋形剂可根据待施用的制剂形式采取多种形式。 例如，适用于口服液体或气雾剂剂型的赋形剂包括，但不限于，水、乙二醇、油、醇、增味剂、 防腐剂以及着色剂。适用于固体口服剂型的赋形剂(例如，粉末、片剂、胶囊和囊片)的实 例包括，但不限于，淀粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、成粒剂、润滑剂、粘合剂以及崩解剂。片剂和胶囊由于其便于施用而成为最有利的口服单位剂型，其中采用了固体赋形 剂。如果需要，可通过标准水性或非水性技术对片剂进行包衣。这种剂型可通过任何制药 方法进行制备。一般而言，药物组合物和剂型可通过将活性成分与液体载体、细颗粒固体载 体或两种载体均勻充分混合后根据需要将产物定形而制备。例如，片剂可通过压制或模制进行制备。压制片可通过将粉末或颗粒等自由流动 形式的活性成分(任选地与赋形剂混合)在合适的机器中压制进行制备。模制片可通过将 用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物在合适的机器中模制进行制备。
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可用于口服剂型的赋形剂的实例包括，但不限于，粘合剂、填充剂、崩解剂和润滑 剂。适用于药物组合物和剂型的粘合剂包括，但不限于，玉米淀粉、马铃薯淀粉或其它淀粉、 凝胶、阿拉伯树胶等天然和合成树胶、藻酸钠、海藻酸、其它藻酸盐、粉状黄芪胶、瓜儿胶、纤 维素及其衍生物(例如，乙基纤维素、醋酸纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠)、聚 乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、预胶化淀粉、羟丙基甲基纤维素(例如，2208，2906，2910)、微 晶纤维素及其混合物。适用的微晶纤维素包括，但不限于，商品名为AVICEL-PH-101、AVICEL-PH-103 AVICEL RC-581、AVICEL-PH-105(可从 FMC Corporation, American Viscose Division, Avicel Sales, Marcus Hook，PA购得)的材料及其混合物。一种具体粘合剂为商品名为 AVICEL RC-581的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠的混合物。适用的无水或低水分赋形剂或 添加剂包括AVICEL-PH-103和淀粉1500LM。适用于此处披露的药物组合物和剂型的填充剂的实例包括，但不限于，滑石、碳酸 钙(例如，颗粒或粉末)、微晶纤维素、粉末状纤维素、葡聚糖、高岭土、甘露醇、硅酸、山梨 醇、淀粉、预胶化淀粉及其混合物。药物组合物中的粘合剂或填充剂通常占该药物组合物或 剂型的重量百分比的约50至约99。组合物中采用了崩解剂以提供在水环境中崩解的片剂。含有过多崩解剂的片剂 可能在贮存时崩解，而包含过少崩解剂的片剂无法以希望的速率或无法在希望的条件下崩 解。因此，此处提供的固体口服剂型中应采用既不过多也不多少的足量崩解剂从而不会不 利地改变活性成分的释放。崩解剂的数量取决于制剂的类型且本领域的普通技术人员可容 易确定。典型的药物组合物包含重量百分比为约0. 5至约15的崩解剂或重量百分比为约 1至约5的崩解剂。可用于药物组合物和剂型的崩解剂包括，但不限于，琼脂、海藻酸、碳酸钙、微晶纤 维素、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、波拉克林钾、羟乙酸淀粉钠、马铃薯或木薯淀粉、 其它淀粉、预胶化淀粉、其它淀粉、粘土、其它褐藻胶、其它纤维素、树胶及其混合物。可用于药物组合物和剂型的润滑剂包括，但不限于，硬脂酸钙、硬脂酸镁、矿物油、 轻矿物油、丙三醇、山梨醇、甘露醇、聚乙二醇、其它乙二醇、硬脂酸、十二烷基硫酸钠、滑石、 氢化植物油(例如，花生油、棉花籽油、葵花籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油以及大豆油)、 硬脂酸锌、油酸乙酯、月桂酸乙酯、琼脂及其混合物。附加润滑剂包括，例如，syloid硅胶 (AER0SIL200,由Baltimore,MD的W. R. Grace Co.生产)、合成二氧化硅的凝结气雾剂(由 Piano,TX 的 Degussa Co.销售)、CAB_0_SIL(由 Boston，MA 的 Cabot Co.销售的一种焦化 二氧化硅产品)及其混合物。在使用时，润滑剂在药物组合物或剂型中的用量少于约1的 重量百分比。在一些实施方式中，所述固体口服剂型包含此处提供的免疫调节化合物、无水乳 糖、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、硬脂酸、胶状无水二氧化硅以及凝胶。5. 6. 2控释剂型此处提供的活性成分可通过本领域普通技术人员公知的缓释方式或给药装置进 行给药。其实例包括，但不限于，披露于美国专利号3，845，770、3，916，899、3，536，809、 3，598，123、和 4，008，719,5, 674，533,5, 059，595,5, 591，767,5, 120，548,5, 073，543、 5，639，476,5，354，556,5，639，480,5，733，566,5，739，108,5，891，474,5，922，356,5，972，891,5，980，945,5，993，855,6，045，830,6，087，324,6，113，943,6，197，350, 6，248，363,6，264，970,6，267，981,6，376，461,6，419，961,6，589，548,6，613，358, 6，699，500、以及6，740，634的内容，其内容分别在此引入作为参考。所述剂型可通过使用
如羟丙基甲基纤维素、其它聚合物质、凝胶、渗透膜、渗透系统、多层涂层、微颗粒、脂质体、 微球体或其组合以不同比例提供所需的释放曲线从而用于提供一种或多种活性成分的缓 释或控释。可以容易地选择本领域技术人员已知的适用控释剂型(包括此处所述的剂型) 与此处提供的活性成分一起使用。因此此处提供了适用于口服给药的单一单位剂型，例如， 但不限于，采用控释的片剂、胶囊、粒状胶囊以及囊片。所有的控释药物产品的共同目标为与其非控释的对照相比，改进药物疗法。理想 情况下，在药物治疗中使用优化设计的控释制剂的特点是通过最小量的药物在最短的时间 内治愈或控制症状。控释制剂的优点包括延长药物的活性、减少用药频率以及提高患者适 应性。此外，控释制剂可用于影响作用发生的时间以及其它特征，例如药物的血液水平以及 从而影响副(例如，不良)作用的发生。多数控释制剂通过设计在最初释放能够迅速产生所需的疗效的药物(活性成分) 量，然后逐渐并且持续地释放其它药物量以在更长的时间内维持这种治疗或预防效果的水 平。为在体内维持这种药物的恒定水平，药物应当从剂型中以一定速率释放从而能够取代 被代谢或从体内排泄的该药物的量。活性成分的控释可受到各种条件刺激，包括，但不限 于，pH、温度、酶、水或其它生理条件或化合物。在一些实施方式中，药剂可通过静脉输注、可植入性渗透泵、透皮贴剂、脂质体 或其它施用模式进行施用。在一个实施方式中，可使用泵(例如，参见CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14 201 (1987) ；Buchwald 等人，Surgery88 507 (1980) ；Saudek 等人，N. Engl. J.Med.321 :574(1989))。在另一实施方式中，可施用聚合材料。在另一实施方式中，控释 系统可被放置在技术人员确定的对象的适当位点，即，从而仅需要全身剂量的一部分(例 如，参见 Goodson, Medical Applications of Controlled Release, vol. 2,第 115-138 页 (1984))。其它控释系统在Langer (Science 249:1527-1533(1990))的综述中有讨论。活 性成分可被分散在固相内部基质中，例如，聚甲基丙烯酸甲酯、聚丁基丙烯酸甲酯、塑化或 未塑化聚氯乙烯、塑化尼龙、塑化聚对苯二甲酸乙二酯、天然橡胶、聚异戊二烯、聚异丁烯、 聚丁二烯、聚乙烯、乙烯醋酸乙烯共聚物、硅橡胶、聚二甲基硅氧烷、碳酸盐有机硅共聚物、 亲水聚合物(例如丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的水凝胶)、胶原、交联聚乙烯醇和交联部分水 解聚醋酸乙烯酯，所述内部基质被不溶于体液的外部聚合物膜包围，所述外部聚合物例如 聚乙烯、聚丙烯、乙烯/丙烯共聚物、乙烯/丙烯酸乙酯共聚物、乙烯/醋酸乙烯酯共聚物、 硅橡胶、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡胶、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、氯乙烯与醋酸乙烯酯共聚物、 偏二氯乙烯、乙烯和丙烯、离子聚对苯二甲酸乙二醇酯、丁基橡胶、环氧氯丙烷橡胶、乙烯/ 乙烯醇共聚物、乙烯/醋酸乙烯/乙烯醇三聚物、以及乙烯/乙烯氧基醇共聚物。活性成分 在释放速率控制步骤中扩散通过外部聚合物膜。在肠胃外组合物中的活性成分的比例高度 依赖于它的特定性质，以及对象的需求。5.6. 3肠胃外剂型肠胃外施用的一般特征为通过皮下、肌肉或静脉注射。可注射物可制备为常规的 形式，可以是液体溶液或悬浮液、适于在注射前配制为溶液或悬浮液的固体形式、或者作为乳液。适用的赋形剂为，例如，水、盐水、右旋糖、甘油或乙醇。此外，根据需要，待施用的药物 组合物还可包含微量的无毒性辅助物质，例如润湿或乳化剂、PH缓冲剂、稳定剂、助溶剂、以 及其它这类制剂，例如，醋酸钠、山梨醇单月桂酸酯、油酸三乙醇胺、以及环式糊精(参见， 美国专利号5，134，127)。组合物的肠胃外施用包括静脉、皮下和肌肉施用。肠胃外施用的制剂包括易于注 射的无菌溶液、无菌干燥可溶性产品(例如冻干粉)、易于在使用前与溶剂混合的制剂(包 括可皮下注射片剂)、易于注射的无菌悬浮液、易于在使用前与溶媒混合的无菌干燥不可溶 性产品、以及无菌乳液。溶液可以是水溶液或非水溶液。在静脉施用时，适用的载体包括生理盐水或磷酸缓冲盐水(PBS)，以及包含增厚剂 和助溶剂(例如，葡萄糖，聚乙二醇和聚丙二醇及其混合物)的溶液。用于肠胃外制剂的药学可接受的载体、赋形剂或稀释剂包括水性溶媒、非水性溶 媒、抗菌剂、等张剂、缓冲液、抗氧化剂、局部麻醉剂、悬浮剂和分散剂、乳化剂、掩蔽剂或螯 合剂以及其它药学可接受的物质。水性溶媒的实例包括氯化钠注射液、Ringers注射液、等渗右旋糖注射液、无菌注 射用水、右旋糖和乳酸盐Ringers注射液。非水性肠胃外溶媒包括植物来源的不挥发油、棉 籽油、玉米油、芝麻油和花生油。应向包装于多剂量容器的肠胃外制剂添加抑菌或抑真菌 浓度的抗菌剂，包括苯酚或甲酚、汞制剂、苯甲醇、氯丁醇、甲基和丙基对羟基苯甲酸酯、硫 柳汞、苯扎氯铵和苄索氯铵。等张剂包括氯化钠和右旋糖。缓冲液包括磷酸盐和柠檬酸盐。 抗氧化剂包括硫酸氢钠。局部麻醉剂包括盐酸普鲁卡因。悬浮和分散剂包括羧甲基纤维素 钠、羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯酮。乳化剂包括聚山梨醇酯80(TWEEN 80)。金属 离子的掩蔽或螯合剂包括EDTA。药学载体还包括用于水混溶性溶媒的乙醇、聚乙二醇和丙 二醇以及用于PH调节的氢氧化钠、盐酸、柠檬酸或乳酸。可调节活性成分的浓度，使得注射可提供形成所需药理作用的有效量。如本领域 所知，确切剂量取决于患者或动物年龄、体重和状况。单位剂量的肠胃外制剂包装于安瓿、小瓶或带有针头的注射器中。如本领域已知 和实践的，所有肠胃外施用的制剂应当被灭菌。举例而言，静脉或动脉输注包含活性成分的无菌水溶液是有效的施用模式。另一 实施方式是根据需要注射包含活性物质的无菌水性或油性溶液或悬浮液以生成所需的药 理活性。可注射物设计成局部和全身施用。一般地，治疗有效剂量经配制包含针对待治疗 组织的至少约0. 1 % w/w至约90% w/w或更高、或超过1 % w/w的活性成分浓度。活性成分 可立即施用，或者可被分为一定数量的较小剂量，从而以一定的时间间隔施用。应理解确 切的剂量和治疗时间与待治疗组织的功能相关联，并可通过已知的测试方案经验测定或可 从体内或体外测试数据推断得到。应注意浓度和剂量值也可随着待治疗个体的年龄而有所 变化。应当进一步理解对于任何特定的对象，应根据个体需求和施用或管理施用制剂的人 员的专业判断随时间调整具体的剂量方案，且此处提供的浓度范围仅作为实例，无意对所 主张的剂型的范围或实施构成限制。化合物可以被微粒化或以其它适当的形式悬浮，或者可被衍生化以生成更为易溶 的活性产物或生成前药。所得混合物的形式取决于多种因素，包括目标施用模式以及化合
28物在所选载体或溶媒中的可溶性。有效浓度足以改善疾病的症状，并可通过经验确定。5. 6. 4 冻干粉此处还感兴趣的是冻干粉，其可复原为溶液、乳液和其它混合物进行施用。它们还 可被复原并配制为固体或凝胶。无菌的冻干粉可通过将活性成分或其药学可接受的盐、溶剂化物、水合物或前药 溶解于适当的溶剂后制备。所述溶剂可包含增强所述粉末或由该粉末制备的复原溶液的 稳定性或其它药理成分的赋形剂。可使用的赋形剂包括，但不限于，右旋糖、山梨醇、果糖、 玉米糖浆、木糖醇、甘油、葡萄糖、蔗糖或其它适当的药剂。溶剂还可包含缓冲液，例如柠 檬酸盐、磷酸钠或钾、或者本领域技术人员已知的其它这类缓冲液，典型地，缓冲液约为中 性PH。对溶液进行无菌过滤后，在本领域技术人员已知的标准条件下进行冻干，以提供所 需的剂型。一般而言，所得的溶液将被分配到小瓶中进行冻干。每个小瓶将包含单独剂量 (IO-IOOOmg或100-500mg)或多重剂量的活性成分。冻干粉将被贮存在适当的条件下，例如 约4°C下或室温下。以注射用水复原冻干粉提供用于肠胃外施用的剂型。为进行复原，可在每毫升无 菌水或其它合适的载体中添加约l-50mg、5-35mg或约9_30mg的冻干粉。确切的数量取决 于所用的化合物。所述数量可通过经验确定。
6.实施例此处提供的一些实施方式通过以下非限制性实施例得以阐述。6. 1脐血(CB)⑶133+祖细胞向内皮细胞系的分化CB-CD133+祖细胞获自AllCells，并培养于VEGF和b_FGF或SCF存在下含有 FBS (20%)的Iscove MDM中30-50天。为了研究免疫调节化合物对内皮祖细胞生成作用，将 CD133+祖细胞连同或不连同1-氧代-2- (2,6- 二氧代哌啶_3_基)-4-氨基异吲哚啉、1，3- 二 氧代-2-(2，6- 二氧代哌啶-3-基)-4_氨基异吲哚啉、2-氨基-N-(2-(3-甲基-2，6- 二氧代 哌啶-3-基)-1，3_ 二氧代异吲哚啉-4-基)乙酰胺氢氯化物或沙利度胺培养30-50天。在 培养2、3和4周后采用流式细胞仪对细胞进行造血和内皮标记物(CD36、CD71、血型糖蛋白A 和胎血红蛋白)的表型鉴定。在30天后通过监测表达UEA-I凝集素的细胞中的LDL摄取进 行功能鉴定。在CD133+分化的第30天和第40天监测基因表达型态。该步骤显示于图1。如图2所示，在免疫调节化合物存在下与VEGF和B-FGF或SCF培养的⑶133+细 胞显示了典型的形态学，其具有增加的纺锤状细胞和索样结构形成。此外，如图3和5所示， 通过免疫调节化合物处理增加了 KDR(VEGFR-2)以及更特异的内皮标记物如VE-钙粘蛋白 (⑶144)、Pl-H12(⑶146)和UEAl凝集素的细胞表面表达。此外，根据分化的EPC的功能 鉴定(监测培养30天后表达UEA-I凝集素的细胞中乙酰化低密度脂蛋白(LDL)的摄取)， 显示通过免疫调节化合物处理可提高EPC摄入LDL和乙酰化LDL的数量和能力(图4)。这些结果表明免疫调节化合物可促进EPC的分化。此处引用的所有参考文献均在此全文引入作为参考。上述实施方式的目的仅在于进行示范，且本领域的技术人员采用不超出常规的试 验将可以识别、或能够确定许多等同的具体化合物、材料和方法。所有这样的等效物被认为 在所主张的主题范围内且包含在所附权利要求书中。
权利要求
治疗、控制或预防与内皮功能障碍有关的紊乱的方法，所述方法包括1)将有效量的免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物或立体异构体与内皮祖细胞相接触；和2)将与所述免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物或立体异构体接触的所述内皮祖细胞施用于患者。
2.治疗、控制或预防与内皮功能障碍有关的紊乱的方法，所述方法包括向患者施用治 疗或预防有效量的免疫调节化合物或其药学可接受的盐、溶剂化物或立体异构体。
3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述紊乱为心血管紊乱、糖尿病、系统性硬化或 者慢性肾衰竭。
4.如权利要求3所述的方法，其中所述心血管紊乱为动脉压过高、体位性低血压、晕 厥、冠状动脉疾病、休克、心律失常、瓣膜性心脏病、心力衰竭、心内膜炎、心包疾病、外周动 脉疾病、心脏肿瘤或者大动脉及分支疾病。
5.如权利要求4所述的方法，其中所述心力衰竭为充血性心力衰竭。
6.如权利要求3所述的方法，其中所述紊乱是糖尿病。
7.如权利要求3所述的方法，其中所述紊乱是慢性肾衰竭。
8.如权利要求4所述的方法，其进一步包括施用第二活性剂。
9.如权利要求7所述的方法，其中所述第二活性剂为氢氯噻嗪、苄氟噻嗪、氯噻嗪、氯 噻酮、氢氟甲噻嗪、茚磺苯酰胺、甲氯噻嗪、美托拉宗、丁苯氧酸、利尿酸、利尿磺胺、托塞米、 氨氯吡嗪脒、安体舒通、氨苯蝶啶、醋丁洛尔、倍他洛尔、普萘洛尔、美托洛尔、阿替洛尔、噻 吗洛尔、比索洛尔、卡替洛尔、卡维洛尔、拉贝洛尔、纳多洛尔、喷布洛尔、吲哚洛尔、硫氮草 酮、维拉帕米、氨氯地平、非洛地平、依拉地平、尼卡地平、硝苯地平、尼索地平、贝那普利、卡 托普利、恩纳普利、福森普利、赖诺普利、莫昔普利、喹那普利、雷米普利、群多普利、依贝沙 坦、氯沙坦、缬沙坦、可乐定、氯压胍、胍法辛、甲基多巴、拉贝洛尔、艾司洛尔、酚妥拉明、多 沙唑嗪、派唑嗪、特拉唑嗪、胍那决尔、胍乙啶、萝芙木碱、利血平、硝普钠；尼卡地平、非诺 多巴、硝化甘油、依那普利拉、酰胼、二氮嗪、米诺地尔、阿斯匹林、噻氯匹啶、奎纳定、普鲁卡 因酰胺、双异丙吡胺、利多卡因、脉律定、托卡胺、莫里西嗪、苯妥英、氟卡胺、普罗帕酮、胺碘 酮、索他洛尔、溴苄胺、盘尼西林、阿莫西林、氨比西林、氯洁霉素、头孢菌素、头孢羟氨苄、阿 齐红霉素、克拉仙霉素、头孢噻吩或其混合物。
10.如权利要求6所述的方法，其进一步包括施用第二活性剂。
11.如权利要求10所述的方法，其中所述第二活性剂为胰岛素、甲苯磺丁脲、氯磺丙 脲、醋磺环己脲、甲磺吖庚脲、格列本脲、格列美脲、二甲双胍、阿卡玻糖、曲格列酮、瑞格列 奈或其混合物。
12.促进伤口愈合的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的免疫调节化合物。
13.如权利要求1-12任意一项所述的化合物，其中所述免疫调节化合物为1，3_二氧 代-2-(2，6- 二氧代哌啶-3-基)-4_氨基异吲哚啉。
14.如权利要求13所述的方法，其中所述免疫调节化合物是光学纯的。
15.如权利要求1-12任意一项所述的方法，其中所述免疫调节化合物为1-氧 代-2-(2，6- 二氧代哌啶-3-基)-4_氨基异吲哚啉。
16.如权利要求15所述的方法，其中所述免疫调节化合物是光学纯的。
17.如权利要求1-12任意一项所述的方法，其中所述免疫调节化合物为2-氨 基-N-(2-(3-甲基-2，6-二氧代哌啶-3-基)-1，3-二氧代异B引哚啉-4-基)乙酰胺氢氯化物。
18.如权利要求17所述的方法，其中所述免疫调节化合物是光学纯的。
19.如权利要求1-12任意一项所述的方法，其中所述免疫调节化合物具有式(I) (I)其中X和Y之一为C = 0，X和Y的另一个为C = 0或CH2，而R2为氢或低级烷基。
20.如权利要求19所述的方法，其中所述免疫调节化合物是光学纯的。
21.如权利要求1-12任意一项所述的方法，其中所述免疫调节化合物具有式(II) 其中X和Y之一为C = 0，另一个为CH2或C = 0 ；R1为H、(C1-C8)烷基、(C3-C7)环烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、苯甲基、芳基、(C0-C4) 烧基-(C1-C6)杂环烷基、(C0-C4)烷基-(C2-C5)杂芳基、C (0) R3、C (S) R3、C(O) OR4、(C1-C8)烷 基-N(R6)2、(C1-C8)烷基-OR5、(C1-C8)烷基-C (O)OR5、C (O)NHR3、C (S) NHR3、C (O)NR3R3' ,C(S) NR3R3'或(C1-C8)烷基-O(CO) R5 ；R2为H、F、苯甲基、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基或(C2-C8)炔基； R3和R3'独立地为(C1-C8)烷基、(C3-C7)环烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、苯甲基、 芳基、(C0-C4)烷基-(C1-C6)杂环烷基、(C0-C4)烷基-(C2-C5)杂芳基、(C0-C8)烷基-N(R6)2、 (C1-C8)烷基-OR5、(C1-C8)烷基-C(O) OR5、(C1-C8)烷基-0 (CO) R5 或 C (0) OR5 ；R4 为(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、(C1-C4)烷基-0R5、苯甲基、芳基、(C0-C4) 烷基-(C1-C6)杂环烷基或(Ctl-C4)烷基-(C2-C5)杂芳基；R5为(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、苯甲基、芳基或(C2-C5)杂芳基； R6每次出现时独立地为H、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、苯甲基、芳基、 (C2-C5)杂芳基或(Ctl-C8)烷基-C(O)O-R5,或者R6基团联合形成杂环烷基基团； η为0或1 ；且 *代表手性-碳中心。
22.如权利要求21所述的方法，其中所述免疫调节化合物是光学纯的。
23.如权利要求1-12任意一项所述的方法，其中所述免疫调节化合物以约0.1-约 150mg/天的量施用。
全文摘要
本发明提供了治疗、预防或控制内皮功能障碍以及其它紊乱的方法。该方法包括施用此处提供的免疫调剂化合物。进一步描述了采用所述免疫调节化合物联合第二活性剂的治疗方法。还披露了适用于此处提供的方法的药物组合物和单一单位剂型。
文档编号A61P37/02GK101909609SQ200880123421
公开日2010年12月8日 申请日期2008年11月7日 优先权日2007年11月8日
发明者劳瑞·A·穆塔-德帕塞维尔 申请人:细胞基因公司