氚或氘标记喹赛多的制备方法

专利名称：氚或氘标记喹赛多的制备方法
技术领域：
本发明涉及氚或気标记喹赛多的制备方法。本方法用放射性同位素氚或稳定同位素氖， 在一种饲料药物添加剂药物喹赛多(Cyadox)的喹噁啉环上定位标记制备，以便示踪喹赛多 在动物体内的吸收、分布、代谢和排泄状况。
背景技术：
同位素示踪试验是重要科研手段，它对生命科学研究的各个领域起强有力的推动作用。 用同位素示踪试验可研究物质代谢的各种问题，如代谢途径、转变的速度、代谢物在体内的 位置，以及激素、维生素等重要代谢物质的定量测定。放射性同位素示踪方法应用于医药学 领域，研究药物的体内分布、代谢与排泄过程。同位素示踪所利用的放射性核素(或稳定性 核素)及它们的化合物，与自然界存在的相应普通元素及其化合物之间的化学性质和生物学 性质是相同的，只是具有不同的核物理性质。因此，就可以用同位素作为一种标记，制成含 有同位素的标记化合物(如标记食物，药物和代谢物质等)代替相应的非标记化合物。利用 放射性同位素不断地放出特征射线的核物理性质，就可以用核探测器随时追踪它在体内或体 外的位置、数量及其转变等，稳定性同位素虽然不释放射线，但可以利用它与普通相应同位 素的质量之差，通过质谱仪、气相层析仪、核磁共振等质量分析仪器来测定。
喹噁啉-l,4-二氧类的许多品种广泛用作词料添加剂。喹赛多是其中一种极具开发价值的 高效、低毒、安全的新型饲料药物添加剂。但研究过程中发现喹赛多在试验动物和靶动物体 内吸收、分布、代谢等途径不明确，很多主要代谢物和次要代谢物去向不明，甚至用现有的 常规研究方法无法定性和定量它们。鉴于上述诸多原因，需要进行同位素示踪研究，说明喹 赛多在动物体内吸、分布、代谢规律及物料平衡，确定该化合物在动物体内的残留靶组织， 从而指导临床合理用药，保障食品动物安全。
同位素标记喹噁啉类药物相关报道中"C标记示踪较多。早在1973年德国Bayer公司 Duhm等(Duhm, et al ， 1973， Bayer Pharma Report no. 4151)通过3位上定位标记14C的方法 示踪研究了喹乙醇。但未见"C标记合成方面的专利和动物示踪研究的公开报道。1989年 Pfizer对同类药物卡巴氧(Pfizer (1989a). Carbadox in Pigs Radiotracer. Metabolism C14-Phenyl Labeled. Unpublished Report. Submitted to FAO by Pfizer， Inc.Groton， CN, USA. Pfizer (1989b). Carbadox in Pigs Radiotracer. Metabolism C14-Carbonyl Labeled. Unpublished Report. Submitted to FAO by Pfizer, Inc.Groton, CN, USA.)的喹噁啉环上通过14C定位标记，进行了动物示踪研 究。国内有同类药物喹烯酮的相关报道。如，2001年杨云裳等(学位论文一"C标记喹烯酮的合成及药代实验设计)应用同位素定位标记方法在喹烯酮的侧链上进行了 14C标记，并在 同一年李建勇等用"C标记喹烯酮进行了猪体内药代动力学研究(李剑勇，赵荣材，李金善， 柳军席，徐忠赞，杜小丽，苗小楼，薛飞群.喹烯酮在猪体内的药代动力学研究.中国兽医科 技[J]. 2001， 31 (8): 31-33.)。本方法虽然成功标记合成了 "C标记的喹烯酮，却有很明显的 缺点。如此方法将14C标记于喹噁啉母环侧链上，在动物体内示踪研究中一旦侧链分解离开 母原环就无法说明整体药物的代谢特性。2005年李建勇等(李剑勇，周绪正，李金善，赵荣 材，苗小楼，张继瑜，张萍.氚标喹烯酮在鸡体内的代W动力学研究.毒理学杂志，2005， 19 (3): 273.)进行了氚标记喹烯酮的鸡体内代谢动力学研究，却未见其氣标记合成方面的报道。 总结以上文献所述的方法存在的主要问题有
1) "C标记合成成本高，国内无法找到合适的起始原料。
2) 标记位置不合理，不符合此类药物在动物体内示踪要求。
3) 没有公开的报道或专利。
4) 合成路线长，操作步骤烦杂，条件苛刻。
鉴于到目前为止未见适合于动物体内示踪研究的喹噁啉类化合物放射性或稳定同位素标 记合成方法，更无喹赛多的放射性或稳定同位素标记合成方法，需要开发一种适用于喹赛多， 而且同时也适用于喹噁啉药物示踪研究的同位素合成方法，以便对其开展同位素示踪研究。

发明内容
本发明的目的是得到高比活度、高放化纯度的放射性(稳定)同位素定位标记的喹赛多。 喹噁啉环是本药物最稳定的部分，体内代谢过程中大多数代谢产物都留有喹噁啉环。喹噁啉 环上定位标记可得到比活度高、标记部位明确的药物，更适合于药物在靶动物体内的示踪研 究。 ，
解决本发明的技术方案是
一种氚或氖标记喹赛多的制备方法，按如下步骤制备
(1)取4-溴-2-硝基苯胺20mg或4-碘-2-硝基苯胺25mg，加入加入质量比为10%的钯/碳 或拉尼镍或氯化钯5mg作催化剂(优选为质量比为10%的钯/碳)，加等摩尔比的氢氧化钠、 醋酸钠或碳酸钾作酸接受体(优选为a氧化钠)，在甲醇或乙醇lml中溶解，得到反应混合液。
(2)将步骤(1)的反应混合液连接,J氚化反应装置(瑞士RCTRITEC公司制造)上， 通氚气或氘气，使反应瓶内压力为100 760mmHg(优选为200 600mmHg)，反应温度为4 40°C (优选反应温度为10 30°C)，搅拌反应时间为5 45min(优选反应时间为6 30min)。， 停止搅拌，液氮冷冻，回收剩余氚气或氘气，放置融化，抽滤收集催化剂。
(3)采用半制备高效液相色谱法分离，按照下列技术参数或步骤色谱柱为vemisil XBP-C18 (21.5 mm x 150讓，10 (im , 100 A);(购自AgelaTechnologies Inc公司，美国)用体积比 为75:25的甲醇/水为流动相；控制流速5mlmhT、检测波长231 nm，收集保留时间与邻硝 基苯胺对应的流动相组分，去除流动相，得到4位上氚或氘标记的邻硝基苯胺。
具体地，步骤(3)的流动相组分中目标化合物的分离方法如下在40。C以下旋转蒸发去 除甲醇，用二氯甲烷或三氯甲烷或乙酸乙酯萃取水相中的目标化合物；或用水蒸气蒸馏方法 分离易于升华的邻硝基苯胺，过滤收集水相中固体物质，得到氚或氘标记的邻硝基苯胺。
(4)取步骤(3)获得的氚或氘标记的邻硝基苯胺中混入适量的未标记邻硝基苯胺稀释至 15mg，溶解于异丙醇50 500pl (优选为100 400pl)，'加入氢氧化钠6mg，在搅拌下缓缓滴 入有效氯摩尔比为5%的次氯酸钠溶液50 400^1 (优选为100 300nl)，在10 35'C下反应 1 5h，静置lh,抽滤，用去离子水洗涤产品两次，自然晾干，得到氚或気标记的苯并呋咱 一氧化物的浅黄色晶体。
(5)取步骤(4)获得的氚或氖标记的苯并呋咱一氧化物10mg，加入N,N-二甲基甲酰胺 30 200W (优选为20 18(^1)，搅拌溶解，加入丙酮醛縮二甲醇8.7 26.2mg，滴加吡咯烷 2 20^1,反应温度为0 35。C (优选为5 25'C)，避光反应16h， 4"C静置过夜，抽滤，产物 用少量乙醇或甲醇洗涤三次，烘箱内70'C干燥2h，得到氚或氘标记的N,N-二氧-喹噁啉甲醛 縮二甲醇。
(6)取步骤(5)获得的氚或氘标记的N,N-二氧-喹噁啉甲醛縮二甲醇6mg，加入甲醇20 500(_d (优选为50 300nl)和盐酸20 300^1 (优选为40 150h1),搅拌，进行醇解，加入 质量比为10。/。的氰乙酰肼溶液100nl，并在10 4(TC下搅拌反应4h，静置，抽滤，分别用去 离子水和无水乙醇洗涤产品2次；70'C烘箱干燥2h，得目标产物氚或氘标记的喹赛多。
本发明的技术方案如下-用氢的同位素氚或氘在喹赛多的喹噁啉环第6位上定位标记合成。合成条件适宜、收率 高、反应步骤少，进行"热试验"(放射性试验)时反应条件易于掌握，对技术人员的辐射损 伤少。
标记位置如下所示(r为氚或氘原子)
<formula>formula see original document page 6</formula>本发明是氚气或氘气与4-碘-2-硝基苯胺或4-溴-2-硝基苯胺，在催化剂和酸接受体作用下 脱碘或脱溴交换氚或氘，生成4-3&2-硝基苯胺或4-&-2-硝基苯胺，再经过氧化反应、Beirut 反应、成腙反应，采用微量合成方法获得高比活度、高放化纯度的氳标记喹赛多或高纯度的 氖标记喹赛多。
本发明的合成路线如下所示(R为氚或氘原子)
■CH=NNHCOCH2CN
1. 依照上述反应式，取4-溴-2-硝基苯胺20mg或4-碘-2-硝基苯胺25mg，加入催化剂(拉 尼镍、10%钯/碳(Pd/C)、氯化钯)5mg和等摩尔量的酸接受体(例如可以选取氢氧化钠、 醋酸钠、碳酸钾其中之一的试剂)，在溶剂(例如可以选自乙醇或甲醇)lml中溶解，连接到 氚化反应装置(瑞士 RC TRITEC公司制造)上，通氚气或氘气，使反应瓶内压力100 760mmHg，反应温度4'C 40。C ，搅拌反应10 60min，停止搅拌，液氮冷冻，回收剩余氖 气或氖气，放置融化，抽滤收集催化剂，乙醇去除反应混合物中的游离氚或氘两次，加入lml 乙醇，待分离纯化。分离纯化在半制备高效液相色谱(HPLC)上进行。色谱柱为venusilXBP-C18 (21.5讓x 150 mm, 10 pm , 100 A) (Agela Technologies Inc., USA);流动相为甲醇/水
(75:25);流速5mlmin—、检测波长231 nm。收集保留时间与邻硝基苯胺对应的组分，在 6(TC以下温度旋转蒸发去除甲醇，用二氯甲垸(或三氯甲烷、乙酸乙酯)萃取水相中的目标 化合物。或水蒸气蒸馏方法分离易于升华的氚或気标记邻硝基苯胺，过滤收集水相中固体物 质，得到氚或氘标记的邻硝基苯胺。 '
2. 在3ml反应瓶内投入氚或氘标记的邻硝基苯胺15mg，异丙醇50 500pl，氢氧化钠 6mg。在搅拌下缓缓滴入有效氯摩尔比为5%的次氯酸钠溶液50 400|11，在10 35。C温度下 反应1 5h，静置lh，抽滤，产品用水洗涤两次，自然晾干，得浅黄色晶体氚或氘标记的苯并呋咱一氧化物。 '
3.在3ml反应瓶内投入上述反应所得到的氚或氘标记的苯并呋咱一氧化物10mg,加入 N,N-二甲基甲酰胺(DMF) 10 400|il，搅拌溶解，加入丙酮醛缩二甲醇8.7 ing 26.2 mg, 滴加吡咯烷2 20nl，在0 35'C温度下避光反应16h。 4"C静置过夜，抽滤，产物用少量乙醇 或甲醇洗涤三次，7(TC烘箱干燥2h，得到氚或氖标记的N,N-二氧-喹噁啉甲醛縮二甲醇。 4. 3ml反应瓶内投入上述反应所得氚或氘标记的N,N-二氧-喹噁啉甲醛縮二甲醇6mg，加入甲 醇20 500|_U和浓盐酸20 300(il，搅拌，进行醇解。加入10%氰乙酰肼溶液100n，在10 4(TC下搅拌反应4h,静置，抽滤，分别用水和无水乙醇洗涤产品各2次；70。C烘箱干燥2h, 得目标产物氚或氘标记的喹赛多。
本发明具有以下优点
1) 原料易得本发明所用的氚气和氘气在国内均可提供。其它都是常用试剂和原料；
2) 除了氚化时需桌特殊装置以外其它步骤所需设备简单、易得本发明除了氖化装置以 外只需普通3mL玻璃反应瓶和搅拌子就可；
3) 环境污染少，易于控制氚化反应在氚化装置内进行，无泄漏危险。其它步骤都是微
量范围内合成，全部废弃试剂和原料不超过5mL。
3) 所得到的目标化合物氚标记喹赛多和氘标记喹赛多的标记位置明确、比活度高，而且 标记位置符合本类药物在靶动物体内任何代谢相关的示踪试验要求。
4) 所得到的目标化合物氚标记喹赛多放化纯度和化学纯度高；氘标记喹赛多的化学纯度 高、杂质少。 .
5) 所得到的目标化合物产率高，成本低。


图1是氚化装置示意图
图2是氚化反应混合液的Radio-TLC放化纯度扫描图(1为杂质放射性峰；2为^H]-邻 硝基苯胺峰)
图3是[2H]-CYX HPLC检测图谱。 图4是[3H]-CYX HPLC检测图谱。 图5是CYX标准品HPLC检测图谱。
图6是^H]-CYX放化纯度检测图谱(纵坐标为LSC检测放射性计数，单位dpm;横坐
标为接受每半分钟流动相的时间点)。
图7是4-[2印-2-硝基苯胺的LCMS-IT-TOF MS(E+)图(左 一级质谱图；右- 二级质谱图)
图8是[2H]-CYX的LCMS-IT-TOF MS(E+) —级质谱图 图9是fH]-CYX的LCMS-IT-TOF MS(E+) 二级质谱图
具体实施例方式
实例l
4-溴-2-硝基苯胺20mg，质量比例为10%的钯/碳(Pd/C)催化剂5mg，氢氧化钠4mg， 乙醇lml依次加入25ml反应瓶中，密封连接到玻璃氚化反应装置上，抽真空，通氳气，反应 瓶内压力达到200mmHg，反应温度l(TC，搅拌反应45min，停止搅拌，液氮冷冻，回收氳气， 放置融化，抽滤收集催化剂。制备色谱分离得到pH]-邻硝基苯胺。产率67.2%。
在3ml反应瓶内投入[SH]-邻硝基苯胺15mg,异丙醇100)il，氢氧化钠6mg。在搅拌下缓 缓滴入有效氯摩尔比为5%的次氯酸钠溶液100^1，在10。C下反应2h，静置lh，抽滤，产品 用水洗涤两次，自然晾牛，得浅黄色晶体[3司-苯并呋咱一氧化物，产率76.7%。
在3ml反应瓶内投入[3印-苯并呋咱一氧化物10mg，加入N，N-二甲基甲酰胺20jul，搅拌 溶解，加入丙酮醛縮二甲醇8.7mg，滴加吡咯烷2pl，在5'C下避光反应16h。 4。C静置过夜， 抽滤，产物用少量乙醇洗涤三次，7(TC烘箱干燥2h，得到淡黄色固体粉末[3印-N,N-二氧-喹 噁啉甲醛縮二甲醇。收率32.5%。
3ml反应瓶内投入上述反应所得[311]- N,N-二氧-喹噁啉甲醛縮二甲醇6mg，加入甲醇 5(^l和盐酸40nl，搅拌，进行醇解。加入10%氰乙酰肼溶液lOO(il，反应4h后停止搅拌，静 置，抽滤，分别用水和无水乙醇洗涤产品2次；70。C讲箱干燥2h,得黄色固体粉末[311]-喹 赛多。收率88.1%。 ' 实例2 '
4-碘-2-硝基苯胺25mg，质量比例为10%的Pd/C催化剂5mg，氢氧化钠4mg，乙醇 lml依次加入25ml反应瓶中，密封连接到氚化反应装置上，抽真空，通氚气，反应瓶内压力 达到200mmHg，反应温度l(TC，搅拌反应5min，停止搅拌，液氮冷冻，回收氚气，放置融 化，抽滤收集催化剂。制备色谱分离得到[311]-邻硝基苯胺。产率68.4%。
在3ml反应瓶内投入[SH]-邻硝基苯胺15mg，异丙醇100)^1，氢氧化钠6mg。在搅拌下缓 缓滴入有效氯摩尔比为5%的次氯酸钠溶液IOOW，在10。C下反应2h,静置lh，抽滤，产品 用水洗涤两次，烘干，得浅黄色晶体[SH]-苯并呋咱一氧化物，60°/。乙醇重结晶。产率76.7%。
在3ml反应瓶内投入fH]-苯并呋咱一氧化物10mg，加入N'N-二甲基甲酰胺20W，搅拌 溶解，加入丙酮醛縮二甲醇8.7mg，滴加吡咯烷2pl，在5'C下避光反应16h。 4'C静置过夜，抽滤，产物用少量乙醇洗涤三次，7(TC烘箱干燥2h，得到淡黄色固体粉末[3^- N,N-二氧-喹 噁啉甲醛縮二甲醇。收率32.5%。
3ml反应瓶内投入上述反应所得[311]- N，N-二氧-喹噁啉甲醛縮二甲醇6mg，加入甲醇 50pI和盐酸4(Hd，搅拌，进行醇解。加入10%氰乙酰肼溶液100^1，反应4h后停止搅拌，静 置，抽滤，分别用水和无水乙醇洗涤产品2次；70'C烘箱千燥2h，得黄色固体粉末[3司-喹 赛多。收率88.1%。 实施例3
操作方法分别与实例1相同，脱溴反库催化剂为分别拉尼镍、质量比例为10%的钯/碳 (Pd/C)催化剂、氯化钯，酸接受体为分别醋酸钠、碳酸钾时其结果也基本相同。 实施例4
4-溴-2-硝基苯胺20mg，拉尼镍5mg,醋酸钠8mg，乙醇lml依次加入25ml反应瓶中， 密封连接到玻璃氚化反应装置上，抽真空，通氚气瓶内压力达到600mmHg，反应温度3(TC， 搅拌反应30min，停止搅拌，液氮冷冻，回收氚气，放置融化，抽滤收集催化剂。制备色谱 分离得到目标产物。产率74.6%。
在3ml反应瓶内投入[SH]-邻硝基苯胺15mg，异丙醇400^1，氢氧化钠6mg。在搅拌下缓 缓滴入有效氯摩尔比为5%的次氯酸钠溶液300^1，在35'C下反应2h,静置lh,抽滤，滤饼 用水洗两次，烘干，得浅黄色晶体[3司-苯并呋咱一氧化物，60%乙醇重结晶。产率72.8%。
在3ml反应瓶内投入[SH]-苯并呋咱一氧化物10mg，加入N'N-二甲基甲酰胺18(^1，搅拌 溶解，加入丙酮醛縮二甲醇26.2mg，加入吡咯垸10nl，在25t下避光反应16h。 4'C静置过 夜，抽滤，产物用少量乙醇洗涤三次，7(TC烘箱干燥2h，得到淡黄色固体粉末^H]-N,N-二氧 -喹噁啉甲醛缩二甲醇。收率38.8%。
3ml反应瓶内投入[3司-N,N-二氧-喹噁啉甲醛缩二甲醇6mg，加入甲醇500W和浓盐酸 150^1，搅拌，进行醇解。加入10°/。氰乙酰肼溶液100nl，反应4h后停止搅拌，静置，抽滤， 分别用水和无水乙醇洗涤产品2次；7(TC烘箱干燥2h，得黄色固体粉末[311]-喹赛多。收率 87.6% 实施例5
4-溴-2-硝基苯胺20mg，氯化钯5mg，碳酸钾10mg，乙醇lml依次加入25ml反应瓶中， 密封连接到玻璃氚化反应装置上，抽真空，通氚气，瓶内压力达到400mmHg，反应温度20 。C，搅拌反应20min，停止搅拌，液氮冷冻，回收氚气，放置融化，抽滤收集催化剂。制备 色谱分离得到目标产物。产率78.3%，熔点68 70'C。
在3ml反应瓶内投入fH]-邻硝基苯胺15mg,异丙醇250)^1，氢氧化钠6mg。在搅拌下缓缓滴入有效氯摩尔比为5%的次氯酸钠溶液150pl,在20。C下反应2h，静置lh，抽滤，产品 用水洗涤两次，自然晾干，得浅黄色晶体fH]-苯并呋咱一氧化物。产率69.2%。
在3ml反应瓶内投入上述[311]-苯并呋咱一氧化物10mg，加入DMF IOOW，搅拌溶解， 加入丙酮醛缩二甲醇17.4mg，滴加吡咯烷7pl，在15'C下避光反应16h。 4'C静置过夜，抽滤， 产物用少量乙醇洗涤三次，7(TC烘箱干燥2h，得到淡黄色固体粉末[3司-N,N-二氧-喹噁啉甲 醛缩二甲醇。收率43.8%。
3ml反应瓶内投入上述反应所得[3巧-N,N-二氧-喹噁啉甲醛縮二甲醇6mg，加入甲醇 200(il和浓盐酸100ial，搅拌，进行醇解。加入10%氰乙酰肼溶液lOOnl，反应4h后停止搅拌， 静置，抽滤，分别用水和无水乙醇洗涤产品？次；7(TC烘箱千燥2h，得黄色固体粉末[311]-喹 赛多。收率89.4%。 实例6
操作方法分别与实例l， 2， 3相同，脱溴反应溶剂为甲醇，结果也基本相同。 实例7
操作方法分别与实例l， 2， 3， 4， 5相同，反应中将氣气换成気气，结果也相同。
权利要求
1.一种氚或氘标记喹赛多的制备方法，其特征在于按如下步骤(1)取4-溴-2-硝基苯胺20mg或4-碘-2-硝基苯胺25mg，加入催化剂质量比为10％的钯/碳或拉尼镍或氯化钯5mg，等摩尔比的酸接受体氢氧化钠、醋酸钠或碳酸钾，在甲醇或乙醇1ml中溶解，获得反应混合液；(2)将步骤(1)获得的反应混合液连接到氚化反应装置上，通氚气或氘气，使反应瓶内压力为100～760mmHg，反应温度为4～40℃，搅拌反应时间为5～45min，停止搅拌，液氮冷冻，回收剩余氚气或氘气，放置融化，抽滤收集催化剂；(3)采用制备高效液相色谱法，按照下列技术参数或步骤分离制备色谱柱为venusilXBP-C18(21.5mm×150mm，10μm， id="icf0001" file="A2009100611540002C1.tif" wi="9" he="3" top= "91" left = "88" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>)；用体积比为75∶25的甲醇/水为流动相；控制流速5ml min-1；检测波长231nm，收集保留时间与邻硝基苯胺对应的流动相组分，去除流动相，得到4位上氚或氘标记的邻硝基苯胺；(4)取步骤(3)获得的氚或氘标记的邻硝基苯胺中混入适量的未标记邻硝基苯胺稀释至15mg，溶解于异丙醇50～500μl，加入氢氧化钠6mg，在搅拌下缓缓滴入有效氯摩尔比为5％的次氯酸钠溶液50～400μl，在10～35℃下反应1～5h，静置1h，抽滤，用去离子水洗涤产品两次，自然晾干，得到氚或氘标记的苯并呋咱一氧化物的浅黄色晶体；(5)取步骤(4)获得的氚或氘标记的苯并呋咱一氧化物10mg，加入N，N-二甲基甲酰胺30～200μl，搅拌溶解，加入丙酮醛缩二甲醇8.7～26.2mg，滴加吡咯烷2～20μl，反应温度为0～35℃，避光反应16h，4℃静置过夜，抽滤，产物用少量乙醇或甲醇洗涤三次，烘箱内70℃干燥2h，得到氚或氘标记的N，N-二氧-喹噁啉甲醛缩二甲醇；(6)取步骤(5)获得的氚或氘标记的N，N-二氧-喹噁啉甲醛缩二甲醇6mg，加入甲醇20～500μl和盐酸20～300μl，搅拌，进行醇解，加入质量比为10％的氰乙酰肼溶液100μl，并在10～40℃下搅拌反应4h，静置，抽滤，分别用去离子水和无水乙醇洗涤产品2次；70℃烘箱干燥2h，得目标产物氚或氘标记的喹赛多。
2. 根据权利要求1所述的方法，,，其特征在于，步璩(l)中的催化剂选自质量比为10%的 钯/碳；酸接受体选自氢氧化钠；反应瓶内压力为200 600mmHg;搅拌反应温度为10 30 。C;反应时间为5 30min。
3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)还包括，流动相组分中目标化合物 的分离是在40。C以下旋转蒸发去除甲醇，用二氯甲烷或三氯甲垸或乙酸乙酯萃取水相中的目 标化合物；或用水蒸气蒸馏方法分离易于升华的邻硝基苯胺，过滤收集水相中固体物质'得 到氚或氘标记的邻硝基苯胺。
4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中的异丙醇为100 400|ul;有效氯摩尔比为5%的次氯酸钠溶液为100 300nl。
5. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(5)的反应温度为5 25°C，；吡咯烷 为3 10pl; N,N-二甲基甲酰胺为20 18(HU。
6. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(6)中的甲醇50 300|il;盐酸40 150)^1。
全文摘要
本发明涉及一种饲料药物添加剂喹赛多的氚或氘标记制备方法。本发明是氚气或氘气与4-溴-2-硝基苯胺或4-碘-2-硝基苯胺，在催化剂和酸接受体作用下脱卤交换氚或氘，生成4-³H-2-硝基苯胺或4-²H-2-硝基苯胺，再经过氧化反应、Beirut反应、成腙反应，采用微量合成方制得氚或氘标记喹赛多，获得高比活度(12.63Ci/mmol)、高放化纯度(98％以上)、高化学纯度(99.5％以上)的氚标记喹赛多或高化学纯度(99.5％以上)的氘标记喹赛多。本发明为系统展开喹赛多在动物体内吸收、分布及代谢规律提供了物质基础。本发明合成制备的4-³H-2-硝基苯胺或4-²H-2-硝基苯胺可作为所有在喹噁啉环第6位上无其它取代基的喹噁啉类药物氚或氘标记合成的起始原料，是本类药物的氚或氘标记合成重要基础物质。
文档编号A61K101/00GK101538249SQ20091006115
公开日2009年9月23日 申请日期2009年3月18日 优先权日2009年3月18日
发明者刘志亮, 刘振利, 刘振果, 彭大鹏, 戴梦红, 斯琴朝克图, 王玉莲, 袁宗辉, 邱荣超, 陈冬梅, 陶燕飞, 黄玲利 申请人:华中农业大学