专利名称：灯盏花强心作用有效部位及制备方法
技术领域：
本发明涉及中药技术领域，更具体的说是一种灯盏花强心作用有效部位及其制备 方法和含它们的药物制剂，以及该制剂在治疗急、慢性充血性心力衰竭药物方面的应用。
背景技术：
充血性心力衰竭(congestive heart faiture)是由于心功能减损，虽然发挥代偿 能力后，心输出量仍不能满足静息或活动情况下全身组织代谢需要，因而体内有关部位发 生血液瘀积，产生一系列的临床症状和体征，是常见的临床综合症。按充血性心力衰竭发病 的急缓，可以分为急性充血性心力衰竭和慢性充血性心力衰竭；根据左右心室发病的先后， 可分为左心室衰竭和右心室衰竭；按心力衰竭时血液动力学的改变，可分为低心排量和高 心排量心力衰竭。后者如严重贫血或动静脉瘘等，即使心脏功能无明显降低，心输出量正常 或相应增加，敢不能满足需要，而出现心力衰竭。临床以慢性低心排量充血性心力衰竭较常 见。《灵枢 经脉》曰“手少阴气绝则脉不通，脉不通则血不流。”明确指出心气虚导致 血流瘀滞。《血证论》进一步指出“血积既久，其水乃成”、“瘀血化水，亦发水肿，是血病而兼 也”。由此推论出心气虚导致血瘀，血瘀又进一步引起水停心下，从而引发了喘咳、水肿、心 悸等一系列症状。近年来，现代中医医家在深入研究中医古籍的基础上，结合临床实践，对 心力衰竭的病因病机进行了全面而系统探讨。大多数研究认为本病以心之阳气虚衰为本， 血脉瘀滞、水饮内停、痰浊不化为标，属本虚标实，虚实夹杂之证。郭维琴认为，气虚血瘀、阳 虚水泛是CHF最主要病机。心气虚、心阳虚是病理基础，血脉瘀滞为中心环节。毛春燕提出 慢性心力衰竭的病机可以用“虚”、“瘀”、“邪”三字来概括，心、肺、脾、肾虚衰是本，湿浊瘀血 内停为标，外邪引动是为诱因。邓铁涛教授强调，“五脏皆致心衰，非独心也”。五脏六腑息 息相关，肺、脾、肝、肾的功能失调均可影响于心而发生心力衰竭。然五脏之中，心属火，脾属 土，心脾母子关系，故在心力衰竭的病理演变中，心、脾功能失调是导致痰瘀病理产物的重 要因素。马中夫等经过长期临床实践，融合了中西医对心力衰竭的病机和临床的各阶段表 现，规范出下列模式左心衰即心虚证，病机为心气虚，左心排血不足，致使血行不畅，宗气 运转不利；右心衰即心肺气虚证，病机为心气虚，运血不利，体循环不畅；全心衰即心阳暴 脱综合征，病机为心阳衰竭，导致气血津液、水液逆乱，而出现“四脱二瘀综合征”。灯盏花是萝蘼科植物杠柳的干燥根皮，中医认为其具有祛风湿、强筋骨的功效，主 要用于风寒湿痹、腰膝酸软、心悸气短、下肢浮肿等。因灯盏花兼有强心及利尿的功效，近年 来灯盏花常和益气、温阳、化瘀、利水的其它中药组成复方，应用于CHF的临床治疗，如复方 生脉饮，强心饮、芪加冲剂、北五加皮合剂、心衰灵等。从其制备工艺来看，均为汤剂或药材 粉末装入胶囊等全成分入药的方法。灯盏花中含有强心苷成分灯盏花，既是治疗急、慢性心 衰的有效成分，又是有毒成分，故应对其进行含量控制；而且灯盏花中强心苷成分灯盏花不 能得到富集，不符合现代中药“三效”(高效，速效，长效)、“三小”(剂量小，毒性小，副作用 小)以及“三便”(便于储存，携带和服用)的要求。
发明内容
本发明一个目的是对在先研究的进一步补充，提供一种灯盏花强心作用有效部 位，其活性成分灯盏花的含量达到50%以上。同时提供了灯盏花强心作用有效部位的制备 方法。本发明也公开了以灯盏花强心作用有效部位为活性组分，与一种或多种药学上可 接受的载体、赋形剂或稀释剂结合制成各种制剂。本发明的技术方案概述如下以灯盏花提取物为原料，采用索氏提取、树脂吸附、 柱层析等工艺中的一种或者两种工艺，并结合薄膜浓缩、真空干燥、喷雾干燥、冷冻干燥等 常用干燥方法制备成灯盏花强心作用有效部位；采用HPLC法测定所制备的有效部位活性 成分灯盏花含量在50%以上；并且可以将其用常规方法制成各种剂型的药物，用于治疗 急、慢性充血性心力衰竭。灯盏花强心作用有效部位的制备方法，它是以灯盏花提取物为原料，采用索氏提 取、树脂吸附、柱层析中的一种或两种方法进行分离、纯化；并以水或10 99. 5%的醇类、 酯类、酮类或烷烃及商代烷烃类有机溶剂的一种或两种为溶剂或洗脱剂，可进行梯度或等 度洗脱；合并灯盏花含量较高的流份，浓缩干燥，得到含灯盏花50 %以上的灯盏花强心作 用的有效部位；灯盏花含量较低的流份合并浓缩后重新进行制备。本发明所述的索氏提取所用溶剂为乙酸乙酯、氯仿、乙醇、甲醇之一种或两种；提 取时间为1 M小时。所采用的树脂吸附法所用树脂为非极性大孔树脂或弱极性大孔树脂。所用洗脱剂 为浓度范围为水或v/v 10 99. 5%的甲醇、乙醇、丙酮水溶液。所述柱层析可以是正相柱层析，也可以是反相柱层析；可以是梯度洗脱，也可以是 等度洗脱；可进行1次或多次。更进一步解释，所述的正相柱层析填料为可以是硅胶，也可以是三氧化二铝或氨 基键合相硅胶，所用洗脱剂为乙酸乙酯、氯仿、甲醇、乙醇、己烷、丙酮之一种或二种混合溶 剂。反相柱层析填料可以是碳十八烷基键合相硅胶，也可以是碳八烷基键合相硅胶或 活性炭，洗脱剂可以是甲醇、乙醇、乙腈、水之一种或两种混合溶剂。所采用的干燥方法为薄 膜浓缩、真空干燥、喷雾干燥、冷冻干燥等常用干燥方法。作为治疗急、慢性充血性心力衰竭的药剂，它包含灯盏花强心作用有效部位以及 一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。其中，灯盏花强心作用有效部位的常规 用量一般为每日0. 5 2. 5mg，可以根据患者的病情、医生诊断的情况加以适当的调整。灯盏花强心作用有效部位可以按常规方法制成各种固体和液体剂型的药物，制成 固体制剂如片剂、缓释片、分散片、滴丸、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、散剂、栓剂等；制成液体制剂 如注射剂、口服液、粉针剂、糖浆剂、乳剂、混悬剂、酊剂、喷雾剂等等。制备口服药剂可采用乳糖或淀粉做载体，明胶，羧甲基纤维素钠，羟丙基甲基纤维 素，甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等是合适的粘合剂。作为崩解剂可选用羧甲基淀粉钠、或 微晶纤维素，常以滑石粉，微粉硅胶，硬脂酸甘油酯，硬脂酸钙或镁等作为合适的抗粘剂和 润滑剂。
制备液体制剂，例如注射用粉针剂，可以加入药学适用的一种或一种以上附加物， 例如填充剂选自药用的氯化钠、葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、山梨醇或木糖醇之一种。优选氯化 钠、葡萄糖、甘露醇、木糖醇之一种；更优选为甘露醇，氯化钠或葡萄糖，其用量未做特殊规 定，但优选的用量为当粉针剂用2mL注射用水溶解后，溶液的渗透压与0. 9%的氯化钠相等 或相近。本发明工艺简单，可实现工业化生产；实用经济，溶媒可反复使用；产品富集灯盏 花强心作用活性成分灯盏花达50%以上，并可制成各种剂型治疗急慢性充血性心力衰竭， 且灯盏花含量可以得到控制。下面通过药效学实验进一步说明本发明的有益效果灯盏花有效部位对离体心脏心功能的影响采用离体心脏灌流的方法观察灯盏花有效部位对心功能的影响。选取健康大鼠16 只，随机分为2组，每组8只，大鼠断头，迅速取出心脏，置于4°C Krebs-Henseleit液中，丝 线固定，灌流，灌流液恒温37°C，通入95%氧气。接心电电极，待心电平稳，将灌注压调节在 46 士 3mmHg，灌流量调节在6. 00 士 0. 06mL/min进行恒压恒流灌注，稳定后记录给药前LVSP、 LVEDP, 士 dp/dtmax，经给药孔缓慢注入0. 2mL/心脏配制好的药液；有效部位组按0. 17mg有 效部位/心脏给药，空白组0. 2mL Krebs-Henseleit液/心脏，给药完毕后立即记录上述各 项指标，持续观察5分钟，结果如下表灯盏花有效部位对离体心脏心功能的影响组别LVSPLVEDP+dp/dtTOX-dp/dtm HR给药前给药后给药前给药后给药前给药后给药前给药后给药前给药后空白组76±1077±120. 9±4. 61. 3 士 5. 11219土1961233±168646 + 154658 ±166176 + 32173 土 34有效部位组80 土 1191 土 15*1.6±3· 71.4±4. 21028士2061267土332**602 ±140731土201**175±38174 土 39注*表示与空白组比P < 0. 05，#表示与空白组比P < 0. 01结论灯盏花有效部位在恒压、恒流灌注条件下，能显著升高大鼠离体心脏的 LVSP,增加士 dp/dtmax，降低LVEDP，改善心功能，具有强心作用。
具体实施例方式以下实施例用来帮助理解本发明，并且不用于也不应被解释为以任何方式对所列 出的权利要求中发明的限制。其中原料可以参考实施例的方法制备或在市面上购买。实施例1灯盏花提取物60g，悬浮于水中，过滤后用Dltll大孔树脂吸附，先用水洗，后用10% 乙醇洗脱，再用60%乙醇洗脱，收集60%洗脱液，减压浓缩至干，回收溶剂；将所得固体进 行硅胶柱层析，乙酸乙酯甲醇=20 1等度洗脱，每IOOmL为一份，用薄层层析(展开剂 氯仿甲醇水=65 35 10的下层，硅胶G薄层板，3，5，_ 二硝基苯甲酸试剂显色)检 验收集的流份，将含有灯盏花的流份合并，减压浓缩后在同样条件下再进行一次硅胶柱层 析，经薄层检验(薄层条件同上)，合并灯盏花含量较高的流份，浓缩干燥，得到灯盏花强心作用的有效部位liang，经HPLC测定，灯盏花含量为51%;灯盏花含量较低的流份合并后可 重新进行柱层析。实施例225g灯盏花提取物，与25g硅胶混勻，用乙酸乙酯进行索氏提取，提取12小时；提 取液经减压浓缩至干，回收溶剂，将所得固体与5g硅胶混勻，上样于硅胶柱，先用乙酸乙酯 洗脱，再用乙酸乙酯乙醇=25 1洗脱，经薄层检验(薄层条件同实施例1)，合并灯盏花 含量较高的流份，冷冻干燥，得到灯盏花强心作用的有效部位48mg，经HPLC测定，灯盏花含 量为58% ；灯盏花含量较低的流份合并后可重新进行柱层析。实施例3灯盏花提取物5g进行反相柱层析，填料为碳十八键合相硅胶，用10% 99. 5%甲 醇梯度洗脱，经薄层检验(薄层条件实施例1)收集灯盏花含量较高的流份，合并，浓缩后喷 雾干燥，得到灯盏花强心作用的有效部位10mg，经HPLC测定，灯盏花含量为56%;灯盏花含 量较低的流份可重新进行一次反相柱层析。实施例4灯盏花提取物50g悬浮于水中，过滤后上样于D3tll大孔树脂柱，水洗后，用20%甲 醇洗脱，再用70%甲醇洗脱，收集70%洗脱部位浓缩，将浓缩所得固体进行正相柱层析，填 料为三氧化二铝，依次用v/V 10 1 10 8的己烷丙酮洗脱，收集含有灯盏花的流份， 合并，浓缩后真空干燥，得到灯盏花强心作用的有效部位90mg，经HPLC测定，灯盏花含量为 54%。实施例5灯盏花强心作用有效部位380mg(灯盏花含量为58% )，乳糖170g，微晶纤维素 100g，羧甲基淀粉钠8g，5% PVPK30溶液80ml，阿斯巴甜5g，硬脂酸镁lg，微粉硅胶2g。制备方法将灯盏花强心作用有效部位、乳糖、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠及阿斯 巴甜混合均勻。用PVPK3tl (聚乙烯吡咯烷酮)溶液制软材，20目筛制粒，60°C干燥整粒。整 粒后的颗粒加入硬脂酸镁及微粉硅胶，混合均勻，装入胶囊。每粒胶囊重约0.35克。胶囊 中灯盏花含量为0.2 Img/粒。实施例6灯盏花强心作用有效部位380mg(灯盏花含量为51 % )，乳糖110g，预胶化淀粉 30g，微晶纤维素38g，交联聚乙烯吡咯烷酮15g，3% PVPK30乙醇溶液40ml，甜菊糖苷5g，硬 脂酸镁2g。制备方法将灯盏花强心作用有效部位、乳糖、预胶化淀粉、微晶纤维素及交联聚 乙烯吡咯烷酮混合均勻。用3% PVPK3tl乙醇溶液制软材，20目筛制粒，60°C干燥并整粒。整 粒后的颗粒加入甜菊糖苷和硬脂酸镁，混合均勻，压片。分散片中灯盏花含量为0. 19mg/ 片。实施例7
灯盏花强心作用有效部位800mg (灯盏花含量为51 % )以普通注射剂制造法，用加 热到60°C的注射用蒸馏水2000ml溶解，活性炭脱色，用NaCl调节等渗，滤过，无菌封入2ml 安瓿。本注射剂2ml中含灯盏花0. 40mg。
实施例8
将40g聚乙二醇4000置水浴上加热使熔融，加入灯盏花强心作用有效部位 200mg(灯盏花含量为51% )使溶解分散，再加入到预热的滴丸机中，85°C保温，调节滴速， 将药液滴入到10 15°C的液体石蜡冷凝液中，收集滴丸，吸去附着在滴丸表面的冷凝液， 干燥。每丸丸重约为40mg。滴丸中灯盏花含量为0. Img/丸。
权利要求
1.一种灯盏花强心作用有效部位的制备方法，其特征是以灯盏花提取物为原料，采用 索氏提取、树脂吸附、柱层析中的一种或两种方法进行分离、纯化；并以水或10 99. 5%的 醇类、酯类、酮类或烷烃及商代烷烃类有机溶剂的一种或两种为溶剂或洗脱剂，可进行梯度 或等度洗脱；合并含有灯盏花的流份浓缩干燥，得到含灯盏花50%以上的灯盏花强心作用 的有效部位。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征是所述索氏提取，采用的有机溶剂为乙酸乙 酯、氯仿、乙醇、甲醇之一种或两种；提取时间为1 M小时。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征是所述树脂吸附法所用树脂为非极性大孔树 脂或弱极性大孔树脂；所用洗脱剂为浓度范围为水或ν/ν 10% 95%的甲醇、乙醇、丙酮 水溶液。
4.如权利要求2所述的制备方法，其特征是所述柱层析包括正相柱层析、反相柱层 析；可以是梯度洗脱，也可以是等度洗脱；可进行1次或多次洗脱。
5.如权利要求4硅胶，所用洗脱剂为乙酸乙酯、氯仿、甲醇、乙醇、丙酮、己烷之一种或 二种混合溶剂；反相柱层析吸附剂是碳十八烷基键合相硅胶、碳八烷基键合相硅胶或活性 炭，洗脱剂是甲醇、乙醇、乙腈、水之一种或两种。
6.权利要求1所述的灯盏花强心作用有效部位在制备治疗急、慢性充血性心力衰竭药 物方面的应用。
全文摘要
本发明公开了一种灯盏花强心作用有效部位的制备方法，其特征是以灯盏花提取物为原料，采用索氏提取、树脂吸附、柱层析中的一种或两种方法进行分离、纯化；并以水或10～99.5％的醇类、酯类、酮类或烷烃及卤代烷烃类有机溶剂的一种或两种为溶剂或洗脱剂，可进行梯度或等度洗脱；合并含有灯盏花的流份浓缩干燥，得到含灯盏花50％以上的灯盏花强心作用的有效部位经药理实验证明，该药物组合物对急慢性充血性心力衰竭有明显治疗作用。
文档编号A61K125/00GK102048781SQ20091007119
公开日2011年5月11日 申请日期2009年11月5日 优先权日2009年11月5日
发明者宋德成 申请人:天津太平洋制药有限公司