专利名称：一种温胃舒胶囊的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种中成药的质量检测方法，特别是一种温胃舒胶囊的质量检测方法。
背景技术：
温胃舒胶囊为党参、山药、乌梅、附子(制)、肉苁蓉(制)、陈皮、黄芪(炙)、白术 (炒)、补骨脂、肉桂、山楂(炒)、砂仁等经加工制成的胶囊剂，补肾健脾，温中养胃，行气止 痛。用于脾肾阳虚引起的胃脘冷痛，胀气，嗳气，纳差，畏寒，无力等症，及萎縮性胃炎、慢性 胃炎表现有上述证候者。在现有的温胃舒胶囊质量检测方法中只有薄层扫描法对补骨脂素 进行含量测定，方法上存在精密度不高、重复性大、容易出现偏差，难以真实的反映产品质 量的缺点，且没有毒性药材附子的限度控制方法，因此，无法保证产品的用药安全性。
发明内容
本发明的目的在于克服现有质量标准的不足，提供一种能够有效保证产品的用药 安全性，可控、稳定且操作简便的温胃舒胶囊的质量检测方法。 其技术方案是一种温胃舒胶囊的质量检测方法，其特征在于该方法包括
A、黄芪甲苷鉴别取本品内容物，加甲醇超声提取，提取液蒸干，残渣加水使溶解， 用水饱和的正丁醇振摇提取，用氨试液洗涤，取正丁醇液蒸干，残渣加水溶解，通过D101型 大孔吸附树脂柱，分别用水、不同浓度乙醇溶液洗脱，收集高浓度乙醇溶液洗脱液，蒸干，残 渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液。 照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以 三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热 至斑点显色清晰，分别置日光下及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色 谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点；紫外光灯(365nm)下显相同的荧光斑点。
B、橙皮苷鉴别取本品内容物，以乙酸乙酯加热回流提取，提取液通过聚酰胺柱， 用水洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，静置，取上清液作为供试品溶液。另取橙皮 苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯_甲醇_水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三 氯化铝试液，吹干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试色谱中，在与对照品色谱相应的位置 上，显相同颜色的荧光斑点。 C、党参鉴别取本品内容物，加水使溶解，再加入乙醇，静置，滤过，滤液蒸干，残渣 加稀盐酸、乙醚加热回流，放冷，分取乙醚层，酸液用乙醚提取，合并乙醚液，挥干，残渣加乙 醇溶解，作为供试品溶液。另取党参对照药材，加水加热回流，滤过，滤液，同法制成对照药 材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲 烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色 清晰，在日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑
4点。 D、补骨脂素和异补骨脂素鉴别取本品内容物，加乙醚加热回流，放冷，滤过，滤液 挥干，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液。另取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品，加乙醇 制成混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照品溶液，分 别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷一乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%氢 氧化钠甲醇溶液，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应 的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 E、乌头碱限度检查取本品内容物一定量，研细，置具塞锥形瓶中，加乙醚振摇提 取，再加氨试液振摇提取洗涤，放置，再分取醚层，蒸干，残渣加无水乙醇溶解，作为供试品 溶液。另取乌头碱对照品，加无水乙醇制成一定浓度的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱 法试验，吸取一定量的供试品溶液和对照品溶液，分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的 硅胶G薄层板上，以正己烷_乙酸乙酯_无水乙醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化 铋钾试液，在日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于 对照品的斑点，或不出现斑点。 F、补骨脂素和异补骨脂素含量测定取一定量本品内容物，以1%盐酸甲醇索氏 回流提取，提取液定容，过滤，取续滤液作为供试品溶液；另取补骨脂素对照品、异补骨脂素 对照品各适量，以甲醇溶解，制成混合溶液，作为对照品溶液；照高效液相色谱法测定，以 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0. 4%磷酸溶液为流动相，检测波长为246nm。理 论塔板数按补骨脂素峰计算应不低于3000，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入 液相色谱仪，测定，结果应为温胃舒胶囊每粒含补骨脂以补骨脂素(CuH603)和异补骨脂素 (CuH603)的总量计，不得少于0. 30mg。 本发明温胃舒胶囊的质量检测方法，首先，对温胃舒胶囊中补骨脂药材的含量测 定方法进行了改进，采用本方法具有分离度好、精密度高、重复性好、操作简便、指标成分更 全面的特点，能对温胃舒胶囊的质量进行可靠的量化控制；第二、增加了温胃舒胶囊中有毒 药材附子的乌头碱的限度检查，通过对其限度作出控制，能够保证临床上的用药安全性；第 三，增加了对黄芪甲苷、橙皮苷、党参和补骨脂的定性鉴别方法，这些定性鉴别方法的建立， 加大了温胃舒胶囊质量的控制力度。因此，本发明温胃舒胶囊的质量检测方法进一步提高 了温胃舒胶囊的质量标准，充分保证了产品的质量和确切疗效，也为鉴别市场上的伪劣产 品提供了科学的依据。
具体实施例方式
温胃舒胶囊处方成份党参、山药、乌梅、附子(黑顺片)、肉苁蓉(酒蒸)、陈皮、炙 黄芪、白术(清炒)、补骨脂、肉桂、炒南山楂、砂仁。
制备工艺取处方量药材，其中砂仁粉碎成细粉；其余党参等十一味加水煎煮二 次，第一次1. 5小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液静置，取上清液浓縮至相对密度为 1. 35-1. 3S(2(TC )的稠膏，加入砂仁细粉与适量滑石粉、淀粉及二氧化硅，混匀，制颗粒，干 燥，装入胶囊，制成IOOO粒，即得。
温胃舒胶囊鉴别 1、黄芪甲苷鉴别取本品内容物5g，研细，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，
5滤液蒸干。残渣加水30ml微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30ml，合并 正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次30ml，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使 溶解，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径lcm，柱高为15cm)，用水50ml洗脱，弃去水洗液， 再用40%乙醇30ml洗脱，弃去40%乙醇液；继用70%乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干， 残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每lml含lmg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取 上述供试品溶液10ia，对照品溶液5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲 醇-水(13 : 7 : 2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在 105t:加热至斑点显色清晰，分别置日光下及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在 与对照品色谱相应的位置上，目光下显相同颜色的斑点；紫外光灯(365nm)下显相同的橙 黄色荧光斑点。 2、橙皮苷鉴别取本品内容物3g，研细，加乙酸乙酯15ml，加热回流1小时，滤过， 滤液通过已处理好的聚酰胺柱(14 30目，4g，内径1. Ocm)上，用水80ml洗脱，收集洗脱 液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，静置，取上清液作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加 甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B) 试验，吸取上述两种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水 (20 : 3 : 2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，吹干，置紫外光灯(365nm)下 检视。供试色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
3、党参鉴别取本品内容物4g，研细，加水10ml使溶解，再缓慢加入乙醇80ml，静 置30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加稀盐酸20ml、乙醚30ml，加热回流1小时，放冷，分取乙 醚层，酸液用乙醚20ml振摇提取1次，合并乙醚液，挥干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试 品溶液。另取党参对照药材2g，加水30ml、加热回流30分钟，滤过，滤液蒸至约10ml，同法制 成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种
溶液各5ia，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(10 : 7 : 0.5) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105t:加热至斑点显色清晰，在日
光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。 4、补骨脂素和异补骨脂素鉴别取本品内容物2g，研细，加乙醚30ml，加热回流30 分钟，放冷，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取补骨脂素对照 品、异补骨脂素对照品，加乙醇制成每lml各含lmg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层 色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液5 ii 1、对照品溶液 2yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷一乙酸乙酯(4 : 1)为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以10%氢氧化钠甲醇溶液，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
乌头碱限度检查 取本品24粒内容物，研细，置具塞锥形瓶中，加乙醚150ml，振摇10分钟，加氨试 液8ml，振摇提取30分钟，放置2小时，分取醚层，蒸干，残渣加无水乙醇lml使溶解，作为供 试品溶液。另取乌头碱对照品，加无水乙醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照 薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液15 ii 1，对照 品溶液5iU，分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶6薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-无水乙醇(7 :3:i)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，在日光下检 视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于对照品的斑点，或不出 现斑点。 温胃舒胶囊含量测定 取本品内容物，研细，粉末过4号筛，混匀，取0.6g，精密称定，置索氏提取器中，加 1 %盐酸甲醇适量，提取至无色，提取液浓縮至约10ml，转移至25ml量瓶中，再加1 %盐酸甲 醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；另取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照 品各适量，精密称定，加甲醇制成每lml各含10 ii g混合溶液，作为对照品溶液；照高效液 相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.4%磷酸溶液(45 : 55)为流 动相，检测波长为246nm。理论塔板数按补骨脂素峰计算应不低于3000，分别精密吸取对照 品溶液与供试品溶液各20ia，注入液相色谱仪，测定，温胃舒胶囊每粒含补骨脂以补骨素 (CuH603)和异补骨脂素(CnH603)的总量计，不得少于0.30mg。
权利要求
一种温胃舒胶囊的质量检测方法，其特征在于该方法包括A、黄芪甲苷鉴别取本品内容物，加甲醇超声提取，提取液蒸干，残渣加水使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取，用氨试液洗涤，取正丁醇液蒸干，残渣加水溶解，通过D101型大孔吸附树脂柱，分别用水、不同浓度乙醇溶液洗脱，收集高浓度乙醇溶液洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，分别置日光下及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点；紫外光灯(365nm)下显相同的荧光斑点。B、橙皮苷鉴别取本品内容物，以乙酸乙酯加热回流提取，提取液通过聚酰胺柱，用水洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，静置，取上清液作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，吹干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。C、党参鉴别取本品内容物，加水使溶解，再加入乙醇，静置，滤过，滤液蒸干，残渣加稀盐酸、乙醚加热回流，放冷，分取乙醚层，酸液用乙醚提取，合并乙醚液，挥干，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液。另取党参对照药材，加水加热回流，滤过，滤液，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，在日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。D、补骨脂素和异补骨脂素鉴别取本品内容物，加乙醚加热回流，放冷，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液。另取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品，加乙醇制成混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷一乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％氢氧化钠甲醇溶液，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。E、乌头碱限度检查取本品内容物一定量，研细，置具塞锥形瓶中，加乙醚振摇提取，再加氨试液振摇提取洗涤，放置，再分取醚层，蒸干，残渣加无水乙醇溶解，作为供试品溶液。另取乌头碱对照品，加无水乙醇制成一定浓度的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取一定量的供试品溶液和对照品溶液，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-无水乙醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，在日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上出现的斑点应小于对照品的斑点，或不出现斑点。F、补骨脂素和异补骨脂素含量测定取一定量本品内容物，以1％盐酸甲醇索氏回流提取，提取液定容，过滤，取续滤液作为供试品溶液；另取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品各适量，以甲醇溶解，制成混合溶液，作为对照品溶液；照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.4％磷酸溶液为流动相，检测波长为246nm。理论塔板数按补骨脂素峰计算应不低于3000，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，结果应为温胃舒胶囊每粒含补骨脂以补骨脂素(C11H6O3)和异补骨脂素(C11H6O3)的总量计，不得少于0.30mg。
2. 根据权利要求1所述的温胃舒胶囊的质量检测方法，其特征在于所述的低浓度乙 醇溶液浓度范围为30-40%，高浓度乙醇溶液浓度范围为70-80%。其所述"三氯甲烷-甲 醇-水"展开剂的比例为13 :7:2。
3. 根据权利要求1所述的温胃舒胶囊的质量检测方法，其特征在于聚酰胺柱的型号 为14 30目，4g，内径1.0cm;其所述"乙酸乙酯-甲醇-水"展开剂的比例为20 :3:2。
4. 根据权利要求1所述的温胃舒胶囊的质量检测方法，其特征在于其所述"三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸"展开剂的比例为io : 7 : o.5。
5. 根据权利要求l所述的温胃舒胶囊的质量检测方法，其特征在于其所述"正己烷-乙酸乙酯"展开剂的比例为4 : i。
6. 根据权利要求l所述的温胃舒胶囊的质量检测方法，其特征在于其所述"正己烷-乙酸乙酯-无水乙醇"展开剂的比例为7 :3:i。
7. 根据权利要求l所述的温胃舒胶囊的质量检测方法，其特征在于样品提取以1%盐酸甲醇置索氏提取器中提取至无色。
8. 根据权利要求l所述的温胃舒胶囊的质量检测方法，其特征在于所述，甲醇_0.4% 磷酸溶液的容积配比为45 : 55。
全文摘要
本发明公开了一种温胃舒胶囊的质量检测方法。该方法包括温胃舒胶囊的鉴别、乌头碱限度及补骨脂素和异补骨脂素的含量测定等步骤。该方法测定，每粒含补骨脂以补骨脂素(C11H6O3)和异补骨脂素(C11H6O3)的总量计，不得少于0.30mg。本发明的方法技术先进、操作简便，能够有效的控制产品的质量。
文档编号A61P1/14GK101703728SQ20091018536
公开日2010年5月12日 申请日期2009年11月6日 优先权日2009年11月6日
发明者张慧 申请人:合肥神鹿双鹤药业有限责任公司