治疗乳疮的乳疮丸的质量控制方法

专利名称：治疗乳疮的乳疮丸的质量控制方法
技术领域：
本发明属于中成药的技术领域，涉及以中药材为原料制成的一种治疗乳疮的乳疮 丸的质量控制方法。
背景技术：
乳疮丸是一种经典中成药，卫生部标准WS3-B-0569-91记载处方及质量标准处方金银花 250g蒲公英 250g 天花粉 150g穿山甲(制)IOOg没药(醋制)IOOg 青皮(醋制)IOOg连翘 250g 当归 200g 赤芍150g乳香(醋制)IOOg地黄 IOOg 川芎IOOg制法以上十二味，粉碎成细粉，混勻，过筛。用水制丸，干燥，即得。检查应符合丸剂项下有关的各项规定(附录8页)。功能与主治解毒消肿，消炎止痛。用于乳疮，痈肿初起，灼热作痛坚硬不消。目前记载有关金银花、连翘、当归单味药材的文献有很多，如安徽农业科学，2009， 37(24) :11545-11546记载郝凤霞1，郝洪涛2，杨敏丽1(1.宁夏大学能源化工重点实验室， 宁夏银川750021 ;2.宁夏大学机械工程学院，宁夏银川750021) “RP2HPLC法同时测定金 银花中绿原酸·芦丁·木犀草素的含量”目的同时测定金银花中绿原酸、芦丁、木犀草素 的含量。[方法]利用反相高效液相色谱法测定，采用hrbax SB2C18柱Q50mmX4. 6mm, 5μπι)，以甲醇0.02%磷酸=50 50为流动相，流速l.Oml/min，检测波长;350nm，柱温 30°C。结果不同品种的金银花中绿原酸、芦丁、木犀草素的含量差别较大。结论该方法简 单、可行，为金银花的质量控制提供了一定的参考。辽宁中医药大学学报，第10卷第12期，2008年12月记载梁璇，孙德国(辽宁中 医药大学附属医院，辽宁沈阳110032) “薄层扫描法测定金银花两种加工方法的绿原酸含 量”目的研究金银花不同加工方法的绿原酸含量。方法薄层扫描法结果生晒品较干品 绿原酸含量高。结论不同加工方法可直接影响绿原酸含量。其中生晒法较烘干法为优。南昌大学学报(理科版)第33卷第3期2009年6月记载胡海山1，2，余燕影13， 万春花2，鄢兵2(1.南昌大学化学系，江西南昌330031 ；2.江西省分析测试研究所，江西 南昌330029)文章编号1006-0464 0009)03-0253-04 “金银花的高效液相色谱指纹图谱 和聚类分析”采用Agilent TC-C18色谱柱，以乙腈-0. 1 %磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱， 在254nm波长下对15批不同产地和不同品种的金银花进行测定，建立了金银花的高效液相 色谱指纹图谱。采用程度相似度计算法结合聚类分析对15批金银花所共有的15个特征峰 进行比较分析，从而对其质量和品质进行评价，判定结果与实际情况相吻合。通过实验方法 学考察，表明该高效液相色谱指纹图谱法具有良好的精密度和重现性。该方法准确、可行， 为金银花药材的质量控制提供实验依据。现代医药卫生2009年第25卷第15期记载余晓琴1，王颖1，张丽平2，董林1(1.四川省食品药品检验所，四川成都610036 ；2.成都纺织高等专科学校，四川成都611731) “利 胆片中药材的鉴别及大黄的含量测定”目的提高利胆片的质量标准。方法采用薄层色 谱(TLC)法鉴别金银花、黄芩、知母及白芍，用高效液相色谱(HPLC)法测定方中大黄的含 量。结果TLC鉴别斑点明显。含量测定大黄素0.01064 0.3192 μ g、大黄酚0.02586 0.7758yg，进样量与峰面积线性关系良好。平均加样回收率大黄素为99. 80%，RSD = 0. 78% (η = 6)；大黄酚为 99. 72%，RSD= 1. 18% (n = 6)。结论建立的 TLC 鉴别和 HPLC 含量测定方法专属性强、重复性好，可用于利胆片的质量控制。中国实验方剂学杂志第15卷第7期2009年7月记载熊艳1，2，朱晶晶1，王智民 13，林丽美1，夏伯候1(11中国中医科学院中药研究所，北京100700 ；21湖南中医药大学 药学院，湖南长沙410004) “连翘及其制剂的分析方法研究”在回顾分析连翘质量控制技 术、方法的基础上，归纳了连翘质量控制的成就和存在问题，并提出采用“一测多评”的多成 分质量控制新方法来评价其质量，为连翘质量的发展提供一种新思路。但是尚未见与以上公开的卫生部标准WS3-B-0569-91乳疮丸的处方相似或相 同，配比不同，功效相似的产品标准的改进的文献，但是现有技术乳疮丸的卫生部标准 WS3-B-0569-91中还存在鉴别项目、鉴别手段、含量测定方法不完善等缺点，为中药走向世 界各国需要完善、提高中药的质量标准。

发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的乳疮丸标准不足之处，提供一种能够定性、定 量检测药物成分的乳疮丸的质量控制方法。为了达到本发明的目的采用的技术方案是一种治疗乳疮的乳疮丸的质量控制方 法，其中所述的药物配方由中药材金银花250g蒲公英250g天花粉150g穿山甲 (制)IOOg没药(醋制)IOOg 青皮(醋制)IOOg连翘 250g当归200g 赤 芍150g乳香(醋制)100g地黄 IOOg 川芎IOOg组成，制法以上十二味，粉碎成 细粉，混勻，过筛；用水制丸，干燥，即得，其特征在于其方法的步骤是(1)以连翘、绿原酸为对照品，薄层色谱法鉴别乳疮丸处方中是否含有连翘、金银 花成分；(2)以绿原酸为对照品，高效液相色谱法检测乳疮丸处方中绿原酸的含量。所述的治疗乳疮的乳疮丸的质量控制方法，其特征在于所述的薄层色谱法鉴别 乳疮丸处方中是否含有连翘成分的方法为取本品粉末2g，加入三氯甲烷50ml，加热回 流1小时，过滤，弃去滤液，残渣挥干，加乙酸乙酯50ml，加热回流提取30分钟，滤过，滤 液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取连翘对照药材0. 2g，同法制成对 照药材溶液；薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一高效硅胶G薄 层板上，以苯-丙酮-乙酸乙酯-甲酸-水为展开剂，苯；丙酮乙酸乙酯甲酸水= 4 5 6 0.6 0.6，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105°C下加热至斑 点显色；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；所述的薄层色谱法鉴别乳疮丸处方中是否含有金银花成分的方法为取本品粉末 2g，加入乙醚20ml，加热回流30min，滤过，弃去滤液，残渣加乙醇20ml超声处理30分钟， 滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取绿原酸对照品加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分 别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水为展开剂，乙酸丁酯甲酸水= 7.5 2.5 2. 5的上层液作，展开，取出，晾干，在紫外灯下365nm检视，供试品色谱中，在 与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。所述的治疗乳疮的乳疮丸的质量控制方法，其特征在于以绿原酸为对照品，液相 色谱法检测乳疮丸处方中绿原酸的含量的方法为(1)色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈 水磷酸=10 90 0.4为流动相；检测波长为327nm;理论板数按绿原酸峰计算应不低 于1000，绿原酸峰与相邻峰的分离度应符合规定要求；(2)对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每Iml 含30 μ g的溶液，即得；(3)供试品溶液的制备取本品3g，研细，取样品粉末0. 5g，精密称定，置具塞锥形 瓶中，精密量取80%甲醇50ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，称重，用80%甲醇补足减 失的重量，过滤，即得；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μ 1，注入液相色谱仪， 测定，即得；供试样品每克含绿原酸不得少于1. 70mg。发明有益效果质量标准中设置的连翘、金银花(绿原酸)等薄层鉴别项目，用高 效液相色谱法测定该药物中绿原酸的含量；供试样品每克含绿原酸不得少于1. 70mg的定 量指标及检验方法，使质量标准较为完善，严格控制药品的质量，确保提高产品质量，修订 后的质量标准，提高了药品的质量控制。


图1是连翘薄层鉴别谱图。图2是金银花薄层鉴别谱图。
图3是对照品的HPLC图谱。图4是供试品溶液的HPLC图谱。图5是金银花、蒲公英双空白对照品的HPLC图谱。图6是绿原酸线性曲线图。
具体实施例方式下面结合实施例，对本发明进一步说明，实施例1改进后的乳疮丸质量标准处方金银花 250g蒲公英 250g 天花粉 150g穿山甲(制)IOOg没药(醋制)IOOg 青皮(醋制)IOOg连翘 250g 当归 200g 赤芍 150g乳香(醋制)IOOg地黄 IOOg 川芎 IOOg制法以上十二味，粉碎成细粉，混勻，过筛。用水制丸，干燥，即得。性状本品为褐色的水丸；味咸苦。检查应符合丸剂项下有关的各项规定(附录8页)。鉴别(1)连翘鉴别取本品粉末2g，加入三氯甲烷50ml，加热回流1小时，过滤，弃去滤液，残渣挥干，加乙酸乙酯50ml，加热回流提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇 Iml使溶解，作为供试品溶液。另取连翘对照药材0.2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色 谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10μ 1，分别点于同一 高效硅胶G薄层板上，以苯-丙酮-乙酸乙酯-甲酸-水G 5 6 0.6 0.6)为展 开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105°C下加热至斑点显色。供试品色谱 中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)金银花鉴别取本品粉末2g，加入乙醚20ml，加热回流30min，滤过，弃去滤液， 残渣加乙醇20ml超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶 液。另取绿原酸对照品加甲醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱 法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10μ 1，分别点于同一高 效硅胶G薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水(7.5 2.5 2.5)的上层液作为展开剂，展开， 取出，晾干，在紫外灯下(365nm)检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相 同颜色的荧光斑点。含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈水磷 酸(10 90 0.4)为流动相；检测波长为327nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于1000， 绿原酸峰与相邻峰的分离度应符合规定要求。对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每Iml含 30 μ g的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品3g，研细，取样品粉末0. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶 中，精密量取80 %甲醇50ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，称重，用80 %甲醇补足减失 的重量，过滤，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ 1，注入液相色谱仪，测定， 即得。本品每克含绿原酸不得少于1. 70mg。功能与主治解毒消肿，消炎止痛。用于乳疮，痈肿初起，灼热作痛坚硬不消。用法与用量口服，一次9g，一日2 3次。规格每袋装9g贮藏密封。实施例2乳疮丸质量标准起草说明乳疮丸原质量标准中无鉴别和含量测定，对 金银花、连翘的薄层鉴别以及金银花的含量测定方法进行研究试验，结果增加金银花和连 翘的薄层鉴别和金银花中绿原酸的含量测定。一.薄层鉴别1.连翘鉴别1. 1材料与试剂甲醇、三氯甲烷、苯、丙酮、乙酸乙酯、甲酸分析纯连翘中国药品生物制品检定所，批号120908-2005121.2供试品溶液的制备取本品粉末2g，加入三氯甲烷50ml，加热回流1小时，滤过，弃去滤液，残渣挥干， 加乙酸乙酯50ml加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。
1. 3对照药材溶液的制备另取连翘对照药材0. 2g，同法制成对照药材溶液。1. 4空白对照品溶液的制备按处方、工艺，除连翘外制备空白对照品，再将空白对照品粉碎成细粉，按照供试 品溶液制备方法制备空白对照品溶液。1. 5实验方法照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶 液各10 μ 1，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以苯-丙酮-乙酸乙酯-甲酸-水 (4 5 6 0.6 0.6)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105°C 下加热至斑点显色。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点， 空白对照品无干扰。结果见图1，图1中1 空白对照品2 对照品3 供试品2金银花鉴别2. 1材料与试剂甲醇、乙醇、乙醚、乙酸丁酯、甲酸分析纯绿原酸中国药品生物制品检定所，批号110753-2004132. 2供试品溶液的制备取本品粉末2g，加入乙醚20ml，加热回流30分钟，滤过，弃去滤液，残渣加乙醇 20ml超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。2. 3对照品溶液的制备取绿原酸对照品加甲醇制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液。2. 4空白对照品溶液的制备按处方、工艺，除金银花外制备空白对照品，再将空白对照品粉碎成细粉，按照供 试品溶液制备方法制备空白对照品溶液。2. 5实验方法照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各 ΙΟμΙ，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水(7.5 2.5 2. 5)的 上层液作为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外灯下(365nm)检视，供试品色谱中，在与对照 品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，空白对照品无干扰。结果见图2，图2中1 对照品2:供试品3:空白对照品。二.绿原酸含量测定2. 1仪器与材料仪器=Waters 2695高效液相色谱仪；Sartorius CP224S.电子天平.检测器:ffaters2487材料与试剂绿原酸对照品由中国药品生物制品检验所生产(批号110753-200413)磷酸分析纯；乙腈、甲醇为色谱纯2. 2实验方法2. 2. 1色谱条件的选择
2. 2. 1. 1色谱柱的选择选择C18色谱柱；柱温30°C;检测波长的选择参考《中国 药典》2005版一部金银花药材含量测定项下的检测波长，选择检测波长327nm。流速的选 择1. Oml/min2. 2. 1.2流动相的选择参考《中国药典》2005版一部金银花药材含量测定项下的流动相，选择乙 腈-水-磷酸比例分别为(15 85 0.4)、(13 87 0. 4),(10 90 0.4)三个不同 比例，结果以乙腈-水-磷酸(10 90 0.4)为展开剂，峰分离最好。2. 2. 1. 3确定色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈水磷酸(10 90 0. 4)为流动相； 检测波长为327nm。2. 2. 2对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每Iml含30 μ g的溶液，即得。 结果见图3色谱峰结果
权利要求
1.一种治疗乳疮的乳疮丸的质量控制方法，其中所述的药物配方由中药材金银花 250g蒲公英 250g天花粉 150g穿山甲(制)IOOg没药(醋制)IOOg青皮(醋制)IOOg连翘250g 当归200g赤芍150g乳香(醋制)IOOg地黄IOOg川芎IOOg组成，制法以上十二味，粉碎成细粉，混勻，过筛；用水制丸，干燥，即得，其特征在于其方法的步骤是(1)以连翘、绿原酸为对照品，薄层色谱法鉴别乳疮丸处方中是否含有连翘、金银花成分；(2)以绿原酸为对照品，高效液相色谱法检测乳疮丸处方中绿原酸的含量。
2.根据权利要求1所述的治疗乳疮的乳疮丸的质量控制方法，其特征在于所述的 薄层色谱法鉴别乳疮丸处方中是否含有连翘成分的方法为取本品粉末2g，加入三氯甲烷 50ml，加热回流1小时，过滤，弃去滤液，残渣挥干，加乙酸乙酯50ml，加热回流提取30分钟， 滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取连翘对照药材0. 2g，同法制 成对照药材溶液；薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一高效硅胶G 薄层板上，以苯-丙酮-乙酸乙酯-甲酸-水为展开剂，苯丙酮乙酸乙酯甲酸水= 4 5 6 0.6 0.6，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105°C下加热至斑 点显色；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；所述的薄层色谱法鉴别乳疮丸处方中是否含有金银花成分的方法为取本品粉末2g， 加入乙醚20ml，加热回流30min，滤过，弃去滤液，残渣加乙醇20ml超声处理30分钟，滤 过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取绿原酸对照品加甲醇制成每 Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液，薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别 点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水为展开剂，乙酸丁酯甲酸水= 7.5 2.5 2. 5的上层液作，展开，取出，晾干，在紫外灯下365nm检视，供试品色谱中，在 与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
3.根据权利要求1所述的治疗乳疮的乳疮丸的质量控制方法，其特征在于以绿原酸 为对照品，液相色谱法检测乳疮丸处方中绿原酸的含量的方法为(1)色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈水 磷酸=10 90 0.4为流动相；检测波长为327nm;理论板数按绿原酸峰计算应不低于 1000，绿原酸峰与相邻峰的分离度应符合规定要求；(2)对照品溶液的制备取绿原酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每Iml含 30 μ g的溶液，即得；(3)供试品溶液的制备取本品3g，研细，取样品粉末0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶 中，精密量取80 %甲醇50ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，称重，用80 %甲醇补足减失 的重量，过滤，即得；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μ 1，注入液相色谱仪，测定，即 得；供试样品每克含绿原酸不得少于1. 70mg。
全文摘要
本发明属于中成药的技术领域，涉及以中药材为原料制成的一种治疗乳疮的乳疮丸的质量控制方法，步骤是以以连翘、绿原酸为对照品，薄层色谱法鉴别乳疮丸处方中是否含有连翘、金银花成分；以绿原酸为对照品，高效液相色谱法检测乳疮丸处方中绿原酸的含量；修订后的质量标准，使质量标准较为完善，提高了药品的质量控制，对中药现代化和中药走出国门具有重大意义。
文档编号A61K35/36GK102068548SQ200910228358
公开日2011年5月25日 申请日期2009年11月19日 优先权日2009年11月19日
发明者刘志宏, 律兆荣, 杨瑾, 王磊, 陈坚 申请人:天津中新药业集团股份有限公司乐仁堂制药厂