专利名称：人参次苷h提取物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种中药提取物及其制备，特别涉及人参次苷H提取物及其制备。
背景技术：
人参在治疗心脑血管疾病方面，有许多报道。人参次苷，可治疗冠心病和缺血性中风。人参次苷H为人参类皂苷成分经水解产生的次级皂苷，再经硅胶柱层析精制所得 到的有效部位-H组皂苷，其组分为人参皂苷Mil、Mi2和他3，其中他2为该药的主要成分， 也是该药的主要抗癌活性成分。药效学研究表明人参皂苷他2对肝癌、黑色素瘤B16、宫 颈癌及肉瘤S180等癌细胞的增殖有显著的特异性的抑制作用。其作用机理为在癌细胞 增殖过程中，经人参皂苷他2作用，使癌细胞停止在一定的增殖期，并促使其逆转为正常细 胞。含有人参皂苷Mil、Mi2和他3的H组皂苷，为“人参次苷H”，体外实验研究发现人参次 苷H对多种人源肿瘤细胞的增殖均有明显的抑制作用。现有技术分离人参次苷H的效果不佳，本发明人在对人参次苷H提取物进行研究 过程中，采用新的分离技术，试验出一组新的人参次苷H提取物及其制备方法，这些人参次 苷H提取物具有疗效高，纯度高，吸收好，质量稳定，同时制备方法分离效果佳，含量高，工 艺简单，操作方便，成本低廉，适合工业化生产。
发明内容
本发明提供一种人参次苷H提取物，所述提取物中人参皂苷Iih1含量范围为 1% _15%，人参皂苷Mi2含量范围为10% -30%，人参皂苷Iih1和人参皂苷Iih2总和不少于 25%，人参总次苷含量以人参皂苷Mi2计不少于50%。本发明的人参次苷H提取物，制备步骤如下步骤1、含有人参皂苷类成分的药材用水提取，提取液醇沉，收集上清液，浓缩至 干，得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于ΡΗ5左右的缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，反应，反 应完成后稀释反应液，收集沉淀物；步骤3、沉淀物用乙醇溶解，拌入硅胶中，进行硅胶柱层析，用乙醇和乙酸乙酯混合 液进行洗脱，收集富含人参皂苷Mil和他2的流份，浓缩即得；其中步骤3所述乙醇和乙酸乙酯混合液为含5-10%乙醇的乙酸乙酯。优选的制备方法如下步骤1、选自西洋参叶、西洋参、三七、三七叶、人参或人参叶等含有人参皂苷类成 分的药材用水提取，提取液浓缩至相对密度为1. 18-1. 23，加乙醇进行醇沉，放置，上清液浓 缩至干得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于ΡΗ5左右的醋酸缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，反 应，反应完成后稀释反应液，收集沉淀物；
步骤3、沉淀物用乙醇溶解，拌入硅胶中，进行硅胶柱层析，用含5-10%乙醇的乙 酸乙酯进行洗脱，薄层TLC检查洗脱结果，收集富含人参皂苷Mil和Μι2的流份，浓缩即得。更优选的制备方法如下步骤1、选自西洋参叶、西洋参、三七、三七叶、人参或人参叶等含有人参皂苷类成 分的药材用水提取2-3次，每次1-2小时，每次加8-12倍水量，混合提取液，浓缩至相对密 度为1. 18-1. 23，加95%乙醇进行醇沉，使含醇量达到75%，放置12h以上，过滤，上清液浓 缩至干得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于PH5左右的醋酸缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，在 40°C反应，反应完成后加水稀释反应液并搅拌均勻，析出沉淀，收集沉淀物，得人参总次苷 粗品；步骤3、人参总次苷粗品用乙醇加热使溶解，拌入2倍量的硅胶中，进行硅胶柱层 析，用含5-10 %乙醇的乙酸乙酯进行洗脱，薄层TLC检查洗脱结果，收集富含人参皂苷Mil 和人参皂苷他2的流份，浓缩。本发明还包括人参次苷H提取物的检测方法，所述检测方法步骤如下(1)人参次苷H中人参总次苷含量以人参皂苷Mi2计不得少于50%对照品溶液的制备精密称取经40°C减压干燥M小时的人参皂苷Mi2对照品适 量，加甲醇制成每Iml含0. 15mg的溶液，作为对照品溶液。供试品溶液的制备精密称取人参次苷H组合物10mg，用50ml正丁醇饱和的水超 声5分钟后转移至分液漏斗，加入2g氯化钠溶解后，用正丁醇乙酸乙酯溶液(水饱和的正 丁醇-乙酸乙酯1 4)萃取三次，每次50ml，合并正丁醇乙酸乙酯层溶液，浓缩至干，残渣 用甲醇溶解，定量转移至50ml量瓶中，稀释至刻度，摇勻，即得。测定法精密量取对照品溶液及供试品溶液各1ml，分别置15ml具塞试管中，水浴 蒸干，精密加入新配制的5%香草醛冰醋酸-高氯酸(1 4)混合溶液anl，摇勻，密塞，置 60°C水浴中加热15分钟，取出，立即放入冰水中冷却2分钟，精密加入冰醋酸IOml，摇勻，以 试剂作空白。照分光光度法(中国药典2005年版一部附录V A)，在550nm的波长处测定吸 收度，计算，即得。(2)人参次苷H中人参皂苷Iih1和人参皂苷Mi2含量之和不得少于25%。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂；以乙腈为流动 相A，以0. 2%磷酸溶液为流动相B，按下列梯度进行洗脱；检测波长为203nm，理论板数按人 参皂苷Mi2峰计算应不低于7000。
时间(分)流动相A (%)流动相B ( %)0 1035 5065 5010 4050 9050 1040 50901050 5590 3510 6555 603565 对照品溶液的制备精密称取40°C减压干燥的人参皂苷Iihp Rh2适量，加甲醇溶 解并制成每Iml分别含0. lmg、0. 5mg的混合溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备取人参次苷H组合物25mg，精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇 稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μ 1，注入液相色谱，测定， 即得。 本发明最优选的制备方法在本发明实施例中。本发明还包括人参次苷H提取物的药物组合物，以及人参次苷H提取物在制备抗 肿瘤药物中的应用。本发明所述药物组合物是用上述人参次苷H提取物作为药物活性成分制备成的 药物制剂。本发明的药物组合物，根据需要可以含有药物可接受的载体，其中人参次苷H提 取物作为药物活性成分，其在制剂中所占重量百分比可以是0. 1-99.9%，其余为药物可接 受的载体。本发明的药物制剂组合物，以单位剂量形式存在，所述单位剂量形式是指制剂的 单位，如片剂的每片，胶囊的每粒胶囊，口服液的每瓶，颗粒剂每袋，注射剂的每支等。本发明的药物组合物可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括片剂、糖衣片剂、 薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸 剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴 剂、贴剂。本发明的药物组合物，其口服给药的制剂可含有常用的赋形剂，诸如粘合剂、填充 剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂和湿润剂，必要时可对片剂进行包衣。适用的填充剂包括纤维素、甘露糖醇、乳糖和其它类似的填充剂。适宜的崩解剂包 括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羟基乙酸淀粉钠。适宜的润滑剂包括，例如硬 脂酸镁。适宜的药物可接受的湿润剂包括十二烷基硫酸钠。可通过混合，填充，压片等常用 的方法制备固体口服组合物。进行反复混合可使活性物质分布在整个使用大量填充剂的那 些组合物中。口服液体制剂的形式例如可以是水性或油性悬浮液、溶液、乳剂、糖浆剂或酏剂， 或者可以是一种在使用前可用水或其它适宜的载体复配的干燥产品。这种液体制剂可含 有常规的添加剂，诸如悬浮剂，例如山梨醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基 纤维素、硬脂酸铝凝胶或氢化食用脂肪，乳化剂，例如卵磷脂、脱水山梨醇一油酸酯或阿拉 伯胶；非水性载体(它们可以包括食用油)，例如杏仁油、分馏椰子油、诸如甘油的酯的油性 酯、丙二醇或乙醇；防腐剂，例如对羟基苯甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸，并且如果需 要，可含有常规的香味剂或着色剂。对于注射剂，制备的液体单位剂型含有本发明的活性物质和无菌载体。根据载体 和浓度，可以将此化合物悬浮或者溶解。溶液的制备通常是通过将活性物质溶解在一种载 体中，在将其装入一种适宜的小瓶或安瓿前过滤消毒，然后密封。辅料例如一种局部麻醉 齐U、防腐剂和缓冲剂也可以溶解在这种载体中。为了提高其稳定性，可在装入小瓶以后将这 种组合物冰冻，并在真空下将水除去。本发明的药物组合物，在制备成药剂时可选择性的加入适合的药物可接受的载 体，所述药物可接受的载体选自甘露醇、山梨醇、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐 酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素C、EDTA 二钠、EDTA钙钠，一价碱金属的碳酸盐、醋
7酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、木糖醇、 麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及 其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性 剂、聚乙二醇、环糊精、环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。本发明的药物组合物在使用时根据病人的情况确定用法用量，可每日服三次，每 次1-20剂，如1-20袋或粒或片，每剂Img-IOOOmgo以下通过实验数据说明本发明的有益效果。人参次苷H注射液经药效学实验证明对小鼠多种移植实验性肿瘤有明显的抑制 作用，50、25、12. 5mg/kg人参次苷H注射液对小鼠肉瘤(S180)、肝癌A22 0fep ·Α22)、艾氏腹 水癌(ESC)、肺癌(Lewis)均有明显的抑制作用；人参次苷H注射液对荷瘤小鼠腹腔巨噬细 胞吞噬功能和体液免疫功能均有明显的增强作用，并可显著提高NK细胞活性，40mg/kg人 参次苷H注射液既可促进脾细胞淋转，又可明显提高白细胞介素-2(IL1)活性。有关试验表明，本发明的人参次苷H提取物比现有技术疗效高，纯度高，产率高， 吸收好，质量稳定，用途新颖，同时制备方法工艺简单，操作方便，成本低廉，适合工业化生 产。
具体实施例方式下面以具体来说明本发明，实施例是为了便于理解本发明，而不以任何方式限制 本发明的权利要求和核心内容。实施例1人参次苷H提取物的制备步骤1、西洋参叶用水提取2次，每次2小时，每次加10倍水量，混合提取液，浓缩 至相对密度为1. 18，加95%乙醇进行醇沉，使含醇量达到75%，放置1 以上，过滤，上清液 浓缩至干得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于PH5左右的醋酸缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，在 40°C反应，反应完成后加水稀释反应液并搅拌均勻，析出沉淀，收集沉淀物，得人参总次苷 粗品；步骤3、人参总次苷粗品用乙醇加热使溶解，拌入2倍量的硅胶中，进行硅胶柱层 析，用含5%乙醇的乙酸乙酯进行洗脱，薄层TLC检查洗脱结果，收集富含人参皂苷和人 参皂苷他2的流份，浓缩。实施例2人参次苷H提取物的制备步骤1、西洋参用水提取2次，每次2小时，每次加10倍水量，混合提取液，浓缩至 相对密度为1. 18，加95%乙醇进行醇沉，使含醇量达到75%，放置1 以上，过滤，上清液浓 缩至干得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于PH5左右的醋酸缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，在 40°C反应，反应完成后加水稀释反应液并搅拌均勻，析出沉淀，收集沉淀物，得人参总次苷 粗品；步骤3、人参总次苷粗品用乙醇加热使溶解，拌入2倍量的硅胶中，进行硅胶柱层 析，用含10%乙醇的乙酸乙酯进行洗脱，薄层TLC检查洗脱结果，收集富含人参皂苷Mil和 人参皂苷Μι2的流份，浓缩。
实施例3人参次苷H提取物的制备步骤1、三七用水提取2次，每次2小时，每次加10倍水量，混合提取液，浓缩至相 对密度为1. 18，加95%乙醇进行醇沉，使含醇量达到75%，放置1 以上，过滤，上清液浓缩 至干得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于PH5左右的醋酸缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，在 40°C反应，反应完成后加水稀释反应液并搅拌均勻，析出沉淀，收集沉淀物，得人参总次苷 粗品；步骤3、人参总次苷粗品用乙醇加热使溶解，拌入2倍量的硅胶中，进行硅胶柱层 析，用含7. 5%乙醇的乙酸乙酯进行洗脱，薄层TLC检查洗脱结果，收集富含人参皂苷和 人参皂苷Μι2的流份，浓缩。实施例4人参次苷H提取物的制备步骤1、三七叶用水提取2次，每次2小时，每次加10倍水量，混合提取液，浓缩至 相对密度为1. 18，加95%乙醇进行醇沉，使含醇量达到75%，放置1 以上，过滤，上清液浓 缩至干得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于PH5左右的醋酸缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，在 40°C反应，反应完成后加水稀释反应液并搅拌均勻，析出沉淀，收集沉淀物，得人参总次苷 粗品；步骤3、人参总次苷粗品用乙醇加热使溶解，拌入2倍量的硅胶中，进行硅胶柱层 析，用含5%乙醇的乙酸乙酯进行洗脱，薄层TLC检查洗脱结果，收集富含人参皂苷和人 参皂苷他2的流份，浓缩。实施例5人参次苷H提取物的制备步骤1、人参用水提取2次，每次2小时，每次加10倍水量，混合提取液，浓缩至相 对密度为1. 23，加95%乙醇进行醇沉，使含醇量达到75%，放置1 以上，过滤，上清液浓缩 至干得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于PH5左右的醋酸缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，在 40°C反应，反应完成后加水稀释反应液并搅拌均勻，析出沉淀，收集沉淀物，得人参总次苷 粗品；步骤3、人参总次苷粗品用乙醇加热使溶解，拌入2倍量的硅胶中，进行硅胶柱层 析，用含10%乙醇的乙酸乙酯进行洗脱，薄层TLC检查洗脱结果，收集富含人参皂苷Mil和 人参皂苷Μι2的流份，浓缩。实施例6人参次苷H提取物的制备步骤1、人参叶用水提取2次，每次2小时，每次加10倍水量，混合提取液，浓缩至 相对密度为1. 18-1. 23，加95%乙醇进行醇沉，使含醇量达到75%，放置12h以上，过滤，上 清液浓缩至干得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于PH5左右的醋酸缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，在 40°C反应，反应完成后加水稀释反应液并搅拌均勻，析出沉淀，收集沉淀物，得人参总次苷 粗品；步骤3、人参总次苷粗品用乙醇加热使溶解，拌入2倍量的硅胶中，进行硅胶柱层 析，用含5%乙醇的乙酸乙酯进行洗脱，薄层TLC检查洗脱结果，收集富含人参皂苷Mil和人参皂苷他2的流份，浓缩。实施例7人参次苷H提取物的制备步骤1、西洋参叶用水提取2次，每次2小时，每次加12倍水量，混合提取液，浓缩 至相对密度为1. 18-1. 23，加95%乙醇进行醇沉，使含醇量达到75%，放置12h以上，过滤， 上清液浓缩至干得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于PH5左右的醋酸缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，在 40°C反应，反应完成后加水稀释反应液并搅拌均勻，析出沉淀，收集沉淀物，得人参总次苷 粗品；步骤3、人参总次苷粗品用乙醇加热使溶解，拌入2倍量的硅胶中，进行硅胶柱层 析，用含7. 5%乙醇的乙酸乙酯进行洗脱，薄层TLC检查洗脱结果，收集富含人参皂苷和 人参皂苷Μι2的流份，浓缩。实施例8人参次苷H提取物的制备步骤1、西洋参叶用水提取3次，每次1小时，每次加8倍水量，混合提取液，浓缩至 相对密度为1. 20，加95%乙醇进行醇沉，使含醇量达到75%，放置1 以上，过滤，上清液浓 缩至干得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于PH5左右的醋酸缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，在 40°C反应，反应完成后加水稀释反应液并搅拌均勻，析出沉淀，收集沉淀物，得人参总次苷 粗品；步骤3、人参总次苷粗品用乙醇加热使溶解，拌入2倍量的硅胶中，进行硅胶柱层 析，用含8%乙醇的乙酸乙酯进行洗脱，薄层TLC检查洗脱结果，收集富含人参皂苷和人 参皂苷他2的流份，浓缩。实施例9人参次苷H提取物的组合物以本发明的人参次苷H提取物为药物活性成分，根据制剂学常规技术，制备成人 参次苷H提取物的药物制剂组合物，如片剂，胶囊，注射剂等。实施例10本发明人参次苷H提取物的含量测定 本发明的实施例1的人参次苷H提取物，检测结果人参皂苷Mi1含量为5 %，人参 皂苷他2含量为；人参总次苷含量以人参皂苷Μι2计为52%。实施例11本发明人参次苷H提取物的含量测定本发明的实施例2，3，4，5，6，7，8，的人参次苷H提取物，用实施例10的方法检测， 检测结果为实施例2,3,4,5,6,7,8的提取物，其中人参皂苷Mi1含量为2，5，3，6，8，10， 9 %，人参皂苷Rh2含量为25，29，观，22，23，22，25 % ；人参总次苷以人参皂苷Rh2计为53， 56, 55, 58, 52, 57, 53% ο实施例12本发明人参次苷H提取物的抗肿瘤活性比较试验分两组，用现有技术中的提取方法得到的人参次苷H提取物和本发明最优选 的人参次苷H提取物进行抗肿瘤活性对比，证明本发明的人参次苷H提取物在小鼠肉瘤 (S180)、肝癌A22 0fep*A22)、艾氏腹水癌(ESC)、肺癌(Lewis)等何瘤小鼠上抗肿瘤活性更高。
权利要求
1.一种人参次苷H提取物，其特征在于，提取物中人参皂苷Iih1含量范围为-15%， 人参皂苷Mi2含量范围为10% -30 %，人参皂苷Iih1和人参皂苷Mi2总和不少于25 %，人参 总次苷含量以人参皂苷Mi2计不少于50%。
2.权利要求1的人参次苷H提取物，其特征在于，步骤如下步骤1、含有人参皂苷类成分的药材，用水提取，提取液醇沉，收集上清液，浓缩至干，得 总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于PH5左右的缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，反应，反应完 成后稀释反应液，收集沉淀物；步骤3、沉淀物用乙醇溶解，拌入硅胶中，进行硅胶柱层析，用乙醇和乙酸乙酯混合液进 行洗脱，收集富含人参皂苷Mil和他2的流份，浓缩即得；其中步骤3所述乙醇和乙酸乙酯混合液为含5-10%乙醇的乙酸乙酯。
3.权利要求1的人参次苷H提取物，其特征在于，制备方法如下步骤1、选自西洋参叶、西洋参、三七、三七叶、人参或人参叶等含有人参皂苷类成分的 药材用水提取，提取液浓缩至相对密度为1. 18-1. 23，加乙醇进行醇沉，放置，上清液浓缩至 干得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于ΡΗ5左右的醋酸缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，反应，反 应完成后稀释反应液，收集沉淀物；步骤3、沉淀物用乙醇溶解，拌入硅胶中，进行硅胶柱层析，用含5-10%乙醇的乙酸乙 酯进行洗脱，薄层TLC检查洗脱结果，收集富含人参皂苷Mil和Μι2的流份，浓缩即得。
4.权利要求1的人参次苷H提取物，其特征在于，制备方法如下步骤1、西洋参叶、西洋参、三七、三七叶、人参或人参叶，用水提取2-3次，每次12-2小 时，每次加8-12倍水量，混合提取液，浓缩至相对密度为1. 18-1. 23，加95%乙醇进行醇沉， 使含醇量达到75%，放置12h以上，过滤，上清液浓缩至干得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于PH5左右的醋酸缓冲液，加β-葡萄糖苷酶，在40°C反 应，反应完成后加水稀释反应液并搅拌均勻，析出沉淀，收集沉淀物，得人参总次苷粗品；步骤3、人参总次苷粗品用乙醇加热使溶解，拌入2倍量的硅胶中，进行硅胶柱层析，用 含5-10%乙醇的乙酸乙酯进行洗脱，薄层TLC检查洗脱结果，收集富含人参皂苷Mil和人参 皂苷他2的流份，浓缩。
5.权利要求1的人参次苷H提取物的检测方法，其特征在于，步骤如下 (1)人参次苷H中人参总次苷含量以人参皂苷Mi2计不得少于50%对照品溶液的制备精密称取经40°C减压干燥M小时的人参皂苷Mi2对照品适量，加 甲醇制成每Iml含0. 15mg的溶液，作为对照品溶液。供试品溶液的制备精密称取人参次苷H组合物10mg，用50ml正丁醇饱和的水超声 5分钟后转移至分液漏斗，加入2g氯化钠溶解后，用正丁醇乙酸乙酯溶液(水饱和的正丁 醇-乙酸乙酯1 4)萃取三次，每次50ml，合并正丁醇乙酸乙酯层溶液，浓缩至于，残渣用 甲醇溶解，定量转移至50ml量瓶中，稀释至刻度，摇勻，即得。测定法精密量取对照品溶液及供试品溶液各1ml，分别置15ml具塞试管中，水浴蒸 干，精密加入新配制的5%香草醛冰醋酸-高氯酸(1 4)混合溶液anl，摇勻，密塞，置60°C 水浴中加热15分钟，取出，立即放入冰水中冷却2分钟，精密加入冰醋酸IOml，摇勻，以试剂作空白。照分光光度法(中国药典2005年版一部附录V A)，在550nm的波长处测定吸收 度，计算，即得。(2)人参次苷H中人参皂苷Iih1和人参皂苷Mi2含量之和不得少于25%。 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂；以乙腈为流动相 A，以0. 2%磷酸溶液为流动相B，按下列梯度进行洗脱；检测波长为203nm，理论板数按人参 皂苷Rh2峰计算应不低于7000。
6.含权利要求1的人参次苷H提取物的药物组合物。
7.权利要求1的人参次苷H提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。
8.权利要求1的人参次苷H提取物的制备方法，其特征在于，步骤如下步骤1、选自西洋参叶、西洋参、三七、三七叶、人参或人参叶等含有人参皂苷类成分的 药材用水提取，提取液醇沉，收集上清液，浓缩至干，得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于ΡΗ5左右的缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，反应，反应完 成后稀释反应液，收集沉淀物；步骤3、沉淀物用乙醇溶解，拌入硅胶中，进行硅胶柱层析，用乙醇和乙酸乙酯混合液进 行洗脱，收集富含人参皂苷Mil和他2的流份，浓缩即得；其中步骤3所述乙醇和乙酸乙酯混合液为含5-10%乙醇的乙酸乙酯。
9.权利要求8的制备方法，其特征在于，步骤如下步骤1、选自西洋参叶、西洋参、三七、三七叶、人参或人参叶等含有人参皂苷类成分的 药材用水提取，提取液浓缩至相对密度为1. 18-1. 23，加乙醇进行醇沉，放置，上清液浓缩至 干得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于ΡΗ5左右的醋酸缓冲液，加β -葡萄糖苷酶，反应，反 应完成后稀释反应液，收集沉淀物；步骤3、沉淀物用乙醇溶解，拌入硅胶中，进行硅胶柱层析，用含5-10%乙醇的乙酸乙 酯进行洗脱，薄层TLC检查洗脱结果，收集富含人参皂苷Mil和Μι2的流份，浓缩即得。
10.权利要求8的制备方法，其特征在于，步骤如下步骤1、选自西洋参叶、西洋参、三七、三七叶、人参或人参叶等含有人参皂苷类成分的 药材用水提取2-3次，每次1-2小时，每次加8-12倍水量，混合提取液，浓缩至相对密度为·1. 18-1. 23，加95%乙醇进行醇沉，使含醇量达到75%，放置12h以上，过滤，上清液浓缩至 干得总皂苷；步骤2、步骤1得到的总皂苷溶于PH5左右的醋酸缓冲液，加β-葡萄糖苷酶，在40°C反 应，反应完成后加水稀释反应液并搅拌均勻，析出沉淀，收集沉淀物，得人参总次苷粗品；步骤3、人参总次苷粗品用乙醇加热使溶解，拌入2倍量的硅胶中，进行硅胶柱层析，用 含5-10%乙醇的乙酸乙酯进行洗脱，薄层TLC检查洗脱结果，收集富含人参皂苷Mil和人参 皂苷他2的流份，浓缩。
全文摘要
本发明涉及一种中药提取物及其制备，特别涉及人参次苷H提取物及其制备。本发明的提取物中人参皂苷Rh1含量范围为1％-15％，人参皂苷Rh2含量范围为10％-30％，人参皂苷Rh1和人参皂苷Rh2总和不少于25％，人参总次苷含量以人参皂苷Rh2计不少于50％。
文档编号A61K31/704GK102058644SQ200910228460
公开日2011年5月18日 申请日期2009年11月17日 优先权日2009年11月17日
发明者周水平, 宋兆辉, 张兰兰, 朱永宏, 林万里, 蔡楠, 黄芝娟 申请人:天津天士力制药股份有限公司