专利名称：脑安胶囊的检测方法
技术领域：
本发明涉及药品检验技术领域，具体地说，涉及一种脑安胶囊的检测方法。
背景技术：
传统中成药检测方法只能定性说明中成药的成分，高效和定量的检测中成药的成分，是现代中药产业急需解决的技术问题。 脑安胶囊由五种天然药物经过粉碎、提纯、过滤、煎煮、干燥等一系列工艺制成，具
有良好的活血化瘀、益气通络的作用，用于脑血栓形成急性期及恢复期，对半身不遂、口舌
歪斜、偏身麻木、口角流涎、脑供血不足都有较好的疗效，还可以预防中风。 脑安胶囊为硬胶囊，内容物为棕色至棕褐色颗粒状粉末；气清香，味苦。主要由川
芎、当归、红花和人参制成，其中，川穹有活血顺气的作用；当归安定神经、补血活血、润肠止
痛的作用；红花活血散瘀止痛；人参对中枢神经系统有镇静作用，对很多兴奋药有对抗作
用，并能减轻中枢抑制药的抑制作用。 脑安胶囊的处方如下川芎1000克 当归800克
红花 500克人参 100克 冰片1克 脑安胶囊的制法如下以上五味，将人参粉碎成细粉，川芎、当归加入90%乙醇回流提取2次，依次为2、1小时，分次滤过，合并滤液，回收乙醇后加入人参细粉，拌匀，7(TC干燥，粉碎；药渣加水煎煮2次，每次1小时，合并煎液，滤过；红花加水煮沸后70 80°C热浸两次，每次2小时，合并煎液，滤过，与上述川芎、当归煎液合并，浓縮至相对密度为1. 10(80°C )的清膏，冷却，加乙醇至含醇量为60%，放置过夜，滤过，滤液回收乙醇，浓縮至相对密度为1. 30 1. 35(80°C )的清膏，干燥，粉碎，冰片研细，与上述两种浸膏粉混匀，装入胶囊，制成1000粒，即得。 脑安胶囊的制法复杂，其疗效受药材的品质、含量和药剂的制作工艺影响较大，然而现有的检测方法，定性、定量检测不全面，无法更好的保证药品的质量，进而对药品使用的安全性和有效性构成威胁。
发明内容
本发明为解决上述现有技术的不足，提供一套全面有效的检测方法，以弥补现有
标准的不足，严格控制脑安胶囊的质量稳定性。本发明提供的脑安胶囊的检测方法包括如
下步骤 A)粉末显微特征鉴别； B)薄层色谱法鉴别方中川芎、当归药材； C)薄层色谱法鉴别方中人参药材； D)鉴别的记录应当符合胶囊剂项下的规定； E)高效液相色谱法测定方中阿魏酸的含量；
F)高效液相色谱法测定方中人参皂苷的含量。
其中，步骤B包括 取脑安胶囊内容物5g，加乙醚40ml ，回流提取1小时，弃去乙醚液，药渣挥干溶剂， 加浓氨试液约1ml使湿润，加三氯甲烷40ml回流提取2小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇 lml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材、当归对照药材各2g，分别同法制成对照 药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，
以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-水按6 : 3 : 1.5 : 1.5 : 0.3的比例和等量的浓氨
试液混合的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与 对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 步骤C包括取脑安胶囊内容物5g，加三氯甲烷40ml，加热回流l小时，滤过，弃去 三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，加水0. 5ml拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇20ml，超声处理30 分钟，吸取上清液，加氨试液60ml，摇匀，放置分层，上层液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作 为供试品溶液；另取人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rgl对照品，加甲醇制成每lml各含lmg 的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2iU，分别点于同 一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水以15 : 40 : 22 : IO的比例在I(TC
以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105t:加热至
斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。
步骤E包括 El :色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0. 6mol/L醋酸溶液(30 : 70)为流 动相；检测波长为320nm ;理论板数按阿魏酸峰计算应不低于1500 ;
E2 :对照品溶液的制备 取阿魏酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含10 ii g的溶液，即得对照品 溶液； E3 :供试品溶液的制备 取本品20粒内容物，精密称定，研细，取约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇 80ml，回流提取至提取液无色，提取液回收甲醇至干，残渣加水20ml使溶解，用稀盐酸调节 pH值至1 2，用乙醚振摇提取4次(30ml， 20ml， 20ml， 10ml)，合并乙醚提取液，回收乙醚至 干，残渣用甲醇使溶解，转移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取滤液，即得供试 品溶液； E4 :测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测定，即得测 定结果；本品每粒含当归和川芎以阿魏酸(Q。&。0》计，不得少于60i!g。
步骤F包括 Fl :色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(20 : 80)为流动相；检测波长为 203nm ;理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于10000 ;
F2 :对照品溶液的制备 取人参皂苷Re对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含0. 15mg的溶液，即得
5对照品溶液； F3 :供试品溶液的制备 取本品20粒内容物，精密称定，研细，取约4g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯 甲烷适量，加热回流至无色，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，连同滤纸筒移置锥形瓶中，精 密加入水饱和正丁醇100ml，密塞，称定重量，放置过夜，超声处理30分钟，放冷，再称定重 量，用水饱和的正丁醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液50ml，用正丁醇饱和的1 % 的氢氧化钠溶液洗涤2次，每次50ml，弃去氢氧化钠溶液，正丁醇液用正丁醇饱和的水洗涤 2次，每次50ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至 刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；
F4 :测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测定，即得测
定结果；本品每粒含人参以人参皂苷Re (C48H82018)计，不得少于0. 20mg。 采用上述方案后，能够对脑安胶囊的成分及含量做很好的定性检测和定量检测，
保证药品的质量，从而提高药品使用的安全性和有效性。
具体实施例方式
下面通过具体实施例对本发明做进一步详细的描述。 本发明的检测方法主要包括观察、鉴别、检查和含量测定四个环节。其中的观察即 粉末显微特征鉴别，也就是取脑安胶囊药品观察，其内容物应当为棕色至棕褐色颗粒状粉 末；气清香，味苦。
鉴别
(1)薄层色谱法鉴别方中川芎、当归药材 取本品内容物5g，加乙醚40ml，回流提取1小时，弃去乙醚液，药渣挥干溶剂， 加浓氨试液约lml使湿润，加三氯甲烷40ml回流提取2小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙 醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取川芎对照药材、当归对照药材各2g，分别同法制成 对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述三 种溶液各5iU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-水
(6 : 3 : 1.5 : 1.5 : o.3)和等量的浓氨试液混合的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾
干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同 颜色的荧光斑点。 (2)薄层色谱法鉴别方中人参药材 取本品内容物5g，加三氯甲烷40ml，加热回流1小时，滤过，弃去三氯甲烷液，药 渣挥干溶剂，加水0. 5ml拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇20ml，超声处理30分钟，吸取上 清液，加氨试液60ml，摇匀，放置分层，上层液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶 液。另取人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rgl对照品，加甲醇制成每lml各含lmg的混合 溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取 上述两种溶液各2 ii 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷_乙酸乙酯_甲醇_水
(15 : 40 : 22 : io)i(rc以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸 乙醇溶液，在i05t:加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显
6相同的紫红色斑点。
检查
鉴别的记录应当符合胶囊剂项下的有关规定(中国药典2005年版一部附录I L)， 因此，根据鉴别的记录对胶囊剂进行水分、装量差异、崩解时限、重金属检查、砷盐检查、微 生物限度检查。
含量测定
1、川芎和当归照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.6mol/L醋酸溶液(30 : 70)为流 动相；检测波长为320nm。理论板数按阿魏酸峰计算应不低于1500。
对照品溶液的制备 取阿魏酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含10 ii g的溶液，即得对照品 溶液。 供试品溶液的制备 取本品20粒内容物，精密称定，研细，取约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇 80ml，回流提取至提取液无色，提取液回收甲醇至干，残渣加水20ml使溶解，用稀盐酸调节 pH值至1 2，用乙醚振摇提取4次(30ml， 20ml， 20ml， 10ml)，合并乙醚提取液，回收乙醚至 干，残渣用甲醇使溶解，转移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取滤液，即得供试 品溶液。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测定，即得测
定结果o 本品每粒含当归和川芎以阿魏酸(Q。&。0》计，不得少于60 ii g。
2、人参照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(20 : 80)为流动相；检测波长为 203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于10000。
对照品溶液的制备 取人参皂苷Re对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含0. 15mg的溶液，即得 对照品溶液。 供试品溶液的制备 取本品20粒内容物，精密称定，研细，取约4g，精密称定，置索氏提取器中，加三 氯甲烷适量，加热回流至无色，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，连同滤纸筒移置锥形瓶中， 精密加入水饱和正丁醇100ml，密塞，称定重量，放置过夜，超声处理(功率为250W，频率为 50kHz) 30分钟，放冷，再称定重量，用水饱和的正丁醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤 液50ml，用正丁醇饱和的1 %的氢氧化钠溶液洗涤2次，每次50ml，弃去氢氧化钠溶液，正丁 醇液用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次50ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解，转 移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
测定法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测定，即得测
定结果。 本品每粒含人参以人参皂苷Re (C48H82018)计，不得少于0. 20mg。 在本发明的上述教导下，本领域技术人员可以在上述实施例的基础上进行各种改
进和变形，而这些改进和变形，都落在本发明的保护范围内，本领域技术人员应该明白，上
述的具体描述只是更好的解释本发明的目的，本发明的保护范围由权利要求及其等同物限定。
权利要求
一种脑安胶囊的检测方法，其特征在于，包括如下步骤A)粉末显微特征鉴别；B)薄层色谱法鉴别方中川芎、当归药材；C)薄层色谱法鉴别方中人参药材；D)鉴别的记录应当符合胶囊剂项下的规定；E)高效液相色谱法测定方中阿魏酸的含量；F)高效液相色谱法测定方中人参皂苷的含量。
2. 按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤B包括取脑安胶囊内容物5g，加乙醚40ml，回流提取1小时，弃去乙醚液，药渣挥干溶剂，加浓氨试液约1ml使湿润，加三氯甲烷40ml回流提取2小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材、当归对照药材各2g，分别同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-水按6 : 3 : i. 5 : i. 5 : o. 3的比例和等量的浓氨试液混合的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
3. 按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤C包括取脑安胶囊内容物5g，加三氯甲烷40ml，加热回流1小时，滤过，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，加水O. 5ml拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇20ml，超声处理30分钟，吸取上清液，加氨试液60ml，摇匀，放置分层，上层液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rgl对照品，加甲醇制成每1ml各含lmg的混合溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水以15 : 40 : 22 : 10的比例在icrc以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105t:加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。
4. 按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述步骤E包括El :色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.6mol/L醋酸溶液(30 : 70)为流动相；检测波长为320nm ;理论板数按阿魏酸峰计算应不低于1500 ;E2 :对照品溶液的制备取阿魏酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含lOi! g的溶液，即得对照品溶液；E3 :供试品溶液的制备取本品20粒内容物，精密称定，研细，取约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇80ml，回流提取至提取液无色，提取液回收甲醇至干，残渣加水20ml使溶解，用稀盐酸调节pH值至1 2，用乙醚振摇提取4次(30ml， 20ml， 20ml， 10ml)，合并乙醚提取液，回收乙醚至干，残渣用甲醇使溶解，转移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取滤液，即得供试品溶液；E4 :测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10yl，注入液相色谱仪，测定，即得测定结果；本品每粒含当归和川芎以阿魏酸(Q。&。0》计，不得少于60iig。4、按照权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述步骤F包括Fl :色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(20 : 80)为流动相；检测波长为203nm ;理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于10000 ;F2 :对照品溶液的制备取人参皂苷Re对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含0. 15mg的溶液，即得对照品溶液；F3 :供试品溶液的制备取本品20粒内容物，精密称定，研细，取约4g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷适量，加热回流至无色，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，连同滤纸筒移置锥形瓶中，精密加入水饱和正丁醇100ml，密塞，称定重量，放置过夜，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用水饱和的正丁醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液50ml，用正丁醇饱和的1%的氢氧化钠溶液洗涤2次，每次50ml，弃去氢氧化钠溶液，正丁醇液用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次50ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；F4 :测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10yl，注入液相色谱仪，测定，即得测定结果；本品每粒含人参以人参皂苷Re (C48H82018)计，不得少于0. 20mg。
全文摘要
本发明提供一种脑安胶囊的检测方法，包括如下步骤A)粉末显微特征鉴别；B)薄层色谱法鉴别方中川芎、当归药材；C)薄层色谱法鉴别方中人参药材；D)鉴别的记录应当符合胶囊剂项下的规定；E)高效液相色谱法测定方中阿魏酸的含量；F)高效液相色谱法测定方中人参皂苷的含量。采用这种方法，能够对脑安胶囊的成分及含量做很好的定性检测和定量检测，保证药品的质量，从而提高药品使用的安全性和有效性。
文档编号A61K36/286GK101732387SQ20091026542
公开日2010年6月16日 申请日期2009年12月28日 优先权日2009年12月28日
发明者赵玉龙 申请人:辽源誉隆亚东药业有限责任公司