金钗石斛生物总碱在制备治疗糖尿病的药物中的应用及产品的制作方法

专利名称：：金钗石斛生物总碱在制备治疗糖尿病的药物中的应用及产品的制作方法
技术领域：
：本发明涉及金钗石斛生物总碱在制备治疗糖尿病的药物中的应用及产品，属于中药
技术领域：
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背景技术：
：糖尿病(Diabetesmellitus，DM)是一组以长期高血糖为主要特征的代谢综合征，由于胰岛素缺乏和(或)胰岛素生物作用障碍导致糖代谢紊乱，同时伴有脂肪、蛋白质、水、电解质等代谢障碍，并可并发眼、肾、神经、心血管等多脏器的慢性损害。1997年美国糖尿病学会(ADA)将糖尿病分为四类g卩l型糖尿病、2型糖尿病、其他类型糖尿病及妊娠糖尿病。2型糖尿病，占糖尿病总数的90%以上，是世界发病率和死亡率最高的三大非传染性疾病之一，且发病率逐年上升，尤以中国、印度次大陆、非洲等发展中国家上升最为明显。我国目前成人(25岁以上)糖尿病患病率约为2.5%，近20年来，在我国境内开展了4次大规模人群(超过10万人/次)的糖尿病抽样调査，比较我国四次糖尿病普査结果显示，目前我国糖尿病患病率的增长速度大约是1980年的3倍，2型糖尿病随年龄增长而升高，年龄增大、肥胖、高血压、体力劳动减少是主要危险因素，遗传因素在2型糖尿病的发病中也起着重要作用。2型糖尿病其特点是胰岛素分泌减少或胰岛素相对不足及胰岛素缺陷，主要并发有胰岛素抵抗，大多数病人表现为肥胖，而肥胖又加重胰岛素抵抗。现代医学已经明确，胰岛素抵抗(Insulinresistance,IR)是2型糖尿病发病的重要因素和显著特征，主要表现为胰岛素的外周耙组织对内源性或外源性胰岛素的敏感性与反应性降低，从而导致人体胰岛素难以产生正常的生理效应。胰岛素抵抗不仅是2型糖尿病发生和发展的关键驱动性因素，也是引起一系列代谢异常如代谢综合征，从而导致心血管等并发症的核心。因此针对胰岛素抵抗的治疗是治疗糖尿病的关键。中药因其降糖机理有多渠道、多途径的特点，在治疗糖尿病方面有极大的优势和潜力。文献报道石斛属植物具有降低血糖、保护和修复胰腺组织的结构和功能，但其作用机制尚不清楚。
发明内容本发明的目的在于提供金钗石斛生物总碱在制备治疗糖尿病的药物中的应用及产品。本发明通过研究金钗石斛生物总碱对小鼠血糖升高模型和糖尿病大鼠模型的影响，进一步明确了其治疗糖尿病的药理作用和机制，为金钗石斛药材的开发应用提供了药理学依据。本发明是这样构成的金钗石斛生物总碱在制备治疗糖尿病的药物中的应用。所述的金钗石斛生物总碱是从金钗石斛中提取的亲脂性总生物碱类成分。前述金钗石斛生物总碱的制备方法为取金钗石斛药材，粉碎成粗粉，加入乙醇提取3次，回收乙醇至无醇味，用酸溶液调PH至34，滤过，滤液用碱溶液调PH至IO，再用适量氯仿萃取58次，收集氯仿层，回收氯仿，干燥，即得。优选的制备方法为取金钗石斛药材，粉碎成粗粉，加入95%的乙醇回流提取3次，回收乙醇至无醇味，用盐酸调PH至34，滤过，滤液用10。/。氨水调PH至10，再用适量氯仿萃取58次，收集氯仿层，回收氯仿，干燥，即得。前述金钗石斛生物总碱中亲脂性总生物碱的含量》60%。一种治疗缺血性脑损伤的药物制剂，是以金钗石斛生物总碱为原料药，加入适量辅料制成的口服制剂或注射剂。所述的药物制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、软胶囊、滴丸剂、糖浆剂、舌下含片或注射剂。金钗石斛具有生津益胃、清热养阴的作用，本申请人通过对其化学成分、药理作用、作用机制等方面进行深入细致的研究，发现金钗石斛药材中所含的生物碱成分能有效改善糖尿病大鼠的胰岛素抵抗，对高糖高脂饲料喂养加小剂量链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠血糖升高具有明显降低作用，对糖尿病大鼠胰岛细胞有保护作用。试验研究的主要过程及结果如下一.实验材料1.动物:雄性SD(Spragye-Dawley)大鼠，清洁级，月龄3-4月，体重约160-180g，由第三军医大学大坪医院实验动物中心提供(许可证SCXK-军2007-017)。2.药品与试剂金钗石斛生物总碱(DNLA):采用贵州遵义赤水产二年生金钗石斛为原药，应用化学提取分离生物总碱成份，提取工作于贵州省基础药理重点实验室完成。链脲佐菌素(Str印tozotocinSTZ):Sigma公司；盐酸二甲双胍片贵州天安药业公司；大鼠胰岛素放免试剂盒LillCO公司；逆转录试剂盒及引物宝生物工程(大连)有限公司；SYBR"GREENPCRMasterMix:美国ABI公司；GLUT4抗体及相关免疫组化试剂武汉博士德生物工程有限公司。3.主要器材AU2700型全自动生化分析仪日本OLYMPUS公司；自动放免仪中国科大中佳公司；EppendorfMastercyclerGradientPCR仪德国Eppendorf公司；icycler荧光定量PCR仪美国BI0-RAD公司；Centrifuge5417R离心机德国E卯endorf公司。二.方法与结果l.金钗石斛生物总碱(DNLA)对正常小鼠血糖的影响小鼠40只，雄性，随机分为4组，每组10只，分别为空白对照组、DNLA低、中、高剂量组(40mg/kg、80mg/kg、160mg/kg)。正常对照组灌胃给等体积蒸馏水，每天给药一次，连续给药7天，末次前禁食12小时，给药后1小时，眶静脉取血测定血糖水平。结果显示，DNLA低、中、高剂量组对正常小鼠血糖均未见明显影响，结果见表l。表lDNLA对正常小鼠血糖的影响组别齐U量〔nigAg)空應血糖FBG(irarol/L)空白对照组-5.33±0.75DNLA-低剂量组405.28±1.83DNLA-中剂量组805.21±2.24DNLA-高剂量组1604.79±0.942.金钗石斛生物总碱(DNLA)对肾上腺素所致小鼠血糖的影响NIH小鼠60只，随机分为6组，每组10只，分别为空白对照组、模型组、DNLA低、中、高剂量(40mg/kg、80mg/kg、160mg/kg)组，阳性药(二甲双胍:150mg/kg)组，每组10只，正常对照组和模型组均给予等体积蒸馏水，连续给药7天，末次给药后禁食12小时，给药后l小时，正常对照组腹腔注射等体积的生理盐水，其余各组均腹腔注射肾上腺素(20ug/kg)，注射后30min从小鼠眼眶静脉丛取血测定血糖含量。结果显示，与空白对照组比较，模型组血糖明显升高(P〈0.05)，与模型组比较，DNLA中、高剂量组及二甲双胍组均不同程度地抑制肾上腺素所致的血糖升高(P〈0.05)，结果见表2。表2DNLA对肾上腺素引起小鼠血糖升高的影响组别剂量〔mgAg)血糖(mnol/L)空白对照组-5.33±0.75模型组—10.09±1.16#二甲双胍组1506.27±0.94*DNLA-低剂量组409.57±1.85DNLA-中剂量组807.32±1.2扭DNLA-咼剂量组1606.79±0.94*与正常对照组比较ttP〈0.05，与模型组比较，*P〈0.05。3.金钗石斛生物总碱(DNLA)对高糖高脂加链脲佐素诱导糖尿病大鼠模型的影响3.1模型制作SD大鼠，雄性，体重160-180g，自制高糖高脂饲料(即在普通饲料中加入20%炼猪油、10%蔗糖、5%蛋黄)连续饲养40天，继以小剂量链脲佐菌素(STZ，40mg/kg，临用前用pH为4.4的0.lmol/L柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液配制)溶液腹腔注射一次，于注射后第三天禁食8小时后，用血糖仪测量血糖，筛选出血糖Sll.lmmol/L者定为糖尿病大鼠。3.2实验分组及给药(1)空白组普通饲料喂养40天，腹腔注射等体积柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，继以蒸馏水灌胃4周。(2)模型组高糖高脂饲料喂养40天，腹腔注射链脲佐菌素，继以蒸馏水灌胃4周。(3)二甲双胍组高糖高脂饲料喂养40天，腹腔注射链脲佐菌素，继以二甲双胍(100mg/kg)灌胃给药4周。(4)DNLA低剂量组高糖高脂饲料喂养40天，腹腔注射链脲佐菌素，继以DNLA(20mg/kg)灌胃给药4周。(5)DNLA中剂量组高糖高脂饲料喂养40天，腹腔注射链脲佐菌素，继以DNLA(40mg/kg)灌胃给药4周。(6)DNLA高剂量组高糖高脂饲料喂养40天，腹腔注射链脲佐菌素，继以DNLA(80mg/kg)灌胃给药4周。(7)正常给药组普通饲料喂养40天，继以DNLA(80mg/kg)灌胃给药4周。3.3观察指标3.3.1空腹血糖(FBG):连续灌胃给药4w后，禁食8h，取血待血液凝固后分离血清，AU2700型全自动生化分析仪测定。3.3.2空腹血清胰岛素(FINs):血清标本制备方法同上，采用放射免疫法检测。3.3.3胰岛素抵抗指数(HOMA—IR):HOMA—IR=FBGXFINs/22.5。3.3.4血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHOL):血清制备方法同前，FFA采用酶学方法检测；TG、CHOL采用OLYMPUSAU2700型全自动生化分析仪测定。3.3.5胰腺组织病理学检査取相同部位胰腺标本用10。/。甲醛固定48h后，石蜡包埋切片进行HE染色，光镜下观察其形态学变化。3.3.6肝脏组织病理学检査取相同部位肝脏标本用10。/。甲醛固定48h后，石蜡包埋切片进行HE染色，光镜下观察其形态学变化。3.3.7检测组织中胰岛素受体底物2(IRS—2)、肿瘤坏死因子a(TNF—a)、胰岛素样生长因子l(IGF—1)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA表达。总RNA的提取100mg组织加入500yl焦碳酸二乙酯液，室温下静置5min丄加500yl氯仿，振摇15sec，4°C12000rpm离心15min丄取300yl上清液加300yl异丙醇，4°C12000rpm离心10min丄弃上清液，加75%乙醇，4。C12000rpm离心5min，清洗2次丄去乙醇，空气干燥RNA3min，加O.1%焦碳酸二乙酯水100y1RNA纯化①在粗提RNA的离心管内，加入纯化液350y1+75%酒精250y1;②上柱将以上混合液体吸入RNA纯化柱离心10000g/min，lmin;③冲洗75。/。酒精500ul加入柱内，10000g/min离心lmin，重复1次。④洗脱及收集纯化RNA液把纯化柱移入新的离心管内，加入焦碳酸二乙酯水100yl进行洗脱，10000g/min离心lmin。盛于离心管内的IOOy1水溶液即纯化的RNA液待测样品。RNA样品的纯度鉴定取20ylRNA样品和980y1焦碳酸二乙酯水于石英比色杯中，混匀。以焦碳酸二乙酯水调零，在紫外分光光度计上分别测定其260nm和280nm的0D值。OD26o/OD28o>l.80认为纯度符合要求，RNA浓度^D，X40X稀释倍数。两步法逆转录-聚合酶链反应(Twost印sRT-PCR)逆转录反应体系5XPrimeScripeTMBuffer4.0y1PrimeScripeTMRTEnzymeMix1l.Oyl01igodTPrimer(50yM)l.OylRandom6mers(100yM)l.OylTotalRNA13.Oy1总体积20y1反应条件第一阶段(逆转录反应)37°CX15min第二阶段(逆转录酶的失活反应)85°CX5sec，4'C保持。PCR产物稀释3.25倍；反应体系iQSYBRGreenSupermix10yl模板混合液(上游、下游引物)lylcDNAtemplate4y1dddH205y1总体积20yl反应条件第一步，95。CX8min;第二步，95°CX15sec，退火温度X1min，第二步循环45次。引物从基因库査出相关引物序列，由TaKaRa生物工程公司合成。表3引物序列<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>结果分析处理(相对定量法)以Ct值为统计参数依次计算下列数据(1)Ctaverage=(CtpCt2+Ct3)/3(重复管)(2)dCt=Ctaverage—中间值(3)基因的表达=2~(-dCt)(4)相对定量=目的基因的表达/内参基因的表达3.3.8骨骼肌组织中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达免疫组织化学法。具体步骤如下(1)4um厚的石蜡切片，二甲苯脱蜡，梯度酒精入水。(2)30%H202l份+甲醇99份混合，室温20分钟，蒸馏水洗3次。(3)抗原修复将切片浸入O.1M枸橼酸缓冲液中(PH值6.0)，微波炉微沸后断电，间歇IO分钟后重复一次，自然冷却至室温，磷酸盐缓冲液冲洗2分钟X3次。(4)滴加5%胎牛血清封闭液，37°C20分钟，甩去多余液体。(5)滴加PCNA(l:50稀释)一抗，37°C2小时，磷酸盐缓冲液洗2分钟X3次。(6)加生物素化二抗，37°C20分钟，磷酸盐缓冲液洗2分钟X3次(7)加SABC，37°C20分钟，磷酸盐缓冲液洗5分钟X4次。(8)DAB显色使用DAB显色试剂盒，取0.85ml蒸馏水，加试剂盒中A、B、C试剂各l滴(50yl)，混匀后加至切片，室温显色，镜下控制显色时间，约35分钟，自来水冲洗。(9)苏木素轻度复染(2分钟)、酒精脱水、二甲苯透明、中性胶封片，光镜下观察其表达变化。3.4统计学分析数据以均数士标准差(f士s)表示，全部数据采用SPSS13.0软件进行单因素方差分析，方差齐使用LSD法，方差不齐使用Du皿ett'T3法，P〈0.05认为有统计学意义。4.结果4.1DNLA对正常小鼠血糖的影响(见表l)4.2DNLA对肾上腺素所致血糖升高的影响(见表2)4.3DNLA对高糖高脂加链脲佐素诱导糖尿病大鼠模型的影响4.3.1DNLA对高糖高脂加链脲佐素诱导糖尿病大鼠及正常大鼠空腹血糖(FBG)的影响结果显示，与空白组比较，模型组FBG明显升高(P〈0.05)，正常给药组无明显变化(P>0.05);与模型组比较，二甲双胍组、DNLA中、高剂量组FBG均明显降低(P〈0.05)，结果见表4。表4DNLA对糖尿病大鼠及正常大鼠FBG的影响P±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>与空白组比较，P〈0.05;与模型组比较P〈0.05;与空白组比较"P>0.05。4.3.2DNLA对高糖高脂加链脲佐素诱导糖尿病大鼠FINs、HOMA-IR的影响结果显示，与空白组比较，模型组大鼠FINs、HOMA-IR明显升高(P〈0.05);与模型组比较，二甲双胍组、DNLA中、高剂量组大鼠FINs、HOMA-IR明显降低(P〈0.05)，结果见表5表5DNLA对糖尿病大鼠血清FINs及HOMAIR的影响P±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>与空白组比较，P〈0.05;与模型组比较，**P〈0.05。4.3.3DNLA对高糖高脂加链脲佐素诱导糖尿病大鼠血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)的影响结果显示，与空白组比较，模型组大鼠血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)均明显升高(P〈0.05);与模型组比较，二甲双胍组、DNLA中、高剂量组则明显降低(P〈0.05)，结果见表6。表6DN则<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>与空白组比较，P〈0.05;与模型组比较，**P〈0.05。4.3.4DNLA对高糖高脂加链脲佐素诱导糖尿病大鼠肝脏组织中胰岛素受体底物2(IRS—2)、胰岛素样生长因子l(IGF—1)表达的影响结果显示，与空白组比较，模型组肝脏组织中IRS—2、IGF—lmRNA表达减少；与模型组比较，各给药组表达不同程度增加，结果见表7。表7DNLA对高糖高脂加链脲佐素诱导糖尿病大鼠肝脏组织中IRS—2、IGF—1mRNA表达的<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>与空白组比较，P〈0.05;与模型组比较，**P〈0.05。4.3.5DNLA对高糖高脂加链脲佐素诱导糖尿病大鼠骨骼肌组织中肿瘤坏死因子a(TNF—a)mRNA表达的影响结果显示，与空白组比较，模型组骨骼肌组织中肿瘤坏死因子a(TNF—a)mRNA表达明显增加；与模型组比较，DNLA低、中、高剂量组和二甲双胍组骨骼肌组织中肿瘤坏死因子a(TNF—a)mRNA表达均明显下降，结果见表8。表8DNLA对高糖高脂加链脲佐素诱导糖尿病大鼠骨骼肌组织中TNF—(f±s)mRNA表达的影响组别TNF—ait^IA空白组51.13±5.40模型组134.22±29.65'二甲双胍组35.16±12.09-'DNLA低剂量组71.54±29.11DNLA中剂量组化.04±6.55"DNLA高剂量组39.22±17.05"与空白组比较，求P〈0.05;与模型组比较，**P〈0.05。4.3.6DNLA脂肪组织中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA表达的影响结果显示，与空白组比较，模型组骨骼肌组织GLUT4表达明显减少，与模型组比较，甲双胍组、DNLA中、高剂量组表达明显增加，结果见表9。表9DNLA对糖尿病大鼠脂肪组织中GLUT4mRNA表达的影响(？±s)组别GLUT4mKNA空白组432.40±87.53模型组67.30±16.10*二甲双胍组144.29±19,DNLA低剂量组56.37±21.64DNLA中剂量组127.15±12.44**DNLA高剂量组119.55±8.82^与空白组比较，求P〈0.05;与模型组比较，**P〈0.05。4.3.7大鼠胰腺组织形态学改变空白组胰岛呈团索状，境界清晰，胰岛数量及岛内细胞数均较多；模型组胰岛萎縮，视野中胰岛数量显著下降，体积縮小，岛内细胞数减少；二甲双胍组胰岛萎縮、数量减少，岛内细胞数减少；各治疗组与模型组比较，胰岛数量较多，体积较大，岛内细胞数较多。4.3.8大鼠肝脏组织形态学改变肝脏组织HE染色，光镜下观察肝细胞病理改变情况，结果显示，空白对照组大鼠肝小叶结构清楚，肝细胞结构正常，而模型组和各给药组大鼠肝小叶内肝细胞均出现了不同程度的脂肪变性。结果显示DNLA各治疗剂量对糖尿病大鼠肝脏脂肪变性有不同程度的保护作用。4.3.9DNLA对骨骼肌组织中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的表达的影响结果显示，与空白组比较，模型组及各给药组GLUT4蛋白表达明显减少；与模型组比较，二甲双胍组、DNLA中、高剂量组表达均有不同程度增加。DNLA对正常大鼠血糖无明显影响，对肾上腺素所引起的小鼠血糖升高具有明显的抑制作用；对高糖高脂加小剂量链脲佐菌素诱导糖尿病模型大鼠血糖有明显降低作用，其作用机制为(1)改善糖尿病大鼠胰岛素抵抗降低游离脂肪酸水平，改善胰岛素抵抗指数，降低TNF—amRNA表达，增加IRS—2、IGF—1、GLUT4mRNA表达，增加骨骼肌细胞GLUT4蛋白表达；(2)对糖尿病大鼠胰岛细胞的保护作用。DNLA还对高糖高脂饲料喂养加小剂量链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠肝脏脂肪变性具有保护作用。与现有技术相比，本发明通过研究金钗石斛生物总碱对肾上腺素所致小鼠血糖升高模型和高糖高脂加链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型的影响，进一步明确了其治疗糖尿病的药理作用和机制，为金钗石斛药材的开发应用提供了药理学依据。具体实施例方式本发明的实施例l:金钗石斛生物总碱的提取取金钗石斛药材，粉碎成粗粉，加入95%的乙醇回流提取3次，回收乙醇至无醇味，用盐酸调PH至34，滤过，滤液用10。/。氨水调PH至10，再用适量氯仿萃取67次，收集氯仿层，回收氯仿，干燥，即得金钗石斛生物总碱；其中亲脂性总生物碱的含量为67.8%。本发明的实施例2:金钗石斛生物总碱的提取取金钗石斛药材，粉碎成粗粉，加入乙醇提取3次，回收乙醇至无醇味，用盐酸调PH至34，滤过，滤液用氢氧化钠溶液调PH至IO，再用适量氯仿萃取56次，收集氯仿层，回收氯仿，干燥，即得金钗石斛生物总碱；其中亲脂性总生物碱的含量为62.4%。本发明的实施例3:金钗石斛生物总碱的应用取实施例1制得的金钗石斛生物总碱提取物502000毫克、硬脂酸镁O.10.40毫克、羧甲基淀粉钠412毫克、微晶纤维素50100毫克，将提取物与羧甲基淀粉钠、微晶纤维素混合，过筛，使其混匀，加入适量水或乙醇制粒，干燥后，整粒，加入硬脂酸镁，然后用冲压装置将颗粒压制成片，即得治疗缺血性脑损伤的片剂。该片剂口服，一日3次，每次13片本发明的实施例4:金钗石斛生物总碱的应用取实施例2制得的金钗石斛生物总碱提取物502000毫克、硬脂酸镁O.10.30毫克、羧甲基淀粉钠412毫克、淀粉50100毫克，将提取物与羧甲基淀粉钠、淀粉混合均匀，加入适量乙醇制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸镁，然后装入明胶胶囊中，即得治疗缺血性脑损伤的胶囊剂。该胶囊剂口服，一日3次，每次13粒。本发明的实施例5:金钗石斛生物总碱的应用取金钗石斛生物总碱提取物1005000毫克、糊精或蔗糖110克、矫味剂和甜味剂适量，将提取物与蔗糖/糊精、矫味剂和甜味剂混合均匀，加入适量水或乙醇制成软材，过筛制粒，干燥，整粒，分装，即得治疗缺血性脑损伤的颗粒剂。该颗粒剂口服，一日3次，每次510克。本发明的实施例6:金钗石斛生物总碱的应用取金钗石斛生物总碱提取物1002000毫克、聚乙醇或豆油1002000毫克、助悬剂3IO毫克、乳化剂310毫克和明胶50100毫克、甘油1030毫克、纯化水50100毫克及防腐剂适量，将明胶置于溶胶罐中，加入纯化水，7crc下加热使溶解，加入甘油和防腐剂，搅拌均匀，真空除去气泡后保温静置，按比例将提取物与聚乙醇/豆油、乳化剂、助悬剂混合均匀，再和制备好的明胶置于旋转压囊机，压制成软胶囊，定型，干燥，即得治疗缺血性脑损伤的软胶囊。该软胶囊口服，一日3次，每次13粒。本发明的实施例7:金钗石斛生物总碱的应用取金钗石斛生物总碱提取物10200毫克、聚乙二醇40002040毫克、甲基硅油适量，将提取物加水制成均匀糊状，再加入溶融的基质(聚乙二醇4000)液，加热熔融成澄清液体，倒入已预热的滴丸器中，控制滴制温度和速度，滴入甲基硅油冷凝液中，成丸后吸干冷凝液，收集滴丸，置干燥器内，即得治疗缺血性脑损伤的滴丸剂。该滴丸剂口服，一日3次，每次1050毫克。本发明的实施例8:金钗石斛生物总碱的应用取金钗石斛生物总碱提取物2005000毫克、羧甲基纤维素纳1.5克、糖精钠O.l克、矫味剂适量、防腐剂适量和纯化水100毫升，将羧甲基纤维素纳分散在热水中，冷却，然后与含有提取物、糖精钠、矫味剂和防腐剂的含水混悬液混合，将溶液调配成所需体积并混合均匀，灭菌后分装，即得治疗缺血性脑损伤的糖浆剂。该糖浆剂口服，一日3次，每次510毫升。本发明的实施例9:金钗石斛生物总碱的应用取金钗石斛生物总碱提取物502000毫克、可压蔗糖4080毫克、硬脂酸镁O.10.3毫克，将提取物过筛后与可压蔗糖、硬脂酸镁混合均匀，并用冲压装置压片，即得治疗缺血性脑损伤的舌下含片。该制剂含服，一日3次，每次1片。本发明的实施例10:金钗石斛生物总碱的应用取金钗石斛生物总碱提取物102000毫克，加水至1000ml，加入O.5%活性炭，保持PH值7.0，加热微沸15分钟，冷却，滤过，加注射用水至全量，罐装，于115i:灭菌30分钟，冷藏48小时，滤过，滤液浓縮，喷雾干燥，分装，即得治疗缺血性脑损伤的注射剂。该制剂注射用，一日3次，每次510毫升。权利要求1.金钗石斛生物总碱在制备治疗糖尿病的药物中的应用及产品。2.按照权利要求l所述金钗石斛生物总碱的应用，其特征在于所述的金钗石斛生物总碱是从金钗石斛中提取的亲脂性总生物碱类成分。3.按照权利要求1或2所述金钗石斛生物总碱的应用，其特征在于所述金钗石斛生物总碱的制备方法为取金钗石斛药材，粉碎成粗粉，加入乙醇提取3次，回收乙醇至无醇味，用酸溶液调PH至34，滤过，滤液用碱溶液调PH至IO，再用适量氯仿萃取58次，收集氯仿层，回收氯仿，干燥，即得。4.按照权利要求3所述金钗石斛生物总碱的应用，其特征在于所述金钗石斛生物总碱的制备方法为取金钗石斛药材，粉碎成粗粉，加入95%的乙醇回流提取3次，回收乙醇至无醇味，用盐酸调PH至34，滤过，滤液用10。/。氨水调PH至10，再用适量氯仿萃取58次，收集氯仿层，回收氯仿，干燥，即得。5.按照权利要求4所述金钗石斛生物总碱的应用，其特征在于所述金钗石斛生物总碱中亲脂性总生物碱的含量》60%。6.一种治疗糖尿病的药物制剂，其特征在于它是以金钗石斛生物总碱为原料药，加入适量辅料制成的口服制剂或注射剂。7.按照权利要求6所述治疗糖尿病的药物制剂，其特征在于所述的药物制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、软胶囊、滴丸剂、糖浆剂、舌下含片或注射剂。全文摘要本发明公开了金钗石斛生物总碱在制备治疗糖尿病的药物中的应用及产品，所述的金钗石斛生物总碱是从金钗石斛中提取的亲脂性总生物碱类成分。与现有技术相比，本发明通过研究金钗石斛生物总碱对肾上腺素所致小鼠血糖升高模型和高糖高脂加链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型的影响，进一步明确了其治疗糖尿病的药理作用和机制，为金钗石斛药材的开发应用提供了药理学依据。文档编号A61K36/8984GK101653563SQ20091030217公开日2010年2月24日申请日期2009年5月8日优先权日2009年5月8日发明者石京山申请人:遵义医学院