专利名称：：一种兽用替米考星微球的制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种兽用替米考星微球的制备方法，属于兽药
技术领域：
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背景技术：
：替米考星是一种具有同其它大环内酯类药物相似抗菌活性的广谱抗菌药对所有的革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌、霉形体、螺旋体等均有抑制作用，尤其对胸膜肺炎放线杆菌、溶血性巴氏杆菌、多杀性巴氏杆菌以及畜禽霉形体具有比泰乐菌素更强的抗菌活性。并且它在体内吸收迅速，消除半衰期长，具有良好的组织穿透能力，分布容积大，在乳中、肺中药物浓度高且消除缓慢。替米考星具有一定的刺激性，有时会引起过敏反应，严重时对心脏有很大毒性，过快过大剂量静脉或肌肉注射时，可能引起负性心力，导致动物死亡。因此替米考星主要采用内服或皮下注射方式给药，使得替米考星在兽医临床推广上受到限制。
发明内容本发明的目的是提供一种兽用替米考星微球的制备方法，提高替米考星药物的肺部靶向性，同时提高替米考星微球的包封率，降低生产的成本。为了实现以上目的，本发明的替米考星微球的制备方法包括如下步骤配制溶液A称取葡聚糖和替米考星，加入水中加热溶解，得到水相；B取蓖麻油，加入乳化剂，加热搅拌溶解得到油相；微球制备1)保持油相5565°C，在持续搅拌下将水相逐滴加入油相中，然后继续保温搅拌得到乳化液；2)将乳化液快速降至510°C，在保持温度下加入脱水剂，搅拌1015分钟后抽滤，用脱水剂洗涤得到未交联微球；3)将未交联微球加入交联剂中，在04°C条件下交联固化，然后过滤，洗涤，干燥得到替米考星微球。所述替米考星与葡聚糖的重量比为0.511。所述配制溶液中所述蓖麻油与水的体积比为8101。所述乳化剂的亲水亲油平衡值为415。所述乳化剂的加入量为蓖麻油体积的1.5%。所述的乳化剂为司班-80或吐温-80。所述水相中葡聚糖的浓度为15-20%(m/v)。所述的脱水剂为丙酮或异丙醇。所述的交联剂为甲醛或戊二醛。所述交联剂的用量为每200mg未交联微球使用2ml。本发明制备的替米考星微球是一种稳定的药物剂型，药物替米考星被包覆在葡聚糖中，并且通过交联剂交联，在微球进入动物体内时，被包覆在微球中的替米考星能够缓慢的释放，对动物长期有效，并且其释放速度缓慢能够限制替米考星在动物体内的浓度，减少了替米考星对心脏和各器官的副作用。本发明的制备优化了方法中的参数，如葡聚糖的浓度，葡聚糖与药物替米考星的配比，及乳化剂、交联剂的用量等，最终制备的替米考星微球的粒径在815微米，平均粒径在1113之间，符合替米考星微球肺部靶向的要求，载药量为(38.96士0.67)%，服用后替米考星药物在动物体内主要集中在肺部，能够针对动物肺部毒性疾病和细菌疾病进行治疗，具有很好的疗效，而且既可以口服，也可以采用静脉注射，静脉注射时用生理盐水即时配制。本发明的替米考星微球的动物实验如下采用组织动力学方法，通过MCPKP计算出药时曲线下面积(AUC)和峰浓度(Cp)，再计算各器官的相对摄取率Re(Re=AUCnZAUCi)，靶向效率TenZTei(Te=AUCwig^ZAUCig器官)和峰浓度比Ce(Ce=CPm/CPi)3个靶向性参数。具体的参数见表1。表1实验数据<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>实验数据分析Tem/Tei为靶向性增强的倍数，从表中可以看出肺的靶向效率较心脏、肌肉、肝、肾提高了4.87,3.03,4.64,3.48倍。Re>1表示该器官对药物的摄取能力增强，Re<1表示摄取能力减弱，Re愈大，该器官的摄取能力愈强。肺的Re最大为8.49，表明肺摄取微球中替米考星的能力最强；心脏的Re最小(为1.75)，说明心脏摄取微球中替米考星的能力最弱。Ce>1表示分布增加，Ce<1表示分布减少，Ce的绝对值愈大表明改变药物分布的效果愈明显。肺、肾、肝、肌肉和心脏的Ce值分别为2.19,0.84,0.75,0.62和0.42，表明替米考星制成微球后显著增加了其在肺的分布，减少了在肾、肝、肌肉，尤其是心脏中的分布。本发明制备的替米考星微球，在干燥状态下放置十天、一个月，用显微镜观察在放置不同是时间后微球的表面形态和粒径基本没有变化，微球受外界条件的影响较小，储存条件不苛刻，易于存放；而且本发明的制备方法简单，能耗低，毒性小、安全性高，不需要特殊设备，而且最终制备的替米考星微球具有较高包封率，制备的成本较低，适合进行大批量的生产。具体实施例方式实施例1本实施例的替米考星微球的制备方法包括如下步骤配制溶液A称取Ig葡聚糖和Ig替米考星，首先将葡聚糖加入5ml蒸馏水中加热溶解，配制成20%的葡聚糖水溶液，然后将替米考星加入葡聚糖水溶液中搅拌充分溶解，得到水相；B取A中加水量10倍体积的蓖麻油50ml，加入0.6ml的司班_80，水浴加热并快速搅拌溶解，得到油相；微球制备1)将上述配制的水相和油相预热至60°C，在持续搅拌下将水相逐滴加入油相中，然后保持温度为60°C继续搅拌10分钟，得到乳化液；2)将乳化液置于冷水浴中，快速搅拌使其降温，当温度降至5°C时，加入预冷的丙酮脱水，搅拌10分钟，然后抽滤，用丙酮洗涤三次，得到粉末状的未交联微球；3)将未交联微球在甲醛的丙酮溶液中，在0°C条件下交联固化24小时，然后过滤，洗涤，干燥得到替米考星微球。其包封率为69.89%，载药量为38.36%。实施例2本实施例的替米考星微球的制备方法包括如下步骤配制溶液A称取0.9g葡聚糖和0.7g替米考星，首先将葡聚糖加入5ml蒸馏水中加热溶解，配制成18%的葡聚糖水溶液，然后将替米考星加入葡聚糖水溶液中搅拌充分溶解，得到水相；B取A中加水量8倍体积的蓖麻油40ml，加入0.6ml的司班_80，水浴加热并快速搅拌溶解，得到油相；微球制备1)将上述配制的水相和油相预热至65°C，在持续搅拌下将水相逐滴加入油相中，然后保持温度为65°C继续搅拌10分钟，得到乳化液；2)将乳化液置于冷水浴中，快速搅拌使其降温，当温度降至10°C时，加入预冷的丙酮脱水，搅拌13分钟，然后抽滤，用丙酮洗涤三次，得到粉末状的未交联微球；3)将未交联微球在戊二醛的丙酮溶液中，在2°C条件下交联固化24小时，然后过滤，洗涤，干燥得到替米考星微球。其包封率为70.86%；载药量为39.22%。实施例3本实施例的替米考星微球的制备方法包括如下步骤配制溶液A称取0.75g葡聚糖和0.38g替米考星，首先将葡聚糖加入5ml蒸馏水中加热溶解，配制成15%的葡聚糖水溶液，然后将替米考星加入葡聚糖水溶液中搅拌充分溶解，得到水相；B取A中加水量9倍体积的蓖麻油45ml，加入0.45ml的吐温_80，水浴加热并快速搅拌溶解，得到油相；微球制备1)将上述配制的水相和油相预热至55°C，在持续搅拌下将水相逐滴加入油相中，然后保持温度为55°C继续搅拌10分钟，得到乳化液；2)将乳化液置于冷水浴中，快速搅拌使其降温，当温度降至7°C时，加入预冷的异丙醇脱水，搅拌15分钟，然后抽滤，用异丙醇洗涤三次，得到粉末状的未交联微球；3)将未交联微球在戊二醛的丙酮溶液中，在4°C条件下交联固化24小时，然后过滤，洗涤，干燥得到替米考星微球。其包封率为68.92%；载药量为38.86%。实施例1-3中所采用的乳化剂为司班-80或吐温-80，其亲水亲油平衡值均在4-15之间。权利要求一种兽用替米考星微球的制备方法，其特征在于包括如下步骤配制溶液A称取葡聚糖和替米考星，加入水中加热溶解，得到水相；B取蓖麻油，加入乳化剂，加热搅拌溶解得到油相；微球制备1)保持油相55～65℃，在持续搅拌下将水相逐滴加入油相中，然后继续保温搅拌得到乳化液；2)将乳化液快速降至5～10℃，在保持温度下加入脱水剂，搅拌10～15分钟后抽滤，用脱水剂洗涤得到未交联微球；3)将未交联微球加入交联剂中，在0～4℃条件下交联固化，然后过滤，洗涤，干燥得到替米考星微球。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述替米考星与葡聚糖的重量比为0.511。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于配制溶液中所述蓖麻油与水的体积比为8101。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述乳化剂的亲水亲油平衡值为415。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述乳化剂的加入量为蓖麻油体积的1.5%。6.根据权利要求1或4或5所述的制备方法，其特征在于所述的乳化剂为司班-80或吐温-80。7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述水相中葡聚糖的浓度为15-20%(m/ν)ο8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的脱水剂为丙酮或异丙醇。9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的交联剂为甲醛或戊二醛。10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述交联剂的用量为每200mg未交联微球使用2ml。全文摘要本发明公开了一种兽用替米考星微球的制备方法，该方法是利用葡聚糖包封替米考星药物制成微球，首先配配制含有葡聚糖和替米考星的水相和含有乳化剂的油相，在55～65℃将水相和油相混合均匀，然后将混合液的温度降至5～10℃，然后加入脱水剂，搅拌、过滤后得到的未交联微球在交联剂中进行交联，得到替米考星微球。本发明方法制备的替米考星微球服用后在动物体内主要集中在肺部，具有很好的靶向性，能够针对动物肺部的细菌感染进行治疗，具有很好的疗效；而且本发明的制备方法简单，能耗低，毒性小、安全性高，不需要特殊设备，而且最终制备的替米考星微球具有较高包封率，制备的成本较低，适合进行大批量的生产。文档编号A61K47/44GK101810582SQ20091030950公开日2010年8月25日申请日期2009年11月10日优先权日2009年11月10日发明者吴红云,董晓盈,陈卓,陈玮斌申请人:郑州后羿制药有限公司