专利名称：男性不育治疗剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新型的男性不 育治疗剂。
背景技术：
男性不育的原因很多，各种因素复杂地相互作用的病例也很多。一般来说，认 为造精功能障碍、精子输送通路障碍、精子功能障碍、性功能障碍是男性不育的四个主 要原因。其中，对于造精功能障碍和精子功能障碍，可见呈现精子运动能力降低的症状 或精子浓度、精子数减少的症状等的乏精子症、精子无力症(乏精子·精子無力症)。 此外，在男性不育症中，原因不明的突发性造精功能障碍也很多。性功能障碍也就是所谓的勃起障碍，据报道其在男性不育症中占15%。勃起通 过如下方式发生阴茎海绵体平滑肌松弛，来自阴茎深动脉的血流增加，同时由于组织 的膨胀引起静脉被压迫而妨碍血液流出。首先，由一氧化氮(NO)合成酶在内皮细胞内 合成的一氧化氮在存在于阴茎海绵体的平滑肌细胞中扩散。然后，一氧化氮与鸟苷酸环 化酶的血红素基团( A，heme)结合，活化鸟苷酸环化酶，由鸟苷三磷酸合成环鸟苷酸 (cGMP)。由于cGMP使平滑肌细胞中的钙浓度减少，所以伴随着cGMP浓度的增加， 平滑肌松弛，阴茎动脉血流增加。以往，作为男性不育症的治疗方法，采用激素治疗方法和非内分泌治疗方 法。具体而言，有促性腺激素、雌激素等激素制剂的给予，蛋白质分解酶、腺苷三磷酸 (ATP)、辅酶Q10、维生素B12、叶酸等维生素制剂、维生素E、维生素C等抗氧化剂、 锌、硒等微量元素、L-肉碱、中药制剂等非内分泌系统制剂的给予。但是，因为这些药 物对生殖细胞、组织等没有特异性的作用，所以不能说有划时代的效果。此外，作为勃起障碍的治疗药，西地那非柠檬酸盐(以下简称西地那非)(参照 专利文献1)已被FDA许可制造。西地那非通过选择性地抑制将cGMP代谢成无活性的 5’ -cGMP的酶而起作用。但是，西地那非存在下述问题其副作用是血压急增且大幅降低，或者也有可 能使导致心脏供氧障碍的心绞痛等发病，此外，其有效率只不过是约50%。现有技术文献专利文献专利文献1 美国专利第6,469,012号
发明内容
本发明的目的在于提供对男性不育症有效性高、副作用少的男性不育症治疗 剂。本发明人对所述现状进行了认真研究，发现通过给予δ-氨基乙酰丙酸(δ - 7 S ) V 7" .j >酸)、其衍生物或它们的盐，对男性不育症，特别是乏精子症、精子无力 症引起的男性不育症和勃起障碍引起的男性不育症显示优异的治疗效果，从而完成本发明。即，本发明提供男性不育治疗剂，其特征在于，其以通式⑴表示的δ-氨基乙 酰丙酸、其衍生物或它们的盐作为有效成分。R2RINCH2COCH2CH2COR3 (1)式中，R1和R2各自独立地表示氢原子、烷基、酰基、烷氧羰基、芳基或芳烷 基，R3表示羟基、烷氧基、酰氧基、烷氧羰基氧基、芳氧基、芳烷基氧基或氨基。本发明的男性不育治疗剂对男性不育症显示优异的治疗效果，特别是对乏精子 症、精子无力症等引起的男性不育症和勃起障碍引起的男性不育症有用。
图1是表示给予了 ALA时的大鼠精囊重量变化的图。
具体实施例方式本发明的男性不育治疗剂的有效成分是上述通式(1)表示的δ -氨基乙酰丙酸、 其衍生物或他们的盐。已知该S-氨基乙酰丙酸类用作光动力学(光動力学)治疗中的 光敏剂(特表2004-505105号公报)、猪生长促进剂(特开2003-40770号公报)、免疫功 能改善剂(特开2006-96746号公报)等。但是，完全不知道对男性不育症的作用。在通式(1)中，作为R1和R2表示的烷基，优选碳原子数为1-24的直链或支链 烷基，更优选碳原子数为1-18的烷基，特别优选碳原子数为1-6的烷基。作为碳原子数 为1-6的烷基，可列举甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基等。作为酰基，优选碳原子数为1-12的直链或支链的烷酰基、烯基羰基或芳酰基， 特别优选碳原子数为1-6的烷酰基。作为该酰基，可列举甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁 酰基等。作为烷氧羰基，优选总碳原子数为2-13的烷氧羰基，特别优选总碳原子数为 2-7的烷氧羰基。作为该烷氧羰基，可列举甲氧羰基、乙氧羰基、正丙氧羰基、异丙氧羰
基等ο作为芳基，优选碳原子数为6-16的芳基，可列举例如苯基、萘基等。作为芳烷基，优选由碳原子数为6-16的芳基和上述碳原子数为1-6的烷基构成 的基团，可列举例如苄基等。作为R3表示的烷氧基，优选碳原子数为1-24的直链或支链烷氧基，更优选碳原 子数为1-16的烷氧基，特别优选碳原子数为1-12的烷氧基。作为该烷氧基，可列举甲
氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、戊氧基、己氧基、辛氧基、癸氧基、 十二烷基氧基等。作为酰氧基，优选碳原子数为1-12的直链或支链烷酰基氧基，特别优选碳原子 数为1-6的烷酰基氧基，作为该酰氧基，可列举乙酰氧基、丙酰氧基、丁酰氧基等。作为烷氧羰基氧基，优选总碳原子数为2-13的烷氧羰基氧基，特别优选总碳原 子数为2-7的烷氧羰基氧基。作为该烷氧羰基氧基，可列举甲氧羰基氧基、乙氧羰基氧 基、正丙氧羰基氧基、异丙氧羰基氧基等。作为芳氧基，优选碳原子数为6-16的芳氧基，可列举例如苯氧基、萘氧基等。作为芳烷基氧基，优选具有上述芳烷基的芳烷基氧基，可列举例如苄基氧基等。在通式(1)中，作为R1和R2，优选氢原子。作为R3，优选羟基，烷氧基或者 芳烷基氧基，更优选羟基或碳原子数为1-12的烷氧基，特别优选甲氧基或己氧基。作为δ-氨基乙酰丙酸衍生物，可列举δ-氨基乙酰丙酸甲酯、δ-氨基乙酰丙 酸乙酯、S-氨基乙酰丙酸丙酯、δ-氨基乙酰丙酸丁酯、δ-氨基乙酰丙酸戊酯、δ-氨 基乙酰丙酸己酯等酯衍生物，特别优选δ-氨基乙酰丙酸甲酯或δ-氨基乙酰丙酸己酯。作为δ-氨基乙酰丙酸或其衍生物的盐，没有特别的限制，但优选药学上可接 受的无机酸或有机酸的酸加成盐。作为无机酸的加成盐，可列举盐酸盐、氢溴酸盐、硫 酸盐、硝酸盐、磷酸盐等。作为有机酸的加成盐，可列举乙酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、 酒石酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、富马酸盐、抗坏血酸盐等，特别优选S-氨基乙酰丙 酸盐酸盐或S-氨基乙酰丙酸磷酸盐。这些盐也可以通过化学合成、使用微生物或酶的方法中的任一方法来制备。可 列举例如特开平4-9360号公报、特表平11-501914号公报、特开2006-182753号公报、 特开2005-314361号公报、特开2005-314360号公报记载的方法。如后述实施例所示，δ-氨基乙酰丙酸、其衍生物或它们的盐，具有使精囊重量 增加、改善勃起障碍的作用。因此，该S-氨基乙酰丙酸、其衍生物或它们的盐对于男 性不育症，特别是乏精子症、精子无力症和勃起障碍的治疗是有用的。此外，为了增强治疗效果，本发明的男性不育治疗剂，除了使用δ-氨基乙酰 丙酸、其衍生物或它们的盐之外，还优选组合使用铁化合物。这里，作为铁化合物，只要是分子内含有铁的化合物则没有特别限制，可列举 例如氯化铁、三氧化二铁、叶绿酸铁钠、铁蛋白铁、柠檬酸亚铁、柠檬酸铁钠、柠檬酸 铁铵、富马酸亚铁、焦磷酸亚铁、焦磷酸铁、含糖氧化铁、乙酸铁、草酸铁、琥珀酸亚 铁、琥珀酸柠檬酸铁钠、血红素铁、右旋糖酐铁、乳酸铁、葡萄糖酸亚铁、二亚乙基三 胺五乙酸铁钠、二亚乙基三胺五乙酸铁铵、二亚乙基二胺四乙酸铁钠、二亚乙基二胺五 乙酸铁铵、三亚乙基四胺铁、二羧甲基谷氨酸铁钠、二羧甲基谷氨酸铁铵、柠檬酸胆碱 铁(夕工 >酸鉄^ 'J甲酸亚铁、甲酸铁、草酸铁钾铵(* ^々酸力·； , α第二鉄7
二々a )、硫酸亚铁、硫酸铁、硫酸铁铵、碳酸铁、氯化亚铁、氯化铁、氧化铁等。 它们可以一种或两种以上组合使用。作为铁化合物，特别优选医疗上常用的柠檬酸亚 铁、富马酸亚铁、焦磷酸铁、含糖氧化铁、右旋糖酐铁。本发明中，δ-氨基乙酰丙酸、其衍生物或它们的盐与铁化合物的组合比例，按 质量比计，优选是1 0.125-1 4，特别优选1 0.25-1 1。本发明的男性不育治疗剂，除了上述成分之外，根据需要，还可以配合药学上 可接受的载体，例如赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、着色剂、矫味剂、包衣剂等， 按照通常方法制备。作为剂型，没有特别的限制，可以根据治疗目的适当地选择，可列举例如颗粒 剂、细粒剂(細粒剤)、片剂等口服给药制剂；液体制剂、即溶型粉针剂等注射剂、软 膏、液体制剂、乳膏剂、凝胶剂等经皮制剂、栓剂等非口服给药制剂。这些制剂的给 药方法可列举口服给药、静脉内给药、肌肉内给药、患部局部给药、腹腔给药、经皮给 药、经直肠给药等，优选口服给药、腹腔给药、患部局部给药或静脉给药。
本发明中，当将δ-氨基乙酰丙酸、其衍生物或它们的盐与铁化合物组合使用 时，它们可以同时给药，也可以间隔一段时间分别给药。即，S-氨基乙酰丙酸、其衍 生物或它们的盐与铁化合物可以制成单一制剂，也可以分别制成制剂，以套件(set)(试 剂盒，kit)的形式使用。此外，当分别制成制剂时，也可以不制成相同剂型。此外，各 成分的给药次数也可以不同。本发明中，δ-氨基乙酰丙酸或其衍生物的盐的给药量根据给药方式、患者症 状和体重、肿瘤种类不同而不同，例如口服给药时，一次0.001mg-10g/kg体重，优选 0.01mg_5g/kg 体重，进一步优选 0.1mg-1000mg/kg 体重，特别优选 lmg_600mg/kg 体 重。此外，铁化合物的给药量也根据给药方式、患者症状和体重、肿瘤种类不同而不 同，例如口服给药时，一次0.001mg-10g/kg体重，优选0.01mg-1000mg/kg体重，特别 优选 0.1mg-500mg/kg 体重。此外，本发明的男性不育治疗剂的给药时期，只要是在进行性行为之前给药则 没有特别限制，但优选在性行为前90天 性行为当天的期间给药，进一步优选性行为前 30天 当天给药，特别优选性行为前10天 当天给药。给药次数可以一天一次，但不 受其限制，也可以多次给药。此外，当多天给药时，可以在上述期间中连续或不连续给 药。作为本发明的男性不育治疗剂的适用对象的疾病是所有男性不育症，但特别优 选应用于乏精子症、精子无力症引起的男性不育症、勃起障碍引起的男性不育症。此 外，本发明的男性不育治疗剂给予雄性哺乳动物。作为哺乳动物的例子，可列举例如 人、牛、猪、羊、山羊、小鼠、大鼠、兔、狗、猫等。作为本发明的男性不育治疗剂的治疗效果的优选程度，例如，在后述实施例2 记载的实验中，优选列举交尾成功动物的受胎率为85%以上，更优选列举为90%以上， 进一步优选列举为94%以上。另外，作为在另一实施方式中的优选程度，例如，在后述 实施例4记载的实验中，从给予本发明制剂开始的第21天的精子的运动能力，相对于即 将给药之前(第0天)的精子的运动能力，优选列举1.5倍以上，更优选列举2倍以上， 进一步优选例示3倍以上，更进一步优选例示4倍以上。此外，从给予本发明制剂开始 的第21天的精子的存活率(％)，相对于即将给药之前(第0天)的精子的存活率，优选 列举1.2倍以上，更优选列举1.5倍以上，进一步优选例示1.8倍以上，更进一步优选例示 2.1倍以上。此外，本发明包含δ-氨基乙酰丙酸，其衍生物或它们的盐、和铁化合物在制 备男性不育治疗剂中的应用，S-氨基乙酰丙酸，其衍生物或它们的盐、和铁化合物在男 性不育治疗中的应用，以及男性不育的治疗方法，所述方法的特征在于，将S-氨基乙 酰丙酸，其衍生物或它们的盐、和铁化合物给予哺乳动物(特别是人)。实施例下面，举出实施例进一步详细地说明本发明，但本发明不受这些实施例的任何 限制。实施例1取得10周龄雄性大鼠(Slc Wistar) 40只，9周龄雌性40只，进行7天的检疫，
13天的适应性饲养。称量δ -氨基乙酰丙酸(下面称为ALA)磷酸盐，使其溶解于注射用水中，调整成50mg/ml的溶液，使用大鼠用口服给药用灌胃针(経口 ’/> 7 )，对于雄 性12周龄20只大鼠，在交配前的14天间、还有经交配后直至剖检前一日的49-52天间 以500mg/kg、一天一次连续口服给药(500mg/kg组)。对于对照组，按照同样的方法， 给予雄性12周龄20只大鼠注射用水。以给药开始日为给药第1日，观察并测定一般状 态、体重、摄食量，剖检(睾丸、附睾、精囊(含凝固腺)、前列腺的重量)。结果，如图1所示，对于精囊的实际重量及与体重的比(重量体重比，体重比重 量)，500mg/kg组与对照组相比显示显著性高值。对于左右睾丸、左右附睾、前列腺， 没有发现显著差异。实施例2实施例1中，在给药15天以后，使对照组、500mg/kg组内的雌性1只与雄性1 只对应同居，交配期为14天。结果，交尾成功动物的受胎率为，相对于对照组80.0% (20只中有16只受胎成 功)，500mg/kg组显示了 94.4%的高值(19只中有17只受胎成功，1只咬断口服给药用 灌胃针死亡)。实施例3将ALA盐酸盐Ig溶解于50ml 5 %葡萄糖水溶液中(被试液)，给予28_44岁的 7名已婚男性健康志愿者。在没吃早饭的情况下，口服摄取被试液(13.9-22.2mg/kg)。 基于个人的主观评价进行评价。即，以个人的性经验为基准，确认了促进性行为的勃起 时为(O )，未见任何变化时为(Δ )，恶化时为(X)。结果，如表1所示，7名中的5名确认了该日的夜勃起，其中2名有性行为，并 确认怀孕。表 1
志愿者年龄体重(kg)给药量(mg/kg)结果备注1436814.7〇无性行为2345817. 2〇有性行为怀孕3376016. 7〇有性行为怀孕4285518.2Δ无性行为5497213. 9〇无性行为6384522. 2Δ无性行为7556315. 9〇无性行为
通过以上实施例，确认了 ALA作为男性不育治疗剂是有效的。实施例4为了确认本发明的男性不育治疗剂是否确实改善精子的运动能力和存活率，使 用狗作为样品进行了以下实验。所述狗是2001年1月28日出生的7岁雄性小狮子狗(卜4 —卜^ )。开始给 予ALA时，体重为2.55kg。作为用于给予该雄性狗的制剂，制备ALA磷酸盐和柠檬酸 亚铁钠的混合物(ALA磷酸盐柠檬酸亚铁钠=1 4 (摩尔比))。按照ALA磷酸盐换 算，将所述制剂以3.33mg/天给予上述雄性狗，从2008年11月27日开始一天一次，连 续21天口服给药。在即将给予上述制剂之前(第0天)、给药第8天和给药第21天，采 集此雄性狗精液共计三次。在显微镜下观察刚采集的精子，用5个等级评价其活力。而 且，根据该活力评价结果，计算出精子的运动能力和存活率。其活力评价时的评价标准及评价结果如下面表2所示。表权利要求
1.男性不育治疗剂，其特征在于，其以通式(1)表示的δ-氨基乙酰丙酸、其衍生 物、或它们的盐作为有效成分，R2RINCH2COCH2CH2COR3(1)式中，R1和R2各自独立地表示氢原子、烷基、酰基、烷氧羰基、芳基或芳烷基；R3 表示羟基、烷氧基、酰氧基、烷氧羰基氧基、芳氧基、芳烷基氧基或氨基。
2.根据权利要求1所述的男性不育治疗剂，其特征在于，还组合铁化合物作为有效成分。
3.根据权利要求2所述的男性不育治疗剂，其中，所述铁化合物是选自氯化铁、三 氧化二铁、叶绿酸铁钠、铁蛋白铁、柠檬酸亚铁、柠檬酸铁钠、柠檬酸铁铵、富马酸亚 铁、焦磷酸亚铁、焦磷酸铁、含糖氧化铁、乙酸铁、草酸铁、琥珀酸亚铁、琥珀酸柠檬 酸铁钠、血红素铁、右旋糖酐铁、乳酸铁、葡萄糖酸亚铁、二亚乙基三胺五乙酸铁钠、 二亚乙基三胺五乙酸铁铵、二亚乙基二胺四乙酸铁钠、二亚乙基二胺五乙酸铁铵、三亚 乙基四胺铁、二羧甲基谷氨酸铁钠和二羧甲基谷氨酸铁铵中的一种或两种以上的化合 物。
4.根据权利要求1 3中任一项所述的男性不育治疗剂，其中，所述男性不育是由勃 起障碍引起的。
5.根据权利要求1 3中任一项所述的男性不育治疗剂，其中，所述男性不育是由乏 精子症或精子无力症引起的。
6.根据权利要求1 5中任一项所述的男性不育治疗剂，其中，δ-氨基乙酰丙酸、 其衍生物或它们的盐的给药量是每次O.OOlmg-lOg/kg体重。
7.根据权利要求2 6中任一项所述的男性不育治疗剂，其中，铁化合物的给药量是 每次 0.00Img-10g/kg 体重。
8.根据权利要求1 7中任一项所述的男性不育治疗剂，其中，给药方法是口服给 药、腹腔给药、静脉给药、肌肉内给药、患部局部给药、经皮给药或经直肠给药。
全文摘要
本发明的目的在于提供对男性不育症有效性高、副作用少的男性不育治疗剂。为了实现所述目的，可使用男性不育治疗剂，其特征在于，其以通式(1)表示的δ-氨基乙酰丙酸、其衍生物、或它们的盐作为有效成分，R2R1NCH2COCH2CH2COR3(1)，其中，R1和R2各自独立地表示氢原子、烷基、酰基、烷氧羰基、芳基或芳烷基；R3表示羟基、烷氧基、酰氧基、烷氧羰基氧基、芳氧基、芳烷基氧基或氨基。
文档编号A61K33/26GK102014890SQ20098011654
公开日2011年4月13日 申请日期2009年5月13日 优先权日2008年5月14日
发明者宫成节子, 田中彻, 石塚昌宏, 高桥真纯 申请人:Sbi 5-Ala生物技术股份有限公司