专利名称：使用选择性细胞周期蛋白依赖性激酶4/6抑制剂对抗电离辐射的造血防护的制作方法
技术领域：
本发明公开的主题涉及保护健康细胞免受因电离辐射导致的损伤的方法。具体地，本发明公开的主题涉及向已暴露于、将暴露于、或者有风险暴露于电离辐射的对象给药的细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)抑制剂的保护作用。缩写
0C=摄氏度%=百分比pL=微升μΜ=微摩尔浓度2BrIC二 2-溴-12,13-二氢-511-吲哚并[2,3々]吡咯并[3，4]咔唑-5,6-二酮BM=骨髓BM-MNC=骨髓单核细胞BrdU=5-溴-2-脱氧尿苷CAFC-鹅卵石区形成细胞(cobbkstone area-forming
cell)
CBC=全血细胞计数
CDK=细胞周期蛋白依赖性激酶
CDK4/6 =细胞周期蛋白依赖性激酶4和/或细胞周期蛋白
依赖性激酶6 CLP=淋巴共同祖细胞
CMP=髓共同祖细胞
DMF= 二甲基甲酰胺
DMSO=二甲亚砜DNA=脱氧核糖核酸ESI= 电喷雾电离EtOAc二乙酸乙酯EtOH-乙醇FBS=胎牛血清g=克G-CSF=粒细胞集落刺激因子GEMM=遗传工程鼠模型GM-CSF=粒细胞-巨噬细胞集落剌激因子GMP=粒细胞-单核细胞系祖细胞Gy=格雷h=小时HSC=造血干细胞HSPC=造血干细胞和造血祖细胞IC50=50%抑制浓度i.p.二腹膜内IR=电离辐射kg=千克LC-MS=液相色谱-质谱LD90=90%致死剂量
权利要求
1.减轻或预防电离辐射对已暴露于、将暴露于或有风险遭受暴露于电离辐射的对象中的健康细胞的效应的方法，其中所述健康细胞是造血干细胞或造血祖细胞，所述方法包括向所述对象给药有效量的抑制剂化合物或其药学可接受的形式，其中所述抑制剂化合物选择性地抑制细胞周期蛋白依赖性激酶4 (CDK4)和/或细胞周期蛋白依赖性激酶6 (CDK6)。
2.权利要求1的方法，其中所述抑制剂化合物选自吡啶并[2，3-d]嘧啶、三氨基嘧啶、 芳基[a]吡咯并[3，4-c]咔唑、含氮的杂芳基取代的脲、5-嘧啶基-2-氨基噻唑、苯并噻二嗪和吖啶硫酮。
3.权利要求2的方法，其中所述吡啶并[2，3-d]嘧啶是吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮或 2-氨基-6-氰基吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-酮。
4.权利要求3的方法，其中所述吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮是2-(2’-吡啶基)氨基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮。
5.权利要求4的方法，其中所述吡啶并[2，3-d]嘧啶-7-酮是6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基吡啶-2-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶_7_酮。
6.权利要求2的方法，其中所述芳基[a]吡咯并[3，4_c]咔唑选自萘基[a]吡咯并[3， 4-c]咔唑、吲哚并[a]吡咯并[3，4_c]咔唑、喹啉基[a]吡咯并[3，4_c]咔唑和异喹啉基 [a]吡咯并[3，4_c]咔唑。
7.权利要求6的方法，其中所述芳基[a]吡咯并[3，4-c]咔唑是2-溴-12，13-二氢-5H-吲哚并[2,3-a]吡咯并[3,4]咔唑-5，6-二酮。
8.权利要求1的方法，其中所述抑制剂化合物选择性地抑制细胞周期蛋白依赖性激酶 4 (⑶K4)和细胞周期蛋白依赖性激酶6 (⑶K6)。
9.权利要求1的方法，其中所述抑制剂化合物是非天然的化合物。
10.权利要求1的方法，其中所述抑制剂化合物选择性地诱导细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)依赖性细胞和/或细胞周期蛋白依赖性激酶6 (CDK6)依赖性细胞中的Gl停滞。
11.权利要求10的方法，其中所述抑制剂化合物在细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4) 依赖性细胞和/或细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)依赖性细胞中诱导基本上纯粹的Gl 停滞。
12.权利要求1的方法，其中所述抑制剂化合物基本上没有脱靶效应。
13.权利要求12的方法，其中所述脱靶效应是长期毒性、抗氧化效应、雌激素效应、酪氨酸激酶抑制、抑制除细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)之外的细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)、和非CDK4/6依赖性细胞中的细胞周期停滞中的一种或多种。
14.权利要求1的方法，其中所述对象是哺乳动物。
15.权利要求1的方法，其中所述抑制剂化合物通过口服给药、局部给药、鼻内给药、吸入和静脉内给药之一向所述对象给药。
16.权利要求1的方法，其中在暴露于所述电离辐射之前、在暴露于所述电离辐射期间、在暴露于所述电离辐射之后或其组合向所述对象给药所述抑制剂化合物。
17.权利要求16的方法，其中在暴露于所述电离辐射之前小于约M小时向所述对象给药所述抑制剂化合物。
18.权利要求16的方法，其中在暴露于所述电离辐射之前向所述对象给药所述抑制剂化合物以致在暴露于所述电离辐射期间所述化合物达到峰值血清水平。
19.权利要求18的方法，其中所述抑制剂化合物是6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基吡啶-2-基氨基)-8H-吡啶并[2，3-d]嘧啶_7_酮，并且其中在暴露于所述电离辐射之前4小时向所述对象口服给药所述抑制剂化合物。
20.权利要求16的方法，其中在暴露于所述电离辐射之后向所述对象给药所述抑制剂化合物。
21.权利要求20的方法，其中在暴露于所述电离辐射之后约对小时或更长时间向所述对象给药所述抑制剂化合物。
22.权利要求1的方法，其中所述健康细胞选自长期造血干细胞(LT-HSC)、短期造血干细胞(ST-HSC)、多能祖细胞(MPP)、髓共同祖细胞(CMP)、淋巴共同祖细胞(CLP)、粒细胞-单核细胞系祖细胞(GMP)和巨核细胞-红细胞系祖细胞(MEP)。
23.权利要求1的方法，其中给药所述抑制剂化合物产生所述对象的造血干细胞和/或造血祖细胞的短暂药理性静止。
24.权利要求1的方法，其中所述对象由于在战争、放射性恐怖袭击、工业事故、其它职业性暴露或太空旅行过程中的放射剂暴露，已遭受电离辐射或者有风险遭受暴露于电离辐射。
25.权利要求1的方法，其中所述对象正接受放射治疗以治疗疾病。
26.权利要求25的方法，其中给药所述抑制剂化合物不影响患病细胞的生长。
27.权利要求25的方法，其中所述疾病是癌症。
28.权利要求27的方法，其中所述癌症的特征在于以下一个或多个方面细胞周期蛋白依赖性激酶I(CDKl)活性增高、细胞周期蛋白依赖性激酶2 (CDD)活性增高、丧失或缺乏视网膜母细胞瘤抑癌蛋白(RB)、高水平的MYC表达、细胞周期蛋白E增多和细胞周期蛋白AJ·日夕O
29.权利要求25的方法，其中与在不给药所述抑制剂化合物的情况下会使用的剂量相比，给药所述抑制剂化合物允许使用更高剂量的电离辐射来治疗所述疾病。
30.权利要求1的方法，其中所述方法没有长期的血液毒性。
31.权利要求1的方法，其中与在不给药所述抑制剂化合物的情况下暴露于电离辐射后预期的状况相比，给药所述抑制剂化合物致使贫血减轻、淋巴细胞减少减轻、血小板减少减轻或中性白细胞减少症减轻。
全文摘要
提供减轻或预防电离辐射对健康细胞的效应的方法。所述方法涉及使用选择性细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4/6抑制剂来诱导CDK4/6依赖性细胞例如造血干细胞和/或造血祖细胞中的暂时静止。通过在暴露于所述电离辐射之前、同时或之后用选择性CDK4/6抑制剂化合物治疗可以实现在哺乳动物中的辐射防护。
文档编号A61K35/12GK102231983SQ200980148409
公开日2011年11月2日 申请日期2009年10月1日 优先权日2008年10月1日
发明者C·D·托里切, J·F·贝尔, M·R·拉姆齐, N·E·沙普尔斯, S·约翰逊 申请人:北卡罗来纳大学查珀尔希尔分校