专利名称：一种鹅胆提取物及其制备方法及其药物用途的制作方法
技术领域：
本发明属于中药领域，尤其指鹅胆提取物及其制备方法及其药物用途。
背景技术：
胆汁在我国医药上的应用，历史悠久。早在东汉时期，我国第一部药学专著《神农本草经》中就记载了一种鲤鱼胆。古代著名医学家张仲景在《伤寒论》中记载了猪胆治疗疾病。明代李时珍的《本草纲目》中收载了31种。清代赵学敏的《本草纲目抬遗》中增收了2种。现代新出版的《中药大辞典》中记载了35种，如鸡胆、鹅胆、牛胆、羊胆、猪胆、狗胆、熊胆等都列入了《中药大辞典》(上海科学技术出版社，2006.3)。《中药大辞典》载鹅胆汁的成分与鸡胆汁相似，主要有鹅去氧胆酸(CDCA)和胆酸(CA)等。CDCA有利胆、溶解胆结石、促进脂肪消化和吸收，止咳祛痰平喘、降血脂、抗高血压和抗菌等作用。CA有中枢抑制、强心、降压、利胆、止咳祛痰平喘、抗炎和抗过敏、抗菌和抗病毒等作用。但关于鹅胆的现代研究极少。
发明内容
本发明提供一种鹅胆提取物及其制备方法及其药物用途，用于清热解毒、保肝、提高免疫。本发明鹅胆提取物是由下列方法得到的 取鲜鹅胆，去掉胆皮后，过滤，收集滤液，加50-95％食用乙醇至50-70％浓度，2-24℃下沉淀5-48小时，过滤，收集滤液得鹅胆汁原液，回收乙醇，浓缩，干燥，得鹅胆提取物。
本发明的鹅胆提取物在制备清热解毒、保肝、提高免疫的药物中的应用。
本发明用现代的提取工艺制得的鹅胆汁具有明显激活，增强小鼠的网状内皮系统功能，可提高机体非特异性免疫功能，有清热解毒、保肝、提高免疫有作用。本发明口服每瓶5ml，口服一次一瓶，一日3次。
具体实施例方式 实施例1 取鲜鹅胆，去掉胆皮后，过滤，收集滤液，加50％食用乙醇至50％浓度，2℃下沉淀5小时，过滤，收集滤液得鹅胆汁原液，回收乙醇，浓缩，干燥，得鹅胆提取物。
实施例2 取鲜鹅胆，去掉胆皮后，过滤，收集滤液，加75％食用乙醇至60％浓度，13℃下沉淀25小时，过滤，收集滤液得鹅胆汁原液，回收乙醇，浓缩，干燥，得鹅胆提取物。
实施例3 取鲜鹅胆，去掉胆皮后，过滤，收集滤液，加95％食用乙醇至70％浓度，24℃下沉淀48小时，过滤，收集滤液得鹅胆汁原液，回收乙醇，浓缩，干燥，得鹅胆提取物。
下面结合药效学实验进一步说明本发明的药物作用。
试验材料 一、药物 鹅胆提取物由实施例2方法获得，阳性对照药护肝片由哈尔滨世一堂制药厂生产每片重0.35g(含提取物0.25g/片)，批号011128，试验时用蒸馏水配制所需浓度，对照组给予等体积蒸馏水。
二、动物 小鼠，昆明种，雌雄各半，体重25±2g每组12-15只，由山西省中医院研究院实验动物室繁殖提供。
三、其他材料，均为常规选购。
方法与结果 一、对小鼠四氯化碳急性肝损伤的保护作用 将小鼠随机分为六组，分设空白对照组、四氯化碳模型组、鹅胆提取物高、中、低剂量组及阳性药护肝片对照组。各给药组均为灌胃给药(空白对照组、模型组给同体积水)，每日一次，连续给药前10小时，除空白对照组外，其余各组均腹腔注射0.2％CCl4豆油溶液0.2ml/20g，其后20小时，由眼底静脉丛取血，分离血清，以比色法测血清丙氨酸氨基转移酶(ATL)，谷草转氨酶(COT)含量，结果进行统计学处理。同时将各组动物处死，取肝脏，镜下观察各组动物肝脏损伤程度，见表1。
表1 鹅胆提取物对CCl4中毒小鼠血清ALT GOT含量的影响 注同模型组相比**P＜0.01 *P＜0.05 表1结果表明，模型组给四氯化碳后血清ALT、GOT均明显升高(同空白对照组相比)。而各给药组同模型组相比，血清ALT含量均明显降低，但对GOT无明显影响。另外，鹅胆提取物中剂量组与护肝片组相比(相同剂量)降低谷丙转氨酶强度基本相同，无显著性差异。
经镜下观察，空白对照组肝小叶结构完整，胞核圆形、清晰，核膜完整，肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列，均未见异常，模型组肝小叶结构紊乱，肝细胞严重坏死，大部分核溶解，线粒体肿胀，基质疏松，胞浆中出现大量空泡。鹅胆提取物各组及护肝片组与模型相比，肝小叶结构紊乱，程度同模型组基本相同，肝细胞坏死程度有所减轻，线粒体肿胀程度及基质疏松程度亦有所减轻。
实验结果表明，鹅胆提取物与原剂型对四氯化碳引起的小鼠肝损伤的保护作用。
二、对D-半乳糖胺盐酸盐急性肝损伤的保护作用 动物分组，给药剂量、给药时间均同实验一。致肝损伤药物选用D-半乳糖胺盐酸盐，小鼠按600mg/kg腹腔注射(10％浓度，PH值为7.0)，注射后30小时各组动物取血，测血清中丙氨酸基转移酶和谷草转氨酶含量，结果进行统计学处理，见表2。
表2 鹅胆提取物对D-半乳糖胺中毒小鼠血清ALT、GOT的影响 注同模型组相比**P＜0.01 *P＜0.05 实验结果表明，模型组同空白对照组相比，小鼠给予D-半乳糖胺后血清ALT明显升高，GOT亦有升高趋势，但不明显。各给药组分别同模型组相比，可使ALT明显降低，鹅胆提取物呈一定的量效关系，鹅胆提取物中剂量组与护肝片组相比无明显性差异，两者降低ATL作用基本相同。另外，各给药组对GOT均无明显的影响。
三、对小鼠单核吞噬细胞功能的影响 取小鼠72只，随机分为六组，每组12只，雌雄各半。除空白对照组外，其余六组均腹腔注射氢化可的松25mg/kg，同时各给药组按表3剂量灌胃给药，每日一次，连续给药7天(对照组、模型组给同体积水)。最后一次给药后3小时，由尾静脉注射印度墨汁1ml/kg，注射后1分钟，5分钟分别从眼眶静脉取血20ul，溶于2ml0.1％Na2CO，溶液中，在波长650nm下测定吸收度。最后将小鼠处死，称定肝、脾重量，计算吞噬指数K值和吞噬活性a值，结果进行统计学处理，见表3 表3 鹅胆汁对小鼠单核吞噬细胞功能的影响 注同模型组相比**P＜0.01 *P＜0.05 实验结果表明，空白对照组同模型组(氢化可的松组)相比，可使K、a值明显降低，各给药组同模型组相比，可对抗由氢化可的松引起的K值降低，并可达到正常水平(同空白对照组相比无明显性差异)。鹅胆汁高剂量组使a值明显升高。
四、清热作用 试验目的 观察鹅胆汁对发热动物的解热作用 受试药物 鹅胆提取物由实施例2方法获得。
动物 新西兰纯种家兔，性别雄性，体重1.6～2.2kg，每组家兔12只。
实验方法选择 选择体内解热试验。以伤寒、付伤寒甲乙三联菌苗为致热剂，兰州生化制药厂。批号020108 试验主要步骤 选择体温在33℃～38.9℃新西兰纯种家兔60只供实验用。随机分成5组即生理盐水组、鹅胆提取物三组高、中、低剂量、阿斯匹林组，耳静脉注射三联菌苗0.8ml/kg，待动物体温升高差值达0.8℃后，鹅胆汁三组分别灌胃5.4g/kg、2.8g/kg、1.4g/kg鹅胆汁，阿斯匹林组灌胃0.37g/kg阿斯匹林，生理盐水组灌胃5ml/kg生理盐水，，每隔1小时测肛温一次，以不同时间所测肛温与基础肛温之差值为体温变化的指标。动物给药后反应 观察指标家兔给药后肛温变化。
观察时间给药30分钟计时，共观察5小时，每隔1小时测肛温一次。
剂量设置3个剂量组，大剂量组4ml/kg、中剂量组2ml/kg、小剂量组1ml/kg。
[给药方法]灌胃给药，给药次数1次。
[试验对照]空白对照为生理盐水。
阳性对照药物阿斯匹林，批号010802，西北第二合成药厂。给药剂量0.37g/kg。氯丙嗪，批号010425，西安制药厂。给药剂量25mg/kg。
[试验结果] 鹅胆提取物4ml/kg、2ml/kg和1ml/kg三组对致热家兔在给药后3小时均产生显著降温作用，与生理盐水组相比差异显著(P＜0.05)，阿斯匹林组降温作用与生理盐水组相比差异显著(P＜0.01)，其降温过程比鹅胆汁快，且作用强，两者相比差异显著(P＜0.01)见表2。
表2 鹅胆提取物对致热剂所致家兔体温的影响
与生理盐水组相比*P＜0.05 **P＜0.01 结论 在本实验条件下，两种动物、两种方法解热实验表明鹅胆汁能显著降低伤寒，付伤寒甲乙三联菌苗所致家兔体温的升高，其4ml/kg和2ml/kg为解热有效剂量但解热作用与速度弱于0.37g/kg的阿司匹林。1ml/kg剂量的鹅胆汁无解热作用。
上述结果说明，鹅胆汁具有明显激活，增强小鼠的网状内皮系统功能，可提高机体非特异性免疫功能，有解热作用。
制剂 1、片剂取鹅胆提取物100g，加入淀粉60g、乳糖30g、羟丙基纤维素1.25g，制成颗粒，干燥，整粒，加入滑石粉5g和硬脂酸镁0.5g混合均匀，制成1000片，包薄膜衣，即得。一日三次，一次2片。
2、胶囊将鹅胆提取物100g粉碎，加入微粉硅胶和糊精按4∶1组成的复合辅料100g，制粒，混匀，装入胶囊。一日三次，一次2粒。
3、颗粒剂取鹅胆提取物100g，加入淀粉60g、蔗糖30g、羟丙基纤维素1.25g，制成颗粒，干燥，整粒，装袋1000g即得。一日三次，一次一袋。
权利要求
1.一种鹅胆提取物，其特征在于它是由下列方法制得的取鲜鹅胆，去掉胆皮后，过滤，收集滤液，加50-95％食用乙醇至50-70％浓度，2-24℃下沉淀5-48小时，过滤，收集滤液得鹅胆汁原液，回收乙醇，浓缩，干燥，得鹅胆提取物。
2.如权利要求1所述的鹅胆提取物的制备方法。
3.如权利要求1所述的鹅胆提取物在制备清热解毒、保肝、提高免疫的药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种鹅胆提取物及其制备方法及其药物用途，属于中药领域。取鲜鹅胆，去掉胆皮后，过滤，收集滤液，加50-95％食用乙醇至50-70％浓度，2-24℃下沉淀5-48小时，过滤，收集滤液得鹅胆汁原液，回收乙醇，浓缩，干燥，得鹅胆提取物。本发明的鹅胆提取物在制备清热解毒、保肝、提高免疫的药物中的应用。本发明用现代的提取工艺制得的鹅胆汁具有明显激活，增强小鼠的网状内皮系统功能，可提高机体非特异性免疫功能，有清热解毒、保肝、提高免疫有作用。
文档编号A61P1/16GK101810643SQ20101016479
公开日2010年8月25日 申请日期2010年5月7日 优先权日2010年5月7日
发明者李平亚, 刘传贵, 金立群, 王福文, 王文杰, 闫智力, 张广民 申请人:吉林华康药业股份有限公司