一种三七总皂苷提取物及其制备方法

专利名称：：一种三七总皂苷提取物及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种三七总皂苷提取物及其制备方法，含有该三七总皂苷提取物的制剂及其制备方法。
背景技术：
：三七为五加科植物三七Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根。主产云南文山，砚山、广南、马关及广西靖西、睦边、百色等地。性甘、微苦，温。归经胃经。功能主治为散瘀止血，消肿定痛。用于咯血，吐血，便血，崩漏，外伤出血，胸腹刺痛，跌扑肿痛。三七中含有皂苷、黄酮、氨基酸、多糖、脂肪酸、肽类化合物等成分，其中，达玛烷型四环三萜类皂苷(三七总皂苷)被认为是三七的主要生理活性成分。到目前为止，从三七中分得多种皂苷成分，其中包括三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re等三七三醇组皂苷和人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷Re、人参皂苷Rd等三七二醇组皂苷。药理研究结果表明，三七三醇组皂苷具有良好的活血化瘀功能，可以通过降低脑血管阻力，明显增加脑血流量来改善脑循环，能抑制二磷酸腺苷(ADP)诱导的大鼠血小板聚集和大鼠动-静脉旁路血栓的形成；三七二醇组皂苷具有钙通道阻滞作用和抗自由基作用，其中人参皂苷Rb1不仅仅具有抑制细胞脂质过氧化反应，清楚自由基的能力，还可以使过氧化氢酶，谷胱甘肽过氧化物酶活性增加，因此，三醇组皂苷和二醇组皂苷不同配伍将影响到组合物的疗效。已上市的品种注射用血塞通，采用三七总皂苷，用注射用水溶解，加针用活性炭脱色，滤过，加注射用水至总量，调节PH，滤过，冷冻干燥，即得。其需专用溶剂(35%45%乙醇溶液)溶解，然后静脉滴注，乙醇有一定的刺激性，存在一定安全性隐患。已上市的注射用血栓通，其对三七总皂苷中有效成分的含量要求低，只要求三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量在55%以上。现有技术中公开了多种高纯度的三七总皂苷及制备方法。申请号为01108591.6的专利文献公开了三七总苷的制备方法，三七采用70%乙醇提取，浓缩液过大孔吸附树脂，7090%乙醇洗脱液过离子交换树脂脱色，得三七总皂苷的纯度达到95%以上；申请号为93105774.4的专利文献公开了三七总皂苷的药物及其制备方法，三七采用50%以上乙醇浸提，回收乙醇后的溶液过大孔吸附树脂柱，70%95%乙醇洗脱液用氧化铝吸附脱色，再用3%5%活性炭脱色，正丁醇萃取，丙酮干燥和真空干燥，得到的皂苷纯度可达88%以上。现有技术中还公开了各种三七皂苷单体的制备纯化方法，公开号为CN101575357A的专利文献公开了一种三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd的制备方法，产品纯度均在97%以上，公开号为CN101390887A的专利文献公开了三七皂苷队、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3的制备方法和及单体组合物，单体的成分在94%以上。以上的现有技术都在一味的追求三七总皂苷的高纯度，却忽视了不同类型皂苷之间的协同增效作用，忽视了中药“多成分、多靶点”的特色。而对于中药三七总皂苷而言，不同类型有效成分的含量与比例都将影响到药物临床安全性和有效性。其次，现有技术中提取纯化的工艺步骤较多，或者用到毒性较大的有机溶剂，为三七总皂苷后续的临床应用存在安全性隐患。
发明内容本发明旨在提供一种高纯度的三七总皂苷提取物，同时提供一种最佳疗效配比的三七总皂苷提取物，在提高三七总皂苷提取物纯度的同时，通过疗效筛选确定最佳的配比范围。本发明提供一种三七总皂苷提取物，包括三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷，三七三醇组皂苷中主要含有三七皂苷R1和人参皂苷Rg1，三七二醇组皂苷中主要含有人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd，其特征在于，三七三醇组皂苷与三七二醇组皂苷的重量比为10.52，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd的总含量占三七总皂苷提取物的重量百分比80%以上。本发明所述的三七总皂苷提取物，根据药效试验结果，该三七总皂苷提取物中三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷的最优重量比为11。本发明所述的三七总皂苷提取物，还含有人参皂苷Re，其中，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd的总含量占三七总皂苷提取物的重量百分比85%以上。本发明所述的三七总皂苷提取物中，所述的三七皂苷R1和人参皂苷Rg1重量比为135，人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd的重量比为351。本发明所述的三七总皂苷提取物中，所述的三七皂苷R1，人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的重量比为1350.41。本发明所述的三七总皂苷提取物中，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1的最优重量比为14，人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd的最优重量比为41。本发明所述的三七总皂苷提取物中，人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd的最优重量比为140.5。本发明所述的三七总皂苷提取物的制备方法为，取三七总皂苷粗提物，上大孔吸附树脂柱；用去离子水洗脱，弃去洗脱液；用5%15%乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液；用3050%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥即得三七三醇组皂苷；继续用60%80%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩，干燥得三七二醇组皂苷；三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷混合，即得。本发明所述的三七总皂苷提取物的制备方法为，取三七总皂苷粗提物，上大孔吸附树脂柱；用去离子水洗脱，弃去洗脱液；用5%15%乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液；用3050%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥即得三七三醇组皂苷，所得三七三醇组皂苷上反相制备液相，用3050%乙醇洗脱，分别收集三七皂苷R1，人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的洗脱液，分别干燥即得三七皂苷R1,人参皂苷Rg1、人参皂苷Re；继续用60%80%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩，干燥得三七二醇组皂苷；所得三七二醇组皂苷上反相制备液相，用6080%乙醇溶液洗脱，分别收集人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd的洗脱液，分别浓缩干燥即得人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd；三七皂苷R1,人参皂苷Rg1、人参皂苷Re按一定的比例配比得三七三醇组皂苷，人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd按一定的重量比配比得三七二醇组皂苷，三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷再按一定比例混合，即得。本发明还包括用所述的三七总皂苷提取物制成的药物制剂，含有治疗有效量的三七总皂苷提取物和医药上可接受的辅料，剂型包括口服制剂和注射制剂，片剂，胶囊，粉针、水针等。相对现有技术来说，本发明不仅对三七总皂苷进行了纯化，所制备的三七总皂苷提取物做成粉针后无需乙醇溶液溶解，只需注射用水或者生理盐水或葡萄糖注射液溶解即可。其次本发明通过药效筛选，筛选出三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷最佳疗效配比，并且验证了单体之间的配比；通过对大鼠脑血管阻断行为障碍的改善药效学研究，结果表明，该三七总皂苷提取物能缩小缺血所致脑梗塞面积，改善脑缺血所致的行为障碍。对家兔脑血管的影响试验结果表明三七总皂苷提取物能够显著增加家兔脑血流量、降低脑血管阻力。最后，本发明所采用的提取工艺步骤少，并且未采用毒性大的有机试剂，所制备的三七总皂苷更容易达到临床药用的要求。经过敏试验及溶血试验，结果表明，该纯度的提取物均未出现过敏反应和溶血现象，安全性高。综上所述，通过选择最佳配比，可以保证三七总皂苷提取物批次之间的重现性，从而保证产品质量的稳定可控，安全有效。1、过敏试验取三七总皂苷提取物用生理盐水溶解制成Iml含50mg的溶液，即得。取粉针1支，加注射用水4ml溶解。取体重250-300g的健康豚鼠6只，连续3次，间日腹腔注射供试品溶液0.5ml，然后分为两组，每组3只，分别在第一次注射后第14天及第21天静脉注射供试品溶液1ml，在注射后15分钟内，均不得出现过敏反应，如有竖毛、呼吸困难、喷嚏、干呕或咳等现象中的两种或两种以上者，或有抽搐，虚脱或死亡现象应列为阳性。经检查均未出现过敏反应。2、溶血试验取三七总皂苷提取物用生理盐水溶解制成Iml含8mg的溶液，即得。取粉针1支，加注射用水3ml溶解。2%红血球混悬液的制备取兔或羊血数毫升，放入成有玻璃珠的三角瓶中振摇10分钟，或用玻璃珠搅动血液，除去纤维蛋白质，使成脱纤维血液，加约10倍量的生理盐水，摇勻，离心，除去上清液，沉淀的红血球再用生理盐水如法洗涤2-3次，至上清液不显红色为止，将所得红血球用生理盐水配成2%混悬液，供试验用。试验方法取试管6支，按下表配比量依次加入2%红细胞混悬液和生理盐水，混勻后，于37°C恒温箱放置半小时，然后分别加入不同的供试品溶液(第6管为对照管)摇勻后，置恒温箱37°C中，开始每隔15分钟观察一次，1小时后，每隔1小时观察一次，一般观察4小时，如溶液呈透明红色，表示溶血。如溶液中有棕红色或红棕色絮状沉淀，表示有红细胞凝聚作用。试管编号1234562%红血球混悬液(ml)2.52.52.52.52.52.5生理盐水(ml)2.02.12.22.32.42.5供试品溶液(ml)0.50.40.30.20.10.0结果判断①一般以0.3ml供试品液(第3管)在2小时内不发生溶血作用判为符合规定。②如有红细胞凝聚现象，可按下法进一步判断。若凝聚物在试管振荡后又能均勻分散，或将凝聚物放在载玻片上，在盖玻片边缘滴加两滴生理盐水，在显微镜下观察，凝聚红细胞能被冲散者为假凝聚，判为符合规定；若凝聚物不被摇散或在玻片上不被冲散者为真凝聚，判为不符合规定。试验结果为均符合规定。3、对大鼠脑血管阻断行为障碍的改善作用3.1供试品和对照品供试品三七总皂苷提取物(实施例1，三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷的比例分别为41；21；11；12；14)阳性对照品注射用血塞通溶媒0·9%氯化钠注射液3.2实验动物名称Wistar大鼠性别雌雄兼用体重210_240g3.3动物分组及给药3.3.1动物分组成年健康大鼠70只，随机分为七组，每组10只生理盐水对照组(NS，iv)；三七总皂苷提取物组(三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷的比例分别为41；21；11；12;14)组；血塞通组。3.3.2给药途经根据拟临床用药途径，三七总皂苷提取物组、阳性对照组、生理盐水对照组均采用iv给药。3.3.3给药剂量生理盐水对照组(NS):0.9%氯化钠注射液三七总皂苷提取物组(三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷的比例为41)三七总皂苷提取物组(三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷的比例为21)三七总皂苷提取物组(三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷的比例为11)三七总皂苷提取物组(三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷的比例为12)三七总皂苷提取物组(三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷的比例为14)阳性对照组注射用血塞通(RlRglRbl约142)3.3.4配制方法试验前加入生理盐水，轻轻摇勻使成透明溶液。3.3.5给药容积静脉途径给药容积为10ml/kg，给药量根据体重计算。3.3.6给药频率每天1次，连续三天。3.4试验方法3.4.1试验方法选择观察并统计三七总皂苷提取物对大脑中动脉阻断大鼠行为障碍的改善作用；观察并统计三七总皂苷提取物对大鼠中动脉阻断后脑梗塞面积的影响；3.4.2大鼠腹腔注射水合氯醛(350mg/ml)麻醉。侧卧固定。于亚无菌手术条件下，经眼外眦与外耳道连线间开口，剪断颧骨，固定创口，在手术显微镜下，颅骨底处开颅窗，暴露大脑中动脉，用高频电刀灼断，止血后，缝合创口，回笼饲养。术后24小时按表1评定缺血损伤程度，根据分数高低搭配分组，并开始给药。药后2小时评分，以后每天给药一次，并在给药后2小时评分。第三次给药，评分后断头。取大脑组织切成5片，常规下TTC染色，用甲醛固定后，根据落点法(100点/cm2)计算梗塞面积占脑切片面积的百分比。3.5动物给药后反应3.5.1观察指标观察给药前及给药后的动物行为及脑梗塞面积占脑切片的百分比。动物缺血损伤的行为按下表所列指标观察、打分。分数越高示损伤越严重。表1MCA0大鼠行为障碍的评分标准<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>*如介于两级之间时则取两级的平均分3.5.2观察时间在给药前及给药后每天都要观察动物缺血损伤后的行为；在首次给药后三天、即在第三次给药后2小时，对动物行为评为后断头，取脑组织切片、染色、固定，观察并统计脑梗塞面积占脑切片面积的百分比。3.6试验结果3.6.1数据及统计学处理各组给药前及各次给药后的分值均表示为平均值^^sd，用配对t检验，判定给药前后分值差异的显著性；以分值改善率(药后每天均分/药前分)的组间非配对t检验比较不同组间的疗效。梗塞面积占脑切片的百分比，以组间非配对t检验判定差异的显著性。3.6.2试验结果各给药组和对照组，给药前及给药期间的每天行为评分如表2所示。由表可见，给药前各组动物的损伤程度比较一致，未见显著差异(P>0.05)，表明分组合理。从改善率结果看，阳性组和样品组与生理盐水组相比均有显著改善作用，样品组中三七三醇组皂苷与三七二醇组皂苷比例为11时效果最强。表2对MCA0大鼠行为评分及其改善率的影响(GlO，X±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001与各自给药前相比;#P<0.05，##P<0.01与NS组对比。根据对MCA0大鼠脑梗塞面积百分比的影响。样品和血塞通组(YX3)的梗塞面积均小于空白对照组(NS)；其中三七三醇组皂苷与三七二醇组皂苷比例为11样品组的梗塞面积显著小于空白对照(P<0.05)，表明增加脑血流量、减少梗塞面积是三七皂苷针改善脑缺血损伤的作用基础之一。3.7试验结论结果显示，三七总皂苷提取物能缩小缺血所致脑梗塞面积，改善脑缺血所致的行为障碍，表明本药对局部缺血损伤有改善作用。增加脑血流量，减少梗塞面积可能是其作用基础之一。4对家兔脑血管的影响4.1供试品和对照品供试品三七总皂苷提取物(实施例1三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷的比例分别为11)三七总皂苷提取物(实施例4三七皂苷礼，人参皂苷Rgl、人参皂苷Rh和人参皂苷Rd的重量比为1441)三七总皂苷提取物(实施例4三七皂苷礼，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re重量比1:4:0.5，人参皂苷Rh和人参皂苷Rd的重量比为41)阳性对照品注射用血塞通(R1RglRbl约142)溶媒0.9%氯化钠注射液4.2实验动物名称中国白兔性别雌雄兼用体重1.5-2.5kg4.3动物分组及给药4.3.1动物分组将25只家兔进行随机分组，每组5只，共分为5组溶剂对照组、三七总皂苷提取物组、血塞通组(阳性对照)。4.3.2给药途经根据临床用药途径，三七总皂苷提取物组、阳性对照组、生理盐水对照组均采用耳缘静脉注射给药。配制方法试验前将生理盐水注入粉针安瓿内，轻轻摇勻使成透明溶液。4.3.3给药容积静脉途径给药容积为10ml/kg，给药量根据每周体重计算。4.3.4给药频率单次给药4.4试验方法各组动物耳缘静脉注射25%乌拉坦(4ml/kg)，仰位固定，切开颈部皮肤，分离两侧总动脉，于左侧颈总动脉处插管，以MPU-0.5型压力换能器测血压曲线，于右侧颈总动脉头端进一步分离，接MF-27型电磁流量计，显示右侧颈内动脉血流，可粗略代表前半部血流量。将针形电极插入四肢皮下，测量II导联心电图。上述指标同步记录于冊-46型多导仪上。阳性对照组动物上腹部切口，十二指肠插管，以备给药。待各项指标稳定30分后，各组动物分别静脉注射给药或十二指肠给药，读取红药前后颈内动脉血流量(ICBF)、血压(平均血压，BP)及心率(HR)。实验结束后，取出全脑称重，计算每100g脑组织血流量(CBF)及脑血管阻力(CVR)。ICBFCBF=-xlOOCVR=MAP/CBF脑重/24.5动物给药后反应4.5.1观察指标主要观察ICBF，同时观察HR、BP，计算CBF及CVR。4.5.2观察时间60分钟4.6试验结果4.6.1数据及统计学处理各组数据以3T±SD表示，以t检验比较给药前后的的差异。4.6.2结果见表3。对家兔脑血流量(CBF，ml/100g，min)的影响(n=5，X士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>_P<0.01与给药前比较4.7试验结论三七总皂苷提取物能够显著增加家兔脑血流量、降低脑血管阻力，给药后5-10分钟开始发挥作用，约20分钟时作用最强，作用至少持续30分钟以上。但对家兔心率及血压无显著性影响。具体实施例方式下面以具体实施例对本发明作详细说明，本发明所述的三七总皂苷提取物是按如下实施例所表示的方法制造或发现的，所涉及到的方法是本领域的技术人员能够掌握和运用的技术手段。但以下实施例不得理解为任何意义上的对本发明权利要求的限制。实施例1取三七总皂苷粗提物，上大孔吸附树脂柱；用去离子水洗脱，弃去洗脱液；用15%乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液；用40%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥即得三七三醇组皂苷；继续用70%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩，干燥得三七二醇组皂苷；测得三七三醇组皂苷中三七皂苷礼，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re的含量分别占三七三醇组皂苷的15.0%，69.0%和6.4%，测得人参皂苷Rh和人参皂苷Rd的含量分别占三七二醇组皂苷的70.0%，18.4%。三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷分别按一定重量比混合。三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷按重量比11混合，计算总混合物中三七皂苷队，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re、人参皂苷Rbi和人参皂苷Rd的含量分别为7.5%，34.5%，3.2%,35%,9.2%。三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷按重量比21混合，计算总混合物中三七皂苷礼，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re、人参皂苷Rh和人参皂苷Rd的含量分别为10%，46%，4.3%,23.3%,6.1%。三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷按重量比41混合，计算总混合物中三七皂苷队，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re、人参皂苷Rbi和人参皂苷Rd的含量分别为12%，55.2%，5.1%,14%,3.7%。三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷按重量比14混合，计算总混合物中三七皂苷队，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re、人参皂苷Rh和人参皂苷Rd的含量分别为3%，13.8%，1.3%,56%,14.7%。三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷按重量比12混合，计算总混合物中三七皂苷Ri，人参皂苷Rgi、人参皂苷Re、人参皂苷Rbi和人参皂苷Rd的含量分别为5%，23%，2.1%,46.7%,12.3%。实施例2取三七总皂苷粗提物，上大孔吸附树脂柱；用去离子水洗脱，弃去洗脱液；用5%乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液；用30%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥即得三七三醇组皂苷；继续用80%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩，干燥得三七二醇组皂苷。测得三七三醇组皂苷中三七皂苷礼，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re的含量分别占三七三醇组皂苷的13.8%，66.7%和9.7%，测得人参皂苷Rb:和人参皂苷Rd的含量分别占三七二醇组皂苷的64.0%，21.1%。三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷分别按一定重量比混合，即得。实施例3取三七总皂苷粗提物，上大孔吸附树脂柱；用去离子水洗脱，弃去洗脱液；用10%乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液；用50%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥即得三七三醇组皂苷；继续用60%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩，干燥得三七二醇组皂苷。测得三七三醇组皂苷中三七皂苷礼，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re的含量分别占三七三醇组皂苷的20.5%,61.7%和12.7%，测得人参皂苷Rh和人参皂苷Rd的含量分别占三七二醇组皂苷的67.5%，13.1%。三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷分别按一定重量比混合，即得。实施例4取三七总皂苷粗提物，上大孔吸附树脂柱；用去离子水洗脱，弃去洗脱液；用15%乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液；用40%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥即得三七三醇组皂苷，所得三七三醇组皂苷上反相制备液相，用40%乙醇洗脱，分别收集三七皂苷队，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re的洗脱液，分别干燥即得三七皂苷礼，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re；继续用70%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩，干燥得三七二醇组皂苷；所得三七二醇组皂苷上反相制备液相，用70%乙醇溶液洗脱，分别收集人参皂苷Rh和人参皂苷Rd的洗脱液，分别浓缩干燥即得人参皂苷Rh和人参皂苷Rd；三七皂苷礼，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re按一定的比例配比得三七三醇组皂苷，人参皂苷Rh和人参皂苷Rd按一定的重量比配比得三七二醇组皂苷，三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷再按一定比例混合，即得。测定三七皂苷礼，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re的纯度分别为95.5%，93.8%，93.2%；测定人参皂苷Rb:和人参皂苷Rd纯度分别为95.2%,94.7%.三七皂苷礼，人参皂苷Rgl重量配比为14得三七三醇组皂苷(1)三七皂苷礼，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re的重量配比为140.5得三七三醇组皂苷⑵人参皂苷Rh和人参皂苷Rd的重量配比为41得三七二醇组皂苷(3)三七三醇组皂苷(1)和三七二醇组皂苷(3)按重量比11混合，即得三七三醇组皂苷(2)和三七二醇组皂苷(3)按重量比11混合，即得实施例5三七总皂苷提取物粉针三七总皂苷提取物250g注射用水加至3000ml_制成1000支取三七总皂苷提取物加适量注射用水加热溶解，加入0.3%针用活性炭(w/v)，加热煮沸，保温30分钟，过滤，加注射用水补充至总体积，滤过、分装、冻干、轧盖、制成1000支，即得。规格为每支含三七总皂苷提取物250mg。实施例6三七总皂苷提取物粉针三七总皂苷提取物100g注射用水加至3000ml_制成1000支取三七总皂苷提取物加适量注射用水加热溶解，加入0.3%针用活性炭(w/v)，加热煮沸，保温30分钟，过滤，加注射用水补充至总体积，滤过、分装、冻干、轧盖、制成1000支，即得。规格为每支含三七总皂苷提取物lOOmg。实施例7三七总皂苷提取物粉针三七总皂苷提取物150g注射用水加至3000ml_制成1000支取三七总皂苷提取物加适量注射用水加热溶解，加入0.3%针用活性炭(w/v)，加热煮沸，保30分钟，过滤，加注射用水补充至总体积，滤过、分装、冻干、轧盖、制成1000支，即得。规格为每支含三七总皂苷提取物150mg。实施例8三七总皂苷提取物粉针三七总皂苷提取物200g注射用水加至4000ml_制成1000支取三七总皂苷提取物加适量注射用水加热溶解，加入0.3%针用活性炭(w/v)，加热煮沸，保温30分钟，过滤，加注射用水补充至总体积，调节pH至6.57.0，滤过、分装、冻干、轧盖、制成1000支，即得。规格为每支含三七总皂苷提取物200mg。实施例9三七总皂苷提取物粉针三七总皂苷提取物400g注射用水加至4000ml_制成1000支取三七总皂苷提取物加适量注射用水加热溶解，加入0.3%针用活性炭(w/v)，加热煮沸，保温30分钟，过滤，加注射用水补充至总体积，调节pH至6.57.0，滤过、分装、冻干、轧盖、制成1000支，即得。规格为每支含三七总皂苷提取物400mg。实施例10三七总皂苷提取物水针三七总皂苷提取物100g注射用水加至2000ml_制成1000支取三七总皂苷提取物加适量注射用水溶解，加入0.2%针用活性炭(w/v)，加热煮沸，保温30分钟，冷藏，过滤除碳，调pH值为7.52，加注射用水补充至总体积，过滤除菌、灌封，制成1000支，即得。规格为每ml含三七总皂苷提取物50mg。实施例11三七总皂苷提取物胶囊三七总皂苷提取物50g淀粉48g滑石粉2g_制成1000粒取三七总皂苷提取物，粉碎成细粉，加入淀粉，滑石粉混勻，填充胶囊，即得实施例12三七总皂苷提取物胶囊三七总皂苷提取物100g淀粉74g滑石粉4g_制成1000粒取三七总皂苷提取物，粉碎成细粉，加入淀粉，滑石粉混勻，填充胶囊，即得。实施例13三七总皂苷提取物片三七总皂苷提取物100g交联羧甲基纤维素钠10g乳糖57g聚维酮乙醇溶液适量硬脂酸镁3g_制成1000粒取三七总皂苷提取物和交联羧甲基纤维素钠、乳糖混合均匀，用聚维酮乙醇溶液制颗粒，干燥，整理后加入硬脂酸镁混合均勻，压片即得。权利要求一种三七总皂苷提取物，包括三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷，其特征在于，三七三醇组皂苷与三七二醇组皂苷的重量比为1∶0.5～2，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd的总含量占三七总皂苷提取物的重量百分比80％以上。2.根据权利要求1所述的三七总皂苷提取物，其特征在于，该三七总皂苷提取物中三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷的重量比为11。3.根据权利要求1或2所述的三七总皂苷提取物，其特征在于，所述的三七三醇组皂苷中还含有人参皂苷Re，其中，三七皂苷札、人参皂苷Rgl、人参皂苷Re、人参皂苷和人参皂苷Rd的总含量占三七总皂苷提取物的重量百分比85%以上。4.根据权利要求3所述的三七总皂苷提取物，其特征在于，所述的三七皂苷礼和人参皂苷1^1重量比为135，人参皂苷Rh和人参皂苷Rd的重量比为351。5.根据权利要求4所述的三七总皂苷提取物，其特征在于，所述的三七皂苷礼，人参皂苷Rgi、人参皂苷Re的重量比为1350.41。6.根据权利要求4所述的三七总皂苷提取物，其特征在于，三七皂苷礼、人参皂苷Rgl的重量比为14，人参皂苷Rh和人参皂苷Rd的重量比为41。7.根据权利要求5所述的三七总皂苷提取物，其特征在于，人参皂苷Re、人参皂苷Rh和人参皂苷Rd的重量比为140.5。8.权利要求1至5任一所述的三七总皂苷提取物的制备方法，其特征在于，取三七总皂苷粗提物，上大孔吸附树脂柱；用去离子水洗脱，弃去洗脱液；用5%15%乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液；用3050%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥即得三七三醇组皂苷；继续用60%80%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩，干燥得三七二醇组皂苷；三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷混合，即得。9.权利要求6或7所述的三七总皂苷提取物的制备方法，其特征在于，取三七总皂苷粗提物，上大孔吸附树脂柱；用去离子水洗脱，弃去洗脱液；用5%15%乙醇溶液洗脱，弃去洗脱液；用3050%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥即得三七三醇组皂苷，所得三七三醇组皂苷上反相制备液相，用3050%乙醇洗脱，分别收集三七皂苷队，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re的洗脱液，分别干燥即得三七皂苷札，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re；继续用60%80%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩，干燥得三七二醇组皂苷；所得三七二醇组皂苷上反相制备液相，用6080%乙醇溶液洗脱，分别收集人参皂苷Rh和人参皂苷Rd的洗脱液，分别浓缩干燥即得人参皂苷Rh和人参皂苷Rd；三七皂苷礼，人参皂苷Rgl、人参皂苷Re按一定的比例配比得三七三醇组皂苷，人参皂苷Rh和人参皂苷Rd按一定的重量比配比得三七二醇组皂苷，三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷再按一定比例混合，即得。10.一种含有权利要求1至6任一所述的三七总皂苷提取物的制剂，其特征在于，含有治疗有效量的三七总皂苷提取物和医药上可接受的辅料。全文摘要本发明涉及一种三七总皂苷提取物及其制备方法，以及用该总皂苷制成的制剂及制剂的制备方法。该提取物包括三七三醇组皂苷和三七二醇组皂苷，三七三醇组皂苷中主要含有三七皂苷R1和人参皂苷Rg1，三七二醇组皂苷中主要含有人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd，其特征在于，三七三醇组皂苷与三七二醇组皂苷的重量比为1∶0.5～2，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Rd的总含量占三七总皂苷提取物的重量百分比80％以上。其制剂含有治疗有效量的三七总皂苷和医药上可接受的辅料。文档编号A61K36/258GK101829170SQ20101017121公开日2010年9月15日申请日期2010年5月13日优先权日2010年5月13日发明者刘启悦,宋华先,张占军,程宇,马红萍,黄海申请人:北京中海康医药科技发展有限公司