专利名称：3-乙氧羰基苯基-β-D-乙酰化糖苷治疗抑郁症的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及药物化学领域，具体而言，本发明涉及小分子酚型糖苷类化合物3-乙氧羰基苯基-β-D-酰化糖苷及其可药用盐、酯及其溶剂化物用于制备治疗抑郁症的用途。
背景技术：
抑郁症(expression)是情感性精神障碍(mood disorders)的主要类型，是一种 以显著而持久的心境低落为主要特征的综合征，临床表现为情绪低落、悲观、睡眠障碍等， 严重者常有自伤冲动或自杀念头。现在临床治疗抑郁症的首选药物为选择性5-HT再摄取抑制剂(selective serotonin reuptakeinhibitors, SSRIs),如氣西汀(fluoxetine)> 中白罗西汀 (paroxetine)、舍曲林(sertraline)和西酞普兰(citalopram)等，其特点是特异性阻断 5-HT再摄取，而对脑内其他神经递质受体亲和力很低，与一般经典的抗抑郁药相比毒副反 应较小；但其起效时间仍较长，且在临床试验中发现，在维持治疗期间使用SSRIs的病人 9-57%抑郁症状复发。参考文献见郑敏玲，黄翔宇，周敏等.广州市抗抑郁药的用药趋势及 发展[J].中国新药杂志.2003，12 (3) =224-226.随着抗抑郁西药副作用的显现及近年来人们“回归自然”理念的形成，研究者们愈 来愈重视从天然植物中寻找、研制和开发治疗抑郁症的理想药物。目前国外研究较多的是 金丝桃素-贯叶连翘提取物；国内研究者也证明许多复方、单方、植物有效成分对抑郁有治 疗作用。参考文献见袁长春，袁花.抗焦虑与抗抑郁的天然药物研究进展[J].中国民族民 间医药，药物研究篇.2009，22-25。但总的说来，目前临床应用的药物在药效、副反应控制、 成瘾性控制方面仍未能达到满意效果，需要进行进一步的研发和改进。
发明内容
本发明提出一种3-乙氧羰基苯基-β -D-乙酰化糖苷治疗抑郁症的用途，所涉及 的化合物3-乙氧羰基苯基-β -D-乙酰化糖苷是以小分子酚性糖苷天麻素和豆腐果苷为母 体衍生而得的结构类似物。所说的3-乙氧羰基苯基-β -D-乙酰化糖苷包括其可药用盐、酯或溶剂化物，它们 在制备用于治疗抑郁的药物中的用途；其中，糖基部分为羟基全乙酰化的任意吡喃糖或者 呋喃糖，代表化合物为3-乙氧羰基苯基-β -D-乙酰化木糖苷，自编号为ΧΗ016，化学结构式
如下
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该化合物为米色粒状结晶，无特殊气味。水、乙醇、二甲亚砜中完全溶解，甲醇中部 分溶解；乙醚中不溶。豆腐果苷(helicid，对甲醛基苯-Ο-β-D-阿洛吡喃糖苷)化学结构与天麻苷 (gastrodin，对羟甲基苯-Ο-β-D-吡喃葡萄糖苷)相似，其结构式见下图。该二种化合物
有类似的化学结构，都为β “型吡喃糖苷，区别在于糖基和官能团的不同。
<formula>formula see original document page 4</formula>关于天麻素和豆腐果苷抗抑郁作用的研究结果显示，该二化合物在小鼠抗抑郁模 型中体现了温和恒定的抗抑郁作用；安全有效，连续服用未发现中毒或其它副反应。其缺点 是起效缓慢、作用强度较弱、给药量较大、生物利用度较低等。参考文献见杨蓉，肖涵，戴晓 畅.豆腐果苷抗抑郁作用研究[J].中药药理与临床，2007 23(6) =22-23.、段玲燕，肖涵， 袁燕等.豆腐果苷抗抑郁作用的初步研究[J].中国实用医药.2008，10 (3) :107-108.、谢 笑天，李海燕，王强，郑萍.天麻化学成分研究概况[J].云南师范大学学报.2004，23 (3) 22-25.和段玲燕.以豆腐果苷为代表的小分子酚性单糖苷化合物抗抑郁活性筛选研究 [D],云南大学.2008。本发明以天麻素和豆腐果苷为参照，对其化学结构进行修饰，并对该类类似物的 神经药理活性进行筛选，得到了具有更好抗抑郁活性的结构类似物ΧΗ016。本发明提供了经过结构优化的小分子酚性糖苷化合物3-乙氧羰基苯基-D-乙 酰化糖苷用于制备治疗抑郁症疾病的药物的用途。本发明所述化合物用于治疗抑郁症，代表化合物3-乙氧羰基苯基-β -D-乙酰化 木糖苷(ΧΗ016)在两个抑郁行为模型上，KM种属小鼠单次灌胃给药45mg/Kg均体现出切实 的抗抑郁效果；其抗抑郁效果高于等量豆腐果苷。对小鼠自发活动的测定也表明，该有效剂 量点没有体现出干扰受试动物自发活动的效果。综上所述，XH016能成为有效的抗抑郁前药。目前，没有查到该化合物应用于抗抑郁治疗研究的报告。
图1是本发明中小鼠悬尾实验能体现抗抑郁活性的实验结果曲线。图2是本发明中小鼠强迫游泳实验能体现抗抑郁活性的实验结果曲线。图3是本发明中小鼠开野实验的实验结果曲线。
具体实施例方式具体药理实验如下一.受试药物名称3-乙氧羰基苯基- β -D-乙酰化木糖苷(ΧΗ016)。
受试化合物，由本研究自行合成提供，于受试前以混悬剂研磨混悬。二 .模型及对照药物盐酸丙米嗪(Imiprominehydrochloride, IMI)，Sigma 公司产品，货号(Lot) 105K1319 ；天麻素(Gastrodine，GAS)，昆明制药厂，批号200610036 ；豆腐果苷(Helicid，HEL)，云南玉溪万方天然药物有限公司产品，批号040701 ；混悬剂0. 02%羧甲基纤维素钠水溶液(CMC-Na)；空白溶剂为混悬剂。阳性对照药物丙咪嗪浓度均为7. 5mg/Kg，糖苷类药物浓度均 为45mg/Kg。给药体积均为20mL/Kg BW。三.实验动物KM(昆明种)小鼠，普通级，孓体重18 22g，由昆明医学院实验动物中心(昆明 医学院，赵家堆，昆明)提供，许可证号SCXK (滇)2008-2011。小鼠分笼饲养，每笼10只，除实验造模特殊要求外均自由饮水、进食，饲养室温 20 士 2°C，相对湿度60 士 10 %，保持12h/12h昼夜节律。每次实验小鼠均在适应实验室环境七天后用于实验，禁食不禁水18h后随机分为 空白对照组、阳性对照组和待测组，每组至少10只动物。四.数据统计处理采用SPSS 13. 0统计软件包作为统计工具，观测结果采用x 2检验(Chi-Square) 比较其组间差异；其余全部数据采用单因素方差分析(One-wayANOVA)，其中方差齐性者采 用Durmett法，方差不齐者采用Darmett's T3法检验组间差异的显著性。数据结果以平均 值士标准差( 士 s)表示，以P < 0. 05为有统计学意义，记为“*” ;Ρ < 0. 01为有极显著 意义，记为“**”。五·药物评价模型采用两个行为模型一小鼠悬尾模型(tail suspension test in mice，TST)和小 鼠强迫游泳模型(forced swimming test in mice, FST)对化合物XHO16的抗抑郁效果进 行验证。采用旷野模型进行了 XH016对动物体中枢神经不良反应的测试。实验在早晨8点 半至中午2点之间进行，每只动物只用一次。具体操作方法见下。A 小鼠悬尾实验(Tail suspension test in mice, TST)参考资料见 Steru L, Chermat R, Thierry B, Simon P. The tail suspension test :A new methodfor screening antidepressant activity in mice[J]. Psychopharmacology, 1985,85 :367_370o每组小鼠至少10只。受试药单次给药，小鼠按体重随机分组后，禁食16h，于开始 记录前lh，各组分别灌胃相应浓度的混悬溶剂或受试药混悬液，溶剂为0. 02% CMC-Na ；阳 性对照药IMI均于开始观察前30min单次腹腔注射给药，溶剂为20°C蒸馏水。实验时，使用医用胶布将小鼠尾在距尾尖约2cm处粘在自制悬尾箱的水平横杆上，使动物成倒挂状态，其头部离桌面约5cm，背向观测者以降低外界影响。实验观察6min， 记录并比较各组小鼠在后5min内的累计不动时间。当小鼠处于四肢无力，自然下垂，停止 活动2秒以上视为行为绝望状态计量。同时观测小鼠行为是否有异常表现(例如身体不正 常蜷缩、痉挛、嘶叫等)。
B 小鼠强迫游泳实验(forced swimming test in mice, FST)参考资料见 Porsolt R, Le pichon Μ, Jalfre Μ. Depression :a new method animal modelsensitive to antidepressant treatments[J] · Nature, 1977, 266 :730 禾口 龚梦娟，王立为，刘新民.大小鼠游泳实验方法的研究概况[J].中国比较医学杂志.2005， 15(5) 311-314.实验时将小鼠置于高30cm，直径18cm，水深IOcm的玻璃水缸中，水温26士 1°C，观 察小鼠6min，记录后4min内的累计不动时间。实验中，各组小鼠以黑色卡纸隔开互相视线以避免干扰，实验完毕后以热油汀烘 干小鼠后回笼。每组小鼠至少10只。受试药单次给药，小鼠按体重随机分组后，禁食16h，于开始 记录前lh，各组分别灌胃相应浓度的受试药或混悬溶剂，溶剂为0. 02% CMC-Na ；阳性对照 药IMI均于开始观察前30min单次腹腔注射给药，溶剂为20°C蒸馏水。
C 开野实验(open field test, OFT)參考 i K Barnett S. A. The rat :A study in behavior [M]. Chicago, IL Aldine,1966. > PorsoltRD. Behacious despair[M]. Enna SJ, Malick JB, Richelson E.Antidepressants Neurochemical, behavioural and clinical perspectives. New York. Raven Press. 1981 121]禾口 Prut L, Belzung C. Theopen field as a paradigm to measure the effects of drugs onanxiety-like behaviors -.a review [J]. Eur JPharmacol，2003，46(3) :3_33.自主活动实验属于行为学实验，是通过观察固定时间内实验动物在不受外界干扰 情况下的活动情况，从而检测实验动物行为正常与否的有效方法。本实验使用的小鼠自主活动测量箱为长40cm，宽40cm，高25cm的无上盖正方塑胶 箱，下底面划分为面积相等的25格。将单只小鼠放入自主活动测量箱，适应Imin后，记录5min内小鼠由底面中心开 始在方格中的穿越格数(locomotions，L0C0)，作为自主活动性的指标；每只小鼠实验完毕 后，都迅速清除排泄物，并用分析纯醋酸的1%。水溶液擦拭开野框底面，以免嗅迹对下一只 小鼠的行为产生干扰。六、实验结果1.小鼠悬尾实验与空白对照组小鼠相比，IMI(阳性药物)组小鼠悬尾不动时间显著缩短(P <0. 05)，说明模型成功。对于KM种小鼠，给药组(XH016)小鼠较空白对照组小鼠悬尾不动时间显著缩短(P <0.05)。这说明，在TST模型检测中，XH016在KM种小鼠悬尾实验中能体现抗抑郁活性。 KM种小鼠实验结果见附图1。2.小鼠强迫游泳实验与空白对照组小鼠相比，IMI(阳性药物)组小鼠游泳不动时间显著缩短(P <0.01)，说明模型成功。给药组(XH016)小鼠较空白对照组小鼠悬尾不动时间显著缩短(P < 0. 05)。这说 明，在FST模型检测中，XH016在不同种属小鼠中均能体现抗抑郁活性。KM种小鼠实验结果见附图2。3.小鼠自主活动实验_开野实验对XH016进行了 KM种种小鼠的开野实验研究，以确定该化合物是否具有中枢兴奋 或者中枢抑制作用。KM种小鼠实验结果见附图3。由图3可以看出，单次灌胃给予XH016对小鼠自发活动没有体现出影响。七、结论1. 3-乙氧羰基苯基-β -D-乙酰化木糖苷(ΧΗ016)在KM种小鼠单次灌胃给药情况 下，在悬尾和强迫游泳两个行为学模型中内均体现出较好的抗抑郁活性，抗抑郁效果优于 母体药物豆腐果苷；
2.对该化合物进行开野实验结果表明，ΧΗ016没有体现出中枢兴奋或者中枢抑制 作用，不反应较母体化合物豆腐果苷低。由此说明，该化合物可以制备成用于抗抑郁治疗的各种剂型的药物。
权利要求
一种3-乙氧羰基苯基-β-D-乙酰化糖苷治疗抑郁症的用途，所说的3-乙氧羰基苯基-β-D-乙酰化糖苷包括其可药用盐、酯或溶剂化物，它们在制备用于治疗抑郁的药物中的用途；其中，糖基部分为羟基全乙酰化的任意吡喃糖或者呋喃糖，代表化合物为3-乙氧羰基苯基-β-D-乙酰化木糖苷，结构式如下FSA00000127389600011.tif
全文摘要
一种3-乙氧羰基苯基-β-D-乙酰化糖苷治疗抑郁症的用途，所说的3-乙氧羰基苯基-β-D-乙酰化糖苷包括其可药用盐、酯或溶剂化物，它们在制备用于治疗抑郁的药物中的用途；其中，糖基部分为羟基全乙酰化的任意吡喃糖或者呋喃糖，代表化合物为3-乙氧羰基苯基-β-D-乙酰化木糖苷，其结构式如下，本发明所述化合物用于治疗抑郁症，代表化合物3-乙氧羰基苯基-β-D-乙酰化木糖苷(XH016)在两个抑郁行为模型上，KM种属小鼠单次灌胃给药45mg/Kg均体现出切实的抗抑郁效果；其抗抑郁效果高于等量豆腐果苷。对小鼠自发活动的测定也表明，该有效剂量点没有体现出干扰受试动物自发活动的效果。
文档编号A61K31/7034GK101829127SQ20101017542
公开日2010年9月15日 申请日期2010年5月18日 优先权日2010年5月18日
发明者戴晓畅, 李萍, 杨蓉, 肖涵 申请人:云南大学