专利名称：一种替莫唑胺冻干制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及的是一种替莫唑胺冻干制剂，属于药物化学技术领域。
背景技术：
# 貞 P坐月安(Temozolomide) ^ 由 Cancer Research Campaign ( ^ 国)/ Schering-Plough(美国)创制的一口服细胞毒性烷化剂抗肿瘤药，1999年首次在13个欧 洲国家和阿根廷、新西兰、美国、加拿大等国上市，用于治疗经常规治疗后病情出现发展或 复发的恶性神经胶质瘤及作为已转移的晚期黑素瘤的一线治疗药物；替莫唑胺的出现是治 疗恶性神经胶质瘤的一大进展。替莫唑胺(Temozolomide)化学名为3，4_ 二氢_3_甲基_4_氧代咪唑[5，l_d]并 1，2，3，5_四嗪-8-甲酰胺，化学结构式为 分子式C6H6N602分子量194.15替莫唑胺的合成是公知的，例如可参见Stevens et al.，J. Med. Chem，27， 196-201(1984) ；Wang et al.，J. Chem. Soc.，Chem. Commun.，1687-1688 (1994)；蔡霞，冯光 玲等，山东医药工业，第1页，22卷第4期(2003年)。替莫唑胺的溶解性为在水中微溶，在甲醇中极微溶解，在乙醇、丙酮或氯仿中几 乎不溶。替莫唑胺具有水中溶解性差、水溶液稳定差的缺点，给替莫唑胺注射制剂制备带来 了很大的难度。目前公开的文献报道对替莫唑胺注射制剂的研究主要有以下几个方面1、美国专利USP6251886中公开了一种以微粒化的悬浮液形式给药的替莫唑胺注 射剂，但因为该悬浮制剂容易导致血管堵塞，该制剂并不成功；2、中国专利CN200510014962. 3中公开了一种替莫唑胺冻干粉针剂，该制剂通过 调节PH和加热超声使替莫唑胺溶解，整个溶解配制过程时间长，这对替莫唑胺溶液的稳定 性是相当不利的，配制过程中会产生大量水解产物；另外所形成的冻干制剂复溶性差，溶液 澄清度不合格，该注射制剂的使用有质量安全隐患；3、中国专利CN03804363中公开了一种替莫唑胺冻干粉针剂，该制剂含有替莫唑 胺，以及至少一种足以溶解替莫唑胺的增溶剂，所述增溶剂是脲、L-组氨酸、L-苏氨酸、 L-天冬酰胺酸、L"丝氨酸、L"谷氨酰胺或它们的混合物。该冻干制剂方法虽然缩短了替 莫唑胺的溶解时间，一定程度上减少了主药的降解，增加了替莫唑胺溶液的稳定性；但该制 备方法存在溶解后形成的溶液易于析出固体，专利中采用将溶液放置一段时间后，再次过滤的方法来解决此问题，但此方法存在二次过滤使一部分主成分浪费、含量不稳定、操作繁 琐、时间长、易于染菌等诸多缺点，工业化生产难以实现和批量重复。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足之处，提供了一种替莫唑胺冻干制剂。本发明的替莫唑胺冻干制剂，每IOOml制剂中包括替莫唑胺1 2000mg、增溶剂 1 2000mg、聚山梨酯801 2000mg、甘露醇5 5000mg、缓冲剂1 2000mg、盐酸0. 5 IOOOmg和余量的水，其中所说的增溶剂选自L-丙氨酸、L-丙氨酸盐酸盐、L-亮氨酸、L-亮氨酸盐酸 盐、L-甲硫氨酸或L-甲硫氨酸盐酸盐；所说的缓冲剂选自枸橼酸、枸橼酸钠或枸橼酸钾。本发明的替莫唑胺冻干制剂的制备方法，包括下列步骤(1)先将增溶剂、聚山梨 酯80、甘露醇、缓冲剂和盐酸完全溶于注射用水，再将替莫唑胺溶于其中，调节PH至3.0 6. 0 ； (2)除菌过滤，灌装，冷冻干燥形成一种冻干制剂。优选地，除菌过滤中采用0. 22 μ m微孔滤膜或0. 22 μ m除菌滤球进行过滤除菌。上述制备方法中，冻干过程如下(1)冻结期将装载药瓶的盘子放入冻干箱预冻，温度为-50士5°C，时间为2 5 小时；(2)升华期药品冻结后，开启冷凝器，当冷凝器温度达_45°C时，开启真空系统， 给药品升温使药品温度保持在-20士5°C，时间至少6小时。(3)干燥期将药品逐渐升温至40°C，保温真空干燥6 8小时。本发明的制剂解决了冻干制剂溶解速度慢、复溶性差、操作繁琐、溶液澄清度不合 格的缺点，具有如下技术效果1)本发明的制剂，复溶性好，冻干制剂加水稍许振摇(1分钟之内)，固体即全部溶 解为澄清无色；经HPLC检测纯度和含量，纯度在99. 5%以上，单杂在0. 3%以下；该制剂经 稳定性考察试验，本品有关物质和含量未见明显变化，质量稳定；2)本发明的制剂可用于治疗恶性黑色素瘤、神经胶质瘤、多形性胶质母细胞瘤、淋 巴瘤、白血病等多种疾病，解决了该类疾病患者往往由于神智不清而拖延治疗时间的问题， 降低了口服制剂因剂量大引起的毒副反应，顺应了临床用药习惯，减轻了患者的痛苦。
具体实施例方式下面通过实施例来进一步说明本发明。应该正确理解的是本发明的实施例中的 方法仅仅是用于说明本发明而给出，而不是对本发明的限制，所以，在本发明的方法前提下 对本发明的简单改进均属本发明要求保护的范围。实施例1 制备注射用替莫唑胺冻干制剂(一 )制剂组成替莫唑胺250mgL-丙氨酸500mg聚山梨酯80400mg
1.5g
500mg
410mg
加水补足至100ml
甘露醇 枸橼酸钠 盐酸
注射用水 (二)制备方法
称取上述重量的L-丙氨酸、聚山梨酯80、甘露醇、枸橼酸钠、盐酸，加入80ml注射 用水中，搅拌约2分钟后，固体全部溶解澄清，加入处方量的替莫唑胺，搅拌约8min后，固体 全部溶解澄清，用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节PH至4. 0 ；加注射用水补足体积至100ml， 经0. 22 y m微孔滤膜除菌过滤，取20ml进行室温溶液放置试验，其他溶液分装于30ml西林 瓶中，每支分装10ml溶液，放入冻干箱，冷冻干燥形成一种冻干制剂。冻干过程如下(1)冻结将装载药瓶的盘子放入冻干箱预冻，温度为_45°C，时间为2小时；(2)升华药品冻结后，开启冷凝器，当冷凝器温度达_45°C时，开启真空系统，给 药品升温使药品温度保持在-20士5°C，时间6小时。(3)干燥将药品逐渐升温至40°C，保温真空干燥6小时。最后经压塞，关机，放入 滤过无菌空气出箱。对照例1 制备注射用替莫唑胺冻干制剂(参照中国专利CN2005100146962. 3方 法制备)(一 )制剂组成替莫唑胺冻干支撑剂(氯化钠)PH调节剂(盐酸)注射用水( 二)制备方法称取氯化钠5g，加入注射用水80ml，室温下搅拌至溶解，加入替莫唑胺400mg， 40°C水浴搅拌至替莫唑胺完全溶解，加水至100ml，用稀盐酸调节PH至3.0，用0. 22 y m微 孔滤膜过滤除菌，分装，冻干；冻干操作同实施例1。对照例2 制备注射用替莫唑胺冻干制剂(参照中国专利CN03804363. 7方法制
0. 01 2g 1 20g 适量 加水补足至100ml(一)制剂组成
替莫唑胺250mg
L-苏氨酸400mg
聚山梨酯80300mg
甘露醇1.5g
枸橼酸钠588mg
浓盐酸389mg
注射用水加水补足至100ml
(二)制备方法
称取处方量的L-苏氨酉1、聚山梨酯80、甘露醇、
、枸橼酸钠、盐酸，加入80ml注射用
5水中，搅拌约5分钟后，固体全部溶解澄清，加入处方量的替莫唑胺，搅拌直至固体全部溶 解澄清，加注射用水补足体积至IOOml，搅拌混合均勻，经0. 22 μ m微孔滤膜除菌过滤，溶液 放置8小时，再次通过0. 22 μ m微孔滤膜除菌过滤，将溶液分装于西林瓶中，每支分装IOml 溶液，放入冻干箱，冷冻干燥形成一种冻干制剂。
冻干过程同实施例1。实施例2 制备注射用替莫唑胺冻干制剂(一 )组成替莫唑胺IOOmgL-丙氨酸盐酸盐IOOmg聚山梨酯80IOOmg甘露醇0. 5g枸橼酸钾IOOmg盐酸50mg注射用水加水补足至IOOml(二)制备方法称取上述重量的L-丙氨酸盐酸盐、聚山梨酯80、甘露醇、枸橼酸钠、盐酸，加入 80ml注射用水中，搅拌至固体全部溶解澄清，加入处方量的替莫唑胺，搅拌至固体全部 溶解澄清，用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节PH至6.0 ；加注射用水补足体积至100ml，经 0. 22 μ m微孔滤膜除菌过滤，分装于30ml西林瓶中，每支分装IOml溶液，放入冻干箱，冷冻 干燥形成一种冻干制剂。冻干过程如实施例1。实施例3 制备注射用替莫唑胺冻干制剂(一)组成替莫唑胺IgL-亮氨酸盐酸盐800mg聚山梨酯80600mg甘露醇2g枸橼酸700mg盐酸300mg注射用水加水补足至IOOml( 二)制备方法称取上述重量的L-亮氨酸盐酸盐、聚山梨酯80、甘露醇、枸橼酸、盐酸，加入80ml 注射用水中，搅拌至固体全部溶解澄清，加入处方量的替莫唑胺，搅拌至固体全部溶解澄 清，用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节PH至6.0 ；加注射用水补足体积至100ml，经0. 22 μ m 微孔滤膜除菌过滤，分装于30ml西林瓶中，每支分装IOml溶液，放入冻干箱，冷冻干燥形成 一种冻干制剂。冻干过程如实施例1。实施例4 制备注射用替莫唑胺冻干制剂(一 )处方组成
替莫唑胺20gL-甲硫氨酸20g聚山梨酯8020g甘露醇50g枸橼酸钠20g盐酸10g注射用水加水补足至1000ml( 二)制备方法称取上述重量的L-甲硫氨酸、聚山梨酯80、甘露醇、枸橼酸、盐酸，加入800ml注射 用水中，搅拌至固体全部溶解澄清，加入处方量的替莫唑胺，搅拌至固体全部溶解澄清，用 盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节PH至4. 5 ；加注射用水补足体积至1000ml，经0. 22 y m微孔 滤膜除菌过滤，分装于30ml西林瓶中，每支分装10ml溶液，放入冻干箱，冷冻干燥形成一种 冻干制剂。冻干过程如实施例1。实施例5 制备注射用替莫唑胺冻干制剂(一 )处方组成名称替莫唑胺L-亮氨酸聚山梨酯80甘露醇枸橼酸盐酸注射用水(二)制备方法称取上述重量的L-亮氨酸、聚山梨酯80、甘露醇、枸橼酸钠、盐酸，加入800ml注射 用水中，搅拌至固体全部溶解澄清，加入处方量的替莫唑胺，搅拌至固体全部溶解澄清，用 盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节PH至5. 0 ；加注射用水补足体积至1000ml，经0. 22 y m微孔 滤膜除菌过滤，分装于30ml西林瓶中，每支分装10ml溶液，放入冻干箱，冷冻干燥形成一种
冻干制剂。
冻干过程如实施例1。
实施例6 制备注射用替莫唑胺冻干制剂
(一)制剂组成
替莫唑胺10g
L-亮氨酸10g
聚山梨酯8012g
甘露醇20g
枸橼酸8g
盐酸5g
投料量 15g 12g 10g 30g 10g 6g
加水补足至1000ml
注射用水加水补足至1000ml(二)制备方法称取上述重量的L-亮氨酸、聚山梨酯80、甘露醇、枸橼酸钠、盐酸，加800ml注射用 水中，搅拌至固体全部溶解澄清，加入处方量的替莫唑胺，搅拌至固体全部溶解澄清，用盐 酸溶液或氢氧化钠溶液调节PH至4. 6 ；加注射用水补足体积至1000ml，经0. 22 y m微孔滤 膜除菌过滤，分装于30ml西林瓶中，每支分装10ml溶液，放入冻干箱，冷冻干燥形成一种冻 干制剂。
冻干过程如实施例1。 实施例7 制备注射用替莫唑胺冻干制剂 (一)制剂组成
25g
替莫唑胺 L-甲硫氨酸盐酸盐
60g
50g 200g 60g
50g
加水补足至10000ml
聚山梨酯80
甘露醇 枸橼酸 盐酸
注射用水 (二)制备方法
称取上述重量的L-甲硫氨酸盐酸盐、聚山梨酯80、甘露醇、枸橼酸钠、盐酸，加入 8000ml注射用水中，搅拌至固体全部溶解澄清，加入处方量的替莫唑胺，搅拌至固体全部 溶解澄清，用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节PH至5. 0 ；加注射用水补足体积至10000ml，经 0. 22um除菌滤球除菌过滤，分装于30ml西林瓶中，每支分装10ml溶液，放入冻干箱，冷冻 干燥形成一种冻干制剂。
0134]冻干过程如实施例1。
0135]实施例8 制备注射用替莫唑胺冻干制剂
0136](一)制剂组成
0137]替莫唑胺25g
0138]L_ 丙氨酸50g 聚山梨酯80 甘露醇 枸橼酸 盐酸
注射用水 (二)制备方法
称取上述重量的L-丙氨酸、聚山梨酯80、甘露醇、枸橼酸钠、盐酸，加入8000ml注 射用水中，搅拌至固体全部溶解澄清，加入处方量的替莫唑胺，搅拌至固体全部溶解澄清， 用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节PH至4. 5 ；加注射用水补足体积至10000ml，经0. 22 y m除 菌滤球除菌过滤，分装于30ml西林瓶中，每支分装10ml溶液，放入冻干箱，冷冻干燥形成一 种冻干制剂。冻干过程如实施例1。
0139]
0140]
0141]
0142]
0143] 0144]
0145]
40g 150g 60g 40g
加水补足至10000ml
实施例9考察实施例1、对照例1、对照例2的制备过程中替莫唑胺的溶解速度，配 制过程中溶液的稳定性依照实施例1 8、对照例1、对照例2的冻干制剂制备方法，在溶液配制过程中考 察替莫唑胺固体的溶解速度，通过高效液相色谱法来检测溶液在放置0h、lh、2h、4h、8h后 的有关物质和澄清度变化情况；溶液澄清度检测方法为取本品，加水制成每Iml中含替莫唑胺2. 5mg的溶液，溶 液应澄清无色。如显浑浊，与标准浊度液比较(中国药典2005版二部附录)比较。研究结果如表1所示表1实施例1 8、对照例1、对照例2的制备过程中替莫唑胺的溶解速度以及配 制过程中溶液的稳定性对比
项时间 有关 澄清有关物澄清有关澄清有关物澄清有关物澄清 \__物质度 质 度 物质度 质度 质 度
实施例1 8min 0.07% 澄淸 0.25% 澄清 0.26% 澄清 0.28% 澄清 0.29% 澄清 实施例2 13min 0.05% 澄清 0.23% 澄清 0.26% 澄清 0.27% 澄清 0.29% 澄清 结论从以上研究结果可知，本发明的替莫唑胺冻干制剂(实施例1)的制备过程 中，加入的增溶剂L-丙氨酸可有效的加快替莫唑胺在溶液中的溶解速度，减少配制时间和溶液的存储时间，降低了主成分替莫唑胺的降解，有关物质较小；另外本发明所配制的溶液 在放置过程中明显比现有技术(对照例1、对照例2)的溶液稳定性好，澄清度好，有关物质 低，这对放大生产是相当有利的，因为批量生产时由于批量大，往往配制的溶液需要较长的 时间才能灌装完毕，本制备工艺解决了制备灌装过程中析晶和澄清度不合格的问题。实施例10考察实施例1 8、对照例1、对照例2制备的冻干制剂样品的稳定性依照实施例1 8、对照例1、对照例2制备所得的冻干制剂样品，该制剂进行高温 (40 °C )稳定性考察试验，本发明纯度和含量检测可参照以下标准方法照高效液相色谱法测定(中国药典 2005年版二部附录)。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂；0. 三乙胺溶 液(量取三乙胺1. 0ml加水至1000ml，用磷酸调pH至3. 0)-甲醇(85 15)为流动相，检 测波长为210nm。理论板数按替莫唑胺峰计算应不低于5000。取本品，加流动相制成每1ml中含0. 2mg的溶液作为供试品溶液；精密量取适量， 加流动相稀释制成每1ml含0. 002mg的溶液作为对照溶液。照含量测定项下的色谱条件， 取对照溶液20ul注入液相色谱仪，调节检测器灵敏度，使主峰峰高为满量程的20 25%， 保持灵敏度不变，分别取对照溶液和供试品溶液各20ul注入液相色谱仪。记录色谱图至主 成分峰保留时间的2倍。供试品溶液的色谱图上若显杂质峰，量取各杂质峰面积之和，不 得大于对照溶液的主峰面积(0. 6% )，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积1/2倍 (0. 2% )。取本品加流动相适量，振摇使溶解，加流动相稀释至刻度，摇勻，精密量取1ml，置 50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇勻，取20 yl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取替莫 唑胺对照品适量，加流动相溶解并制成每1ml含lOy g的对照品溶液，同法测定。按外标法 以峰面积计算，即得。研究结果如表2所示。表2实施例1 8、对照例1、对照例2制备的冻干制剂样品的稳定性实验结果 结论从以上研究结果可知，本发明一种替莫唑胺冻干制剂(实施例1)，有关物质 低，纯度高，在放置过程中，有关物质和含量未见明显变化，质量稳定。
权利要求
一种替莫唑胺冻干制剂，其特征在于，每100ml制剂中包括替莫唑胺1～2000mg、增溶剂1～2000mg、聚山梨酯801～2000mg、甘露醇5～5000mg、缓冲剂1～2000mg、盐酸0.5～1000mg和余量的水，其中所说的增溶剂选自L-丙氨酸、L-丙氨酸盐酸盐、L-亮氨酸、L-亮氨酸盐酸盐、L-甲硫氨酸或L-甲硫氨酸盐酸盐；所说的缓冲剂选自枸橼酸、枸橼酸钠或枸橼酸钾。
2.一种替莫唑胺冻干制剂的制备方法，其特征在于，包括下列步骤(1)先将增溶剂、 聚山梨酯80、甘露醇、缓冲剂和盐酸完全溶于注射用水，再将替莫唑胺溶于其中，调节PH至 3. 0 6. 0 ； (2)除菌过滤，灌装，冷冻干燥形成一种冻干制剂。
3.根据权利要求2所述的一种替莫唑胺冻干制剂的制备方法，其特征在于除菌过滤中 采用0. 22 μ m微孔滤膜或0. 22 μ m除菌滤球进行过滤除菌。
全文摘要
本发明提供了一种替莫唑胺冻干制剂，每100ml制剂中包括替莫唑胺1～2000mg、增溶剂1～2000mg、聚山梨酯801～2000mg、甘露醇5～5000mg、缓冲剂1～2000mg、盐酸0.5～1000mg和余量的水，本发明的制剂解决了冻干制剂溶解速度慢、复溶性差、操作繁琐、溶液澄清度不合格的缺点，具有如下技术效果本发明的制剂，复溶性好，冻干制剂加水稍许振摇，固体即全部溶解为澄清无色；经HPLC检测纯度和含量，纯度在99.5％以上，单杂在0.3％以下；该制剂经稳定性考察试验，本品有关物质和含量未见明显变化，质量稳定。
文档编号A61P35/00GK101869551SQ20101021201
公开日2010年10月27日 申请日期2010年6月28日 优先权日2010年6月28日
发明者宗在伟, 李谢, 赵俊, 魏佳 申请人:江苏奥赛康药业有限公司