专利名称：卡托普利在抑制瘢痕增生中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及的是卡托普利的一种新用途，具体地说是卡托普利应用在制备抑制瘢痕增生的治疗或预防药物中的新用途。
背景技术：
卡托普利(Captopril)，又称巯甲丙脯酸，即1_(3_巯基-2-D-甲基丙酰基)_L_脯
氨酸，结构为为白色或类白色结晶性粉末，有类似蒜的特臭，味咸，微溶于水，易溶于乙醇。卡托普利是最早应用于临床的血管紧张素转化酶抑制剂，随着对肾素一血管紧张素系统的深入研究，认识到血管紧张素不仅仅存在于血液循环中，而且还存在于各种组织，如血管、肾、 肾上腺、脑、垂体和子宫等，发挥着各种生理作用。自20世纪90年代问世以来.卡托普利已经从治疗高血压专用药物向治疗其它心血管疾病、肝硬化腹水、类风湿性关节炎、甲状腺机能亢进、特发性水肿等疾病的临床用药发展，并取得了良好的临床效果。以上结果均提示 ACE-I类药物在机体内有多方面的生物功能，其作用无法用降压来解释，抗高血压的作用仅是其作用的一部分。病理性瘢痕包括增生性瘢痕和瘢痕疙瘩，一直是整形外科乃至整个外科界研究的焦点问题之一，尽管已有大量研究结果表明，众多错综复杂的细胞因子和基因参与了病理性瘢痕的生成，但其明确的病因学机制至今仍不清楚，也没有一种普遍有效的临床治疗方法。然而，综合目前对于病理性瘢痕机制研究的结果，TGF-β 1细胞因子成为现今公认的瘢痕疙瘩生成机制中最为重要的因素之一。TGF-β 1不但能诱导自身和其他因子(TNF-a， IL-Ιβ，PDGF等)的表达，而且还可以使成纤维细胞活化、增殖并转化为肌成纤维细胞，促进纤维连接蛋白、糖蛋白和胶原等胞外基质成分的沉积。同时TGF-β 1还可以通过抑制胶原酶产生和增加MMP抑制物质(ΤΙΜΡ、ΡΑΙ、α -巨球蛋白)产生而抑制前胶原的降解，导致胶原沉积增加。近年来实验研究证实，卡托普利具有抑制TGF-β 1的作用。卡托普利针对心脏、肾脏及肝脏均具有良好的抗纤维化的功效。然而，当前针对病理性瘢痕作为皮肤的纤维化疾病的卡托普利的防治作用的相关研究及报道却少之又少。
发明内容
本发明的目的是针对上述新领域的研究方向提供卡托普利的一种新用途。
本发明的研究表明，卡托普利具有抑制瘢痕增生的作用，应用于制备治疗和/或预防瘢痕增生性疾病的药物中。具体的说，本发明所述的卡托普利在抑制增生性瘢痕的治疗和/或预防药物中的应用；在抑制瘢痕疙瘩的治疗和/或预防药物中的应用；所述卡托普利也可以做出凝胶，应用在尿道瘢痕性狭窄的治疗和/或预防；所述卡托普利制作成注射液应用于硅凝胶假体隆胸术后包膜挛缩的治疗和/或预防。在治疗和/或预防瘢痕增生性疾病时，以卡托普利为活性成分，以常规的制剂工艺，制备成临床上可以使用的各种不同剂型的药物。如乳膏、凝胶、注射液及各种外用制剂寸。本发明的研究表明，卡托普利能降低病理性瘢痕成纤维细胞胶原蛋白合成及分泌胶原蛋白能力，减弱成纤维细胞的增殖能力，下调TGF-β 1表达。卡托普利软膏对于病理性瘢痕具有良好的治疗或预防作用。本研究应用卡托普利对瘢痕疙瘩成纤维细胞进行干预，发现卡托普利对于成纤维细胞具有直接的抑制增生作用。将卡托普利制作成乳膏、凝胶或注射液，通过对病理性瘢痕进行探索性治疗后，表明成纤维细胞合成胶原蛋白含量减少及分泌胶原蛋白能力下降；同时一些与瘢痕疙瘩生成相关的重要细胞因子TGF-β 1发生了相应的下调表达。临床上通过对病理性瘢痕患者进行卡托普利乳膏外用，能有效减轻瘢痕的疼、痒等症状；瘢痕色泽变淡；显著降低瘢痕的高起皮肤表面的高度。通过对手术后患者伤口的预防性应用，未发现伤口部位出现病理性瘢痕发生。本发明具有以下优点1、治疗针对病理性瘢痕发病因素重要的细胞因子 TGF-β 1，具有特异性；2、采用霜剂等外用制剂，直接作用于瘢痕组织，故剂量小，疗效高，副作用小；3、卡托普利属于常规的心血管药物，具有价格便宜、工艺成熟、易得等特点，将其应用于抗纤维化治疗属于老药新用，有望成为临床上主要的瘢痕治疗和预防方法。
图1为卡托普利组TGF-β ImRNA表达于成纤维细胞胞质，胞质淡染(Χ200)图2为非卡托普利组TGF-β ImRNA表达于成纤维细胞胞质，胞质浓染(Χ200)图3为卡托普利组I型胶原表达，胶原含量少，排列整齐(Χ200)图4为非卡托普利组I型胶原表达，胶原含量多，排列紊乱(Χ200)
具体实施例方式以下实施例仅用于阐述本发明，而本发明的保护范围并非仅仅局限于以下实施方式。所述技术领域的普通技术人员依据以上本发明的公开内容，均可实现本发明的目的。卡托普利乳膏的制备基质按重量比硬脂酸4-10%，司盘1-2%，十八醇4-10%，液体石蜡6-12%，白凡士林4-10%配制溶液甲；吐温3-10%，甘油4-20%，山梨酸0. 2%，蒸馏水50-70%配制溶液乙。将甲、乙两液分别加热至80°C，将乙液缓缓加入甲液中，搅拌至近凝，得基质备用。按重量比将蒸馏水80-88%溶解卡托普利6-20%;在该溶液中加入等量基质，冷凝既得3-10%卡托普利乳膏。
实验例将上述实施方式中制得的卡托普利乳膏产品对不同情况病例实施所得实验结果如下实验例1 病理性瘢痕患者临床治疗应用选择整形外科医院就诊的病理性瘢痕患者30例，标本为烧伤后5-8个月病理性瘢痕需经整形手术治疗的标本，其中男性12例，女性18例；年龄17-39岁；瘢痕部位分别为耳垂、胸部、腿部。使用方法5%卡托普利乳膏外用瘢痕部位，3次/天，每次5-lOOmg/cm2。 使用后分别于0. 5小时、1小时、2小时监测血压；使用3个月后评定瘢痕治疗情况，分别为效果佳、改善、无效、严重。患者使用3-7个月后，未发生皮肤的过敏反应及其他不良反应， 未监测到血压明显波动情况。大体观察及组织学观察可见经卡托普利治疗的瘢痕色泽暗红，表面隆起，质地较软；而非卡托普利治疗的瘢痕颜色较红，表面粗糙，质地较硬。组织学观察可见经卡托普利治疗的病理性瘢痕胶原含量较少，排列整齐；而非卡托普利治疗的病理性瘢痕胶原含量多，排列紊乱。瘢痕评价结果为22例患者效果佳，8例效果改善。改善率 100%，明显改善率73. 3%。实验例2 术后患者预防性应用选择整形外科医院就诊的手术患者30例，针对伤口部位进行预防性应用。其中男性15例，女性15例，年龄6-33岁。使用方法5%卡托普利乳膏外用手术伤口部位，3次/ 天，每次5-lOOmg/cm2。使用后分别于0. 5小时、1小时、2小时监测血压；使用3_6个月后评定瘢痕治疗情况，分别为瘢痕增生严重、中度增生、无增生。患者使用3-7个月后，未发生皮肤的过敏反应及其他不良反应，未监测到血压明显波动情况。四例未发生瘢痕增生，1例患者伤口中度增生，继续使用3个月后出现症状改善。预防增生效果非常明显。实验例3 =MTT检测实验分为4组，KO代表对照组，KU K5、KlO分别代表药物浓度为1、5、10 μ g/L的实验组，MTT1-5分别代表5个瘢痕疙瘩样本的成纤维细胞。实验分组后，(1)用0. 25%胰蛋白酶消化细胞使其成为单细胞，用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液配成1X109细胞/L的单细胞悬液，将细胞接种于96孔培养板中，每孔100 μ L。(2)将培养板置C02孵箱中，在37°C 5% C02条件下，培养3 5天。(3)培养3 5天后，每孔加入MTT溶液(将 MTT按5mg/mL溶于0. 01mol/L, pH7. 2的PBS中，轻轻吹打至全部溶解，过滤除菌，4°C避光保存，保存时间一般不超过两周)10 μ L，继续置培养箱孵育3 6小时，终止培养，加10% SDS-HCl 100 μ L/孔37°C数小时，使细胞内和细胞周围的MTT颗粒充分溶解。(4)用酶联免疫检测仪测定各孔光吸收值(OD)，选波长490nm，在酶联免疫检测仪上测定各孔吸光度值。 数据表明药物对细胞生长有直接抑制作用，随着剂量增加，MTT数值下降(表1)。表1不同药物浓度的MTT值
权利要求
1.卡托普利作为制备治疗和/或预防瘢痕增生性疾病的药物中的应用。
2.如权利要求1所述的卡托普利的应用，其特征在于所述的疾病为增生性瘢痕。
3.如权利要求1所述的卡托普利的应用，其特征在于所述的疾病为瘢痕疙瘩。
4.如权利要求1所述的卡托普利的应用，其特征在于所述的疾病为尿道瘢痕性狭窄。
5.如权利要求1所述的卡托普利的应用，其特征在于所述的疾病为硅凝胶假体隆胸术后包膜挛缩。
全文摘要
本发明涉及了卡托普利在制备治疗和/或抑制瘢痕增生性疾病的应用。具体的说，所述的疾病为增生性瘢痕、瘢痕疙瘩、尿道瘢痕性狭窄和硅凝胶假体隆胸术后包膜挛缩。在治疗上述疾病时，以卡托普利为活性成分，以常规的制剂工艺，制备成临床上使用的各种不同剂型的乳膏、凝胶、注射液等。本发明的研究表明，卡托普利能降低病理性瘢痕成纤维细胞胶原蛋白合成及分泌胶原蛋白能力，减弱成纤维细胞的增殖能力，下调TGF-β1表达，对于病理性瘢痕具有良好的治疗或预防作用。同时，本发明具有直接作用于瘢痕组织，剂量小、疗效高、副作用小，原料工艺成熟、易得、价格便宜等优点，有望成为临床上主要的瘢痕治疗和预防药物。
文档编号A61P17/02GK102335167SQ20101023967
公开日2012年2月1日 申请日期2010年7月28日 优先权日2010年7月28日
发明者严笠, 刘学红, 庄洪兴, 潘博, 蒋海越, 郄淑燕 申请人:中国医学科学院整形外科医院