专利名称：从甜味绞股蓝中提取分离人参皂苷、黄酮、多糖的方法
技术领域：
本发明涉及一种天然产物提取工艺，特别是提取甜味绞股蓝中多种有效成分的工 艺。
背景技术：
Sf Πτ^^Ι^^,Gynostemma pentaphyllum(Thunb. )Makino ^J^|^f4Cucurbitaceae 绞股蓝属Gynostemma多年生草质藤本植物。目前，全世界有报道的甜味绞股蓝三个日 本的冲绳201、，中国的恩五叶蜜、恩七叶甜。其含人参皂苷5. 5%以上，多糖12%，黄酮 1%-4%,不仅就有很高的医药保健价值，还有工业提取价值。1976年日本人永井正博等在绞股蓝中分离得到了人参二醇和2α-羟基人参二 醇，首次揭示了绞股蓝中含有达玛烷(dammarane)型皂苷类成分。随后，人们对绞股蓝的 化学成分进行了大量的研究，迄今发现的绞股蓝皂苷136种，其中有绞股蓝皂苷(Gyp)III、 IV、VIII、VII与人参皂苷(Gin)-Rbl，-Rb3，-Rd和-F2完全相同，此外还分离得到了人参皂 Rd3，K，其余为人参皂苷的类似物。由于绞股蓝的产地不同，其中的皂苷成分和含量也有很 大的不同。覃章铮等曾经对1990年以前发现的84种皂苷成分进行过综述性报道。由于绞 股蓝皂苷具有较好的药理疗效，因此，对绞股蓝皂苷成分的研究一直是热点。1990年后，又 有52种绞股蓝皂苷被相继报道。根据苷元结构相近的程度，这52种皂苷分为11类。其母核上的糖苷键带有β -D-吡喃葡萄搪基，β -D-吡喃木糖基，α -L-吡喃鼠李 糖基，α-L-吡喃阿拉伯糖基等组成低聚糖并结合有β-D-来苏糖基，乙酰基，甲基，分子 550-1064。原有的84种皂苷分为6类，它们仅是与母核连接的基团和连接的低聚糖的种类数 有差别。新的绞股蓝皂苷在结构上有很大的差别。第1类、第4类、第5类、第6类、第7类、 第10类和第11类在二十位碳上成环，但是在其成环的类型上又存在着很大的差别。第11 类所成的环为含氧的双环。第1类、第4类、第6类、第7类和第10类所成的环为五元环，而 其中的第1类、第4类和第7类为含氧的五元环，第6类和第10类为不含氧的五元环，而且 即使在含氧的五元环中氧所在的位置也有所不同。第5类为含氧的六元环。此外，碳碳双 键的有无和位置也有很大的区别，第4类、第5类、第6类和第11类不含碳碳双键，其他的 几类都含有碳碳双键，第1类、第2类、第3类、第7类和第12类的碳碳双键在24和25位 碳上，第8类的碳碳双键在23和24位碳上，第9类和第10类的碳碳双键在25和26位碳 上。毒性研究表明，绞股蓝人参皂苷无毒无副作用，无三致，可大量长期使用，其含抗肿癌的 皂甙为15、21、22、33、34、55、Tashio，其对S-180肉瘤抑制率为87%，同时对肿瘤细胞有直 接杀灭作用，杀灭率高达91%，比抗癌西药“环磷酰胺”作用更明显；临床治疗肿癌、胃癌、 甲状腺癌有明显疗效；其含皂甙22、30、31、32、33、35、36、37、38、39、40、51，对胃溃疡、十二 指溃疡有明显治疗作用，其总皂苷是细胞活化剂，降血脂、血糖，平衡血压，延长离体细胞寿 命15. 7% -22. 7%，延长果蝇寿命53. 4% ；防治心肌梗塞和坏死；增强肝解毒功能和有促 肝细胞再生的能力，防治肝炎(能治疗空洞性肝炎)；清洗体液和血液，维持机体弱碱性，增
3强机体排毒功能，提高免疫力；增加胰腺NK细胞活力；防治糖尿病；防治胸腺和肾腺萎缩； 防止辐射；降低低密度蛋白和低密度脂肪、抑制30%脂肪合成、白嫩肌肤；并显著治疗失眠 和偏头疼；辅助治疗糖尿病、防治急慢性支气管炎；可改善睡眠，抗衰防老，益寿延年，抗血 栓、降血脂、抗溃疡、抗疲劳、增加机体耐缺氧、耐高温能力、对心肌梗塞及心肌缺氧再灌注 损伤的保护作用及防治糖皮质激素的副作用；并具镇静、增加记忆力、防治便秘，防治老年 痴呆症和提高药物疗效和降低药物毒性功效。目前绞股蓝人参皂苷在抗癌、提高免疫力、防 治心脑血管疾病，治疗气管炎、传染性肝炎、血压高、劳肌虚损以及防治神经、循环、血液、内 分泌、消化系统疾病、抗衰老、美容等方面广泛应用于临床。生产有片剂、针剂等具有降脂、 癌症防治、治疗心脑血管疾病、消化道疾病等多种医药品。近年研究发现绞股蓝有3种绞股蓝多糖GPS_2，GPS-3和GPS-4，并对其中的两种 GPS-2，GPS-3进行了深入的研究，确定了 GPS-2的分子量为10700Dal，GPS-3的分子量为 9100Dal。GPS-2成分中含有鼠李糖和木糖，GPS-3成分中含有鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、半乳 糖、果糖和葡萄糖。多糖具有抑制S-100肉瘤及艾氏腹水瘤等细胞生长的生物学效应，明显 促进肝脏蛋白质和核酸合成及骨髓造血功能，促进体细胞免疫和体液免疫功能。绞股蓝多 糖为水溶性多糖，临床具有提高免疫、抗癌、促进肺器官氧气吸收，增强并稳定肺器官血液 循环，增强肺器官排除淤滞、和毒素绞股蓝多糖抗肿瘤、对肝损伤有保护作用、提高免疫力、 抗癌功、降血糖、对质粒DNA有保护作用、对神经细胞谷氨酸损伤有保护作用、抗氧化。绞股蓝还含有黄酮类化合物(商陆素、芦丁、商陆苷及丙二酸等十多种黄酮类物 质)、有镇痛、抗氧化(抗衰老)、抗疲劳的作用。现代研究证明绞股蓝所含有效成分是生产畜禽抗变饲料最理想原料。之外，绞股蓝还含有萜类、有机酸、生物碱、多糖、蛋白质、鞣质、黏液质等以及锌、 铜、铁、锰、硒等微量元素。绞股蓝适合在我国西南地区生长和日本的冲绳地区生长。绞股蓝人参皂苷已开发 出国家二类新药，绞股蓝多糖、黄酮也已开发成药品和保健品在市场销售。对于绞股蓝多糖、黄酮生产提取技术，相关的专利文献有一种绞股蓝多糖的提取 方法CN03157680. X ；一种绞股蓝总人参皂苷的制取方法；CN03134505. 0 ；CN 03114470. 5 ； CN 03114471. 3 ；绞股蓝总苷的制备方法CN200610065788. X ；绞股蓝总皂甙的制备工艺 93105470. 2。非专利文献则较多主要是人参皂苷(覃洁萍等，中国现代应用药学杂志，2000， No. 3 ；李卫等，食品科学，2004，No. 11，等)；其次是绞股蓝多糖方面的相关文献(罗祖友等， 食品科学，2007，No. 1，等)；关于绞股蓝黄酮的研究报道不多(熊皓平等，中国食品学报， 2004，No. 3)。上述专利文献和非专利文献技术都不能很好的解决产品中残留和有效成分活性 降解，及达到低成本高收率高纯度连续快速提取分离绞股蓝多糖、黄酮、人参皂苷的先进技 术。
发明内容
本发明的目的是提供一种从甜味绞股蓝中提取分离人参皂苷、黄酮、多糖的方法。 本发明提供一种用去离子水替代有机溶剂；整个提取分离过程为常温和不超过50°C的物理提取分离干燥技术。针对当前提取甜味绞股蓝有效成分生产工艺中使用化学试剂提取和用大孔树脂 柱层析分离，成本高，生产周期长，产品中残留有害化学残基；高温提取，降低有效活性；提 取分离时间长，效率低；单一提取某一种生物活性成分，资源利用效益低等问题；采用物理 方法连续对同批原料提取分离多种成分的提取方法，获得甜味绞股蓝中人参皂苷、黄酮、多 糖3种生物活性成分，该方法低成本高、收率高、纯度高，大幅度缩短生产时间，产品绿色有 机，废弃物生产优质饲料精，生产过程环保，适合工业化连续生产，可实现甜味绞股蓝资源 的综合开发利用和经济效益的提高。本发明的技术方案是从甜味绞股蓝中提取分离人参皂苷、黄酮、多糖的方法，按 照如下步骤操作(一 )原料粉碎将甜味绞股蓝干全草粉碎至80-105目；( 二)除离子水浸润将粉碎的原料用离子水浸润2小时，甜味绞股蓝干全草与离 子水的重量比为1 4.5-5.5;(三)过滤空气加压机破壁用过滤空气加压机对浸润后的原料破壁，压力为 14-16MPa,时间14-16分钟，然后快速释放气体到0. 9-1. 1个大气压，让甜味绞股蓝原料的 细胞壁在很大的气压差下快速破壁；(四)超声波提取机低功率提取破壁原料在40°C-50°C温度条件下发射 19-21KHZ声波频率的超声波，时间14-16分钟，将甜味绞股蓝细胞壁和细胞内的人参皂苷 及多糖提取到在水中；(五)提取液ZTC1+1沉淀取ZTC1+1-II除杂剂，将A除杂剂用除离子水配成 0. 9-1. 浓度溶解23-25小时；将B除杂剂用0. 9-1. 醋酸水配成0. 9-1. 浓度溶解 23-25小时备用；提取液膜浓缩至1 4.5-5.5，加热至55-651，配好的4』澄清剂分别按 提取液质量4. 5-5. 5%用量，先B后A的次序加入提取液中，将提取液中色素、蛋白质、粘液 质、鞣质等胶质物和大分子物质完全吸附沉淀；(六)离心除杂提取液为澄清液后，把提取后的液体放入到离心机，以 15000-17000转/分钟速度除杂，除杂温度55-65°C，除杂时间各1. 4-1. 6小时，离心机转速 170-190转/分钟搅拌，残渣生产抗变饲料精；(七)超滤膜、纳滤膜、离子膜复合分离使用1.4-1. 6万分子超滤膜超滤分离出 多糖和人参皂苷、黄酮、氨基酸；将含有人参皂苷、黄酮、氨基酸的混合物用离子膜机除去氨 基酸和矿物离子；将含有人参皂苷、黄酮的混合物用390-410分子纳滤膜将人参皂苷与黄 酮分离开；(八)膜浓缩脱水使用脱水膜浓缩机，减压0.45-0. 55PMa，温度55_65°C分别将 含水的皂苷、黄酮、多糖浓缩到干物质含水量为9-11% ；(九)冷冻干燥将冷冻干燥机温度控制在-550C至-65 °C，减压到 0. 0014-0. 0016MPa，干燥人参皂苷、黄酮，多糖含水量为0. 7-0. 9%。本发明的创新点在于(一 )破壁-超声波_压榨联用提取，提取率高，提取时间短，减少试剂用量、降低 浓缩成本。使用自创的过滤空气加压破壁技术，使原料细胞壁在15分钟内完成100%破碎，利用超声波机在超声频率28KHz，超声峰值功率300W，温度50°C，提取24min，快速彻底将 细胞壁和细胞内的人参皂苷和多糖萃取并溶在水中并结合每次分离提取后的残渣进行压 榨，保证了热敏性的人参皂苷、多糖、黄酮在提取过程中不降解变性，提取出的人参皂苷和 多糖不降解，保持原有活性，在减少溶剂后能保证了人参皂苷、黄酮、多糖提取率分别达到 99%。因整个提取中用除离子水代替了传统的有机溶剂，大大降低了成本并避免了化学有 害残基在产品中的残留，提取生产成本减低2/3。(二)ZTC1+1吸附除杂联用离心除杂技术，无有害化学残留，成本低，除杂时间快。每吨干原料仅需400元就彻底除去大分子杂质色素、鞣质、蛋白质，黏液质。大大 降低除杂成本并为后续工艺膜分离顺利进行创造了很好的条件，克服了大孔树脂分离除杂 时间长并溶出大孔树脂合成物和使用化学试剂及成本高等缺点。克服了化学试剂萃取除杂 使用试剂大，增加产品有害化学残基及生产成本很高的缺点，除杂成本降低2/3。(三)创造性的实现了低成本、快速度，不用合成化学试剂，用物理方法分离出无 有害物的高纯度的甜味绞股蓝人参皂苷、多糖、黄酮产品。根据研究的提取纯化甜味绞股蓝人参皂苷、多糖、黄酮工艺流程研究参数，将储液 罐、空气加压破壁罐、超声波机、压榨机、离心除杂机、纳滤机、超滤机、膜浓缩机、反馈式离 子膜机、冷冻干燥机等设备整合设计成一条物理提取分离纯化甜味总人参皂苷、总多糖的 生产线。联用纳滤机、超滤机、膜浓缩机、反馈式离子膜机、冷冻干燥机设备技术连续低成本 的分别快速提取出高纯度人参皂苷、多糖、黄酮，实现了现代化物理分离高纯度人参皂苷、 总多糖、黄酮的创新生产技术，产品无化学残基，保持了生物活性，比传统工艺生产时间缩 短 2/3。生产出的未精制的人参皂苷产品提取率99%、收率91.9%、纯度92% ；多糖产品 提取率99 %、收率80 %、纯度82 %。黄酮产品提取率99 %、收率80 %、纯度80 %，比目前使 用生产工艺生产时间缩短100%，由原有工艺生产时间6天生产一批次产品缩短到3天生产 一批次产品，成本降低60 %以上。本提取分离工艺，用水代替了有机试剂，大幅度节省费用，防止了化学有害残基在 产品中残存，提高了中间体产品的安全性。提取分离浓缩干燥都采用低温物理方法，产品不 降解不变性，生产成本低，生产速度快，生产出的人参皂苷、黄酮、总多糖产品不仅达到绿色 有机出口标准并在防病保健功效显著。分离残渣因富含蛋白质(23% -25% )未被污染，可以生产抗变饲料精。不污染环 境，提高了产品的市场竞争力和公司的抗风险能力，保证产品质量并可满足国际市场的需 求。
具体实施例方式下面用最佳的实施例对本发明作详细的说明。实施例一从甜味绞股蓝中提取分离人参皂苷、黄酮、多糖的方法，按照如下步骤操作(1)将新鲜绞股蓝茎叶干燥、粉碎80目-100目作为提取原料；(2)原料粉末以 1 5料液(除离子水)比置储存罐常温20°C-30°C浸润2h。充分吸涨的材料置破壁罐升 温60°C，罐压控制15MPa，恒压时间15min放压破壁。(3)离心分离收集破壁液，残渣用压榨
6机榨干水分集并到离心分离收集的破壁液中。(4)干残渣加5倍(除离子水)，吸涨2h，置 超声波机超声频率28KHz，超声峰值功率300W，温度50°C提取24min。离心分离超声波机 提取液集并到离心分离收集的破壁液中，残渣用压榨机榨干水分集并到离心分离收集的破 壁液中。(5)干残渣加5倍(除离子水)，保温30°C并搅拌，50转/min，吸涨2h，离心分离 浸泡提取液集并到离心分离收集的破壁液中，残渣用压榨机榨干收集水分集并到离心分离 收集的破壁液中。(6)检验残渣中多糖、黄酮、人参皂苷含量，多糖、黄酮、人参皂苷的提取率 达到99%后(残渣烘干作为生产抗变饲料原料)。(7)提取的合并液置除杂罐中，加温到 75°C，取ZTC1+1-II除杂剂(配好的A、B澄清剂将A除杂剂用除离子水配成浓度溶解 24h ；将B除杂剂用1 %醋酸水配成1 %浓度溶解24h备用)。提取液膜浓缩至干材料1 5 除离子水，加热至75°C按提取液5%用量，先B后A的次序加入提取液中并不断搅拌，待提 取液变很透明时停止加温和搅拌，上离心机离心分离残杂(色素、蛋白质、粘液质、鞣质生 产饲料)，得透明总提取液。(8)透明液输入12万分子超滤膜超滤分除去少量杂质减压、干 燥，干燥器内夹层蒸汽工作压力0. 005MPa，干燥器内真空度真空度60KPa生产饲料和分离 出多糖、人参皂苷、黄酮、氨基酸、矿物离子混合液。(9)分离出的混合液输入2. 5万分子超 滤膜超滤分离出一部分多糖和人参皂苷、黄酮、氨基酸、矿物离子混合液。多糖置储存罐中。 (10)分离得到的混合液用2000分子超滤膜分离出小分子多糖和人参皂苷、黄酮、氨基酸， 矿物离子等混合液，多糖集并储存罐中，使用膜浓缩机，生产参数操作压力0. 3MPa，温度 60°C，浓缩到干物质水为1 10时，用冷冻干燥机干燥多糖，温度控制在-60°C，真空度 IOPa,干燥至浸膏时用精制粮食酒精95%沉淀多糖，收集酒精液，沉淀多糖75°C烘干含水 量8%得多糖产品；回收酒精得干燥物集并到混合液中。(11)混合液用450分子纳滤膜分 离出人参皂苷和黄酮、氨基酸，矿物离子混合液。人参皂苷使用脱水膜浓缩机浓缩，生产参 数操作压力0. 3(MPa)，温度60°C，浓缩到干物质水为1 10时，用冷冻干燥机干燥人 参皂苷，温度控制在-60°C，真空度10Pa，干燥含水量8%得人参皂苷产品。(12)混合液用 离子膜机分离出黄酮和氨基酸、矿物离子混合液，黄酮使用膜浓缩机浓缩，生产参数操作 压力0.3(MPa)，温度60°C，浓缩到干物质水为1 10时，用冷冻干燥机干燥黄酮，温度 控制在-60°C，真空度IOPa干燥含水量8%得黄酮产品。(13)氨基酸、矿物离子混合液减 压浓缩干燥，生产参数温度80°C，真空度60KPa，蒸馏水回收用于提取前干材料浸润，氨基 酸、矿物离子混合液浓缩液生产参生产饲料。实施例二(1)将新鲜绞股蓝茎叶干燥、粉碎200目-300目作为提取原料；(2)原料粉末以 1 5料液(除离子水)比置储存罐常温20°C-30°C浸润2h。充分吸涨的材料置破壁罐升 温60°C，罐压控制15MPa，恒压时间15min放压破壁。(3)离心分离收集破壁液，残渣用压 榨机榨干水分集并到离心分离收集的破壁液中。(4)干残渣加5倍(除离子水)，吸涨2h， 置超声波机超声频率28KHz，超声峰值功率300W，温度50°C提取24min。离心分离超声波 机提取液集并到离心分离收集的破壁液中，残渣用压榨机榨干水分集并到离心分离收集的 破壁液中。(5)检验残渣中多糖、黄酮、人参皂苷含量，多糖、黄酮、人参皂苷的提取率达到 99%后(残渣烘干作为生产抗变饲料原料)。(6)提取的合并液置除杂罐中，加温到75°C，取 ZTC1+1-II除杂剂(配好的A、B澄清剂将A除杂剂用除离子水配成浓度溶解24h ；将B 除杂剂用醋酸水配成浓度溶解24h备用)。提取液膜浓缩至干材料1 5除离子水，
7加热至75°C按提取液5%用量，先B后A的次序加入提取液中并不断搅拌，待提取液变很透 明时停止加温和搅拌，上离心机离心分离残杂(色素、蛋白质、粘液质、鞣质生产饲料)，得 透明总提取液。(7)透明液输入12万分子超滤膜超滤分除去少量杂质减压、干燥，干燥器内 夹层蒸汽工作压力0. 005MPa，干燥器内真空度真空度60KPa生产饲料和分离出多糖、人参 皂苷、黄酮、氨基酸、矿物离子混合液。(8)分离出的混合液输入2. 5万分子超滤膜超滤分离 出一部分多糖和人参皂苷、黄酮、氨基酸、矿物离子混合液。多糖置储存罐中。(9)分离得到 的混合液用2000分子超滤膜分离出小分子多糖和人参皂苷、黄酮、氨基酸，矿物离子等混 合液，多糖集并储存罐中，使用膜浓缩机，生产参数操作压力0. 3MPa，温度60°C，浓缩到 干物质水为1 10时，用冷冻干燥机干燥多糖，温度控制在-60°C，真空度10Pa，干燥至 浸膏时用精制粮食酒精95%沉淀多糖，收集酒精液，沉淀多糖75°C烘干含水量8%得多糖 产品；回收酒精得干燥物集并到混合液中。(10)混合液用450分子纳滤膜分离出人参皂苷 和黄酮、氨基酸，矿物离子混合液。人参皂苷使用脱水膜浓缩机浓缩，生产参数操作压力 0. 3 (MPa)，温度60°C，浓缩到干物质水为1 10时，用冷冻干燥机干燥人参皂苷，温度控 制在-60°C，真空度10Pa，干燥含水量8%得人参皂苷产品。(11)混合液用离子膜机分离出 黄酮和氨基酸、矿物离子混合液，黄酮使用膜浓缩机浓缩，生产参数操作压力0. 3 (MPa)， 温度60°C，浓缩到干物质水为1 10时，用冷冻干燥机干燥黄酮，温度控制在-60°C，真 空度IOPa干燥含水量8%得黄酮产品。(12)氨基酸、矿物离子混合液作鱼塘饲料使用。实施例三(1)将新鲜绞股蓝茎叶干燥、粉碎200目-300目作为提取原料；(2)原料粉末以 1 5料液(除离子水)比置储存罐常温20°C-30°C浸润2h。充分吸涨的材料置破壁罐 升温60°C，罐压控制15MPa，恒压时间15min放压破壁。(3)离心分离收集破壁液，残渣用 压榨机榨干水分集并到离心分离收集的破壁液中。(4)干残渣加5倍除离子水，吸涨2h， 置超声波机超声频率28KHz，超声峰值功率300W，温度50°C提取24min。离心分离超声波 机提取液集并到离心分离收集的破壁液中，残渣用压榨机榨干水分集并到离心分离收集的 破壁液中。(5)检验残渣中多糖、黄酮、人参皂苷含量，多糖、黄酮、人参皂苷的提取率达到 99%。(残渣烘干作为生产抗变饲料原料)。(6)提取的合并液置除杂罐中，加温到75°C，取 ZTC1+1-II除杂剂(配好的A、B澄清剂将A除杂剂用除离子水配成浓度溶解24h ；将B 除杂剂用醋酸水配成浓度溶解24h备用)。提取液膜浓缩至干材料1 5除离子水， 加热至75°C按提取液5%用量，先B后A的次序加入提取液中并不断搅拌，待提取液变很透 明时停止加温和搅拌，上离心机离心分离残杂(色素、蛋白质、粘液质、鞣质生产饲料)，得 透明总提取液。(7)透明液输入12万分子超滤膜超滤分除去少量杂质减压、干燥，干燥器内 夹层蒸汽工作压力0. 005MPa，干燥器内真空度真空度60KPa生产饲料和分离出多糖、人参 皂苷、黄酮、氨基酸、矿物离子混合液。(8)分离得到的混合液用2000分子超滤膜分离出小 分子多糖和人参皂苷、黄酮、氨基酸，矿物离子等混合液，小分子多糖集并储存罐中，使用膜 浓缩机，生产参数操作压力0. 3MPa，温度60°C，浓缩到干物质水为1 10时，用冷冻干 燥机干燥多糖，温度控制在-60°C，真空度10Pa，干燥至浸膏时用精制的95%粮食酒精沉淀 大分子多糖和小分子多糖，收集酒精液，沉淀多糖75°C烘干得含水量8%多糖产品；回收酒 精所得浸膏集并到混合液中。(9)混合液用450分子纳滤膜分离出人参皂苷和黄酮、氨基 酸，矿物离子混合液。人参皂苷使用脱水膜浓缩机浓缩，生产参数操作压力0. 3 (MPa)J^度60°C，浓缩到干物质水为1 10时，用冷冻干燥机干燥人参皂苷，温度控制在-60°C， 真空度10Pa，干燥含水量8%得人参皂苷产品。(10)混合液用离子膜机分离出黄酮和氨基 酸、矿物离子混合液，黄酮使用膜浓缩机浓缩，生产参数操作压力0.3(MPa)，温度60°C， 浓缩到干物质水为1 10时，用冷冻干燥机干燥黄酮，温度控制在_60°C，真空度IOPa干 燥含水量8%得黄酮产品。(12)氨基酸、矿物离子混合液作鱼塘饲料使用。
以上实施例是本发明较优选具体实施方式
的一种，本领域技术人员在本技术方案 范围内进行的通常变化和替换应包含在本发明的保护范围内。
权利要求
从甜味绞股蓝中提取分离人参皂苷、黄酮、多糖的方法，其特征在于，按照如下步骤操作(一)原料粉碎将甜味绞股蓝干全草粉碎至80 105目；(二)除离子水浸润将粉碎的原料用离子水浸润2小时，甜味绞股蓝干全草与离子水的重量比为1∶4.5 5.5；(三)过滤空气加压机破壁用过滤空气加压机对浸润后的原料破壁，压力为14 16MPa，时间14 16分钟，然后快速释放气体到0.9 1.1个大气压，让甜味绞股蓝原料的细胞壁在很大的气压差下快速破壁；(四)超声波提取机低功率提取破壁原料在40℃ 50℃温度条件下发射19 21KHz声波频率的超声波，时间14 16分钟，将甜味绞股蓝细胞壁和细胞内的人参皂苷及多糖提取到在水中；(五)提取液ZTC1+1沉淀取ZTC1+1 II除杂剂，将A除杂剂用除离子水配成0.9 1.1％浓度溶解23 25小时；将B除杂剂用0.9 1.1％醋酸水配成0.9 1.1％浓度溶解23 25小时备用；提取液膜浓缩至1∶4.5 5.5，加热至55 65℃，配好的A、B澄清剂分别按提取液质量4.5 5.5％用量，先B后A的次序加入提取液中，将提取液中色素、蛋白质、粘液质、鞣质等胶质物和大分子物质完全吸附沉淀；(六)离心除杂提取液为澄清液后，把提取后的液体放入到离心机，以15000 17000转/分钟速度除杂，除杂温度55 65℃，除杂时间各1.4 1.6小时，离心机转速170 190转/分钟搅拌，残渣生产抗变饲料精；(七)超滤膜、纳滤膜、离子膜复合分离使用1.4 1.6万分子超滤膜超滤分离出多糖和人参皂苷、黄酮、氨基酸；将含有人参皂苷、黄酮、氨基酸的混合物用离子膜机除去氨基酸和矿物离子；将含有人参皂苷、黄酮的混合物用390 410分子纳滤膜将人参皂苷与黄酮分离开；(八)膜浓缩脱水使用脱水膜浓缩机，减压0.45 0.55PMa，温度55 65℃分别将含水的皂苷、黄酮、多糖浓缩到干物质含水量为9 11％；(九)冷冻干燥将冷冻干燥机温度控制在 55至 65℃，减压到0.0014 0.0016MPa，干燥人参皂苷、黄酮，多糖含水量为0.7 0.9％。
全文摘要
从甜味绞股蓝中提取分离人参皂苷、黄酮、多糖的方法，涉及一种天然产物提取工艺，特别是提取甜味绞股蓝中多种有效成分的工艺。本发明的技术方案是按照如下步骤操作(一)原料粉碎将甜味绞股蓝干全草粉碎至80-105目；(二)除离子水浸润；(三)过滤空气加压机破壁；(四)超声波提取机低功率提取；(五)提取液ZTC1+1沉淀；(六)离心除杂；(七)超滤膜、纳滤膜、离子膜复合分离；(八)膜浓缩脱水；(九)冷冻干燥，干燥人参皂苷、黄酮，多糖含水量为0.7-0.9％。本发明提供一种用去离子水替代有机溶剂，整个提取分离过程为常温和不超过50℃的物理提取分离干燥技术。
文档编号A61P35/00GK101961371SQ20101051273
公开日2011年2月2日 申请日期2010年10月20日 优先权日2010年10月20日
发明者刘金龙, 周大寨, 武芸, 毕文钢, 田国政, 肖强, 肖浩, 赵梅轩, 赵玉宏, 郑小江 申请人:刘金龙