专利名称：一种用于耐缺氧的药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于耐缺氧的药物组合物。
背景技术：
菊花系菊科植物Chrysanthemummorifoliumat. ) Tzvel的干燥头状花序。菊属 植物全世界有30余种，中国约17种，但栽培供药用的主要是菊花一种，药用类群经过长期 人工栽培选育和不同的生态环境，加之特殊的加工方法，形成了各具特色的药用品种，如滁 菊、毫菊、济菊、怀菊、杭菊、贡菊、祁菊、黄菊等。菊花的主要活性成分为挥发油和黄酮类成 分。已有研究表明菊花粗提物具有抗菌、抗炎、镇痛、抗病毒、抗衰老、抗肿瘤、抗诱变，增加 离体豚鼠心脏冠脉流量等多种药理作用。但是菊花总黄酮(总黄酮的含量不低于60%)作为 有效部位耐缺氧的药理活性未见报道。法菲规参为苋科(Amaranthaceae)法菲亚属(PfaffiaPedersen)植物，主要生长 于亚马孙河流域，1826年首次有植物学记载，有壮阳、镇静、抗肿瘤、治疗溃疡、风湿性关节 炎和降血糖等功效。法菲西含有多种氨基酸及维生素，微量矿物质包括铁、镁、钴、硅、锌 及高含量的锗，含有超过其干重11%的皂苷成分，包括法菲西酸(pfaffic acid)及其苷类 (如法菲西苷Pfaffosides A-F),三萜类(nortriperpene)及其苷类，脱皮留醇类激素 (如蜕皮甾酮 ecdysterone )、蕨甾酮(pterosterone )、足甾酮(podecdysone)、豆甾醇 (stigmasterol)、谷留醇(sitostero)及其苷类等。文献报道巴西人参粗提取物具有抗肿 瘤、壮阳、对血液系统的作用、抗炎、镇痛活等药理作用。但是，法菲规参总皂苷(黄酮含量不 低于70%)耐缺氧的药理活性未见报道。多种中药，如红景天、刺蒺藜、六月雪、人参、三七、玉葡萄根等的提取物可从抗氧 化、清除自由基多方面机制产生耐缺氧的作用，提示中药在不同层次、多靶点发挥耐缺氧的 作用特点，为进一步开发出具有耐缺氧作用的中药新药提供了新的思路。从文献上看，目前 中药有效成分耐缺氧的药理作用研究多采用单味中药有效部位，很少进行中药复方有效部 位的研究。但是临床上中药多以复方入药，因此开发出复方耐缺氧的有效部位组合，并进行 作用机制的研究，是今后中药新药研究的重要方向。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有明显耐缺氧作用的药物组合物。本发明所述药物组合物由菊花总黄酮和法菲亚参总皂苷按2 1的重量比配制而 成。上述菊花总黄酮有市售，也可采用常规的乙醇热回流提取，大孔吸附树脂纯化方 法自制，菊花总黄酮中总黄酮的含量不低于60% (UV法测定)，木樨草素-7-0-D-葡萄糖苷 不低于0. 3%(HPLC法测定)。上述法菲亚参总皂苷有市售，也可采用常规的乙醇热回流提取，大孔吸附树脂纯 化方法自制，其中总黄酮含量不低于70% (UV法测定)。
本发明将菊花总黄酮和法菲亚参总皂苷进行合理的配伍，使得两种有效成分协同 作用，能够延长小鼠耐缺氧时间，具有明显的耐缺氧作用。
具体实施例方式1.药物的制备
1.1菊花总黄酮的制备
取江苏产白白菊花，粉碎，加入10量70%乙醇回流提取2次(6倍，4倍)，每次2 小时，合并提取液，回收溶剂至相对密度为1. 2流浸膏，加水稀释成每毫升相当0. 2g生 药.过滤，滤液备用(测得总黄酮含量为15. 07mg.mL-l)经过预处理的DlOl大孔吸附树脂， 湿法装柱，装柱体积为IOOmL (湿重66g，干重18g)，径高比为1:8，精密吸取上柱液400mL 上柱，控制流速为6 mL/min。再分别用3倍柱体积量纯化水和1倍柱体积量的20%乙醇洗 脱杂质，控制流速为6 mL/min再用3倍柱体积量的60%乙醇洗脱菊花总黄酮，控制流速为 6 mL/min。收集洗脱液，减压浓缩，真空干燥至恒重，即得菊花总黄酮。总黄酮含量60%(UV 法测定)；木樨草素-7-0-D-葡萄糖苷0. 3%(HPLC法测定)。1. 2法菲亚参总皂苷的其制备
取国产法菲亚参粉碎过60目筛，加10倍量70%乙醇，热回流提取两次，每次1小时，提 取液放冷，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，加水稀释成0. 2g生药每毫升，此为上柱液。将处理过的大孔吸附树脂DlOl装入柱子，柱子径高比为1 :5，将三倍于树脂体积 的上柱液上柱，控制流速为每小时三倍树脂体积，再用三陪树脂体积量的去离子水洗脱杂 质后，再用三倍树脂体积量70%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液上离子交换树脂柱D941 (树体积 与前柱相同)，收集过柱液，再用70%乙醇洗脱至醋酐-浓硫酸反应呈阴性，合并过柱液和洗 脱液，减压浓缩，真空干燥至恒重，即得法菲亚参总皂苷，总皂苷含量70% (UV法测定)。1. 3将上述菊花总黄酮和法菲亚参总皂苷按2 1的重量比进行复配。1.4上述药物组合物每IOOmg中，含菊花总黄酮40. 2mg (相当于菊花原药材 1. 7g)，法菲规参总皂苷23mg (相当于法菲规参原药材0. 46g)。2、动物实验本发明所述药物组合物对小鼠常压耐缺氧的影响 2. 1实验动物
KM小鼠，雌雄各半，20-22g。由中国医学科学院实验动物研究所提供，合格证号SCXK (京)2005-0013。2. 2实验药品
本发明所述菊花总黄酮+法菲亚参总皂苷药物组合物。心得安(IOmg/片)，天津力生制药股份有限公司生产，批号0411015。2. 3 试剂
凡士林，天津市石油化学实验厂，批号071019。钠石灰，上海市纳辉干燥试剂厂，批号20040724。2. 4实验方法
动物及分组小鼠60只，雌、雄各半，按体重、性别随机分为6组，每组10只。分别设 空白对照组、组合物给药组、阳性对照药心得安50mg/kg组。组合物设四个剂量组。给药剂 量为 80 (53. 3+26. 7)mg/kg、40 (26. 7+13. 3) mg/kg、20 (13. 3+6. 7) mg/kg、10 (6.7+3.3)mg/kg。组合物在实验前用0. 9%的氯化钠配制成相应浓度的溶液，浓度分别为4. Omg/ml、 2. 0mg/ml、1.0mg/ml、0. 5mg/ml,心得安浓度为 2. 5mg/ml。按体重 0. 2ml/10g 腹腔给药，每 日一次，连续给药7天，空白对照组给予等体积的0. 9%氯化钠。于末次给药后0. 5h，取各组 体重相近小鼠各一只，作为同批检测动物。将小鼠迅速放入盛有15g钠石灰的250ml广口 磨口瓶内，每瓶一只(密封)，立即秒表计时，记录小鼠因缺氧而死亡时间。以最后一次张口 喘气为死亡时间，观察小鼠的存活时间，计算存活时间延长百分率[1]。存活时 间延长 百分率 =
给药组平均存活时111·对照组平均存活时间
对照组平均存活时间x 。
2. 5统计方法
实验数据以均数士标准差G±s )表示，组间比较采用t检验，显著水平以0. 05和 0. 01为标准。2. 6实验结果
组合物对小鼠常压耐缺氧的影响
药物腹腔给药7天，与空白对照组比较，其中80mg/kg延长小鼠常压耐缺氧时间，延 长率为20.88% (P<0.05)。心得安能够明显延长小鼠常压耐缺氧时间，延长率为70.83% (Ρ<0·01)。结果见表1。表1 对小鼠常压耐缺氧的影响([士^ ) (η=10)
权利要求
一种用于耐缺氧的药物组合物，其特征在于由菊花总黄酮和法菲亚参总皂苷按21的重量比配制而成。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于菊花总黄酮中总黄酮的含量不低于 60%，木樨草素-7-0-D-葡萄糖苷不低于0. 3%。
3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于法菲亚参总皂苷中总黄酮含量不低于70%。
4.权利要求1至3任意一项所述药物组合物在制备耐缺氧的药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种用于延长小鼠常压耐缺氧存活时间的药物组合物，由菊花总黄酮和法菲亚参总皂苷按21的重量比配制而成。上述菊花总黄酮中总黄酮的含量不低于60%(UV法测定)，木樨草素-7-O-D-葡萄糖苷不低于0.3%(HPLC法测定)。上述法菲亚参总皂苷中总黄酮含量不低于70%(UV法测定)。本发明能够延长小鼠常压耐缺氧时间，具有明显的耐缺氧作用。
文档编号A61K36/28GK101953870SQ201010514248
公开日2011年1月26日 申请日期2010年10月21日 优先权日2010年10月21日
发明者卞庆亚, 熊存全, 王宁, 王树树, 秦红兵, 罗崇念, 蔡红星 申请人:盐城卫生职业技术学院