专利名称：菊苣降糖有效部位的制备方法及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种菊苣中降糖有效部位的制备及其用途，具体的说是从毛菊苣中提 取的活性成分，作为治疗糖尿病药物及功能食品的用途。
背景技术：
菊苣按照中国药典，“菊苣”特指菊苣属植物毛菊苣(Cichoriumglandulosum Bioss. et Huet.)和菊苣(Cichorium intybus L.)。菊苣是一种用途广泛的植物，意大利 居民用菊苣叶做蔬菜沙拉，味美可口，除此之外，菊苣更多是具有很多药用价值。菊苣系维吾尔族习用药材，具有清肝利胆，健胃消食，利尿消肿的功效。用于湿热 黄疸，胃痛食少，水肿尿少。II型糖尿病是我国中老年人的常见慢性病。我国肥胖者中有30%患有2型糖尿 病。由于II型糖尿病和肥胖均属于与生活方式密切相关的多基因遗传性疾病，其发病机制 尚不十分明确。近来的研究表明，蛋白质酪氨酸磷酸酶lB(protein tyrosine phosphatase IB, PTP1B)可减弱胰岛素及瘦素信号转导，引起脂代谢异常，是导致胰岛素抵抗和肥胖的 关键环节；同时，实验证明，PTPlB小鼠即使在致肥胖饮食条件下也未出现胰岛素抵抗和肥 胖。由此引起人们对PTPlB抑制剂的广泛兴趣，PTPlB基因成为越来越引人注目的靶基因之 一。蛋白质酪氨酸磷酸化是细胞代谢、信号传导及细胞周期调控的重要调节步骤。PTPlB属 于蛋白质酪氨酸磷酸酶家族，该家族40余种磷酸酶都具有一个约240个氨基酸组成的同源 序列，位于酶催化活性部位，以跨膜受体样蛋白和胞内酶形式存在，催化蛋白质酪氨酸去磷 酸化反应。PTPlB通过对胰岛素受体激酶(insulin receptor kinase, IRK)或IRK活性片 段的磷酸化酪氨酸残基去磷酸化作用对胰岛素信号传导进行负调节。国外正在筛选PTPlB 抑制剂主要有两类一类是PTPlB的底物类似物-磷酸酪氨酸多肽；另一类是芳基磷酸盐 类小分子物质，但其还正在研发中，还没有用于II型糖尿病的临床治疗。钒酸钠虽为蛋白 酪氨酸酶(PTP)的有效抑制剂，但其不具有选择性，也只能用于体外研究。因此，非肽类、非 磷酸盐类PTPlB抑制剂的研究成为这一领域的热门。目前筛选PTPlB抑制剂最有效的策略 就是以PTP的活性部位为靶点，该研究用PTPlB的催化结构域进行抑制剂的筛选，以期获得 可用于临床的、有效的、特异性的抑制剂。本发明直接针对PTPlB靶点进行筛选。在国内外研究的已相当多的研究证实菊苣具有降血糖功能。北京中医药大学中药 学院研制了菊苣胶囊，张冰等发现菊苣胶囊对糖尿病复合高脂兔血糖血脂及血尿酸有一定 影响，作者采用四氧嘧啶静脉注射合高脂食饵的复台兔模型，观察菊苣胶囊对高血糖、高血 脂模型兔血搪、血脂及血尿酸的影响。结果发现，菊苣胶囊在连续口服培药时，可降低模型 动物第2周、第4周、第8周时空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇水平，表明菊苣经化学提取后 制成的胶囊剂可降低复合动物模型的血糖、血脂、血尿酸水平，具有改善代谢紊乱的多方面 作用。随后张冰又发现菊苣醇提取物对实验性高脂家兔的血液流变性有一定影响，作者 采用复合高血糖高血脂兔模型，观察菊苣醇提取物对血液流变性的影响，结果发现，菊苣醇提物能降低全血、血浆粘稠度；降低模型动物红细胞沉降速率及血沉方程K值。张冰还发现菊苣提取物对α香树脂醇对高糖高脂环境中家兔主动脉平滑肌细胞 膜微粘度及过氧化脂质有一定影响力，能明显降低高脂高糖模型细胞膜粘度、改善细胞流 动性，降低培养液中LPO含量，两者之间作用强度无明显差异。高云艳等采用四氧嘧啶高血糖模型大鼠、观察菊苣不同提取物对模型动物血糖、 血总胆固醇(TC)及总甘油三酯(TG)的影响。结果得出菊苣醇提物对模型降低血糖、血TC 及TG方面疗效优于水煮醇沉提取物。郑红梅等将菊苣降血糖和降血脂的有效部位进一步缩小，通过对大鼠药理实验， 发现菊苣正己烷提取物能降低四氧嘧啶大鼠血糖，对其胰岛素水平无显著影响，能降低高 血脂大鼠血清总胆固醇、总甘油三脂、低密度脂蛋白含量，并能显著降低其全血粘度、血浆 粘度、血浆纤维蛋白原含量。在菊苣胶囊的对血糖影响的机理方面，张冰初步探讨了菊苣胶囊防治糖尿病的作 用机理，他采用体内方法，通过对不同高血糖模型小鼠给药，实验结果发现，菊苣胶囊可显 著降低四氧嘧啶及肾上腺素模型小鼠血糖含量，同时升高肾上腺素模型小鼠肝糖原含量。 初步表明，菊苣胶囊降糖作用与胰外途径有关，尤其是与增加肝糖原含量、减少肝糖原分解 作用有关。郑红梅等从组织形态学上阐述了菊苣双降胶囊药理作用机理，她认为菊苣双降胶 囊能降糖作用与修复胰岛β细胞和胰外途径特别是促进肝糖原合成，抑制糖异性有关，另 外还推测，菊苣双降胶囊可能直接影响糖代谢，且其降糖作用与抑制肠道对葡萄糖的吸收 有关。张冰等在已证明菊苣提取物在降糖降脂和改善血液流变性以及对兔动脉平滑肌 细胞膜有良好的保护作用的基础上，又对模型动物血浆相关因子做了测试，他们得出结论 认为菊苣提取物能改善血浆多种细胞因子水平，减少高糖高脂等不良因素对血管壁壁的刺 激，对抗由高脂高糖导致的内皮素(ET)、血管性假血友病因子(Vwf)水平升高，调节前列环 素(PGI2)和血栓素(TXA2)的比值，维持正常舒缩状态，减少兔动脉平滑肌细胞异常增殖的 刺激，减少班块的形成，起到抗动脉粥样硬化的综合作用，进一步阐述了菊苣提取物药理作 用机理。刘小青等用小鼠高脂血模型证明不同剂量的菊苣提取物能明显降低高脂血症小 鼠的血清总胆固醇、总甘油三脂、一氧化氮和过氧化脂质水平，增强超氧化物歧化酶活性， 结论菊苣提取物能改善高脂饮食引起的高脂血症。萨翼等发现菊苣提取物Ν2还能降低该 模型小鼠血清中的黄嘌呤氧化酶。刘小青等又用与人类代谢类似的鹌鹑高尿酸血症模型 证明小剂量菊苣提取物能明显降低模型动物的血尿酸水平，菊苣提取物有明显的降尿酸作 用，但药理作用机制并未提及。而孔悦等初步探讨了其作用机理，他们通过用大、中、小不同 剂量菊苣提取物给药于高尿酸高甘油三酯血症的鹌鹑，相对于对照组，三个不同剂量组的 菊苣提取物能明显降低鹌鹑血清中的尿酸和甘油三脂含量，而对肾功能没有影响，证明菊 苣提取物对这种交互紊乱具有良好的调节作用，其药理作用具有多方面、多靶点的优势。最近又报道治疗2型糖尿病复方草药专利，这其中就包括菊苣提取物， R. Petlevski用该复方草药的用两种不同的工艺路线得到粗提物，同样的药材用60%醇水 冷浸28天，过滤，分成两份，一份冻干，得提取物1 ；另一份低压回收醇水，同样冻干，得提取物2，将提取物1和提取物2对四氧嘧啶诱导的非肥胖糖尿病小鼠进行实验，结果提取物2 相对于提取物1更能降低小鼠血清葡萄糖和果糖胺水平。以上主要阐述了菊苣提取物在降血脂降血糖及免疫调节生理活性，在国外，Zahra Amirghofran对菊苣的免疫调节生理活性也做了评价他的实验证明菊苣提取物在植物血 球凝集素(PHA)存在下能明显抑制淋巴细胞增殖。
发明内容
本发明目的在于，提供一种菊苣降糖有效部位的制备方法及其用途，该方法从菊 苣中采用有机溶剂提取，大孔树脂分离纯化获得降糖有效部位，并阐明其医学用途，经初 步的活性筛选试验证明通过本发明所述的方法获得的有效部位具有蛋白酪氨酸磷酸酶 (PTPlB)抑制剂作用，并通过动物实验证实具有降糖、降脂活性；该有效部位可用于在制备 治疗糖尿病的药物或保健品的应用及作为药物组合物的应用。本发明所述的菊苣降糖有效部位的制备方法，按下列步骤进行a、先用极性溶剂20-95%浓度的甲醇或乙醇水溶液或无水甲醇或无水乙醇，在温 度20°C -溶剂沸点的条件下提取菊苣地上部分；b、将步骤a提取物浓缩，用水或浓度1-20%甲醇或乙醇溶解分散，加入预先处理 好的大孔树脂柱，以水，10^,30^,95%的甲醇或乙醇溶液梯度洗脱，收集30-95%流出液 浓缩后即可得到具有降血糖活性的有效部位。步骤a提取时固液比为1 2-10。步骤b 所用的大孔树脂型号为 HPD600、HPD450、NKA-9、D201、D301、HPD300、AB-8。通过该方法获得的有效部位对蛋白质酪氨酸磷酸酶具有抑制作用。通过该方法获得的有效部位在制备治疗降血糖的药物的用途。通过该方法获得的有效部位作为制备治疗降血糖的保健品或者其他功能性食品 的用途。
具体实施例方式实施例1取菊苣地上部分10Kg，粉碎，置于50L提取罐，以浓度70%乙醇水溶液在室温下冷 浸提取6次，每次时间为M小时，固液比为1 2，合并提取液；将提取液放置旋转蒸发仪内减压浓缩，加入浓度1 %的乙醇水溶液溶解分散，加入 预先处理好的大孔树脂AB-8柱中吸附，再用水，浓度为10%，30%，95%的甲醇溶液梯度洗 脱，收集30-95%的流出液，浓缩后即可得到IlOg具有降血糖活性的有效部位。实施例2取菊苣地上部分4Kg，粉碎，置于50L提取罐，以浓度95%乙醇水溶液在温度20°C 下冷浸提取3次，每次时间为M小时，固液比为1 10，合并提取液；将提取液放置旋转蒸发仪内减压浓缩，加入水溶液溶解分散，加入预先处理好的 大孔树脂HPD600柱中吸附，再用水，浓度为10%，30%，95%的乙醇溶液洗脱，收集30-95% 的流出液，浓缩后即可得到具有35g降血糖活性的有效部位。实施例3
取菊苣地上部分10Kg，粉碎，置于50L提取罐，用无水乙醇提取，加热至溶剂沸点 提取3次，每次4h，固液比为1 4，合并提取液；将提取液放置旋转蒸发仪内减压浓缩，加入浓度10%的乙醇水溶液溶解分散，加 入预先处理好的大孔树脂D301柱中吸附，用水，浓度为10%，30%，95%的乙醇溶液梯度洗 脱，收集30-95%的流出液，浓缩后即可得到130g具有降血糖活性的有效部位。实施例4取菊苣地上部分^(g，粉碎，置于50L提取罐，用无水甲醇提取，加热至溶剂沸点提 取4次，每次证，固液比为1 7，合并提取液；将提取液放置旋转蒸发仪内减压浓缩，加入浓度5%的乙醇水溶液溶解分散，加入 预先处理好的大孔树脂柱NKA-9中吸附，用水，浓度为10%，30%，95%的乙醇溶液梯度洗 脱，收集30-95%的流出液，浓缩后即可得到60g具有降血糖活性的有效部位。实施例5取菊苣地上部分Ig，粉碎，置于50L提取罐，用浓度40%的乙醇的水溶液温度 70°C保温浸泡提取3次，每次他，固液比为1 5，合并提取液；将提取液放置旋转蒸发仪内减压浓缩，加入浓度20%的乙醇水溶液溶解分散，加 入预先处理好的大孔树脂HPD300柱中吸附，再用水，浓度为10%，30%，95%的乙醇溶液洗 脱，收集30-95%流出液，浓缩后即可得到40g具有降血糖活性的有效部位。实施例6取菊苣地上部分Ig，粉碎，置于50L提取罐，用浓度70%的乙醇水溶液温度40°C 保温浸泡提取3次，每次他，固液比为1 8，合并提取液；将提取液放置旋转蒸发仪内减压浓缩，加入浓度15%的乙醇水溶液溶解分散，加 入预先处理好的大孔树脂柱HPD450中吸附，再用水，浓度为10%，30%，95%的乙醇溶液梯 度洗脱，收集30-95%的流出液，浓缩后即可得到约43g具有降血糖活性的有效部位。实施例7取菊苣地上部分Ig，粉碎，置于50L提取罐，用浓度20%的甲醇水溶液温度60°C 保温浸泡提取3次，每次他，固液比为1 8，合并提取液；将提取液放置旋转蒸发仪内减压浓缩，加入浓度15%的乙醇水溶液溶解分散，加 入预先处理好的大孔树脂柱HPD450中吸附，再用水，浓度为10%，30%，95%的乙醇溶液梯 度洗脱，收集30-95%的流出液，浓缩后即可得到约26g具有降血糖活性的有效部位。实施例8 筛选实验筛选方法用对-硝基苯基磷酸二钠(pNPP)作为底物，以在阳性药物钒酸钠为 对照，利用酶标仪进行PTPlB酶抑制剂的高通量筛选，根据PTPlB水解pNPP的磷酸基团而 产生颜色反应来测定PTPlB的活性；酶反应体系组成如下缓冲液(50mM HEPES, pH 7. 3， IOOmM氯化钠，0. 牛血清白蛋白，和ImM 二硫代苏糖醇)，PTPlB融合蛋白，pNPP，PTPlB特 异抑制剂钒酸钠(100μ g/mL)；反应体系混勻后在37°C放置30rnin，加入IM氢氧化钠终止 反应，置比色仪上测定405波长条件下的吸收值(A)，测定结果减去本底值后计算酶活性。
权利要求
1.组合物，其包含选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合物、溶剂合物、可 药用盐、前药或复合物，抗真菌有效量的抗真菌剂，和可药用载体。
2.权利要求1的组合物，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为式(A)化合物及其水合物、 溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，
3.权利要求2的组合物，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自
4.权利要求2的组合物，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自
5.权利要求2的组合物，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自或其水合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物。
6.权利要求2的组合物，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为式(B)化合物
7.权利要求2的组合物，其中所述抗真菌剂抑制麦角留醇合成途径中的步骤。
8.权利要求2的组合物，其中所述抗真菌剂为唑。
9.权利要求2的组合物，其中所述抗真菌剂选自酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康唑、 泊沙康唑和雷夫康唑。
10.权利要求2的组合物，其中所述抗真菌剂为丁苯吗啉或特比萘芬。
11.选择性敏化有效量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合物、溶剂合物、可药用盐、前 药或复合物在制备用于选择性敏化真菌细胞对抗真菌剂的药物中的用途，其中所述选择性 敏化有效量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物与抗 真菌有效量的抗真菌剂协同作用。
12.权利要求11的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为选自式(A)化合物及其水 合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，和式(B)化合物及其水合物、溶剂合物、可药用 盐、前药或复合物的化合物，
13.权利要求11的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自
14.权利要求11的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为
15.权利要求11的用途，其中所述抗真菌剂为唑。
16.权利要求11的用途，其中所述抗真菌剂选自酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康唑、 泊沙康唑和雷夫康唑。
17.权利要求11的用途，其中所述抗真菌剂为丁苯吗啉或特比萘芬。
18.权利要求11的用途，其中敏化真菌细胞对抗真菌剂包括抑制麦角留醇生物合成。
19.权利要求18的用途，其中抑制麦角留醇生物合成包括抑制ERGl或ERG11。
20.权利要求11的用途，其中敏化真菌细胞对抗真菌剂包括抑制多药物转运蛋白的合成。
21.权利要求20的用途，包括抑制选自⑶Rl和⑶R2的基因的合成。
22.权利要求11的用途，其中所述真菌细胞在人中。
23.权利要求22的用途，包括向人给药组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合物、溶剂合物、 可药用盐、前药或复合物，和抗真菌剂或其组合物。
24.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或权利要求1的组合物在制备用于选择性增强抗 真菌剂抵抗真菌细胞的活性的药物中的用途。
25.权利要求M的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为选自式(A)化合物及其水 合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，和式(B)化合物及其水合物、溶剂合物、可药用 盐、前药或复合物的化合物，
26.权利要求对的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自
27.权利要求对的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为
28.权利要求M的用途，其中所述抗真菌剂为唑。
29.权利要求M的用途，其中所述抗真菌剂选自酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康唑、 泊沙康唑和雷夫康唑。
30.权利要求对的用途，其中所述抗真菌剂为丁苯吗啉或特比萘芬。
31.权利要求对的用途，其中增强抗真菌剂的活性包括抑制麦角留醇生物合成。
32.权利要求31的用途，其中抑制麦角留醇生物合成包括抑制选自ERGl和ERGll的基因。
33.权利要求对的用途，其中增强抗真菌剂的活性包括抑制多药物转运蛋白的合成。
34.权利要求33的用途，其中抑制多药物转运蛋白的合成包括抑制选自CDRl和CDR2 的基因。
35.权利要求M的用途，其中所述真菌细胞在人中。
36.权利要求35的用途，包括向人给药抗真菌剂和组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或其组合物。
37.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或权利要求1的组合物在制备用于选择性抑制真 菌生长的药物中的用途。
38.权利要求37的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为选自式(A)化合物及其水 合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，和式(B)化合物及其水合物、溶剂合物、可药用 盐、前药或复合物的化合物，
39.权利要求37的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自
40.权利要求37的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为H或其水合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物。
41.权利要求37的用途，其中所述抗真菌剂为唑。
42.权利要求37的用途，其中所述抗真菌剂选自酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康唑、 泊沙康唑和雷夫康唑。
43.权利要求37的用途，其中所述抗真菌剂为丁苯吗啉或特比萘芬。
44.权利要求37的用途，其中抑制真菌生长包括抑制麦角留醇生物合成。
45.权利要求44的用途，其中抑制麦角留醇生物合成包括抑制选自ERGl和ERGl1的基因。
46.权利要求37的用途，其中抑制真菌生长包括抑制多药物转运蛋白的合成。
47.权利要求46的用途，其中抑制多药物转运蛋白的合成包括抑制选自CDRl和CDR2 的基因。
48.权利要求37的用途，其中所述真菌在人中。
49.权利要求48的用途，包括向人给药抗真菌剂和组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或其组合物。
50.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或权利要求1的组合物在制备用于选择性治疗被 至少一种传染性真菌单位感染的有机体中的真菌感染的药物中的用途。
51.权利要求50的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为选自式㈧化合物及其水 合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，和式(B)化合物及其水合物、溶剂合物、可药用 盐、前药或复合物的化合物
52.权利要求50的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自
53.权利要求50的用途，其中或
54.权利要求50的用途，其中所述抗真菌剂为唑。
55.权利要求50的用途，其中所述抗真菌剂选自酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康唑、 泊沙康唑和雷夫康唑。
56.权利要求50的用途，其中所述抗真菌剂为丁苯吗啉或特比萘芬。
57.权利要求50的用途，其中抑制真菌生长包括抑制麦角留醇生物合成。
58.权利要求57的用途，其中抑制麦角留醇生物合成包括抑制选自ERGl和ERGl1的基因。
59.权利要求50的用途，其中抑制真菌生长包括抑制多药物转运蛋白的合成。
60.权利要求59的用途，其中抑制多药物转运蛋白的合成包括抑制选自CDRl和CDR2 的基因。
61.权利要求50的用途，其中所述有机体为人。
62.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或权利要求1的组合物在制备用于选择性降低真 菌细胞对抗真菌剂的抗药性的药物中的用途。
63.权利要求62的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为选自式(A)化合物及其水 合物、溶剂合物、可药用盐、前药和复合物，和式(B)化合物及其水合物、溶剂合物、可药用 盐、前药和复合物的化合物
64.权利要求62的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自
65.权利要求62的用途，其中所述蛋白脱乙酰酶抑制剂为
66.权利要求62的用途，其中所述抗真菌剂为唑。
67.权利要求62的用途，其中所述抗真菌剂选自酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康唑、 泊沙康唑和雷夫康唑。
68.权利要求62的用途，其中所述抗真菌剂为丁苯吗啉或特比萘芬。
69.权利要求62的用途，其中降低真菌细胞对唑类抗真菌剂的抗性包括抑制麦角甾醇 生物合成。
70.权利要求69的用途，其中抑制麦角留醇生物合成包括抑制选自ERGl和ERGl1的基因。
71.权利要求62的用途，其中降低真菌细胞对抗真菌剂的抗性包括抑制多药物转运蛋 白的合成。
72.权利要求71的用途，其中抑制多药物转运蛋白的合成包括抑制选自CDRl和CDR2的基因。
73.权利要求62的用途，其中所述真菌细胞在人中。
74.权利要求73的用途，包括向人给药抗真菌剂和组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或其组合物。
75.抗真菌有效量的试剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合物、溶 剂合物、可药用盐、前药或复合物，或与权利要求1的组合物在制备用于选择性降低真菌细 胞中基因的抗真菌剂-依赖性上调的药物中的用途。
76.权利要求75的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为选自式(A)化合物及其水 合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，和式(B)化合物及其水合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物的化合物，
77.权利要求75的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自
78.权利要求75的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为
79.权利要求75的用途，其中所述抗真菌剂为唑。
80.权利要求75的用途，其中所述抗真菌剂选自酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康唑、 泊沙康唑和雷夫康唑。
81.权利要求75的用途，其中所述抗真菌剂为丁苯吗啉或特比萘芬。
82.权利要求75的用途，其中所述基因为选自在麦角留醇生物合成中涉及的基因和编 码多药物转运蛋白的基因。
83.权利要求82的用途，其中所述基因为ERGl或ERGll。
84.权利要求82的用途，其中所述基因为⑶Rl或⑶R2。
85.权利要求75的用途，其中所述真菌细胞在人中。
86.权利要求75的用途，包括向人给药抗真菌剂和组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或其组合物。
87.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或权利要求1的组合物在制备用于选择性抑制当 真菌细胞与抗真菌剂接触时抗真菌剂抵抗的真菌细胞的形成的药物中的用途。
88.选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合物、溶剂合物、可药用盐、前药 或复合物在制备药物中的用途，所述药物用于选择性抑制涉及在用唑处理真菌细胞期间， 真菌细胞中在麦角留醇生物合成中涉及的基因或编码多药物转运蛋白基因的表达。
89.权利要求80的用途，其中所述在麦角留醇生物合成中涉及的基因为ERGl或 ERGl1。
90.权利要求80的用途，其中所述编码多药物转运蛋白的基因为⑶Rl或⑶R2。
91.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或其组合物在制备用于选择性促进抗真菌剂对真 菌细胞的杀菌作用的药物中的用途。
92.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或其组合物在制备用于选择性增加抗真菌剂对真 菌细胞的抗生素后效应的药物中的用途。
93.式⑴的化合物
94.权利要求11-36和62-92中任一项的用途，其中所述真菌细胞为念珠菌属真菌细 胞、曲霉属真菌细胞、镰孢属真菌细胞、拟青霉属真菌细胞、根霉属真菌细胞、球孢子菌属真 菌细胞、丝孢酵母属真菌细胞或毛霉属真菌细胞。
95.权利要求37-49中任一项的用途，其中所述真菌生长为念珠菌属真菌生长、曲霉属 真菌生长、镰孢属真菌生长、拟青霉属真菌生长、根霉属真菌生长、球孢子菌属真菌生长、丝 孢酵母属真菌生长或毛霉属真菌生长。
96.权利要求50-61中任一项的用途，其中所述真菌感染为念珠菌属真菌感染、曲霉属 真菌感染、镰孢属真菌感染、拟青霉属真菌感染、根霉属真菌感染、球孢子菌属真菌感染、丝 孢酵母属真菌感染或毛霉属真菌感染。
97.权利要求11-36和62-92中任一项的用途，其中所述真菌细胞为选自下列真菌的真 菌细胞白色念珠菌、光滑念珠菌、克柔氏念珠菌、平滑假丝酵母、热带假丝酵母、烟曲霉、葡 萄牙假丝酵母、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉、淡紫色拟青霉、无根根霉菌或粗球孢子菌。
98.权利要求37-49中任一项的用途，其中真菌生长为选自下列真菌的真菌生长白色 念珠菌、光滑念珠菌、克柔氏念珠菌、平滑假丝酵母、热带假丝酵母、烟曲霉、葡萄牙假丝酵 母、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉、淡紫色拟青霉、无根根霉菌或粗球孢子菌。
99.权利要求50-61中任一项的用途，其中真菌感染为由选自下列真菌造成的真菌感 染白色念珠菌、光滑念珠菌、克柔氏念珠菌、平滑假丝酵母、热带假丝酵母、烟曲霉、葡萄牙 假丝酵母、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉、淡紫色拟青霉、无根根霉菌或粗球孢子菌。
100.选择性敏化有效量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合物、溶剂合物、可药用盐、前 药或复合物在选择性敏化真菌细胞对抗真菌剂中的用途，其中所述选择性敏化有效量的组 蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物与抗真菌有效量的抗 真菌剂协同作用。
101.权利要求100的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为选自式㈧化合物及其 水合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，和式(B)化合物及其水合物、溶剂合物、可药 用盐、前药或复合物的化合物，
102.权利要求100的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自
103.权利要求100的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为
104.权利要求100的用途，其中所述抗真菌剂为唑。
105.权利要求100的用途，其中所述抗真菌剂选自酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康 唑、泊沙康唑和雷夫康唑。
106.权利要求100的用途，其中所述抗真菌剂为丁苯吗啉或特比萘芬。
107.权利要求100的用途，其中敏化真菌细胞对抗真菌剂包括抑制麦角留醇生物合成。
108.权利要求107的用途，其中抑制麦角留醇生物合成包括抑制ERGl或ERG11。
109.权利要求100的用途，其中敏化真菌细胞对抗真菌剂包括抑制多药物转运蛋白的合成。
110.权利要求109的用途，包括抑制选自⑶Rl和⑶R2的基因的合成。
111.权利要求100的用途，其中所述真菌细胞在人中。
112.权利要求111的用途，包括向人给药组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合物、溶剂合 物、可药用盐、前药或复合物，和抗真菌剂或其组合物。
113.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或权利要求1的组合物在选择性增强抗真菌剂抵 抗真菌细胞的活性中的用途。
114.权利要求113的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为选自式㈧化合物及其 水合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，和式(B)化合物及其水合物、溶剂合物、可药 用盐、前药或复合物的化合物，
115.权利要求113的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自
116.权利要求113的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为
117.权利要求113的用途，其中所述抗真菌剂为唑。
118.权利要求113的用途，其中所述抗真菌剂选自酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康 唑、泊沙康唑和雷夫康唑。
119.权利要求113的用途，其中所述抗真菌剂为丁苯吗啉或特比萘芬。
120.权利要求113的用途，其中增强抗真菌剂的活性包括抑制麦角留醇生物合成。
121.权利要求120的用途，其中抑制麦角留醇生物合成包括抑制选自ERGl和ERGll的 基因。
122.权利要求113的用途，其中增强抗真菌剂的活性包括抑制多药物转运蛋白的合成。
123.权利要求122的用途，其中抑制多药物转运蛋白的合成包括抑制选自⑶Rl和 ⑶R2的基因。
124.权利要求113的用途，其中所述真菌细胞在人中。
125.权利要求124的用途，包括向人给药抗真菌剂和组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或其组合物。
126.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或权利要求1的组合物在选择性抑制真菌生长中 的用途。
127.权利要求1 的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为选自式㈧化合物及其 水合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，和式(B)化合物及其水合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物的化合物，
128.权利要求126的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自
129.权利要求126的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为
130.权利要求126的用途，其中所述抗真菌剂为唑。
131.权利要求126的用途，其中所述抗真菌剂选自酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康 唑、泊沙康唑和雷夫康唑。
132.权利要求126的用途，其中所述抗真菌剂为丁苯吗啉或特比萘芬。1
133.权利要求126的用途，其中抑制真菌生长包括抑制麦角留醇生物合成。
134.权利要求133的用途，其中抑制麦角留醇生物合成包括抑制选自ERGl和ERGll的 基因。
135.权利要求126的用途，其中抑制真菌生长包括抑制多药物转运蛋白的合成。
136.权利要求135的用途，其中抑制多药物转运蛋白的合成包括抑制选自⑶Rl和 ⑶R2的基因。
137.权利要求126的用途，其中所述真菌在人中。
138.权利要求137的用途，包括向人给药抗真菌剂和组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或其组合物。
139.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或权利要求1的组合物在选择性治疗被至少一种 传染性真菌单位感染的有机体中的真菌感染中的用途。
140.权利要求139的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为选自式㈧化合物及其 水合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，和式(B)化合物及其水合物、溶剂合物、可药 用盐、前药或复合物的化合物式(A)中R为烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基，优选环烷基、芳基、杂芳基或杂环基，这些基 团中任一种可以任选被取代；χ为0至5的整数，其中所述长度为χ的链任选被取代，且其中长度为χ的该链的一个 碳原子任选被杂原子所替代； η为0至2的整数；且 Y选自H和杂环基团；条件是当χ为4时，η不为2，且当χ为3时，η不为3 ；
141.权利要求139的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自
142.权利要求139的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为
143.权利要求139的用途，其中所述抗真菌剂为唑。
144.权利要求139的用途，其中所述抗真菌剂选自酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康 唑、泊沙康唑和雷夫康唑。
145.权利要求139的用途，其中所述抗真菌剂为丁苯吗啉或特比萘芬。
146.权利要求139的用途，其中抑制真菌生长包括抑制麦角留醇生物合成。
147.权利要求146的用途，其中抑制麦角留醇生物合成包括抑制选自ERGl和ERGll的 基因。
148.权利要求139的用途，其中抑制真菌生长包括抑制多药物转运蛋白的合成。
149.权利要求148的用途，其中抑制多药物转运蛋白的合成包括抑制选自⑶Rl和 ⑶R2的基因。
150.权利要求139的用途，其中所述有机体为人。
151.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或权利要求1的组合物在选择性降低真菌细胞对 抗真菌剂的抗药性中的用途。
152.权利要求151的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为选自式㈧化合物及其 水合物、溶剂合物、可药用盐、前药和复合物，和式(B)化合物及其水合物、溶剂合物、可药 用盐、前药和复合物的化合物
153.权利要求151的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自
154.权利要求151的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为
155.权利要求151的用途，其中所述抗真菌剂为唑。
156.权利要求151的用途，其中所述抗真菌剂选自酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康 唑、泊沙康唑和雷夫康唑。
157.权利要求151的用途，其中所述抗真菌剂为丁苯吗啉或特比萘芬。
158.权利要求151的用途，其中降低真菌细胞对唑类抗真菌剂的抗性包括抑制麦角甾 醇生物合成。
159.权利要求158的用途，其中抑制麦角留醇生物合成包括抑制选自ERGl和ERGll的基因。
160.权利要求151的用途，其中降低真菌细胞对抗真菌剂的抗性包括抑制多药物转运 蛋白的合成。
161.权利要求160的用途，其中抑制多药物转运蛋白的合成包括抑制选自⑶Rl和 ⑶R2的基因。
162.权利要求151的用途，其中所述真菌细胞在人中。
163.权利要求162的用途，包括向人给药抗真菌剂和组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或其组合物。
164.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或与权利要求1的组合物在选择性降低真菌细胞 中基因的抗真菌剂-依赖性上调中的用途。
165.权利要求164的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为选自式(A)化合物及其 水合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，和式(B)化合物及其水合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物的化合物，
166.权利要求164的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂选自
167.权利要求164的用途，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为或其水合物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物。
168.权利要求164的用途，其中所述抗真菌剂为唑。
169.权利要求164的用途，其中所述抗真菌剂选自酮康唑、伊曲康唑、氟康唑、伏立康 唑、泊沙康唑和雷夫康唑。
170.权利要求164的用途，其中所述抗真菌剂为丁苯吗啉或特比萘芬。
171.权利要求164的用途，其中所述基因为选自在麦角留醇生物合成中涉及的基因和 编码多药物转运蛋白的基因。
172.权利要求171的用途，其中所述基因为ERGl或ERGll。
173.权利要求171的用途，其中所述基因为⑶Rl或⑶R2。
174.权利要求164的用途，其中所述真菌细胞在人中。
175.权利要求164的用途，包括向人给药抗真菌剂和组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或其组合物。
176.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或权利要求1的组合物在选择性抑制当真菌细胞 与抗真菌剂接触时抗真菌剂抵抗的真菌细胞的形成中的用途。
177.选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合物、溶剂合物、可药用盐、前药 或复合物在选择性抑制涉及在用唑处理真菌细胞期间，真菌细胞中在麦角留醇生物合成中 涉及的基因或编码多药物转运蛋白基因的表达中的用途。
178.权利要求177的用途，其中所述在麦角甾醇生物合成中涉及的基因为ERGl或ERGl1。
179.权利要求177的用途，其中所述编码多药物转运蛋白的基因为⑶Rl或⑶R2。
180.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或其组合物在选择性促进抗真菌剂对真菌细胞的 杀菌作用中的用途。
181.抗真菌有效量的抗真菌剂与选择性且协同量的组蛋白脱乙酰酶抑制剂或其水合 物、溶剂合物、可药用盐、前药或复合物，或其组合物在选择性增加抗真菌剂对真菌细胞的 抗生素后效应中的用途。
182.权利要求100-125和151-181中任一项的用途，其中所述真菌细胞为念珠菌属真 菌细胞、曲霉属真菌细胞、镰孢属真菌细胞、拟青霉属真菌细胞、根霉属真菌细胞、球孢子菌 属真菌细胞、丝孢酵母属真菌细胞或毛霉属真菌细胞。
183.权利要求126-138中任一项的用途，其中所述真菌生长为念珠菌属真菌生长、曲 霉属真菌生长、镰孢属真菌生长、拟青霉属真菌生长、根霉属真菌生长、球孢子菌属真菌生 长、丝孢酵母属真菌生长或毛霉属真菌生长。
184.权利要求139-150中任一项的用途，其中所述真菌感染念珠菌属真菌感染、曲霉 属真菌感染、镰孢属真菌感染、拟青霉属真菌感染、根霉属真菌感染、球孢子菌属真菌感染、 丝孢酵母属真菌感染或毛霉属真菌感染。
185.权利要求100-125和151-181中任一项的用途，其中所述真菌细胞为选自下列真 菌的真菌细胞白色念珠菌、光滑念珠菌、克柔氏念珠菌、平滑假丝酵母、热带假丝酵母、烟 曲霉、葡萄牙假丝酵母、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉、淡紫色拟青霉、无根根霉菌或粗球孢子菌。
186.权利要求126-138中任一项的用途，其中真菌生长为选自下列真菌的真菌生长 白色念珠菌、光滑念珠菌、克柔氏念珠菌、平滑假丝酵母、热带假丝酵母、烟曲霉、葡萄牙假 丝酵母、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉、淡紫色拟青霉、无根根霉菌或粗球孢子菌。
187.权利要求139-150中任一项的用途，其中真菌感染为由选自下列真菌造成的真菌 感染白色念珠菌、光滑念珠菌、克柔氏念珠菌、平滑假丝酵母、热带假丝酵母、烟曲霉、葡萄 牙假丝酵母、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉、淡紫色拟青霉、无根根霉菌或粗球孢子菌。
全文摘要
本发明涉及一种菊苣降糖有效部位的制备方法及其用途，该方法从毛菊苣中采用有机溶剂提取，大孔树脂分离纯化获得降糖有效部位，并阐明其医学用途，经初步的活性筛选试验证明通过本发明所述的方法获得的有效部位具有蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)抑制剂作用，并通过动物实验证实具有降糖、降脂活性；该有效部位可用于在制备治疗糖尿病的药物或保健品的应用及作为药物组合物的应用。
文档编号A61P3/10GK102078356SQ20101059270
公开日2011年6月1日 申请日期2010年12月17日 优先权日2010年12月17日
发明者信学雷, 吴涛, 张尧, 杨伟俊, 赵海清, 阿吉艾克拜尔·艾萨 申请人:中国科学院新疆理化技术研究所