专利名称：一种舒筋活血片的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种中药制剂的检测方法，具体涉及一种舒筋活血片的检测方法，属于中药制药领域。
背景技术：
舒筋活血片由中药材红花、香附(制)、狗脊(制)、香加皮、络石藤、伸筋草、泽兰叶、 槲寄生、鸡血藤、自然铜(煅)按中成药合剂的常规工艺制备而成，产品有舒筋活络，活血散瘀的功效，用于治疗筋骨疼痛，肢体拘挛，腰背酸痛，跌打损伤等病症。舒筋活血片处方
红花80g、香附(制)300g、狗脊(制)400g、香加皮200g、络石藤300g、伸筋草300g、泽兰叶300g、槲寄生400g、鸡血藤300g、自然铜(煅)50g。制法以上以上十味，先将红花、香附、狗脊、香加皮粉碎成细粉，过筛，自然铜加水煎煮2小时，然后加入络石藤、伸筋草、泽兰叶、槲寄生、鸡血藤煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，静置，上清液浓缩成稠膏，加入上述粉末980g，淀粉49g，饴糖 147g制成颗粒，干燥，压制成3818片，即得。舒筋活血片标准WS3-B-2624_97中仅有显微鉴别，其专属性较差，且没有任何有效成分含量检测的方法，不能很好控制产品质量。
发明内容
针对现有检测方法存在的缺陷，本发明在原质量检测方法中增加了产品有效成分的鉴别和含量测定的方法，有效地解决了产品生产过程中质量控制问题。本发明是通过以下方法实现的
(1)采用薄层色谱法，以狗脊为对照药材，鉴别舒筋活血片中的狗脊药材；
(2)采用薄层色谱法，以4-甲氧基水杨醛为对照品，鉴别舒筋活血片中香加皮成分；
(3)采用高效液相色谱法，测定舒筋活血片中红花的主要成分羟基红花黄色素的含量。本发明的舒筋活血片的检测方法，其中鉴别方法包括以下步骤
(1)取舒筋活血片10片，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取狗脊对照药材2g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(2010年版药典附录VI B)试验，吸取供试品溶液l(^g、对照药材溶液4Pg，分别点于同一硅胶G薄层板上，使成条状，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(3 :5 :6 :1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以m三氯化铁溶液-1%铁氰化钾溶液(1:1)(临用配制)，放置至斑点显色清晰，在供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2 )取舒筋活血片10片，研细，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取4-甲氧基水杨醛对照品，加甲醇制成每Iml含Img 的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录VI B)试验，吸取上述二种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90°C )_乙酸乙酯-冰醋酸(20 3 :0. 5)为展开剂，展开，取出，晾干。喷以二硝基苯胼试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本发明的舒筋活血片的检测方法，其中含量测定包括以下步骤
对照品溶液的制备取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加25%甲醇制成每 Iml含0. 13mg的溶液；
供试品溶液的制备取舒筋活血片20片，研细，取约4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇50ml，称定重量，超声处量(功率300W，频率50KH) 40分钟，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液25ml ；
测定条件色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-0. 7%磷酸溶液(26:2 :72)为流动相；检测波长为403nm ；理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000 ；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μ1，注入液相色谱仪，测定，本品每片(每素片重0. 35g)含羟基红花黄色素A (C27H30O15)不得少于0. 05mg。含量测定方法的方法学考察
1、线性关系考察取羟基红花黄色素A对照品溶液(0.26(Mmg/mL)用甲醇配成质量浓度为 0. 05208，0. 10416，0. 1302，0. 20832 和 0. 26040mg/mL 的对照品溶液，注入液相色谱仪，按拟定的色谱条件进样，记录峰面积；以峰面积Γ Y)对进样量Γ乃进行线性回归，回归方程为:r 二 781224 J - 4582 , r = 0. 9999 ；结果表明在 1. 0416 5. 208 μ g 范围内，羟基红花黄色素A的峰面积与进样量有良好的线性关系。2、精密度试验精密吸取同一供试品溶液，在上述色谱条件下连续进样6次，测定峰面积，羟基红花黄色素A峰面积的RSD为0. 52 %( η = 6)。结果表明，本法精密度良好。3、重现性试验取同一批号样品6份，在上述色谱条件下进样，测定样品中羟基红花黄色素A峰面积，计算，结果样品中羟基红花黄色素A含量的RSD为0. 83 %( η = 6)。4、稳定性试验取同一供试品溶液，分别在0，2，4，6，8，12，24h精密吸取 IOyL，在上述色谱条件下进样，测定样品中羟基红花黄色素A峰面积，结果羟基红花黄色素A峰面积的RSD为1.05 %( η = 7)，表明供试品溶液在M h内具有良好的稳定性。5、回收率实验精密称定已知含量的样品6份，每份约2. 5g，分别精密加入羟基红花黄色素A对照品，在上述色谱条件下进行分析测定，计算回收率。结果羟基红花黄色素 A的平均回收率为98. 3 %，RSD为1.7 %。该测定方法经过方法学验证，阴性样品对测定无干扰。用本方法测定十批舒筋活
血片中羟基红花黄色素A的含量，结果如下
MM__itkM_
0901010.070906010.05
0901020.080909010.07
0902010.061003010.09
0902020.09 1003020.08 090401_0^06_100401_0. 06根据以上结果和原标准，规定本品每片(每素片重0. 35g)含羟基红花黄色素A (C27H30O15)计，不得少于 0. 05mg。
具体实施例方式实施例1
处方红花80g、香附(制》00g、狗脊(制)400g、香加皮200g、络石藤300g、伸筋草300g、 泽兰叶300g、槲寄生400g、鸡血藤300g、自然铜(煅)50g。制法以上十味，先将红花、香附、狗脊、香加皮粉碎成细粉，过筛，自然铜加水煎煮 2小时，然后加入络石藤、伸筋草、泽兰叶、槲寄生、鸡血藤煎煮二次，第一次3小时，第二次2 小时，合并煎液，滤过，静置，上清液浓缩成稠膏，加入上述粉末980g，淀粉49g，饴糖147g制成颗粒，干燥，压制成3818片，即得。舒筋活血片的质量检测方法为 鉴别
(1)取舒筋活血片10片，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液。另取狗脊对照药材2g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法(2010年版药典附录VI B)试验，吸取供试品溶液l(^g、对照药材溶液4Pg，分别点于同一硅胶G薄层板上，使成条状，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(3 561)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以m三氯化铁溶液-1%铁氰化钾溶液(1:1)(临用配制)，放置至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2 )取舒筋活血片10片，研细，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取4-甲氧基水杨醛对照品，加甲醇制成每Iml含Img 的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录VI B)试验，吸取上述二种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90°C )_乙酸乙酯-冰醋酸(20 :3:0. 5)为展开剂，展开，取出，晾干。喷以二硝基苯胼试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。含量测定
照高相液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)，色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-乙腈-0. 7%磷酸溶液(26:2 72)为流动相，检测波长为403nm，理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于 3000 ；
对照品溶液的制备取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加25%甲醇制成每 Iml含0. 13mg的溶液；
供试品溶液的制备取舒筋活血片20片，研细，取约4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇50ml，称定重量，超声处量(功率300W，频率50KH) 40分钟，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液25ml ；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，本品每片(每素片重0. 35g)含红花以羟基红花黄色素A (C27H30O15)计，不得少于0. 05mg。
权利要求
1.一种舒筋活血片的检测方法，其特征在于，包括产品有效成份的鉴别和含量测定。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，采用薄层色谱法鉴别产品中的狗脊、 香加皮成分，采用高效液相色谱法测定红花主要成分羟基红花黄色素的含量。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，鉴别方法包括以下步骤取舒筋活血片10片，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取狗脊对照药材2g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(2010年版药典附录VI B)，吸取供试品溶液l(^g、对照药材溶液4Pg，分别点于同一硅胶G薄层板上，使成条状，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(3 5 6 1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 2%三氯化铁溶液-1%铁氰化钾溶液(1 1 )，放置至斑点显色清晰，在供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
4.权利要求2的检测方法，其特征在于，鉴别方法包括以下步骤取舒筋活血片10片， 研细，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取4-甲氧基水杨醛对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录VI B)试验，吸取上述二种溶液各5μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90°C)-乙酸乙酯-冰醋酸(20 3 :0. 5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯胼试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
5.根据权利要求2所述的检测方法，其中含量测定包括以下步骤取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加25%甲醇制成每Iml含0. 13mg的溶液， 取舒筋活血片20片，研细，取约4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇50ml，称定重量，超声处量(功率300W，频率50KH) 40分钟，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液25ml，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μ1，注入液相色谱仪，测定，本品每片(每素片重0.35g)含羟基红花黄色素A (C27H3tlO15)计，不得少于 0. 05mgo
6.根据权利要求2所述的检测方法，包含如下步骤(1)取舒筋活血片10片，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取狗脊对照药材2g，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(2010年版药典附录VI B)，吸取供试品溶液l(^g、对照药材溶液4Pg，分别点于同一硅胶G薄层板上，使成条状，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(3 :5 :6 :1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以洲三氯化铁溶液-1%铁氰化钾溶液(1 :1)，放置至斑点显色清晰，在供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取舒筋活血片10片，研细，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；取4-甲氧基水杨醛对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录VI B)试验，吸取上述二种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90°C )_乙酸乙酯-冰醋酸 (20 3 0. 5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯胼试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加25%甲醇制成每Iml含0.13mg的溶液，取舒筋活血片20片，研细，取约4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇50ml，称定重量，超声处量(功率300W，频率50KH) 40分钟，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇勻，滤过，取续滤液25ml，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，本品每片(每素片重0.35g)含羟基红花黄色素A (C27H30O15) 计，不得少于0. 05mg。
全文摘要
本发明属于制药领域，涉及一种舒筋活血片中药制剂检测方法，特别涉及舒筋活血片的检测方法，所述检测方法采用薄层色谱法鉴别产品中的狗脊、香加皮，采用高效液相色谱法测定红花主要成分羟基红花黄色素的含量，本发明的检测方法速度快，准确性高，能有效控制舒筋活血片的质量。
文档编号A61K33/26GK102552616SQ20101061013
公开日2012年7月11日 申请日期2010年12月29日 优先权日2010年12月29日
发明者邹武斌 申请人:江西济民可信药业有限公司, 江西济民可信集团有限公司