专利名称：用于口腔护理体系的肽组合物的制作方法
技术领域：
本文提供肽基组合物、口腔护理体系、以及将微粒施用到口腔表面的方法。
背景技术：
牙齿的美容外观，对许多人来说非常重要。这些人通常期望“闪亮的”笑容和亮白的牙齿。遗憾的是，牙齿的表面颜色一般发暗，并且由于牙齿材料的吸收性质，会随时间而变色。牙齿颜色受内在因素如年龄和遗传，以及外在因素如使用多种食品、饮料、药物和烟草导致的变色等影响。甚至在进行定期刷牙和牙线洁齿的情况下，暴露于变色和褪色的物质可导致明显的变色。因此，需要快速并安全地增白牙齿的产品和方法。牙齿变色问题的一个解决方案是施用由瓷、复合材料或陶瓷制成的贴面。然而，施用贴面费用昂贵并且需要培训的牙科专业人员的帮助。可使用漂白剂增白牙齿。一些漂白剂的施用可能需要牙科专业人员(即，施用浓缩的氧化剂)的帮助和/或多次施用，并且可能达不到期望的增白程度。非处方漂白产品通常使用较低浓度的漂白剂，并且常常需要多次施用该产品以达到期望的效应。然而，使用漂白剂已经与若干个不期望的副效应相关联，包括化学烧伤、对牙龈的刺激和增加牙齿敏感度。也可使用增白着色剂增白牙齿。无毒着色剂通常是白色颜料或白色颜料与其它非白色颜料的组合以达到较“天然的”白色外观。然而，使用颜料微粒改善牙齿美容外观一般缺乏达到期望美容效应所需的耐久性。已经进行了各种尝试以提高牙齿增白剂的结合耐久性。授予Ibrahim等人的美国专利公开申请公布2005-0069501描述了使用硅氧烷粘合剂和增白微粒(羟基磷灰石粉末) 作为牙齿增白组合物。Shimako等人的PCT公开W02006/068011公开了牙齿增白组合物，其包含(A) —种或多种颜料，所述颜料选自二氧化钛、二氧化硅、氧化锌、氧化铝、氧化镁和氧化锆，(B)普鲁兰多糖，和(C)选自溶菌酶、阳离子纤维素和聚赖氨酸的一种或多种成分，其中组分(B)和(C)用于将金属氧化物粉末连结到牙齿表面上。无参考文献公开包含肽基试剂的牙齿增白体系，所述试剂包含对牙齿表面具有强亲和力的第一结合元件和能够非共价地结合到微粒有益剂的配体部分的第二结合元件，如白色颜料。共同拥有的美国专利7，220，405公开了与毛发、皮肤和指/趾甲以高亲和力结合的肽序列和肽基护发素以及毛发、皮肤和指/趾甲的着色剂。共同未决的和共同拥有的美国专利申请公布2005-0226839、2008-015洸00和2008-(^80810公开了通过生物淘选鉴定的若干个牙齿结合肽。除了使用颜料增白牙齿之外，还可以使用微粒向口腔表面递送多种其它有益剂。 非限制性实例可包括酶、抗斑剂、防污剂、抗微生物剂、防龋剂、调味剂、凉爽剂、或流涎齐U。
5因此，一般需要提供组合物和方法以提高施用于口腔表面(如牙齿表面)的微粒有益剂的耐久性。所要解决的问题是提供口腔护理体系、口腔护理肽和使用此类组合物用于肽介导的施用或将口腔护理有益效剂施用到口腔表面的方法。发明概述本文提供的是口腔护理体系、口腔护理肽、包含口腔护理肽的口腔护理组合物和将口腔护理有益剂施用到口腔表面的方法。本文提供的口腔护理体系包括(a)肽组合物，其包含(i)第一结合元件，其与口腔表面的亲和力具有10_5摩尔或更低的MB5tl值；和(ii)第二结合元件；和(b)包含微粒的组合物，所述微粒包含⑴有益剂；禾口(ii)配体部分(ligand property)；其中所述微粒具有在0. 01微米至10微米范围内的平均粒度；并且其中所述第二结合元件和配体部分非共价地或通过螯合而彼此缔合。在一个实施方案中，包含微粒的组合物是所述微粒的稳定分散体。在一些实施方案中，提供的口腔护理体系具有稳定分散体，其中所述稳定分散体是电荷稳定的。还提供了其中稳定分散体的zeta电位绝对值为至少25mV的体系。稳定分散体可为空间稳定的。稳定分散体可包含分散剂，如离子分散剂、非离子分散剂或它们的组合。在一个实施方案中，第二结合元件和配体部分之间的缔合是基于离子键的、基于氢键的、基于螯合的、基于生物亲和力的、基于静电的或它们的组合。在一个实施方案中，第二结合元件和配体部分选自生物素和亲和素、生物素和链霉亲和素、链霉亲和素标记和链霉亲和素、麦芽糖结合蛋白和麦芽糖、麦芽糖结合蛋白和淀粉酶、聚组氨酸标记和包含金属离子的亲和介质、谷胱甘肽S-转移酶和谷胱甘肽、表位标记和抗体、以及它们的组合。在另一个实施方案中，第一结合元件包含多个口腔表面结合肽，并且在一些方面， 多个口腔表面结合肽包含一种以上的相同口腔表面结合肽。在另一个实施方案中，口腔表面是牙齿表面，并且所述牙齿表面是釉质或表膜。在一些方面，第一结合元件对口腔表面的结合亲和力比它对微粒具有的结合亲和力更大。在另一个实施方案中，有益剂包含着色剂、增白剂、酶、抗斑剂、防污剂、抗微生物剂、防龋剂、调味剂、凉爽剂、流涎剂或它们的任意组合。在另一个实施方案中，有益剂为着色剂，并且所述着色剂可为颜料如TiO2。在一些方面，在分开的容器中提供肽组合物和微粒。在另一个实施方案中，口腔护理体系包含钛，所述钛具有的氨基酸序列选自SEQ ID NO :64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、 87、88、89、90、91、92、93、94、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、 110、111、112、113、114、115、120、121、122、123、125、126、127、128、129、130、131、132、133、 134、135、136、137、138、139、140、141、142、143 和 144。
在另一个实施方案中，口腔护理体系包含钛，所述钛具有的氨基酸序列选自SEQ ID NO :145、146、147、148、149、150 和 151。在另一个实施方案中，肽组合物包含钛，所述钛具有的氨基酸序列选自SEQ ID NO :161、162、163 和 166。在另一个实施方案中，肽组合物包括第二结合元件，所述第二结合元件具有的氨基酸序列选自 SEQ ID NO :116、117、119、152、153、154、155、156、157、165 和 168。本文提供了多钛，所述多钛包含的氨基酸序列选自SEQ ID NO :64、65、66、67、68、 69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、 94、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、 115、120、121、122、123、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、 139、140、141、142、143 和 144。在一个方面，提供了多钛，所述多钛包含的氨基酸序列选自SEQ ID NO :161,162, 163 和 166。还提供了包含一种或多种上述多肽的口腔护理组合物。本文还提供了将口腔护理有益剂施用到口腔表面的方法，所述方法包括(a)提供口腔护理体系，所述口腔护理体系包括(i)肽组合物，其包含(1)第一结合元件，其与口腔表面的亲和力具有10_5摩尔或更低的MB5tl值；和(2)第二结合元件；和(ii)包含微粒的组合物，所述微粒包含(1)有益剂；和(2)配体部分；其中所述微粒具有在0. 01微米至10微米范围内的平均粒度；并且其中第二结合元件和配体部分非共价地或通过螯合而彼此缔合；以及(b)使口腔表面与(a)的口腔护理体系接触，从而将所述有益剂施用到所述口腔表面。在本发明方法的一个实施方案中，使口腔表面首先与肽组合物接触，然后与包含微粒的组合物接触。在本发明方法的一个实施方案中，包含微粒的组合物是所述微粒的稳定分散体。 在一些实施方案中，稳定分散体是电荷稳定的。还提供了口腔护理体系和方法，其中所述稳定分散体的zeta电位绝对值为至少 25mV。稳定分散体可为空间稳定的。稳定分散体可包含分散剂，如离子分散剂、非离子分散剂或它们的组合。生物序列简述根据下面的发明详述和附带的序列描述可以更充分地理解本发明，下面的发明详述和所附的序列描述形成本申请的一部分。下列序列符合37C. F. R. 1. 821-1. 825 (“对含有核酸序列和/或氨基酸序列公开的专利申请的要求-序列规则”)，并且与世界知识产权组织(WIPO)标准ST. 25(1998)和EPO 和PCT的序列列表要求(规则5. 2和49. 5 (a-bis)，以及行政指导的208节和附录C)相一致。用于核苷酸和氨基酸序列数据的符号和格式遵循在37C. F. R. § 1.822中所列出的规定。
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结合肽的氨基酸序列。
结合肽的氨基酸序列。 的氨基酸序列。 面结合肽的氨基酸序列。
的肽组合物的氨基酸序列。124是二氧化硅结合肽的氨基酸序列。 :125-144是包含表膜结合肽的第一结合元件的氨基酸序列。 :145-151是设计用于静电结合到带负电的颜料上的表膜结合缀合物的氨基酸序列。SEQIDNO=152-157是第二结合元件的氨基酸序列c
SEQIDNO158是柔性的、不带电的肽接头的氨基醛 序列。
SEQIDNO159 是载体 pKSI (C4) E-HC77643 的核苷·睃序列。
SEQIDNO161是肽DenP03-C的氨基酸序列。
SEQIDNO162是肽DenP03-D的氨基酸序列。
SEQIDNO163是肽DEl 18的氨基酸序列。
SEQIDNO164是肽DEl 18的第一结合元件的氨基!睃序列。
SEQIDNO165是肽DEl 18的第二结合元件的氨基!睃序列。
SEQIDNO166是肽DElOl的氨基酸序列。
SEQIDNO167是肽DElOl的第一结合元件的氨基!睃序列。
SEQIDNO168是肽DElOl的第二结合元件的氨基!睃序列。
发明详沭本文提供了组合物、口腔护理体系、以及它们非共价地将微粒耦合到口腔表面的用途。本文所述的口腔护理体系包括有利于口腔表面和微粒之间相互作用的肽基组合物。在本公开中，使用了大量的术语和缩写。除非另外特别说明，下述定义适用。
如本文所用，在本发明的元件或组分之前的词语“一个”、“一种”和“所述”旨在表明元件或组分的实例(即出现的事物)数量为非限制性的。因此，应将“一个”和“一种”和 “所述”理解为包括一个(种)或至少一个(种)，并且元件或组分的词语单数形式也包括复数指代，除非该数字明显表示单数。 如本文所用，术语“包含”是指如权利要求中提及的所述特征、整数、步骤、或组分的存在，但不预先排除一种或多种其它特征、整数、步骤、组分或其组的存在或添加。术语“包含”旨在包括由术语“基本上由…组成”和“由…组成”涵盖的实施方案。类似地，术语 “基本上由…组成”旨在包括由术语“由…组成”涵盖的实施方案。如本文所用，用术语“约”修饰成分或反应物的数量时是指数值量的变化，该变化可能发生在例如典型的测量和用于制备浓缩液或实际使用溶液的液体处理程序中；这些程序中的偶然误差中；制造、来源、或用于制备组合物或实施方法的成分的纯度的差异中； 等。术语“约”还包括因特定起始混合物所产生的组合物的不同平衡条件而不同的量。无论是否通过术语“约”来修饰，权利要求包括量的等同量。当存在时，所有的范围均包括端值以及其中的组合。例如，当列出范围“1至5”时， 所列范围应视为包括范围“1至4”、“1至3”、“1-2”、“1-2和4-5”、“1-3和5”、等等。如本文所用，术语“ 口腔护理体系”指包括一种或多种肽试剂的体系，所述肽试剂有利于将微粒和包含微粒的组合物施用(即，非共价地结合)到口腔表面。在一个实施方案中，包含微粒的组合物是所述微粒的稳定分散体。口腔表面包括存在于口腔内的那些表面，包括软组织如牙龈、舌头和面颊。在一个实施方案中，口腔表面包括牙釉、羟基磷灰石、 牙齿表膜和表膜包被的羟基磷灰石。在一个优选的实施方案中，口腔表面包括牙釉或牙齿表膜。如本文所用，术语“ 口腔护理组合物”指包含口腔护理体系以及通常存在于口腔护理产品中的组分的组合物，所述组分如口部可接受的载体介质。本文涉及将微粒施用到口腔表面以在所述表面上产生期望效应。可将此类效应考虑为有益效果，因此该微粒包含“有益剂”。在一个实施方案中，有益效果是增白。在一个优选的实施方案中，微粒包含产生增白效应的有益剂。此类有益剂可为增白剂或着色剂。优选的着色剂包括颜料如Ti02。在一个实施方案中，有益剂可为包含TiA的微粒或包被二氧化硅的TW2微粒。如本文所用，术语“体系的肽基部分”指口腔护理体系的肽组分，所述口腔护理体系包括至少一种肽，其具有耦合到至少一种第二结合元件上的至少一种第一结合元件。在一个实施方案中，口腔护理体系的肽基部分包含共价耦合到第二结合元件上的第一结合元件。如本文所用，术语“肽组合物”指口腔护理体系的肽基部分。肽组合物优选地包含“第一结合元件”和“第二结合元件”。“第一结合元件”是缺乏骨架蛋白并缺乏免疫球蛋白折叠的单链肽。因此，第一结合元件不包括骨架蛋白、抗体、抗体片段(Fab)以及单链可变片段(scFv ；免疫球蛋白的重链(Vh)和轻链可变区融合)和单结构域羊驼抗体 (Muyldermans, S.，Rev. Mol. Biotechnol. (2001) 74 :277-302)。据一些实施方案的设想，第一结合元件和第二结合元件彼此共价连结。例如，就本文所述的或例示的某些实施方案而言，肽组合物是包括两个结合元件的直链肽，前提条件是第二结合元件不是生物淘选的肽。第一结合元件 如本文所用，术语“第一结合元件”指包含对口腔表面具有强亲和力的一种或多种口腔表面结合肽的直链肽。在一个实施方案中，第一结合元件包含多个口腔表面结合肽，如牙齿结合肽(例如选择的对牙釉和/或表膜具有强亲和力的肽)。 如本文所用，术语“ 口腔表面结合肽”指结合到口腔表面上的肽。在一个实施方案中，口腔表面结合肽是非天然存在的肽，其通过生物淘选展示库鉴定和/或获得。在另一个实施方案中，获取自生物淘选的两种或更多种口腔表面结合肽可组合形成第一结合元件。 组合两种或更多种口腔表面结合肽以形成较长的结合区域在本文可称为“结合域”。在一个实施方案中，口腔表面结合肽的长度为7个氨基酸至60个氨基酸，更优选地7个氨基酸至 25个氨基酸，最优选7个氨基酸至20个氨基酸。在一个优选的实施方案中，口腔表面肽是组合生成的肽。第一结合元件优选地包含通过生物淘选鉴定的一种或多种口腔表面结合肽。第一结合元件包含多个口腔表面结合肽，它们可为多个具有相同序列的肽或具有不同序列的肽的组合，其任选地被肽间隔区予以分开。在使用具有不同序列的多个肽的情况下，它们均可以被选择结合到相同的口腔表面(例如，所有表膜结合肽)。然而，也考虑加入结合到其它表面或基质的肽。在一些实施方案中，第一结合元件包含下文所述的至少一种“牙齿结合肽”。在一些实施方案中，第一结合元件包含单个口腔表面结合肽或由单个口腔表面结合肽组成。第一结合元件的长度可在7至600个氨基酸的范围内，优选地在14至600个氨基酸的范围内，更优选地在7至200个氨基酸的范围内，最优选地在14至200个氨基酸的范围内。应当理解，口腔表面结合肽包括“牙齿结合肽”，它是结合到牙齿表面上的肽。术语 “牙齿表面”指由牙釉(通常在专业的清洁或打磨后暴露出来)或牙齿表膜(包括唾液蛋白的获得性表面)构成的口腔表面。因此，也包括“表膜结合肽”或“釉质结合肽”。羟基磷灰石可涂覆有唾液糖蛋白以模拟天然牙齿表膜表面。如本文所用，术语“表膜”或“牙齿表膜”来源于唾液糖蛋白的薄膜(通常约20nm 至约200 μ m厚)，唾液糖蛋白在牙冠表面上形成。日常的刷牙往往仅移除一部分牙齿表膜表面，而研磨清洁牙齿和/或打磨(通常由职业牙医进行)将使更多的牙釉表面暴露出来。如本文所用，术语“釉质”和“牙釉”将指形成牙齿外层的高度矿化的组织。釉质层主要由结晶磷酸钙(即羟基磷灰石)与水和一些有机材料构成。牙齿结合肽的实例已经在共同未决的和共同拥有的美国专利公开申请公布 2008-0280810-A1中公开并在表A中提供。本文例示了附加的牙齿结合肽。^A 口腔表面结合肽的实例
权利要求
1.口腔护理体系，所述口腔护理体系包括(a)肽组合物，其包含(i)第一结合元件，其与口腔表面的亲和力具有10_5摩尔或更低的MB5tl值；和( )第二结合元件；和(b)包含微粒的组合物，所述微粒包含⑴有益剂；和( )配体部分；其中所述微粒具有在0. 01微米至10微米范围内的平均粒度；并且其中所述第二结合元件和所述配体部分非共价地或通过螯合而彼此缔合。
2.权利要求1的口腔护理体系，其中所述包含微粒的组合物是所述微粒的稳定分散体。
3.权利要求1或2的口腔护理体系，其中所述平均粒度通过光散射方法如激光衍射或动态光散射方法进行测量。
4.权利要求1的口腔护理体系，其中所述第一结合元件包含多个口腔表面结合肽。
5.权利要求1的口腔护理体系，其中所述口腔表面是牙齿表面。
6.权利要求5的口腔护理体系，其中所述牙齿表面是釉质。
7.权利要求5的口腔护理体系，其中所述牙齿表面是表膜。
8.权利要求1的口腔护理体系，其中所述第一结合元件对所述口腔表面的结合亲和力相对于其对所述微粒的亲和力更大。
9.权利要求1的口腔护理体系，其中第二结合元件和所述配体部分之间的缔合是基于离子键的、基于氢键的、基于螯合的、基于生物亲和力的、基于静电的或它们的组合。
10.权利要求9的口腔护理体系，其中所述第二结合元件和所述配体部分之间的缔合是基于螯合的。
11.权利要求10的口腔护理体系，其中所述第二结合元件是聚组氨酸标记。
12.权利要求9的口腔护理体系，其中所述第二结合元件和所述配体部分之间的缔合是基于静电的。
13.权利要求9的口腔护理体系，其中所述第二结合元件和所述配体部分选自生物素和亲和素、生物素和链霉亲和素、链霉亲和素标记和链霉亲和素、麦芽糖结合蛋白和麦芽糖、麦芽糖结合蛋白和淀粉酶、聚组氨酸标记和包含金属离子的亲和介质、谷胱甘肽S-转移酶和谷胱甘肽、表位标记和抗体、以及它们的组合。
14.权利要求13的口腔护理体系，其中所述亲和介质包括钴、铜、镍、锌、或它们的组合的金属离子。
15.权利要求1的口腔护理体系，其中所述有益剂包含着色剂、增白剂、酶、抗斑剂、防污剂、抗微生物剂、防龋剂、调味剂、凉爽剂、流涎剂或它们的组合。
16.权利要求15的口腔护理体系，其中所述着色剂是颜料。
17.权利要求16的口腔护理体系，其中所述颜料包含Ti02。
18.权利要求2的口腔护理体系，其中所述稳定分散体是电荷稳定的。
19.权利要求2的口腔护理体系，其中所述稳定分散体包含具有至少25mV的绝对值的 ζ电位。
20.权利要求2的口腔护理体系，其中所述稳定分散体是空间稳定的。
21.权利要求2的口腔护理体系，其中所述稳定分散体包含分散剂。
22.权利要求21的口腔护理体系，其中所述分散剂是离子分散剂或非离子分散剂。
23.权利要求1的口腔护理体系，其中所述肽组合物包含肽，所述肽具有的氨基酸序列选自 SEQ ID NO :64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、 84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、 108、109、110、111、112、113、114、115、120、121、122、123、125、126、127、128、129、130、131、 132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143 和 144。
24.权利要求1的口腔护理体系，其中所述肽组合物包含肽，所述肽具有的氨基酸序列选自 SEQ ID NO :145、146、147、148、149、150 和 151。
25.权利要求1的口腔护理体系，其中所述肽组合物包含肽，所述肽具有的氨基酸序列选自 SEQ ID NO :161、162、163 和 166。
26.权利要求1的口腔护理体系，其中所述肽组合物包含第二结合元件，所述第二结合元件具有的氨基酸序列选自 SEQ ID NO :116、117、119、152、153、154、155、156、157、165 和 168。
27.将口腔护理有益剂施用到口腔表面的方法，所述方法包括(a)提供口腔护理体系，所述口腔护理体系包括(i)肽组合物，其包含(1)第一结合元件，其与口腔表面的亲和力具有10_5摩尔或更低的MB5tl值；和(2)第二结合元件；和(ii)包含微粒的组合物，所述微粒包含(1)有益剂；和(2)配体部分；其中所述微粒具有在0.01微米至10微米范围内的平均粒度；并且其中所述第二结合元件和所述配体部分非共价地或通过螯合而彼此缔合；以及(b)使口腔表面与(a)的所述口腔护理体系接触，从而将所述有益剂施用到所述口腔表面。
28.权利要求27的方法，其中使所述口腔护理体系的肽组合物在接触包含微粒的组合物之前与所述口腔表面接触。
29.权利要求27的方法，其中将所述口腔护理体系的肽组合物和包含微粒的所述组合物一起施用到所述口腔表面。
30.权利要求27的方法，其中所述肽组合物包含选自SEQID NO :64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114和 115 的氨基酸序列。
31.包含氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列选自SEQID NO :64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、120、 121、122、123、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、 141、142、143 和 144。
32.包含氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列选自161、162、163和166。
33.包含权利要求31或权利要求32的多肽的口腔护理组合物。
34.权利要求33的口腔护理组合物，其中所述组合物是粉末、糊料、凝胶、液体、油膏剂、或片剂的形式。
全文摘要
提供了口腔护理组合物、口腔护理体系、口腔表面结合肽和将微粒施用到口腔表面的方法。所述口腔护理体系包括至少一种肽组分，所述肽组分包含对口腔表面具有亲和力的第一结合元件和对微粒的配体部分具有亲和力的第二结合元件。
文档编号A61K9/14GK102448483SQ201080024109
公开日2012年5月9日 申请日期2010年3月30日 优先权日2009年3月30日
发明者D·R·安顿, K·A·富泽, P·E·鲁维耶, S·R·法内斯托克, T·M·格鲁伯, 王红 申请人:纳幕尔杜邦公司