专利名称：蟾肽抗生素用于制备治糖尿病足的药品的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种外用药品，特别是蟾肽抗生素用于制备治糖尿病足的药品。
背景技术：
糖尿病足是糖尿病的并发症之一，在临床上，由于糖尿病患者长期受到高血糖的 影响，下肢血管易形成血栓及闭塞并造成下肢组织病变，或者糖尿病患者由于足部皮肤擦 伤、皲裂、脚气等原因引发感染，造成足部或下肢水肿、发黑、腐烂、坏死及坏疽。现在对糖尿 病足患者的治疗常用注射抗生素、截肢、搭桥及干细胞移植技术。CN200510124025. 3公开了治脉管炎及糖尿病足中药，由大黄、金银花、蟾蜍、红豆 杉、黄芩、黄柏、独活、半夏、天南星、三七、杜仲等中草药组成；CN200510088707. 3公开了一 种用于糖尿病足的保健搽洗剂及制备方法和应用的专利技术，由水蛭、红花、乳香、没药、姜 黄、莪术、虎杖、桂枝、尼泊金乙酯等配料组成；CN20041009M08. 2公开了一种治糖尿病足 中药的专利技术，由黄芪、玄参、丹参、牛膝、和忍冬藤等中草药组成。CN200410013742. 4公开了采用中药培育蟾蜍蛆虫的方法，可以大批量工业化生产 蟾蜍蛆虫。原则上，上述的各种药物及治疗技术都可以应用于治疗糖尿病足的病症，但每个 配方中药物繁多，每种中草药由于种植地域、气候、采收时间、炮制及加工方法的差异，在工 业化生产时，难于保证产品的一致性和质量控制。
发明内容
本发明的目的是提供蟾肽抗生素用于制备治糖尿病足的药品，其药品组方与工艺 专门针对糖尿病足特殊症状而设计，成分准确、质量可控、使用方便。本发明的目的是通过以下技术方案实现的(1)将蟾蜍蛆虫用水或乙醇稀溶液浸 泡提取分离或超声波提取分离；( 脱除蛋白质及多糖类；C3)注入酸性阳离子交换树脂柱 并用碱性水溶液洗脱，收集蟾肽抗生素部分；(4)用超声驻波液相制备色谱分离纯化蟾肽 抗生素；( 将蟾肽抗生素与适宜的药剂辅料结合使用，分别制备成蟾肽抗生素酊剂、蟾肽 抗生素糊剂、蟾肽抗生素软膏剂及蟾肽抗生素糊膜剂。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进一步的描述实施例1、(1)将IOOOg蟾蜍蛆虫用10L-100L的纯净水并加入0. 02-0. IOmol/L磷酸-磷 酸氢二钾缓冲液加热至35°C -90°C、保持30min-300min并且进行搅拌，提取出蟾肽抗生素 的粗品；( 加入提取液体积5倍-10倍的乙醇或甲醇，常温下静止沉淀lh-24h，然后用分 离机在800r/min-16000r/min条件下将多糖类及蛋白质分离；(3)分离液泵入HD-8酸性阳 离子交换树脂柱内，常温下放置lh-24h ；然后用Imol/L-lOmol/L氨水洗脱收集蟾肽抗生素部分；(4)将收集的蟾肽抗生素部分溶解于由氯仿-乙醇-水(5 3 4)组成的溶剂体 系中用超声驻波液相制备色谱以声强0. 2kw-5. Okw，流速0. lml/min-lOOOml/min、紫外检 测器波长220nm检测条件下分离纯化蟾肽抗生素；( 将纯化的蟾肽抗生素用真空冷冻干 燥机在-IO0C —500C、真空度0. OlMpa-O. IMpa条件下干燥1. Oh-IOh,含量达98. 2%； (6)纯 化的蟾肽抗生素粉碎过100目-200目筛收集粉末。2、(1)将IOOOg蟾蜍蛆虫用5L-10L的纯净水并加入10% -20%乙醇，在超声波 提取罐中以Ikw-IOkw声强超声波常温条件下提取10min-120min，提取出蟾肽抗生素粗 品溶液；⑵提取液中加入5倍-10倍的乙醇，常温下，静止沉淀lh-Mh，用分离机SOOr/ min-16000r/min连续分离上述溶液；(3)用真空蒸发器在真空度0. OlMpa-O. 5Mpa、温度 IO0C _50°C条件下浓缩提取液至原体积的10% -1. 0% ； (4)将提取浓缩液泵入HZOOl酸性 阳离子交换树脂柱中，用0. lmol/L-1.0mol/L NaOH溶液洗脱，收集蟾肽抗生素部分；(5) 收集的蟾肽抗生素部分溶解到由氯仿-乙醇-水(5 4 3)组成的溶剂体系中，用超 声驻波液相制备色谱以声强0. lkw-5. Okw、流速0. lml/min-lOOOml/min、紫外检测器波长 220nm检测条件下，连续分离纯化；(6)分离纯化的蟾肽抗生素在温度_10°C-50°C、真空度 0. OlMpa-O. IMpa真空冷冻干燥lh_10h，纯化后的蟾肽抗生素含量达98. 9%。3、取20g羊毛脂和30_35g凡士林加热熔化后，加入预先混合均勻的10g_15g淀粉 及10g-15g氧化锌，搅拌均勻成为糊状后，冷却至室温时加入lg_5g蟾肽抗生素粉末混勻， 即成蟾肽抗生素糊剂。4、将IOOOg液体石蜡和IOOOg凡士林在干热100°C _200°C杀菌lh_3h，冷却至室温 后两者混合均勻并研磨30min-180min，再加入1. 0g_50g蟾肽抗生素粉末混合均勻，即成蟾 肽抗生素软膏剂。5、取蟾肽抗生素2g-10g溶于IOOOml 0. 1 %-95%乙醇溶液中，并加入50ml_100ml 甘油用高压均质机在0. 3Mpa-60Mpa常温条件下均质处理，即制备成蟾肽抗生素酊剂。6、取蟾肽抗生素IOg溶于IOOOml 30% -95%乙醇溶液中并加入1. Oml-IOOml吐 温-80和10ml-50ml蓖麻油及1. Oml-IOOml丙二醇，搅拌均勻后再加入10g_200g羟丙基甲 基纤维素溶解并混合均勻，即制备成蟾肽抗生素糊膜剂。7、临床治疗与结果(1)纳入病例的患者符合《糖尿病足(肢端坏疽检查方法及诊断标准(草案))》 的患者，治疗时间10d-90d。(2)经诊断的糖尿病足患者病情按中医临床六级分级O级皮肤无开放性病灶。表现为肢端供血不足，颜色紫绀或苍白，肢端发凉、麻 木、感觉迟钝或丧失，肢端刺痛或灼痛，常伴有足趾或足的畸形等；一级肢端皮肤有开放性病灶。水疱、血疱、鸡眼或胼胝，冻伤或烫伤及其他皮肤损 伤所引起的浅表溃疡，但病灶尚未波及深部组织；二级感染病灶已侵犯深部肌肉组织。常有轻度蜂窝组织炎，多发性脓灶及窦道形 成，或感染沿肌间隙扩大，造成足底、足背贯通性溃疡或坏疽，脓性分泌物较多，足或指趾皮 肤干性坏疽，但肌腱韧带尚无破坏；三级肌腱韧带组织破坏。蜂窝组织炎融合形成大脓腔，脓性分泌物及坏死组织增 多，足或少数足趾干性坏疽，但骨质破坏尚不明显；
四级严重感染已造成骨质破坏。骨髓炎，骨关节破坏或已形成假关节，部分足趾 或部分手足发生湿性或干性严重坏疽或坏死；五级足的大部或全部感染或缺血，导致严重的湿性或干性坏疽，肢端变黑，常波 及踝关节及小腿。(3)治疗方法全部病例均采用严格控制血糖，同时疏通微循环，将坏死组织清除 后用0.01%过氧化氢稀溶液杀菌，晾干后，常规用蟾肽抗生素酊剂涂复治疗，再用蟾肽抗生 素糊剂或蟾肽抗生素软膏剂或蟾肽抗生素糊膜剂，治疗周期10天至90天。(4)疗效标准参照《中医病证诊断疗效标准》拟定，痊愈创面基本愈合，显效创 面面积缩小范围> 50%，有效创面面积缩小范围> 30% ；无效创面面积颜色略有改善或 无明显变化。治疗结果见表
权利要求
1.蟾肽抗生素用于制备治糖尿病足的药品，其特征在于①将IOOOg蟾蜍蛆虫用 10L-100L的纯净水并加入0. 02mol/L-0. 10mol/L磷酸-磷酸氢二钾缓冲溶剂加热至 350C -90°C、保持30min-300min、并且进行搅拌，或用Ikw-IOkw超声波处理10min_120min， 提取出蟾肽抗生素的粗品；②加入提取液体积5倍-10倍的乙醇或甲醇，常温下静止沉 淀lh-Mh，然后用分离机在SOOr/min-ieOOOr/min条件下将多糖类及蛋白质分离；③分 离液泵入HZ001或HD-8酸性阳离子交换树脂柱内，常温下放置lh-24h，然后用lmol/ L-lOmol/LNaOH溶液或氨水溶液洗脱，收集蟾肽抗生素部分；④将收集的蟾肽抗生素部分 溶解于由氯仿-乙醇-水(5 3 4)组成的溶剂体系中用超声驻波液相制备色谱以声 强0. 2kw-5. Okw、注入流速0. lmL/min-lOOOml/min、紫外检测器波长220nm检测条件下， 分离纯化蟾肽抗生素；⑤将纯化的蟾肽抗生素用真空冷冻干燥机在-10°C --50°C、真空度 0. OlMpa-O. IMpa条件下干燥1. 0h_10h，含量达98. 2% -98. 9% ；⑥将蟾肽抗生素与药用辅 料混合制成蟾肽抗生素糊剂、蟾肽抗生素软膏剂、蟾肽抗生素酊剂、蟾肽抗生素糊膜剂。
2.如权利要求1所述的蟾肽抗生素用于制备治糖尿病足的药品，其特征在于将IOOOg 蟾蜍蛆虫用20L-30L的纯净水并加入0. 02mol/L-0. 05mol/L磷酸-磷酸氢二钾缓冲溶液加 热至50°C -60°C保持30min-60min并且进行搅拌，提取出蟾肽抗生素粗品。
3.如权利要求1所述的蟾肽抗生素用于制备治糖尿病足的药品，其特征在于分离液 注入HZ001或HD-8酸性阳离子交换树脂柱内，常温下放置釙-lOh，然后用2m0l/L-5m0l/ LNaOH溶液或氨水溶液洗脱，收集蟾肽抗生素部分。
4.如权利要求1所述的蟾肽抗生素用于制备治糖尿病足的药品，其特征在于收集的 蟾肽抗生素部分溶解于由氯仿-乙醇-水(5 3 4)组成的溶剂体系中用超声驻波液相 制备色谱以声强0. 5kw-2. Okw、注入流速20ml/min-100ml/min、紫外检测器波长220nm检测 条件下分离纯化蟾肽抗生素。
5.如权利要求1所述的蟾肽抗生素用于制备治糖尿病足的药品，其特征在于蟾肽抗 生素糊剂由lg_2g蟾肽抗生素、20g羊毛脂、30g凡士林、IOg淀粉和IOg氯化锌组成。
6.如权利要求1所述蟾肽抗生素用于制备治糖尿病足的药品，其特征在于蟾肽抗生 素软膏剂由5g-10g蟾肽抗生素、IOOOg液体石蜡、IOOOg凡士林组成。
7.如权利要求1所述蟾肽抗生素用于制备治糖尿病足的药品，其特征在于蟾肽抗生 素酊剂由2g-10g蟾肽抗生素、1000ml30% -60%乙醇及50ml_100ml甘油组成。
8.如权利要求1所述蟾肽抗生素用于制备治糖尿病足的药品，其特征在于蟾肽抗生 素糊膜剂由IOg蟾肽抗生素、1000ml30% -60%乙醇、10ml_50ml吐温-80、20ml_30ml蓖麻 油、10ml-50ml丙二醇及50g_150g羟丙基甲基纤维素组成。
全文摘要
本发明提供蟾肽抗生素用于制备治糖尿病足的药品，它以蟾蜍蛆虫为原料，采用溶剂萃取法，超声波萃取法，离子交换树脂吸附法，超声驻波液相制备色谱法及真空冷冻干燥等工艺过程，提取分离纯化为蟾肽抗生素，以蟾肽抗生素为治糖尿病足的活性成分并与适宜的赋形剂相结合制备成各种剂型的药品，制备药品成份明确，质量稳定可控，对治疗各种糖尿病足疗效好。本发明生产工艺过程合理，能耗低，适合工业化生产。
文档编号A61K9/00GK102078593SQ20111000727
公开日2011年6月1日 申请日期2011年1月14日 优先权日2011年1月14日
发明者徐华民, 赵荣华 申请人:哈尔滨工业大学