专利名称：一种中药组合物中橙皮苷的含量测定方法
技术领域：
本发明涉及到一种中药组合物中橙皮苷的含量测定方法，特别地，涉及一种中药组合物中橙皮苷含量的高效液相色谱法外标法测定的方法。
背景技术：
由于中药组合物成份复杂，因此，不同中药组合物难以采用相同的方法测定，不同的中药组合物需要根据其组合物特点建立其特有的检测方法，且需要严格的方法学研究，才可以用于控制该中药组合物的含量测定。
发明内容
本发明的目的是提供一种中药组合物中橙皮苷的含量测定方法，该中药组合物由 如下重量份的原料药制成酸枣仁300-500、桑椹300-500、菊花100-160、茯苓50-80、山楂100-160、百合50-80、陈皮50-80、荷叶50-80、灵芝100-160，该方法采用高效液相色谱法外标法测定，测定条件如下
色谱条件色谱柱Waters Symmetryshield RP18色谱柱；检测波长283nm ;流动相为乙腈-O. 1%磷酸溶液，室温体积比为10-20:90-80，流速为l.Oml/min ；
供试品溶液的制备方法取所述中药组合物制剂或制剂内容物I. 5g，精密称定，精密加入25ml甲醇，称定重量，超声处理20分钟，放冷，称重，用甲醇补足减失的重量，滤过，精密吸取续滤液10ml，蒸干，残渣加水IOml使溶解，上聚酰胺柱，先加水IOml洗脱，弃去，再用50ml 30%甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加50%的甲醇溶解并转移至25ml的容量瓶中，加50%的甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，即得；
对照品溶液的制备方法精密称取橙皮苷对照品适量，加50%甲醇制成每Iml含27 μ g的溶液，摇匀，即得；
分别精密吸取对照品溶液15 μ I与供试品溶液20 μ 1，注入高效液相色谱仪，测定，即得。本发明中药组合物中橙皮苷的含量测定方法中所使用的色谱柱规格优选为4. 6 X 150mm、填料粒径优选为5 μ m,流动相优选为乙腈-O. 1%磷酸溶液，室温体积比优选为18:82，理论板数以橙皮苷峰计不低于2000 ;供试品溶液的制备方法中所述聚酰胺柱填料粒径优选为100-200目，内径优选为I. Ocm，填料重量优选为I. 5g，所述微孔滤膜规格优选为 O. 45 μ m。本发明提供的中药组合物中的橙皮苷的含量测定方法，其目的是作为该中药组合物的质量控制方法，为更好实现发明目的，本发明中的中药组合物进一步优选为如下重量份的原料药制成
酸枣仁375、桑椹375、菊花125、茯苓62. 5、山楂125、百合62. 5、陈皮62. 5、荷叶62. 5、灵芝125。该中药组合物还优选为由如下重量份的原料药制成酸枣仁300、桑椹500、菊花100、茯苓80、山楂100、百合80、陈皮50、荷叶80、灵芝100。该中药组合物还优选为由如下重量份的原料药制成
酸枣仁500、桑椹300、菊花160、茯苓50、山楂160、百合50、陈皮80、荷叶50、灵芝160。该中药组合物还优选为由如下重量份的原料药制成
酸枣仁375、桑椹500、菊花125、茯苓80、山楂125、百合80、陈皮62. 5、荷叶80、灵芝
125。该中药组合物还优选为由如下重量份的原料药制成酸枣仁300、桑椹375、菊花100、茯苓62. 5、山楂100、百合62. 5、陈皮50、荷叶62. 5、灵芝 100。该中药组合物还优选为由如下重量份的原料药制成
酸枣仁400、桑椹400、菊花130、茯苓65、山楂130、百合65、陈皮65、荷叶65、灵芝130。本发明的橙皮苷含量测定方法适用于上述中药组合物制成的各种制剂剂型，进一步优选为胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液、散剂或丸剂。本发明方法测定橙皮苷的含量从多个方面评价该方法的可行性，评价方法如下
I、仪器与试药
仪器=Agilent 1100高效液相色谱仪；METTLER TOLEDO AT201分析天平；试药本发明颗粒剂(石家庄以岭药业股份有限公司，批号030201，030202，030203 ;按照实施例2的制备方法制备);橙皮苷对照品(批号110721-200211);乙腈(Fisher，色谱纯)；其他试剂均为分析纯。2、检测波长的选择对橙皮苷对照品进行光谱检测，光谱图上可见，在283nm、328nm处均有最大吸收，但在283nm处吸收较大，所以选择283nm为本样品的检测波长。3、专属性实验按处方比例取陈皮以外的其它原料药材，依照制备工艺制得阴性样品，按供试品溶液制备法操作，即得阴性对照液，吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性样品溶液，进样，测定，结果阴性样品不干扰橙皮苷的测定。空白试验见图I。4、标准曲线精密吸取不同浓度的对照品溶液，注入高效液相色谱仪，以峰面积积分值为纵坐标(Y)，进样量为横坐标(X)，绘制标准曲线。得回归方程Y=1. 69832177Χ-1. 7400625，r=l. 00000，表明橙皮苷进样量在136. 32-2453. 76ng范围内具有良好的线性关系。5、精密度试验吸取对照品溶液，在上述色谱条件下连续进样5次，测定峰面积，结果对照品峰面积的RSD为O. 14%，说明仪器性能良好。6、稳定性试验吸取供试品溶液，于O，2，6，12，24h进样，测定峰面积，结果供试品峰面积的RSD为O. 37%，说明24h内供试品溶液稳定。7、重复性试验取同一批样品，分别取高中低三个样品量，每个样品量3份，按供试品的制备方法制备，测定，结果样品的含量(mg/g)平均值为O. 9224，RSD为O. 62%，说明方法精密度良好。8、回收率试验采用加样回收试验，取同一批样品9份，分三组，分别加入高、中、低3种量的橙皮苷对照品溶液，按供试品的制备方法处理后，依法测定，计算回收率，结果见表I。结果橙皮苷的平均回收率为96. 69%，RSD为I. 10% (n=9)，说明方法的准确度良好。表I回收率试验结果
权利要求
1.一种中药组合物中橙皮苷的含量测定方法，该中药组合物由如下重量份的原料药制成酸枣仁300-500、桑椹300-500、菊花100-160、茯苓50-80、山楂100-160、百合50-80、陈皮50-80、荷叶50-80、灵芝100-160，其特征在于，该方法采用高效液相色谱法外标法测定，测定条件如下 色谱条件色谱柱Waters Symmetryshield RP18色谱柱；检测波长283nm ;流动相为乙腈-0. 1%磷酸溶液，室温体积比为10-20:90-80，流速为l.Oml/min ； 供试品溶液的制备方法取所述中药组合物制剂或制剂内容物I. 5g，精密称定，精密加入25ml甲醇，称定重量，超声处理20分钟，放冷，称重，用甲醇补足减失的重量，滤过，精密吸取续滤液10ml，蒸干，残渣加水IOml使溶解，上聚酰胺柱，先加水IOml洗脱，弃去，再用50ml 30%甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加50%的甲醇溶解并转移至25ml的容量瓶中，加50%的甲醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，即得； 对照品溶液的制备方法精密称取橙皮苷对照品适量，加50%甲醇制成每Iml含27 ii g的溶液，摇匀，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液15 Ul与供试品溶液20 iil，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
2.如权利要求I所述的橙皮苷的含量测定方法，其特征在于，色谱条件为色谱柱为规格为4. 6 X 150mm、填料粒径为5 u m,流动相为乙腈-0. 1%磷酸溶液，室温体积比为18:82，理论板数以橙皮苷峰计不低于2000 ;供试品溶液的制备方法中所述聚酰胺柱填料粒径为100-200目，填料重量I. 5g，内径为I. Ocm，所述微孔滤膜规格为0. 45 u m。
3.如权利要求I或2所述的橙皮苷的含量测定方法，其特征在于所述中药组合物由如下重量份的原料药制成 酸枣仁375、桑椹375、菊花125、茯苓62. 5、山楂125、百合62. 5、陈皮62. 5、荷叶62. 5、灵芝125。
4.如权利要求I或2所述的橙皮苷的含量测定方法，其特征在于该中药组合物由如下重量份的原料药制成 酸枣仁300、桑椹500、菊花100、茯苓80、山楂100、百合80、陈皮50、荷叶80、灵芝100。
5.如权利要求I或2所述的橙皮苷的含量测定方法，其特征在于该中药组合物由如下重量份的原料药制成 酸枣仁500、桑椹300、菊花160、茯苓50、山楂160、百合50、陈皮80、荷叶50、灵芝160。
6.如权利要求I或2所述的橙皮苷的含量测定方法，其特征在于该中药组合物由如下重量份的原料药制成 酸枣仁375、桑椹500、菊花125、茯苓80、山楂125、百合80、陈皮62. 5、荷叶80、灵芝125。
7.如权利要求I或2所述的橙皮苷的含量测定方法，其特征在于该中药组合物由如下重量份的原料药制成 酸枣仁300、桑椹375、菊花100、茯苓62. 5、山楂100、百合62. 5、陈皮50、荷叶62. 5、灵芝 100。
8.如权利要求I或2所述的橙皮苷的含量测定方法，其特征在于该中药组合物由如下重量份的原料药制成酸枣仁400、桑椹400、菊花130、茯苓65、山楂130、百合65、陈皮65、荷叶65、灵芝130。
9.如权利要求I或2所述的橙皮苷的含量测定方法，其特征在于所述中药组合物制剂剂型为胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液、散剂或丸剂。
全文摘要
本发明提供了一种中药组合物中橙皮苷含量测定的方法，本发明中药组合物由酸枣仁、陈皮、茯苓、桑椹、菊花等9味中药组成，本发明方法采用高效液相色谱法测定其中橙皮苷的含量，符合药物制剂质量控制的要求，可有效控制该中药组合物中橙皮苷的含量。
文档编号A61K36/8967GK102670951SQ20111006222
公开日2012年9月19日 申请日期2011年3月16日 优先权日2011年3月16日
发明者张永峰, 李正杰, 杨丽荣, 杨雷, 柏艳柳, 许红辉 申请人:河北以岭医药研究院有限公司