专利名称：一种低酸高品质银杏叶提取物的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种低酸高品质银杏叶提取物的制备方法，该银杏叶提取物可作为治 疗血瘀型胸痹及血瘀型轻度脑动脉硬化引起的眩晕以及冠心病、心绞痛、心肌梗塞等疾病 的原料药，属于中药制备技术领域。
背景技术：
心脑血管疾病居各种死因首位，已成为人类死亡病因最高的头号杀手。据统计，目 前中国60岁以上人口已逾3亿，人口老龄化的来临使心脑血管疾病患者也相应上升。同时 现代社会来自工作、社会、生活等方面的压力促使心脑血管疾病在30岁至40岁的中青年人 中的发病率也不断上升，发病的年龄跨度在不断扩大。目前，虽然西医治疗心脑血管疾病 的药物较多，但是由于副作用大等原因，临床使用受到了限制。银杏叶制剂作为临床安全 有效的治疗心脑血管疾病的药物，在全球临床市场已取得广泛认可。从技术先进性角度来 看，银杏叶制剂至今已经历大约5个发展阶段，即第一代将银杏叶烘干，粉碎原生药压片； 第二代将银杏叶用水提取后浓缩成膏，然后烘干、制粒压片，但对其中的主要有效成分银杏 黄酮和银杏内酯没有进行控制；第三代在第二代的基础上对主要有效成分银杏黄酮和银杏 内酯进行定性控制，但无有害成分银杏酸含量标示；第四代控制有效成分银杏黄酮在 以上，银杏内酯在6%以上，有害成分银杏酸控制在IOppm以下；第五代控制有效成分总黄 酮在44%以上，黄酮苷在以上，银杏内酯在6%以上，有害成分银杏酸控制在5ppm以 下。中国药典2010版要求银杏叶提取物中含总黄酮醇苷不得少于对％，含总内酯不得少于 6%，银杏酸含量小于IOppm ；美国药典对此的要求是含总黄酮醇苷为22 27%，含总内酯 为5. 4 12%，银杏酸含量小于IOppm ；德国药典对此要求是总黄酮醇苷为22 27%，含 内酯为5 7%，银杏酸含量小于lOppm。由此可见，控制好总黄酮醇苷、总内酯和银杏酸的 含量是银杏叶提取物质量的关键因素。已经报道的银杏叶提取物的现有工艺技术有微波提取法，超临界萃取法等。现有 技术中大多数只关注提取物的纯化，追求有效成分的高含量，忽视了有害成成分银杏酸的 含量控制，在临床使用中容易引发不良反应。为了解决此问题，有少数报道提出增加有效成 分含量，降低有害成分含量的银杏叶提取物，但是提取工艺繁琐，还有的需要用到葡聚糖凝 胶等高贵填料，无法实现工业化大生产。其次，目前有效成分只聚焦于银杏黄酮醇苷和萜类 内酯，而文献报道二苯乙烯类成分具有抗氧化、降低血脂等功效，对心血管具有良好的保护 作用，有可能是银杏提取物治疗心脑血管疾病的另一大类活性成分。而目前所有报道的文 献专利均未控制其中3，3' -二甲氧基_4，4' -二羟基二苯乙烯的含量。
发明内容
本发明的目的是提供一种低酸高品质银杏叶提取物的制备方法，通过该提取方法 得到的银杏叶提取物，显著提高活性成分银杏总黄酮醇苷、总内酯的含量，降低有害成分银 杏酸的含量，以更好的满足药物的临床需要；首次对银杏叶提取物中的二苯乙烯类成分进
3行了定量控制，以更好的控制产品质量。本发明的目的是通过以下方式实现的一种低酸高品质银杏叶提取物的制备方法，该方法包括以下步骤a)将干燥银杏叶粉碎至过20 30目筛，用质量百分比浓度为65 85%乙醇加 热回流提取，过滤，滤液浓缩至稠膏；b)在上述稠膏中加入银杏叶重量3 6倍的水，搅勻，冷藏静置M 48h，离心， 得上清液；c)将制得的上清液，以每克树脂加入1. 5 2. 5ml上清液的比例，通过混合树脂 组成的离子交换柱，先用水洗涤，再用质量百分比浓度为阳 70%的乙醇洗脱，收集55 70%乙醇洗脱液，将洗脱液浓缩，得浓缩液；其中，混合树脂为大孔吸附树脂与聚酰胺树脂 按照4 1 9 1的重量比组成；优选大孔吸附树脂与聚酰胺树脂按照6 1 9 1 的重量比组成。d)向所得浓缩液中加入水和低极性有机溶剂作为萃取溶剂，萃取2 3次，有机层 弃去，水相液浓缩，得浓缩液；干燥浓缩液，得银杏叶提取物。所述的大孔吸附树脂优选为DM130、AB-8或DlOl型；所述的萃取溶剂为浓缩液体 积1 3倍的水和1 3倍的低极性有机溶剂，其中，低极性有机溶剂为乙醚、氯仿、环己烷 或正己烷，优选环己烷或正己烷。采用水洗涤时用量为3 4倍柱体积，乙醇洗脱时用量 12 16倍柱体积，洗脱速度为20 30ml/min。所述的干燥浓缩液方式为喷雾干燥或真空干燥。本发明所制备的高品质银杏叶提取物中总黄酮含65%以上(银杏叶提取物中含 35%以上的黄酮醇苷)，总萜类内酯含10%以上，3，3' -二甲氧基_4，4' - 二羟基二苯乙 烯含量达0.05%以上，银杏酸含量低于2ppm。在步骤a)中回流提取的次数可为1 3次， 每次提取时间为1 2小时，每次乙醇用量为银杏叶干重的6 14倍。优选回流提取3 次，每次提取时间为1 2小时，三次乙醇用量范围分别为银杏叶干重的12 14倍(第一 次)，10 12倍(第二次)，6 8倍(第三次)。提取后浓缩得到的稠膏在60°C时相对密 度为1. 15 1. 25。上述银杏叶提取物成分所指的“％”均为质量百分含量。关键工艺参数的主要筛选过程如下试验1、考察了不同类型大孔吸附树脂富集纯化银杏叶提取物的效果。取7份Ikg的干燥银杏叶，分别粉碎过20 30目筛，用75%乙醇加热回流提取三 次，每次时间分别均是1.5小时，三次乙醇用量范围是分别为银杏叶干重的14倍，10倍，8 倍，提取液合并，滤过，减压浓缩至60°C时相对密度为1. 15 1. 25的稠膏后，加干燥银杏叶 3倍量水，充分搅勻，4°C冷库冷藏静置48小时后，离心，上清液分别过不同的大孔树脂柱， 先用4倍柱体积的蒸馏水洗涤，再分别用6倍柱体积质量百分比浓度为55%的乙醇和8倍 柱体积70%的乙醇按20ml/min速度洗脱，合并洗脱液，洗脱液浓缩，喷雾干燥，即得。结果如表1所示表权利要求
1.一种银杏叶提取物的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤a)将干燥银杏叶粉碎至过20 30目筛，用质量百分比浓度为65-85%的乙醇加热回 流提取，过滤，滤液浓缩至稠膏；b)在上述稠膏中加入银杏叶重量3 6倍的水，冷藏静置M 48h，离心，得上清液；c)将制得的上清液，以每克树脂加入1.5 2. 5ml上清液的比例，通过混合树脂组成 的离子交换柱，先用水洗涤，再用质量百分比浓度为阳 70%的乙醇洗脱，收集55 70% 乙醇洗脱液，将洗脱液浓缩，得浓缩液；其中，混合树脂为大孔吸附树脂与聚酰胺树脂按照 41 91的重量比组成；d)向所得浓缩液中加入水和低极性有机溶剂作为萃取溶剂，萃取2 3次，有机层弃 去，水相液浓缩，得浓缩液；干燥浓缩液，得银杏叶提取物。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤a)中所述的稠膏在60°C时相对 密度为1. 15 1. 25。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤c)中大孔吸附树脂为DM130、 AB-8 或 DlOl 型。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤c)中混合树脂为大孔吸附树脂与 聚酰胺树脂按照61 91的重量比组成。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤d)中所述的萃取溶剂为浓缩液体 积1 3倍的水和1 3倍的低极性有机溶剂，其中，低极性有机溶剂为乙醚、氯仿、环己烷 或正己烷。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于步骤d)中所述的低极性有机溶剂为环 己烷或正己烷。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的干燥为喷雾干燥或真空干燥。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所制备的银杏叶提取物中总黄酮含 65%以上，总萜类内酯含量含10%以上，3，3' -二甲氧基_4，4' -二羟基二苯乙烯含量达 0. 05%以上，银杏酸含量低于2ppm。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于在银杏叶提取物中含35%以上的黄酮 醇苷。
全文摘要
本发明公开了一种低酸高品质银杏叶提取物的制备方法，该制备方法包括提取、精制纯化分离、浓缩干燥。通过本发明方法得到的银杏叶提取物总黄酮含量达65％以上(其中黄酮醇苷达35％以上)，总萜类内酯含量达10％以上，3，3′-二甲氧基-4，4′-二羟基二苯乙烯含量达0.05％以上，银杏酸含量可低于2ppm。与现有技术相比，本发明首次对3，3′-二甲氧基-4，4′-二羟基二苯乙烯含量进行了定量控制，有效成分富集提取率高，有害成分银杏酸含量低，具有生产过程符合工业化大生产要求，工艺路线更加合理的特点。
文档编号A61K36/16GK102133244SQ20111006872
公开日2011年7月27日 申请日期2011年3月22日 优先权日2011年3月22日
发明者徐成, 段绪红, 秦勇, 胡传良, 金春 申请人:江苏神龙药业有限公司