专利名称：一种由锁阳致肾阳虚证动物模型的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种动物模型的建立，尤其是一种由锁阳致肾阳虚证动物模型的制作方法。
背景技术：
动物模型是进行中医病证研究所采用的常用实验手段，“肾阳虚”证是中医常见证候，但从实验动物模型模拟肾阳虚证临床表现方面还没有有效的实验动物模型制作方法， 这大大影响相关实验结果的准确性。
发明内容
本发明的目的就是针对模拟肾阳虚证临床表现方面的实验动物模型的制作，提供一种由锁阳致肾阳虚证动物模型的制作方法。本发明采用的技术方案是一种由锁阳致肾阳虚证动物模型的制作方法，其特征是，选择昆明种小鼠210只，雄性，体重18 22g，将以上小鼠分成5组，分别为分别为正常对照组1 肌注生理盐水+灌水，肌注生理盐水+灌锁阳高剂量造模组2，肌注生理盐水+中剂量造模组3，肌注生理盐水+低剂量造模组4，氢考造模组5 肌注氢考+灌水造模组。所述锁阳高、中、低造模组按照体表面积比值折算小鼠高、中、低剂量分别为等效剂量的1倍量、5倍量、10倍量，即分别为11. 70g/kg、5. 85g/kg、l. 17g/kg，均按25ml/kg体积灌胃给药。所述氢考造模组的造模剂量剂量为0. 25-0. 5mg/d/只，用生理盐水配成不同浓度的混悬液，0. Iml/只/天后肢肌肉注射。所述正常对照组30只小鼠，锁阳高、中、低造模组各40只小鼠，氢考造模组60只小鼠。本发明的一种由锁阳致肾阳虚证动物模型的制作方法，具有使实验结果更加准确的特点。
具体实施例方式本发明的一种由锁阳致肾阳虚证动物模型的制作方法，选择昆明种小鼠210只， 雄性，体重18 22g，将以上小鼠分成五组，分别为正常对照组1 肌注生理盐水+灌水。肌注生理盐水+灌锁阳高剂量造模组2、肌注生理盐水+中剂量造模组3，肌注生理盐水+低剂量造模组4。氢考造模组5 肌注氢考+灌水造模组，根据预试验的情况，分别设置不同的动物数，正常对照组300只，锁阳高、中、低造模组各40只，氢考造模组60只。按照不同的给药时间和剂量进行造模。所述锁阳高、中、低造模组按照体表面积比值折算小鼠高、中、低剂量分别为等效剂量的1倍量、5倍量、10倍量，即分别为11. 70g/kg、5. 85g/kg、l. 17g/kg， 均按25ml/kg体积灌胃给药。所述氢考造模组的造模剂量剂量为0. 25-0. 5mg/d/只，用生理盐水配成不同浓度的混悬液，0. Iml/只/天后肢肌肉注射。
确定动物肾阳虚表现的主、次症及积分标准，见表1。观察各组小鼠的毛色光亮度、精神萎靡程度、肛门便染、少食、怠动、倦缩、畏寒肢冷、死亡情况等症状，进行积分分级判断，结果进行组间Raddit分析，对积分值进行组间t检验处理，每日定时记录体重，结果进行组间t检验。分别于造模7、10、15天后，取部分小鼠测定体温，结果进行组间统计学处理。取部分小鼠每天固定时间将小鼠逐只放入小鼠自主活动仪中，自由活动30分钟以熟悉环境。连续2天。然后继续造模，末次给药后1小时，用小鼠自主活动仪记录2分钟内小鼠的活动次数，结果进行组间统计学处理。取部分小鼠于末次给药后1小时，进行低温负重游泳实验。实验时在小鼠尾部吊约Ig重物，自投入1-4°C的冰水中开始计时，计录鼻孔沉下水面所需的时间，以此来反映小鼠的低温耐力。结果进行组间t检验。表1.动物肾阳虚证的主、次症判定及积分标准
权利要求
1.一种由锁阳致肾阳虚证动物模型的制作方法，其特征在于选择昆明种小鼠210只，雄性，体重18 22g，将以上小鼠分成5组，分别为分别为正常对照组1 肌注生理盐水+灌水， 肌注生理盐水+灌锁阳高剂量造模组2，肌注生理盐水+中剂量造模组3，肌注生理盐水+低剂量造模组4，氢考造模组5 肌注氢考+灌水造模组。
2.根据权利要求1所述的一种由锁阳致肾阳虚证动物模型的制作方法，其特征在于 所述锁阳高、中、低造模组按照体表面积比值折算小鼠高、中、低剂量分别为等效剂量的1 倍量、5倍量、10倍量，即分别为11. 70g/kg、5. 85g/kg、l. 17g/kg，均按25ml/kg体积灌胃给药。
3.根据权利要求1所述的一种由锁阳致肾阳虚证动物模型的制作方法，其特征在于 所述氢考造模组的造模剂量剂量为0. 25-0. 5mg/d/只，用生理盐水配成不同浓度的混悬液，0. Iml/只/天后肢肌肉注射。
4.根据权利要求1所述的一种由锁阳致肾阳虚证动物模型的制作方法，其特征在于 所述正常对照组30只小鼠，锁阳高、中、低造模组各40只小鼠，氢考造模组60只小鼠。
全文摘要
本发明公开了一种由锁阳致肾阳虚证动物模型的制作方法，其特征是，选择昆明种小鼠210只，雄性，体重18～22g，将以上小鼠分成5组，分别为分别为正常对照组、锁阳高、中、低造模组，氢考造模组，其中锁阳高、中、低造模组按照体表面积比值折算小鼠高、中、低剂量分别为等效剂量的1倍量、5倍量、10倍量，即分别为11.70g/kg、5.85g/kg、1.17g/kg，均按25ml/kg体积灌胃给药，氢考造模组的造模剂量剂量为0.25-0.5mg/d/只，用生理盐水配成不同浓度的混悬液，0.1ml/只/天后肢肌肉注射。
文档编号A61K49/00GK102166232SQ201110083049
公开日2011年8月31日 申请日期2011年4月2日 优先权日2011年4月2日
发明者吕丽莉, 孙玲, 孙蓉, 徐新刚, 王平, 陆永辉 申请人:山东省中医药研究院