专利名称:一种双水相萃取蒲黄总黄酮的方法
技术领域:
本发明属于制药技术领域,涉及一种双水相萃取蒲黄总黄酮的方法。
背景技术:
蒲黄为香蒲科植物水烛香蒲(Typha angustifolia L.)、东方香蒲(Typha orientalis Presl.)或同属植物的干燥花粉,具有止血、化瘀、通淋的功能,用于吐血、崩漏、外伤出血,经闭痛经,血淋涩痛。蒲黄中黄酮类成分具有明显增加冠脉流量、降低心脑组织耗氧量、扩张血管、降低血脂及康动脉粥样硬化等作用,其中主要有效成分有香蒲新苷、 异鼠李素-3-0-新橙皮苷、柚皮素和异鼠李素等。傅大煦等在文献“蒲黄总黄酮提取物中香蒲新苷及异鼠李素-3-0-新橙皮糖苷的 HPLC测定”中,采用60 %乙醇提取,提取液浓缩后上大孔树脂,依次以水、20 %乙醇、50 % 乙醇洗脱,洗脱液真空干燥得到总黄酮提取物。在文献“大孔树脂吸附和纯化蒲黄总黄酮的工艺研究”中,以香蒲新苷及异鼠李素-3-0-新橙皮糖苷含量为指标,研究了 HZ802非极性大孔树脂吸附和纯化蒲黄总黄酮的工艺条件,结果表明HZ802非极性大孔树脂对蒲黄总酮有良好的吸附纯化性能。刘斌等用70%乙醇提取3次,溶剂用量依次为8,6,6倍,提取时间为60min,60min,30min。中国专利申请号03115508. 1,蒲黄提取物及其制备方法和用途,采用含水乙醇00-95%)加热提取后浓缩,离心或过滤,取上清液或滤液,用大孔吸附树脂吸附,先用水淋洗除去杂质,再用含水低级醇洗脱;洗脱液浓缩至一定体积,用乙醇 (70-95% )醇沉,去沉淀后浓缩至干或除去乙醇后喷雾干燥,得蒲黄提取物,并将得到的蒲黄提取物用于防治心肌缺血性心血管疾病。李维维等采用70%乙醇回流提取,再经大孔树脂柱色谱、聚酰胺柱色谱及kphadex LH-20柱色谱分离得到香蒲新苷、异鼠李素-3_0_新橙皮苷、柚皮素和异鼠李素。张淑敏等在“蒲黄化学成分研究”中,采用聚酰胺及硅胶柱色谱进行成分分离,鉴定出9个黄酮类化合物。这些方法主要采用大孔树脂、硅胶柱或聚酰胺柱层析等传统柱色谱方法,存在提取率低、溶剂用量大、生产周期长、操作繁琐、不宜工业化生产等问题。
发明内容
本发明的目的是克服已有技术中蒲黄提取工艺流程长、提取率低、难以连续操作、 难工业化生产的技术问题,提供一种双水相萃取蒲黄总黄酮的方法。本发明的目的是这样实现的一种双水相萃取蒲黄总黄酮的方法,其特征在于包括以下步骤A.提取将蒲黄药材加入甲醇溶液提取,过滤除杂后得到蒲黄粗提液;B.双水相萃取取上述蒲黄粗提液浓缩后加入乙醇和磷酸盐双水相系统,混勻, 分为上、下两相,将下相降温、结晶、过滤,回收磷酸盐晶体;C.反萃取将上述上相加乙酸乙酯、水和无机盐,系统室温下混勻,进行反萃取, 静置后分为上、下两相;
D.干燥取上述乙酸乙酯相,减压浓缩、真空干燥,得到蒲黄总黄酮。步骤B中加入的乙醇质量比为7-25%。步骤B中磷酸盐选用磷酸钾、磷酸二氢钾或磷酸氢二钾中的一种或几种组合,加入的磷酸盐质量比为10-22%。步骤B双水相萃取中,分相温度为10_25°C,分相时间为2-5小时。步骤C中无机盐选用硫酸铵、硫酸镁、氯化钠。步骤C反萃取中分相时间为1-3小时。本发明的优点为本发明的双水相萃取蒲黄总黄酮的方法,是利用双水相萃取方法,选择性地富集分离纯化黄酮成分,分离过程不经过层析柱,与传统的硅胶柱层析、大孔吸附树脂柱层析方法相比,具有工艺流程短、简单易行、成本低,可放大工程进行连续性操作的优点。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。实施例1 称取20g蒲黄粉末,加入甲醇200ml加热回流提取池,提取3次,过滤,合并提取液,浓缩得到浓缩液180g ;取浓缩液加入25g乙醇、40gK3P04和IOOg水,充分混勻,在15°C 分相4小时;取出富含乙醇聚合物的上相141ml,加水60ml,乙酸乙酯96ml,硫酸铵3g,充分混勻,室温下静置分相2小时,取出乙酸乙酯相进行减压浓缩、真空干燥得到蒲黄总黄酮。实施例2:称取20g蒲黄粉末,加入甲醇300ml加热回流提取池,提取2次,过滤,合并提取液,浓缩得到浓缩液195g ;取浓缩液加入35g乙醇、48gK3P04和66g水,充分混勻,在25°C分相5小时;取出富含乙醇聚合物的上相16細1,加水66ml,乙酸乙酯105ml,硫酸铵3g,充分混勻,室温下静置分相3小时,取出乙酸乙酯相进行减压浓缩、真空干燥得到蒲黄总黄酮。实施例3 称取30g蒲黄粉末,加入甲醇MOml加热回流提取池,提取3次,过滤,合并提取液,浓缩得到浓缩液275g ;取浓缩液加入40g乙醇、53gKH2P0jn 80g水,充分混勻,在25°C分相4小时;取出富含乙醇聚合物的上相205ml,加水82ml,乙酸乙酯12細1,硫酸镁3g,充分混勻,室温下静置分相2小时,取出乙酸乙酯相进行减压浓缩、真空干燥得到蒲黄总黄酮。实施例4 称取30g蒲黄粉末,加入甲醇360ml加热回流提取池,提取2次,过滤,合并提取液,浓缩得到浓缩液;取浓缩液加入45g乙醇、55gK2HP0jn 98g水,充分混勻,在20°C分相2小时;取出富含乙醇聚合物的上相230ml,加水92ml,乙酸乙酯139ml,硫酸铵3g,充分混勻,室温下静置分相1小时,取出乙酸乙酯相进行减压浓缩、真空干燥得到蒲黄总黄酮。实施例5 称取50g蒲黄粉末,加入甲醇400ml加热回流提取池,提取2次,过滤,合并提取液,浓缩得到浓缩液356g ;取浓缩液加入55g乙醇、67gKH2P04和IlOg水,充分混勻,在10°C 分相5小时;取出富含乙醇聚合物的上相332ml,加水127ml,乙酸乙酯189ml,氯化钠3g,充分混勻,室温下静置分相3小时,取出乙酸乙酯相进行减压浓缩、真空干燥得到蒲黄总黄酮。
权利要求
1.一种双水相萃取蒲黄总黄酮的方法,其特征在于包括以下步骤A.提取将蒲黄药材加入甲醇溶液提取,过滤除杂后得到蒲黄粗提液;B.双水相萃取取上述蒲黄粗提液浓缩后加入乙醇和磷酸盐双水相系统,混勻,分为上、下两相;C.反萃取将上述上相加乙酸乙酯、水和无机盐,系统室温下混勻,进行反萃取,静置后分为上、下两相;D.干燥取上述乙酸乙酯相,减压浓缩、真空干燥,得到蒲黄总黄酮。
2.如权利要求1所述的一种双水相萃取蒲黄总黄酮的方法,其特征在于步骤B中加入的乙醇质量比为7-25%。
3.如权利要求1所述的一种双水相萃取蒲黄总黄酮的方法,其特征在于步骤B中磷酸盐选用磷酸钾、磷酸二氢钾或磷酸氢二钾中的一种或几种组合,加入的磷酸盐质量比为 10-22%。
4.如权利要求1所述的一种双水相萃取蒲黄总黄酮的方法,其特征在于步骤B双水相萃取中,分相温度为10-25°C,分相时间为2-5小时。
5.如权利要求1所述的一种双水相萃取蒲黄总黄酮的方法,其特征在于步骤C中无机盐选用硫酸铵、硫酸镁、氯化钠。
6.如权利要求1所述的一种双水相萃取蒲黄总黄酮的方法,其特征在于步骤C反萃取中分相时间为1-3小时。
全文摘要
本发明属于医药技术领域,涉及一种双水相萃取蒲黄总黄酮的方法。本发明的技术特征在于先将蒲黄药材提取、除杂后得到蒲黄粗提液,浓缩后加入乙醇和磷酸盐双水相系统,混匀,分为上、下两相;上相加乙酸乙酯、水和无机盐,室温下混匀,进行反萃取。取出含有蒲黄总黄酮的乙酸乙酯相,对其减压浓缩,真空干燥得到蒲黄总黄酮。本发明的有益效果是采用双水相从蒲黄中提取蒲黄总黄酮,方法简单易行,可放大工程进行连续性操作,处理量大、成本低、不存在有机溶剂残留。
文档编号A61P9/10GK102233067SQ20111011757
公开日2011年11月9日 申请日期2011年5月6日 优先权日2011年5月6日
发明者刘东锋, 杨成东, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司