专利名称：一种降倍半萜类化合物及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种降倍半萜类化合物及其制备方法与应用。
背景技术：
调研文献，发现目前从金针菇发酵液中分离得到的化合物，仅见于5个侧柏烯型倍半職，该类化合物显示了较好的抗菌活性，如抗真菌及抗细菌等(Ishikawa,N.K., Yamaji, K., Tahara, S., Fukushi, Y., & Takahashi, K.(2000).Highly oxidizedcuparene-typesesquiterpenes from a mycelia culture of Flammulina velutipes.Phytochemistry，54，777-782.)。据报道，该家族的Enokipodin D对枯草芽孢杆菌具有较好的抗菌活性(Ishikawa,N.K.，Fukushi，Y.，Yamaji，K.,Tahara,S.，& Takahashi Κ.(2001).Antimicrobial cuparene-type sesquiterpenes，enokipodins C and D,from a mycelialcultureof Flammulina velutipes.Journal ofNatural Products，64，932-934.)。
发明内容
本发明的目的是提供一种降倍半萜类化合物及其制备方法。本发明所提供的降倍半職类化合物是从食用菌金针燕Flammulina velutipes的
大米发酵物中提取得到的，其结构式如式I所示:
权利要求
1.结构式如式I所示化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物:
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物，其特征在于:所述下述化合物1-化合物6中的任意一种: 化合物1:式I中，Cl与C2之间、C2与C7之间以及C5与C6之间均形成碳碳单键，R1为双键氧，R2为羟基，R3为羟基，R4为氢，R5为氢； 化合物2:式I中，Cl与C2之间、C2与C7之间以及C5与C6之间均形成碳碳单键，R1为双键氧，R2为羟基，R3为双键氧，R4为氢，R5为氢； 化合物3:式I中，Cl与C2之间、C2与C7之间以及C5与C6之间均形成碳碳单键，R1为双键氧，R2为氢，R3为羟基，R4为氢，R5为氢； 化合物4:式I中，Cl与C2之间形成碳碳双键、C2与C7之间以及C5与C6之间均形成碳碳单键，R1为双键氧，R2不存在，R3为氢，R4为羟基，R5为氢； 化合物5:式I中，Cl与C2之间形成碳碳双键、C2与C7之间以及C5与C6之间均形成碳碳单键，R1为氢，R2不存在，R3为氢，R4为羟基，R5双键氧； 化合物6:式I中，Cl与C2之间以及C2与C7之间形成均形成碳碳单键、C5与C6之间形成碳碳双键，R1双键氧，R2不存在，R3为羟基，R4不存在，R5为氢。
3.制备权利要求2中所述化合物的方法，包括下述步骤: 1)将金针燕(Flammulinavelutipes)进行固体发酵培养,收集发酵培养物； 2)向所述发酵培养中加入有机溶剂进行提取，将提取液浓缩干燥得到粗提物； 3)将所述粗提物经硅胶柱层析分离，以氯仿-丙酮为洗脱剂进行梯度洗脱，分别收集100%氯仿梯度的洗脱物和氯仿-丙酮体积比为30: I梯度的洗脱物；将收集的100%氯仿梯度的洗脱物经反相硅胶柱层析，以甲醇-水为洗脱剂进行梯度洗脱，分别收集甲醇-水体积比为60: 40梯度的洗脱产物以及甲醇-水体积比为70: 30梯度的洗脱产物；将甲醇-水体积比为60: 40梯度的洗脱产物经制备HPLC分离纯化，以甲醇-水为流动相进行洗脱，得到化合物3、5、6 ;将甲醇-水体积比为70: 30梯度的洗脱产物经制备HPLC分离纯化，以甲醇-水为流动相进行洗脱，得到化合物2、4;将氯仿-丙酮体积比为30: I梯度的洗脱物经反相硅胶柱层析，以甲醇-水为洗脱剂进行梯度洗脱，收集甲醇-水体积比为40: 60梯度的洗脱产物，将所述洗脱产物经制备HPLC分离纯化，以甲醇-水的混合溶剂进行洗脱，得到化合物I。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于:步骤I)所述固体发酵中所用的培养基为稻米培养基；所述固体发酵培养的条件为:避光在22-28°C培养40天35-45天； 所述金针燕(Flammulina velutipes),其保藏编号:CGMCC5.786。
5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于:步骤2)中所述有机溶剂为乙酸乙酯，所述提取至少进行3次；每次提取的时间为4-10天。
6.权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物在制备真核生物肿瘤细胞增殖抑制剂中的应用或在制备预防和/或治疗肿瘤药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于:所述真核生物为哺乳动物；所述肿瘤细胞为癌细胞，所述癌细胞具体为宫颈癌细胞、口腔癌细胞、肝癌细胞、前列腺癌细胞、肺癌细胞、结直肠癌细胞、胃癌细胞或乳腺癌细胞。
8.权利要求6所述的应用，其特征在于:所述肿瘤为癌；所述癌具体为宫颈癌、口腔癌、肝癌、前列腺癌、肺癌、结直肠癌、胃癌或乳腺癌。
9.一种药物，它的有效成分为权利要求1或2中所述化合物或其药学上可接受的盐、酯、溶剂合物；所述药物为抑制真核生物肿瘤细胞增殖的药物或预防和/或治疗肿瘤的药物。
10.根据权利要求9所述的药物，其特征在于:所述真核生物为哺乳动物；所述肿瘤细胞为癌细胞；所述癌细胞具体为宫颈癌细胞、口腔癌细胞、肝癌细胞、前列腺癌细胞、肺癌细胞、结直肠癌细胞、胃癌细胞或乳腺癌细胞 所述肿瘤为癌；所述癌具体为宫颈癌、 口腔癌、肝癌、前列腺癌、肺癌、直肠癌、胃癌或乳腺癌。
全文摘要
本发明公开了一种降倍半萜类化合物及其制备方法与应用。发明所提供的化合物是从食用菌金针菇Flammulina velutipes的大米发酵物中提取得到的，其结构式如式I所示，其中，R1和R5均选自双键氧、羟基或氢；C1与C2之间或C2与C7之间为碳碳单键或双键，且不同时为碳碳双键；当C1与C2之间以及C2与C7之间同时为碳碳单键时，R2为氢或羟基；当C1与C2之间或C2与C7之间为碳碳双键时，R2不存在；当C1与C2之间形成碳碳单键时，R3为双键氧、羟基或氢；当C1与C2之间形成碳碳双键时，R3为羟基或氢；C5与C6之间形成碳碳单键或碳碳双键，当C5与C6之间形成碳碳单键时，R4为氢或羟基，当C5与C6之间形成碳碳双键时，R4不存在。经实验证实，该类化合物可作为细胞增殖抑制剂或抗肿瘤剂。(式I)
文档编号A61K31/343GK103183655SQ201110443960
公开日2013年7月3日 申请日期2011年12月27日 优先权日2011年12月27日
发明者刘宏伟, 宝丽, 王雅琪 申请人:中国科学院微生物研究所