专利名称：：基于4-硫脲基-亚氨基甲基吡啶鎓高氯酸盐的结核病药物制备和治疗方法
技术领域：
：本发明涉及化学-医药工业的领域，具体地涉及一种新型抗结核病(TB)治疗剂(treatment)，其包含作为活性成分的处于治疗有效且安全水平的4-硫脲基-亚氨基甲基批唳鐵高氯酸盐(4-thioureido-iminomethylpyridiniumperchlorate)以及药用赋形剂。另外，此新产品涉及一种制备方法以及一种通过联合使用其他TB药物来治疗和预防所有形式的肺部和肺外TB的方法。背景来自TB的高死亡率是一个紧迫的健康问题。全世界，根据世界卫生组织(WHO)数据，在2007年估计有927万TB发病病例。这从2006年的924万例、2000年的830万例、以及1990年的660万例是增加的。2007年中估算的总病例中的大多数在亚洲(55%)和·非洲(31%)，其中小比例在东地中海(6%)、欧洲(5%)和美洲(3%)。2007年总发病率最高的5个主要国家是印度(200万)、中国(130万)、印度尼西亚(53万)、尼日利亚(46万)和南非(46万)。在927万发病病例中，大约137万(15%)是HIV阳性的；这些HIV阳性病例中的79%在非洲而11%在东南亚。尽管由于人口增长TB发病病例的总数在绝对数量上是增加的，但病例数/总人口在下降的。下降速度慢，低于1%/年。全世界，比率在2004年达到最高为142例/100，000人口。在2007年，为大约139个发病病例/100，000人口。发病率在6个WHO区域中的5个中下降(除了欧洲，该处发病率大致稳定)。大约有50万多药耐药TB(MDR-TB)病例。有27个国家(其中15个在欧洲)，其占据所有这样的病例的85%。依据MDR-TB病例总数，最突出的国家是印度(131，000)、中国(112，000)、俄罗斯(43，000)、南非(16，000)、和孟加拉国(15,000)。到2008年底，55个国家和地区已报道了至少一个广泛耐药TB(XDR-TB)病例[2009年世界卫生组织(WHO)报告[http://www.who.int/tb/publications/global_report/2009/key_points/ru/index,html]。TB控制的显著成果与药物治疗相关联。已有大量的这样的药物。第一种化学制剂(链霉素，对氨基水杨酸钠和tibon)出现在20世纪40年代末。接着开发了异烟腙(ftivazide)、异烟肼(isoniazid),以及新型有效的化学制剂如乙硫异烟胺(ethionamide)、卡那霉素(canamycin)、紫霉素(florimycin)、环丝氨酸(cycloserine)和丙硫异烟胺(prothionamide),允许进行最恰当和有效的个体治疗。接着可利用利福平(rifampicin)、乙胺丁醇(ethambutol)和利福布汀(mycobutin),它们是非常有效的TB药物。然而，随后出现了对于这些新药物广谱耐药性的结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)。在标准TB疗法(对于所有形式的TB)中，基本且最有效的TB药物是异烟肼(异烟酸月井，INH)[M.D.MashkovskyPharmaProducts,vol.2,Kharkov,Torsing,1997，p.332-333,341-342.]，此新开发的先驱，以及利福平[M.D.MashkovskyPharmaProducts,vol.2,Kharkov,Torsing,1997,p.332-333,341-342；A.G.KhomenkoChemotherapyofPulmonaryTuberculosis(肺结核的化学疗法),Moscow:Meditsina，1980，279ρ·]。尽管异烟肼显示出良好疗效，但是它是极大毒性的(LD5tl为150mg/kg)，并且其长期给药与消化、肾、情绪、血液、和变应性疾病以及中毒性肝炎相关联。异烟肼的主要缺点在于，结核分枝杆菌中的耐药性在70%的患者中快速形成并且高达30%的TB患者变为慢性携带者。半合成抗生素利福平对于结核分枝杆菌也具有极大活性，尽管它具有高毒性作用。与异烟肼一样，利福平的主要缺点是在结核分枝杆菌中快速形成利福平耐药性，这在40-50%的TB患者中被观察到并且显著降低药物效力。在利福平耐药TB的情况下，必需联合利福平与其他TB药物(链霉素，异烟餅，乙胺丁醇等)[M.D.MashkovskyPharmaProducts,vol.2,Kharkov,Torsing,1997，p.332-333，341-342]。结核分枝杆菌对可用TB药物的耐药性使得必需开发新型治疗剂以及它们的组合。这里概述的新型制剂的目的是制备具有最小毒性作用且在储存期间稳定的新型高度有效的TB治疗剂。发明概述所述药剂是一种新型原创性TB治疗剂，其含有作为活性成分的处于治疗有效量且安全水平的4-硫脲基-亚氨基甲基吡啶鎗高氯酸盐以及药用赋形剂。4-硫脲基-亚氨基甲基吡啶鎗高氯酸盐通过之前由开发者开发的方法获得在80-85°C下在48-55%高氯酸的水-乙醇溶液中使(过量)4-吡啶醛与氨基硫脲反应[专利RU2265014，日期13.05.2004]。该TB药物含有5.0-90.O%w/w的活性成分4_硫脲基-亚氨基甲基吡啶鎗高氯酸盐和100%w/w的药用辅助物质(％通过总制剂的重量表示)。制剂中活性成分的有效量为5至1，OOOmg。该药剂优选包含至少再有一种另外的TB药剂以产生协同作用。所述治疗剂可以包含作为另外的TB药剂的活性成分如异烟肼、吡嗪酰胺(pyrazinamid)、利福平、利福布汀(rifabutin)、amycacin、乙胺丁醇、以及氟喹诺酮抗生素或它们的组合。制剂优选地可以为薄膜衣片(肠溶包衣改善释放片)、或组合片剂、胶囊剂、粒齐U、栓剂和混悬剂的形式。本发明的药物剂型可以利用常规技术制备[PharmaceuticalTechnology.DosageFormtechnology,2nded.,Moscow,2006]。给药可以是口腔或肠胃外的。药剂的剂量取决于患者年龄、症状和体重以及给药途径。除了活性成分之外，该药物可以包含赋形剂如粘合剂、填充材料(bulkingmaterial)、防腐剂、助流剂、软化剂、润湿剂(humectant)、分散剂、乳化剂、稀释剂、抗氧化剂和/或抛射剂和延长剂(prolongator)[Suckeretal.PharmazeutischeTechnologie,Thieme-Verlag,Stuttgart,1991]。目标添加剂优选是蔗糖、聚维酮、微晶纤维素、胶体二氧化硅、乙基纤维素、甲基丙烯酸和丙烯酸乙酯的共聚物、柠檬酸三乙酯、聚乙二醇(macragol)、滑石、氧化铁染料，以活性成分的重量百分比表示的含量为蔗糖3·1-50.4聚维酮0.9-14.4微晶纤维素1·1-18.O胶体二氧化硅0·2-3.6乙基纤维素0·2-3.6用于制备片剂的最常用技术是三种技术方法湿法制粒，干法制粒和直接压片。然而，提供了一种用于制备新型TB治疗剂的新方法。为此，最佳技术是湿法制粒程序，包括混合、润湿、制粒、干燥、撒粉(dusting)和压片[DosageFormtechnology,Ed.L.A.Ivanova,MoscowMeditsina,1991,vol.2,p.142,223.]。该方法涉及以下步骤(a)使4-硫脲基-亚氨基甲基吡啶鎗高氯酸盐、胶体二氧化硅、交聚维酮(crosspovidone)、硬脂酸镁、聚维酮、微晶纤维素、轻丙甲纤维素(hypromellose)(轻丙基甲基纤维素)、滑石、聚乙二醇、丙二醇、二氧化钛和黄氧化铁的粉末单独地通过网筛进行筛分；(b)为了制备润湿剂，将纯净冷水和聚维酮放入反应器中并在60°C下混合30min直至获得浅黄色的清澈同质溶液；(c)为了制备用于压片的软材(mass)，将4-硫脲基-亚氨基甲基吡啶鎗高氯酸盐和微晶纤维素混合15min,然后加入润湿剂并混合至少15min直至获得均勻同质软材；(d)使步骤(C)获得的软材经受湿法制粒；(e)使在阶段⑷获得的湿法粒化材料在0.2mPa和55±2°C下干燥20min直至残余水分含量为1.0-2.0%；(f)使在步骤(e)获得的经干燥的粒化材料经受撒粉和干法制粒，其中它被放入振动筛料斗(hopper)中，然后与防粘剂(气相二氧化娃(aerosil),交聚维酮,硬脂酸镁)一起放入混合器，避免粉尘产生，并混合15min以获得用于压片的软材；(g)在压片机中对步骤(f)中获得的用于压片的软材进行压片；(h)片芯(tabletcore)用包含羟丙甲纤维素混合物、黄氧化铁、聚乙二醇、滑石、丙二醇和二氧化钛的水混悬液涂覆以获得最终产品。最终片剂是椭圆形、两面凸起的，并且涂覆有黄色至深黄色的薄膜。当破裂时，每个片剂的破碎区为浅黄色至绿黄色。药物收率为99.47%。利用此方法，有可能获得最大的这样的收率。还提出了用于制备所述新型TB治疗剂的第二方法。这涉及直接压片和湿法制粒程序，包括混合、润湿、制粒、滚轧直至期望尺寸、包衣、以及干燥[DosageFormtechnology,Ed.L.A.Ivanova,MoscowMeditsina,1991,vol.2，p.142，223]。在此中，将4-硫脲基-亚氨基甲基吡啶鎗高氯酸盐与胶体二氧化硅、微晶纤维素和乙基纤维素组合；该混合材料与3.0-5.O%聚维酮和30.0-35.O%糖浆的水溶液混合；制粒；以及滚轧。颗粒在40-45°C下干燥直至残余水分含量为I.5-4.5%。利用已建立的技术来涂布粒芯(granulecore),其中使用甲基丙烯酸-丙烯酸乙酯共聚物的20%水溶液以及滑石和氧化铁的颜料悬液。这里概述的新药中详细描述了一种联合其他TB药物用于治疗和预防所有形式的肺部和肺外TB的方法。在此治疗方案下，药物可以通过口服或胃肠外(皮下，静脉内，肌内，腹膜内)以20mg/kg(l,200mg/kg)的单次日剂量给药,其中最大单次剂量为30mg/kg(l,800mg/天)。为了减慢在结核分枝杆菌中形成耐药性，该药物与其他TB药物或它们的组合(异烟肼、吡嗪酰胺、利福平、利福布汀、amycacin、乙胺丁醇、氟喹诺酮抗生素)一起开处方。新型治疗剂的生物学活性用于研究新型治疗剂的抗结核病活性的材料和方法I.体外活性的评估(微生物的培养和方法)使用以下微生物株I)来自结核分枝杆菌复合群(Mycobacteriumtuberculosiscomplex)的实验室试验株，其获自Tarasevich州立生物医学制剂标准化和控制科学研究所(TarasevichStateScientificResearchInstitutionforStandardizationandControlofBiomedicalPreparation)并且对于当前TB药物敏感-结核分枝杆菌Erdman(M.tuberculosisErdman)；-结核分枝杆菌H37Rv(M.tuberculosisH37Rv)；-结核分枝杆菌“Academia”(M.tuberculosis“Academia”)；-牛分枝杆菌bovinus8(M.bovisbovinus8)；2)分离自患有新诊断的TB患者的具有多药耐药性的培养物(14株)-no.5419StPIPl，抗异烟肼(10μg/ml)、利福平(40μg/ml)和链霉素(50μg/ml)；-no.2483StPIP，抗异烟肼(Iμg/ml)、利福平(40μg/ml)、链霉素(5和10μg/ml)、利福布汀(40μg/ml)、乙胺丁醇(2μg/ml)；-no.3485和no.3589StPIP,抗异烟肼(Iμg/ml)、利福平(20和50μg/ml)、链霉素(50μg/ml)、卡那霉素(30μg/ml)、乙胺丁醇(2μg/ml)、乙硫异烟胺(30μg/ml)；-no.3019StPIP,抗异烟肼(I和25μg/ml)、利福平(20和50μg/ml)、链霉素和卡那霉素(分别为30和50μg/ml)、乙硫异烟胺(30μg/ml)；-no.3655StPIP，抗异烟肼(Iμg/ml)、利福平(20和50μg/ml)、链霉素(50μg/ml)、卡那霉素和乙胺丁醇(30μg/ml)；-no.3689StPIP，抗异烟肼(Iμg/ml)、利福平(20和50μg/ml)、链霉素(50μg/ml)、卡那霉素(30μg/ml)；-no.3910StPIP,抗异烟肼(Iμg/ml)、利福平(20和50μg/ml)、链霉素(50μg/ml)、卡那霉素和乙硫异烟胺(30yg/ml)；-no.1201StPIP,抗异烟肼(Iμg/ml)、利福平(20μg/ml)、链霉素(50yg/ml)、卡那霉素(30μg/ml)、乙胺丁醇(2μg/ml)；-no.41和no.779StPIP，抗异烟肼(Iμg/ml)、利福平(20和50μg/ml)、链霉素(50μg/ml)；-no.1081StPIP，抗利福平(20μg/ml)、链霉素(50μg/ml)；-no.1719和no.1279StPIP，抗异烟肼(Iμg/ml)、利福平(20μg/ml)、链霉素(50μg/ml)、卡那霉素和乙硫异烟胺(30yg/ml)；3)对于抗微生物制剂敏感的非特异性微生物(来自StPIP保藏中心，1StPIP=圣彼得堡肺结核病学研究所Roszdrav)-革兰氏阴性杆菌大肠杆菌(E.Coli)；-革兰氏阳性球菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus),金色链球菌(Streptococcusaureus),假白喉棒状杆菌(Corynebacteriumpseudodiphtericum)(类白喉杆菌(diphtheroid))。根据试验株的生物学性能，利用营养培养基中的双重系列稀释的常规方法来研究4-硫脲基-亚氨基甲基吡啶鎗高氯酸盐的抗微生物活性-具有10%正常血清的Soton合成培养基(Soton’ssyntheticmedium)(用于分枝杆菌)；-糖肉汤(用于革兰氏阳性和革兰氏阴性菌)。以5XIO6个细胞/ml的工作浓度当场制备微生物悬液。在100-0.19μg/ml范围内研究4_硫脲基-亚氨基甲基吡啶鎗高氯酸盐剂量，并且对每个培养物实施3次重复试验。向每个试验管和对照管中加入试验株的混悬液的O.2ml样品表面平板接种方法被用于分枝杆菌混悬液，而深层平板接种方法被用于非特异性细菌的混悬液。在24h和7-10天后分别测量非特异性细菌生长和分枝杆菌生长。活性标准为培养基中的新型治疗剂完全抑制细菌生长的最低浓度(最小抑制浓度，MIC，yg/ml)ο在结核病的实验模型中使用对TB药物敏感的菌株牛分枝杆菌bovinuS8。2.新型治疗剂的治疗作用的评估。为此目的，使用治疗效力指数(ITE)(%)0ITE是相对变化，其涉及比较对照组和接收新型治疗剂的动物中的TB感染的严重度。通过以下公式进行计算,He~!HtΛΛ_(j(jjyIIL>ifOI~*...........................................................................anc其中n。和nt分别是对照组和试验组中的平均值。正的ITE(正效果)表明流行程度降低或结合该新型治疗剂的TB药物的治疗活性增加。负的ITE(负效果)表明流行程度增大或结合该新型治疗剂的TB药物的治疗活性下降。当评估参比药物的活性时，ITE以类似方式计算并利用常用符号(药物名称的首字母)标明。治疗作用的变化的关系度利用等级相关系数(r)以及Y和X的回归系数测量。为此目的，使用Student-Fisher法。2.新型治疗剂的体外抗微生物活性关于新型治疗剂对来自结核分枝杆菌复合群的试验株(其对当前TB药物敏感)的生长的作用的数据提供在表I中。表I新型治疗剂对分枝杆菌的药物敏感试验株的生长的作用(分枝杆菌混悬液密度为IO6个细胞/ml)权利要求1.ー种包含活性成分和药用物质的结核病治疗剂，其中所述活性成分是治疗有效且安全的量的4-硫脲基-亚氨基甲基吡啶鎗高氯酸盐。2.根据权利要求I所述的结核病治疗剂，其包含以所述制剂的重量百分比表示的5.0-90.0%w/w的4-硫脲基-亚氨基甲基吡啶鎗高氯酸盐和100%w/w的药用赋形剂。3.根据权利要求I所述的结核病治疗剂，其包含蔗糖、聚维酮、微晶纤维素、胶体ニ氧化硅、以及こ基纤维素，以所述片芯的重量百分比表示的量为-鹿糖3.1-50.4_聚维酮0.9-14.4-微晶纤维素1.1-18.0-胶体ニ氧化硅0.2-3.6-こ基纤维素0.2-3.6。4.根据权利要求I所述的结核病治疗剂，其包衣包含甲基丙烯酸和丙烯酸こ酯的共聚物、柠檬酸三こ酷、聚こニ醇、滑石、以及氧化铁染料，以所述片芯的重量百分比表示的量为-甲基丙烯酸和丙烯酸こ酯共聚物3.0-4.O-こ酸三こ酯0.8-1.8-聚こニ醇0.2-0.4-滑石0.9-1.3-氧化铁染料0.2-0.3。5.根据权利要求I所述的结核病治疗剂，其包含量不超过权利要求I所述的结核病治疗剂的重量的90%的至少再有一种的另外的TB药剂。6.根据权利要求5所述的结核病治疗剂，其包含异烟肼、吡嗪酰胺、利福平、利福布汀、amycacin、こ胺丁醇、以及氟喹诺酮抗生素或它们的组合作为另外的TB药剂。7.根据权利要求I所述的结核病治疗剂，其可以为薄膜包衣片、组合片剂、胶囊剂、粒齐U、栓剂、以及混悬剂的形式。8.ー种制备权利要求1-7中任一项所述的结核病药剂的方法，所述方法包括筛分和混合活性成分和目标添加剂的粉末，压缩或润湿，湿混合物制粒，颗粒干燥，干法制粒，撒粉，片芯形成，以及薄膜包衣过程，其中a)使用湿法制粒的方法作为制备用于压片的片剂软材的方法；b)使用压片方法作为制备片芯的方法；c)使用以水混悬液形式薄膜包衣的方法作为薄膜包衣的方法。9.ー种制备权利要求1-7中任一项所述的结核病治疗剂的方法，所述方法包括成分混合，润湿，制粒，滚轧，薄膜包衣，以及干燥过程，其中a)使用通过聚维酮和糖浆的混合物逐步增加颗粒，接着进行所述干燥的方法作为制备粒剂的方法；b)使用以水混悬液形式的薄膜包衣的方法作为薄膜包衣的方法。10.一种治疗和/或预防所有形式的肺部和肺外TB的方法，其中以治疗有效量给药权利要求1-7中任一项所述的结核病治疗剂。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述治疗剂通过ロ服或肠胃外途径给药。12.根据权利要求10所述的方法，其中权利要求1-4中任一项所述的结核病药物以20mg/kg的单次日剂量给药。全文摘要本发明涉及化学-医药工业领域，具体地涉及一种结核病治疗剂，其包含作为活性成分的处于治疗有效且安全水平的4-硫脲基-亚氨基甲基吡啶鎓高氯酸盐和药用赋形剂。另外，此治疗剂涉及一种制备新型药物的方法，提供该新型治疗剂的高收率。相比于原型药物，该新型治疗剂具有更高的抗结核病活性(高200倍)和更低的毒性(低2.4倍)，并且在长期储存期间稳定。通过利用该新型治疗剂联合其他TB药物，此药剂可以被用于治疗和预防所有形式的肺部和肺外TB。文档编号A61K31/47GK102844024SQ201180005281公开日2012年12月26日申请日期2011年4月12日优先权日2010年4月20日发明者亚历山大·谢尔盖耶维奇·古今,塔季扬娜·伊万诺夫娜·维诺格拉多娃,派卓·卡齐米罗维奇·亚布隆斯基,詹纳蒂·安德垒维奇·巴秋宁,纳塔利娅·维亚切拉斯拉沃娃·扎博洛特内,斯韦特兰娜·尼古拉耶芙娜·瓦西里娃,艾莱克伊·维拉迪米洛维奇·马利今申请人:法玛西泰股份公司