专利名称：枸杞叶总黄酮提取物及其制备方法
技术领域：
本发明属于枸杞叶总黄酮提取技术领域，特别涉及一种以枸杞叶为原料提取的枸杞叶总黄酮提取物及其制备方法。二、技术背景枸杞)是爺科枸杞属的多年生植物,分布于我国西北地区。枸杞叶俗称天精草，在传统中(藏)药中主要具有补肾生精、养肝、明目安神等作用，《本草纲目》中称枸杞叶“有除烦益志补五劳七伤，壮心气，除热毒，散疮肿，除风明目”之功效。据研究，枸杞叶的活性成分与枸杞果实基本一致，而且在某些营养元素上甚至超过枸杞果实。枸杞叶总黄酮提取物的药理性质的报道较少。现在发现的枸杞叶总黄酮提取物的药理活性仅仅停留在抗氧化活性的水平上。邹耀洪等分离出了枸杞叶中的5种黄酮类化合 物，分别为5，7，3’-三羟基-6，4’，5’-三甲氧基黄酮、金合欢素(4’-甲氧基-5，7-二羟基黄酮)、金合欢素-7-0-a-L-鼠李糖基(I— 6)-β-D-葡萄糖苷、木犀草素(5，7，3’，4’ -四羟基黄酮)和芦丁，这5种黄酮类化合物中木犀草素抗氧化的活性较强，优于合成类抗氧化剂3，5-二叔丁基-4-羟基甲基苯(分析测试学报，2002，21 (I) : 76-78)。目前枸杞叶仅用于枸杞茶使用，尚未发现采用枸杞叶为原料提取枸杞叶总黄酮技术的有关报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种以枸杞叶为原料提取枸杞叶总黄酮提取物和制备方法，把枸杞叶中的最有经济和药用价值的枸杞叶总黄酮提取物提取出来，使过去被人们忽视的甚至遗弃的枸杞叶变废为宝，大大地发挥枸杞叶的经济和社会效益。技术方案为本发明的枸杞叶总黄酮提取物是采用如下制备方法制备而来的，其制备方法是以枸杞叶作原料，采用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物作提取溶剂进行提取。提取制备过程包括用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作提取溶剂，以枸杞叶或其粉末提取溶剂为1:5-30的重量比进行配比，把配比后的枸杞叶或其粉末和提取溶剂进行混合，再经浸泡、煎熬或回流提取、过滤去渣、浓缩回收有机试剂得浸膏，然后对浸膏进行分离纯化得枸杞叶总黄酮提取物。分离纯化方法有三种，它们分别为①采用丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作溶剂对浸膏进行萃取，回收有机溶剂后，经过真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥再去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物；②采用吸附树脂对浸膏进行柱层析，上柱过程中任意选择黄酮类显色剂检测流出液以确定树脂是否吸附饱和，前后两次各用1-5倍柱体积的水、O. 5-5倍柱体积的乙醇体积浓度为1-99%的乙醇水溶液洗涤，再用3-10倍树脂柱体积的乙醇体积浓度为1-99%的乙醇水溶液洗脱，浓缩，并将浓缩液进行真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物；③用无机酸将浸膏的PH值调至O. 1-3，在O—42°C下静置，分离沉淀物并干燥沉淀物去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物。上述分离纯化的方法可单独应用得枸杞叶总黄酮提取物，也可任意组合应用得枸杞叶总黄酮提取物。上述方法所得的枸杞叶总黄酮提取物中黄酮类化合物的质量之和可为提取物总质量的1-100%，其它物质为非黄酮类化合物，这些总黄酮化合物，可以通过进一步纯化技术进行分离得到，这些纯化方法对本领域的技术人员来说是不言自明的。本发明的原料枸杞叶或其粉末是干净的干燥枸杞叶，或是干净的干燥枸杞叶经粉碎后的粉末，统称为枸杞叶或其粉末。因枸杞叶总黄酮提取物它易溶于水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物的有机溶剂中，故采用上述这些溶剂作提取溶剂进行提取。无机酸如盐酸、硝酸、硫酸、碳酸、硅酸……，以及它们二至多种的混合物均可。本发明具有如下优点1、本发明首次发现枸杞叶中含有总黄酮类化合物，它采用科学合理的提取方法获得了具有十分显著经济效益的具有降血糖、降血脂和降血压活性的枸杞叶总黄酮提取物，一方面可以给有以上病症的病人新的治疗选择，一方面对深入开发枸杞叶资源具有重要意义；2、本发明提供的制备方法具有工序少，操作简便，生产周期短而且可以除去原料中的残留重金属；3、本发明提供的枸杞叶总黄酮提取物具有治疗 和/或预防糖尿病、高血脂和高血压的功能，资源得到高效充分利用，经济和社会效益十分显著。四、具体实施方案
实施例I:本发明的枸杞叶总黄酮提取物是采用如下制备方法制得的，其制备方法是用水作提取溶剂，以枸杞叶提取溶剂水为1:5的重量比进行配比，把配比后的枸杞叶和提取溶剂水进行混合，再经浸泡、煎熬至枸杞叶中的枸杞叶总黄酮提取物全部提取后，过滤去渣、浓缩提取液得浸膏，然后对浸膏
采用丙酮作溶剂对浸膏进行萃取，对萃取液回收有机溶剂后，经过真空干燥去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物产品。实施例2 :本发明的枸杞叶总黄酮提取物是采用如下制备方法制得的，其制备方法是用含水35%的甲醇作提取溶剂，以枸杞叶提取溶剂为1:10的重量比进行配比，把配比后的枸杞叶和提取溶剂进行混合，再经浸泡、回流提取至枸杞叶中的枸杞叶总黄酮提取物全部提取后、过滤去渣，把提取液进行浓缩回收溶剂得浸膏，然后对浸膏采用乙酸乙酯作溶剂对浸膏进行萃取，对萃取液回收溶剂后，经过喷雾干燥再去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物产品。实施例3 :本发明的枸杞叶总黄酮提取物是采用如下制备方法制得的，其制备方法是用含水率为75%的乙酸乙酯作提取溶剂，以枸杞叶粉末提取溶剂为I: 30的重量比进行配比，把配比后的枸杞叶粉末和提取溶剂进行混合，再经浸泡、回流提取至枸杞叶粉末中的枸杞叶总黄酮提取物全部提取后、过滤去渣、把提取液进行浓缩回收溶剂得浸膏，然后对浸膏采用丙酮、乙酸乙酯、正丁醇各为三分之一的混合物作溶剂对浸膏进行萃取，对萃取液回收溶剂后，经过冷冻干燥再去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物产品。实施例4 :本发明的枸杞叶总黄酮提取物是以枸杞叶粉末作原料，采用含水率45%的乙醇、含水率15%的正丁醇以8 2的体积比配比混合作提取溶剂，以枸杞叶粉末提取溶剂为1:20的重量比进行配比，把配比后的枸杞叶粉末和提取溶剂混合，再经浸泡、回流提取至枸杞叶粉末中的枸杞叶总黄酮提取物提取干净后、过滤去渣、把提取液进行浓缩回收有机试剂得浸膏，然后对浸膏采用吸附树脂进行柱层析，上柱过程中任意选择黄酮类显色剂检测流出液以确定树脂是否吸附饱和，前后两次各用I倍柱体积的水、5倍柱体积的乙醇体积浓度为1%的乙醇水溶液洗涤，再用3倍树脂柱体积的乙醇体积浓度为99%的乙醇水溶液洗脱，浓缩，并将浓缩液进行真空干燥去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物。实施例5 :本发明的枸杞叶总黄酮提取物是采用如下制备方法制备而来的，其制备方法是以枸杞叶和枸杞叶粉末的混合物为原料，用不含水的甲醇、丙酮以4:6体积比配比的混合物作提取溶剂，以枸杞叶和枸杞叶粉末提取溶剂为1:10的重量比进行配比，把配比后的枸杞叶和枸杞叶粉末和提取溶剂混合，再经浸泡、回流提取至枸杞叶粉末中的枸杞叶总黄酮提取物提取干净后、过滤去渣、把提取液进行浓缩回收有机溶剂得浸膏，然后对浸膏采用吸附树脂进行柱层析，上柱过程中任意选择黄酮类显色剂检测流出液以确定树脂是否吸附饱和，前后两次各用5倍柱体积的水、O. 5倍柱体积的乙醇体积浓度为99%的乙醇水溶液洗涤，再用10倍树脂柱体积的乙醇体积浓度为1%的乙醇水溶液洗脱,浓缩,并将浓缩液进行喷雾干燥去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物。
实施例6 :本发明的枸杞叶总黄酮提取物是采用如下制备方法制得的，其制备方法是用含水35%的甲醇作提取溶剂，以枸杞叶提取溶剂为1:10的重量比进行配比，把配比后的枸杞叶和提取溶剂进行混合，再经浸泡、回流提取至枸杞叶中的枸杞叶总黄酮提取物全部提取后、过滤去渣，把提取液进行浓缩回收溶剂得浸膏，然后用盐酸的无机酸将浸膏的pH值调至O. 1，在0°C下静置，再分离沉淀物并干燥沉淀物去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物。实施例7 :本发明的枸杞叶总黄酮提取物是以枸杞叶粉末作原料，采用含水率45%的乙醇、含水率15%的正丁醇以8 2的体积比配比混合作提取溶剂，以枸杞叶粉末提取溶剂为1:20的重量比进行配比，把配比后的枸杞叶粉末和提取溶剂混合，再经浸泡、回流提取至枸杞叶粉末中的枸杞叶总黄酮提取物提取干净后、过滤去渣、把提取液进行浓缩回收有机试剂得浸膏，然后对浸膏用硝酸和硫酸以I :1体积比配比的混合无机酸将浸膏的PH值调至3，在42°C下静置，分离沉淀物并干燥沉淀物去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物。实施例8 :本发明的枸杞叶总黄酮提取物是采用如下制备方法制备而来的，其制备方法是以枸杞叶和枸杞叶粉末的混合物为原料，用不含水的甲醇、丙酮以4:6体积比配比的混合物作提取溶剂，以枸杞叶和枸杞叶粉末提取溶剂为1:10的重量比进行配比，把配比后的枸杞叶和枸杞叶粉末和提取溶剂混合，再经浸泡、回流提取至枸杞叶粉末中的枸杞叶总黄酮提取物提取干净后、过滤去渣、把提取液进行浓缩回收有机溶剂得浸膏，然后用碳酸的无机酸将浸膏的PH值调至I. 3，在25°C下静置，分离沉淀物并干燥沉淀物去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物。
权利要求
1.一种枸杞叶总黄酮提取物的制备方法，其特征是以枸杞叶作原料，用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作提取溶剂，以枸杞叶或其粉末提取溶剂为1:5-30的重量比进行配比，把配比后的枸杞叶或其粉末和提取溶剂进行混合，再经浸泡、煎熬或回流提取、过滤去渣、浓缩回收有机试剂得浸膏，然后对浸膏进行分离纯化得枸杞叶总黄酮提取物。
2.根据权利要求I所述的枸杞叶总黄酮提取物的制备方法，其特征是对浸膏进行分离纯化的方法是采用丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作溶剂对浸膏进行萃取，回收有机溶剂后，经过真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥再去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物。
3.根据权利要求I所述的枸杞叶总黄酮提取物的制备方法，其特征是对浸膏进行分离纯化的方法是采用吸附树脂对浸膏进行柱层析，上柱过程中任意选择黄酮类显色剂检测流出液以确定树脂是否吸附饱和，前后两次各用1-5倍柱体积的水、O. 5-5倍柱体积的乙醇体积浓度为1-99%的乙醇水溶液洗涤，再用3-10倍树脂柱体积的乙醇体积浓度为1-99%的乙醇水溶液洗脱，浓缩，并将浓缩液进行真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物。
4.根据权利要求I所述的枸杞叶总黄酮提取物的制备方法，其特征是对浸膏进行分离纯化的方法是用无机酸将浸膏的PH值调至O. 1-3，在O—42°C下静置，分离沉淀物并干燥沉淀物去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物。
5.一种枸杞叶总黄酮提取物，其特征是它由如下制备方法制备而来，其制备方法是以枸杞叶作原料，用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作提取溶剂，以枸杞叶或其粉末提取溶剂为1:5-30的重量比进行配比，把配比后的枸杞叶或其粉末和提取溶剂进行混合，再经浸泡、煎熬或回流提取、过滤去渣、浓缩回收有机试剂得浸膏，然后对浸膏进行分离纯化得枸杞叶总黄酮提取物。
6.根据权利要求5所述的枸杞叶总黄酮提取物，其特征是对浸膏进行分离纯化的方法是采用丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作溶剂对浸膏进行萃取，回收有机溶剂后，经过真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥再去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物。
7.根据权利要求5所述的枸杞叶总黄酮提取物，其特征是对浸膏进行分离纯化的方法是采用吸附树脂对浸膏进行柱层析，上柱过程中任意选择黄酮类显色剂检测流出液以确定树脂是否吸附饱和，前后两次各用1-5倍柱体积的水、O. 5-5倍柱体积的乙醇体积浓度为1-99%的乙醇水溶液洗涤，再用3-10倍树脂柱体积的乙醇体积浓度为1-99%的乙醇水溶液洗脱，浓缩，并将浓缩液进行真空干燥、喷雾干燥或冷冻干燥去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物。
8.根据权利要求5所述的枸杞叶总黄酮提取物的，其特征是对浸膏进行分离纯化的方法是用无机酸将浸膏的PH值调至O. 1-3，在O—42°C下静置，分离沉淀物并干燥沉淀物去除残余的水和溶剂得枸杞叶总黄酮提取物。
全文摘要
本发明属于枸杞叶总黄酮提取技术领域，特别涉及一种提取枸杞叶总黄酮提取物及其制备方法。枸杞叶总黄酮提取物是用如下方法制得，用水、含水或者不含水的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇或其它的液体有机化合物之一种或几种的混合物作提取溶剂，以枸杞叶或其粉末提取溶剂为1:5-30的重量比进行配比，把配比后的枸杞叶或其粉末和提取溶剂进行混合，再经浸泡、煎熬或回流提取、过滤去渣、浓缩回收有机试剂得浸膏，然后对浸膏进行分离纯化得枸杞叶总黄酮提取物。优点是首次发现枸杞叶中含有总黄酮类化合物，它采用科学合理的提取方法获得了具有十分显著经济效益的枸杞叶总黄酮提取物。
文档编号A61P3/10GK102836280SQ20121034195
公开日2012年12月26日 申请日期2012年9月17日 优先权日2012年9月17日
发明者梅丽娟, 江磊, 于瑞涛, 陶艳铎, 陶德喜 申请人:青海红鼎生物工程有限公司