专利名称：葛根素口服黏附微球及制备方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种葛根素口服黏附微球及制备方法。
背景技术：
葛根素(Puerarin)是从葛根(Radix Puerariae)中提炼得到的有效成分，临床上葛根素常以注射剂用于心脑血管病的治疗，能够扩张冠状动脉和脑血管。其化学名为4’，
7—二羟基一 8 — β 一 D葡萄糖异黄酮，具有活血化瘀、改善微循环作用，能够扩张冠状动脉和脑血管，常用于各种心脑血管疾病的治疗。近年来，随着葛根素注射剂在临床应用的日益广泛，其不良反应报道数量也明显增多。2003年2月，国家药品不良反应检测中心发布的第三期《药品不良反应通报》上，葛根素作为可疑严重不良反应的药物榜上有名。其中以溶血反应数量最多占21. 33% ;其余依次为皮肤损害占20. 67% ;循环系统损害占16% ;呼 吸系统损害占12. 67%，消化系统损害占11. 33%;药物热占7. 33%和过敏性休克占6. 00%等。国家食品药品监督管理局对葛根素等5种不良反应发生频率较高的药品发出警告，特别是《国家药品不良反应信息通报》先后两次就葛根素注射剂的严重不良反应提出警示，使人们对葛根素注射液的安全性格外关注。由于注射给药的安全性有待提高，且不能自主给药，因而限制了葛根素的应用。另外，在脑血管病后期，病人需要长期恢复治疗，但因注射剂不易实现自主给药，一定程度上限制了葛根素的临床应用。口服给药病人依从性较好，适合脑血管疾病恢复期的自主给药，但普通口服制剂生物利用度低，需要开发新型口服制剂。对于脑血管疾病而言，需要长期用药，除急症抢救时应用注射给药外，一般采用口服给药。口服给药与注射给药相比，生产成本大大降低，有利于降低患者的经济负担。目前市场上以葛根素为主要成分的剂型除注射剂外多为口服制剂，但因葛根素结构中具有多苯环和多羟基，极性较大，水溶性较小，水中的溶解度仅为I. lX10_2mol / L，脂溶性也小，难以被胃肠道等生物膜吸收，大鼠灌胃和临床口服葛根素的生物利用度都比较低，口服生物利用度小于15%，这在一定程度上影响其疗效的发挥。
发明内容
针对现有技术中存在的问题，本发明目的在于在提供一种葛根素口服黏附微球及制备方法。本发明通过以下技术方案加以实现
所述的葛根素口服黏附微球，其特征在于由以下重量份数的组分组成
葛根素100份
缓释骨架材料 100-300份 黏附材料50-100份
乳化剂50-100份
液体石腊100-300份
其中缓释骨架材料为水不溶性缓释骨架材料乙基纤维素，黏附材料为卡波姆；乳化剂为蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂及span-80中的一种或几种。所述的葛根素口服黏附微球，其特征在于由以下重量份数的组分组成
葛根素100份
缓释骨架材料 100-250份 黏附材料50-80份
乳化剂50-80份
液体石腊100-250份
其中缓释骨架材料为水不溶性缓释骨架材料乙基纤维素，黏附材料为卡波姆；乳化剂为蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂及span-80中的一种或几种。所述的葛根素口服黏附微球的制备方法，其特征在于按以下工艺步骤
(1)按重量份数，取葛根素100份、缓释骨架材料100-300份，置于100-300份无水乙醇或丙酮中，搅拌使缓释骨架均匀分散，然后加入50-100份黏附材料后密闭、10°C _25°C下浸泡12-24h，得浸泡液；
(2)将步骤(1)制得的浸泡液用磁力搅拌器在800 1200r .HiirT1，0~10°C下搅拌，制得混悬液；
(3)按重量份数，取乳化剂50-100份，加入到100-300份液体石蜡中搅拌5_10min，搅拌速度为400-1200 r · mirT1，制得油相；
(4)将步骤(2)中制得的混悬液加入到步骤(3)制得的油相中进行搅拌，在0-10°C，800-1200 r .mirT1下搅拌30_60min后将温度升至20_30°C，无水乙醇或丙酮随温度的升高逐渐挥发，微球形成，过20-40目筛，收集微球，以重量份数为50-150份的石油醚洗涤3-6次，置于干燥器中室温干燥即得。所述的葛根素口服黏附微球的制备方法，其特征在于所述的缓释骨架材料为乙基纤维素，其粘度为45cp,所述黏附材料为卡波姆934p。所述的葛根素口服黏附微球的制备方法，其特征在于步骤(I)中的浸泡温度为15-20°C，浸泡时间为16-20h。所述的葛根素口服黏附微球的制备方法，其特征在于步骤(2)中的搅拌速度为1000 1200 r · mirT1，温度为:5 10。。。所述的葛根素口服黏附微球的制备方法，其特征在于步骤(3)中的搅拌时间为
8-10min，搅拌速度为:600-1000 r · mirT1。所述的葛根素口服黏附微球的制备方法，其特征在于步骤(4)中在5-10°C，1000-1200 r · mirT1 下搅拌 40_50min 后将温度升至 25_30°C。
与现有制剂相比，本发明具有以下有点
(I)包封率可达88. Γ93. 5%，载药量可达569Γ63. 4%。所制备的微球颗粒饱满，外观球形，粒径分布均匀，符合制剂学要求。该制备方法具有工艺简单、操作方便、成本低廉、易于放大、可实现工业化生产等优点，可作为一种良好的葛根素类口服制剂用于脑血管类疾病恢复期的治疗。(2)该口服黏附微球可延长葛根素在胃粘膜的滞留时间，黏附率为89. 7^95. 5%，延长葛根素体外释放时间。(3)该口服黏附微球可提高葛根素口服生物利用度，与葛根素片相比，其相对生物利用度为919. 5% 966. 1%，即为片剂生物利用度的9. 2 9. 7倍。(4)该葛根素口服黏附微球可显著改善脑缺血大鼠的神经功能症状，增强SOD活力，降低MDA含量(即脑组织的损伤程度)。且与注射剂相比，口服依从性好，与普通口服制剂葛根素片相比，又可提高口服生物利用度的特点，弥补了目前葛根素类制剂的不足。
具体实施例方式通过以下具体实施例对本发明作进一步详述。实施例I
取葛根素100份，45cp的乙基纤维素100份，置于100份无水乙醇中，搅拌使乙基纤维素均匀分散，然后加入50份卡波姆934p，密闭，在10°C下浸泡24h后用磁力搅拌器搅拌，搅拌速度为800 r · mirT1，温度控制在0°C，制得混悬液。·
取大豆卵磷脂50份，液体石蜡100份，将大豆卵磷脂加入到液体石蜡中搅拌5min，搅拌速度为1200 r · min—1，然后将制得的混悬液加入到含有大豆卵磷脂的液体石蜡油相中，在0°C，1200 r ^irT1下搅拌30min，然后升温至30°C，无水乙醇借助温度的升高逐渐挥发，微球形成，过筛，收集20-40目的微球,石油醚洗漆3-6次,每次50份，置于干燥器中室温干燥即制得口服黏附微球。实施例2
取葛根素100份，45cp的乙基纤维素150份，置于200份丙酮中，搅拌使乙基纤维素均匀分散，然后加入60份卡波姆934p，密闭，在15°C下浸泡20h后用磁力搅拌器搅拌，搅拌速度为1000 r · mirT1，温度控制在5°C，制得混悬液。取大豆卵磷脂60份，液体石蜡200份，将大豆卵磷脂加入到液体石蜡中，搅拌8min，搅拌速度为IOOOr然后将制得的混悬液加入到含有大豆卵磷脂的液体石蜡油相中，在温度5°C，IOOOr · mirT1的转速下搅拌40min，然后升温至25°C，丙酮借助温度的升高逐渐挥发，微球形成，过筛，收集20-40目的微球，石油醚洗涤3-6次，每次70份，置于干燥器中室温干燥即制得口服黏附微球。实施例3
取葛根素100份，45cp的乙基纤维素200份，置于250份丙酮中，搅拌使乙基纤维素均匀分散，然后加入80份卡波姆934p，密闭，在20°C下浸泡16h后用磁力搅拌器搅拌，搅拌速度为1000 r · mirT1，温度控制在8°C，制得混悬液。取大豆卵磷脂75份，液体石蜡250份，将大豆卵磷脂加入到液体石蜡中，搅拌lOmin，搅拌速度为400r然后将制得的混悬液加入到含有大豆卵磷脂的液体石蜡油相中，在温度8°C，IlOOr · mirT1的转速下搅拌45min，然后升温至28°C，丙酮借助温度的升高逐渐挥发，微球形成，过筛，收集20-40目的微球，石油醚洗涤3-6次，每次90份，置于干燥器中室温干燥即制得口服黏附微球。实施例4
取葛根素100份，45cp的乙基纤维素300份，置于300份无水乙醇中，搅拌使乙基纤维素均匀分散，然后加入100份卡波姆934p，密闭，在25°C下浸泡12h后用磁力搅拌器搅拌，搅拌速度为1200 r · mirT1，温度控制在10°C，制得混悬液。取大豆卵磷脂100份，液体石蜡300份，将大豆卵磷脂加入到液体石蜡中，搅拌lOmin，搅拌速度为600r ^mirT1,然后将制得的混悬液加入到含有大豆卵磷脂的液体石蜡油相中，在温度10°C, 1200r ^mirT1的转速下搅拌50min,然后升温至20°C,无水乙醇借助温度的升高逐渐挥发，微球形成，过筛，收集20-40目的微球，石油醚洗涤3-6次，每次110份，置于干燥器中室温干燥即制得口服黏附微球。实施例5
取葛根素100份，45cp的乙基纤维素250份，置于300份无水乙醇中，搅拌使乙基纤维素均匀分散，然后加入80份卡波姆934p，密闭，在18°C下浸泡18h后用磁力搅拌器搅拌，搅拌速度为1200 r · mirT1，温度控制在10°C，制得混悬液。取大豆卵磷脂80份，液体石蜡300份，将大豆卵磷脂加入到液体石蜡中，搅拌9min，搅拌速度为SOOr · mirT1，然后将制得的混悬液加入到含有大豆卵磷脂的液体石蜡油相中，在温度5°C, 1200r · mirT1的转速下搅拌60min,然后升温至30°C,无水乙醇借助温度的升高逐渐挥发，微球形成，过筛，收集20-40目的微球，石油醚洗涤3-6次，每次130份，置于干燥器中室温干燥即制得口服黏附微球。实施例6
取葛根素100份，45cp的乙基纤维素280份，置于300份丙酮中，搅拌使乙基纤维素均匀分散，然后加入100份卡波姆934p，密闭，在18°C下浸泡20h后用磁力搅拌器搅拌，搅拌速度为1200 r · mirT1，温度控制在10°C，制得混悬液。取大豆卵磷脂90份，液体石蜡280份，将大豆卵磷脂加入到液体石蜡中，搅拌 9min，搅拌速度为IOOOr然后将制得的混悬液加入到含有大豆卵磷脂的液体石蜡油相中，在温度5°C, 1200r · mirT1的转速下搅拌60min,然后升温至28°C,无水乙醇借助温度的升高逐渐挥发，微球形成，过筛，收集20-40目的微球，石油醚洗涤3-6次，每次150份，置于干燥器中室温干燥即制得口服黏附微球。载药量和包封率的测定
取微球50mg,加入5OmL蒸懼水作为流动相,用保鲜膜封口，超声30min。振摇IOmin后用流动相定容至50mL,在5000r .mirT1条件下离心50s。取上清液ImL,再次用蒸懼水定容至50mL,用O. 45 μ m的微孔滤膜过滤,最后用高效液相色谱于248nm处检测峰面积A。色谱条件流动相甲醇0. 5%乙酸水(28 72)。岛津LC-IOAD液相色谱仪手动进样器、LC-1OADVP泵、SPD-1OAVP检测器；流动相甲醇一O. 5%乙酸水(28 72, V V);
固定相phenomenex GEMINI C18 柱，150mmX 4. 6mm, 5Mm ;
柱温25°C ；
流速1. OmL · mirT1 ；
检测波长248nm。将所测得的峰面积A值代入标准曲线方程中，求得药物含量测定值，计算溶液中的药物含量。根据测得的一定质量微球中的药物含量，按照以下公式计算载药量
并狀县―微球中药物的量彳 釣重=^L r=￡= m X 100%
微球的质量
微球中药物的量、/1ΛΛη/
包封率=投入药量 Χ100%正交实验
在单因素分析的基础上，选取乙基纤维素粘度、投药量、搅拌速度和分散相和连续相比四个因素，在单因素实验的基础上，每个因素选三个水平，设计正交表如下表。按照四因素三水平正交设计9组实验，分别测定包封率和载药量，按照包封率和载药量7 3的权重比例进行综合评分，然后进行直观分析和方差分析，优化出因素影响主次顺序和水平的优劣。表I正交因素水平表
权利要求
1.葛根素口服黏附微球，其特征在于由以下重量份数的组分组成 葛根素100份 缓释骨架材料 100-300份 黏附材料50-100份 乳化剂50-100份 液体石腊100-300份。
2.根据权利要求I所述的葛根素口服黏附微球，其特征在于由以下重量份数的组分组成 葛根素100份 缓释骨架材料 100-250份 黏附材料50-80份 乳化剂50-80份 液体石腊100-250份。
3.根据权利要求I所述的葛根素口服黏附微球，其特征在于所述缓释骨架材料为水不溶性缓释骨架材料乙基纤维素，所述黏附材料为卡波姆。
4.根据权利要求I所述的葛根素口服黏附微球，其特征在于所述乳化剂为蛋黄卵磷月旨、大豆卵磷脂及span-80中的一种或几种。
5.葛根素口服黏附微球的制备方法，其特征在于按以下工艺步骤 (1)按重量份数，取葛根素100份、缓释骨架材料100-300份，置于100-300份无水乙醇或丙酮中，搅拌使缓释骨架均匀分散，然后加入50-100份黏附材料后密闭、10°C _25°C下浸泡12-24h，得浸泡液； (2)将步骤(I)制得的浸泡液用磁力搅拌器在800 1200r .HiirT1，(TlO°C下搅拌，制得混悬液； (3)按重量份数，取乳化剂50-100份，加入到100-300份液体石蜡中搅拌5_10min，搅拌速度为400-1200 r · mirT1，制得油相； (4)将步骤(2)中制得的混悬液加入到步骤(3)制得的油相中进行搅拌，在0-10°C，800-1200 r .mirT1下搅拌30_60min后将温度升至20_30°C，无水乙醇或丙酮随温度的升高逐渐挥发，微球形成，过20-40目筛，收集微球，以重量份数为50-150份的石油醚洗涤3-6次，置于干燥器中室温干燥即得。
6.根据权利要求5所述的葛根素口服黏附微球的制备方法，其特征在于所述的缓释骨架材料为乙基纤维素，其粘度为45cp,所述黏附材料为卡波姆934p。
7.根据权利要求5所述的葛根素口服黏附微球的制备方法，其特征在于步骤(I)中的浸泡温度为15-20°C，浸泡时间为16-20h。
8.根据权利要求5所述的葛根素口服黏附微球的制备方法，其特征在于步骤(2)中的搅拌速度为:1000^1200 r · min—1，温度为:5 10。。。
9.根据权利要求5所述的葛根素口服黏附微球的制备方法，其特征在于步骤(3)中的揽拌时间为8-lOmin,揽拌速度为600-1000 r · min 1O
10.根据权利要求5所述的葛根素口服黏附微球的制备方法，其特征在于步骤(4)中在5-10°C, 1000-1200 r · mirT1 下搅拌 40_50min 后将温度升至 25_30°C。
全文摘要
本发明公开了一种葛根素口服黏附微球及制备方法，属于医药技术领域，由以下重量份数的组分组成葛根素100份，缓释骨架材料100-300份，黏附材料50-100份，乳化剂50-100份，液体石蜡100-300份。葛根素口服黏附微球的制备工艺将含有葛根素浸泡液制备成悬混液，油相的制备，将悬浮液加入到油相中搅拌，升高温度，微球形成，石油醚洗涤，室温干燥即得。该葛根素口服黏附微球可显著改善脑缺血大鼠的神经功能症状，增强SOD活力，降低MDA含量。且与注射剂相比，口服依从性好，与普通口服制剂葛根素片相比，又可提高口服生物利用度的特点，弥补了目前葛根素类制剂的不足。
文档编号A61K47/44GK102871970SQ20121041582
公开日2013年1月16日 申请日期2012年10月26日 优先权日2012年10月26日
发明者郭莹 申请人:浙江中医药大学