植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)C1纳米抗癌药物及其制备方法与流程

本发明涉及生化药物技术领域，更详细的是一种植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物及其制备方法。

背景技术：
癌症是严重危害人类健康的疾病之一，具有较高的发病率和死亡率。采用传统的抗癌药物对病人进行化疗在一定程度上可以治疗癌症，然而，在治疗过程中由于癌细胞易产生耐药性而导致化疗失效。为避免或减少这些不良反应，人们提出了许多方案，包括联合中医中药进行治疗，但是目前尚无有效的解决办法。金属离子对癌细胞的抑制作用近几十年来已陆续被报道。如锌盐与癌细胞作用后，可诱导癌细胞产生氧化应激反应，最终导致癌细胞死亡。但是，由于金属离子在水溶性环境中易于扩散，使其很难有效的作用于癌细胞。随着纳米技术的发展，将金属离子制备成含有该金属离子的不溶性固体纳米颗粒，可以克服上述困难。

技术实现要素：
本发明要解决的问题是：提供一种植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物。本发明要解决的另一问题是：提供上述植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物的制备方法。本发明提供的植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物，其特征在于：该植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物是由植物源性醇溶蛋白、ZnO和Cd(OH)Cl组成的纳米棒。本发明提供的植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物的制备方法，其特征在于：该方法是把植物源性醇溶蛋白与锌盐在乙醇和水的混合溶液中先进行螯合。随后调节pH为7.0～10.0，恒温静置反应1～10天。将所得沉淀离心富集后，重新分散在含有镉盐的乙醇和水的混合溶液中，恒温静置反应1～10天。最后，将沉淀离心富集，冷冻干燥制得植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物。所述的制备方法中，使用的植物源性醇溶蛋白包括玉米醇溶性蛋白、小麦醇溶性蛋白、大麦醇溶性蛋白和燕麦醇溶性蛋白。所述的锌盐是硝酸锌、氯化锌。所述的镉盐是硝酸镉、氯化镉。反应物中使用的植物源性醇溶蛋白浓度为0.1～20mg/mL，锌盐浓度为0.1～40mg/mL，镉盐浓度为0.15～40mg/mL，乙醇和水的混合溶液中乙醇和水的比例为19∶1～3∶2，反应温度为10～50℃。本发明的优点：1、本发明提供的植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物，其制备方法反应温度控制在10～50℃，条件温和，使用的溶剂包括水和乙醇，环境友好。2、反应不需要特殊的装备，不需要后续的复杂提纯步骤，操作方便，且产物为分散良好的植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物，适于大规模产业生产，具有广泛的应用前景。3、本发明提供的植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物对神经癌细胞(PC12)、肝癌细胞(BEL-7402)和皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10)生长具有优良的抑制作用。附图说明图1：实施例1制备的玉米醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物的红外光谱。图2：实施例1制备的玉米醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物的X衍射图谱。图3：实施例1制备的玉米醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物的透射电镜照片。图4：实施例2制备的玉米醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物的透射电镜照片。图5：实施例3制备的小麦醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物的透射电镜照片。图6：本发明制备的植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物与Corning细胞培养板(PLASTIC)的抑制(1)：神经癌细胞(PC12)；(2)：肝癌细胞(BEL-7402)和(3)：皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10)比较(癌细胞与植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物作用2天的数量)。(a)：玉米醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物；(b)：小麦醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物；(c)：大麦醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物；(d)：燕麦醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物。具体实施方式通过下述实施例将有助于理解本发明，但并不限制本发明的内容。实施例1：玉米醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物制备1.分别量取浓度为0.2mg/mL的玉米醇溶蛋白乙醇水溶液(v/v＝3∶2)40mL，和浓度为0.2mg/mL的氯化锌乙醇水溶液(v/v＝3∶2)40mL，将二者混合。用氢氧化钠的乙醇水溶液(v/v＝3∶2)调节pH为7.0，在10℃恒温静置反应10天。10,000转/分钟离心富集沉淀。2.重新将沉淀分散在40mL含有0.15mg/mL氯化镉的乙醇水溶液(v/v＝3∶2)中，在10℃恒温静置反应10天。10,000转/分钟离心富集沉淀，冷冻干燥制得白色纳米棒状的玉米醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物。产物的红外光谱如图1所示，X衍射图谱如图2所示，透射电镜照片如图3所示。实施例2：玉米醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物制备1.分别量取浓度为40mg/mL的玉米醇溶蛋白乙醇水溶液(v/v＝19∶1)40mL，和浓度为80mg/mL的硝酸锌乙醇水溶液(v/v＝19∶1)40mL，将二者混合。用氢氧化钠的醇水溶液(v/v＝19∶1)调节pH为10.0，在50℃恒温静置反应1天。10,000转/分钟离心富集沉淀。2.重新将沉淀分散在40mL含有40mg/mL硝酸镉的乙醇水溶液(v/v＝19∶1)中，在50℃恒温静置反应1天。10,000转/分钟离心富集沉淀，冷冻干燥制得白色纳米棒状的玉米醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物。产物的透射电镜照片如图4所示。实施例3：小麦醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物制备1.分别量取浓度为20mg/mL的小麦醇溶蛋白乙醇水溶液(v/v＝17∶3)40mL，和浓度为40mg/mL的硝酸锌乙醇水溶液(v/v＝17∶3)40mL，将二者混合。用氢氧化钠的醇水溶液(v/v＝17∶3)调节pH为8.5，在30℃恒温静置反应5天。10,000转/分钟离心富集沉淀。2.重新将沉淀分散在40mL含有20mg/mL硝酸镉的乙醇水溶液(v/v＝17∶3)中，在30℃恒温静置反应5天。10,000转/分钟离心富集沉淀，冷冻干燥制得白色纳米棒状的小麦醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物。产物的透射电镜照片如图5所示。实施例4：植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物的抗肿瘤细胞疗效选取神经癌细胞(PC12)、肝癌细胞(BEL-7402)和皮肤黑色素瘤细胞(B16-F10)为模型，植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物的抗肿瘤疗效通过与细胞共孵育后的细胞存活率来评价。细胞存活率实验采用细胞计数法测定。于96孔Corning培养板预培养12小时细胞，分别加入5mg/L的植物源性醇溶蛋白共轭ZnO/Cd(OH)Cl纳米抗癌药物，并设对照孔，每组重复6次；孵育2天后，显微镜下计数，结果如图6所示。