β-阻断剂在制备用于治疗血管瘤药物中的用途的制作方法

专利名称：β-阻断剂在制备用于治疗血管瘤药物中的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及β -阻断剂在制备用于治疗诸如婴儿血管瘤的血管瘤药物中的用途。本发明还公开了通过使用本发明治疗血管瘤的方法。在下文中，加方括号加粗的参考文献为引用的文献和公开物，并列于说明书的实施例部分之后所列的参考文献中。
背景技术：
儿童血管瘤中婴儿毛细血管瘤(IH)在皮肤和肝脏中最常见。如在Frieden IJ等人著有的“婴儿血管外皮细胞瘤:关于婴儿血管外皮细胞瘤的研究场所的现有知识、未来方向和进程”，Pediatr Dermatol2005 ；22 =383-406[I]中所公开的，婴儿毛细血管瘤(IH)是最常见的婴儿软组织肿瘤，并发生于4%至10%的I岁以下儿童。IH由细胞类型的复杂混合物组成，包括大多数的内皮细胞，与外膜细胞相关的、树突状细胞和肥大细胞。如在文件[I]中和由BielenbergD.R.等人著有的“婴儿皮肤的血管外皮细胞瘤的逐增与邻近表皮的增生和血管造影直接相关，与内生的血管造影抑制剂的表达成倒置关系”，INF-beta.1nt.J.0ncol.；14:401-408 [10]、Boye E等人著有的“来自血管外皮细胞瘤的内皮细胞的无性繁殖和可变习性” J Clin Invest2001 ；107:745-52[9]所公开的，在起源上，来自增殖血管瘤的内皮细胞是无性繁殖，表明血管瘤来自于内皮前体细胞的无性扩增，其可能是如[I]中公开的造血干细胞衍生的。在文件[I]中，IH内皮细胞表现出独特的分子表型，其特征为免疫组织化学阳性:吲哚胺2，3-加双氧 酶(IDO)和LYVE-1在早期IH中均为阳性在成熟为血管表型期间消失，葡萄糖转运蛋白 I (Glut-1)、Lewis Y Ag(Le Y)、FcRyll、merosin、CCR6 和 CD15。对IH生长和退化的调节物的了解仍然很少，但是已经证实，在它们的生长期，涉及两种主要的前血管生成因子:碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮生长因子(VEGF)，其是原位存在的，但是如在文件[I]和在Mancini A.J.等人著有的“青少年毛细血管瘤的增殖和细胞凋亡”，A.m.J.Dermatopathol.1996 ；18:505_514[11]中所公开的，也存在于血液和尿液中。此外，在增殖性IH中VEGF受体(VEGF-R)的原位杂交显示了 VEGF-R在整个血管瘤中均匀分布，而尚未组合到血管中。在IH的生长期，组织学研究显示内皮细胞和间质细胞均处于增殖状态(MIB1染色强阳性)，如在Mancini等人著有的“青少年毛细血管瘤的增殖和细胞凋亡”，Am JDermatopathol 1996 ；18:505-14[10]中所公开；另一方面，在退化期期间，细胞表现出凋亡的标志物，如在[10]和Razon M.J.等人著有的“细胞凋亡增加与婴儿血管瘤的退化开始相一致”,Microcirculation 1998 ;5:189_195[11]中所公开。一种解释毛细血管瘤中内皮细胞凋亡的假设是在细胞表面ICAM-1的表达，但是可选的可能性可能是刺激因子例如VEGF的丧失[I]。肾上腺素能系统是心脏和血管功能的主要调节物。如在D' AngeloG.等人著有的“cAMP依赖性蛋白激酶通过阻断Raf活化抑制毛细血管内皮细胞中血管内皮生长因子和成纤维细胞生长因子的促有丝分裂作用” J.Cell Biochem.1997 ；67 =353-366 [13]中公开的，毛细血管内皮细胞表达β-2-肾上腺素能受体，其调节NO的释放，引起内皮依赖性血管舒张。此外，β_肾上腺素能受体属于G-蛋白偶联受体家族，当它们被肾上腺素能儿茶酚胺活化时，能够促进一系列细胞内信号转导途径，如在Iaccarino等人著有的“通过β 2-肾上腺素能受体过表达增强缺血性血管再生:内皮肾上腺素能系统的一种新作用”，Circ Res2005 ；97:1182-1189[12]和[13]中所公开。β _受体刺激能够诱导血管生成因子例如VEGF或bFGF的信号转导途径的修饰，如在[13]中所公开。已经证实，cAMP水平的增加抑制VEGF和bFGF诱导的内皮细胞增殖。在cAMP中药理学或β_肾上腺素能受体介导的升高阻断了 MAPK信号途径的促分裂素诱导的活化，导致经由提高的PKA活性的Raf-1活性的阻断[13]。此外，已经证实β -阻断可以诱导培养的毛细血管内皮细胞的凋亡，如在SommersSmith S.K.等人著有的“β-阻断剂诱导培养的毛细血管内皮细胞的凋亡”，In Vitro CellDev.Biol.Anim.2002 ；38:298-304[14]中所公开。尽管它们的良性自限性过程，常见的IH很少在它们的增殖期引起局部并发症例如溃疡或出血。例如在Enjolras 0.等人著有的“儿童中报警性血管瘤的管理:一项25例病例的回顾”，Pediatricsl990 ；85:491_8[4]中所公开的所谓的报警HI能够损害生命的或感觉的功能，尤其是当分别存在于上呼吸道和眼眶区域时。此外，如在文件[I]和Tanner J.L.等人著有的“伴随面部血管瘤生长:父母和儿童应对及适应，儿科”，1998 ；101 =446-452[2]中公开的，IH导致至少短暂的化妆品毁容，其引发了首先在父母中、其后在患病的儿童中的心理发病。全身性或病灶内的皮质类固醇被用作在增殖期期间问题性病变的第一线治疗，如在Bennett ML等人著有的“使用口服皮质类固醇对皮肤血管瘤是有效的，一种基于证据的评价”，Arch.Dermatol.2001 ；137:1208-13[3]中所公开。然而，即使在高剂量(2到5mg/kg体重/天)下，治疗缓解率在30%至60%之间，如在文件[I]、[3]和[4]中公开的。副作用通常是短暂的和有限的，例如，库兴综合征样消退、应激性、生长抑制，但是可能导致更为关切的肥厚型心肌病。其他治疗选择包括干扰素a-2a和2b (给药l_3mU/m2/天的40%至50%的完全缓解)(几百万单元/m2)，但是在低于I岁的儿童中报道了神经毒性的风险，如在文件[I]和中公开的；如在文件[I]中公开的，长春新碱也因其抗有丝分裂性质被使用，但是其公知的不利面是周围神经病、便秘和血液毒性。此外，新的抗血管生成因子例如avastatin由于它们的副作用，在幼儿中是相反地指示的。此外，由于接受治疗的大多数患者是婴儿或小孩，对已知化合物耐受的患者变得
至关重要。因而， 需要可选的、更有效和更低毒性的化合物，用于治疗IH，特别是婴儿毛细血管瘤。本发明满足这些和其他需求
发明内容
萘心安是良好耐受的非选择性β_阻断剂，通常在幼儿中使用，用于心脏适应症，如Villain E等人著有的“在长QT综合征儿童中采用β -阻断治疗心脏事件的发生率较低”，Eur.Heart J.2004 ；25 =1405-11 [6], Fritz K.1.等人著有的 “ β -阻断剂对症状性地塞米松诱导的早产婴儿肥厚型梗阻性心肌病的作用:三个病例报告和文献综述”，JPerinatol 1998 ；18:38_44[7]和Kilian K.著有的“婴儿高血压的原因及治疗”，J.PerinatNeonatal Nurs.2003 ;17:65_74[8]所公开的。但是这种β -阻断剂一般在治疗血管瘤中的使用尚未被实验且未公开。
本发明人是实验并注意到β_阻断剂可能非常有效地控制IH的生长、甚至治疗IH的第一人。在本申请中提供了观察和实验结果。因此，在本发明的第一个方面，提供了 β-阻断剂在制备用于治疗血管瘤药物中的用途。“ β -阻断剂”在本文中还指β -受体阻断剂、β -肾上腺素能受体阻断剂、β -阻断剂、β -阻断剂或β -肾上腺素能受体阻断剂，或表明抑制天然的或人工的激动剂与任何类型的β -肾上腺素能受体(β -1、β _2、β -3或其他)结合的化合物的任何其他命名。根据本发明，β-阻断剂可以是非选择性的β-阻断剂、β-1-选择性β-阻断剂、α-1/β-肾上腺素能拮抗剂、β-2-选择性β-阻断剂。β-阻断剂还可以是两种或更多种β -阻断剂的混合物。可以在本发明中使用的β-阻断剂的实例在Goodman和Gilman著有的“治疗学的病理学基础”，eleventh edition, chapter 10, pp 271-295, 2006 [19]中公开。优选地，根据本发明，当使用非选择性β-阻断剂时，它可以选自例如包含阿普洛尔、布新洛尔、卡替洛尔、卡维地洛、拉贝洛尔、左布诺洛尔、美沙洛尔、甲吲洛尔、美替洛尔、纳多洛尔、氧烯洛尔、喷布洛尔、吲哚洛尔、普罗帕酮(普罗帕酮是也作为β_肾上腺素能受体拮抗剂的钠通道阻断药物)、萘心安、索他洛尔、噻吗洛尔或其药学上可接受的盐的组。可以使用其混合物。根据本发明当使用β_1选择性β-阻断剂时，例如，它可以选自包含醋丁洛尔、阿替洛尔、倍他洛尔、比索洛尔、塞利洛尔、艾司洛尔、美托洛尔、奈必洛尔的组。β -阻断剂还可能具有内在的拟交感活性，如醋丁洛尔、倍他洛尔、卡替洛尔、卡维地洛、拉贝洛尔、氧烯洛尔、喷布洛尔、吲哚洛尔、萘心安。优选地，β -阻断剂是萘心安或其药学上的盐，例如L-或D-萘心安或其混合物。混合物可以是L-和D-萘心安的混合物，其数量为O:1到1: 0，例如1:1。萘心安的药学上可接受的盐可以是萘心安盐酸盐或萘心安的任何其他制剂，无论该制剂是否变化或改变萘心安的药代动力学性质或代谢性。根据本发明，药物可以是用于治疗婴儿毛细血管瘤的药物。根据本发明，该药物还可以是用于治疗其他血管瘤的药物，例如，选自包含血管瘤(即，上皮血管瘤、血窦血管瘤、纺锤形细胞血管瘤)、丛状血管瘤、血管内皮瘤(即，kaposiform血管内皮瘤)、von Hippel-Lindau综合征中的血管瘤、Bourneville病中的血管纤维瘤和血管脂瘤、脓性肉芽肿、血管肉瘤，例如Kaposi' s肉瘤、扩张的动静脉畸形、肿瘤相关的血管增生的组。参考文献M.Wassef和coll著有的“血管肿瘤和血管畸形、分类、病理学及影像学”，Ann Chir PlastEsth 2006 ；51 =263-281 [20]公开了这些主动增殖肿瘤的病理解剖学分类。药物可以是可被施用给人类或动物的任何形式。可以直接进行施药，即，纯的或基本上纯的，或在β-阻断剂与药学上可接受的载体和/或介质混合后进行。根据本发明，药物可以是糖浆或可注射的溶液。根据本发明，所述药物可以是用于口服施用的药物，选自包含液体制剂、口服泡腾剂型、口服粉剂、多颗粒系统、或口服可分散剂型的组。例如，当所述药物是用于口服施用的药物时，它可以是选自包含溶液、糖浆、悬浮液、乳剂和口服滴剂的组的液体制剂形式。当所述药物是口服泡腾剂型的形式时，它可以是选自包含片剂、微粒、粉剂的组的形式。当所述药物是口服粉剂或多颗粒系统的形式时，它可以选自包含珠子、微粒、迷你片剂和微颗粒的组的形式。当所述药物是口服可分散剂型的形式时，它可以选自包含口分散片剂、冻干薄片、薄膜、咀嚼片、片剂和胶囊、医用口香糖的组的形式。根据本发明，所述药物可以是用于口腔和舌下给药途径的药物，例如，选自包含口腔或舌下片剂、粘膜粘附制剂、锭剂、口粘膜滴剂或喷雾剂的组。根据本发明，所述药物可以是用于局部经皮施用的药物，例如，选自包含软膏剂、乳膏剂、凝胶、洗涤剂、贴片和泡沫的组。根据本发明，所述药物可以是用于鼻部施用的药物，例如，选自包含滴鼻剂、鼻部喷雾、鼻部粉剂的组。

根据本发明，所述药物可以是用于直肠施用的药物，例如，栓剂或硬明胶胶囊。根据本发明，所述药物可以是用于胃肠外施用的药物，例如，皮下的、肌肉内的、静脉内的施用。本领域的技术人员清楚地理解，在此使用的术语“形式”是指药物用于其实际用途的药物制剂。例如，所述药物可以选自下组的形式，所述组包含可注射的形式(例如，Avlocardyl 5mg/ml)、糖浆(例如，Efferalgan 3% )、口服悬浮液(例如，Efferalgan
3% )、丸粒(例如，Dafalgan lg)、粉剂(例如，Doliprane IOOmg)、微粒剂(例如，Zoltum IOmg)、喷雾剂、穿表皮的贴片(例如，Cordipatch 5mg/24h)或局部形式(乳骨剂、洗漆剂、洗眼剂)(例如，分别地，Dermoval creme 、Betneval lotion和Chibroxine col lyre)。在这些实例中，β -阻断剂，例如，上述β -阻断剂之一，例如，萘心安，可以添加或可以替换所述药物的活性成分。药学上可接受的载体可以是取决于受试者用于向人类或动物施用β -阻断剂的任何已知的药学上的载体。例如，这种载体可以选自包含例如单甲氧基-聚乙二醇(例如，在Viraferonpeg 中)或脂质体(例如，在Ambizome 中)的组。所述介质可以是用于β-阻断剂向人类或动物施用的任何已知的介质。例如，这种介质可以选自包含例如cremophor(例如,在Sandimmun 中)或cellulosis(例如,在Avlocardyl LPl60mg 中)的组。药物的药物形式根据要治疗的人类或动物来选择。例如，对于儿童或婴儿，优选糖浆或注射。施用可以用重量刻度的移液管来进行。根据本发明，药物可以包含任何药学上可接受的和有效剂量的β -阻断剂来治疗血管瘤。例如，药物可以包含一种剂量，其容许I到5mg/kg体重/天、例如2到4mg/kg体重/天的施用。在第二个方面，本发明提供了治疗患有血管瘤的受试者的方法，也公开了。这种方法包括向所述受试者施用β_阻断剂的步骤。血管瘤和β -阻断剂，以及可用的制剂如上文定义。所述施用可以通过使用本领域技术人员已知的、和对施用β -阻断剂有用的任何药物途径来进行。上文提供了药物的施用形式的实例。例如，施用可以通过β-阻断剂的直接注射来进行。这种施用途径以及糖浆对于婴儿当然是优选的。施用可以被限定，以容许药学上可接受的和有效的剂量的递送用于血管瘤的治疗。例如，施用可以包含I到5mg/kg体重/天的剂量,例如2到4mg/kg体重/天。施用可以以每天一次给药或多次给药来进行。本申请的发明人在实验上清楚地证实了使用β_阻断剂在婴儿毛细血管瘤(IH)中强的抗血管生成作用。本发明人对血管瘤进行的进一步研究显示，肾上腺素能β 2受体存在于血管瘤内皮细胞的表面(参见下文的实施例)。这确认了本发明获得的结果，提供了生理病理解释，并确认了在本发明的框架内β_阻断剂的作用机制。这也确认了萘心安的功效与其作为β_阻断剂的活性之间的联系。由于现有技术的新的抗血管生成因子例如avastatin，由于它们的副作用在幼儿中被相反地指示，根据本发明的萘心安的使用构成了对全身性皮质类固醇、以及甚至对干扰素或长春新碱的安全的可选方案。萘心安是具有弱的内在拟交感`活性的非选择性β -阻断剂，其对IH的显著治疗作用可以通过三种机制解释:1.诱导细胞缺氧的外周血管收缩剂作用，萘心安导致外周的血管收缩，这种效果在我们治疗的IH上立即可见。2.通过Raf/MAPK途径或HIF途径的负调节，VEGF和bFGF基因的降低的表达(Giatromanoloki A, Arvanitidou V, Hatzimichael A, Simopoulos C, Sivridis E[17])。在皮肤毛细血管瘤中HIF-2alpha/VEGF途径的活化(Shyu KG, Liou JY, Wang Bff, FangWJ, Chang H著有的“Cardiovedilol预防压力超负荷大鼠心脏的心脏肥大和低氧诱导因子-1 α及血管内皮生长因子的过表达”，J Biomed Sc1.2005 ；12 =409-420[18]) 3.对毛细血管内皮细胞的细胞凋亡触发作用。在下文公开的实验结果中，在显现了 IH的婴儿中观察到与病变的明显的软化相关的强烈红色到紫色的颜色变化。这种作用可以诱导引起皮细胞增殖阻滞的血管瘤的慢性缺氧。然而，在发明人的实验中，在萘心安治疗下IG的进展性改善强烈地表明对增殖生长因子的持续作用。在这点上不清楚的是,治疗的祀点是内皮细胞本身还是其他细胞例如间质细胞或肥大细胞。可能涉及解释IH的退化的第三种机制是由β-阻断诱导的早期内皮细胞凋亡。然而当在IH的增殖期期间停止治疗时，在呈现的两个病例中血管瘤的重新生长不支持这种假说。此外，在第二个病例中，通过利用裂解的caSpaSeS3和8抗体的免疫组织化学，发明人没有发现凋亡细胞标志物。进一步的，目前在婴儿或儿童患者中广泛的使用β-阻断剂，在心脏疾病中，如文件Villain E.等人著有的“在长QT综合征儿童中采用β _阻断治疗心脏事件的发生率较低”，Eur.Heart J.2004 ；25:1405-1411 [6]中所示的长 QT 综合征、文件 Fritz K.1.等人著有的“ β-阻断剂对症状性地塞米松诱导的早产婴儿肥厚型梗阻性心肌病的作用:三个病例报告和文献综述”，J.Perinatal 1998 ；18:38_44[7]中所示的肥厚型心肌症、或文件Kilian K.等人著有的“婴儿高血压的原因及治疗”，J.Perinat.Neonatal Nurs 2003 ; 17:65-74[8]中所示的高血压中具有良好的耐受性。通过以下实施例参考附图来进一步说明本发明，不得理解为是对本发明的限制。


图1显示在开始萘心安治疗之前、4周的在先全身性类固醇治疗之后血管瘤的外观的图像。图2显示根据本发明在开始萘心安治疗之后仅仅七天的血管瘤外观的图像。图3显示在6个月龄时实验结果的图像，其中儿童仍然继续根据本发明治疗，在先的全身性类固醇治疗自2个月起停止。图4显示根据本发明在9个月萘心安治疗时的实验结果的图像。图5是用免疫组织化学的方法获得的图片，显示β 2受体在IH的内皮细胞上表达。图6是用免疫组织化学的方法获得的图片，显示HIFl-α (红色染色)在IH的内皮细胞上表达。
具体实施例方式实施例1:根据本发明的第一实验男性婴儿呈现了涉及鼻部棱锥的ΙΗ。在2月龄时，由于与鼻部中隔和中柱坏死相关的呼吸困难，引入了全身性类固醇。在3mg/kg体重/天(mg/kg/天)的泼尼松龙治疗一个月之后，血管瘤被稳定，但是鼻部坏死进展。由于婴儿逐渐地拒绝服用泼尼松龙片剂，我们引入相当剂量的倍他米松滴剂(0.5mg/kg/天)。在4月龄，血管瘤已经停止生长，鼻内溃疡痊愈。然而，该儿童在控制访视时返回具有与收缩期心杂音相关的180到200次脉搏/分钟的心动过速。心脏超声检查显示阻塞性肥厚型心肌病,调整倍他米松剂量从3mg/kg体重/天降至2mg/kg体重/天(mg/kg/天)。因而我们开始使用3mg/kg/天的β-阻断剂萘心安(化学品IUPAC名称:(2RS)-1-[1-甲基乙基)氨基]_3(萘-1基氧基)丙-2-醇)治疗。萘心安作为含有市售萘心安粉剂的胶囊剂来施用。在开始萘心安治疗次日，血管瘤颜色从强烈红色变为紫色，并且软化。倍他米松由泼尼松龙替代，其逐渐减少，并且在开始萘心安之后6周停止。尽管降低了全身性类固醇，IH仍然继续改善。在5个半月龄，当停止类固醇时，未注意到IH大小或颜色的反弹。在14月龄时，该儿童仍然接受萘心安，皮质类固醇诱导的肥厚型心肌病转归。IH是完全扁平的，在黄-橙不正常颜色的皮肤背景上仅有皮肤毛细管扩张持续存在、以及鼻内和中柱坏死的后遗症。实施例2:根据本发明的第二实验第二个婴儿，男性三胞胎，在30周出生，自出生起呈现斑块样IH，累及全部右侧上肢和右侧额顶骨和上眼睑区域。在一月龄，在3个区域的皮下部分发生，包括上眼睑、腮腺区域和腋下的皱褶。由于视觉丧失的风险，泼尼松龙以3mg/kg/天开始。然而，在2周的治疗之后，病情未得到控制，我们决定提高泼尼松龙为5mg/kg/天，持续2周。尽管采用这种方案，但IH继续扩大，在2月龄时眼睑已不能张开，右侧面部由于如图1所示的巨大肿瘤而畸形。此外，腋下的皱褶被临床上测量直径为5cm的肿瘤IH部分占据。MRI显示没有脑内异常，但是揭示IH涉及锥内外的眼眶区域，并且导致眼球突出。此外，MRI显示牙周的IH与压缩的颈内部分相连续，导致气管和食道的偏离腋下肿块测量为26mmX45mmX40mm,并且延伸到右侧肺尖部。心脏超声检查显示心输出量增加。泼尼松龙的剂量降低到3mg/kg/天，根据本发明开始用萘心安2mg/kg/天的治疗。与之前婴儿(参见上述实施例1) 一样，在萘心安开始后仅12小时，病变软化。

七天后，如图2中呈现的图片所显示，由于血管瘤的皮下部分大小的显著降低，自发的眼睛张开是可能的。牙周和腋下的肿块大小显著降低。本发明获得的这些出乎意料的结果与图1的图片中呈现的结果相比较，后者显示在现有技术的全身性类固醇治疗(2周3mg/kg/d和2周5mg/kg/d) 4周之后、开始萘心安治疗之前的血管瘤的外观。泼尼松龙治疗逐渐地减少，而IH继续改善。在3个月龄时，在臂上获取活检样品，显示典型的IH。内皮细胞证实用单克隆抗体MIB-1染色较差，表明在幼儿中IH的增殖活性较弱。为了评估萘心安的可能的促细胞凋亡作用，进行了利用单克隆抗裂解的caspase-3 和 8 抗体(Ozyme, Saint Quentin en Yvelines,France)的免疫组织化学分析，但是没有证实阳性的免疫染色[15]。泼尼松龙在4月龄时停止，没有任何反弹，但是萘心安治疗的3天中断引起上眼睑和牙周区域上血管瘤大小的轻度增加。萘心安治疗以2mg/kg/天的再引入在仅24小时后就是成功的。在6月龄，眼睛张开是满意的，未注意到严重的视力损害，牙周和腋下的皮下血管瘤部分不明显，IH在面部和手臂均显著地消退。图3提供了显示在6月龄时这些实验结果的图片，此时该儿童仍然继续服用2mg/kg/d的萘心安，但是自2个月起停用了全身性类固醇。没有注意到血管瘤的皮下部分，皮肤上的部分显著地消退。此外，该儿童没有患上任何视力损害。在9个月龄，治疗停止，如在图4的图片中显示的，没有任何IH的重新生长。实施例3:根据本发明的第三实验呈现右侧眼周IH的女婴在3周龄首次被注意到，局限于内眼角。在2月龄，IH的皮下部分延伸到眼眶，并限制了上眼睑的张开。多普勒超声显示测量直径为32mm、厚度为12mm的IH。在从其父母获得知情同意之后，其接受2mg/kg/天的萘心安治疗。在12小时内注意到病变的扁平化，随后是渐进性的改善。在萘心安开始后7天进行的对照超声检查显示IH大小的降低:直径21mm对比32mm,厚度6mm对比12mm,没有任何血液动力学的改变。萘心安在一个月后停止，但是注意到IH大小的新的增加，使得重新开始治疗成为必要。在7月龄，IH是扁平的并且消退，超声检查未能鉴定任何皮下的部分。在8个月时停止萘心安,没有血管瘤的任何反弹。患有血管瘤的另外七例儿童已经用萘心安治疗，获得了类似的结果。本发明没有观察到治疗失败。这种结果在现有技术中从未实现，例如，使用皮质治疗或干扰素的现有技术。总之，这些实施例清楚地显示，萘心安在IH中具有强烈的抗血管生成作用。由于新的抗血管生成因子例如avastatin，由于它们的副作用在幼儿中被相反地指示，萘心安可以构成对全身性皮质类固醇、以及甚至对干扰素或长春新碱的合理的、安全的可选方案。实施例4:评论和进一步的实验结果发明人偶然注意到，萘心安`，通常在幼儿中用于心脏适应症的、耐受良好的非选择性β -阻断剂，可以控制IH的生长期，如在Leaute-Labreze C, Dumas de la RoqueE, Hubiche T, Boralevi F, Thambo JB著有的“萘心安用于婴儿重度血管瘤”，New EnglJ Med2008，358 ;24:2650-51 [16]中所报道的。偏离的性别比率的可能的解释，以及HIF-2alpha途径的活化和随后内皮细胞的VEGF过量表达，在皮肤毛细血管瘤的病理中涉及(Giatromanolaki等人著有的“皮肤毛细血管瘤中HIF_2alpha/VEGF途径的活化”，Pathology2005:149-51 [17])。令人惊讶地,研究用于治疗心脏肥大的β-阻断剂,Shyu等人揭不cardivedilol将HIF-1alpha和VEGF的蛋白质和mRNA逆转录到基线值(Shyu等人著有的“Cardiovedilol预防压力超负荷大鼠心脏的心脏肥大和低氧诱导因子_1 α及血管内皮生长因子的过表达”，J Biomed Sc1.2005 ; 12:409-420[18])。进行进一步的研究，考察在IH中在体内和体外的β -肾上腺素能受体的血管生成级联下游，以及考察影响IH表型的可能的遗传决定因素。组织学和免疫组织化学皮肤活检物被包埋在石蜡中，切成5 μ m切片，用苏木色素-曙红染色以评估一般的形态。为了显现α 2-肾上腺素能受体的存在和HIFl-α的表达水平，将切片分别与单克隆兔抗人α 2-肾上腺素能受体I: 100 (ΡΑ1-20659, ABR, Golden, USA)或单克隆小鼠抗AHIFl-Q I: 1000 (ab8366，abcam，Cambridge，UK)在 4°C孵育过夜。作为第二系统，我们使用了 Envision辣根过氧化酶系统(K4002, K4000Dako, Trappes, France),其增强了针对α 2-肾上腺素能受体的兔子和针对HIFl-α的小鼠的染色敏感性。切片用氨基甲酸氨基乙酯(Κ3461, Dako, Trappes, France)显现，用苏木色素复染。初步的免疫组织化学发现显示，β 2受体(图5)在IH的内皮细胞上表达。如近来观察到的，HIFl-α (图6)也在IH的内皮细胞上表达。
参考文献列表:[l]Frieden IJ,Haggstrom A,Drolet BA,Mancini AJ,Friedlander SF,Boon L,andcoll.“婴儿血管外皮细胞瘤:关于婴儿血管外皮细胞瘤的研究场所的现有知识、未来方向和进程”.Pediatr Dermatol 2005 ；22:383-406.
[2] Tanner JL, Dechert MP, BA ；Frieden IJ.“伴随面部血管瘤生长:父母和儿童应对及适应，儿科”.Pediatrics.1998 ；101:446-452.
[3]Bennett ML, Fleischer AB, Chamlin SL, Frieden IJ.“使用口服皮质类固醇对皮肤血管瘤是有效的，一种基于证据的评价'Arch Dermatol 2001 ；137 =1208-13.
[4]Enjolras O, Riche MC, Merland JJ, Escande JP.“儿童中报警性血管瘤的管理:一项 25 例病例的回顾”.Pediatrics 1990 ；85:491-8.
[5]Ezekowitz RAB, Phil CBD, Mulliken JB, Folkman J.“干扰素 a _2a 对危及生命的婴儿血管瘤的治疗.New Engl J Med 1992 ；326 =1456-63.
[6]Villain E, Denjoy I, Lupoglazoff JM, Guicheney P, Hainque B, Lucel V,Bonnet D.“在长QT综合征儿童中采用β -阻断治疗心脏事件的发生率较低”.Eur HeartJ2004；25:1405-11.
[7]Fritz Kl7Bhat AM.“ β -阻断剂对症状性地塞米松诱导的早产婴儿肥厚型梗阻性心肌病的作用:三个病例报告和文献综述”.J Perinatol 1998 ；18:38-44.
[8]Kilian K.“婴儿高血压的原因及治疗”.J Perina Neonatal Nurs2003 ；17:65-74.
[9]Boye E, Yu Y, Paranya G, Paranya G,Mulliken JB, Olsen BR Bischoff J.“来自血管外皮细胞瘤的内皮细胞的无性繁殖和可变习性”.J Clin Invest2001 ；107:745-52.
[IOjMancini AJ, Smoller BR.“青少年毛细血管瘤的增殖和细胞凋亡”.AmJDermatopathoI 1996 ；18:505-14.
[II]Razon MJ, Kraling BM, Mulliken JB, BischoffJ.“细胞凋亡增加与婴儿血管瘤的退化开始相一致”.Microcirculation 1998 ；5: 189-95.
12]laccarino G,Ciccarelli M,Soriento D,Galasso G, Campanile A,SantulliG, Cipolletta E, Cerullo V, Cimini V, Altobelli GG, Piscione F, Priante O, PastoreL, Chiarello M, Salvatore F, Koch WJ, Trimarco B.“通过 β 2_ 肾上腺素能受体过表达增强缺血性血管再生:内皮肾上腺素能系统的一种新作用Circ Res2005 ；97:1182-1189.
[13]N Angelo G，Lee H，Weiner Rl.“cAMP 依赖性蛋白激酶通过阻断 Raf 活化抑制毛细血管内皮细胞中血管内皮生长因子和成纤维细胞生长因子的促有丝分裂作用”.JCell Biochem 1997；67:353-366.
[14]Sommers Smith SK7Smith DM.“ β -阻断剂诱导培养的毛细血管内皮细胞的凋亡”.In Vitro Cell Dev Biol Anim 2002 ；38:298-304.
[15]Chaturvedi V, Sitailo LA, Bodner B, Denning MF, Nickoloff BJ.定义含caspase的细胞凋亡机制有助于人类皮肤替代物的角质化.Exp Dermatol.2006Jan ；15(1):14-22.
[16] Leaute-Labreze C, Dumas de la Roque E, Hubiche T, Boralevi F, ThamboJB.“萘心安用于婴儿重度血管瘤”.New Engl J Med 2008，358 ;24:2650-51.
[17]Giatromanoloki A， Arvanitidou V， Hatzimichael A， Simopoulos C，Sivridis E.“皮肤毛细血管瘤中 HIF_2alpha/VEGF途径的活化Pathology 2005:149-51.
[18]Shyu KG,Liou JYiWang BWiFang WJ,Chang H.“Cardiovedilol 预防压力超负荷大鼠心脏的心脏肥大和低氧诱导因子-1a及血管内皮生长因子的过表达”.J BiomedSc1.2005 ；12:409-420.
[19]Goodman and Gilman.“治疗学的病理学基础”，eleventh edition，chapter10，pp 271-295，2006.
[20]M.Wassefand coll.“血管肿瘤和血管畸形、分类、病理学及影像学Ann ChirPlast Esth 2006 ；51:2 63-281.
权利要求
1.一种β-阻断剂在制备用于治疗血管瘤药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其中，所述β-阻断剂选自包含非选择性的β-阻断齐U、β -1-选择性β -阻断剂、α -1/ β -肾上腺素能拮抗剂的混合物、β -2-选择性β -阻断剂和两种或更多种β-阻断剂的混合物的组。
3.根据权利要求1所述的用途，其中，所述β_阻断剂是非选择性的β_阻断剂。
4.根据权利要求3所述的用途，其中，所述非选择性的β-阻断剂选自包含阿普洛尔、布新洛尔、卡替洛尔、卡维地洛、拉贝洛尔、左布诺洛尔、美沙洛尔、甲吲洛尔、美替洛尔、纳多洛尔、氧烯洛尔、喷布洛尔、吲哚洛尔、普罗帕酮、萘心安、索他洛尔、噻吗洛尔、其药学上可接受的盐和其混合物的组。
5.根据权利要求1或2所述的用途，其中，所述β-阻断剂是β -1选择性的β -阻断剂。
6.根据权利要求5所述的用途，其中，所述β-1选择性的β-阻断剂选自例如包含醋丁洛尔、阿替洛尔、倍他洛尔、比索洛尔、塞利洛尔、艾司洛尔、美托洛尔、奈必洛尔的组。
7.根据权利要求1所述的用途，其中，所述β_阻断剂具有内在拟交感活性。
8.根据权利要求7所述的用途，其中，所述β-阻断剂选自包含醋丁洛尔、倍他洛尔、卡替洛尔、卡维地洛、拉贝洛尔、氧烯洛尔、喷布洛尔、吲哚洛尔、萘心安的组。
9.根据权利要求1所述的用途，其中，所述β_阻断剂是萘心安或其药物盐。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的用途，其中，所述药物是用于治疗毛细血管瘤和/或毛细血管婴儿血管瘤的药物。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的用途，其中，所述药物是糖浆或可注射的溶液。
12.根据权利要求1-10中任一项所述的用途，其中，所述药物是用于口服施用的药物，选自包含液体制剂、口服泡腾剂型、口服粉剂、多颗粒系统、口服可分散剂型的组。
13.根据权利要求12所述的用途，其中，所述用于口服施用的药物是选自包含溶液、糖浆、悬浮液、乳剂和口服滴剂的组的液体制剂。
14.根据权利要求1-10中任一项所述的用途，其中，所述药物是用于口腔和舌下途径的药物。
15.根据权利要求1-10中任一项所述的用途，其中，所述药物是用于局部-经皮施用的药物。
16.根据权利要求15所述的用途，其中，所述用于局部施用的药物选自包含软膏剂、乳膏剂、凝胶、洗涤剂、贴片、泡沫的组。
17.根据权利要求1-10中任一项所述的用途，其中，所述药物是用于鼻部施用的药物。
18.根据权利要求1-10中任一项所述的用途，其中，所述药物是用于直肠施用的药物。
19.根据权利要求1-10中任一项所述的用途，其中，所述药物是用于胃肠外施用的药物。
全文摘要
本发明涉及β-阻断剂在制备用于治疗血管瘤，例如婴儿血管瘤药物中的用途。所述β-阻断剂可以是非选择性的β-阻断剂，例如萘心安。本发明提供了一般用于治疗血管瘤的已知化合物，例如皮质类固醇、干扰素或长春新碱的替代药物。
文档编号A61K31/138GK103169971SQ20121045564
公开日2013年6月26日 申请日期2008年10月16日 优先权日2007年10月19日
发明者克里斯蒂娜·莱奥泰-拉布尼茨, 埃里克·罗克·德拉·迪马, 阿兰·塔伊布, 吉恩-伯努瓦·塔姆波 申请人:维克多塞加伦波尔多第二大学