具有抗癌活性的山栀花黄酮的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种具有抗癌活性的山栀花黄酮的制备方法。本发明以山栀花为原料，采用溶剂提取结合柱层析的方法得到三种山栀花黄酮，均为多甲氧基黄酮类化合物，通过药理实验表明该山栀花黄酮具有较好的抗癌活性。本发明提取分离制备山栀花黄酮工艺简单，成本低，产率高，纯度高。
【专利说明】具有抗癌活性的山栀花黄酮的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种具有抗癌活性的山桅花黄酮的制备方法。具体讲，本发明涉及从山桅花中提取制备一种具有抗癌活性的多甲氧基黄酮类化合物的方法。
【背景技术】
[0002]菌草科桅子属植物山桅(ferofeflia jasminoides Ellis)盛产于江、浙、闽、赣、徽、湘等省山区，为我国大宗传统中药材，属卫生部颁布的首批药食两用药用植物资源。常见的栽培品种及变种为山桅、黄桅及水桅。其成熟果实入药，具有护肝、利胆、降压、镇静、止血、消肿等作用；中医临床上用于治疗黄疽型肝炎、扭挫伤、高血压、糖尿病等症。山桅花为茜草科桅子属山桅的干燥花，别名桅子花，野桂花，白蟾花，雀舌花。山桅花性寒，味苦。具清肺，凉血之功效。主治肺热咳嗽，鼻衄。目前已从山桅花中分别分离得到环烯醚萜，二萜，三萜等成分。[0003]多甲氧基黄酮(PMFs)是苯基色原酮结构上的3，4，5，6，7，8，2’，3’，4’，5’，6’等位置处连有4个或4个以上甲氧基的黄酮类化合物。PMFs甲基化程度高，相对于多羟基黄酮类化合物和黄酮苷类化合物其脂溶性较好，口服生物利用度高。PMFs广泛存在于芸香科柑橘属植物中，目前已从该属植物中分离出40多种PMFs，以中国甜橙和中国柑橘果皮中的含量较高。此外，马鞭草科的黄荆属和紫珠属，芸香科的九里香属，茜草科的桅子属和耳草属，豆科的榼藤子属、爵床科的穿心莲属，唇形科的刺蕊草属及禾本科的薏苡属植物中也存在不同类型的PMFs。桅子属中的PMFs大多数为5-OH-PMFs，少数为5位连有甲氧基的黄酮醇，该属植物中PMFs的4’，5’位上常连有甲氧基，5’的甲氧基有时被羟基代替，少数5-OH-PMFs的6’位连有甲氧基。药理研究证实PMFs具有抗癌活性，柑橘果皮中的Nobiletin能够抑制H2O2诱导的人成神经细胞SH-SY5凋亡，Tangeretin、5-0-DemethylNobiletin 能够抑制 SH-SY5 生长。Tangeretin 和 Nobiletin 对 SH-SY5 呈现拮抗作用，tangeretin 和 5-0-Demethyl Nobiletin 对 SH-SY5 呈现协同作用，Nobiletin 和5-0-Demethyl Nobiletin对SH-SY5呈现相加作用(Bioorg Med Chem, 2008，16: 2803.);橙子果皮中的hydroxylated PMFs能够抑制AOM诱导的慢性肿瘤模型小鼠Gsk3 β的功能和表皮生长因子受体信号，从而抑制ACF的增殖，且呈剂量依赖关系(Mol Nutr Food Res,2011, 55: 278.);甜澄中 5-hydroxy-6, 7，8，3，，4，-pentamethoxyflavone, 5-hydroxy-3,6, 7, 8, 3' , 4' -hexamethoxy- flavone 和 5_hydroxy- 6, 7, 8, 4' -tetramethoxyflavone 倉泛够调控p21Cipl和p21Waf基因，诱导GcZG1期和GcZM期阻滞，从而诱导HCTl 16 (p53+/+)细胞死亡，三者诱导GcZG1期阻滞的作用与其B环4’上的甲氧基密切相关(Mol Nutr Food Res,2011 (55): 613.)。
[0004]目前已从山桅果即中药桅子中分离得到包括PMFs在内多种类型黄酮类化合物(桅子的化学成分研究[J].中国天然药物，2008，6(6):418-420.)，未见有关从山桅花中分离得到具有抗癌活性的多甲氧基黄酮类化合物的报道。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种具有抗癌活性的山桅花黄酮的制备方法。
[0006]本发明以山桅子的干燥花为原料，首次从中制备得到山桅花黄酮，属于多甲氧基黄酮类化合物。
[0007]—种具有抗癌活性的山桅花黄酮的制备方法，其特征在于该方法包括原料采集加工，浸膏提取，分离纯化三个步骤:
A、原料采集加工:采集菌草科植物桅子fertfefliajasminoides Ellis或其栽培品种及变种山桅子或黄桅子或水桅子的花，干燥，粉碎；
B、浸膏提取:采用70-95%的工业乙醇对原料进行冷浸或热回流提取0.5-2 h，过滤，滤液经减压浓缩溶剂后得山桅花总浸膏； C、分离纯化:山桅花总浸膏经水混悬，依次用石油醚，乙酸乙酯进行液液分配萃取，萃取液经减压浓缩溶剂后，分别得到石油醚部位Fa和乙酸乙酯部位Fb ;取Fb进行常规硅胶柱层析，以不同体积比的石油醚和丙酮进行梯度洗脱，等份法接样，薄层检测合并馏分，收集石油醚:丙酮体积比5:1和石油醚:丙酮体积比3:1的两个组分Fbi和Fb2 ；Fb1经丙酮重结晶得到式I，Fb2以甲醇为流动相经凝胶柱层析分别得到式1、式II和式III。
[0008]山桅花黄酮为多甲氧基黄酮类化合物5-羟基-7，3’，4’，5’ -四甲氧基黄酮，具有C19H18O7的分子式,化学结构式如式I
【权利要求】
1.一种具有抗癌活性的山桅花黄酮的制备方法，其特征在于该方法包括原料采集加工，浸膏提取，分离纯化三个步骤: A、原料采集加工:采集茜草科植物桅子或其栽培品种及变种山桅子或黄桅子或水桅子的花，干燥，粉碎； B、浸膏提取:采用70-95%的工业乙醇对原料进行冷浸或热回流提取0.5-2 h，过滤，滤液经减压浓缩溶剂后得山桅花总浸膏； C、分离纯化:山桅花总浸膏经水混悬，依次用石油醚，乙酸乙酯进行液液分配萃取，萃取液经减压浓缩溶剂后，分别得到石油醚部位Fa和乙酸乙酯部位Fb ;取Fb进行常规硅胶柱层析，以不同体积比的石油醚和丙酮进行梯度洗脱，等份法接样，薄层检测合并馏分，收集石油醚:丙酮体积比5:1和石油醚:丙酮体积比3:1的两个组分Fbi和Fb2 ；Fb1经丙酮重结晶得到式I，Fb2以甲醇为流动相经凝胶柱层析分别得到式1、式II和式III ； 山桅花黄酮为多甲氧基黄酮类化合物5-羟基-7，3’，4’，5’-四甲氧基黄酮，具有C19H18O7的分子式，化学结构式如式I
【文档编号】A61P35/00GK103864740SQ201210550991
【公开日】2014年6月18日 申请日期:2012年12月18日 优先权日:2012年12月18日
【发明者】师彦平, 戚欢阳, 宋家玲 申请人:中国科学院兰州化学物理研究所